本發(fā)明涉及保健食品領(lǐng)域，具體是一種基于鮸魚魚鰾多肽的降血脂復(fù)配物及其制備方法。
背景技術(shù)：
高血脂癥是一種全身性疾病，指血液之中總膽固醇(tc)和/或甘油三酯(tg)過高或高密度脂蛋白膽固醇(hdl-c)過低，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)稱之為血脂異常。脂質(zhì)不溶或微溶于水，必須與蛋白質(zhì)結(jié)合以脂蛋白形式存在，因此，高血脂癥通常也稱為高脂蛋白血癥。高血脂癥是中老年代謝疾病的常見病、多發(fā)病，是引起冠心病、動(dòng)脈硬化、腦血栓和腦出血的主要因素。近年來(lái)由于生活水平的提高，日常飲食中高熱量食物逐漸增多，而人們的日常活動(dòng)量卻相對(duì)減少，致使高血脂癥日趨增多且呈現(xiàn)年青化趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅著人們的身體健康。
據(jù)調(diào)查，心腦血管疾病已經(jīng)成為危害我國(guó)人民身體健康的第一號(hào)殺手，而高血脂癥是引起心腦血管疾病的重要原因之一。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)成年人中高血脂患病率為18.6％，高血脂癥在中老年人達(dá)到70％左右，已經(jīng)成為國(guó)民健康的最大威脅。高血脂癥的藥物治療見效快，但降血脂藥物副作用較大。因此，輔以使用降血脂保健食品成為治療高脂血癥的一種重要方式，對(duì)于提高中老年人的生活質(zhì)量具有重要意義。而研制出療效確切的降血脂保健食品已成為防治心腦血管疾病的當(dāng)務(wù)之急。
現(xiàn)有技術(shù)如授權(quán)公告號(hào)為cn104055773b的中國(guó)發(fā)明專利，公開了一種降血脂組合物及其應(yīng)用。該組合物含有鳥氨酸、門冬氨酸、維生素b6。該降血脂組合物能夠調(diào)節(jié)血脂、增強(qiáng)心腦血管供血能力、降低甘油三酯、膽固醇及提高谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶的酶活，促進(jìn)脂肪酸代謝，恢復(fù)機(jī)體的降血脂能力，可用于制備降血脂的藥物、保健品、食品添加劑或者食品。該組合物是通過促進(jìn)肝臟對(duì)甘油三酯和高密度脂蛋白的分解，來(lái)降低血脂，增加了肝臟的負(fù)擔(dān)，長(zhǎng)此以往會(huì)影響身體健康。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種綠色安全、無(wú)毒副作用，改善心腦組織的血液微循環(huán)，改善脂肪和類脂的代謝，降血脂效果明顯的基于鮸魚魚鰾多肽的降血脂復(fù)配物及其制備方法。
本發(fā)明針對(duì)背景技術(shù)中提到的問題，采取的技術(shù)方案為：一種基于鮸魚魚鰾多肽的降血脂復(fù)配物，成份及其重量份為：鮸魚魚鰾多肽80~95份、三七總皂甙10~15份、愈創(chuàng)木酚0.0001~0.0002份、魚油1~10份、維生素c0.5~2份和香柑內(nèi)酯0.0002~0.0006份。上述復(fù)配物綠色安全、無(wú)毒副作用，分子量小，易吸收，利用率高，可同時(shí)補(bǔ)充服用者對(duì)氨基酸等的需求；其中愈創(chuàng)木酚和香柑內(nèi)酯通過三七總皂甙具有活血散瘀的作用，使擴(kuò)張心腦組織血管，能抗血小板聚集，抗血栓形成，減少心血管疾病的發(fā)生的概率，并在降低血壓的同時(shí)增加心臟冠狀動(dòng)脈和腦血管的血流量，改善心腦組織的血液微循環(huán)；能有效降低人體內(nèi)血清膽固醇及低密度脂蛋白的含量，減少心血管疾病的發(fā)生的概率。
魚鰾多肽的平均分子量為550.0~750.0da，甘氨酸含量為16.3~16.6%，羥脯氨酸的含量為7.7~8.1%，丙氨酸的含量為7.4~7.9%，脯氨酸的含量為6.8~7.1%，谷氨酸的含量為6.6~6.9%，精氨酸的含量為6.2~6.5%，天冬氨酸的含量為4.3~4.6%，精氨酸的含量為3.8~4.1%。
一種基于鮸魚魚鰾多肽的降血脂復(fù)配物的制備方法，制備步驟為：
1）將鮸魚魚鰾洗凈，勻漿，按照1g：15~20ml的重量體積比加入0.17~0.23mol/l的na2hpo4-nah2po4緩沖液，混合均勻，調(diào)節(jié)ph為6.0~7.5，得到混合液；
2）將步驟1得到的混合液溫度升至45~55℃進(jìn)行預(yù)熱5~10min，于300~600w微波處理10~15min，然后加入復(fù)合酶系進(jìn)行酶解，復(fù)合酶系為質(zhì)量比1:0.7~1.2的中性蛋白酶和木瓜蛋白酶，加入量為原料質(zhì)量的2.0~2.5%，酶解溫度為45~55℃，酶解時(shí)間為4~6h。酶解結(jié)束后，升溫至90~95℃，并于此溫度保持10~15min，離心取上清液；
3）將步驟2得到的上清液過截留分子量為1~2kda的超濾膜，收集濾過液，制成濃度5~10mg/ml的溶液，進(jìn)行大孔樹脂脫鹽；脫鹽后的酶解液在≤40℃的溫度下進(jìn)行低壓濃縮，最后經(jīng)噴霧干燥得到鮸魚魚鰾多肽；
4）取配方量鮸魚魚鰾多肽、三七總皂甙、愈創(chuàng)木酚、魚油、維生素c和香柑內(nèi)酯于適量雙蒸水中混合均勻，將混合物噴霧干燥得復(fù)配物粉末，即為基于鮸魚魚鰾多肽的降血脂復(fù)配物。上述復(fù)配物為片劑、分散片、速溶片、散劑、顆粒劑或膠囊。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：1）本發(fā)明制備的復(fù)配物綠色安全、無(wú)毒副作用，分子量小，易吸收，利用率高，可同時(shí)補(bǔ)充服用者對(duì)氨基酸等的需求；2）活血散瘀、擴(kuò)張心腦組織血管，能抗血小板聚集，抗血栓形成，并在降低血壓的同時(shí)增加心臟冠狀動(dòng)脈和腦血管的血流量，改善心腦組織的血液微循環(huán)；3）能有效降低人體內(nèi)血清膽固醇及低密度脂蛋白的含量，減少心血管疾病的發(fā)生的概率；4）不會(huì)對(duì)肝臟造成負(fù)擔(dān)，反而會(huì)起到養(yǎng)肝護(hù)肝的作用；5）采用生物酶解法制備，步驟簡(jiǎn)單，效率高，成本低廉。
具體實(shí)施例
下面通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明方案作進(jìn)一步說明：
實(shí)施例1：
一種基于鮸魚魚鰾多肽的降血脂復(fù)配物，成份及其重量份為：鮸魚魚鰾多肽80~95份、三七總皂甙10~15份、愈創(chuàng)木酚0.0001~0.0002份、魚油1~10份、維生素c0.5~2份和香柑內(nèi)酯0.0002~0.0006份。魚鰾多肽的平均分子量為550.0~750.0da，甘氨酸含量為16.3~16.6%，羥脯氨酸的含量為7.7~8.1%，丙氨酸的含量為7.4~7.9%，脯氨酸的含量為6.8~7.1%，谷氨酸的含量為6.6~6.9%，精氨酸的含量為6.2~6.5%，天冬氨酸的含量為4.3~4.6%，精氨酸的含量為3.8~4.1%。
一種基于鮸魚魚鰾多肽的降血脂復(fù)配物的制備方法，制備步驟為：
1）將鮸魚魚鰾洗凈，勻漿，按照1g：15~20ml的重量體積比加入0.17~0.23mol/l的na2hpo4-nah2po4緩沖液，混合均勻，調(diào)節(jié)ph為6.0~7.5，得到混合液；
2）將步驟1得到的混合液溫度升至45~55℃進(jìn)行預(yù)熱5~10min，于300~600w微波處理10~15min，然后加入復(fù)合酶系進(jìn)行酶解，復(fù)合酶系為質(zhì)量比1:0.7~1.2的中性蛋白酶和木瓜蛋白酶，加入量為原料質(zhì)量的2.0~2.5%，酶解溫度為45~55℃，酶解時(shí)間為4~6h。酶解結(jié)束后，升溫至90~95℃，并于此溫度保持10~15min，離心取上清液；
3）將步驟2得到的上清液過截留分子量為1~2kda的超濾膜，收集濾過液，制成濃度5~10mg/ml的溶液，進(jìn)行大孔樹脂脫鹽；脫鹽后的酶解液在≤40℃的溫度下進(jìn)行低壓濃縮，最后經(jīng)噴霧干燥得到鮸魚魚鰾多肽；
4）取配方量鮸魚魚鰾多肽、三七總皂甙、愈創(chuàng)木酚、魚油、維生素c和香柑內(nèi)酯于適量雙蒸水中混合均勻，將混合物噴霧干燥得復(fù)配物粉末，即為基于鮸魚魚鰾多肽的降血脂復(fù)配物。上述復(fù)配物為片劑、分散片、速溶片、散劑、顆粒劑或膠囊，以上實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)呈非線性，其作用機(jī)理有待驗(yàn)證。
實(shí)施例2：
一種基于鮸魚魚鰾多肽的降血脂復(fù)配物，成份及其最優(yōu)選重量份為：鮸魚魚鰾多肽90份、三七總皂甙13份、愈創(chuàng)木酚0.0001份、魚油6份、維生素c1.3份和香柑內(nèi)酯0.0004份。
一種基于鮸魚魚鰾多肽的降血脂復(fù)配物的制備方法，制備步驟為：
1）勻漿鮸魚魚鰾與na2hpo4-nah2po4緩沖液（ph6.0~7.5，濃度0.2mol/l）按照1g：18ml的重量體積比混合、勻漿，然后調(diào)節(jié)ph值至6.5，得混合液；
2）將混合液溫度升至55℃攪拌預(yù)熱10分鐘，于400w微波處理15分鐘；按原料質(zhì)量的2.3%加入中性蛋白酶和木瓜蛋白酶復(fù)合酶系(1:1，w/w)，酶解溫度為55℃，酶解時(shí)間5h；
3）將所得的酶解產(chǎn)物升溫至95℃，并于此溫度保持12min，再冷卻至室溫，然后離心，得酶解液；酶解液依次經(jīng)1kda超濾膜超濾，收集小于1kda組分制成濃度8mg/ml的溶液，按照大孔樹脂柱體積的1:15將超濾酶解液加入到da201-c大孔樹脂柱，用雙蒸水洗脫2個(gè)體積后，然后用60%乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫液，在35℃進(jìn)行低壓濃縮，最后濃縮液經(jīng)噴霧干燥得魚鰾多肽；
4）取配方量鮸魚魚鰾多肽、三七總皂甙、愈創(chuàng)木酚、魚油、維生素c和香柑內(nèi)酯于適量雙蒸水中混合均勻，將混合物噴霧干燥得復(fù)配物粉末，粉末上膠囊填充機(jī)進(jìn)行充填。制成0.3g/粒的膠囊。
所得的魚鰾多肽經(jīng)sec-hplc試驗(yàn)表明：平均分子量為628.0da，甘氨酸（gly）含量為16.5%，羥脯氨酸(hyp)的含量為7.9%，丙氨酸（ala）的含量為7.6%，脯氨酸(pro)的含量為7.0%，谷氨酸（glu）的含量為6.8%，精氨酸（arg）的含量為6.4%，天冬氨酸（asp）的含量為4.5%，精氨酸(arg)的含量為3.9%。
功能試驗(yàn)：試驗(yàn)樣品：實(shí)施例2制得的鮸魚魚鰾多肽復(fù)配物膠囊，分為高（0.33g/kg·bw）、中（0.67g/kg·bw）、低劑量組（2.0g/kg·bw）；
試驗(yàn)動(dòng)物：spf級(jí)雌性icr小鼠，體重為18-22g；
試驗(yàn)環(huán)境條件：spf屏障系統(tǒng)；
劑量選擇及樣品處理：設(shè)低（0.33g/kg·bw）、中（0.67g/kg·bw）、高劑量組（2.0g/kg·bw）。低、中、高劑量受試液配置時(shí)，分別取膠囊內(nèi)容物1.65g、3.35g、10.0g加生理鹽水定容至50ml，對(duì)照組予以等體積的生理鹽水，每天灌胃一次，灌胃體積為0.1ml/10g·bw，連續(xù)30天。
試驗(yàn)結(jié)果：經(jīng)口給與小鼠低（0.33g/kg·bw）、中（0.67g/kg·bw）、高劑量組（2.0g/kg?bw）的鮸魚魚鰾多肽復(fù)配物30天。實(shí)驗(yàn)結(jié)果（表1）表明：給予本發(fā)明鮸魚魚鰾多肽復(fù)配物不同劑量的小鼠與模型對(duì)照組比較，復(fù)配物組總膽固醇（tc）合甘油三酯（tg）含量低于模型組，中劑量組和高劑量組也低于陽(yáng)性對(duì)照組；復(fù)配物組低密度脂蛋白（ldl）含量低于模型組，高劑量組也低于陽(yáng)性對(duì)照組；復(fù)配物組高密度脂蛋白（hdl）含量高于模型組，中劑量組和高劑量組也高于陽(yáng)性對(duì)照組。結(jié)果提示本發(fā)明的鮸魚魚鰾多肽復(fù)配物具有顯著地降血脂功效，中劑量組和高劑量組的多數(shù)指標(biāo)甚至優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照組（阿托伐他?。?/p>
表1鮸魚魚鰾多肽復(fù)配物對(duì)高血脂小鼠血脂指標(biāo)的影響
本發(fā)明的鮸魚魚鰾多肽復(fù)配物配方合理，操作簡(jiǎn)單，具有較強(qiáng)的工業(yè)實(shí)施性。本發(fā)明的魚鰾多肽復(fù)配物可作為老年人和體弱多病者的日常保健產(chǎn)品，亦可作為術(shù)后病人的醫(yī)用食品。
本發(fā)明的操作步驟中的常規(guī)操作為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知，在此不進(jìn)行贅述。
以上所述的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行了詳細(xì)說明，應(yīng)理解的是以上所述僅為本發(fā)明的具體實(shí)施例，并不用于限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的原則范圍內(nèi)所做的任何修改、補(bǔ)充或類似方式替代等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。