一種利用胚芽體細(xì)胞培育改良野生構(gòu)樹性狀的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種利用胚芽體細(xì)胞培育改良野生構(gòu)樹性狀的方法，包括以下步驟：1）采用野生構(gòu)樹為母本；2）胚芽的選擇和切?。?）胚芽的滅菌；4）通過誘導(dǎo)愈傷組織；5）愈傷組織分化成苗形成完整植株；6）分化成苗后的管理；本發(fā)明通過胚芽體細(xì)胞組織培養(yǎng)技術(shù)，使野生構(gòu)樹的速生性加強(qiáng)，木質(zhì)纖維增長(zhǎng)，嫩芽葉的植物蛋白含量提高，成為既能夠超速生，又有較長(zhǎng)木質(zhì)纖維，還使嫩芽葉的營(yíng)養(yǎng)更豐富。
【專利說明】一種利用胚芽體細(xì)胞培育改良野生構(gòu)樹性狀的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種利用胚芽體細(xì)胞培育改良野生構(gòu)樹性狀的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]構(gòu)樹,學(xué)名(Broussonetia papyrifera),為桑科構(gòu)樹屬，多年生、落葉喬木，莖干色白，可作為造紙?jiān)?，嫩芽葉含植物蛋白，可作為動(dòng)物飼料，但由于木質(zhì)纖維長(zhǎng)度較短，不能造出高品質(zhì)紙漿。因此如何培育木質(zhì)纖維較長(zhǎng)的構(gòu)樹植株就成了人們探索的一個(gè)課題。
[0003]長(zhǎng)期以來，廣大生產(chǎn)者主要通過利用多施肥、摘除側(cè)芽等手段，有的甚至利用赤霉素等植物激素，從而達(dá)到培育所謂較長(zhǎng)木質(zhì)纖維和速生的目的。這種方法不僅增加生產(chǎn)成本，而且生物性狀不能延續(xù)。
[0004]近年來，時(shí)有報(bào)道人們利用植物體細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)改良植物生物性狀；但因其繼代繁殖的分離性較高，優(yōu)良生物性狀的延續(xù)性不強(qiáng)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種利用胚芽體細(xì)胞培育改良野生構(gòu)樹性狀的方法，該方法通過胚芽體細(xì)胞組織培養(yǎng)技術(shù)，使野生構(gòu)樹的速生性加強(qiáng)，木質(zhì)纖維增長(zhǎng)，嫩芽葉的植物蛋白含量提高，成為既能夠超速生，又有較長(zhǎng)木質(zhì)纖維，還使嫩芽葉的營(yíng)養(yǎng)更豐
邑O
[0006]為解決上述問題，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:` 一種利用胚芽體細(xì)胞培育改良野生構(gòu)樹性狀的方法，包括以下步驟:
1)采用野生構(gòu)樹為母本:選擇較為粗壯的野生構(gòu)樹；
2)胚芽的選擇和切取:在步驟I)中所選取的野生構(gòu)樹上選擇飽滿的野生購樹的種子，在無土條件下發(fā)芽，待胚芽生長(zhǎng)到1.5cm-2cm時(shí)切取中段胚芽,長(zhǎng)度為1.8cm_lcm ;
3)胚芽的滅菌:將步驟2)中所切取的胚芽，浸入70%-75%濃度的酒精中，消毒30秒，取出后，再投入到0.09%-0.1%濃度的酸性升汞溶液中滅菌15分鐘，再使用無菌水沖洗3-5遍；
4)通過誘導(dǎo)愈傷組織:將誘導(dǎo)培養(yǎng)基接種到步驟3)所得到的胚芽體細(xì)胞中進(jìn)行暗培養(yǎng)，得到愈傷組織，靜置25-30天后達(dá)到愈傷組織發(fā)出高峰期，當(dāng)愈傷組織生長(zhǎng)到1.5-
2.0mm時(shí)，轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上進(jìn)行分化陪養(yǎng)，增加光照，并保持25°C -30°C的溫度，約50天后得到分化苗；
5)愈傷組織分化成苗形成完整植株:將步驟4)中最后所得到的分化苗嫁接到步驟I)中所選取的野生構(gòu)樹上；
6)分化成苗后的管理，包括:試管苗移植初期的管理、煉苗期的管理和移栽大田的管理。
[0007]作為優(yōu)選的技術(shù)方案，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基包括以下物質(zhì)組分:
N6 培養(yǎng)基1300ml-1500ml5%濃度的蔗糖水4500ml-5000ml
2.4—D 丁脂0.lmg/10ml
萘乙酸0.lmg/10ml。
[0008]作為優(yōu)選的技術(shù)方案，所述分化培養(yǎng)基包括以下物質(zhì)組分:
MS基本培養(yǎng)基 2000ml-2500ml
6BA 蔡乙酸0.lmg/10ml
NAA 蔡乙酸0.lmg/10ml。
[0009]作為優(yōu)選的技術(shù)方案，所述試管苗移植初期的管理，包括做好遮光、防風(fēng)、保濕，并保持溫度在25°C -30°C范圍。
[0010]作為優(yōu)選的技術(shù)方案，所述煉苗期的管理，包括保持水分和營(yíng)養(yǎng)供給，同時(shí)增加光照，及時(shí)抹除側(cè)芽。
[0011]作為優(yōu)選的技術(shù)方案，所述移栽大田的管理，包括做好所移栽土地的施肥、所移栽苗木的整形修剪、防治病蟲害和摘除頂芽。
[0012]本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明過胚芽體細(xì)胞組織培養(yǎng)技術(shù)，使野生構(gòu)樹的速生性加強(qiáng)，木質(zhì)纖維增長(zhǎng)，嫩芽葉的植物蛋白含量提高，成為既能夠超速生，又有較長(zhǎng)木質(zhì)纖維，還使嫩芽葉的營(yíng)養(yǎng)更豐富，并且本發(fā) 明實(shí)施方式較為簡(jiǎn)單，成活率高，成本低廉，適合推廣使用。
【具體實(shí)施方式】
[0013]一種利用胚芽體細(xì)胞培育改良野生構(gòu)樹性狀的方法，包括以下步驟:
1)采用野生構(gòu)樹為母本:選擇較為粗壯的野生構(gòu)樹；
2)胚芽的選擇和切取:在步驟I)中所選取的野生構(gòu)樹上選擇飽滿的野生購樹的種子，在無土條件下發(fā)芽，待胚芽生長(zhǎng)到1.5cm-2cm時(shí)切取中段胚芽,長(zhǎng)度為1.8cm_lcm ;胚芽體細(xì)胞是指體細(xì)胞組織培養(yǎng)時(shí)用來進(jìn)行培養(yǎng)的外植體，是改良構(gòu)樹的生命基礎(chǔ)。從植物生理學(xué)上看胚芽是一個(gè)具有根、莖、葉等器官分化能力的活體植物全息細(xì)胞，能通過相關(guān)生物技術(shù)培養(yǎng)后形成植株，具備生長(zhǎng)、分枝等生理活動(dòng)的基礎(chǔ)性植物體；胚芽的選擇直接影響到愈傷組織的發(fā)出率，所以選擇健壯色澤白的胚芽是關(guān)鍵；
3)胚芽的滅菌:將步驟2)中所切取的胚芽，浸入70%-75%濃度的酒精中，消毒30秒，取出后，再投入到0.09%-0.1%濃度的酸性升汞溶液中滅菌15分鐘，再使用無菌水沖洗3-5遍；
4)通過誘導(dǎo)愈傷組織:將誘導(dǎo)培養(yǎng)基接種到步驟3)所得到的胚芽體細(xì)胞中進(jìn)行暗培養(yǎng)，得到愈傷組織，靜置25-30天后達(dá)到愈傷組織發(fā)出高峰期，當(dāng)愈傷組織生長(zhǎng)到1.5-
2.0mm時(shí)，轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上進(jìn)行分化陪養(yǎng)，增加光照，并保持25°C -30°C的溫度，約50天后得到分化苗；
5)愈傷組織分化成苗形成完整植株:將步驟4)中最后所得到的分化苗嫁接到步驟I)中所選取的野生構(gòu)樹上；
6)分化成苗后的管理，包括:試管苗移植初期的管理、煉苗期的管理和移栽大田的管理。
[0014]其中，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基包括以下物質(zhì)組分:N6 培養(yǎng)基1300ml-1500ml
5%濃度的蔗糖水4500ml-5000ml
2.4—D 丁脂0.lmg/10ml
萘乙酸0.lmg/10ml。 [0015]作為優(yōu)選的技術(shù)方案，所述分化培養(yǎng)基包括以下物質(zhì)組分:
MS基本培養(yǎng)基 2000ml-2500ml
6BA 蔡乙酸0.lmg/10ml
NAA 蔡乙酸0.lmg/10ml。
[0016]所述試管苗移植初期的管理，包括做好遮光、防風(fēng)、保濕，并保持溫度在250C -30°C范圍。
[0017]所述煉苗期的管理，包括保持水分和營(yíng)養(yǎng)供給，同時(shí)增加光照，及時(shí)抹除側(cè)芽。
[0018]所述移栽大田的管理，包括做好所移栽土地的施肥、所移栽苗木的整形修剪、防治病蟲害和摘除頂芽。
[0019]本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明過胚芽體細(xì)胞組織培養(yǎng)技術(shù)，使野生構(gòu)樹的速生性加強(qiáng)，木質(zhì)纖維增長(zhǎng)，嫩芽葉的植物蛋白含量提高，成為既能夠超速生，又有較長(zhǎng)木質(zhì)纖維，還使嫩芽葉的營(yíng)養(yǎng)更豐富，并且本發(fā)明實(shí)施方式較為簡(jiǎn)單，成活率高，成本低廉，適合推廣使用。
[0020]實(shí)施例1
1)采用野生構(gòu)樹為母本:選擇較為粗壯的野生構(gòu)樹；
2)胚芽的選擇和切取:在步驟I)中所選取的野生構(gòu)樹上選擇飽滿的野生購樹的種子，在無土條件下發(fā)芽，待胚芽生長(zhǎng)到1.5cm時(shí)切取中段胚芽，長(zhǎng)度為1.8cm ;胚芽體細(xì)胞是指體細(xì)胞組織培養(yǎng)時(shí)用來進(jìn)行培養(yǎng)的外植體，是改良構(gòu)樹的生命基礎(chǔ)。從植物生理學(xué)上看胚芽是一個(gè)具有根、莖、葉等器官分化能力的活體植物全息細(xì)胞，能通過相關(guān)生物技術(shù)培養(yǎng)后形成植株，具備生長(zhǎng)、分枝等生理活動(dòng)的基礎(chǔ)性植物體；胚芽的選擇直接影響到愈傷組織的發(fā)出率，所以選擇健壯色澤白的胚芽是關(guān)鍵；
3)胚芽的滅菌:將步驟2)中所切取的胚芽，浸入75%濃度的酒精中，消毒30秒，取出后，再投入到0.1%濃度的酸性升汞溶液中滅菌15分鐘，再使用無菌水沖洗5遍；
4)通過誘導(dǎo)愈傷組織:將誘導(dǎo)培養(yǎng)基接種到步驟3)所得到的胚芽體細(xì)胞中進(jìn)行暗培養(yǎng)，得到愈傷組織，靜置30天后達(dá)到愈傷組織發(fā)出高峰期，當(dāng)愈傷組織生長(zhǎng)到1.5時(shí)，轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上進(jìn)行分化陪養(yǎng)，增加光照，并保持30°C的溫度，50天后得到分化苗；
5)愈傷組織分化成苗形成完整植株:將步驟4)中最后所得到的分化苗嫁接到步驟I)中所選取的野生構(gòu)樹上；
6)分化成苗后的管理，包括:試管苗移植初期的管理、煉苗期的管理和移栽大田的管理。
[0021]其中，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基包括以下物質(zhì)組分:
N6培養(yǎng)基1500ml
5%濃度的鹿糖水 5000ml 2.4— D 丁脂 0.lmg/10ml 萘乙酸0.lmg/10ml。[0022]所述分化培養(yǎng)基包括以下物質(zhì)組分:
MS基本培養(yǎng)基2500ml
6BA 蔡乙酸0.lmg/10ml
NAA 蔡乙酸0.lmg/10ml。
[0023]所述試管苗移植初期的管理，包括做好遮光、防風(fēng)、保濕，并保持溫度在250C -30°C范圍。
[0024]所述煉苗期的管理，包括保持水分和營(yíng)養(yǎng)供給，同時(shí)增加光照，及時(shí)抹除側(cè)芽。
[0025]所述移栽大田的管理，包括做好所移栽土地的施肥、所移栽苗木的整形修剪、防治病蟲害和摘除頂芽。
[0026]附表說明如下:
表1:改良構(gòu)樹和野生構(gòu)樹一年生長(zhǎng)對(duì)照表 表2:改良構(gòu)樹和野生構(gòu)樹生物性狀的對(duì)照表 表1:改良構(gòu)樹和野生構(gòu)樹一年生長(zhǎng)對(duì)照表
【權(quán)利要求】
1.一種利用胚芽體細(xì)胞培育改良野生構(gòu)樹性狀的方法，其特征在于，包括以下步驟: 采用野生構(gòu)樹為母本:選擇較為粗壯的野生構(gòu)樹； 胚芽的選擇和切取:在步驟I)中所選取的野生構(gòu)樹上選擇飽滿的野生購樹的種子，在無土條件下發(fā)芽，待胚芽生長(zhǎng)到1.5cm-2cm時(shí)切取中段胚芽,長(zhǎng)度為1.8 cm-1 cm ； 胚芽的滅菌:將步驟2)中所切取的胚芽，浸入70%-75%濃度的酒精中，消毒30秒，取出后，再投入到0.09%-0.1%濃度的酸性升汞溶液中滅菌15分鐘，再使用無菌水沖洗3-5遍；通過誘導(dǎo)愈傷組織:將誘導(dǎo)培養(yǎng)基接種到步驟3)所得到的胚芽體細(xì)胞中進(jìn)行暗培養(yǎng)，得到愈傷組織，靜置25-30天后達(dá)到愈傷組織發(fā)出高峰期，當(dāng)愈傷組織生長(zhǎng)到1.5—2.0mm時(shí)，轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上進(jìn)行分化陪養(yǎng)，增加光照，并保持25°C -30°C的溫度，約50天后得到分化苗； 愈傷組織分化成苗形成完整植株:將步驟4)中最后所得到的分化苗嫁接到步驟I)中所選取的野生構(gòu)樹上； 分化成苗后的管理，包括:試管苗移植初期的管理、煉苗期的管理和移栽大田的管理。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用胚芽體細(xì)胞培育改良野生構(gòu)樹性狀的方法，其特征在于:所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基包括以下物質(zhì)組分: N6 培養(yǎng)基1300ml-1500ml 5%濃度的蔗糖水 4500ml-5000ml 2.4— D 丁脂0.lmg/10ml 萘乙酸 0.lmg/10ml。`
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用胚芽體細(xì)胞培育改良野生構(gòu)樹性狀的方法，其特征在于:所述分化培養(yǎng)基包括以下物質(zhì)組分: MS基本培養(yǎng)基 2000ml-2500ml 6BA 蔡乙酸0.lmg/10ml NAA 蔡乙酸0.lmg/10ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用胚芽體細(xì)胞培育改良野生構(gòu)樹性狀的方法，其特征在于:所述試管苗移植初期的管理，包括做好遮光、防風(fēng)、保濕，并保持溫度在25°C -30°C范圍。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用胚芽體細(xì)胞培育改良野生構(gòu)樹性狀的方法，其特征在于:所述煉苗期的管理，包括保持水分和營(yíng)養(yǎng)供給，同時(shí)增加光照，及時(shí)抹除側(cè)芽。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用胚芽體細(xì)胞培育改良野生構(gòu)樹性狀的方法，其特征在于:所述移栽大田的管理，包括做好所移栽土地的施肥、所移栽苗木的整形修剪、防治病蟲害和摘除頂芽。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK103688863SQ201310702512
【公開日】2014年4月2日 申請(qǐng)日期:2013年12月19日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月19日
【發(fā)明者】陳民, 方顯初, 李勇, 鄯保玉, 李軍 申請(qǐng)人:云南晉企生物科技有限公司