本發(fā)明屬于藥物化學合成領域，具體涉及一種半合成紫杉醇及其中間體的制備方法。
背景技術：
紫杉醇(Paclitaxel，商品名Taxol)是從紅豆杉屬(Taxus)植物中分離出的一種紫杉烷二萜類化合物。其結構新穎、抗癌機理獨特、抗癌效果顯著、抗癌譜廣，被認為是迄今所發(fā)現最好的抗癌藥物之一。紫杉醇化學全合成獲得成功，但合成路線復雜，成本過高，僅具有研究意義，尚無商業(yè)價值相對紫杉醇全合成，紫杉醇半合成是具有實用價值的一種制備方法。紫杉醇半合成一般都是以與紫杉醇大環(huán)結構類似的10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(10-deacetylbaccatinⅢ，10-DABⅢ)為原料，通過與紫杉醇的側鏈基團化合物對接而制得紫杉醇。10-DABⅢ可從來源豐富的紅豆杉屬植物中提取而獲得，且得率高，從而為紫杉醇半合成提供了充足的原料?，F有技術中在半合成紫杉醇的方法中除了使用溶劑外還會使用各種催化劑以提高反應收率，如專利CN200580011712.2使用咪唑等催化劑，又如專利US193263中對C7羥基保護時需使用瓊斯試劑，并且對C10羥基保護時需要在-23℃下反應，反應試劑要求較高、體系組分復雜有雜質產生，使得最終提純產品中紫杉醇的含量不高。
總之，現有專利技術中普遍存在的問題是：以10-DABⅢ為原料，最終獲得的紫杉醇收率低，其主要原因是：(1)對10-DABⅢ10位羥基進行乙酰化的過程中，在反應接近終點的時候容易產生副反應生成其它雜質；(2)在進行最后一步開環(huán)脫保護反應過程容易造成過反應生成其它雜質。
由于將原料大量的轉化為了雜質，因此收率低；在進行紫杉醇純化分離過程中，采用柱層析及重結晶的進行純化，因此造成了部分紫杉醇產品損失且紫杉醇純度提高不大。
技術實現要素：
為了解決上述問題，本發(fā)明提供了一種收率高、產品純度高、易于產業(yè)化的一種半合成紫杉醇及其中間體的制備方法。
為實現上述目的，本發(fā)明采用的技術方案是：一種半合成紫杉醇的制備方法包括步驟：
A.制備中間體I：10-DABⅢ溶于吡啶中，將10-DABⅢ上7位碳上羥基用三乙基甲硅烷基進行保護得中間體I；
B.制備中間體II：將中間體I的10位碳上羥基乙?；弥虚g體II；
C.制備中間體III：將中間體II、側鏈基團化合物、4-二甲氨基吡啶在有機溶劑中反應制得中間體III；
D.制備紫杉醇粗品：將中間體III在酸性條件下與三氟乙酸反應得紫杉醇粗品；
所述中間體Ⅰ分子式：C35H50O10Si，其結構式如下：
所述中間體Ⅱ分子式：C37H52O11Si，其結構式如下：
所述中間體Ⅲ分子式：C62H71NO15Si，其結構式如下：
通過對10-DABIII分子結構中的活性羥基進行保護，并且選擇合適的側鏈基團化合物化合物基團使得紫杉醇的收率和純度大大提高，適于合成較高品質的紫杉醇，對抗腫瘤藥物的開發(fā)提供支持。
進一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟A至D具體如下：
A.制備中間體I：將10-DABⅢ加入吡啶中攪拌溶解，在氮氣保護下滴加三乙基氯硅烷，當反應液中10-DABⅢ殘留小于0.2％時停止反應，滴加水進行淬滅反應，用濃鹽酸中和吡啶，萃取二氯甲烷，濃縮干燥得到中間體I；
B.制備中間體Ⅱ：將中間體I加入吡啶中攪拌溶解，在氮氣保護下滴加乙酰氯，然后在-15～5℃溫度下反應至中間體I殘留為5～10％時停止反應，滴加水進行淬滅反應，用濃鹽酸中和吡啶，萃取二氯甲烷，濃縮干燥得到中間體Ⅱ；
C.制備中間體Ⅲ：將中間體II、側鏈基團化合物、4-二甲氨基吡啶加入甲苯中攪拌溶解，在10～30℃溫度及氮氣保護下滴加縮合劑，然后在10～30℃溫度下反應至中間體Ⅱ原料殘留小于0.2％停止反應，加入正己烷攪拌結晶，過濾干燥得到中間體Ⅲ；
D.制備紫杉醇粗品：將中間體Ⅲ加入乙酸中，再加入水攪拌溶解，再將三氟乙酸加入體系，在10～30℃溫度下反應至中間體Ⅲ原料殘留為5～10％時停止反應，加入堿中和，用二氯甲烷萃取后經水洗、濃縮、干燥得到紫杉醇粗品。
合成紫杉醇的方法中體系組分相對簡單，不需使用其他催化劑，且制備工藝均較常規(guī)易于工業(yè)化，分離簡單。
進一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟A中滴加三乙基氯硅烷的滴加時間為30～60min，滴加溫度為10～20℃，滴加完成后反應溫度為10～30℃；所述步驟C中加入正己烷攪拌結晶的時間為1～2小時。
進一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟B中滴加乙酰氯的滴加時間為30～60min，滴加溫度為-15～5℃，滴加完成后反應溫度為-15～5℃。
進一步優(yōu)選的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟D中加入堿中和具體為加入弱堿調節(jié)pH至6～8。
進一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟D后還包括步驟E，所述步驟E為：
E.制備紫杉醇：將紫杉醇粗品用有機溶劑溶解、過濾，然后經液相色譜分離分別收集含有紫杉醇、中間體Ⅲ的洗脫液，含有紫杉醇洗脫液濃縮干燥得紫杉醇產品。
進一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟E中收集的含有中間體III的洗脫液經濃縮干燥后加入步驟D中重復利用。
進一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟B中濃縮干燥后的中間體II粗品經過液相色譜分離分別收集含有中間體I的洗脫液和含有中間體II的洗脫液，含有中間體I的洗脫液經過濃縮干燥后加入步驟B中重復利用，含有中間體II的洗脫液經過濃縮干燥后用作步驟C的原料。
對于洗脫液的重復利用，不僅僅能夠提高原料的使用率，同時洗脫液的加入還能對反應有促進作用，使得最終產品收率更高、轉化率更高。
進一步優(yōu)選的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟A中10-DABⅢ原料與吡啶的用量重量比為1：(3～6)，所述10-DABⅢ與三乙基氯硅烷的用量重量比為＝1：(0.8～2)；所述步驟B中所述中間體I和吡啶的用量重量比為1：(3～6)，中間體Ⅰ和乙酰氯的用量重量比為1：(0.5～2)；所述步驟C中中間體II和有機溶劑的用量重量比為1：(2～5)。
進一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟C中有機溶劑為甲醇、乙醇、乙腈中的一種。
進一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述提純中間體II粗品的液相色譜分離的制備柱所用填料為5～60um的十八烷基硅烷鍵合硅膠，所述液相色譜的流動相為50～70vol％的甲醇、50～70vol％的乙醇、50～70vol％的乙腈中的一種；所述步驟E中紫杉醇粗品和有機溶劑的用量重量比為1：(2～5)，所用液相色譜分離的制備柱所用填料為5～60um的十八烷基硅烷鍵合硅膠，所述流動相為40～60vol％的甲醇或40～60vol％的乙醇或40～60vol％的乙腈。
采用簡單的液相色譜分離方法對產品進行分離能夠大大提高方法的實用性，通過選擇合適的填料和溶劑能夠最大程度地保證產品的收率。
進一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟C中側鏈基團化合物為(4S,5R)-3-苯甲酰基-2-(4-甲氧基苯基)-4-苯基-5-惡唑啉羧酸。所述側鏈基團化合物的分子式為：C24H21NO5，其結構式如下：
側鏈基團化合物基團的選擇對于紫杉醇的合成至關重要，選擇所述側鏈基團化合物能夠減少雜質和副反應產物的產生。
進一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟C中中間體Ⅲ和側鏈基團化合物的用量重量比為1：(0.63～1)。
進一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟C中中間體Ⅲ和4-二甲氨基吡啶的用量重量比為1：(0.05～0.2)；所述步驟C中中間體Ⅲ和甲苯的用量重量比為1：(4～10)；所述步驟C中縮合劑為二環(huán)已基碳二亞胺或二異丙基碳二亞胺中；所述步驟C中中間體Ⅲ和縮合劑的用量重量比為1：(0.2～0.6)；所述步驟C中中間體Ⅲ和正己烷的用量重量比為1：(8～20)；所述步驟D中中間體Ⅲ和乙酸的用量重量比為1：(2～4)；所述步驟D中中間體Ⅲ和水的用量重量比為1：(0.1～0.5)；所述步驟D中中間體Ⅲ和三氟乙酸的用量重量比為1：(0.5～2)。
進一步優(yōu)選的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟D中弱堿為碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氨水中的一種，當然還可以是其它溶于水后不完全電離的弱堿。
本發(fā)明還提供一種半合成紫杉醇中間體的制備方法，包括步驟：在10-DABⅢ原料中加入吡啶攪拌溶解，在氮氣保護下滴加三乙基氯硅烷，當反應液中10-DABⅢ殘留小于0.2％時停止反應，滴加水進行淬滅反應，用濃鹽酸中和吡啶，萃取二氯甲烷，濃縮干燥得到中間體I。
本發(fā)明提供的半合成紫杉醇及其中間體的制備方法具有如下有益效果：
1.本發(fā)明方法以10-DABⅢ為原料，先用三乙基氯硅烷進行7位羥基保護得到中間體Ⅰ，再用中間體Ⅰ與乙酰氯反應合成中間體Ⅱ，中間體Ⅱ通過制備液相色譜純化得到精制后的中間體Ⅱ，精制后的中間體Ⅱ再與側鏈基團化合物反應制得中間體Ⅲ，中間體Ⅲ開環(huán)脫保護后制得粗品紫杉醇，粗品紫杉醇經過制備液相色譜純化后獲得紫杉醇產品。制備方法簡單易于工業(yè)化，且對10-DABIII原料活性羥基保護有效，使得最終的副產物少，制得的紫杉醇產品摩爾收率高達70％～81％，紫杉醇純度高達99.5％～99.9％。
2.本發(fā)明方法控制合成中間體Ⅱ和合成紫杉醇步驟中原料殘留為5～10％時停止反應，即本發(fā)明制備方法提高了原料的選擇性，減少了副反應的產生，使原料轉化為所需的產物，合成中間體Ⅱ反應步驟的選擇性高達92％～97％，合成紫杉醇反應步驟的選擇性高達93％～97％。
3.本發(fā)明方法利用制備液相色譜分離純化中間體Ⅱ和紫杉醇，將分離得到未反應完的中間體Ⅰ和中間體Ⅲ作為下一步反應的原料，充分利用了原料。
4.紫杉醇粗品的分離純化過程采用制備液相色譜一步純化獲得紫杉醇產品，操作簡單易控制，且利用本發(fā)明提供的液相色譜原料及溶液分離獲得的紫杉醇產品純度高，收率高。
5.本發(fā)明方法可廣泛應用于10-DABⅢ半合成紫杉醇的實驗室及工業(yè)化制備中，采用本發(fā)明方法生產的紫杉醇作為治療卵巢癌和乳腺癌等醫(yī)藥領域的原料。
具體實施方式
下面結合具體實施例對本發(fā)明做進一步說明。需要說明的是，本發(fā)明所記載的實施例僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例而已，并不用于限制本發(fā)明，對于本領域的技術人員來說，本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內?；诒景l(fā)明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。下述實施例中所述用量比除特殊說明外均為質量比。
實施例一
(1)稱取10-DABⅢ原料，加入一定重量的干燥吡啶攪拌溶解，然后在氮氣保護下滴加一定重量的三乙基氯硅烷，滴加時間保持在30min，滴加溫度控制在10℃，滴加完成后，控制反應溫度為10℃，當反應液中10-DABⅢ殘留小于0.2％時停止反應，滴加水進行淬滅反應，然后經過濃鹽酸中和吡啶，二氯甲烷萃取，濃縮干燥，得到中間體I。
(2)稱取中間體I，加入一定重量的干燥吡啶攪拌溶解，然后在氮氣保護下滴加一定重量的乙酰氯，滴加時間保持在30min，滴加溫度控制在-15℃，滴加完成后，控制反應溫度為-15℃，當反應液中中間體I殘留為5％時停止反應，滴加水進行淬滅反應，然后經過濃鹽酸中和吡啶，二氯甲烷萃取，濃縮干燥，得到中間體Ⅱ。
(3)稱取中間體Ⅱ，用一定重量的有機溶劑溶解、過濾，然后經制備液相色譜分離分別收集含有中間體I、中間體Ⅱ的洗脫液，含有中間體I、中間體Ⅱ的洗脫液分別經濃縮干燥得到中間體I、中間體Ⅱ，中間體I作為合成中間體Ⅱ的原料，中間體Ⅱ作為合成中間體Ⅲ的反應原料。
(4)稱取中間體Ⅱ，加入一定重量的側鏈基團化合物、4-二甲氨基吡啶，再加入一定重量的干燥甲苯溶解，在溫度為10℃下氮氣保護下滴加一定重量的縮合劑，滴加完成后在反應溫度為10℃下反應至中間體Ⅱ原料殘留小于0.2％以下停止反應得到反應液，向反應液中加入一定重量的正己烷攪拌結晶1小時，過濾干燥得到中間體Ⅲ。
(5)稱取中間體Ⅲ，加入一定重量的乙酸、水攪拌溶解，再加入一定重量的三氟乙酸，在溫度為10℃下反應至中間體Ⅲ原料殘留為5％時停止反應，加入弱堿調節(jié)pH至6，用二氯甲烷萃取后，經水洗、濃縮、干燥得到紫杉醇粗品。
(6)稱取紫杉醇粗品，用一定重量的有機溶劑溶解、過濾，然后經制備液相色譜分離分別收集含有紫杉醇、中間體Ⅲ的洗脫液，含有紫杉醇、中間體Ⅲ的洗脫液分別經濃縮干燥得到紫杉醇產品、中間體Ⅲ，中間體Ⅲ作為合成紫杉醇的反應原料。
(7)所述第(1)步中一定重量的干燥吡啶為10-DABⅢ原料：干燥吡啶＝1：3，一定量的三乙基氯硅烷為10-DABⅢ原料：三乙基氯硅烷＝1：0.8。
(8)所述第(2)步中一定重量的干燥吡啶為中間體I：干燥吡啶＝1：3，一定重量的乙酰氯為中間體I：乙酰氯＝1：0.5。
(9)所述第(3)步中的有機溶劑為甲醇，一定重量的有機溶劑為中間體Ⅱ：有機溶劑＝1：2，制備液相色譜分離的制備柱所用填料為5um的十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動相為50vol％的甲醇。
(10)所述第(4)步中的側鏈基團化合物為(4S,5R)-3-苯甲?；?2-(4-甲氧基苯基)-4-苯基-5-惡唑啉羧酸，一定重量的側鏈基團化合物為中間體Ⅲ：側鏈基團化合物＝1：0.63，一定重量的4-二甲氨基吡啶為中間體Ⅲ：4-二甲氨基吡啶＝1：0.05，一定重量的干燥甲苯為中間體Ⅲ：甲苯＝1：4，縮合劑為二環(huán)已基碳二亞胺，一定重量縮合劑為中間體Ⅲ：縮合劑＝1：0.2，一定重量正己烷為中間體Ⅲ：正己烷＝1：8。
(11)所述第(5)步中一定重量的乙酸為中間體Ⅲ：乙酸＝1：2，一定重量的水為中間體Ⅲ：水＝1：0.1，一定重量的三氟乙酸為中間體Ⅲ：三氟乙酸＝1：0.5，弱堿為碳酸氫鈉。
(12)所述第(6)步中的有機溶劑為甲醇，一定重量的有機溶劑為紫杉醇粗品：有機溶劑＝1：2，制備液相色譜分離的制備柱所用填料為5um的十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動相為40vol％的甲醇。
所得產品紫杉醇摩爾收率高達70％，紫杉醇純度高達99.5％。
實施例二
(1)稱取10-DABⅢ原料，加入一定重量的干燥吡啶攪拌溶解，然后在氮氣保護下滴加一定重量的三乙基氯硅烷，滴加時間保持在60min，滴加溫度控制在20℃，滴加完成后，控制反應溫度為30℃，當反應液中10-DABⅢ殘留小于0.2％時停止反應，滴加水進行淬滅反應，然后經過濃鹽酸中和吡啶，二氯甲烷萃取，濃縮干燥，得到中間體I。
(2)稱取中間體I，加入一定重量的干燥吡啶攪拌溶解，然后在氮氣保護下滴加一定重量的乙酰氯，滴加時間保持在60min，滴加溫度控制在5℃，滴加完成后，控制反應溫度為5℃，當反應液中中間體I殘留為10％時停止反應，滴加水進行淬滅反應，然后經過濃鹽酸中和吡啶，二氯甲烷萃取，濃縮干燥，得到中間體Ⅱ。
(3)稱取中間體Ⅱ，用一定重量的有機溶劑溶解、過濾，然后經制備液相色譜分離分別收集含有中間體I、中間體Ⅱ的洗脫液，含有中間體I、中間體Ⅱ的洗脫液分別經濃縮干燥得到中間體I、中間體Ⅱ，中間體I作為合成中間體Ⅱ的原料，中間體Ⅱ作為合成中間體Ⅲ的反應原料。
(4)稱取中間體Ⅱ，加入一定重量的側鏈基團化合物、4-二甲氨基吡啶，再加入一定重量的干燥甲苯溶解，在溫度為30℃下氮氣保護下滴加一定重量的縮合劑，滴加完成后在反應溫度為30℃下反應至中間體Ⅱ原料殘留小于0.2％以下停止反應得到反應液，向反應液中加入一定重量的正己烷攪拌結晶2小時，過濾干燥得到中間體Ⅲ。
(5)稱取中間體Ⅲ，加入一定重量的乙酸、水攪拌溶解，再加入一定重量的三氟乙酸，在溫度為30℃下反應至中間體Ⅲ原料殘留為10％時停止反應，加入弱堿調節(jié)pH至8，用二氯甲烷萃取后，經水洗、濃縮、干燥得到紫杉醇粗品。
(6)稱取紫杉醇粗品，用一定重量的有機溶劑溶解、過濾，然后經制備液相色譜分離分別收集含有紫杉醇、中間體Ⅲ的洗脫液，含有紫杉醇、中間體Ⅲ的洗脫液分別經濃縮干燥得到紫杉醇產品、中間體Ⅲ，中間體Ⅲ作為合成紫杉醇的反應原料。
(7)所述第(1)步中一定重量的干燥吡啶為10-DABⅢ原料：干燥吡啶＝1：6，一定量的三乙基氯硅烷為10-DABⅢ原料：三乙基氯硅烷＝1：2。
(8)所述第(2)步中一定重量的干燥吡啶為中間體I：干燥吡啶＝1：6，一定重量的乙酰氯為中間體I：乙酰氯＝1：2。
(9)所述第(3)步中的有機溶劑為乙腈，一定重量的有機溶劑為中間體Ⅱ：有機溶劑＝1：5，制備液相色譜分離的制備柱所用填料為60um的十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動相為50vol％的乙腈。
(10)所述第(4)步中的側鏈基團化合物為(4S,5R)-3-苯甲?；?2-(4-甲氧基苯基)-4-苯基-5-惡唑啉羧酸，一定重量的側鏈基團化合物為中間體Ⅲ：側鏈基團化合物＝1：1，一定重量的4-二甲氨基吡啶為中間體Ⅲ：4-二甲氨基吡啶＝1：0.2，一定重量的干燥甲苯為中間體Ⅲ：甲苯＝1：10，縮合劑為二異丙基碳二亞胺，一定重量縮合劑為中間體Ⅲ：縮合劑＝1：0.6，一定重量正己烷為中間體Ⅲ：正己烷＝1：20。
(11)所述第(5)步中一定重量的乙酸為中間體Ⅲ：乙酸＝1：4，一定重量的水為中間體Ⅲ：水＝1：0.5，一定重量的三氟乙酸為中間體Ⅲ：三氟乙酸＝1：2，弱堿為氨水。
(12)所述第(6)步中的有機溶劑為乙腈，一定重量的有機溶劑為紫杉醇粗品：有機溶劑＝1：5，制備液相色譜分離的制備柱所用填料為60um的十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動相為40vol％的乙腈。
所得產品紫杉醇摩爾收率高達81％，紫杉醇純度高達99.9％。
實施例三
(1)稱取10-DABⅢ原料，加入一定重量的干燥吡啶攪拌溶解，然后在氮氣保護下滴加一定重量的三乙基氯硅烷，滴加時間保持在45min，滴加溫度控制在15℃，滴加完成后，控制反應溫度為20℃，當反應液中10-DABⅢ殘留小于0.2％時停止反應，滴加水進行淬滅反應，然后經過濃鹽酸中和吡啶，二氯甲烷萃取，濃縮干燥，得到中間體I。
(2)稱取中間體I，加入一定重量的干燥吡啶攪拌溶解，然后在氮氣保護下滴加一定重量的乙酰氯，滴加時間保持在45min，滴加溫度控制在-5℃，滴加完成后，控制反應溫度為-5℃，當反應液中中間體I殘留為7％時停止反應，滴加水進行淬滅反應，然后經過濃鹽酸中和吡啶，二氯甲烷萃取，濃縮干燥，得到中間體Ⅱ。
(3)稱取中間體Ⅱ，用一定重量的有機溶劑溶解、過濾，然后經制備液相色譜分離分別收集含有中間體I、中間體Ⅱ的洗脫液，含有中間體I、中間體Ⅱ的洗脫液分別經濃縮干燥得到中間體I、中間體Ⅱ，中間體I作為合成中間體Ⅱ的原料，中間體Ⅱ作為合成中間體Ⅲ的反應原料。
(4)稱取中間體Ⅱ，加入一定重量的側鏈基團化合物、4-二甲氨基吡啶，再加入一定重量的干燥甲苯溶解，在溫度為20℃下氮氣保護下滴加一定重量的縮合劑，滴加完成后在反應溫度為20℃下反應至中間體Ⅱ原料殘留小于0.2％以下停止反應得到反應液，向反應液中加入一定重量的正己烷攪拌結晶1.5小時，過濾干燥得到中間體Ⅲ。
(5)稱取中間體Ⅲ，加入一定重量的乙酸、水攪拌溶解，再加入一定重量的三氟乙酸，在溫度為20℃下反應至中間體Ⅲ原料殘留為7％時停止反應，加入弱堿調節(jié)pH至7，用二氯甲烷萃取后，經水洗、濃縮、干燥得到紫杉醇粗品。
(6)稱取紫杉醇粗品，用一定重量的有機溶劑溶解、過濾，然后經制備液相色譜分離分別收集含有紫杉醇、中間體Ⅲ的洗脫液，含有紫杉醇、中間體Ⅲ的洗脫液分別經濃縮干燥得到紫杉醇產品、中間體Ⅲ，中間體Ⅲ作為合成紫杉醇的反應原料。
(7)所述第(1)步中一定重量的干燥吡啶為10-DABⅢ原料：干燥吡啶＝1：5，一定量的三乙基氯硅烷為10-DABⅢ原料：三乙基氯硅烷＝1：1.5。
(8)所述第(2)步中一定重量的干燥吡啶為中間體I：干燥吡啶＝1：5，一定重量的乙酰氯為中間體I：乙酰氯＝1：1.5。
(9)所述第(3)步中的有機溶劑為乙醇，一定重量的有機溶劑為中間體Ⅱ：有機溶劑＝1：4，制備液相色譜分離的制備柱所用填料為10um的十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動相為50vol％的乙醇。
(10)所述第(4)步中的側鏈基團化合物為(4S,5R)-3-苯甲?；?2-(4-甲氧基苯基)-4-苯基-5-惡唑啉羧酸，一定重量的側鏈基團化合物為中間體Ⅲ：側鏈基團化合物＝1：0.8，一定重量的4-二甲氨基吡啶為中間體Ⅲ：4-二甲氨基吡啶＝1：0.1，一定重量的干燥甲苯為中間體Ⅲ：甲苯＝1：7，縮合劑為二異丙基碳二亞胺，一定重量縮合劑為中間體Ⅲ：縮合劑＝1：0.4，一定重量正己烷為中間體Ⅲ：正己烷＝1：12。
(11)所述第(5)步中一定重量的乙酸為中間體Ⅲ：乙酸＝1：3，一定重量的水為中間體Ⅲ：水＝1：0.3，一定重量的三氟乙酸為中間體Ⅲ：三氟乙酸＝1：1，弱堿為碳酸氫鉀。
(12)所述第(6)步中的有機溶劑為乙醇，一定重量的有機溶劑為紫杉醇粗品：有機溶劑＝1：4，制備液相色譜分離的制備柱所用填料為10um的十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動相為40vol％的乙醇。
所得產品紫杉醇摩爾收率高達75％，紫杉醇純度高達99.8％。