本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種蛹蟲(chóng)草菌株及其在制備產(chǎn)脂蛹蟲(chóng)草產(chǎn)品中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
蛹蟲(chóng)草(Cordyceps militaris)，又名北冬蟲(chóng)夏草，屬于真菌界，分類學(xué)上屬于真菌門(mén)，子囊菌亞門(mén)，核菌綱，球殼菌目，麥角菌科，蟲(chóng)草屬。蛹蟲(chóng)草分布廣、生長(zhǎng)快、易培養(yǎng)、含有多種活性成分，對(duì)人體具有多種生理功能。近年來(lái)，科學(xué)工作者們?cè)谟枷x(chóng)草及其無(wú)性型的生物學(xué)特征、人工栽培、液體深層發(fā)酵培養(yǎng)、培養(yǎng)基組成、培養(yǎng)條件優(yōu)化、菌絲體及代謝產(chǎn)物的化學(xué)成分檢測(cè)、分離、提取、純化及其功能、優(yōu)良菌株選育、功能性食品研制、保健藥物開(kāi)發(fā)等方面進(jìn)行了大量的研究，取得了許多可喜的成果。大量研究已檢測(cè)或分離到蛹蟲(chóng)草含有的多類活性成分，如蟲(chóng)草素、腺苷、蟲(chóng)草酸(D-甘露醇)、蟲(chóng)草多糖、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、麥角甾醇等，其對(duì)促進(jìn)機(jī)體新陳代謝，提高機(jī)體免疫功能等具有積極意義。此外，蛹蟲(chóng)草還含有豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸、不飽和脂肪酸、維生素及微量元素等成分。2009年原衛(wèi)生部批準(zhǔn)蛹蟲(chóng)草為新資源食品，認(rèn)定其作為新保健食品，為冬蟲(chóng)夏草的良好替代品。2014年國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委批準(zhǔn)蛹蟲(chóng)草作為新食品原料，取消了對(duì)蛹蟲(chóng)草的食用量及使用范圍等限制，更進(jìn)一步體現(xiàn)了蛹蟲(chóng)草作為健康食品的安全性和可行性。
研究數(shù)據(jù)顯示，蛹蟲(chóng)草中含有較低含量的不飽和脂肪酸如γ-亞麻酸、亞油酸等，其總油脂含量不足3％，而且油脂中的不飽和脂肪酸的種類比較單一，總的不飽和脂肪酸的含量占總油脂含量低于30％。不飽和脂肪酸作為人體必需的營(yíng)養(yǎng)成分，對(duì)降低血液粘稠度，改善血液微循環(huán)以及維持機(jī)體細(xì)胞膜的相對(duì)流動(dòng)性，保證細(xì)胞的正常生理功能方面具有顯著生理功效，但人體不能自行合成，必須從膳食中補(bǔ)充。開(kāi)展蛹蟲(chóng)草合成與積累油脂，尤其是積累不飽和脂肪酸的研究，是實(shí)現(xiàn)蛹蟲(chóng)草資源生物活性物質(zhì)有效補(bǔ)充的一個(gè)全新課題，從而實(shí)現(xiàn)蛹蟲(chóng)草資源營(yíng)養(yǎng)成分多優(yōu)并舉，生理活性功能多效疊加的目的，具有極高的現(xiàn)實(shí)意義與應(yīng)用價(jià)值。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種蛹蟲(chóng)草菌株及其在制備產(chǎn)脂蛹蟲(chóng)草產(chǎn)品中的應(yīng)用。
本發(fā)明提供的蛹蟲(chóng)草FX1521(Cordyceps militaris FX 1521)，已于2016年08月15日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(簡(jiǎn)稱CCTCC；地址：中國(guó)武漢，武漢大學(xué)；郵編：430072)，保藏編號(hào)為CCTCC NO：M 2016423。蛹蟲(chóng)草FX1521(Cordyceps militaris FX 1521)CCTCC NO：M2016423簡(jiǎn)稱為蛹蟲(chóng)草FX1521。
本發(fā)明還保護(hù)蛹蟲(chóng)草FX1521的應(yīng)用，為如下(a1)和/或(a2)和/或(a3)和/或(a4)：
(a1)生產(chǎn)油脂；
(a2)生產(chǎn)不飽和脂肪酸；
(a3)生產(chǎn)蟲(chóng)草素；
(a4)制備產(chǎn)品；所述產(chǎn)品滿足如下參數(shù)(b1)-(b10)中的一種或多種：
(b1)油脂含量為301g/kg以上；
(b2)不飽和脂肪酸含量為225.8g/kg以上；
(b3)油酸含量為77.8g/kg以上；
(b4)γ-亞麻酸含量為59.9g/kg以上；
(b5)亞油酸含量為52.1g/kg以上；
(b6)二十碳五烯酸含量為22.1g/kg以上；
(b7)二十二碳六烯酸含量為9.3g/kg以上；
(b8)二十四碳一烯酸含量為3.1g/kg以上；
(b9)二十碳一烯酸含量為1.5g/kg以上；
(b10)蟲(chóng)草素含量含量為2.1g/kg以上。
本發(fā)明還保護(hù)一種制備產(chǎn)品的方法，包括如下步驟：培養(yǎng)蛹蟲(chóng)草FX1521。
本發(fā)明還保護(hù)一種制備產(chǎn)品的方法，包括如下步驟：采用液體發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)蛹蟲(chóng)草FX1521。
本發(fā)明還保護(hù)一種制備產(chǎn)品的方法，依次包括如下步驟(a)和步驟(b)：
步驟(a)：采用種子強(qiáng)化培養(yǎng)基培養(yǎng)蛹蟲(chóng)草FX1521；
步驟(b)：將步驟(a)的產(chǎn)物接種至液體發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
本發(fā)明還保護(hù)以上任一所述方法制備得到的產(chǎn)品。
以上任一所述產(chǎn)品滿足如下參數(shù)(b1)-(b10)中的一種或多種：
(b1)油脂含量為301g/kg以上；
(b2)不飽和脂肪酸含量為225.8g/kg以上；
(b3)油酸含量為77.8g/kg以上；
(b4)γ-亞麻酸含量為59.9g/kg以上；
(b5)亞油酸含量為52.1g/kg以上；
(b6)二十碳五烯酸含量為22.1g/kg以上；
(b7)二十二碳六烯酸含量為9.3g/kg以上；
(b8)二十四碳一烯酸含量為3.1g/kg以上；
(b9)二十碳一烯酸含量為1.5g/kg以上；
(b10)蟲(chóng)草素含量含量為2.1g/kg以上。
本發(fā)明還保護(hù)一種培養(yǎng)蛹蟲(chóng)草FX1521的方法，包括如下步驟：采用液體發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)所述蛹蟲(chóng)草FX1521。
所述培養(yǎng)蛹蟲(chóng)草FX1521的方法具體包括如下步驟(a)和步驟(b)：
步驟(a)：采用種子強(qiáng)化培養(yǎng)基培養(yǎng)蛹蟲(chóng)草FX1521；
步驟(b)：將步驟(a)的產(chǎn)物接種至液體發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
本發(fā)明還保護(hù)一種生產(chǎn)油脂和/或不飽和脂肪酸和/或蟲(chóng)草素的方法，包括如下步驟：培養(yǎng)蛹蟲(chóng)草FX1521。
所述培養(yǎng)蛹蟲(chóng)草FX1521是采用液體發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)蛹蟲(chóng)草FX1521。
所述生產(chǎn)油脂和/或不飽和脂肪酸和/或蟲(chóng)草素的方法具體包括如下步驟(a)和步驟(b)：
步驟(a)：采用種子強(qiáng)化培養(yǎng)基培養(yǎng)蛹蟲(chóng)草FX1521；
步驟(b)：將步驟(a)的產(chǎn)物接種至液體發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
本發(fā)明還保護(hù)一種用于培養(yǎng)蛹蟲(chóng)草FX1521的試劑盒。
本發(fā)明還保護(hù)一種用于生產(chǎn)油脂的試劑盒。
本發(fā)明還保護(hù)一種用于生產(chǎn)不飽和脂肪酸的試劑盒。
本發(fā)明還保護(hù)一種用于制備蟲(chóng)草素的試劑盒。
以上任一所述試劑盒包括液體發(fā)酵培養(yǎng)基。
所述試劑盒還包括種子強(qiáng)化培養(yǎng)基。
以上任一所述“采用液體發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)蛹蟲(chóng)草FX1521”或所述步驟(b)中，所述“培養(yǎng)”的條件為：通氣量15-20L/min，攪拌150-200rpm，罐壓0.8Mpa，溫度24-28℃，溶解氧(DO)25-45％。
所述“采用液體發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)蛹蟲(chóng)草FX1521”或所述步驟(b)中，所述“培養(yǎng)”的方法具體可為：第0-24小時(shí)為黑暗培養(yǎng)，第25-96小時(shí)為光照培養(yǎng)(光照強(qiáng)度：300lux)；實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)體系中的還原糖濃度，第0-92小時(shí)，通過(guò)加入70％的葡萄糖水溶液控制培養(yǎng)體系中的還原糖濃度在0.5-1.5g/100mL(每當(dāng)培養(yǎng)體系中的還原糖濃度低于0.5g/100mL時(shí)，加入70％的葡萄糖水溶液使得培養(yǎng)體系中的還原糖濃度達(dá)到1.5g/100mL)；第93小時(shí)至發(fā)酵結(jié)束，不再加入70％的葡萄糖水溶液。發(fā)酵結(jié)束時(shí)，培養(yǎng)體系中的還原糖濃度為0.1g/100ml。培養(yǎng)全程參數(shù)為：通氣量20L/min，攪拌200rpm，罐壓0.8Mpa，溫度25℃，溶解氧(DO)35％。
所述“采用液體發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)蛹蟲(chóng)草FX1521”或所述步驟(b)中，所述“培養(yǎng)”的方法具體可為：第0-24小時(shí)為黑暗培養(yǎng)，第25-120小時(shí)為光照培養(yǎng)(光照強(qiáng)度：200lux)；實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)體系中的還原糖濃度，第0-115小時(shí)，通過(guò)加入70％的葡萄糖水溶液控制培養(yǎng)體系中的還原糖濃度在0.8-1.5g/100mL(每當(dāng)培養(yǎng)體系中的還原糖濃度低于0.8g/100mL時(shí)，加入70％的葡萄糖水溶液使得培養(yǎng)體系中的還原糖濃度達(dá)到1.5g/100mL)；第116小時(shí)至發(fā)酵結(jié)束，不再加入70％的葡萄糖水溶液。發(fā)酵結(jié)束時(shí)，培養(yǎng)體系中的還原糖濃度為0.01g/100ml。培養(yǎng)全程參數(shù)為：通氣量15L/min，攪拌150rpm，罐壓0.8Mpa，溫度24℃，溶解氧(DO)25％。
所述“采用液體發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)蛹蟲(chóng)草FX1521”或所述步驟(b)中，所述“培養(yǎng)”的方法具體可為：第0-24小時(shí)為黑暗培養(yǎng)，第25-96小時(shí)為光照培養(yǎng)(光照強(qiáng)度：500lux)；實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)體系中的還原糖濃度，第0-92小時(shí)，通過(guò)加入70％的葡萄糖水溶液控制培養(yǎng)體系中的還原糖濃度在0.8-1.5g/100mL(每當(dāng)培養(yǎng)體系中的還原糖濃度低于0.8g/100mL時(shí)，加入70％的葡萄糖水溶液使得培養(yǎng)體系中的還原糖濃度達(dá)到1.5g/100mL)；第93小時(shí)至發(fā)酵結(jié)束，不再加入70％的葡萄糖水溶液。發(fā)酵結(jié)束時(shí)，培養(yǎng)體系中的還原糖濃度為0.045g/100ml。培養(yǎng)全程參數(shù)為：通氣量17.5L/min，攪拌175rpm，罐壓0.8Mpa，溫度28℃，溶解氧(DO)45％。
以上任一所述步驟(a)具體可為：將蛹蟲(chóng)草FX1521接種至種子強(qiáng)化培養(yǎng)基(蛹蟲(chóng)草FX1521在培養(yǎng)體系中的初始濃度為104個(gè)/ml)，26℃培養(yǎng)4天，得到強(qiáng)化種子培養(yǎng)物(蛹蟲(chóng)草FX1521在培養(yǎng)體系中的孢子濃度為1012個(gè)/克培養(yǎng)物)。
以上任一所述步驟(b)具體可為：將100g步驟(a)的產(chǎn)物接種至35L液體發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
以上任一所述方法還包括如下步驟(c)：完成(b)后，取整個(gè)培養(yǎng)體系，離心收集菌絲體。
步驟(c)具體可為：完成(b)后取整個(gè)培養(yǎng)體系，采用平板式離心機(jī)收集菌絲體(3000rpm離心30min)。
以上任一所述方法還包括如下步驟：完成步驟(c)后，將產(chǎn)物風(fēng)干。
所述風(fēng)干具體可為60℃烘干至水分為7％(質(zhì)量百分含量)。
以上任一所述種子強(qiáng)化培養(yǎng)基的原料配比為：1L營(yíng)養(yǎng)液：0.5-1.5kg小米；所述營(yíng)養(yǎng)液由溶質(zhì)和溶劑組成；所述溶質(zhì)及其在所述營(yíng)養(yǎng)液中的濃度如下：馬鈴薯浸出粉1-3g/100ml、葡萄糖0.5-1.5g/100ml、蛋白胨0.5-0.7g/100ml、磷酸二氫鉀0.05-0.15g/100ml、硫酸鎂0.04-0.06g/100ml、檸檬酸鈉0.05-0.15g/100ml、維生素B1 1-3mg/100ml、維生素B2 0.5-1.5mg/100ml、維生素B60.5-1.5mg/100ml、甘氨酸0.2-0.4mg/100ml、蘇氨酸0.20-0.30mg/100ml、纈氨酸0.10-0.20mg/100ml、亮氨酸0.04-0.06mg/100ml、異亮氨酸0.05-0.15mg/100ml、苯丙氨酸0.20-0.30mg/100ml、絲氨酸0.05-0.15mg/100ml、脯氨酸0.04-0.06mg/100ml、羥脯氨酸0.02-0.04mg/100ml、半胱氨酸0.01-0.03mg/100ml、色氨酸0.02-0.03mg/100ml、甲硫氨酸0.04-0.06mg/100ml、賴氨酸0.05-0.15mg/100ml、谷氨酸0.04-0.06mg/100ml、硫酸亞鐵16.0-17.0μg/100ml、氯化鈣16.0-17.0μg/100ml、硫酸銅0.2-0.4μg/100ml、硫酸鋅3.0-4.0μg/100ml；所述溶劑為水。
所述溶質(zhì)及其在所述營(yíng)養(yǎng)液中的濃度具體可為：馬鈴薯浸出粉2g/100ml、葡萄糖1g/100ml、蛋白胨0.6g/100ml、磷酸二氫鉀0.1g/100ml、硫酸鎂0.05g/100ml、檸檬酸鈉0.1g/100ml、維生素B12mg/100ml、維生素B21mg/100ml、維生素B61mg/100ml、甘氨酸0.3mg/100ml、蘇氨酸0.25mg/100ml、纈氨酸0.15mg/100ml、亮氨酸0.05mg/100ml、異亮氨酸0.1mg/100ml、苯丙氨酸0.25mg/100ml、絲氨酸0.1mg/100ml、脯氨酸0.05mg/100ml、羥脯氨酸0.03mg/100ml、半胱氨酸0.02mg/100ml、色氨酸0.025mg/100ml、甲硫氨酸0.05mg/100ml、賴氨酸0.1mg/100ml、谷氨酸0.05mg/100ml、硫酸亞鐵16.5μg/100ml、氯化鈣16.5μg/100ml、硫酸銅0.3μg/100ml、硫酸鋅3.5μg/100ml。
所述種子強(qiáng)化培養(yǎng)基的原料配比具體可為：1L營(yíng)養(yǎng)液：1.0kg小米。
所述種子強(qiáng)化培養(yǎng)基的制備方法具體可為：將營(yíng)養(yǎng)液與小米混合均勻，隔水蒸(時(shí)間具體可為30min)。
以上任一所述液體發(fā)酵培養(yǎng)基由溶質(zhì)和溶劑組成；所述溶質(zhì)及其在所述液體發(fā)酵培養(yǎng)基中的濃度如下：葡萄糖7-9g/100ml、蛋白胨1.0-2.0g/100ml、酵母粉1.0-2.0g/100ml、玉米粉5.0-6.0g/100ml、小麥粉0.4-0.6g/100ml、硫酸胺0.4-0.6g/100ml、磷酸二氫鉀0.4-0.6g/100ml、硫酸鎂0.2-0.4g/100ml、維生素B11-3mg/100ml、維生素B20.5-1.5mg/100ml、維生素B60.5-1.5mg/100ml、甘氨酸0.2-0.4mg/100ml、蘇氨酸0.20-0.30mg/100ml、纈氨酸0.10-0.20mg/100ml、亮氨酸0.04-0.06mg/100ml、異亮氨酸0.05-0.15mg/100ml、苯丙氨酸0.20-0.30mg/100ml、絲氨酸0.05-0.15mg/100ml、脯氨酸0.04-0.06mg/100ml、羥脯氨酸0.02-0.04mg/100ml、半胱氨酸0.01-0.03mg/100ml、色氨酸0.02-0.03mg/100ml、甲硫氨酸0.04-0.06mg/100ml、賴氨酸0.05-0.15mg/100ml、谷氨酸0.04-0.06mg/100ml、硫酸亞鐵16.0-17.0μg/100ml、氯化鈣16.0-17.0μg/100ml、硫酸銅0.2-0.4μg/100ml、硫酸鋅3.0-4.0μg/100ml；所述溶劑為水。
所述溶質(zhì)及其在所述液體發(fā)酵培養(yǎng)基中的濃度具體可為：葡萄糖8g/100ml、蛋白胨1.5g/100ml、酵母粉1.5g/100ml、玉米粉5.5g/100ml、小麥粉0.5g/100ml、硫酸胺0.5g/100ml、磷酸二氫鉀0.5g/100ml、硫酸鎂0.3g/100ml、維生素B12mg/100ml、維生素B21mg/100ml、維生素B61mg/100ml、甘氨酸0.3mg/100ml、蘇氨酸0.25mg/100ml、纈氨酸0.15mg/100ml、亮氨酸0.05mg/100ml、異亮氨酸0.1mg/100ml、苯丙氨酸0.25mg/100ml、絲氨酸0.1mg/100ml、脯氨酸0.05mg/100ml、羥脯氨酸0.03mg/100ml、半胱氨酸0.02mg/100ml、色氨酸0.025mg/100ml、甲硫氨酸0.05mg/100ml、賴氨酸0.1mg/100ml、谷氨酸0.05mg/100ml、硫酸亞鐵16.5μg/100ml、氯化鈣16.5μg/100ml、硫酸銅0.3μg/100ml、硫酸鋅3.5μg/100ml。
所述溶質(zhì)及其在所述液體發(fā)酵培養(yǎng)基中的濃度具體可為：葡萄糖7g/100ml、蛋白胨1.0g/100ml、酵母粉1.0g/100ml、玉米粉5.0g/100ml、小麥粉0.4g/100ml、硫酸胺0.4g/100ml、磷酸二氫鉀0.4g/100ml、硫酸鎂0.2g/100ml、維生素B11mg/100ml、維生素B20.5mg/100ml、維生素B60.5mg/100ml、甘氨酸0.2mg/100ml、蘇氨酸0.2mg/100ml、纈氨酸0.1mg/100ml、亮氨酸0.04mg/100ml、異亮氨酸0.05mg/100ml、苯丙氨酸0.2mg/100ml、絲氨酸0.05mg/100ml、脯氨酸0.04mg/100ml、羥脯氨酸0.02mg/100ml、半胱氨酸0.01mg/100ml、色氨酸0.02mg/100ml、甲硫氨酸0.04mg/100ml、賴氨酸0.05mg/100ml、谷氨酸0.04mg/100ml、硫酸亞鐵16.0μg/100ml、氯化鈣16.0μg/100ml、硫酸銅0.2μg/100ml、硫酸鋅3.0μg/100ml。
所述溶質(zhì)及其在所述液體發(fā)酵培養(yǎng)基中的濃度具體可為：葡萄糖9g/100ml、蛋白胨2.0g/100ml、酵母粉2.0g/100ml、玉米粉6.0g/100ml、小麥粉0.6g/100ml、硫酸胺0.6g/100ml、磷酸二氫鉀0.6g/100ml、硫酸鎂0.4g/100ml、維生素B13mg/100ml、維生素B21.5mg/100ml、維生素B61.5mg/100ml、甘氨酸0.4mg/100ml、蘇氨酸0.3mg/100ml、纈氨酸0.20mg/100ml、亮氨酸0.06mg/100ml、異亮氨酸0.15mg/100ml、苯丙氨酸0.3mg/100ml、絲氨酸0.15mg/100ml、脯氨酸0.06mg/100ml、羥脯氨酸0.04mg/100ml、半胱氨酸0.03mg/100ml、色氨酸0.03mg/100ml、甲硫氨酸0.06mg/100ml、賴氨酸0.15mg/100ml、谷氨酸0.06mg/100ml、硫酸亞鐵17.0μg/100ml、氯化鈣17.0μg/100ml、硫酸銅0.4μg/100ml、硫酸鋅4.0μg/100ml。
以上任一所述液體發(fā)酵培養(yǎng)基的pH＝6.5-7.0。
本發(fā)明提供了蛹蟲(chóng)草FX1521以及培養(yǎng)蛹蟲(chóng)草FX1521的方法以及通過(guò)培養(yǎng)蛹蟲(chóng)草FX1521合成油脂和制備蟲(chóng)草素的方法。蛹蟲(chóng)草FX1521能高效積累蟲(chóng)草素，同時(shí)能夠有效合成油脂，特別是積累不飽和脂肪酸。蛹蟲(chóng)草菌株在液體發(fā)酵過(guò)程往往容易出現(xiàn)過(guò)早“老化”現(xiàn)象，導(dǎo)致蛹蟲(chóng)草菌株生長(zhǎng)的同步性降低，菌絲體生物量及代謝能力減弱，最終影響蛹蟲(chóng)草菌株在發(fā)酵過(guò)程中合成與積累目標(biāo)代謝產(chǎn)物(油脂、不飽和脂肪酸以及蟲(chóng)草素)的表現(xiàn)。本發(fā)明提供的培養(yǎng)方法大大提高蛹蟲(chóng)草菌株孢子數(shù)及細(xì)胞活力，減少發(fā)酵級(jí)數(shù)，縮短發(fā)酵周期，節(jié)約成本，能夠非常有效的促進(jìn)菌絲體的生長(zhǎng)及提高菌絲體中油脂含量，特別是合成與積累不飽和脂肪酸。本發(fā)明具有重大的應(yīng)用價(jià)值和產(chǎn)業(yè)前景。
具體實(shí)施方式
以下的實(shí)施例便于更好地理解本發(fā)明，但并不限定本發(fā)明。下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)方法，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的試驗(yàn)材料，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為自常規(guī)生化試劑商店購(gòu)買(mǎi)得到的。以下實(shí)施例中的定量試驗(yàn)，均設(shè)置三次重復(fù)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果取平均值。
蛹蟲(chóng)草菌株50383：中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心(www.accc.org.cn，簡(jiǎn)稱ACCC)，ACCC編號(hào)：50383。
蛹蟲(chóng)草菌FY1421(Cordyceps militaris FY1421)于2016年4月21日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(簡(jiǎn)稱CCTCC；地址：中國(guó)武漢，武漢大學(xué)；郵編：430072)，保藏編號(hào)為CCTCC NO：M2016220。
溶壁酶：廣東微生物菌種保藏中心。
蝸牛酶：生工生物工程(上海)股份有限公司，貨號(hào)：A600870。
纖維素酶：生工生物工程(上海)股份有限公司，貨號(hào)：A002598。
PDA固體培養(yǎng)基：馬鈴薯浸出粉20g，葡萄糖20g，瓊脂15-20g，蒸餾水定容至1000mL，自然pH；121℃高壓蒸汽滅菌20-30min。
PDA液體培養(yǎng)基：馬鈴薯浸出粉20g，葡萄糖20g，蛋白胨15g，磷酸二氫鉀0.8g，硫酸鎂0.3g，維生素B120mg，蒸餾水定容至1000ml，調(diào)pH至6.5-7.0；121℃高壓蒸汽滅菌20-30min。
再生固體培養(yǎng)基：在PDA固體培養(yǎng)基中添加20％(W/V)甘露醇作為滲透壓穩(wěn)定劑。
再生液體培養(yǎng)基：在PDA液體培養(yǎng)基中添加20％(W/V)甘露醇作為滲透壓穩(wěn)定劑。
氨基酸營(yíng)養(yǎng)母液的制備方法為：取甘氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸，絲氨酸、脯氨酸、羥脯氨酸、半胱氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、賴氨酸和谷氨酸，加蒸餾水定容至1000ml；4℃存儲(chǔ)，備用。
微量元素母液的制備方法為：取硫酸亞鐵、氯化鈣、硫酸銅和硫酸鋅，加蒸餾水定容至1000ml，4℃存儲(chǔ)，備用。
種子強(qiáng)化培養(yǎng)基：馬鈴薯浸出粉20g，葡萄糖10g，蛋白胨6.0g，磷酸二氫鉀1.0g，硫酸鎂0.5g，檸檬酸鈉1.0g，氨基酸營(yíng)養(yǎng)母液5ml，微量元素母液10ml，維生素B120mg，維生素B210mg，維生素B610mg，蒸餾水定容至1000ml，制成營(yíng)養(yǎng)液；1000ml營(yíng)養(yǎng)液與1000g小米混合均勻，隔水蒸30min，得到種子強(qiáng)化培養(yǎng)基；121℃高壓滅菌20-30min。各溶質(zhì)在營(yíng)養(yǎng)液中的濃度如下：馬鈴薯浸出粉2g/100ml、葡萄糖1g/100ml、蛋白胨0.6g/100ml、磷酸二氫鉀0.1g/100ml、硫酸鎂0.05g/100ml、檸檬酸鈉0.1g/100ml、維生素B12mg/100ml、維生素B21mg/100ml、維生素B61mg/100ml、甘氨酸0.3mg/100ml、蘇氨酸0.25mg/100ml、纈氨酸0.15mg/100ml、亮氨酸0.05mg/100ml、異亮氨酸0.1mg/100ml、苯丙氨酸0.25mg/100ml、絲氨酸0.1mg/100ml、脯氨酸0.05mg/100ml、羥脯氨酸0.03mg/100ml、半胱氨酸0.02mg/100ml、色氨酸0.025mg/100ml、甲硫氨酸0.05mg/100ml、賴氨酸0.1mg/100ml、谷氨酸0.05mg/100ml、硫酸亞鐵16.5μg/100ml、氯化鈣16.5μg/100ml、硫酸銅0.3μg/100ml、硫酸鋅3.5μg/100ml。
液體發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法(pH＝6.5-7.0)：取葡萄糖，蛋白胨，酵母粉，玉米粉，小麥粉，硫酸胺，磷酸二氫鉀，硫酸鎂，氨基酸營(yíng)養(yǎng)母液，微量元素母液，維生素B1，維生素B2，維生素B6，加蒸餾水定容至100ml，調(diào)pH為6.5-7.0；121℃高壓滅菌25min。按照上述方法分別制備得到液體發(fā)酵培養(yǎng)基甲、液體發(fā)酵培養(yǎng)基乙及液體發(fā)酵培養(yǎng)基丙。
液體發(fā)酵培養(yǎng)基甲中，各溶質(zhì)的濃度如下：葡萄糖8g/100ml、蛋白胨1.5g/100ml、酵母粉1.5g/100ml、玉米粉5.5g/100ml、小麥粉0.5g/100ml、硫酸胺0.5g/100ml、磷酸二氫鉀0.5g/100ml、硫酸鎂0.3g/100ml、維生素B12mg/100ml、維生素B21mg/100ml、維生素B61mg/100ml、甘氨酸0.3mg/100ml、蘇氨酸0.25mg/100ml、纈氨酸0.15mg/100ml、亮氨酸0.05mg/100ml、異亮氨酸0.1mg/100ml、苯丙氨酸0.25mg/100ml、絲氨酸0.1mg/100ml、脯氨酸0.05mg/100ml、羥脯氨酸0.03mg/100ml、半胱氨酸0.02mg/100ml、色氨酸0.025mg/100ml、甲硫氨酸0.05mg/100ml、賴氨酸0.1mg/100ml、谷氨酸0.05mg/100ml、硫酸亞鐵16.5μg/100ml、氯化鈣16.5μg/100ml、硫酸銅0.3μg/100ml、硫酸鋅3.5μg/100ml。
液體發(fā)酵培養(yǎng)基乙中，各溶質(zhì)的濃度如下：葡萄糖7g/100ml、蛋白胨1.0g/100ml、酵母粉1.0g/100ml、玉米粉5.0g/100ml、小麥粉0.4g/100ml、硫酸胺0.4g/100ml、磷酸二氫鉀0.4g/100ml、硫酸鎂0.2g/100ml、維生素B11mg/100ml、維生素B20.5mg/100ml、維生素B60.5mg/100ml、甘氨酸0.2mg/100ml、蘇氨酸0.2mg/100ml、纈氨酸0.1mg/100ml、亮氨酸0.04mg/100ml、異亮氨酸0.05mg/100ml、苯丙氨酸0.2mg/100ml、絲氨酸0.05mg/100ml、脯氨酸0.04mg/100ml、羥脯氨酸0.02mg/100ml、半胱氨酸0.01mg/100ml、色氨酸0.02mg/100ml、甲硫氨酸0.04mg/100ml、賴氨酸0.05mg/100ml、谷氨酸0.04mg/100ml、硫酸亞鐵16.0μg/100ml、氯化鈣16.0μg/100ml、硫酸銅0.2μg/100ml、硫酸鋅3.0μg/100ml。
液體發(fā)酵培養(yǎng)基丙中，各溶質(zhì)的濃度如下：葡萄糖9g/100ml、蛋白胨2.0g/100ml、酵母粉2.0g/100ml、玉米粉6.0g/100ml、小麥粉0.6g/100ml、硫酸胺0.6g/100ml、磷酸二氫鉀0.6g/100ml、硫酸鎂0.4g/100ml、維生素B13mg/100ml、維生素B21.5mg/100ml、維生素B61.5mg/100ml、甘氨酸0.4mg/100ml、蘇氨酸0.3mg/100ml、纈氨酸0.20mg/100ml、亮氨酸0.06mg/100ml、異亮氨酸0.15mg/100ml、苯丙氨酸0.3mg/100ml、絲氨酸0.15mg/100ml、脯氨酸0.06mg/100ml、羥脯氨酸0.04mg/100ml、半胱氨酸0.03mg/100ml、色氨酸0.03mg/100ml、甲硫氨酸0.06mg/100ml、賴氨酸0.15mg/100ml、谷氨酸0.06mg/100ml、硫酸亞鐵17.0μg/100ml、氯化鈣17.0μg/100ml、硫酸銅0.4μg/100ml、硫酸鋅4.0μg/100ml。
油脂提取及含量檢測(cè)方法：參照參考文獻(xiàn)“李植峰，張玲，沈曉京，等.四種真菌油脂提取方法的比較研究[J].微生物學(xué)通報(bào)，2001，28(6)：72-75”中的酸熱法(初篩)和索氏提取法(復(fù)篩和成品檢測(cè))。
檢測(cè)油脂中總不飽和脂肪酸的含量的方法：參照參考文獻(xiàn)“趙娟，楊志巖，閆仲麗，等.油脂中總不飽和脂肪酸的紫外光譜測(cè)定[J].天津科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，2(3)：815-818.”中的紫外光譜法。
檢測(cè)不飽和脂肪酸種類的方法：參考文獻(xiàn)：可成友，吳曉芳.不飽和脂肪酸的氣相色譜法同時(shí)測(cè)定[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2005，5(15)：528-535.。
檢測(cè)蟲(chóng)草素含量的方法：NY/T 2116-2012蟲(chóng)草制品中蟲(chóng)草素和腺苷的測(cè)定高效液相色譜法。
實(shí)施例1、蛹蟲(chóng)草菌FY1421的選育
以蛹蟲(chóng)草菌株50383為出發(fā)菌株，經(jīng)過(guò)常壓室溫等離子體(ARTP)誘變處理，篩選出一株蛹蟲(chóng)草菌株，命名為蛹蟲(chóng)草菌FY1421(Cordyceps militaris FY1421)。蛹蟲(chóng)草菌FY1421(Cordyceps militaris FY1421)于2016年4月21日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(簡(jiǎn)稱CCTCC；地址：中國(guó)武漢，武漢大學(xué)；郵編：430072)，保藏編號(hào)為CCTCCNO：M2016220。蛹蟲(chóng)草菌FY1421(Cordyceps militaris FY1421)CCTCC NO：M2016220簡(jiǎn)稱為蛹蟲(chóng)草菌FY1421。
實(shí)施例2、蛹蟲(chóng)草菌FX1521的選育
一、蛹蟲(chóng)草菌FY1421菌絲體的收集
1、將蛹蟲(chóng)草菌FY1421接種至PDA固體斜面培養(yǎng)基，24-28℃培養(yǎng)5-7天。
2、用無(wú)菌的生理鹽水將步驟1培養(yǎng)好的PDA固體斜面培養(yǎng)基上的孢子洗脫，并通過(guò)無(wú)菌濾紙過(guò)濾得到孢子懸液，孢子懸液中含孢子濃度為1.8×107個(gè)/mL。
3、將步驟2制備的孢子懸液按5-20％接種量轉(zhuǎn)接于PDA液體培養(yǎng)基培養(yǎng)(24-28℃，100-150rpm，24-36h)，獲得液體培養(yǎng)物。
4、將步驟3獲得的液體培養(yǎng)物8000rpm離心10min收集菌絲體，用無(wú)菌生理鹽水洗滌二次，用無(wú)菌濾紙吸干水分，得到菌絲體。
二、蛹蟲(chóng)草菌FY1421原生質(zhì)體懸液的制備
1、取步驟一得到的菌絲體，采用由溶壁酶、蝸牛酶和纖維素酶混合得到的酶解液對(duì)菌絲體進(jìn)行酶解反應(yīng)，得到反應(yīng)后的酶解液。酶解反應(yīng)中：溶壁酶的使用濃度為0.5％-2.5％，最佳濃度為0.5％-1.0％；蝸牛酶的使用濃度0.5％-2.5％，最佳濃度為0.5％-1.0％；纖維素酶的使用濃度為0.2％-1.5％，最佳濃度為0.5-1.0％％；酶解溫度范圍為24-35℃，最佳酶解溫度為26-30℃；酶解時(shí)間為2-8h，最佳酶解時(shí)間為3-5h；調(diào)節(jié)酶解pH為5.0-7.0，最佳酶解pH為6.2-6.8。
2、采用45g/L的氯化鉀水溶液重懸步驟2得到的原生質(zhì)體細(xì)胞沉淀，得到原生質(zhì)體懸液。
三、蛹蟲(chóng)草菌株原生質(zhì)體的常壓室溫等離子體(ARTP)誘變處理
取10μL的步驟二制備的原生質(zhì)體懸液，均勻涂布在金屬載片的上表面，干燥后用鑷子將載片轉(zhuǎn)移至載物臺(tái)。采用高純氦氣作為等離子體的工作氣體處理菌物載片，設(shè)置電源功率80W，照射距離4mm，等離子體的溫度26-30℃，氣流量10L/min，處理時(shí)間為20s。樣品處理完畢后，用無(wú)菌鑷子將載片放至裝有1mL再生液體培養(yǎng)基的EP管中，在振蕩器上再生培養(yǎng)45min，把附著在載片上的微生物洗脫到再生液體培養(yǎng)基中，形成新的菌懸液。
四、優(yōu)良高效合成油脂、積累不飽和脂肪酸的蛹蟲(chóng)草菌株的篩選
1、將步驟三得到的新的菌懸液稀釋1000倍，取100-300μL稀釋液涂布到再生固體培養(yǎng)基平板置于培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。
2、將步驟1的平板上的生長(zhǎng)快速的突變菌株接種到裝有1mL PDA液體培養(yǎng)基的96孔微孔板振蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為24-28℃，轉(zhuǎn)速為150-200rpm，培養(yǎng)2天，離心收集菌絲體，檢測(cè)菌絲體油脂含量。
統(tǒng)計(jì)得到2000株突變菌株，其中油脂含量提高的正突變菌株為61株，油脂含量降低的負(fù)突變菌株為1939株。與出發(fā)菌株相比，正突變菌株中的32株的油脂含量提高幅度為250％-500％，5株的油脂含量提高幅度為500％以上。
3、收集步驟2中油脂含量明顯提高的正突變菌株(5株)，繼續(xù)進(jìn)行搖瓶復(fù)篩，250ml搖瓶，裝液量50ml，培養(yǎng)條件為24-28℃，150-200rpm，培養(yǎng)2天，收集菌絲體，60℃烘干至水分為7％，檢測(cè)其生物量(菌絲體干重)、油脂含量及不飽和脂肪酸含量、蟲(chóng)草素含量。
5株正突變菌株中，4株的生物量在30g/L以下，油脂含量在20％(占菌絲體干重的比例)以下，不飽和脂肪酸占總油脂的含量不足50％，蟲(chóng)草素含量為“1.0g/kg菌絲體干重”以下，另外1株菌(即編號(hào)FX 1521的菌株)的生物量達(dá)到50g/L，油脂含量達(dá)到30.1％(占菌絲體干重的比例)，其中不飽和脂肪酸占總油脂的含量達(dá)75％，而且蟲(chóng)草素含量達(dá)到“2.1g/kg菌絲體干重”。將編號(hào)FX 1521的菌株命名為蛹蟲(chóng)草FX 1521，進(jìn)行斜面保存及甘油保種。
五、蛹蟲(chóng)草FX1521的保藏
蛹蟲(chóng)草FX1521(Cordyceps militaris FX1521)于2016年08月15日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(簡(jiǎn)稱CCTCC；地址：中國(guó)武漢，武漢大學(xué)；郵編：430072)，保藏編號(hào)為CCTCC NO：M 2016423。蛹蟲(chóng)草FX1521(Cordyceps militaris FX1521)CCTCC NO：M2016423簡(jiǎn)稱為蛹蟲(chóng)草FX1521。
六、蛹蟲(chóng)草FX1521的遺傳穩(wěn)定性
將蛹蟲(chóng)草FX1521進(jìn)行傳代培養(yǎng)以考察其遺傳穩(wěn)定性，每3天傳代一次，傳代15代，每隔一代進(jìn)行搖瓶發(fā)酵測(cè)定菌絲體的油脂含量、不飽和脂肪酸含量及蟲(chóng)草素含量，結(jié)果顯示蛹蟲(chóng)草FX1521傳代過(guò)程中發(fā)酵油脂含量、不飽和脂肪酸含量以及蟲(chóng)草素含量均無(wú)明顯變化，具有良好的遺傳穩(wěn)定性。
實(shí)施例2、蛹蟲(chóng)草FX1521的發(fā)酵應(yīng)用
一、蛹蟲(chóng)草FX1521的種子強(qiáng)化培養(yǎng)
1、將蛹蟲(chóng)草FX1521接種至PDA固體斜面培養(yǎng)基，24-28℃培養(yǎng)5-7天。
2、用無(wú)菌的生理鹽水將步驟1培養(yǎng)好的PDA固體斜面培養(yǎng)基上的分生孢子洗脫，轉(zhuǎn)接于PDA固體斜面培養(yǎng)基，于培養(yǎng)箱中24-28℃避光培養(yǎng)3-5天。
3、用10ml無(wú)菌的生理鹽水將步驟2培養(yǎng)好的PDA固體斜面培養(yǎng)基上的分生孢子洗脫，得到菌懸液。
4、將10ml步驟3得到的菌懸液接種至裝有100g種子強(qiáng)化培養(yǎng)基的茄子瓶中(蛹蟲(chóng)草FX1521在培養(yǎng)體系中的初始濃度為104個(gè)/ml)，于培養(yǎng)箱中26℃培養(yǎng)4天，得到強(qiáng)化種子培養(yǎng)物(孢子濃度為1012個(gè)/克培養(yǎng)物)。
二、蛹蟲(chóng)草FX1521液體深層發(fā)酵培養(yǎng)
取100g步驟一制備的強(qiáng)化種子培養(yǎng)物接種于含有35L液體發(fā)酵培養(yǎng)基的50L發(fā)酵罐中進(jìn)行培養(yǎng)。
試驗(yàn)組甲采用的液體發(fā)酵培養(yǎng)基為液體發(fā)酵培養(yǎng)基甲。
試驗(yàn)組乙采用的液體發(fā)酵培養(yǎng)基為液體發(fā)酵培養(yǎng)基乙。
試驗(yàn)組丙采用的液體發(fā)酵培養(yǎng)基為液體發(fā)酵培養(yǎng)基丙。
試驗(yàn)組甲的培養(yǎng)過(guò)程(發(fā)酵時(shí)間為96小時(shí))：第0-24小時(shí)為黑暗培養(yǎng)，第25-96小時(shí)為光照培養(yǎng)(光照強(qiáng)度：300lux)；實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)體系中的還原糖濃度，第0-92小時(shí)，通過(guò)加入70％的葡萄糖水溶液控制培養(yǎng)體系中的還原糖濃度在0.5-1.5g/100mL(每當(dāng)培養(yǎng)體系中的還原糖濃度低于0.5g/100mL時(shí)，加入70％的葡萄糖水溶液使得培養(yǎng)體系中的還原糖濃度達(dá)到1.5g/100mL)；第93小時(shí)至發(fā)酵結(jié)束，不再加入70％的葡萄糖水溶液。發(fā)酵結(jié)束時(shí)，培養(yǎng)體系中的還原糖濃度為0.1g/100ml。培養(yǎng)全程參數(shù)為：發(fā)酵罐通氣量20L/min，攪拌200rpm，罐壓0.8Mpa，溫度25℃，溶解氧(DO)35％。
試驗(yàn)組乙的培養(yǎng)過(guò)程(發(fā)酵時(shí)間為120小時(shí))：第0-24小時(shí)為黑暗培養(yǎng)，第25-120小時(shí)為光照培養(yǎng)(光照強(qiáng)度：200lux)；實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)體系中的還原糖濃度，第0-115小時(shí)，通過(guò)加入70％的葡萄糖水溶液控制培養(yǎng)體系中的還原糖濃度在0.8-1.5g/100mL(每當(dāng)培養(yǎng)體系中的還原糖濃度低于0.8g/100mL時(shí)，加入70％的葡萄糖水溶液使得培養(yǎng)體系中的還原糖濃度達(dá)到1.5g/100mL)；第116小時(shí)至發(fā)酵結(jié)束，不再加入70％的葡萄糖水溶液。發(fā)酵結(jié)束時(shí)，培養(yǎng)體系中的還原糖濃度為0.01g/100ml。培養(yǎng)全程參數(shù)為：發(fā)酵罐通氣量15L/min，攪拌150rpm，罐壓0.8Mpa，溫度24℃，溶解氧(DO)25％。
試驗(yàn)組丙的培養(yǎng)過(guò)程(發(fā)酵時(shí)間為96小時(shí))：第0-24小時(shí)為黑暗培養(yǎng)，第25-96小時(shí)為光照培養(yǎng)(光照強(qiáng)度：5001ux)；實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)體系中的還原糖濃度，第0-92小時(shí)，通過(guò)加入70％的葡萄糖水溶液控制培養(yǎng)體系中的還原糖濃度在0.8-1.5g/100mL(每當(dāng)培養(yǎng)體系中的還原糖濃度低于0.8g/100mL時(shí)，加入70％的葡萄糖水溶液使得培養(yǎng)體系中的還原糖濃度達(dá)到1.5g/100mL)；第93小時(shí)至發(fā)酵結(jié)束，不再加入70％的葡萄糖水溶液。發(fā)酵結(jié)束時(shí)，培養(yǎng)體系中的還原糖濃度為0.045g/100ml。培養(yǎng)全程參數(shù)為：發(fā)酵罐通氣量17.5L/min，攪拌175rpm，罐壓0.8Mpa，溫度28℃，溶解氧(DO)45％。
三、蛹蟲(chóng)草FX1521發(fā)酵培養(yǎng)物菌絲體的分離
完成步驟二后，取整個(gè)培養(yǎng)體系，采用平板式離心機(jī)收集菌絲體(3000rpm離心30min，收集菌絲體)，60℃烘干至水分為7％，烘干后得到產(chǎn)脂蛹蟲(chóng)草產(chǎn)品。
試驗(yàn)組甲的菌絲體干重得率約為5.0％(即5g干重/100ml發(fā)酵液)。試驗(yàn)組甲得到的產(chǎn)脂蛹蟲(chóng)草產(chǎn)品命名為產(chǎn)脂蛹蟲(chóng)草產(chǎn)品I-甲。
試驗(yàn)組乙的菌絲體干重得率約為3.0％(即3g干重/100ml發(fā)酵液)。試驗(yàn)組乙得到的產(chǎn)脂蛹蟲(chóng)草產(chǎn)品命名為產(chǎn)脂蛹蟲(chóng)草產(chǎn)品I-乙。
試驗(yàn)組丙的菌絲體干重得率約為4.0％(即4g干重/100ml發(fā)酵液)。試驗(yàn)組乙得到的產(chǎn)脂蛹蟲(chóng)草產(chǎn)品命名為產(chǎn)脂蛹蟲(chóng)草產(chǎn)品I-丙。
試驗(yàn)組甲得到的菌絲體最多。
四、對(duì)照菌株菌絲體的制備
將蛹蟲(chóng)草菌FY1421代替蛹蟲(chóng)草FX1521采用試驗(yàn)組甲的條件按照步驟一、二、三進(jìn)行操作，得到產(chǎn)脂蛹蟲(chóng)草產(chǎn)品II。
五、油脂及蟲(chóng)草素含量的測(cè)定
將步驟三制備的產(chǎn)脂蛹蟲(chóng)草產(chǎn)品I-甲和步驟四制備的產(chǎn)脂蛹蟲(chóng)草產(chǎn)品II進(jìn)行油脂提取、不飽和脂肪酸含量及蟲(chóng)草素含量進(jìn)行測(cè)定。
檢測(cè)結(jié)果為：利用蛹蟲(chóng)草FX1521制備的產(chǎn)脂蛹蟲(chóng)草產(chǎn)品I-甲的油脂含量達(dá)到301g/kg菌絲體干重，總的不飽和脂肪酸含量為225.8g/kg菌絲體干重，占總油脂含量的75％，其中，油酸為77.8g/kg菌絲體干重，占總不飽和脂肪酸含量的34.5％，γ-亞麻酸為59.9g/kg菌絲體干重，占總不飽和脂肪酸含量的26.5％，亞油酸為52.1g/kg菌絲體干重，占總不飽和脂肪酸含量的23.1％，二十碳五烯酸(EPA)為22.1g/kg菌絲體干重，占總不飽和脂肪酸含量的9.8％，二十二碳六烯酸(DHA)為9.3g/kg菌絲體干重，占總不飽和脂肪酸含量的4.1％，二十四碳一烯酸為3.1g/kg菌絲體干重，占總不飽和脂肪酸含量的1.4％，二十碳一烯酸為1.5g/kg菌絲體干重，占總不飽和脂肪酸含量的0.67％，蟲(chóng)草素含量為2.1g/kg菌絲體干重。
利用蛹蟲(chóng)草菌FY1421制備的產(chǎn)脂蛹蟲(chóng)草產(chǎn)品II的油脂含量達(dá)到36.5g/kg菌絲體干重，總的不飽和脂肪酸含量為12.8g/kg菌絲體干重，占總油脂含量的35.1％，其中油酸含量為9.9g/kg，占總不飽和脂肪酸含量的77.3％，γ-亞麻酸為2.9g/kg菌絲體干重，占總不飽和脂肪酸含量的22.7％，蟲(chóng)草素含量達(dá)到42.3g/kg菌絲體干重。
結(jié)果表明：蛹蟲(chóng)草FX1521在種子強(qiáng)化培養(yǎng)的基礎(chǔ)上，其發(fā)酵周期顯著縮短，在合成與積累一定量蟲(chóng)草素的基礎(chǔ)上，具備優(yōu)異的油脂合成與不飽和脂肪酸的積累能力，而且不飽和脂肪酸的種類較對(duì)照菌株明顯豐富多樣。