本發(fā)明屬于農(nóng)產(chǎn)品活性物質(zhì)原花青素提取
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種提取火龍果皮中原花青素的方法。
背景技術(shù)：
：原花青素(簡稱PC)是自然界中廣泛存在于植物中的一種多酚物質(zhì)混合物，紅棕色粉末，氣微、味澀，溶于水和大多有機(jī)溶劑，具有非常強(qiáng)的體內(nèi)生物活性，是目前世界公認(rèn)的高效抗氧化劑，能夠保護(hù)人體免受自由基的損傷。原花青素在日常生活中應(yīng)用十分廣泛，如在護(hù)膚方面，原花青素添加進(jìn)護(hù)膚品中能有效改善肌膚彈性，起抗衰老、美白和抗紫外線等作用，在化妝品市場上則可用做口紅；醫(yī)療保健方面，原花青素制成保健品能增強(qiáng)機(jī)體免疫力，具有降血脂、抑制結(jié)腸癌細(xì)胞，預(yù)防心腦血管疾病和動脈粥樣硬化；因此原花青素在護(hù)膚、化妝品行業(yè)、醫(yī)藥保健、功能性食品等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。原花青素在葡萄、高粱、蘋果、可可豆等豆類及野生水果如玫瑰果、櫻桃、草莓等植物中廣泛分布，隨著植物研究范圍的擴(kuò)大，越來越多的研究顯示火龍果皮中也存在原花青素。人們通常品嘗完鮮美的果肉后將其果皮丟棄，殊不知在火龍果皮內(nèi)富含原花青素，具有較高的經(jīng)濟(jì)效益和社會價(jià)值。目前，有關(guān)提取原花青素的方法主要有以下幾種：傳統(tǒng)有機(jī)溶劑萃取法、水溶液提取法、超臨界流體萃取法、微波輔助提取法等，但有機(jī)溶劑提取法受試劑選擇、原料大小、料液比等多種因素的影響，且有機(jī)溶劑毒副作用大且產(chǎn)物提取率低，提取時(shí)間長，易破壞熱穩(wěn)定性較弱的成分，雜質(zhì)含量高，污染環(huán)境；水溶液提取法選擇水作為提取劑，浸提耗時(shí)長，溫度高，易造成原花青素的損失，同時(shí)水的極性較大，溶出雜質(zhì)較多，提取純度較低；超臨界流體萃取法成本高，對操作條件的要求比較高。綜上，原花青素傳統(tǒng)提取方法普遍存在提取效率低與花青素不穩(wěn)定等問題，因此，探索新的提取技術(shù)以提高花青素的提取效率和穩(wěn)定性是今后原花青素提取研究的發(fā)展方向。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足之處，提供一種從火龍果皮中提取原花青素的方法。利用此方法所提取的原花青素可廣泛應(yīng)用于護(hù)膚品行業(yè)、醫(yī)藥保健和功能性食品等領(lǐng)域。本發(fā)明是一種利用溶劑輔助高壓脈沖電場方法提取火龍果皮中的原花青素，原料為火龍果皮。該方法首先是將火龍果皮進(jìn)行干燥、粉碎、過篩，獲到火龍果皮粉末，再將火龍果皮粉末經(jīng)粗提、高壓脈沖電場處理、提取、純化、干燥等步驟提取火龍果皮中的原花青素。該發(fā)明改進(jìn)了目前從火龍果皮中提取原花青素的效率，具有重要的經(jīng)濟(jì)和社會效益。本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：一種提取火龍果皮中原花青素的方法，所述方法包括下列步驟：1)將火龍果皮晾干，液氮粉碎后過60～80目篩，裝入容器，密封保存于4℃冰箱備用；2)稱取火龍果皮，以1∶10～15的料液重量比加入乙醇水溶液，再按200U/mL加入纖維素酶，在PH值為4～8進(jìn)行粗提取1.0～2.0h，過濾、減壓、濃縮后得到濃縮液，加入乙醚去除脂類化合物，再用丙酮與乙酸乙酯混合溶液進(jìn)行萃取，加入水后減壓、去除有機(jī)溶劑即得到粗提液；3)將粗提液按重量比1∶15～20加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)25％冰醋酸水溶液，將粗提液與冰醋酸水溶液放置于高壓脈沖電場中提取1～2小時(shí)，得提取液；4)純化：將提取液減壓過濾，回收溶劑后，經(jīng)過大孔吸附樹脂分離，并采用10倍重的蒸餾水和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50％乙醇水溶液進(jìn)行洗脫；5)干燥：把洗脫液置于50～60℃真空中進(jìn)行濃縮，最后冷凍干燥成粉末，得到產(chǎn)物。優(yōu)選的是，步驟2)中粗提取溫度為40～50℃，乙醇水溶液質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30～60％。優(yōu)選的是，步驟2)中所述的丙酮與乙酸乙酯重量比為1∶4。優(yōu)選的是，步驟2)中所述的乙醚、丙酮、乙酸乙酯濃度質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于99.5％，乙醚與濃縮液的重量比為1∶1，丙酮與乙酸乙酯混合溶液與濃縮液的重量比為2∶1。優(yōu)選的是，步驟3)中所述的高壓脈沖電場電場強(qiáng)度為20～30kV/cm，脈沖數(shù)為6～8。優(yōu)選的是，步驟3)中高壓脈沖電場設(shè)備中提取2小時(shí)。優(yōu)選的是，步驟4)中所述的大孔吸附樹脂為AB-8。本發(fā)明至少包括以下有益效果：(1)溶劑輔助高壓脈沖電場結(jié)合酶解提取分離主要是根據(jù)物質(zhì)中的有效成分的存在狀態(tài)、極性、溶解度等設(shè)計(jì)的一項(xiàng)新型提取原花青素工藝，具有成本低、投資少、提取時(shí)間短、提取效率高等特點(diǎn)，在提取過程中高壓脈沖電場的處理不會造成原料溫度的升高，可以有效地保護(hù)原花青素提取物的生理活性，保證了產(chǎn)品的穩(wěn)定性，具有很大的推廣應(yīng)用價(jià)值。(2)本發(fā)明提供的從火龍果皮中提取原花青素的方法，比一般的原花青素提取工藝得率高，是常規(guī)有機(jī)溶劑法的約2.5倍，微波輔助法的約1.6倍，超聲波輔助法的約1.4倍，提取溫度低，能很好保持原花青素的活性，避免了超聲波輔助方法的噪聲大、處理量小的缺陷，能夠連續(xù)處理樣品，適于工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。(3)采用本發(fā)明所公開的方法，填補(bǔ)了目前利用溶劑輔助高壓脈沖電場結(jié)合酶解從火龍果皮中提取原花青素的技術(shù)空白。本發(fā)明的其它優(yōu)點(diǎn)、目標(biāo)和特征將部分通過下面的說明體現(xiàn)，部分還將通過對本發(fā)明的研究和實(shí)踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。具體實(shí)施方式結(jié)合下列實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說明書文字能夠據(jù)以實(shí)施。實(shí)施例1提取火龍果皮中原花青素的方法包括下列步驟：1)將火龍果皮晾干，液氮粉碎后過60目篩，裝入容器，密封保存于4℃冰箱備用；2)稱取火龍果皮，以1∶10的料液重量比加入乙醇水溶液，再按200U/mL加入纖維素酶，在PH值為4進(jìn)行粗提取1.0h，過濾、減壓、濃縮后得到濃縮液，加入乙醚去除脂類化合物，再用丙酮與乙酸乙酯混合溶液進(jìn)行萃取，加入水后減壓、去除有機(jī)溶劑即得到粗提液；3)將粗提液按重量比1∶15加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)25％冰醋酸水溶液，將粗提液與冰醋酸水溶液放置于高壓脈沖電場中提取1小時(shí)，得提取液；4)純化：將提取液減壓過濾，回收溶劑后，經(jīng)過大孔吸附樹脂分離，并采用10倍重的蒸餾水和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50％乙醇水溶液進(jìn)行洗脫；5)干燥：把洗脫液置于50℃真空中進(jìn)行濃縮，最后冷凍干燥成粉末，得到產(chǎn)物。實(shí)施例2提取火龍果皮中原花青素的方法包括下列步驟：1)將火龍果皮晾干，液氮粉碎后過80目篩，裝入容器，密封保存于4℃冰箱備用；2)稱取火龍果皮，以1∶15的料液重量比加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30％乙醇水溶液，再按200U/mL加入纖維素酶，在PH值為8，溫度為40℃，進(jìn)行粗提取2.0h，過濾、減壓、濃縮后得到濃縮液，加入乙醚去除脂類化合物，再用丙酮與乙酸乙酯混合溶液進(jìn)行萃取，加入水后減壓、去除有機(jī)溶劑即得到粗提液，所述的乙醚、丙酮、乙酸乙酯濃度質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于99.5％，乙醚與濃縮液的重量比為1∶1，丙酮與乙酸乙酯混合溶液與濃縮液的重量比為2∶1，所述的丙酮與乙酸乙酯重量比為1∶4；3)將粗提液按重量比1∶20加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)25％冰醋酸水溶液，將粗提液與冰醋酸水溶液放置于電場強(qiáng)度為20kV/cm高壓脈沖電場中提取2小時(shí)，脈沖數(shù)為6，得提取液；4)純化：將提取液減壓過濾，回收溶劑后，經(jīng)過AB-8大孔吸附樹脂分離，并采用10倍重的蒸餾水和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50％乙醇水溶液進(jìn)行洗脫；5)干燥：把洗脫液置于60℃真空中進(jìn)行濃縮，最后冷凍干燥成粉末，得到產(chǎn)物。實(shí)施例3提取火龍果皮中原花青素的方法包括下列步驟：1)將火龍果皮晾干，液氮粉碎后過70目篩，裝入容器，密封保存于4℃冰箱備用；2)稱取火龍果皮，以1∶12的料液重量比加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60％乙醇水溶液，再按200U/mL加入纖維素酶，在PH值為6，溫度為50℃，進(jìn)行粗提取1.5h，過濾、減壓、濃縮后得到濃縮液，加入乙醚去除脂類化合物，再用丙酮與乙酸乙酯混合溶液進(jìn)行萃取，加入水后減壓、去除有機(jī)溶劑即得到粗提液，所述的乙醚、丙酮、乙酸乙酯濃度質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于99.5％，乙醚與濃縮液的重量比為1∶1，丙酮與乙酸乙酯混合溶液與濃縮液的重量比為2∶1，所述的丙酮與乙酸乙酯重量比為1∶4；3)將粗提液按重量比1∶18加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)25％冰醋酸水溶液，將粗提液與冰醋酸水溶液放置于電場強(qiáng)度為30kV/cm高壓脈沖電場中提取2小時(shí)，脈沖數(shù)為8，得提取液；4)純化：將提取液減壓過濾，回收溶劑后，經(jīng)過AB-8大孔吸附樹脂分離，并采用10倍重的蒸餾水和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50％乙醇水溶液進(jìn)行洗脫；5)干燥：把洗脫液置于55℃真空中進(jìn)行濃縮，最后冷凍干燥成粉末，得到產(chǎn)物。將600g火龍果皮平均分成6組分別采用實(shí)施例1-3方法與有機(jī)溶劑法、微波輔助法、超聲波輔助法對比試驗(yàn)提取原花青素，采用葡萄籽原青花素作為標(biāo)準(zhǔn)品，配置標(biāo)準(zhǔn)溶液，采用鐵鹽催化比色法在550nm處比色作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，測定提取產(chǎn)物中原花青素含量，并按下列公式計(jì)算出得率和純度，得率(％)＝(產(chǎn)物中原花青素質(zhì)量/火龍果皮質(zhì)量)×100％純度(％)＝(產(chǎn)物中原花青素質(zhì)量/產(chǎn)物質(zhì)量)×100％提取火龍果皮原花青素得率和純度如下表所示：實(shí)施例1實(shí)施例2實(shí)施例3有機(jī)溶劑法微波輔助法超聲波輔助法得率9.50％9.61％9.43％3.81％5.98％6.79％純度98.5％99.2％98.8％92.5％96.8％95.8％從測試結(jié)果得出結(jié)論：本發(fā)明提供的方法得出的產(chǎn)物中的原花青素純度高，并且比一般的原花青素提取工藝得率高，是常規(guī)有機(jī)溶劑法的約2.5倍，微波輔助法的約1.6倍，超聲波輔助法的約1.4倍。盡管本發(fā)明的實(shí)施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說明書和實(shí)施方式中所列運(yùn)用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域，對于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實(shí)現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細(xì)節(jié)和這里示出與描述的實(shí)施例。當(dāng)前第1頁1 2 3