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一種可定量的免疫層析裝置的制造方法

文檔序號:10264951閱讀:750來源:國知局
一種可定量的免疫層析裝置的制造方法
【技術領域】
[0001]本實用新型涉及生物檢測技術領域,更具體地,涉及一種可定量的免疫層析裝置。
【背景技術】
[0002]免疫層析法是近幾年來國外興起的一種快速診斷技術,其原理是將特異的抗體先固定于硝基纖維素膜的某一區(qū)帶,當該干燥的硝酸纖維素一端浸入樣品(尿液或血清)后,由于毛細管作用,樣品將沿著該膜向前移動,當移動至固定有抗體的區(qū)域時,樣品中相應的抗原即與該抗體發(fā)生特異性結合,若用免疫膠體金或免疫酶染色可使該區(qū)域顯示一定的顏色,來提供對樣品的定量檢測數(shù)據(jù),從而實現(xiàn)特異性的免疫診斷。與常規(guī)診斷方法相比,該技術分析速度快,全部檢測過程僅需5-30分鐘。操作簡便,不需要其它任何儀器,無需專業(yè)人員,為實時實地檢測提供了條件。檢測樣品種類多,可用于醫(yī)療、衛(wèi)生、食品安全、環(huán)境檢測中的血液、唾液、食物、水質(zhì)、土壤等制備的微量溶液。
[0003]免疫層析試紙條是結合免疫標記物與對應抗原(抗體)的反應特異性和層析技術而制成的。免疫層析測試條通常由加樣區(qū)、反應區(qū)和吸水區(qū)三部分組成。加樣區(qū)含有免疫標記物顆粒,通常由玻璃纖維將免疫膠體金顆粒吸附在該區(qū);反應區(qū)則噴涂兩條反應線,一條為檢測線,一條為質(zhì)控線。檢測線用以檢測此處(抗原)物質(zhì)與免疫標記物顆粒的包被抗原(抗體或抗體攜帶的抗原)的反應性;質(zhì)控線則用以檢測免疫標記物顆粒上的包被蛋白質(zhì)的活性及程度,免疫標記物由加樣區(qū)釋放后,經(jīng)反應區(qū),部分繼續(xù)到吸附區(qū),完成層析,從而達到快速檢測的目的。
[0004]目前采用的免疫層析裝置無法自動控制進入反應區(qū)的樣品量,無法自動實現(xiàn)準確定量。如果要加定量的樣品,一般要用定量加樣的工具。如果用定量加樣的工具加定量的樣品,需要更多的操作步驟而不方便。如果想直接用全血樣品檢測,由于每個全血樣品中血漿含量不一樣而會造成誤差。而如果先分離血漿再定量加樣,步驟多而不方便,且還需要用定量加樣的工具。
【實用新型內(nèi)容】
[0005]本實用新型為了克服上述缺陷,提供一種可定量的免疫層析裝置。
[0006]為了實現(xiàn)上述目的,本實用新型是通過以下方案予以實現(xiàn)的:
[0007]—種可定量的免疫層析裝置,包括殼體和置于殼體內(nèi)的血液分離膜片、可移動基片、免疫層析膜片,可移動基片包括樣品預定量膜片,殼體上設有加樣孔、稀釋孔、觀察窗,血液分離膜片緊貼在加樣孔對應的殼體內(nèi)壁上,可移動基片設在血液分離膜片下方,使經(jīng)過血液分離膜片的樣品正好流入可移動基片的樣品預定量膜片,可移動基片能移動到免疫層析膜片上;免疫層析膜片包括卡片和依次放置于卡片上的稀釋墊、連接墊、結合墊、硝基纖維素膜、吸水墊,稀釋墊與連接墊部分重疊,結合墊、硝基纖維素膜、吸水墊依次部分重疊,連接墊和結合墊的距離剛好使樣品預定量膜片分別與連接墊和結合墊部分重疊;稀釋墊對應殼體上的稀釋孔,硝基纖維素膜對應殼體上的觀察窗;樣品預定量膜片飽和后,將樣品預定量膜片移動到免疫層析膜片上,使預定量膜片分別與連接墊和結合墊部分重疊。
[0008]優(yōu)選地,所述血液分離膜片為多層多孔分離膜,也可以是攜帶有紅細胞凝集素的多層多孔分離膜。紅細胞凝集素可以截留血液中的紅細胞,從而得到血漿樣本??椎拇笮】稍O置到讓其它成分通過,但阻止血紅細胞通過。
[0009]可移動基片的樣品預定量膜片可以緊貼在血液分離膜片下面,使經(jīng)過血液分離膜的血漿更容易進入到樣品預定量膜片上;或者,可移動基片的樣品預定量膜片在血液分離膜片正下方的I?3mm處,這樣的距離也可以使經(jīng)過血液分離膜的血漿正好滴在樣品預定量膜片上。
[0010]將待測血液樣品加到加樣孔后,血液樣品通過加樣孔集中在加樣孔下方的血液分離膜片上,首先,血液樣品經(jīng)過血液分離膜片,血液分離膜本身或者血液分離膜片上的紅細胞凝集素能截留血液樣品中的血細胞,形成血漿。血漿浸入到樣品預定量膜片上,血漿截留在樣品預定量膜片上,當樣品預定量膜片上的血漿達到飽和狀態(tài)后,就可以將樣品預定量膜片移動到免疫層析膜片上,使樣品預定量膜片分別與連接墊和結合墊部分重疊,開始進行檢測。
[0011]優(yōu)選地,所述樣品預定量膜片為尺寸大小(長度、寬度、厚度)、孔隙度相同的多孔膜片。這樣的膜片能夠定量截留定量的血漿,這樣,只要加入足夠量的血樣品,樣品預定量膜片達到血漿飽和度之后,多余的血漿就不會繼續(xù)加到樣品預定量膜片上,這樣就可以實現(xiàn)定量檢測。
[0012]因為單位面積多孔膜片截留的血漿的量是可以計算或著測量出來的,所以,樣品預定量膜片截留血漿的量是可以根據(jù)實際檢測需要來準確切割多孔膜片的大小和厚度。
[0013]更優(yōu)選地,通常用的多孔膜片為定量血清或者血漿中的硝酸纖維素膜,纖維過濾膜,非織造纖維基片,玻璃纖維基片。
[0014]為了使用更方便,可以在稀釋孔上設有一稀釋袋,刺破稀釋袋后稀釋液剛好進入稀釋孔。這樣的免疫層析檢測裝置在使用時就不用另外攜帶稀釋液。
[0015]常用的稀釋液為PBS緩沖液或添加了表面活性劑如吐溫-20、牛血清蛋白、酪蛋白或疊氮化鈉的PBS緩沖液。
[0016]作為優(yōu)選的實施方式,所述可移動基片還包括底板,底板黏貼在樣品預定量膜片下方,所述免疫層析膜片位于可移動基片的斜下方,在可移動基片的底板的一側設有側壁,側壁的另一端穿過殼體而伸出,通過拉動伸出的側壁,可將樣品預定量膜片與血液分離膜片分離,并把樣品預定量膜片拉到免疫層析膜片正上方,使預定量膜片分別與連接墊和結合墊部分重疊。在明白了上述拉動操作過程后,在殼體內(nèi)部設置相應的隔板和滑道來實現(xiàn)拉動過程是很公知的技術結構,對于這些結構本實用新型就不再皇述。
[0017]結合墊是諸如玻璃纖維紙的多孔介質(zhì),裝有膠體金顆粒,熒光顆料等偶聯(lián)物,硝基纖維素膜含檢測區(qū)及對照區(qū)/校準區(qū)。檢測區(qū)域為一個或多個抗體結合分析物在膜上;對照區(qū)則為另一種特定結合區(qū)域。吸水墊作為儲備裝置將待測血清樣本通過毛細血管作用從結合墊轉(zhuǎn)到吸收墊。
[0018]本實用新型所述可定量的側向?qū)游鲅b置的工作原理為:可移動基片中的血液分離膜片不僅可以附著待測血液樣本,而且可以將待測血液樣本中的血細胞分離出來,產(chǎn)生血漿,血漿中的全部蛋白預留在樣品預定量膜片上,當樣品預定量膜片上的血漿達到飽和狀態(tài)時,就可以將樣品預定量膜片推向免疫層析膜片,使預定量膜片分別與連接墊和結合墊部分重疊。刺破稀釋袋,稀釋袋中的稀釋液流入到稀釋孔中,進而進入稀釋墊,稀釋液通過毛細管作用流到樣品預定量膜片上,稀釋液帶動膜片上的血漿進入結合墊,當樣品預定量膜片與結合墊接觸后,樣本中的待測抗體與預包被在膜上測試區(qū)(T)的的重組抗原-結合物反應。然后,混合物隨之在毛細血管作用向前層析,在質(zhì)控區(qū)(C)的相應抗體反應。如果血液中含有待測抗體,在測試區(qū)內(nèi)(T)會出現(xiàn)一條紅色條帶,表明是陽性結果。如果在測試區(qū)內(nèi)(T)沒有出現(xiàn)紅色條帶,則血液中不含有待測抗體,表明是陰性結果。無論抗體是否存在于血液中,混合物都會繼續(xù)向上層析至質(zhì)控區(qū)(C),質(zhì)控區(qū)的相應抗體與結合物反應出現(xiàn)一條紅色條帶。質(zhì)控區(qū)內(nèi)(C)所顯現(xiàn)的紅色條帶是判定層析過程是否正常的標準,同時也作為試劑的內(nèi)控標準。
[0019]與現(xiàn)有技術相比,本實用新型具有如下有益效果:
[0020]本實用新型設計的可移動基片可以自動去除待測血液樣本中的紅細胞,得到血漿樣本,血漿樣本通過毛細管作用自動轉(zhuǎn)移到樣本預定量膜片上。當血漿樣本含量達到飽和狀態(tài)時,定量的血漿樣本收集在樣本預定量膜片上,再進行檢測。因此,可移動基片先將待測樣本預定量之后在進行免疫層析檢測。
【附圖說明】
[0021 ]圖1為可定量免疫層析裝置的正視圖。
[0022]圖2為可定量免疫層析裝置的正面透視圖。
[0023]圖3為可定量免疫層析裝置的內(nèi)部免疫層析膜片的結構示意圖。
[0024]圖4為可移動基片的結構示意圖。
[0025]圖示說明:1.稀釋墊;2.連接墊;3.結合墊;4.硝基纖維素膜;41.檢測區(qū);42.對照區(qū);5.吸水墊;6.卡片;7.殼體;71.稀釋孔;72.加樣孔;73.觀察窗;74.側壁穿出殼體的部分
8.可移動基片;81.底板;82.樣品預定量膜片;83.血液分離膜片;84.側壁;9免疫層析膜片。
[0026]圖5為可定量免疫層析裝置的移動軌跡。
【具體實施方式】
[0027]下面結合說明書附圖和具體實施例對本實用新型作出進一步地詳細闡述,所述實施例只用于解釋本實用新型,并非用于限定本實用新型的范圍。下述實施例中所使用的試驗方法如無特殊說明,均為常規(guī)方法;所使用的材料、試劑等,如無特殊說明,為可從商業(yè)途徑得到的試劑和材料。
[0028]實施例1
[0029]—種可定量的免疫層析裝置,包括殼體和置于殼體內(nèi)的血液分離膜片、可移動基片、免疫層析膜片,可移動基片包括樣品預定量膜片,殼體上設有加樣孔、稀釋孔、觀察窗,血液分離膜片緊貼在加樣孔對應的殼體內(nèi)壁上,可移動基片設在血液分離膜片下方,使經(jīng)過血液分離膜片的樣品正好流入可移動基片的樣品預定量膜片,可移動基片能移動到免疫層析膜片上;免疫層析膜片包括卡片和依次放置于卡片上的稀釋墊、連接墊、結合墊、硝基纖維素膜、吸水墊,稀釋墊與連接墊部分重疊,結合墊、硝基纖維素膜、吸水墊依次部分重疊,連接墊和結合墊的距離剛好使樣品預定量膜片分別與連接墊和結合墊部分重疊;稀釋墊對應殼體上的稀釋孔,硝基纖維素膜對應殼體上的觀察窗;樣品預定量膜片飽和后,將樣品預定量
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