一種應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物，其特征在于，其藥用成分按質(zhì)量百分比計，包括：木通皂苷D60-90％，姜黃素10-30％。本發(fā)明所述藥物可應(yīng)用于治療代謝綜合征。在實際應(yīng)用中可以制成片劑、膠囊或者針劑。本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明所述藥物可以調(diào)節(jié)患者的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和碳水化合物的代謝過程，對代謝綜合征起到很好的預(yù)防和治療的作用。
【專利說明】一種應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，主要涉及到一種應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物。
【背景技術(shù)】
[0002]代謝綜合征的特征在于一個人所具有的一組代謝風(fēng)險因素，包括腹部肥胖、胰島素抵抗或葡萄糖不耐性、致動脈粥樣硬化的血脂異常、血栓前狀態(tài)(prothrombotiestate)、促炎癥狀態(tài)(proinflammatory state)和高血壓。如果患者顯示至少三種以下癥狀，成人治療小組(AdultTreatment Panel)就定義為代謝綜合征:腰圍測量男性至少40英寸，女性35英寸；血 清甘油三酯水平至少150mg/dl ；HDL膽固醇水平男性低于40mg/dl，女性低于50mg/dl,血壓至少135/80mmHg和血糖(血清葡萄糖)至少110mg/dl。據(jù)估計,美國高達25%的人口受代謝綜合征困擾。代謝綜合征的根本原因是胰島素抵抗，其中胰島素攝取血中葡萄糖的能力削弱。這導(dǎo)致在進食后葡萄糖水平維持升高狀態(tài)，而胰腺對進食是通過分泌胰島素作出響應(yīng)的。如果不治療，代謝綜合征顯著增加II型糖尿病、心血管疾病和涉及動脈壁中粥樣斑塊聚集的其它疾病的風(fēng)險。目前，治療代謝綜合征的藥物中一般都是重點治療其中一種代謝紊亂。
[0003]鑒于上述描述，亟待有一種對代謝綜合征患者的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和碳水化合物代謝的水平均有調(diào)節(jié)和治療作用的藥物的出現(xiàn)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物，以期能夠從蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和碳水化合物代謝的三個水平同時進行調(diào)節(jié)，達到好的治療和預(yù)防效果。
[0005]為了實現(xiàn)上述目的和一些其他目的，本發(fā)明提供一種應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物，其特征在于，其藥用成分按質(zhì)量百分比計，包括:
[0006]木通皂苷D 60-90%
[0007]姜黃素10-30%
[0008]優(yōu)選的是，藥用成分按質(zhì)量百分比計，包括:
[0009]木通皂苷D 90%
[0010]姜黃素 10%
[0011]優(yōu)選的是，所述應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物可制成片劑、膠囊或者針劑。
[0012]一種藥物應(yīng)用于治療代謝綜合征。
[0013]優(yōu)選的是，所述藥物用于治療和預(yù)防糖尿病、肥胖癥、胰島素抗性、高膽固醇血癥和高血壓。
[0014]優(yōu)選的是，所述藥物用于治療和預(yù)防高脂血癥。
[0015]優(yōu)選的是，所述藥物用于治療和預(yù)防增加的血清三?；视蜐舛取?br>
[0016]優(yōu)選的是,所述糖尿病患者的空腹血糖水平介于125mg/dl-200mg/dl之間。
[0017]優(yōu)選的是，所述藥物使所述患者的空腹血糖水平降低至110mg/dl以下。[0018]對于被定義為患有代謝綜合征的人員而言，他們必須具有:
[0019]中心性肥胖(對于歐洲男性(Europid man)定義為腰圍≥94cm,以及對于歐洲女性(Europid woman) > 80cm,并且針對其他組為種族特異性數(shù)值)
[0020]加上以下4種因素的任何兩種:
[0021]升高的甘油三酯(TG)水平150mg/dL(l.7mmol/L)；
[0022]或針對這種脂質(zhì)異常的特異性治療，降低的高密度脂蛋白(HDL)膽固醇:在男性中< 40mg/dL(L 03mmol/L*)，以及在女性中< 50mg/dL(L 29mmol/L*)，或針對這種脂質(zhì)異常的特異性治療；
[0023]升高的血壓(BP):收縮BP≥130或舒張BP≥85mmHg,或先前診斷的高血壓的治療；
[0024]升高的空腹血糖(FPG)≥100mg/dL(5.6mmol/L)，或先前診斷的2型糖尿病，如果高于 5.Bmmol /I,或 100mg/dL。
[0025]木通皂苷D是中藥續(xù)斷中的主要有效成分之一，其含量達到2%以上，木通皂苷D具有降低血脂的作用。
[0026]姜黃素是一種從姜科植物姜黃等的根莖中提取得到的黃色色素。為酸性多酚類物質(zhì)，主鏈為不飽和脂族及芳香族基團。通常用作肉類食品著色劑和酸堿指示劑，同時具有抗炎、抗氧化等藥理作用。
[0027]本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明所述藥物可以調(diào)節(jié)患者的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和碳水化合物的代謝過程，對代謝綜合征起到很好的預(yù)防和治療的作用，本發(fā)明所述藥物的藥用成分木通皂苷D和姜黃素是從天然中藥物中提煉獲得，提煉方法比較簡單，木通皂苷D和姜黃素的毒性較低，符合國家安全用藥標(biāo)準(zhǔn)，尤其是是姜黃素還是國際上認可的可食用色素，開發(fā)前景好，且這兩種藥用成分在普通藥店即可買到，價格適中，按照本發(fā)明所述藥物的質(zhì)量百分比配比后應(yīng)用于治療代謝綜合征效果好，適用于普通患者，可進行大規(guī)模生產(chǎn)。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0028]圖1為本發(fā)明所述應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物對肝細胞活力的影響。
[0029]圖2為本發(fā)明所述應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物對棕櫚酸PA誘導(dǎo)的肝細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積影響(圖2a為標(biāo)準(zhǔn)組、圖2b模型組、圖2c_圖2e為用藥組)。
[0030]圖3為本發(fā)明所述應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物對PA誘導(dǎo)的肝細胞內(nèi)脂質(zhì)含量變化分析(圖3a為標(biāo)準(zhǔn)組、圖3b模型組、圖3c-圖3e為用藥組)。
[0031]圖4為本發(fā)明所述應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物PA誘導(dǎo)的肝細胞凋亡率的影響的FlowJo軟件分析。
[0032]圖5為本發(fā)明所述應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物PA誘導(dǎo)的肝細胞凋亡率的影響的柱形圖。
[0033]圖6為本發(fā)明所述應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物對小鼠血清轉(zhuǎn)氨酶水平的影響。
[0034]圖7為本發(fā)明所述應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物對脂肪肝小鼠肝臟脂肪變性的影響。
[0035]圖8為本發(fā)明所述應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物對于預(yù)防胰島素抵抗的藥效學(xué)研究。[0036]圖9為本發(fā)明所述應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物對脂肪細胞糖代謝的影響?！揪唧w實施方式】
[0037]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步的詳細說明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說明書文字能夠據(jù)以實施。
[0038]實施例1
[0039]應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物，其特征在于，其藥用成分按質(zhì)量百分比計，包括:木通皂苷D70 %，姜黃素30 %。
[0040]實施例2
[0041]應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物，其特征在于，其藥用成分按質(zhì)量百分比計，包括:木通皂苷D80 %，姜黃素20 %。
[0042]實施例3
[0043]應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物，其特征在于，其藥用成分按質(zhì)量百分比計，包括:木通皂苷D90 %，姜黃素10 %。
[0044]應(yīng)用本發(fā)明的治療代謝綜合征的藥物按照實施例3中藥物的質(zhì)量百分比配制基礎(chǔ)藥物并應(yīng)用試驗方法檢測藥物應(yīng)用于治療代謝綜合征的治療效果: [0045]細胞實驗是將上述比例的藥物溶解于二甲基亞砜(DMSO)中進行加藥，小鼠實驗是將上述比例藥物制成混懸液進行口服灌胃給藥。
[0046]1、木通皂苷D和姜黃素聯(lián)合用藥(MG)對肝細胞(BRL)生長、增殖的作用
[0047]材料來源:大鼠BRL細胞；
[0048]DMEM 培養(yǎng)基(Gibco)；
[0049]涉及試劑:胎牛血清(FBS，Gibco) ;二甲基亞砜(DMSO);四甲基偶氮唑鹽(MTT，sigma)；
[0050]方法:取對數(shù)生長期BRL細胞，消化后制成單細胞懸液，用培養(yǎng)基調(diào)整細胞濃度為5X IOVmL的細胞于96孔板培養(yǎng)，待細胞貼壁，更換培養(yǎng)基，向培養(yǎng)基中加入木通皂苷D和姜黃素混合藥物，使混合藥物在培養(yǎng)基中的終濃度為25、50、100、200、400、80(^11101/1，孵育48h后，每孔加入10 μ L MTT (5mg/mL)，在細胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)孵育4h，棄去培養(yǎng)基，每孔加Λ 150 μ L DMS0，用酶標(biāo)儀在492nm波長處檢測每孔的光密度。每組設(shè)6個復(fù)孔，至少重復(fù)3次，計算細胞生長抑制率。結(jié)果見圖1。
[0051]由圖1結(jié)果顯示，隨著藥物濃度的提高細胞活力逐漸降低，細胞存活率逐漸下降，說明本發(fā)明應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物對細胞蛋白質(zhì)代謝具有顯著的影響。
[0052]2.木通皂苷D和姜黃素聯(lián)合用藥對脂肪肝細胞脂質(zhì)沉積的影響
[0053]取對數(shù)期細胞，細胞計數(shù)后接種于6孔板中，每孔10000個，細胞分組為:正常組(用正常培養(yǎng)基培養(yǎng))、模型組(加入棕櫚酸PA誘導(dǎo))、木通皂苷D和姜黃素聯(lián)合用藥低、中、高濃度(25、50、100μπιΟ1/υ預(yù)保護組。待細胞培養(yǎng)48h后棄去培養(yǎng)基，磷酸鹽緩沖液PBS沖洗3次，4%中性甲醛固定30min，氟化硼二吡咯(Bodipy) 493/503熒光染色30min，PBS沖洗3次，熒光顯微鏡下攝片、觀察細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積情況，結(jié)果見圖2，熒光顯微鏡下可見正常組圖2a和模型組(48h)圖2b肝細胞排列緊密，邊緣清晰；模型組肝細胞細胞質(zhì)周圍均可見明顯脂滴，顯示強烈綠色熒光；木通皂苷D和姜黃素聯(lián)合用藥各劑量組(圖2c、圖2d和圖2e)肝細胞內(nèi)脂滴數(shù)量較模型組相比均有明顯減少，熒光強度減弱。采用DMSO溶解染料后，檢測吸光度(OD)，結(jié)果見圖3，相比起正常組圖3a，模型組圖3b的OD值顯著升高(P<0.05);相比起模型組，木通皂苷D和姜黃素聯(lián)合用藥各劑量組(圖3c、圖3d和圖3e)的OD值均有降低，其中高劑量組有統(tǒng)計學(xué)意義(P < 0.05)(見圖3)，表明木通皂苷D和姜黃素聯(lián)合用藥可抑制肝細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積。
[0054]3.木通皂苷D和姜黃素聯(lián)合用藥對非酒精脂肪肝細胞凋亡的影響
[0055]取對數(shù)期細胞，細胞計數(shù)后接種于6孔板中，每孔10000個，細胞分組為:正常組(用正常培養(yǎng)基培養(yǎng))、模型組(加入PA誘導(dǎo))、木通皂苷D和姜黃素聯(lián)合用藥低、中、高濃度(25、50、100μπιΟ1/υ預(yù)保護組。待細胞培養(yǎng)48h后棄去培養(yǎng)基，PBS沖洗3次，用不含乙二胺四乙酸(EDTA)的胰酶消化收集；用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集I~5 X IO5細胞；加入500 μ L的結(jié)合緩沖液(Binding Buffer)懸浮細胞；加入5 μ L膜聯(lián)蛋白V (Annexin V-FI TC)混勻后，加入5 μ L碘化丙唳(Propidium 1dide),混勻；室溫、避光、反應(yīng)5~15min ;在Ih內(nèi)，將細胞置激發(fā)光為488nm波長的流式細胞儀上檢測。上機測定時獲取IX IO5個以上細胞，重復(fù)3次。得到的數(shù)據(jù)用Flow Jo軟件分析結(jié)果(如圖4所示)并畫柱狀圖如圖5所示。正常對照組(圖4a)、標(biāo)準(zhǔn)組PA(圖4b)、木通皂苷D和姜黃素聯(lián)合用藥不同濃度(25ymol/L-圖4c、50ymol/L-圖4d、100ymol/L-圖4e)干預(yù)保護組細胞凋亡率分別為 1.00±0.10,6.80±0.45,6.60±0.10,4.90±0.15,1.70±0.10。棕櫚酸 PA誘導(dǎo)的BRL細胞凋亡率較正常對照組相比顯著增加(P <0.05);木通皂苷D和姜黃素聯(lián)合用藥各濃度組干預(yù)后，細胞凋亡率較PA組相比有所降低，其中木通皂苷D和姜黃素聯(lián)合用藥中、高濃度組存在顯著性差異(P < 0.05)，表明木通皂苷D和姜黃素聯(lián)合用藥可抑制肝細胞凋亡率。
[0056]4.木通皂苷D和姜黃素聯(lián)合用藥對脂肪肝小鼠的影響。
[0057]取ob/ob小鼠36只，體重37±2g，隨機分成4組，即模型組，木通皂苷D低、中、高劑量治療組，每組9只。正常對照組用小鼠為C57BL/6J野生型小鼠，9只，體重20±2g，小鼠分籠飼養(yǎng)在SPF級實驗動物房內(nèi)，自由進食飲水。小鼠用基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)I周后，正常組小鼠繼續(xù)喂食基礎(chǔ)飼料，其它實驗組小鼠喂食高脂飼料，在喂食高脂飼料的同時，進行給藥干預(yù)治療。正常組和模型組小鼠均給予腹腔注射等量生理鹽水，木通皂苷D和姜黃素聯(lián)合用藥低、中、高劑量治療組分別給予腹腔注射30、60、120mg/kg木通皂苷D和姜黃素，藥物均以生理鹽水溶解。每天腹腔注射I次，連續(xù)注射4周。末次給藥后禁食不禁水24h，稱量體重，摘眼球取血后斷頸處死小鼠，離心分離血清，用試劑盒測定總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)含量；取肝臟，迅速解剖摘取肝臟，生理鹽水漂洗，濾紙吸干后稱重，拍照，取肝臟右葉于4%中性甲醛固定后切片HE染色病理觀察，取肝臟左葉置于-80°C冰箱中保存用于測定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(S0D)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)含量。實驗結(jié)果如下表1-3和圖 6-7所示。
[0058]表1木通皂苷D和姜黃素聯(lián)合用藥對小鼠體重、肝指數(shù)的影響
【權(quán)利要求】
1.一種應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物，其特征在于，其藥用成分按質(zhì)量百分比計，包括: 木通皂苷D 60-90% 姜黃素10-30%
2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物，其特征在于，藥用成分按質(zhì)量百分比計，包括: 木通皂苷D 90% 姜黃素10%
3.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物，其特征在于，所述應(yīng)用于治療代謝綜合征的藥物可制成片劑、膠囊或者針劑。
4.一種如權(quán)利要求1所述藥物應(yīng)用于治療代謝綜合征。
5.如權(quán)利要求4所述的藥物治療代謝綜合征的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物用于治療和預(yù)防糖尿病、肥胖癥、胰島素抗性、高膽固醇血癥和高血壓。
6.如權(quán)利要求4所述的藥物治療代謝綜合征的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物用于治療和預(yù)防聞脂血癥。
7.如權(quán)利要求4所述的藥物治療代謝綜合征的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物用于治療和預(yù)防增加的血清三 酰基甘油濃度。
8.如權(quán)利要求5所述的藥物治療代謝綜合征的應(yīng)用，其特征在于，所述糖尿病患者的空腹血糖水平介于125mg/dl-200mg/dl之間。
9.如權(quán)利要求8所述的藥物治療代謝綜合征的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物使所述患者的空腹血糖水平降低至110mg/dl以下。
【文檔編號】A61P3/06GK103977014SQ201410256108
【公開日】2014年8月13日 申請日期:2014年6月10日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月10日
【發(fā)明者】劉麗宏, 宮麗麗, 呂亞麗, 劉河 申請人:劉麗宏