專利名稱：利用玉米芯木糖渣水解液培養(yǎng)隱球酵母生產(chǎn)單細(xì)胞油的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)單細(xì)胞油的方法，尤其涉及一種利用玉米芯木糖渣水解液 (糖化液)培養(yǎng)隱球酵母(Cryptococcus curvatus)發(fā)酵生產(chǎn)單細(xì)胞油的方法。
背景技術(shù)：
單細(xì)胞油脂，又稱微生物油脂，是微生物或藻類以碳水化合物、碳?xì)浠衔锖推胀ㄓ椭瑸樘荚?、氮源、輔以無機(jī)鹽生產(chǎn)的油脂，其中有些油脂具有高附加值。其脂肪酸組成與植物油脂相似，以C16、C18系脂肪酸為主，如棕櫚酸(C16:0)、硬脂酸(C18:0)、油酸 (C18:l)、亞油酸(C18:2)、亞麻酸(C18:3)等。微生物油脂可以廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、精細(xì)化工等行業(yè)。目前，國內(nèi)外工業(yè)用油和食用油脂主要來源于動、植物和化石資源，隨著可耕用土地的日益減少和化石資源的逐漸枯竭以及生物技術(shù)的進(jìn)步，工業(yè)用油勢必走向多種渠道開發(fā)的途徑。單細(xì)胞油脂作為一種新型油脂已經(jīng)引起人們的廣泛關(guān)注。近年來，關(guān)于利用蔗糖、糖蜜、乳糖、工業(yè)廢液及木質(zhì)纖維素來生產(chǎn)微生物油脂已經(jīng)有所報道。劉宏娟等利用兩步水解木質(zhì)纖維素所得水解液和兩次補(bǔ)料發(fā)酵得到單細(xì)胞油，趙宗保等也利用玉米秸稈的無機(jī)酸或纖維素酶水解液進(jìn)行單細(xì)胞油的生產(chǎn)。但上述實驗所需水解液的獲得需要大量的稀酸等化學(xué)試劑，帶來環(huán)境問題的同時極大地增加了生產(chǎn)成本。玉米芯經(jīng)酸水解，利用其中的半纖維素制取木糖醇及低聚木糖等高附加值產(chǎn)品后，廢棄的纖維素殘渣即是木糖渣，脫木素木糖渣為木糖渣經(jīng)堿處理脫除木素后的殘渣，均為生物煉制過程中產(chǎn)生的廢渣。經(jīng)檢索，利用木糖渣和脫木素木糖渣水解液培養(yǎng)產(chǎn)油微生物，生產(chǎn)單細(xì)胞油的研究還未有報道，因而利用木糖渣及脫木素木糖渣發(fā)酵生產(chǎn)單細(xì)胞油的方法具有極其重要的實際意義。
發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明要解決的問題是提供一種利用玉米芯木糖渣水解液 (糖化液)培養(yǎng)隱球酵母(Cryptococcus curvatus)發(fā)酵生產(chǎn)單細(xì)胞油的方法。本發(fā)明所述利用生物質(zhì)資源水解液培養(yǎng)隱球酵母生產(chǎn)單細(xì)胞油的方法的步驟是(1)糖化液制備取玉米芯木糖渣，以15 35個濾紙酶活單位(FPA)每克干木質(zhì)纖維素的量添加纖維素酶液，在35 55°C下糖化60 80h ；收集糖化液于75 85°C下水浴30 60min使殘余纖維素酶失活，然后將糖化液于7000 IOOOOrpm下離心6 lOmin， 得澄清的糖化液；其中上述玉米芯木糖渣是指脫木素木糖渣或木糖渣；(2)糖化液的脫毒處理將上述糖化液水浴加熱至80°C，再加入其質(zhì)量百分比為 0. 6 1. 2%的活性炭，攪拌30 50min，然后真空抽濾去除活性炭，得脫毒的糖化液；
(3)利用糖化液發(fā)酵隱球酵母以脫毒的糖化液、4g/l酵母粉的配方制備產(chǎn)油糖化液發(fā)酵培養(yǎng)基，將活化好的隱球酵母(Cryptococcus curvatus)以體積百分比為4 10%的接種量接種于產(chǎn)油糖化液發(fā)酵培養(yǎng)基中，于30士2°C、200士50rpm，搖床震蕩培養(yǎng) 60 80h，得含單細(xì)胞油的發(fā)酵液；(4)單細(xì)胞油粗提將步驟(3)的發(fā)酵液于7000 9000rpm下離心8 15min 收集菌體，蒸餾水清洗菌體3 4次；以酸熱-有機(jī)試劑法提取單細(xì)胞油，即以3g濕菌體IOml的比例加入4M HCl，渦旋混合后，沸水浴60min，再冰水浴30min ；然后按3g濕菌體5ml的比例加入無水乙醇，按3g濕菌體15ml的比例加入乙醚，震蕩后再按3g濕菌體15ml的比例加入石油醚，振蕩放氣，收集有機(jī)試劑層，烘干揮發(fā)去除有機(jī)試劑后得單細(xì)胞油。上述步驟(1)所述的纖維素酶酶液是商品纖維素酶或是任何能產(chǎn)生纖維素酶的菌種所產(chǎn)生的纖維素酶。商品纖維素酶可以是液體酶，也可以是固體酶粉。纖維素酶的制備方法是纖維素酶產(chǎn)生菌(例如青霉屬、木霉屬或曲霉屬菌株)按常規(guī)量接種于纖維素酶產(chǎn)酶培養(yǎng)基中，在觀 30°C，搖床轉(zhuǎn)速200 300rpm下，產(chǎn)酶發(fā)酵96 120小時，然后將所有發(fā)酵物在5000 lOOOOr/min的轉(zhuǎn)速下離心15 40min，收集上清液即獲得纖維素酶粗酶液。上述步驟(1)所述纖維素酶添加量優(yōu)選20 30個濾紙酶活單位每克干木質(zhì)纖維素，糖化溫度優(yōu)選40 50°C，糖化時間優(yōu)選70 80h。上述步驟⑵所述活性炭的質(zhì)量百分比優(yōu)選為0. 8 1. 0%，攪拌時間優(yōu)選30 35min。上述步驟( 所述隱球酵母的培養(yǎng)條件優(yōu)選是30°C、200rpm搖床震蕩培養(yǎng)65 75h。上述步驟(4)所述發(fā)酵液優(yōu)選于8000rpm下離心IOmin收集菌體。本發(fā)明提供一種利用玉米芯木糖渣水解液培養(yǎng)隱球酵母生產(chǎn)單細(xì)胞油的方法，較現(xiàn)有技術(shù)中利用玉米秸稈的無機(jī)酸或纖維素酶水解液進(jìn)行單細(xì)胞油生產(chǎn)的方法，具有工藝簡便、成本較低、無污染、油脂產(chǎn)量高的特點。顯著克服了上述實驗所需水解液的獲得需要大量的稀酸等化學(xué)試劑帶來的環(huán)境污染問題，同時極大地降低了生產(chǎn)成本。本發(fā)明方法中利用的生物質(zhì)資源具有原料豐富、價格低廉、加工方便的優(yōu)勢，可顯著降低單細(xì)胞油的生產(chǎn)成本，更重要的是生物質(zhì)資源的充分利用，處理了農(nóng)業(yè)廢料，對改善我國能源緊缺狀況，保障我國能源可持續(xù)供給，緩解能源危機(jī)具有重要的實際意義和重要的經(jīng)濟(jì)價值。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明內(nèi)容作進(jìn)一步的說明。實施例1(1)纖維素酶液的制備將斜臥青霉(Penicillium decumbens) JU-AlO以常規(guī)量接種于產(chǎn)酶培養(yǎng)基中，300C，250rpm下震蕩培養(yǎng)產(chǎn)酶，6000rpm下離心30min，收集上清液即為纖維素酶粗酶液；上述產(chǎn)酶培養(yǎng)基配方為20g/l木糖渣，30g/l麩皮，6g/l微晶纖維素，5g/l豆餅粉，2g/l硫酸銨，lg/Ι尿素，2g/l硝酸鈉，3g/l磷酸二氫鉀，0. 5g/l硫酸鎂，3ml/l吐溫80 ；(2)糖化液制備取脫木素木糖渣，以25個FPA每克干底物添加纖維素酶液，在 45°C下糖化72h ；收集糖化液于80°C下水浴30min使殘余纖維素酶失活，然后將糖化液于 8000rpm下離心lOmin，得澄清的糖化液；(3)糖化液的脫毒處理將糖化液水浴加熱至80°C，加入其質(zhì)量百分比為1. 0%的活性炭，攪拌30min，然后真空抽濾去除活性炭，得脫毒的糖化液；(4)利用糖化液發(fā)酵隱球酵母以脫毒的糖化液、4g/l酵母粉的配方制備產(chǎn)油糖化液發(fā)酵培養(yǎng)基，將活化好的隱球酵母(Cryptococcus curvatus)以6%的接種量接種于產(chǎn)油糖化液發(fā)酵培養(yǎng)基中，于30°C、200rpm，搖床震蕩培養(yǎng)72h，得含單細(xì)胞油的發(fā)酵液；(5)單細(xì)胞油粗提發(fā)酵液于SOOOrpm下離心IOmin收集菌體，蒸餾水清洗菌體3 次；酸熱-有機(jī)試劑法提取單細(xì)胞油，即以3g濕菌體IOml的比例加入4M HC1，渦旋混合后，沸水浴60min，再冰水浴30min ；然后按3g濕菌體5ml的比例加入無水乙醇，按3g 濕菌體15ml的比例加入乙醚，震蕩后再按3g濕菌體15ml的比例加入石油醚，振蕩放氣，收集有機(jī)試劑層，烘干揮發(fā)去除有機(jī)試劑后得單細(xì)胞油；實驗結(jié)果斜臥青霉粗酶液酶解得到的糖化液的葡萄糖的濃度達(dá)到了 49g/l，在未經(jīng)脫毒處理的產(chǎn)油糖化液培養(yǎng)基中的隱球酵母的菌體干重達(dá)到了 15. OOg/Ι，單細(xì)胞油達(dá)到了 6. 14g/l，油脂含量為40. 92%。在脫毒后產(chǎn)油糖化液培養(yǎng)基中，隱球酵母菌體干重和單細(xì)胞油分別達(dá)到了 15. 16g/l和6. 18g/l，油脂含量為40. 73%。實施例2(1)纖維素酶液的制備將斜臥青霉以常規(guī)量接種于產(chǎn)酶培養(yǎng)基中，30°C，250rpm 下震蕩培養(yǎng)84h產(chǎn)酶，6000rpm下離心30min，收集上清液即為纖維素酶粗酶液；上述產(chǎn)酶培養(yǎng)基配方為20g/l木糖渣，30g/l麩皮，6g/l微晶纖維素，5g/l豆餅粉，2g/l硫酸銨，lg/Ι尿素，2g/l硝酸鈉，3g/l磷酸二氫鉀，0. 5g/l硫酸鎂，3ml/l吐溫80 ；(2)糖化液制備取脫木素木糖渣，以30個FPA每克干底物添加纖維素酶液，在 45°C下糖化72h ；收集糖化液于80°C下水浴30min使殘余纖維素酶失活，然后將糖化液于 9000rpm下離心8min，得澄清的糖化液；(3)糖化液的脫毒處理將糖化液水浴加熱至80°C，加入其質(zhì)量百分比為1. 0%的活性炭，攪拌30min，然后真空抽濾去除活性炭，得脫毒的糖化液；(4)利用糖化液發(fā)酵隱球酵母以脫毒的糖化液、4g/l酵母粉的配方制備產(chǎn)油糖化液發(fā)酵培養(yǎng)基，將活化好的隱球酵母(Cryptococcus curvatus)以8%的接種量接種于產(chǎn)油糖化液發(fā)酵培養(yǎng)基中，于30°C、200rpm，搖床震蕩培養(yǎng)75h，得含單細(xì)胞油的發(fā)酵液；(5)單細(xì)胞油粗提發(fā)酵液于SOOOrpm下離心IOmin收集菌體，蒸餾水清洗菌體3 次；酸熱-有機(jī)試劑法提取單細(xì)胞油，即以3g濕菌體IOml的比例加入4M HC1，渦旋混合后，沸水浴60min，再冰水浴30min ；然后按3g濕菌體5ml的比例加入無水乙醇，按3g 濕菌體15ml的比例加入乙醚，震蕩后再按3g濕菌體15ml的比例加入石油醚，振蕩放氣，收集有機(jī)試劑層，烘干揮發(fā)去除有機(jī)試劑后得單細(xì)胞油；實驗結(jié)果斜臥青霉粗酶液酶解脫木素木糖渣所得的糖化水解液的葡萄糖的濃度達(dá)到了 52g/l.經(jīng)過80h的培養(yǎng)，隱球酵母在產(chǎn)油糖化液培養(yǎng)基中的菌體干重達(dá)到了 16. 30g/l，油脂含量為42. 92%，單細(xì)胞油產(chǎn)量達(dá)到了 7. 00g/l。
實施例3(1)糖化液制備取脫木素木糖渣，以25個FPA每克干底物添加商品化纖維素酶液(來源于青島康地恩生物技術(shù)有限公司)，緩沖體系為PH4. 8的0. 05M HAC-NaAc緩沖液在45°C下糖化72h ；收集糖化液于80°C下水浴30min使殘余纖維素酶失活，然后將糖化液于8000rpm下離心lOmin，得澄清的糖化液；(2)糖化液的脫毒處理將糖化液水浴加熱至80°C，加入其質(zhì)量百分比為1. 0%的活性炭，攪拌30min，然后真空抽濾去除活性炭，得脫毒的糖化液；(3)利用糖化液發(fā)酵隱球酵母以脫毒的糖化液、4g/l酵母粉的配方制備產(chǎn)油糖化液發(fā)酵培養(yǎng)基，將活化好的隱球酵母(Cryptococcus curvatus 03)以8%的接種量接種于產(chǎn)油糖化液發(fā)酵培養(yǎng)基中，于30°C、200rpm，搖床震蕩培養(yǎng)72h，得含單細(xì)胞油的發(fā)酵液；(4)單細(xì)胞油粗提發(fā)酵液于SOOOrpm下離心IOmin收集菌體，蒸餾水清洗菌體3 次。酸熱-有機(jī)試劑法提取單細(xì)胞油，即以3g濕菌體IOml的比例加入4M HC1，渦旋混合后，沸水浴60min，再冰水浴30min ；然后按3g濕菌體5ml的比例加入無水乙醇，按3g 濕菌體15ml的比例加入乙醚，震蕩后再按3g濕菌體15ml的比例加入石油醚，振蕩放氣，收集有機(jī)試劑層，烘干揮發(fā)去除有機(jī)試劑后得單細(xì)胞油； 實驗結(jié)果在pH4. 8的0. 05M HAC-NaAc緩沖液中，康地恩酶液酶解得到的糖化液的葡萄糖濃度達(dá)到了 Mg/Ι。用于隱球酵母的培養(yǎng)時，隱球酵母的菌體干重達(dá)到了 23. 43g/ 1，油脂含量達(dá)到了 46. 74 %，單細(xì)胞油產(chǎn)量達(dá)到了 10. 95g/l。實施例4(1)糖化液制備取脫木素木糖渣，以20個FPA每克干底物添加商品化纖維素酶液(來源于青島康地恩生物技術(shù)有限公司)，緩沖體系為PH4. 8的0. 2M HAC-NaAc緩沖液在45°C下糖化72h ；收集糖化液于80°C下水浴30min使殘余纖維素酶失活，然后將糖化液于9000rpm下離心8min，得澄清的糖化液；(2)糖化液的脫毒處理將糖化液水浴加熱至80°C，加入其質(zhì)量百分比為1. 0%的活性炭，攪拌30min，然后真空抽濾去除活性炭，得脫毒的糖化液；(3)利用糖化液發(fā)酵隱球酵母以脫毒的糖化液、4g/l酵母粉的配方制備產(chǎn)油糖化液發(fā)酵培養(yǎng)基，將活化好的隱球酵母(Cryptococcus curvatus)以6%的接種量接種于產(chǎn)油糖化液發(fā)酵培養(yǎng)基中，于30°C、200rpm，搖床震蕩培養(yǎng)65h，得含單細(xì)胞油的發(fā)酵液；(4)單細(xì)胞油粗提發(fā)酵液于SOOOrpm下離心IOmin收集菌體，蒸餾水清洗菌體3 次。酸熱-有機(jī)試劑法提取單細(xì)胞油，即以3g濕菌體IOml的比例加入4M HCl，渦旋混合后，沸水浴60min，再冰水浴30min ；然后按3g濕菌體5ml的比例加入無水乙醇，按3g 濕菌體15ml的比例加入乙醚，震蕩后再按3g濕菌體15ml的比例加入石油醚，振蕩放氣，收集有機(jī)試劑層，烘干揮發(fā)去除有機(jī)試劑后得單細(xì)胞油；實驗結(jié)果在pH4. 8的0. 2M HAC-NaAc緩沖液中，康地恩纖維素酶酶解脫木素木糖渣所得糖化液的葡萄糖的濃度達(dá)到了 56g/l。用于隱球酵母的培養(yǎng)時，隱球酵母的菌體干重達(dá)到了 17. 36g/l，油脂含量達(dá)到了 44. 35%，單細(xì)胞油產(chǎn)量達(dá)到了 7. 70g/l。實施例5 (1)糖化液制備取脫木素木糖渣，以25個FPA每克干底物添加商品化纖維素酶液(來源于杰能科生物技術(shù)有限公司)，緩沖體系為PH4. 8的0. 05M HAC-NaAc緩沖液在
645°C下糖化72h ；收集糖化液于80°C下水浴30min使殘余纖維素酶失活，然后將糖化液于 8000rpm下離心lOmin，得澄清的糖化液；(2)糖化液的脫毒處理將糖化液水浴加熱至80°C，加入其質(zhì)量百分比為1. 0%的活性炭，攪拌30min，然后真空抽濾去除活性炭，得脫毒的糖化液；(3)利用糖化液發(fā)酵隱球酵母以脫毒的糖化液、4g/l酵母粉的配方制備產(chǎn)油糖化液發(fā)酵培養(yǎng)基，將活化好的隱球酵母(Cryptococcus curvatus 03)以6%的接種量接種于產(chǎn)油糖化液發(fā)酵培養(yǎng)基中，于30°C、200rpm，搖床震蕩培養(yǎng)72h，得含單細(xì)胞油的發(fā)酵液；(4)單細(xì)胞油粗提發(fā)酵液于SOOOrpm下離心IOmin收集菌體，蒸餾水清洗菌體3 次。酸熱-有機(jī)試劑法提取單細(xì)胞油，即以3g濕菌體IOml的比例加入4M HC1，渦旋混合后，沸水浴60min，再冰水浴30min ；然后按3g濕菌體5ml的比例加入無水乙醇，按3g 濕菌體15ml的比例加入乙醚，震蕩后再按3g濕菌體15ml的比例加入石油醚，振蕩放氣，收集有機(jī)試劑層，烘干揮發(fā)去除有機(jī)試劑后得單細(xì)胞油；實驗結(jié)果在pH4. 8的0. 05M HAC-NaAc緩沖液中，杰能科酶液酶解得到的糖化液的葡萄糖濃度達(dá)到了 52g/l。用于隱球酵母的培養(yǎng)時，隱球酵母的菌體干重達(dá)到了 15. 31g/ 1，油脂含量達(dá)到了 40. 21%，單細(xì)胞油產(chǎn)量達(dá)到了 6. 16g/l。實施例6(1)糖化液制備取木糖渣，以20個FPA每克干底物添加商品化纖維素酶液(來源于杰能科生物技術(shù)有限公司)，緩沖體系為PH4. 8的0. 2M HAC-NaAc緩沖液在50°C下糖化72h ；收集糖化液于80°C下水浴30min使殘余纖維素酶失活，然后將糖化液于9000rpm下離心8min，得澄清的糖化液；(2)糖化液的脫毒處理將糖化液水浴加熱至80°C，加入其質(zhì)量百分比為1. 0%的活性炭，攪拌30min，然后真空抽濾去除活性炭，得脫毒的糖化液；(3)利用糖化液發(fā)酵隱球酵母以脫毒的糖化液、4g/l酵母粉的配方制備產(chǎn)油糖化液發(fā)酵培養(yǎng)基，將活化好的隱球酵母(Cryptococcus curvatus 03)以7%的接種量接種于產(chǎn)油糖化液發(fā)酵培養(yǎng)基中，于30°C、200rpm，搖床震蕩培養(yǎng)65h，得含單細(xì)胞油的發(fā)酵液；(4)單細(xì)胞油粗提發(fā)酵液于SOOOrpm下離心IOmin收集菌體，蒸餾水清洗菌體3 次。酸熱-有機(jī)試劑法提取單細(xì)胞油，即以3g濕菌體IOml的比例加入4M HC1，渦旋混合后，沸水浴60min，再冰水浴30min ；然后按3g濕菌體5ml的比例加入無水乙醇，按3g 濕菌體15ml的比例加入乙醚，震蕩后再按3g濕菌體15ml的比例加入石油醚，振蕩放氣，收集有機(jī)試劑層，烘干揮發(fā)去除有機(jī)試劑后得單細(xì)胞油；實驗結(jié)果在pH4. 8的H2O緩沖液中，杰能科酶液酶解脫木素木糖渣所得糖化液的葡萄糖的濃度達(dá)到了 51g/l。用于隱球酵母的培養(yǎng)時，隱球酵母的菌體干重達(dá)到了 17. 86g/ 1，油脂含量達(dá)到T 37. 35 %，單細(xì)胞油產(chǎn)量達(dá)到T 6. 67g/l。
權(quán)利要求
1.一種利用玉米芯木糖渣水解液培養(yǎng)隱球酵母生產(chǎn)單細(xì)胞油的方法，步驟是(1)糖化液制備取玉米芯木糖渣，以15 35個濾紙酶活單位(FPA)每克干木質(zhì)纖維素的量添加纖維素酶液，在35 55°C下糖化60 80h ；收集糖化液于75 85°C下水浴 30 60min使殘余纖維素酶失活，然后將糖化液于7000 IOOOOrpm下離心6 lOmin，得澄清的糖化液；(2)糖化液的脫毒處理將上述糖化液水浴加熱至80°C，再加入其質(zhì)量百分比為0.6 1. 2%的活性炭，攪拌30 50min，然后真空抽濾去除活性炭，得脫毒的糖化液；(3)利用糖化液發(fā)酵隱球酵母以脫毒的糖化液、4g/l酵母粉的配方制備產(chǎn)油糖化液發(fā)酵培養(yǎng)基，將活化好的隱球酵母(Cryptococcus curvatus)以體積百分比為4 10%的接種量接種于產(chǎn)油糖化液發(fā)酵培養(yǎng)基中，于30士2°C、200士50rpm，搖床震蕩培養(yǎng)60 80h， 得含單細(xì)胞油的發(fā)酵液；(4)單細(xì)胞油粗提將步驟(3)的發(fā)酵液于7000 9000rpm下離心8 15min收集菌體，蒸餾水清洗菌體3 4次；以酸熱-有機(jī)試劑法提取單細(xì)胞油，即以3g濕菌體IOml 的比例加入4M HC1，渦旋混合后，沸水浴60min，再冰水浴30min ；然后按3g濕菌體5ml的比例加入無水乙醇，按3g濕菌體15ml的比例加入乙醚，震蕩后再按3g濕菌體15ml的比例加入石油醚，振蕩放氣，收集有機(jī)試劑層，烘干揮發(fā)去除有機(jī)試劑后得單細(xì)胞油。
2.如權(quán)利要求1所述利用玉米芯木糖渣水解液培養(yǎng)隱球酵母生產(chǎn)單細(xì)胞油的方法，其特征在于步驟(1)所述纖維素酶添加量為20 30個濾紙酶活單位每克干木質(zhì)纖維素，糖化溫度為40 50°C，糖化時間為70 80h。
3.如權(quán)利要求1利用玉米芯木糖渣水解液培養(yǎng)隱球酵母生產(chǎn)單細(xì)胞油的方法，其特征在于步驟(2)所述活性炭的質(zhì)量百分比為0. 8 1. 0%，攪拌時間為30 35min。
4.如權(quán)利要求1利用玉米芯木糖渣水解液培養(yǎng)隱球酵母生產(chǎn)單細(xì)胞油的方法，其特征在于步驟(3)所述隱球酵母的培養(yǎng)條件是30°C、200rpm搖床震蕩培養(yǎng)65 75h。
5.如權(quán)利要求1利用玉米芯木糖渣水解液培養(yǎng)隱球酵母生產(chǎn)單細(xì)胞油的方法，其特征在于步驟(4)所述發(fā)酵液于SOOOrpm下離心IOmin收集菌體。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種利用玉米芯木糖渣水解液培養(yǎng)隱球酵母生產(chǎn)單細(xì)胞油的方法，較現(xiàn)有技術(shù)中利用玉米秸稈的無機(jī)酸或纖維素酶水解液進(jìn)行單細(xì)胞油生產(chǎn)的方法，具有工藝簡便、成本較低、無污染、油脂產(chǎn)量高的特點；顯著克服了上述實驗所需水解液的獲得需要大量的稀酸等化學(xué)試劑帶來的環(huán)境污染問題，同時極大地降低了生產(chǎn)成本。本發(fā)明對生物質(zhì)資源的大量利用，處理了農(nóng)業(yè)廢料，對改善我國能源緊缺狀況，保障我國能源可持續(xù)供給，緩解能源危機(jī)具有重要的實際意義和重要的經(jīng)濟(jì)價值。
文檔編號C12P7/64GK102392058SQ201110403848
公開日2012年3月28日 申請日期2011年12月7日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月7日
發(fā)明者宋欣, 馬曉靜 申請人:山東大學(xué)