一種山區(qū)鱘魚親本培育及人工催產(chǎn)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種山區(qū)鱘魚親本培育及人工催產(chǎn)方法，該方法采用對(duì)山區(qū)鱘魚親本進(jìn)行流水培育，在繁殖季節(jié)前兩個(gè)月對(duì)鱘魚親本進(jìn)行選擇并實(shí)現(xiàn)雌雄親本分類，將選擇后的雌雄鱘魚親本分池培育并進(jìn)行溫度調(diào)控，采用促黃體素釋放激素A3作為催產(chǎn)劑精細(xì)人工催產(chǎn)，催產(chǎn)完后雌、雄親本分別暫養(yǎng)，本發(fā)明操作簡(jiǎn)單，成本低廉，鱘魚的受精率達(dá)90.48%。共孵化出鱘魚苗16.32萬(wàn)尾，孵化率為66.55%，效果非常明顯。
【專利說(shuō)明】一種山區(qū)鱘魚親本培育及人工催產(chǎn)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種山區(qū)鱘魚親本培育及人工催產(chǎn)方法，屬于農(nóng)業(yè)淡水養(yǎng)殖【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]1999年，貴州省水產(chǎn)研究所在我省首次引進(jìn)鱘魚進(jìn)行研究試驗(yàn)。多年來(lái)，貴州省水產(chǎn)研究所在鱘魚養(yǎng)殖技術(shù)研究中形成了適合我省資源特點(diǎn)的鱘魚集約化高產(chǎn)養(yǎng)殖配套技術(shù)體系，創(chuàng)造了 262.7kg/m2的全國(guó)鱘魚養(yǎng)殖最高單產(chǎn)記錄，鱘魚養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展形成了對(duì)苗種的大量需求，但是由于鱘魚成熟期長(zhǎng)、技術(shù)難度大等因素影響，我省鱘魚人工繁殖長(zhǎng)期處于空白，全省各地每年約需從省外(甚至國(guó)外)引進(jìn)500萬(wàn)尾左右鱘魚苗、1000萬(wàn)粒鱘魚卵，苗種的質(zhì)量、供應(yīng)等受制于他人，極大地限制了我省山區(qū)鱘魚養(yǎng)殖的快速發(fā)展。
鱘魚人工繁育技術(shù)日趨成熟。申請(qǐng)?zhí)枮镃N201110147872.7的中國(guó)發(fā)明專利公開了一種鱘魚人工繁殖方法，但該發(fā)明一是采用體征觀察分辨雌雄親本，無(wú)法徹底解決親魚選擇中雌雄親本難于分辨問(wèn)題；二是該專利在親魚培育中采用將親本直接轉(zhuǎn)入低溫環(huán)境的方法，此方法不符合自然條件下的降溫模式，同時(shí)沒有說(shuō)明低溫培育后溫度是如何升高的；三是該專利無(wú)法準(zhǔn)確選擇適齡親本進(jìn)行人工繁育。
目前，雖然鱘魚人工繁殖的研究報(bào)道很多，但對(duì)于貴州山區(qū)鱘魚人工繁育來(lái)說(shuō)，一是貴州省為典型的喀斯特山區(qū)，水資源豐富，與北方冬季嚴(yán)寒期和南方夏季高溫期均持續(xù)較長(zhǎng)時(shí)間相比，具有特殊的水資源特點(diǎn)，水溫常年保持在15?22°C，因此導(dǎo)致了山區(qū)鱘魚特采取殊的培育策略；二是多年來(lái)的人工繁育研究得知，照搬省外鱘魚人工繁育技術(shù)對(duì)于山區(qū)鱘魚人工繁育是行不通的。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本發(fā)明的目的是:提供一種山區(qū)鱘魚親本培育及人工催產(chǎn)方法，徹底解決了鱘魚親本雌雄個(gè)體難于分辨和年齡選擇的難題，摸索建立了山區(qū)鱘魚人工低溫培育流程和人工催產(chǎn)策略，以克服現(xiàn)有技術(shù)的不足。
本發(fā)明的技術(shù)方案；
一種山區(qū)鱘魚親本培育及人工催產(chǎn)方法，該方法采用對(duì)山區(qū)鱘魚親本進(jìn)行流水培育，在繁殖季節(jié)前兩個(gè)月對(duì)鱘魚親本進(jìn)行選擇并實(shí)現(xiàn)雌雄親本分類，將選擇后的雌雄鱘魚親本分池培育并進(jìn)行溫度調(diào)控，采用促黃體素釋放激素A3(LHRH-A3)作為催產(chǎn)劑精細(xì)人工催產(chǎn)，催產(chǎn)完后雌、雄親本分別暫養(yǎng)，流水刺激，收集成熟的精、卵，采用干法和濕法相結(jié)合進(jìn)行人工受精即可。
前述的山區(qū)鱘魚親本培育及人工催產(chǎn)方法中，所述流水培育指水體交換量為1.5?2次/h，水體水溫保持在16?22°C，PH值為7.0?8.0，溶解氧大于6.0mg/L,養(yǎng)殖密度為5?8kg/m3,飼料投喂量為每天按鱘魚親本體重的I?1.5%。
前述的山區(qū)鱘魚親本培育及人工催產(chǎn)方法中，所述鱘魚親本選擇和分類方法為在親魚體內(nèi)植入標(biāo)記芯片，建立親魚檔案，記錄親本個(gè)體的體重、年齡等信息，在繁殖季節(jié)前兩個(gè)月，通過(guò)親魚檔案挑選出體格健壯、體表無(wú)傷的親魚進(jìn)行繁殖，雌魚體重在16kg以上，雄魚體重在12kg以上，使用取卵器在生殖孔前15cm側(cè)面通過(guò)腹腔穿刺取性腺分辨雌雄親本及性腺發(fā)育程度，選擇雌性親本卵子成熟度達(dá)IV期，卵橢圓形，呈深褐色，卵粒大小均勻，色素圈及動(dòng)物極明顯的親魚，選擇雄性親本精巢發(fā)育到IV或V期，用取卵器取出少許精巢組織灑在水中立即散開的親魚作為當(dāng)年人工繁育用的親本，并將雌、雄親魚分池培育。
前述的山區(qū)鱘魚親本培育及人工催產(chǎn)方法中，在對(duì)親本進(jìn)行腹腔穿刺取性腺前對(duì)鱘魚親本停止投喂12?20天.前述的山區(qū)鱘魚親本培育及人工催產(chǎn)方法中，所述溫度調(diào)控方法為養(yǎng)殖密度保證在I?2 kg/m3，水體循環(huán)為40?60 m3/h，保持供氧，按照2°C/d的降溫速度將培育水溫從常溫控制到TC以下，保持TC以下水溫培育親魚60d以上后，按照1°C /d的升溫速度將培育水溫提高至14°C，并持續(xù)培育7d后，開始對(duì)親魚進(jìn)行人工催產(chǎn)。
前述的山區(qū)鱘魚親本培育及人工催產(chǎn)方法中，所述人工催產(chǎn)的具體步驟對(duì)鱘魚雌親本采用兩次注射法進(jìn)行背部肌肉注射，第一次催產(chǎn)時(shí)注射劑量為Ikg親本注射Iyg催產(chǎn)素，第二次注射時(shí)注射劑量為Ikg親本注射2yg催產(chǎn)素，間隔時(shí)間為12h;對(duì)鱘魚雄親本采用一次注射法進(jìn)行背部肌肉注射，注射劑量為Ikg親本注射I μ g催產(chǎn)素。
前述的山區(qū)鱘魚親本培育及人工催產(chǎn)方法中，采用干法和濕法相接合的人工受精方法為將成熟精、卵混合均勻攪拌3?5min，將含有精液的水倒掉，用清水清洗3次，再將受精卵在含有滑石粉的水中脫粘50min，將受精卵放入具有翻動(dòng)功能的孵化器中孵化，孵化時(shí)控制水溫為14?18°C，水流控制在能保證魚卵能正常翻動(dòng)，孵化時(shí)溶解氧含量控制在7.0mg /L以上，孵化時(shí)間為10h左右。
由于采用了上述技術(shù)方案，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明采用流水培育的方法進(jìn)行鱘魚親本培育，并通過(guò)通過(guò)腹腔穿刺取性腺分辨雌雄親本及性腺發(fā)育程度進(jìn)而對(duì)鱘魚親本標(biāo)記分類，形成檔案，采用精巢組織灑在水中立即散開的親魚作為當(dāng)年人工繁育用的親本，并對(duì)選出的親本進(jìn)行低溫培育然后進(jìn)行人工繁育，本發(fā)明在貴州省水產(chǎn)研究所在惠水試驗(yàn)基地成功繁育出第一批鱘魚苗，共獲得受精卵27.10萬(wàn)粒，受精率達(dá)90.48%。共孵化出鱘魚苗16.32萬(wàn)尾，孵化率為66.55%，效果非常明顯。
【具體實(shí)施方式】；
下面對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，但不作為對(duì)本發(fā)明的任何限制。
本發(fā)明的實(shí)施例:一種山區(qū)鱘魚親本培育及人工催產(chǎn)方法，該方法采用對(duì)山區(qū)鱘魚親本進(jìn)行流水培育，在繁殖季節(jié)前兩個(gè)月對(duì)鱘魚親本進(jìn)行選擇并實(shí)現(xiàn)雌雄親本分類，將選擇后的雌雄鱘魚親本分池培育并進(jìn)行溫度調(diào)控，采用促黃體素釋放激素A3 (LHRH-A3)作為催產(chǎn)劑精細(xì)人工催產(chǎn)，催產(chǎn)完后雌、雄親本分別暫養(yǎng)，流水刺激，收集成熟的精、卵，采用干法和濕法相結(jié)合進(jìn)行人工受精即可。
具體方法為:
一、親魚培育；
(I)流水培育:采用山區(qū)簡(jiǎn)易流水高效養(yǎng)鱘技術(shù)，長(zhǎng)方形培育池規(guī)格為長(zhǎng)20mX寬6mX深1.4m，常年水溫保持在16?22°C，pH 7.0?8.0，溶解氧大于6.0mg/L，水池水體交換量
1.5 ?2 次/h。 (2)飼料投喂:2011年的6?12月，對(duì)惠水基地的后備親魚進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化培育，培育期間投喂鱘魚親魚專用飼料，培育池養(yǎng)殖密度為5?8kg/m3，每天按魚體重I?1.5%的飼料量投喂，當(dāng)在對(duì)親本進(jìn)行選擇繁殖親魚檢查時(shí)前半個(gè)月，停止投喂親本，以防止由于穿刺是損傷腸道導(dǎo)致感染。
二、親魚選擇；
通過(guò)繁育檔案(在親魚體內(nèi)植入標(biāo)記芯片)，在惠水試驗(yàn)基地后備親魚中選擇體格健壯、體表無(wú)傷的適齡親魚(通常情況下鱘魚達(dá)到性成熟的時(shí)間不同，西伯利亞鱘(含雜交)需培育6?7年，史氏鱘(含雜交)需培育7?8年，達(dá)氏鰉(含雜交)需培育12年以上，要求雌魚體重在16kg以上，雄魚體重在12kg以上)，使用取卵器在生殖孔前15cm側(cè)面通過(guò)腹腔穿刺取性腺觀察性腺發(fā)育程度，選擇雌性親本卵子成熟度達(dá)IV期的親魚17尾，體重16.80?21.51kg，均在 10 齡以上，芯片編號(hào)分別為 C3C1、2E11、C3BA、DEDC、BD05、D1E8、E940、C9FD、D48A、DED8、CD2A、C6D1、2E11、CE31、DED8、E8CA、E8DO ;選擇雄性親本精巢發(fā)育到IV或 V 期的雄魚7尾，體重12.86?15.20kg/尾，均在8齡以上，芯片編號(hào)分別為DC35、328B、C976、579C、680E、355B、CF3B。將雌、雄親魚分池培育。
三、溫度調(diào)控；
將選擇好的雌、雄親本轉(zhuǎn)移至帶有自動(dòng)控制可調(diào)溫設(shè)備的降溫池，培育池養(yǎng)殖密度為I?2kg/m3,每組降溫池有3個(gè)7.5kw的壓縮機(jī),循環(huán)水泵2.2kw,水體循環(huán)為50 m3 /h,
1.1kw氣泵供氧，按照2 V /d的降溫速度將培育水溫控制在7 V，保持7°C水溫培育親魚65d后，按照1°C /d的升溫速度將培育水溫提高至18 °C，并持續(xù)培育7d后，開始進(jìn)行人工催產(chǎn)。
四、人工催產(chǎn)；
人工催產(chǎn)采用促黃體素釋放激素A3 (LHRH-A3)作為催產(chǎn)劑，對(duì)鱘魚雌親本采用兩次注射法進(jìn)行背部肌肉注射，第一次催產(chǎn)時(shí)注射劑量為Ikg親本注射I μ g催產(chǎn)素，第二次注射時(shí)注射劑量為Ikg親本注射2 μ g催產(chǎn)素，間隔時(shí)間為12h ;對(duì)鱘魚雄親本采用一次注射法進(jìn)行背部肌肉注射，注射劑量為Ikg親本注射I μ g催產(chǎn)素，經(jīng)注射催情藥物的雌、雄親本分別暫養(yǎng)，流水刺激。
五、產(chǎn)卵孵化；
當(dāng)發(fā)現(xiàn)雌魚培育池底有深褐色的游離卵粒出現(xiàn)時(shí)，采用鱘魚人工繁殖用裝置通過(guò)活體取卵技術(shù)人工獲取成熟的精、卵，把魚卵放入干燥的面盆中，加入精液，采用干法和濕法相接合的人工受精，均勻攪拌3?5min后，將含有精液的水倒掉，用清水清洗3次，再將受精卵在含有滑石粉的水中脫粘50min。最后將受精卵放入具有翻動(dòng)功能的瓶式孵化器孵化要掌握好孵化密度，調(diào)節(jié)好水流，及時(shí)清除死卵、霉卵。孵化時(shí)控制水溫為14?18°C，水流控制在能保證魚卵能正常翻動(dòng)，孵化時(shí)溶解氧含量控制在7.0mg / L以上，孵化時(shí)間為10h左右。
六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果；
經(jīng)過(guò)努力，2012年5月底，貴州省水產(chǎn)研究所在惠水試驗(yàn)基地成功繁育出第一批鱘魚苗，共獲得受精卵27.10萬(wàn)粒，受精率達(dá)90.48%，共孵化出鱘魚苗16.32萬(wàn)尾，孵化率為66.55%。
【權(quán)利要求】
1.一種山區(qū)鱘魚親本培育及人工催產(chǎn)方法，其特征在于:該方法采用對(duì)山區(qū)鱘魚親本進(jìn)行流水培育，在繁殖季節(jié)前兩個(gè)月對(duì)鱘魚親本進(jìn)行人工選擇并實(shí)現(xiàn)雌雄親本分類，將選擇后的雌雄鱘魚親本分池培育并進(jìn)行溫度調(diào)控，采用促黃體素釋放激素A3 (LHRH-A3)作為催產(chǎn)劑精細(xì)人工催產(chǎn)，催產(chǎn)完后雌、雄親本分別暫養(yǎng)，流水刺激，收集成熟的精、卵，采用干法和濕法相結(jié)合進(jìn)行人工受精即可。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的山區(qū)鱘魚親本培育及人工催產(chǎn)方法，其特征在于:所述流水培育指水體交換量為1.5?2次/h，水體水溫保持在16?22°C，PH值為7.0?8.0，溶解氧大于6.0mg/L,養(yǎng)殖密度為5?8kg/m3,飼料投喂量為每天按鱘魚親本體重的I?1.5%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的山區(qū)鱘魚親本培育及人工催產(chǎn)方法，其特征在于:所述鱘魚親本選擇和分類方法為在親魚體內(nèi)植入標(biāo)記芯片，建立親魚檔案，記錄親本個(gè)體的體重、年齡等信息，在繁殖季節(jié)前兩個(gè)月，通過(guò)親魚檔案挑選出體格健壯、體表無(wú)傷的親魚進(jìn)行繁殖，雌魚體重在16kg以上，雄魚體重在12kg以上，使用取卵器在生殖孔前15cm側(cè)面通過(guò)腹腔穿刺取性腺分辨雌雄親本及性腺發(fā)育程度，選擇雌性親本卵子成熟度達(dá)IV期，卵橢圓形，呈深褐色，卵粒大小均勻，色素圈及動(dòng)物極明顯的親魚，選擇雄性親本精巢發(fā)育到IV或V期，用取卵器取出少許精巢組織灑在水中立即散開的親魚作為當(dāng)年人工繁育用的親本，并將雌、雄親魚分池培育。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的山區(qū)鱘魚親本培育及人工催產(chǎn)方法，其特征在于:在對(duì)親本進(jìn)行腹腔穿刺取性腺前對(duì)鱘魚親本停止投喂12?20天。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的山區(qū)鱘魚親本培育及人工催產(chǎn)方法，其特征在于:所述溫度調(diào)控方法為養(yǎng)殖密度保證在I?2 kg/m3，水體循環(huán)為40?60 m3/h，保持供氧，按照2V /d的降溫速度將培育水溫從常溫控制到7V以下，保持7 V以下水溫培育親魚60d以上后，按照1°C /d的升溫速度將培育水溫提高至14°C，并持續(xù)培育7d后，開始對(duì)親魚進(jìn)行人工催產(chǎn)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的山區(qū)鱘魚親本培育及人工催產(chǎn)方法，其特征在于:所述人工催產(chǎn)的具體步驟對(duì)鱘魚雌親本采用兩次注射法進(jìn)行背部肌肉注射，第一次催產(chǎn)時(shí)注射劑量為Ikg親本注射I μ g催產(chǎn)素，第二次注射時(shí)注射劑量為Ikg親本注射2 μ g催產(chǎn)素，間隔時(shí)間為12h ;對(duì)鱘魚雄親本采用一次注射法進(jìn)行背部肌肉注射，注射劑量為Ikg親本注射I μ g催產(chǎn)素。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的山區(qū)鱘魚親本培育及人工催產(chǎn)方法，其特征在于:采用干法和濕法相接合的人工受精方法為將成熟精、卵混合均勻攪拌3?5min，將含有精液的水倒掉，用清水清洗3次，再將受精卵在含有滑石粉的水中脫粘50min，將受精卵放入具有翻動(dòng)功能的孵化器中孵化，孵化時(shí)控制水溫為14?18°C，水流控制在能保證魚卵能正常翻動(dòng)，孵化時(shí)溶解氧含量控制在7.0mg / L以上，孵化時(shí)間為10h左右。
【文檔編號(hào)】A01K61/00GK104160986SQ201410257306
【公開日】2014年11月26日 申請(qǐng)日期:2014年6月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月11日
【發(fā)明者】周洲, 楊興, 劉霆, 蔣曉紅, 張龍濤 申請(qǐng)人:貴州省水產(chǎn)研究所