免疫分析方法及試劑的制作方法

免疫分析方法及試劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了能夠高靈敏度且正確地測(cè)定抗原的免疫分析方法及用于所述方法的試劑。該免疫分析方法在多羧酸型表面活性劑存在下進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)和/或測(cè)定。在該方法中使用的免疫分析試劑的特征是，含有多羧酸型表面活性劑。借助使反應(yīng)和/或測(cè)定體系中存在多羧酸型表面活性劑的簡(jiǎn)單手段，即使在高靈敏度的免疫分析中也能有效地抑制非特異性反應(yīng)，且在免疫分析中能夠正確地測(cè)定抗原而提高特異性。
【專利說明】免疫分析方法及試劑

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及免疫分析方法及用于所述方法的試劑。

【背景技術(shù)】
[0002]免疫分析方法廣泛用于血清、血漿、尿、便、腦脊液等的臨床檢查，近年來，由于能夠簡(jiǎn)單迅速地進(jìn)行測(cè)定，因此廣泛應(yīng)用一起地自動(dòng)進(jìn)行從反應(yīng)到測(cè)定的自動(dòng)分析裝置。
[0003]已知免疫分析方法是利用抗原抗體反應(yīng)且特異性高的測(cè)定方法。但是，存在由于樣品而產(chǎn)生假陽(yáng)性或假陰性等非特異性反應(yīng)的問題。存在顯示出與真實(shí)值不同的測(cè)定值的問題，例如，有在樣品中存在識(shí)別抗體并反應(yīng)的因子的情況，此情況下樣品中即使不存在要測(cè)定的抗原也得到陽(yáng)性的測(cè)定值，另一方面，有在樣品中存在抑制抗原抗體反應(yīng)的因子的情況，此情況下樣品中即使存在要測(cè)定的抗原也得到陰性的測(cè)定值。
[0004]作為抑制非特異性反應(yīng)的手段，已知添加人IgM天然抗體、具有砜基或其鹽的芳香族單體聚合而成的聚合物(參考專利文獻(xiàn)1、2)。但是，這些添加劑有時(shí)不充分，尤其是難以抑制低濃度區(qū)域下的非特異性反應(yīng)。進(jìn)一步地，對(duì)于高靈敏度的試劑，由于抗體反應(yīng)性增力口，非特異性反應(yīng)容易發(fā)生。
[0005]現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)
專利文獻(xiàn)1:專利4065600號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)2:專利4580180號(hào)公報(bào)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明要解決的問題
本發(fā)明的目的是，提供在免疫分析中能夠高靈敏度且正確地測(cè)定抗原的免疫分析方法及用于所述方法的試劑。
[0007]解決問題的手段
本申請(qǐng)發(fā)明人進(jìn)行了深入研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，通過使多羧酸型表面活性劑存在于免疫分析中，即使是高靈敏度的測(cè)定，也能夠容易地抑制非特異性反應(yīng)。
[0008]也即，本發(fā)明涉及下列I) _9)。
[0009]I)免疫分析方法，其在多羧酸型表面活性劑存在下進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)和/或測(cè)定。
[0010]2) I)的方法，其中，所述多羧酸型表面活性劑是:⑴馬來酸和/或馬來酸酐或其鹽與(2) 二異丁烯的共聚體。
[0011]3) I)或2)的方法，其中，在所述多羧酸型表面活性劑存在的反應(yīng)體系和/或測(cè)定體系中，該多羧酸型表面活性劑的濃度是0.001%-3%。
[0012]4) I) -3)中任一項(xiàng)的方法，其中，在所述多羧酸型表面活性劑存在下，從抗原抗體反應(yīng)開始進(jìn)行至測(cè)定結(jié)束。
[0013]5) 1)-4)中任一項(xiàng)的方法，其中，所述免疫分析方法是免疫凝集法。
[0014]6) 5)的方法，其中，所述免疫凝集法是乳膠凝集法。
[0015]7)在I)的方法中使用的免疫分析試劑，其特征是，含有多羧酸型表面活性劑。
[0016]8)7)的試劑，其中，所述多羧酸型表面活性劑是:(I)馬來酸和/或馬來酸酐與(2)二異丁烯的共聚體。
[0017]9) 7)或8)的試劑，其為用于免疫凝集的試劑，其還含有用于免疫凝集法的試劑。
[0018]10) 9)的試劑，其為用于乳膠凝集的試劑，其還含有用于乳膠凝集法的試劑。
[0019]發(fā)明的效果
根據(jù)本發(fā)明方法，通過使多羧酸型表面活性劑在反應(yīng)和/或測(cè)定體系中存在的簡(jiǎn)單手段，即使在高靈敏度的免疫分析中也能有效地抑制非特異性反應(yīng)，在免疫分析中，能夠正確地測(cè)定抗原而提高特異性。
[0020]

【專利附圖】

【附圖說明】
圖1顯示下述實(shí)施例及比較例中作出的校準(zhǔn)曲線(calibrat1n curve)。
[0021]圖2顯示下述實(shí)施例的免疫分析方法與應(yīng)用已知抑制非特異性反應(yīng)的市售試劑(現(xiàn)有試劑)的免疫分析方法的測(cè)定結(jié)果的相關(guān)關(guān)系。
[0022]圖3對(duì)圖2的低濃度區(qū)域進(jìn)行放大顯示。
[0023]圖4顯示下述比較例的免疫分析方法與應(yīng)用現(xiàn)有試劑的免疫分析方法的測(cè)定結(jié)果的相關(guān)關(guān)系。
[0024]圖5對(duì)圖4的低濃度區(qū)域進(jìn)行放大顯示。
[0025]圖6顯示下述比較例的免疫分析方法與應(yīng)用現(xiàn)有試劑的免疫分析方法的測(cè)定結(jié)果的相關(guān)關(guān)系。
[0026]圖7對(duì)圖6的低濃度區(qū)域進(jìn)行放大顯示。
[0027]圖8顯示下述比較例的免疫分析方法與應(yīng)用現(xiàn)有試劑的免疫分析方法的測(cè)定結(jié)果的相關(guān)關(guān)系。
[0028]圖9對(duì)圖8的低濃度區(qū)域進(jìn)行放大顯示。
[0029]圖10顯示下述實(shí)施例的免疫分析方法與應(yīng)用現(xiàn)有試劑的免疫分析方法的測(cè)定結(jié)果的相關(guān)關(guān)系。
[0030]圖11對(duì)圖10的低濃度區(qū)域進(jìn)行放大顯示。
[0031]圖12顯示下述實(shí)施例的免疫分析方法與應(yīng)用現(xiàn)有試劑的免疫分析方法的測(cè)定結(jié)果的相關(guān)關(guān)系。
[0032]圖13對(duì)圖12的低濃度區(qū)域進(jìn)行放大顯示。
[0033]圖14顯示下述實(shí)施例的免疫分析方法與應(yīng)用現(xiàn)有試劑的免疫分析方法的測(cè)定結(jié)果的相關(guān)關(guān)系。
[0034]圖15對(duì)圖14的低濃度區(qū)域進(jìn)行放大顯示。
[0035]圖16顯示下述實(shí)施例的免疫分析方法與應(yīng)用現(xiàn)有試劑的免疫分析方法的測(cè)定結(jié)果的相關(guān)關(guān)系。
[0036]圖17對(duì)圖16的低濃度域進(jìn)行放大顯示。
[0037]圖18顯示下述比較例的免疫分析方法與應(yīng)用現(xiàn)有試劑的免疫分析方法的測(cè)定結(jié)果的相關(guān)關(guān)系。
[0038]圖19對(duì)圖18的低濃度區(qū)域進(jìn)行放大顯示。
[0039]圖20顯示下述實(shí)施例的免疫分析方法與應(yīng)用現(xiàn)有試劑的免疫分析方法的測(cè)定結(jié)果的相關(guān)關(guān)系。
[0040]圖21對(duì)圖20的低濃度區(qū)域進(jìn)行放大顯示。
[0041]圖22顯示下述實(shí)施例的免疫分析方法與應(yīng)用現(xiàn)有試劑的免疫分析方法的測(cè)定結(jié)果的相關(guān)關(guān)系。
[0042]圖23對(duì)圖22的低濃度區(qū)域進(jìn)行放大顯示。
[0043]圖24顯示下述實(shí)施例的免疫分析方法與應(yīng)用現(xiàn)有試劑的免疫分析方法的測(cè)定結(jié)果的相關(guān)關(guān)系。
[0044]圖25對(duì)圖24的低濃度區(qū)域進(jìn)行放大顯示。
[0045]

【具體實(shí)施方式】
下文對(duì)本發(fā)明的方法進(jìn)行說明。另外，本說明書中的“％”如無特別限定則意味著質(zhì)量基準(zhǔn)(w/v%)0
[0046]本發(fā)明的免疫分析方法應(yīng)用對(duì)樣本中的被測(cè)定物質(zhì)免疫性地反應(yīng)的免疫分析試齊U，進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)，并測(cè)定得到的反應(yīng)物，其特征是，在多羧酸型表面活性劑存在下進(jìn)行反應(yīng)和/或測(cè)定。
[0047]免疫分析的手段本身是公知的。本發(fā)明方法適用的免疫分析方法可為公知的任意免疫分析方法，其中優(yōu)選免疫凝集法，尤其優(yōu)選應(yīng)用乳膠粒子作為不溶性載體粒子的乳膠凝集法。免疫凝集法中檢測(cè)敏化粒子的凝集的方法是公知的，本發(fā)明中也可使用公知方法，例如檢測(cè)敏化粒子凝集弓I起的吸光度或光散射等的方法等。例如，可列舉:免疫比濁法(TIA法、乳膠凝集法)、比色法、RPLA法、CL法及免疫層析法等，優(yōu)選應(yīng)用靈敏度高且定量精度良好的比濁法及比色法。
[0048]作為該免疫分析方法的方式，應(yīng)用的不溶性載體粒子沒有特別限制，可為免疫分析試劑中一直應(yīng)用的公知粒子。例如，可列舉:聚乙烯或聚苯乙烯等乳膠粒子、氧化鋁粒子、二氧化硅粒子、膠體金、磁性粒子等粒子。這些不溶性載體中優(yōu)選應(yīng)用乳膠粒子，特別是聚苯乙烯乳膠粒子。免疫凝集法公知為光學(xué)地檢測(cè)感應(yīng)了抗原或抗體的敏化粒子的凝集的方法，在檢測(cè)中優(yōu)選應(yīng)用比濁法或比色法。例如，從比色皿外部照射從可見光至近紅外區(qū)域的光，例如通常300-1000nm、優(yōu)選500_900nm的光，檢測(cè)吸光度變化或散射光的強(qiáng)度變化，從而測(cè)定該敏化粒子的凝集的程度。乳膠粒子特別優(yōu)選應(yīng)用聚苯乙烯乳膠粒子。乳膠粒子的尺寸沒有特別限定，優(yōu)選粒徑是30-600nm。
[0049]在上述的乳膠粒子中，固定與應(yīng)測(cè)定的抗原進(jìn)行免疫反應(yīng)的抗體或其抗原結(jié)合片段。固定的方法也是公知的，通過物理吸附或共價(jià)鍵等公知方法進(jìn)行。如果將得到的敏化粒子懸浮液與被測(cè)樣品混合，敏化粒子由于被測(cè)樣品中含有的被測(cè)定物質(zhì)(抗原)而凝集，敏化粒子懸浮液的吸光度變化。測(cè)定該吸光度的變化量(終點(diǎn)法)或變化率(比率法)。制備以各種已知濃度包含應(yīng)測(cè)定的抗原的多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品，并通過上述方法對(duì)它們測(cè)定吸光度的變化量或變化率。以標(biāo)準(zhǔn)樣品中應(yīng)測(cè)定的抗原的濃度為橫軸、以測(cè)定的吸光度變化量或變化率為縱軸繪圖，繪制校準(zhǔn)曲線。對(duì)未知的被測(cè)樣品通過相同方法測(cè)定吸光度的變化量或變化率，將測(cè)定結(jié)果與上述校準(zhǔn)曲線對(duì)照，從而能夠?qū)Ρ粶y(cè)樣品中的抗原定量。
[0050]另外，市售有各種進(jìn)行該免疫凝集法的自動(dòng)裝置，應(yīng)用市售的用于免疫凝集法的自動(dòng)裝置，能夠容易且簡(jiǎn)單地實(shí)施。
[0051]本發(fā)明中免疫分析的被測(cè)定物質(zhì)沒有任何限制，只要是能夠通過免疫分析測(cè)定的物質(zhì)即可，被測(cè)定物質(zhì)是抗原時(shí)，例如可列舉:CRP (C-反應(yīng)蛋白)、前列腺特異性抗原、鐵蛋白、β-2微球蛋白、肌紅蛋白、血紅蛋白、白蛋白、肌酸酐等蛋白標(biāo)志物，IgG、IgA、IgM等免疫球蛋白，各種腫瘤標(biāo)志物，LDL、HDL、TG等脂蛋白，甲型流感病毒(influenza Avirus)、乙型流感病毒(influenza B virus)、RS 病毒(RSV)、鼻病毒(rhinovirus)、輪狀病毒(rotavirus)、諾如病毒(norovirus)、腺病毒(adenovirus)、星狀病毒(astrovirus)、HAV> HBs> HCV、HIV、EBV 等病毒抗原，沙眼衣原體(chlamydia trachomatis)、溶血性鏈球菌(hemolytic streptococcus)、百日咳菌(bordetella pertussis)、幽門螺旋桿菌(helicobacter pylori)、鉤端螺旋體(Ieptospira)、梅毒螺旋體(treponema palidum)、弓形蟲(toxoplasma gondii)、包柔氏螺旋體(borrelia)、軍團(tuán)菌屬菌(Ieg1nella)、炭疽桿菌(anthrax bacillus)、MRSA等細(xì)菌抗原,細(xì)菌等生產(chǎn)的毒素,支原體(mycoplasma)脂質(zhì)抗原，人絨毛膜促性腺激素等肽激素、類固醇激素等類固醇，腎上腺素、嗎啡等生理活性胺類，維生素B類等維生素類，前列腺素類，四環(huán)素等抗生素，農(nóng)藥，環(huán)境激素等，但不限于此。優(yōu)選的例子可列舉:CRP、前列腺特異性抗原、鐵蛋白、β-2微球蛋白及血紅蛋白等抗原。
[0052]被測(cè)定物質(zhì)是抗體時(shí)，可列舉:與上述蛋白標(biāo)志物、各種腫瘤標(biāo)志物、脂蛋白、病毒抗原、細(xì)菌抗原、細(xì)菌等產(chǎn)生的毒素、肽激素、類固醇、生理活性胺類、維生素類、抗生素、農(nóng)藥、環(huán)境激素等抗原特異性反應(yīng)的抗體等。
[0053]免疫分析中應(yīng)用的樣本沒有特別限制，只要含有被測(cè)定物質(zhì)即可，可列舉:血液、血清、血漿、尿、便、唾液、組織液、腦脊液、拭子液等體液等或其稀釋物，優(yōu)選血液、血清、血漿、尿、便、腦脊液或其稀釋物。
[0054]如上述，本發(fā)明方法的特征是，在反應(yīng)體系和/或測(cè)定體系中，在多羧酸型表面活性劑存在的狀態(tài)下，進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)和/或測(cè)定?！岸圄人嵝捅砻婊钚詣睘椋鳛榘琁分子中具有多數(shù)羧基或其鹽、和/或酸酐基(酸酐基的至少一部分在水中水解產(chǎn)生羧基，因此在水中在I分子中具有多數(shù)羧基)的高分子的表面活性劑而為人所知的陰離子表面活性劑的一種，公知各種多羧酸型表面活性劑且有市售且在工業(yè)中使用。本發(fā)明可應(yīng)用任一多羧酸型，其中優(yōu)選:(I)馬來酸和/或馬來酸酐與(2) 二異丁烯的共聚體，和/或其鹽。此處，對(duì)鹽沒有特別限制，優(yōu)選鈉鹽。該共聚體或其鹽在工業(yè)中廣泛應(yīng)用，也有市售，因此本發(fā)明中也可優(yōu)選利用市售品(參考下述實(shí)施例)。
[0055]多羧酸型表面活性劑的重量平均分子量沒有特別限制，優(yōu)選1000-5萬左右。
[0056]本發(fā)明方法中，對(duì)于該多羧酸型表面活性劑，在從抗原抗體反應(yīng)開始至抗原抗體反應(yīng)量檢測(cè)、定量結(jié)束的任意階段，多羧酸型表面活性劑在反應(yīng)和/或測(cè)定體系(也稱為“反應(yīng)、測(cè)定體系”)中包含即可，優(yōu)選在從抗原抗體反應(yīng)開始至檢測(cè)、定量為止期間均包含。因此，多羧酸型表面活性劑優(yōu)選在抗原抗體反應(yīng)開始前或與抗原抗體反應(yīng)開始同時(shí)加入反應(yīng)體系內(nèi)。具體地，可在稀釋樣本時(shí)加入，也可在抗體或抗原與樣本混合時(shí)加入。
[0057]另外，也可使免疫分析中應(yīng)用的各種試劑中預(yù)先包含多羧酸型表面活性劑，本發(fā)明也提供含有該多羧酸型表面活性劑的免疫分析試劑。此處，免疫分析中應(yīng)用的各種試劑可列舉:例如樣本稀釋液、抗體/抗原稀釋液、固相化抗體/抗原、敏化粒子懸浮液、洗滌液、酶液、基質(zhì)液、用于制備校準(zhǔn)曲線的被測(cè)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)液等，含有多羧酸型表面活性劑的免疫分析試劑可列舉:在這些試劑中加入多羧酸型表面活性劑而成的試劑，例如，在稀釋樣本的緩沖液、含有抗體或抗原的試劑等中包含多羧酸型表面活性劑而成的試劑。
[0058]另外，例如，可使含有將抗體或抗原固定(敏化)而成的乳膠粒子(敏化粒子)的免疫凝集試劑中包含多羧酸型表面活性劑。此時(shí)，免疫分析試劑中敏化粒子的濃度沒有特別限制，優(yōu)選0.01-0.5%。敏化粒子懸浮液中抗體量及抗原量根據(jù)常規(guī)方法即可，沒有特別限制，例如在抗體敏化乳膠的情況下，優(yōu)選抗體量在乳膠懸浮液中是0.01-2.0mg/mL。
[0059]從非特異性反應(yīng)抑制方面而言，多羧酸型表面活性劑在反應(yīng)、測(cè)定體系內(nèi)的濃度優(yōu)選0.001-3%,更優(yōu)選0.005-1%。因此，免疫分析試劑中預(yù)先包含多羧酸型表面活性劑時(shí)，其可在免疫分析試劑中以使得在反應(yīng)和/或測(cè)定體系中的濃度成為上述濃度的方式包含。
[0060]免疫分析中應(yīng)用的空白樣品不含被測(cè)定物質(zhì)即可，沒有特別限制，優(yōu)選純化水、生理鹽水、緩沖液、陰性樣本或它們的稀釋物。
[0061]如下述實(shí)施例中公開地，使多羧酸型表面活性劑在反應(yīng)和/或測(cè)定體系中存在時(shí)，非特異性反應(yīng)得到抑制。并且，特異性與多羧酸型表面活性劑不存在時(shí)相比優(yōu)勢(shì)性地提高。因此，通過應(yīng)用本發(fā)明方法，尤其是在容易產(chǎn)生非特異性反應(yīng)的高靈敏度化試劑中，與以前相比可提高試劑性能。
[0062]以下，基于實(shí)施例及比較例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更具體說明。但本發(fā)明不限于下述實(shí)施例。
[0063]實(shí)施例1、比較例1-3
(I)試劑的配制
應(yīng)用針對(duì)鐵蛋白的抗體，如下配制利用免疫凝集法的測(cè)定試劑。
[0064]i)將相對(duì)于平均粒徑300nm的聚苯乙烯乳膠懸浮液ImL擔(dān)載0.03mg抗鐵蛋白抗體而成的敏化粒子，以成為0.04%的方式懸浮在緩沖液(tris、pH8.0)中，而配制乳膠懸浮液。
[0065]ii)在緩沖液(tris、pH8.5)中加入多羧酸型表面活性劑(馬來酸.二異丁烯共聚體鈉)，配制下述試劑A (實(shí)施例1)。作為比較例1-3，配制不加入任何物質(zhì)或進(jìn)一步加入其它添加劑的試劑B-D。
[0066]【表I】
例 I試劑I添加劑(濃度)—
實(shí)施例1 A_+馬來酸.二異丁烯共聚體鈉*1 1.0%_
比較例I B__
比較例@常兔球蛋白3 g /L
TE發(fā)例3 |d I+聚苯乙烯磺酸鈉*2 1.0%
*1:多羧酸型表面活性劑(陰離子表面活性劑)“polystar 0M”(商品名，日油株式會(huì)社市售)
*2:陰離子表面活性劑“PS-5”(商品名，東曹株式會(huì)社(TOSOH CORPORAT1N)市售)。
[0067](2)利用自動(dòng)分析裝置的測(cè)定
自動(dòng)分析裝置為，利用日立公司7180型自動(dòng)分析裝置通過終點(diǎn)法進(jìn)行自動(dòng)測(cè)定。
[0068]應(yīng)用前述試劑A-D，測(cè)定含有已知引起非特異性反應(yīng)的RF陽(yáng)性樣本的24個(gè)血清樣本。在樣本溶液10.0 μ L中加入試劑A-D的上述配制的緩沖液100 μ L，在37°C下攪拌混合該混合液。放置5分鐘后，加入乳膠懸浮液10(^1^，進(jìn)一步在371:下攪拌混合。以吸光度變化量測(cè)定約5分鐘的凝集反應(yīng)，通過校準(zhǔn)曲線算出各樣本的鐵蛋白濃度。
[0069](3)與現(xiàn)有試劑的靈敏度比較
上述實(shí)施例1及比較例1-3的測(cè)定靈敏度與已知抑制非特異性反應(yīng)的現(xiàn)有市售乳膠試劑FER-Latex X2 “生研” CN (Denka Seiken)(以下稱為“現(xiàn)有試劑”)的靈敏度進(jìn)行比較。結(jié)果不于圖1。
[0070]如圖1所知，在實(shí)施例1及比較例1-3的方法中，與應(yīng)用現(xiàn)有試劑的方法相比，若為相同鐵蛋白濃度，則吸光度變化量變大，實(shí)施例1及比較例1-3的方法測(cè)定靈敏度高。
[0071](4)與現(xiàn)有試劑的特異性比較
上述實(shí)施例1及比較例1-3的測(cè)定結(jié)果與應(yīng)用上述現(xiàn)有試劑的方法的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果分別示于圖2-9。
[0072]已知現(xiàn)有試劑是抑制非特異性反應(yīng)的試劑。比較顯示實(shí)施例1的結(jié)果的圖2及圖3、以及顯示各比較例的結(jié)果的圖4-圖9，顯示出在高靈敏度化的免疫分析方法中，通過加入多羧酸型表面活性劑，非特異性反應(yīng)得以抑制，與應(yīng)用現(xiàn)有試劑時(shí)的測(cè)定結(jié)果的相關(guān)性增加。顯示出尤其是低濃度區(qū)域增加。
[0073]實(shí)施例2-5、比較例4
(1)試劑的配制
應(yīng)用針對(duì)鐵蛋白的抗體，如下配制利用免疫凝集法的測(cè)定試劑。
[0074]i)將相對(duì)于平均粒徑300nm的聚苯乙烯乳膠懸浮液ImL擔(dān)載0.03mg抗鐵蛋白抗體而成的敏化粒子，以成為0.04%的方式懸浮在緩沖液(tris、pH8.0)中，配制乳膠懸浮液。
[0075]ii)在緩沖液(tris、pH8.5)中加入多羧酸型表面活性劑(馬來酸.二異丁烯共聚體鈉、“polystar 0M”(商品名，日油株式會(huì)社市售))，配制下述試劑E-H (實(shí)施例2_5)。作為比較例4，配制不加入任何物質(zhì)的試劑I。
[0076]【表2】

【權(quán)利要求】
1.免疫分析方法，其在多羧酸型表面活性劑的存在下進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)和/或測(cè)定。
2.權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述多羧酸型表面活性劑是:(I)馬來酸和/或馬來酸酐與(2) 二異丁烯的共聚體，和/或其鹽。
3.權(quán)利要求1或2所述的方法，其中，在所述多羧酸型表面活性劑存在的反應(yīng)體系和/或測(cè)定體系中，所述多羧酸型表面活性劑的濃度是0.001%-3%。
4.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其中，在所述多羧酸型表面活性劑的存在下，從抗原抗體反應(yīng)開始進(jìn)行至測(cè)定結(jié)束。
5.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述免疫分析方法是免疫凝集法。
6.權(quán)利要求5所述的方法，其中，所述免疫凝集法是乳膠凝集法。
7.在權(quán)利要求1所述的方法中使用的免疫分析試劑，其特征在于，含有多羧酸型表面活性劑。
8.權(quán)利要求7所述的試劑，其中，所述多羧酸型表面活性劑是:(I)馬來酸和/或馬來酸酐與(2) 二異丁烯的共聚體。
9.權(quán)利要求7或8所述的試劑，其為用于免疫凝集的試劑，其還含有用于免疫凝集法的試劑。
10.權(quán)利要求9所述的試劑，其為用于乳膠凝集的試劑，其還含有用于乳膠凝集法的試劑。
【文檔編號(hào)】G01N33/543GK104204801SQ201380017740
【公開日】2014年12月10日 申請(qǐng)日期:2013年3月28日 優(yōu)先權(quán)日:2012年3月30日
【發(fā)明者】M.加納, 橘律子, 飯塚雅行 申請(qǐng)人:電化生研株式會(huì)社