一種具有磷光離子對結(jié)構(gòu)的銥配合物及其制備方法和應(yīng)用與流程

本發(fā)明涉及一種具有磷光離子對結(jié)構(gòu)的銥配合物及其制備方法和應(yīng)用，屬于有機(jī)光電功能材料技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

光動(dòng)力療法(photodynamictherapy，pdt)是一種無創(chuàng)或微創(chuàng)性，非熱性的，利用光化學(xué)反應(yīng)靶向組織和靶向腫瘤細(xì)胞的治療方法。pdt是一種冷光化學(xué)反應(yīng)，其基本要素是氧、光敏劑和可見光(常用激光)。首先腫瘤組織選擇性攝取光敏劑，隨后選擇適當(dāng)波長的激光對局部照射，光敏劑能夠吸收該光源光子的能量而達(dá)到激發(fā)態(tài)單重態(tài)，光敏劑由激發(fā)單重態(tài)經(jīng)過隙間穿越到光敏劑激發(fā)三重態(tài)。由于光敏劑在激發(fā)三重態(tài)與氧氣的能級(jí)匹配而發(fā)生能量轉(zhuǎn)移，光敏劑將能量傳遞給周圍的基態(tài)氧分子，基態(tài)氧分子發(fā)生光氧化反應(yīng)生成單線態(tài)氧或氧自由基等。單線態(tài)氧和相鄰的生物大分子如核酸、蛋白質(zhì)發(fā)生氧化反應(yīng)，產(chǎn)生細(xì)胞毒作用而導(dǎo)致細(xì)胞受損乃至死亡。與傳統(tǒng)的手術(shù)、化學(xué)治療、放射治療三大腫瘤治療手段相比，光動(dòng)力學(xué)治療具有毒性低微、適用性廣、創(chuàng)傷性小、可協(xié)同手術(shù)提高治療效果、選擇性高、可重復(fù)治療、對重要器官的傷害小、可以消除隱藏性的腫瘤組織等特點(diǎn)。

利用陰陽離子兩個(gè)組分之間的能量傳遞有利于提高單線態(tài)氧的產(chǎn)率，如wang等的工作(j.am.chem.soc.,2009,131,13117-13124)。但此工作是基于陽離子有機(jī)染料與陰離子共軛聚合物，結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜，不利于合成與制備。目前金屬銥配合物作為光敏劑，在光動(dòng)力治療領(lǐng)域扮演著重要的角色。由于金屬銥配合物中重原子銥原子可以誘導(dǎo)強(qiáng)的自旋電感耦合來增強(qiáng)了激發(fā)單重態(tài)到激發(fā)三重態(tài)之間的隙間竄越效率，到達(dá)激發(fā)三重態(tài)的金屬銥配合物的能量一邊以磷光的形式釋放出，一邊通過能量轉(zhuǎn)移或電荷轉(zhuǎn)移到基態(tài)氧氣生成活性氧或者單線態(tài)氧，這將金屬銥配合物的應(yīng)用范圍拓展到光動(dòng)力學(xué)治療領(lǐng)域。然而，目前關(guān)于利用磷光離子對銥配合物作為光敏劑應(yīng)用于光動(dòng)力治療領(lǐng)域還未見報(bào)道。通常陰陽離子配合物之間會(huì)存在能量傳遞提高單線態(tài)氧產(chǎn)率，因此設(shè)計(jì)合成結(jié)構(gòu)更為簡單的基于磷光離子對配合物的光敏劑是非常有必要的。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明解決的技術(shù)問題是：提出一種具有離子對結(jié)構(gòu)的銥配合物，給出它們的制備方法，并提出這類配合物在光動(dòng)力治療領(lǐng)域中的應(yīng)用。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提出的技術(shù)方案是：一種具有磷光離子對結(jié)構(gòu)的銥配合物，該離子對銥配合物具有如下結(jié)構(gòu)式：

r1、r2可以為下列結(jié)構(gòu)的一種：

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提出的技術(shù)方案是：一種具有磷光離子對結(jié)構(gòu)的銥配合物制備方法，該方法的合成路線如下：

具體是：步驟一，如上式反應(yīng)ⅰ所示將醛基化合物與2-乙酰基吡啶、氫氧化鈉和氨水在乙醇溶液中25℃反應(yīng)12小時(shí)得到三聯(lián)吡啶衍生物；

步驟二，如上式反應(yīng)ⅱ所示，將反應(yīng)ⅰ得到的三聯(lián)吡啶衍生物與三水合三氯化銥在乙二醇乙醚溶液中氮?dú)獗Ｗo(hù)下160℃密閉避光反應(yīng)15分鐘，冷卻至室溫后，抽濾水、冷乙醇和乙醚分別洗滌，得到三聯(lián)吡啶銥配合物；

步驟三，如上式反應(yīng)ⅲ所示，將反應(yīng)ii得到的三聯(lián)吡啶銥配合物與另一個(gè)三聯(lián)吡啶衍生物在乙二醇乙醚溶液中氮?dú)獗Ｗo(hù)下180℃密閉避光反應(yīng)15分鐘，冷卻至室溫后加入六氟磷酸鉀水溶液繼續(xù)反應(yīng)5分鐘，抽濾水洗得到對稱或不對稱的陽離子三聯(lián)吡啶銥配合物；

步驟四，如上式反應(yīng)ⅳ所示，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，c^n配體與三水合三氯化銥在乙二醇乙/水體積比為3:1混合液中110℃密閉反應(yīng)24小時(shí)得到銥二氯橋；

步驟五，如上式反應(yīng)ⅴ所示，反應(yīng)iv得到的將得到的二氯橋與四丁基氰胺在二氯甲烷/甲醇體積比為2:1混合液中氮?dú)獗Ｗo(hù)下25℃反應(yīng)4小時(shí)，層析柱分離提純得到陰離子銥配合物；

步驟六，將反應(yīng)v得到的陰離子銥配合物與步驟iii得到的陽離子三聯(lián)吡啶銥配合物在丙酮溶液中25℃反應(yīng)4小時(shí)，加水?dāng)嚢璩闉V，沉淀經(jīng)提純得到最終的離子對銥配合物。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提出的技術(shù)方案是：所述的磷光離子對銥配合物的應(yīng)用，其特征在于所述離子對銥配合物可應(yīng)用于非疾病的診斷和治療目的的光敏劑，在白光照射下產(chǎn)生單線態(tài)氧。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提出的技術(shù)方案是：所述的磷光離子對銥配合物的應(yīng)用，其特征在于所述離子對銥配合物通過陰陽離子配合物之間的能量傳遞，可應(yīng)用于非疾病的診斷和治療目的的提高單線態(tài)氧產(chǎn)率。

本發(fā)明的有益效果：

本發(fā)明的磷光離子對銥配合物陰陽離子之間存在能量傳遞，使之光照下單線態(tài)產(chǎn)率得以提高。

本發(fā)明的磷光離子對銥配合物具有較低暗毒性及較高的光毒性，是很好的應(yīng)用于光動(dòng)力治療的光敏劑。

附圖說明

下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的作進(jìn)一步說明。

圖1.銥配合物ir-1、ir-2以及ir-3的紫外-可見吸收光譜；

圖2.銥配合物ir-1、銥配合物ir-2與銥配合物ir-3的單線態(tài)氧產(chǎn)率對比；

圖3.銥配合物ir-1、銥配合物ir-2不同比例的單線態(tài)產(chǎn)率；

圖4.銥配合物ir-3在細(xì)胞中產(chǎn)生單線態(tài)氧的檢測實(shí)驗(yàn)；

圖5.銥配合物ir-3光動(dòng)力治療效果的流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。

具體實(shí)施方式

為了更好地理解本發(fā)明專利的內(nèi)容，下面通過具體的實(shí)例來進(jìn)一步說明本發(fā)明的技術(shù)方案。但這些實(shí)施實(shí)例并不限制本發(fā)明。

實(shí)施例1：

陽離子銥配合物ir-1的制備：

如上圖所示，如反應(yīng)ⅰ所示，稱取苯甲醛(1mmol)、2-乙?；拎?4mmol)、氫氧化鈉(4.2mmol)，氨水(3mmol)投入反應(yīng)瓶中，加入乙醇，25℃磁力攪拌12小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后過濾沉淀，并用乙醇重結(jié)晶得到的重結(jié)晶產(chǎn)物即為苯基三聯(lián)吡啶，烘干后可直接投入下一步反應(yīng)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.76–8.71(m,4h),8.67(t,j＝6.4hz,2h),7.94–7.85(m,4h),7.49(dt,j＝20.0,4.9hz,3h),7.35(dt,j＝10.8,5.2hz,2h)。

如反應(yīng)ⅱ所示，稱取苯基三聯(lián)吡啶(1mmol)與ircl3·3h2o(1mmol)混合投入三頸瓶中，在雙排管上抽真空-保氮?dú)?抽真空，循環(huán)往復(fù)三次，最后采用氮?dú)獗Ｗo(hù)整個(gè)反應(yīng)體系。將乙二醇乙醚注射進(jìn)反應(yīng)體系中，升溫至160℃，磁力攪拌反應(yīng)15分鐘。反應(yīng)結(jié)束后，將體系冷卻至室溫，過濾沉淀，并用水、冷乙醇和乙醚分別洗滌，得到的固體產(chǎn)物即為單配合的苯基三聯(lián)吡啶銥配合物，烘干后可直接投入下一步反應(yīng)。

如反應(yīng)ⅲ所示，稱取苯基三聯(lián)吡啶銥配合物(1mmol)與9-己基咔唑-3-苯基三聯(lián)吡啶(1mmol)混合投入三頸瓶中，在雙排管上抽真空-保氮?dú)?抽真空，循環(huán)往復(fù)三次，最后采用氮?dú)獗Ｗo(hù)整個(gè)反應(yīng)體系。將乙二醇乙醚注射進(jìn)反應(yīng)體系中，升溫至180℃，磁力攪拌反應(yīng)15分鐘。反應(yīng)結(jié)束后，將體系冷卻至室溫，將含2(mmol)氯氟磷酸鉀的水溶液注射進(jìn)入反應(yīng)體系，磁力攪拌5分鐘，過濾沉淀，并用水、冷乙醇和乙醚分別洗滌，得到的固體產(chǎn)物用乙腈/乙醚重結(jié)晶，得到的橙黃色固體產(chǎn)物即為陽離子銥配合物ir-1。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.68(s,2h),9.61(s,2h),9.30(s,1h),9.27–9.18(m,4h),8.59(d,j＝8.5hz,1h),8.44(d,j＝7.6hz,2h),8.37(dt,j＝14.5,7.4hz,5h),8.05(d,j＝8.9hz,1h),7.99(d,j＝5.1hz,2h),7.95(d,j＝5.3hz,2h),7.84(t,j＝7.7hz,2h),7.76(dd,j＝12.8,7.9hz,2h),7.59(dt,j＝12.6,7.0hz,5h),7.40(t,j＝7.6hz,1h),4.58(t,j＝7.0hz,2h),1.94–1.74(m,2h),1.50–1.17(m,6h),0.82(t,j＝7.1hz,3h)。

實(shí)施例2：

陰離子銥配合物ir-2的制備：

如反應(yīng)ⅳ所示，稱取苯基吡啶(2.5mmol)與ircl3·3h2o(1mmol)混合投入三頸瓶中，在雙排管上抽真空-保氮?dú)?抽真空，循環(huán)往復(fù)三次，最后采用氮?dú)獗Ｗo(hù)整個(gè)反應(yīng)體系。將體積比為3:1的乙二醇乙醚和水的混合物注射進(jìn)反應(yīng)體系中，升溫至110℃，磁力攪拌反應(yīng)24小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，將體系冷卻至室溫，過濾沉淀，并用乙醇和水洗，得到的固體產(chǎn)物即為苯基吡啶銥二氯橋，干燥后可直接投入下一步反應(yīng)。

如反應(yīng)ⅴ所示，稱取苯基吡啶銥二氯橋(1mmol)與四丁基氰胺(2.3mmol)混合加入至反應(yīng)瓶中，將體積比為2:1的二氯甲烷和甲醇的混合物注入體系中，將溫度控制在25℃，攪拌反應(yīng)4小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后用柱層析的方法分離，旋除展開劑并真空干燥，即得陰離子型銥配合物ir-2。

實(shí)施例3：

磷光離子對銥配合物ir-3的制備：

如反應(yīng)ⅵ所示稱取陽離子型銥配合物ir-1(1mmol)與陰離子型銥配合物ir-2(3mmol)混合加入至反應(yīng)瓶中，將丙酮注入體系中，將溫度控制在25℃，攪拌反應(yīng)4小時(shí)后，將少量的水注入體系中攪拌1分鐘，抽濾，固體產(chǎn)物經(jīng)丙酮和乙醚重結(jié)晶，得到固體產(chǎn)物即為銥配合物ir-3。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.68(s,2h),9.61(s,2h),9.30(s,1h),9.27–9.18(m,4h),8.59(d,j＝8.5hz,1h),8.44(d,j＝7.6hz,2h),8.37(dt,j＝14.5,7.4hz,5h),8.05(d,j＝8.9hz,1h),7.99(d,j＝5.1hz,2h),7.95(d,j＝5.3hz,2h),7.84(t,j＝7.7hz,2h),7.76(dd,j＝12.8,7.9hz,2h),7.59(dt,j＝12.6,7.0hz,5h),7.40(t,j＝7.6hz,1h),4.58(t,j＝7.0hz,2h),1.94–1.74(m,2h),1.50–1.17(m,6h),0.82(t,j＝7.1hz,3h)。

同上ir1制備過程，我們制備了下列陽離子銥配合物ir-4至ir-7：

ir-4：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.59(d,j＝8.0hz,4h),9.20(d,j＝8.2hz,4h),8.48–8.30(m,9h),7.93(t,j＝4.5hz,4h),7.83(t,j＝7.6hz,2h),7.63(d,j＝8.5hz,2h),7.59–7.49(m,4h),1.21(s,3h)。

ir-5：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.58(s,2h),9.42(s,2h),9.18(dd,j＝8.1,3.0hz,4h),8.41(dd,j＝8.0,6.5hz,4h),8.33(td,j＝8.3,1.1hz,4h),7.96(d,j＝5.5hz,2h),7.90(d,j＝5.4hz,2h),7.82(t,j＝7.6hz,1h),7.74(t,j＝7.4hz,4h),7.53(ddd,j＝16.5,10.3,4.1hz,2h),3.16(s,6h)。

ir-6：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.68(s,2h),9.61(s,2h),9.20(t,j＝7.5hz,4h),8.62(d,j＝8.2hz,2h),8.44(d,j＝7.5hz,2h),8.37(td,j＝8.0,1.3hz,4h),8.24(d,j＝8.4hz,2h),7.94(t,j＝6.5hz,4h),7.83(t,j＝7.6hz,2h),7.75(t,j＝7.4hz,1h),7.60–7.51(m,4h)。

ir-7：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.68(s,2h),9.59(s,2h),9.30(s,1h),9.23(t,j＝8.1hz,4h),8.59(d,j＝8.8hz,1h),8.37(ddd,j＝20.0,8.0,4.1hz,7h),8.05(d,j＝8.7hz,1h),7.97(dd,j＝13.4,5.7hz,4h),7.77(d,j＝8.3hz,1h),7.66–7.51(m,7h),7.39(t,j＝7.3hz,1h),4.58(t,j＝6.8hz,2h),2.07(s,3h),1.42–1.17(m,8h),0.82(t,j＝7.1hz,3h)。

同上ir3制備過程，利用對應(yīng)陽離子銥配合物ir-4至ir-7我們制備了下列磷光離子對銥配合物ir-8至ir-11：

ir-8：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.59(d,j＝8.0hz,4h),9.20(d,j＝8.2hz,4h),8.48–8.30(m,9h),7.93(t,j＝4.5hz,4h),7.83(t,j＝7.6hz,2h),7.63(d,j＝8.5hz,2h),7.59–7.49(m,4h),1.21(s,3h)。

ir-9：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.58(s,2h),9.42(s,2h),9.18(dd,j＝8.1,3.0hz,4h),8.41(dd,j＝8.0,6.5hz,4h),8.33(td,j＝8.3,1.1hz,4h),7.96(d,j＝5.5hz,2h),7.90(d,j＝5.4hz,2h),7.82(t,j＝7.6hz,1h),7.74(t,j＝7.4hz,4h),7.53(ddd,j＝16.5,10.3,4.1hz,2h),3.16(s,6h)。

ir-10：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.68(s,2h),9.61(s,2h),9.20(t,j＝7.5hz,4h),8.62(d,j＝8.2hz,2h),8.44(d,j＝7.5hz,2h),8.37(td,j＝8.0,1.3hz,4h),8.24(d,j＝8.4hz,2h),7.94(t,j＝6.5hz,4h),7.83(t,j＝7.6hz,2h),7.75(t,j＝7.4hz,1h),7.60–7.51(m,4h)。

ir-11：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.68(s,2h),9.59(s,2h),9.30(s,1h),9.23(t,j＝8.1hz,4h),8.59(d,j＝8.8hz,1h),8.37(ddd,j＝20.0,8.0,4.1hz,7h),8.05(d,j＝8.7hz,1h),7.97(dd,j＝13.4,5.7hz,4h),7.77(d,j＝8.3hz,1h),7.66–7.51(m,7h),7.39(t,j＝7.3hz,1h),4.58(t,j＝6.8hz,2h),2.07(s,3h),1.42–1.17(m,8h),0.82(t,j＝7.1hz,3h)。

銥配合物ir-1、ir-2及ir-3的吸收光譜測試：

本發(fā)明采用的光譜測試濃度為ir-1與ir-3為10μm、ir-2為30μm，測試溶劑為乙腈溶液，測發(fā)射光譜時(shí)。

配合物的吸收如圖1所示。配合物在紫外區(qū)250-380nm以及可見藍(lán)光區(qū)400-500nm均表現(xiàn)出了較強(qiáng)的吸收，特別是該配合物能夠被可見光激發(fā)，在做細(xì)胞成像實(shí)驗(yàn)時(shí)大大減少了激發(fā)光源對細(xì)胞的損傷。

銥配合物ir-4、ir-2、ir-8(ir-5、ir-2、ir-9/ir-6、ir-2、ir-10/ir-7、ir-2、ir-11)的吸收光譜測試結(jié)果基本同銥配合物ir-1、ir-2及ir-3。

銥配合物ir-1、ir-2、ir-3以及ir-1：ir-2＝(1:1/1:2/1:3/1:4)的單線態(tài)氧產(chǎn)率實(shí)驗(yàn)：

本發(fā)明采用的單線態(tài)氧產(chǎn)率實(shí)驗(yàn)采用的測試濃度為ir-1與ir-3為10μm、ir-2為30μm，測試溶劑為乙腈溶液，采用白光照射，氙燈功率為12mw，以1,3-二苯基異苯并呋喃(dpbf)為單線態(tài)氧消耗劑，通過參比法測定了配合物的單線態(tài)氧產(chǎn)率。

配合物的單線態(tài)氧量子產(chǎn)率如圖2所示。在圖中dpbf的吸收基本不隨光照時(shí)間增長而改變，證實(shí)了光照下配合物ir-1、ir-2及ir-3產(chǎn)生了單線態(tài)氧。通過對比我們發(fā)現(xiàn)磷光離子對銥配合物ir-3的單線態(tài)氧產(chǎn)率最高，說明離子對銥配合物可用于光動(dòng)力治療，通過陰陽離子配合物之間的能量傳遞，提高了單線態(tài)氧產(chǎn)率。

ir-1：ir-2＝(1:1/1:2/1:3/1:4)的單線態(tài)氧產(chǎn)率如圖3所示，通過與ir-1、ir-2比較，本發(fā)明的磷光離子對銥配合物ir-3的陰陽離子之間存在能量傳遞，使之光照下單線態(tài)產(chǎn)率得以提高，說明陰陽離子配合物之間的能量傳遞，提高了單線態(tài)氧產(chǎn)率。

銥配合物ir-4、ir-2、ir-8以及ir-4：ir-2＝(1:1/1:2/1:3/1:4)[(ir-5、ir-2、ir-9以及ir-5：ir2＝(1:1/1:2/1:3/1:4)/ir-6、ir-2、ir-10以及ir-6：ir2＝(1:1/1:2/1:3/1:4)/ir-7、ir-2、ir-11)以及ir-7：ir2＝(1:1/1:2/1:3/1:4)]的單線態(tài)氧產(chǎn)率實(shí)驗(yàn)結(jié)果基本同上。

磷光離子對銥配合物ir-3在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生單線態(tài)氧的檢測實(shí)驗(yàn)：

我們利用一種檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧的熒光探針(dcfh-da)，對ir-3在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的活性氧進(jìn)行檢測。因?yàn)?，dcfh-da可以進(jìn)入到細(xì)胞中并在細(xì)胞內(nèi)水解酶的作用下轉(zhuǎn)變成dcfh，當(dāng)細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生活性氧時(shí)，dcfh被氧化生成量子效率很高的綠光dcf，從而實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞內(nèi)活性氧檢測的turn-on響應(yīng)。用ir-3孵育hepg2細(xì)胞，加入dcfh-da溶液到細(xì)胞培養(yǎng)液中，繼續(xù)孵育。之后用12mwcm^-2的白光分別照射細(xì)胞，再用激光掃描共聚焦顯微鏡對細(xì)胞內(nèi)dcf發(fā)出的熒光波段進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)熒光成像。然后收集dcf在505-560nm波段的光信號(hào)。如圖4所示，經(jīng)過一段時(shí)間的光照之后，細(xì)胞內(nèi)505-560nm波段的光信號(hào)明顯增強(qiáng)，證明了細(xì)胞中活性氧的產(chǎn)生。因此，證明了ir-3在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生活性氧的能力。

磷光離子對銥配合物ir-8、ir-9、ir-10、ir-11在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生單線態(tài)氧的檢測實(shí)驗(yàn)結(jié)果基本同ir-3。

磷光離子對銥配合物ir-3光動(dòng)力治療效果的流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：

為了研究磷光離子對銥配合物在pdt應(yīng)用中的效果，我們以hepg2細(xì)胞系為模型作為離子對光動(dòng)力學(xué)抗癌治療應(yīng)用的研究對象。我們通過annexinv-fitc/propidiumiodide(pi)雙熒光染色實(shí)驗(yàn)，用以監(jiān)測細(xì)胞細(xì)胞凋亡，進(jìn)而研究磷光離子對銥配合物調(diào)節(jié)下的光動(dòng)力學(xué)治療誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡。因?yàn)樵缙诘蛲龅募?xì)胞會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)膜外翻，進(jìn)而將其內(nèi)膜上的絲氨酸蛋白酶暴露在溶液中，annexinv-fitc可以特異性與絲氨酸蛋白酶結(jié)合而導(dǎo)致熒光增強(qiáng)，從而實(shí)現(xiàn)對早期凋亡細(xì)胞的檢測，pi可以與細(xì)胞中的dna結(jié)合，實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞核的特異性染色，但是其無法穿過正常細(xì)胞完整的細(xì)胞膜，而細(xì)胞膜完整性和通透性會(huì)在細(xì)胞處于凋亡晚期或壞死時(shí)而變?nèi)?，因此pi可以實(shí)現(xiàn)對凋亡晚期或壞死細(xì)胞的細(xì)胞核進(jìn)行染色。因而，在流式細(xì)胞分析實(shí)驗(yàn)中，不同的熒光染色情況annexinv-fitc^-/pi^-，annexinv-fitc⁺/pi^-和annexinv-fitc⁺/pi⁺分別對應(yīng)處于正常狀態(tài)下的活細(xì)胞、處于凋亡早期的細(xì)胞和處于凋亡晚期或已經(jīng)壞死的細(xì)胞如圖5所示，在不施加光照的情況下含有ir-3材料的細(xì)胞相比不加材料的細(xì)胞，凋亡或壞死細(xì)胞的比例僅由1.62％上升到2.24％，說明ir-3材料在黑暗條件下較低的暗毒性，具有良好的生物相容性；在經(jīng)過相同的光照的條件下，含有材料的細(xì)胞相比不加材料的細(xì)胞，凋亡或壞死細(xì)胞的比例由7％上升到了11.5％，說明材料具有較高的光毒性。

磷光離子對銥配合物ir-8、ir-9、ir-10、ir-11的光動(dòng)力治療效果的流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果基本同ir-3。

本發(fā)明的磷光離子對銥配合物具有較低暗毒性及較高的光毒性，是很好的應(yīng)用于光動(dòng)力治療的光敏劑。

本發(fā)明的不局限于上述實(shí)施例所述的具體技術(shù)方案，凡采用等同替換形成的技術(shù)方案均為本發(fā)明要求的保護(hù)范圍。