本發(fā)明屬于化學(xué)合成領(lǐng)域，具體涉及一種3,4-二芳基馬來酰亞胺衍生物及其制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
心腦血管疾病是當(dāng)今危害人類生命健康的第一大殺手，由血脂代謝紊亂所引起的高血脂癥是引發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化、肝硬化、高血壓等心腦血管疾病的重要原因之一。目前臨床上所使用的降膽固醇藥物主要有他汀類藥物、貝特類藥物、煙酸衍生物及膽酸螯合劑，但這些藥物的副作用也很明顯，特別是他汀類藥物中的西立伐他汀由于橫紋肌溶解的副作用造成多例臨床死亡的病例。(3r,4s)-1-(4-氟苯基)-3-[(3s)-3-(4-氟苯基)-3-羥丙基]-4-(4-羥苯基)-2-氮雜環(huán)丁酮(依澤替米貝，ezetimibe，zetiatm)是merck/schering-plough公司研制的新型膽固醇吸收抑制劑，于2002年11月在德國上市，同期在美國上市。該藥選擇性地抑制了膽固醇在腸道內(nèi)的吸收，從而達(dá)到降低血清中膽固醇的目的，發(fā)揮降血脂作用。依澤替米貝是目前唯一上市的膽固醇吸收抑制劑，但其不能有效地逆轉(zhuǎn)動(dòng)脈粥樣硬化、有潛在的安全性風(fēng)險(xiǎn)等問題。因此，尋求活性更強(qiáng)的膽固醇吸收抑制劑具有重要研究意義和應(yīng)用前景。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種3,4-二芳基馬來酰亞胺衍生物，以解決現(xiàn)有技術(shù)存在的效果不佳和有潛在的安全性風(fēng)險(xiǎn)等問題。
本發(fā)明還要解決的技術(shù)問題是提供上述3,4-二芳基馬來酰亞胺衍生物的制備方法。
本發(fā)明最后要解決的技術(shù)問題是提供上述3,4-二芳基馬來酰亞胺衍生物的應(yīng)用。
為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：
一種由下述通式ⅰ表示的3,4-二芳基馬來酰亞胺衍生物及其藥用鹽形式：
其中，
n為2、3或4；
r1為-oh或-och2(conhch2)2cooh；
ar為r2取代的芳基，r2取代基的個(gè)數(shù)為1～5個(gè)，各自獨(dú)立的取自-or3、-o(co)r3、-o(co)or3、-o(ch2)1～5or3、-o(ch2)1～2o-、-o(co)nr3r4、-nr3r4、-nr3(co)r4、-nr3(co)or4、-nr3(co)nr4r5、-nr3so2-低級烷基、-nr3so2-芳基、-conr3r4、-cor3、-so2nr3r4、s(o)0～2-芳基、-o(ch2)1～10coor3、-o(ch2)1～10conr3r4、氫、鄰-鹵代、間-鹵代、對-鹵代、鄰-低級烷基、間-低級烷基、對-低級烷基、芳基、-no2、-ocf3、-cf3、-低級亞烷基-coor3或-ch＝ch-coor3；
r3、r4和r5各自獨(dú)立的取自氫、低級烷基、芳基或芳基取代的低級烷基；
所述的低級烷基為碳數(shù)1～6的直鏈烷基或者總碳數(shù)1～6的帶支鏈的烷基，優(yōu)選甲基、乙基、正丙級、異丙基、叔丁基、正戊基或正己基；
所述的低級烷基優(yōu)選為碳數(shù)1～3的直鏈烷基或者總碳數(shù)1～3的帶支鏈的烷基，進(jìn)一步優(yōu)選為甲基、乙基或正丙基。
所述的低級亞烷基為碳數(shù)1～6的亞烷基，優(yōu)選亞甲基、1,2-亞乙基、1,3-亞丙基、1,4-亞丁基、1,5-亞戊基或1,6-亞己基。
其中，ar優(yōu)選為
其中，當(dāng)n為2或3時(shí)，r1為-oh；當(dāng)n為4時(shí)，r1為-och2(conhch2)2cooh。
其中，所述的3,4-二芳基馬來酰亞胺衍生物的優(yōu)選方案如下：
2-(2-(2-(4-(n-(4-苯磺酰胺基丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酰氨基)乙酰氨基)乙酸(i-1)；
2-(2-(2-(4-(n-(4-(4-氟苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酰氨基)乙酰氨基)乙酸(i-2)；
2-(2-(2-(4-(n-(4-(4-甲基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酰氨基)乙酰氨基)乙酸(i-3)；
2-(2-(2-(4-(n-(4-(4-三氟甲基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酰氨基)乙酰氨基)乙酸(i-4)；
2-(2-(2-(4-(n-(4-(2-溴苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酰氨基)乙酰氨基)乙酸(i-5)；
2-(2-(2-(4-(n-(4-(4-乙基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酰氨基)乙酰氨基)乙酸(i-6)；
2-(2-(2-(4-(n-(4-(噻吩-2-磺酰胺)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酰氨基)乙酰氨基)乙酸(i-7)；
2-(2-(2-(4-(n-(4-(2-三氟甲氧基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酰氨基)乙酰氨基)乙酸(i-8)；
2-(2-(2-(4-(n-(4-(4-三氟甲氧基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酰氨基)乙酰氨基)乙酸(i-9)；
2-(2-(2-(4-(n-(4-(4-叔丁基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酰氨基)乙酰氨基)乙酸(i-10)；
n-(4-(4-氟苯磺酰胺基)乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-羥基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮(i-11)；
n-(4-(4-乙基苯磺酰胺基)乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-羥基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮(i-12)；
n-(4-(4-三氟甲基苯磺酰胺基)乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-羥基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮(i-13)；
n-(4-(4-三氟甲氧基苯磺酰胺基)乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-羥基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮(i-14)；
n-(4-(4-氟苯磺酰胺基)丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-羥基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮(i-15)；
n-(4-(4-乙基苯磺酰胺基)丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-羥基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮(i-16)；
n-(4-(4-三氟甲基苯磺酰胺基)丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-羥基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮(i-17)；
n-(4-(4-三氟甲氧基苯磺酰胺基)丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-羥基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮(i-18)。
上述化合物i-1～i-18的r1-、ar-基團(tuán)選擇見表1。
表1
上述3,4-二芳基馬來酰亞胺衍生物的制備方法，它包括如下步驟：
(1)以化合物1為起始原料，與溴經(jīng)α溴代反應(yīng)得到化合物2；化合物2與疊氮化鈉反應(yīng)得到化合物3；化合物3與hcl經(jīng)氫化反應(yīng)得到化合物4；
(2)以化合物5為起始原料，與lioh經(jīng)水解反應(yīng)得到化合物6；
(3)步驟(1)中制備得到化合物4和步驟(2)中制備得到的化合物6縮合，得到化合物7；化合物7與三乙胺發(fā)生分子內(nèi)縮合反應(yīng)，得到化合物8；化合物8與ch3ona反應(yīng)，脫去保護(hù)基得到化合物9；化合物9和有機(jī)堿在溶劑中經(jīng)氧化反應(yīng)得到化合物10；
(4)將步驟(3)中制備得到的化合物10與1,4-二溴丙烷和無機(jī)堿反應(yīng)，得到中間體11；中間體11與bbr3反應(yīng)脫去保護(hù)基得到中間體12；中間體12與溴代乙酸甲酯和k2co3反應(yīng)得到中間體13；中間體13、ki、k2co3和化合物ⅱ反應(yīng)得到中間體14；中間體14和lioh反應(yīng)，經(jīng)水解得到中間體15；中間體15、雙甘肽甲酯鹽酸鹽、n，n-二異丙基乙胺、1-羥基苯并三唑和碳化二亞胺反應(yīng)得到中間體16；中間體16經(jīng)水解得到n為4，r1為-och2(conhch2)2cooh的化合物ⅰ；
將步驟(3)中制備得到的化合物10與1,2-二溴乙烷或1,3-二溴丙烷在無機(jī)堿作用下反應(yīng)得到中間體17；中間體17、ki、k2co3和化合物ⅱ反應(yīng)得到中間體18；中間體18脫去保護(hù)基得到n為2或3，r1為-och2(conhch2)2cooh的的化合物?。?/p>
步驟(1)中，化合物1和溴的摩爾比為1：1～1.1，溴化反應(yīng)時(shí)間為8～10h，反應(yīng)溫度為室溫。
步驟(1)中，化合物2和疊氮化鈉的摩爾比為1：1.2～1.5，兩者間的反應(yīng)時(shí)間為6～8h，反應(yīng)溫度為-5～5℃。
步驟(1)中，化合物3和hcl的摩爾比為1：2～4，所用催化劑為鈀碳，反應(yīng)時(shí)間為8～10h，反應(yīng)溫度為室溫。
步驟(2)中，化合物5和lioh的摩爾比為1：1.5～3，反應(yīng)時(shí)間為4～8h，反應(yīng)溫度為室溫。
步驟(3)中，化合物4和化合物6的摩爾比為1：1～1.5，兩者間的反應(yīng)時(shí)間為5～10h，反應(yīng)溫度為室溫。
步驟(3)中，化合物7和三乙胺的摩爾比為1：5～10，內(nèi)縮合反應(yīng)的時(shí)間為3～8h，反應(yīng)溫度為60～90℃。
步驟(3)中，化合物8和ch3ona的摩爾比為1：1～1.5，反應(yīng)時(shí)間為1～4h，反應(yīng)溫度為-10～10℃。
步驟(3)中，化合物9和有機(jī)堿的摩爾比為1：1～3，反應(yīng)時(shí)間是0.5～1.5h，反應(yīng)溫度為-5～5℃；其中，所述的有機(jī)堿為nah、ch3ona、t-buok或dbu，所述的溶劑為dmf、ch3oh、t-buoh或ch3cn。
步驟(4)中，化合物10和1,4-二溴丙烷的摩爾比為1：4～10，化合物10和無機(jī)堿的摩爾比為1：1～2，三者間的反應(yīng)時(shí)間為16～32h，反應(yīng)溫度為60～90℃；其中，所述的無機(jī)堿為k2co3或na2co3。
步驟(4)中，中間體11和bbr3的摩爾比為1：2～4，兩者間的反應(yīng)時(shí)間為0.5～1h，反應(yīng)溫度為-78～-20℃。
步驟(4)中，中間體12和溴代乙酸甲酯的摩爾比為1：1～1.5，中間體12和k2co3的摩爾比為1：1～1.5，三者間的反應(yīng)溫度為40～60℃，反應(yīng)時(shí)間為5～10h。
步驟(4)中，在制備n為4，r1為-och2(conhch2)2cooh的化合物ⅰ的過程中，中間體13和ki的摩爾比為1：1.5～3，中間體13和k2co3的摩爾比為1：1～2，中間體13和化合物ⅱ的摩爾比為1：1～2，四者間的反應(yīng)時(shí)間為5～10h，反應(yīng)溫度為75～100℃。
步驟(4)中，中間體14和lioh的摩爾比為1：1～1.5，反應(yīng)時(shí)間為4～8h，反應(yīng)溫度為0～5℃。
步驟(4)中，中間體15和雙甘肽甲酯鹽酸鹽的摩爾比為1：1～1.5，中間體15和n，n-二異丙基乙胺的摩爾比為1：2～3，中間體15和1-羥基苯并三唑的摩爾比為1：1～1.5，中間體15和碳化二亞胺的摩爾比為1：1～1.5，反應(yīng)時(shí)間為8～12h，反應(yīng)溫度為40～60℃。
步驟(4)中，中間體16水解的反應(yīng)溫度為-5～5℃，反應(yīng)時(shí)間為4～6h。
步驟(4)中，中間體10和1,2-二溴乙烷或1,3-二溴丙烷的摩爾比為1：4～10，化合物10和無機(jī)堿的摩爾比為1：1～2，三者間的反應(yīng)時(shí)間為16～32h，反應(yīng)溫度為60～90℃；其中，所述的無機(jī)堿為k2co3，
步驟(5)中，在制備n為2或3，r1為-och2(conhch2)2cooh的的化合物ⅰ的過程中，中間體17和ki的摩爾比為1：1.5～3，化合物10和k2co3的摩爾比為1：1～2，化合物10和化合物ⅱ的摩爾比為1：1～2，四者間的反應(yīng)時(shí)間為5～10h，反應(yīng)溫度為75～100℃。
步驟(6)中，反應(yīng)時(shí)間為24～36h，反應(yīng)溫度為80～100℃。
本發(fā)明的反應(yīng)流程如下：
上述3,4-二芳基馬來酰亞胺衍生物在制備預(yù)防或治療動(dòng)脈粥樣硬化和制備降低血漿膽固醇水平的藥物中的應(yīng)用也在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
其中，所述的3,4-二芳基馬來酰亞胺衍生物包括其可藥用鹽形式和其在藥學(xué)上可接受的載體的形式。
其中，所述的在藥學(xué)上可接受的載體的形式指一種或幾種惰性，非毒性的固體或液體填充物、稀釋劑、助劑等，它們不逆向與活性化合物或病人發(fā)生作用。
其藥物劑型為片劑、膠囊、丸劑、栓劑、軟膠囊、口服液、混懸劑或注射液等藥劑學(xué)上常用劑型。口服用藥片和膠囊含有傳統(tǒng)的賦形劑如填充物、稀釋劑、潤滑劑、分散劑以及粘合劑?？蓞⒄毡绢I(lǐng)域中熟知的方法進(jìn)行制備。
本發(fā)明活性化合物的劑量將因配方而異。一般的，證明有利的量為達(dá)到所需結(jié)果，每千克體重每24小時(shí)給藥通式(i)化合物的總量為約0.01～100mg，優(yōu)選總量為0.1～50mg。如果必要，以幾次單劑量的形式給藥。然而如果必要，也可以偏離上述用量，即這取決于待治療的受試者的類型和體重、個(gè)體對藥物的行為、疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重性、制劑和給藥類型以及給藥時(shí)間和間隔。
有益效果：
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)勢：
本發(fā)明可以應(yīng)用于治療或預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化或降低血漿膽固醇水平，其降低血漿膽固醇活性更強(qiáng)，市場前景更廣闊。
具體實(shí)施方式
根據(jù)下述實(shí)施例，可以更好地理解本發(fā)明。然而，本領(lǐng)域的技術(shù)人員容易理解，實(shí)施例所描述的內(nèi)容僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)當(dāng)也不會限制權(quán)利要求書中所詳細(xì)描述的本發(fā)明。
根據(jù)下述實(shí)施例，可以更好地理解本發(fā)明。然而，本領(lǐng)域的技術(shù)人員容易理解，實(shí)施例所描述的內(nèi)容僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)當(dāng)也不會限制權(quán)利要求書中所詳細(xì)描述的本發(fā)明。
實(shí)施例1：2-溴-1-(4-氟苯基)乙酮的制備
將20g(144.7mmol)對氟苯乙酮溶于200ml乙腈中，緩慢滴加23.12g(144.7mmol)br2的50ml乙腈溶液，室溫下攪拌過夜。反應(yīng)完全后，濃縮除去反應(yīng)液，乙酸乙酯復(fù)溶，用飽和食鹽水洗三次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸餾除去溶劑，得到的白色油狀物在低溫下固化，用100ml正己烷加1ml乙酸乙酯打漿，過濾得白色固體28g，收率：89.2％，mp：40-41℃。
1h-nmr(300m，cdcl3):4.40(s,2h,-ch2-),7.17(m,2h,ar-h),8.02(m,2h,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]215.96,foundm/z[m-h]-215.0.
實(shí)施例2：2-疊氮基-1-(4-氟苯基)乙酮的制備
將31.59g(146mmol)2-溴-1-(4-氟苯基)乙酮溶于150ml的甲醇中，0℃下緩慢加入50ml的11.38g(175mmol)nan3水溶液，室溫下攪拌反應(yīng)過夜。反應(yīng)完全后，0℃下緩慢滴加50ml水，有大量的白色固體析出，過濾，烘干，得到25.25g，收率：96.6％。
1h-nmr(300m，cdcl3):4.52(s,2h,-ch2-),7.17(m,2h,ar-h),7.94(m,2h,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]179.05,foundm/z[m+h]+180.0.
實(shí)施例3：2-氨基-1-(4-氟苯基)乙酮鹽酸鹽的制備
將25.25g(141mmol)2-疊氮基-1-(4-氟苯基)乙酮溶于100ml甲醇中，緩慢滴加42.85g(423mmol)濃鹽酸(濃度36％)，加入2gpd/c，常溫下催化氫化。反應(yīng)完全后，過濾pd/c，減壓蒸餾除去溶劑，50ml乙醚打漿，過濾得白色固體22.72g，收率：85％，mp：213-215℃。
實(shí)施例4：(4-(4-甲氧基芐基)氧基)苯乙酸甲酯的制備
將2.6g(15.6mmol)對羥基苯乙酸甲酯、7g(50.6mmol)k2co3和2g(12.8mmol)對甲氧基芐氯溶于40ml丙酮中，攪拌回流過夜。反應(yīng)完全后，濃縮除去溶劑，用二氯甲烷復(fù)溶，飽和食鹽水洗三次，水洗三次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸餾除去溶劑，10ml乙醇打漿，過濾，得到白色固體3.9g，收率：87％，mp：53-56℃。
1h-nmr(500m，dmso):3.59(s,2h,-ch2-),3.60(s,3h,ch3o),3.75(s,3h,ch3o),4.99(s,2h,phch2-),6.94(d,4h,j＝6.95hz,ar-h),7.15(d,2h,j＝8.45hz,ar-h),7.35(d,2h,j＝8.5hz,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]286.12,foundm/z[m+na]+309.3.
實(shí)施例5：(4-(4-甲氧基芐基)氧基)苯乙酸的制備
將3.9g(4-(4-甲氧基芐基)氧基)苯乙酸甲酯溶于50ml的四氫呋喃中，攪拌條件下緩慢滴加1.14g(27.24mmol)lioh的水溶液，室溫下反應(yīng)過夜。反應(yīng)完全后，0℃下緩慢滴加1mol/l的鹽酸，將ph調(diào)節(jié)至酸性，室溫下繼續(xù)攪拌30min。水相用二氯甲烷萃取三次，將有機(jī)相合并后水洗三次，無水硫酸鈉干燥后過濾，減壓蒸餾除去溶劑，得到白色固體3.4g，收率：91.6％，mp：140-145℃。
1h-nmr(300m，cdcl3):3.59(s,2h,-ch2-),3.81(s,3h,ch3o),4.97(s,2h,phch2-),6.92(m,4h,ar-h),7.19(d,2h,j＝8.46hz,ar-h),7.34(d,2h,j＝8.43hz,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]272.10,foundm/z[m+na]+295.1.
實(shí)施例6：n-(2-(4-氟苯基)-2-氧-乙基)-2-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)乙酰胺的制備
將10g(36.78mmol)(4-(4-甲氧基芐基)氧基)苯乙酸、9.48g(50.14mmol)edcl、6.95g(50.14mmol)hobt和13.27g(133.73mmol)n-甲基嗎啉依次加入100ml的無水二氯甲烷中，0℃下攪拌1h后繼續(xù)加入6.32g(33.43mmol)2-胺基-1-(4-氟苯基)乙酮鹽酸鹽，室溫下攪拌過夜。反應(yīng)完全后，0℃下攪拌，有大量固體析出，過濾，烘干，得到白色固體9.7g，收率：64.8％，mp：150-152℃。
1h-nmr(300m，cdcl3):3.45(s,2h,-ch2-),3.76(s,3h,ch3o-),4.58(d,2h,j＝5.4hz,-ch2n-),4.99(s,2h,phch2o-),6.92(m,4h,ar-h),7.19(d,2h,j＝8.37hz,ar-h),7.34(m,4h,ar-h),8.06(m,2h,ar-h),8.37(m,1h,-nh-)；
ms:calcd.m/z[m]407.15,foundm/z[m+na]+430.4.
實(shí)施例7：n-乙?；?4-(4-氟苯基)-3-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2(5h)-酮的制備
將9.7g(23.82mmol)n-(2-(4-氟苯基)-2-氧-乙基)-2-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)乙酰胺加入到30.36g(297.8mmol)乙酸酐中，氮?dú)獗Ｗo(hù)，0℃下緩慢滴加20.47g(202.50mmol)三乙胺，75℃下攪拌反應(yīng)2h。反應(yīng)完全后，減壓蒸餾除去溶劑，二氯甲烷復(fù)溶后用飽和食鹽水洗三次，無水硫酸鈉干燥，過濾后減壓蒸餾除去溶劑，用30ml乙醚打漿，得到淡黃色固體8.4g，收率：81.8％，mp：155-160℃。
1h-nmr(300m，cdcl3):2.63(s,3h,-ch3),3.83(s,3h,ch3o-),4.69(s,2h,-ch2n-)，5.00(s,2h,phch2o-),6.99(m,6h,ar-h),7.27(m,2h,ar-h),7.38(m,4h,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]431.50,foundm/z[m-h]+430.9.
實(shí)施例8：4-(4-氟苯基)-3-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2(5h)-酮的制備
將8.4g(19.48mmol)n-乙?；?4-(4-氟苯基)-3-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2(5h)-酮溶于40ml無水甲醇中，氮?dú)獗Ｗo(hù)，0℃下緩慢滴加3.94g的28％甲醇鈉(20.45mmol)的甲醇溶液，0℃下攪拌反應(yīng)1h。反應(yīng)完全后，滴加1.23g(20.45mmol)乙酸淬滅反應(yīng)，繼續(xù)攪拌5min，減壓蒸餾除去溶劑，二氯甲烷復(fù)溶，水洗三次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸餾除去溶劑，20ml乙醚打漿，過濾烘干，得到淡黃色固體6.2g，收率：81.5％，mp：150-155℃。
1h-nmr(500m，cdcl3):3.53(s,3h,ch3o-),4.32(s,2h,-ch2n-),5.00(s,2h,phch2o-),6.98(m,6h,ar-h),7.30(m,2h,ar-h),7.36(m,2h,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]389.14,foundm/z[m+na]+412.2.
實(shí)施例9：3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
將0.4g(1.02mmol)4-(4-氟苯基)-3-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2(5h)-酮溶于4ml無水dmf中，0℃下加入0.16g(4.08mmol)的nah(含量：60％)，室溫下攪拌反應(yīng)30min。反應(yīng)完全后，滴加3滴水淬滅反應(yīng)，加入乙酸乙酯，飽和食鹽水洗三次，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸餾除去溶劑，柱層析(pe∶ea＝5∶1)得到黃色固體0.32g，收率：77.2％，mp：140-145℃。
1h-nmr(500m，cdcl3):3.83(s,3h,ch3o-),5.03(s,2h,phch2o-),6.94(m,4h,ar-h),7.07(t,2h,j＝8.50hz,ar-h),7.35(d,2h,j＝8.35hz,ar-h),7.40(s,1h,ar-h),7.47(m,2h,ar-h),7.51(m,2h,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]403.12,foundm/z[m-h]+402.2.
實(shí)施例10：1-(2-溴乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
將0.85g(2.11mmol)3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮溶于15ml的乙腈中，加入1.58g(8.43mmol)的1,2-二溴乙烷、0.35g(2.53mmol)的k2co3和68mg(0.2mmol)的四丁基溴化銨，60℃下攪拌反應(yīng)過夜。反應(yīng)完全后，減壓蒸餾除去溶劑，乙酸乙酯復(fù)溶，飽和食鹽水洗三次，無水硫酸鈉干燥后過濾，減壓蒸餾除去溶劑，柱層析(pe∶ea＝9∶1→pe∶ea＝5∶1)得到黃色固體0.9g，收率：83％。
1h-nmr(300m，cdcl3):3.60(t,2h,j＝6.6hz,-ch2-),3.81(s,3h,ch3o-),4.06(t,2h,j＝6.6hz,-ch2-),5.01(s,2h,phch2o-),6.95(dd,4h,j＝1.8,6.9hz,ar-h),7.06(t,2h,j＝8.7hz,ar-h),7.34(d,2h,j＝8.7hz,ar-h),7.49(m,4h,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]511.06,foundm/z[m+na]+534.3.
實(shí)施例11：1-(3-溴丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
參考實(shí)施例10。以3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮和1,3-二溴丙烷為原料，摩爾比為1:4。收率：54.5％。
1h-nmr(300m，cdcl3):2.27(q,2h,j＝6.6hz,-ch2-),3.43(t,2h,j＝6.6hz,-ch2-),3.77(d,2h,j＝6.9hz,-ch2-),3.82(s,3h,ch3o-),5.01(s,2h,phch2o-),6.93(m,4h,ar-h),7.06(m,2h,ar-h),7.34(d,j＝8.7hz,-ch2-),7.49(m,4h,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]523.08,foundm/z[m+na]+546.2.
實(shí)施例12：1-(3-溴丁基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-芐氧基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
參考實(shí)施例10。以3-(4-氟苯基)-4-(4-(4-芐氧基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮和1,4-二溴丁烷為原料，摩爾比為1:4。收率：54.5％。
1h-nmr(300m,cdcl3):1.895(m,4h,-ch2-),3.45(m,2h,-ch2-),3.66(t,j＝6.69hz,2h,-ch2n-),5.08(s,2h,-phch2o-),6.95(d,j＝8.85hz,2h,ar-h),7.05(t,j＝8.69hz,2h,ar-h),7.42(m,8h,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]507.08,foundm/z[m+na]+530.1.
實(shí)施例13：1-(3-溴丁基)-3-(4-氟苯基)-4-(對羥基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
將2g(3.94mmol)1-(3-溴丁基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-芐氧基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮溶于20ml無水ch2cl2中，n2保護(hù)，降溫至-78℃，緩慢加入bbr3(9.47mmol)的ch2cl2溶劑，-78℃反應(yīng)2h，自然升溫，tlc跟蹤。待反應(yīng)完全，加入10ml的水，0℃攪拌10min，乙酸乙酯提取，飽和nahco3洗滌，再用鹵水洗滌，無水na2so4干燥。得1.55g黃色粉末，產(chǎn)率：94％。
1h-nmr(500m,cdcl3):1.896(m,4h,-ch2-),3.46(t,j＝6.69hz,2h,-ch2-br),3.67(t,j＝6.53hz,2h,-ch2n-),6.81(d,j＝8.52hz,2h,ar-h),7.06(t,j＝8.58hz,2h,ar-h),7.41(d,j＝8.55hz,2h,ar-h),7.49(dd,j＝5.49,8.46hz,2h,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]417.04,foundm/z[m-h]-416.1.
實(shí)施例14：2-(4-(n-(4-溴丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯的制備
將0.776g(1.86mmol)的中間體1-(3-溴丁基)-3-(4-氟苯基)-4-(對羥基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮溶于10ml丙酮，加入0.32g(2.28mmol)的k2co3，分批加入溴代乙酸甲酯0.36g(2.28mmol)，加熱回流。待反應(yīng)完全，加入10ml的水和20ml乙酸乙酯，攪拌5min，分液收集有機(jī)相，水相用乙酸乙酯再萃取兩次，合并有機(jī)相，用鹵水洗滌，無水na2so4干燥。制沙柱層析提純產(chǎn)物。得黃色油狀物0.86g，產(chǎn)率：94.73％。
1h-nmr(500m,cdcl3):1.85(dd,j＝6.8,14.5hz,2h,-ch2-),1.91(m,2h,-ch2-),3.45(t,j＝6.4hz,2h,-ch2-br),3.67(t,j＝6.775hz,2h,-ch2n-),3.80(s,3h,-och3),4.66(s,2h,-och2co-),6.88(d,j＝8.75hz,2h,ar-h),7.06(t,j＝8.6hz,2h,ar-h),7.47(m,2h,ar-h),7.49(d,j＝5.55hz,2h,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]489.06,foundm/z[m+na]+512.2.
實(shí)施例15：2-(4-(n-(4-(4-甲基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯的制備
將0.43g(0.88mmol)中間體2-(4-(n-(4-溴丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯溶于2ml乙腈，加入0.22g(1.32mmol)ki，0.24g(1.76mmol)k2co3，0.23g(1.32mmol)4-甲基苯磺酰胺，加熱回流。待反應(yīng)完全后，過濾，減壓蒸餾除去溶劑，加入乙酸乙酯復(fù)溶，水洗三次，干燥，過濾，旋干，制沙，柱層析提純。得到黃色油狀物0.35g，產(chǎn)率：68.6％。
1h-nmr(500m,cdcl3):1.53(dd,j＝7.15,14.75hz,2h,-ch2-),1.67(dd,j＝7.15,14.75hz,2h,-ch2-),2.41(s,3h,-ch3),2.99(d,j＝4.1hz,2h,-ch2nh-),3.60(t,j＝6.85hz,2h,-ch2n-),3.81(s,3h,-och3),4.52(s,1h,-nh-),4.66(s,2h,-och2co-),6.88(d,j＝8.55hz,2h,ar-h),7.05(t,j＝8.55hz,2h,ar-h),7.29(d,j＝7.95hz,2h,ar-h),7.47(m,4h,ar-h),7.73(d,j＝8hz,2h,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]580.17,foundm/z[m-h]-579.1.
實(shí)施例16：2-(4-(n-(4-苯磺酰胺基丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯的制備
參考實(shí)施例15。以2-(4-(n-(4-溴丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯和苯磺酰胺為原料，摩爾比為1:1.5。收率：89.3％。
實(shí)施例17：2-(4-(n-(4-(4-氟苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯的制備
參考實(shí)施例15。以2-(4-(n-(4-溴丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯和對氟苯磺酰胺為原料，摩爾比為1:1.5。收率：90.7％。
實(shí)施例18：2-(4-(n-(4-(4-三氟甲基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯的制備
參考實(shí)施例15。以2-(4-(n-(4-溴丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯和對三氟甲基苯磺酰胺為原料，摩爾比為1:1.5。收率：80％。
實(shí)施例19：2-(4-(n-(4-(3-溴苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯的制備
參考實(shí)施例15。以2-(4-(n-(4-溴丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯和3-溴苯磺酰胺為原料，摩爾比為1:1.5。收率：72％。
實(shí)施例20：2-(4-(n-(4-(4-乙基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯的制備
參考實(shí)施例15。以2-(4-(n-(4-溴丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯和4-乙基苯磺酰胺為原料，摩爾比為1:1.5。收率：81％。
實(shí)施例21：2-(4-(n-(4-(噻吩-2-磺酰胺)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯的制備
參考實(shí)施例15。以2-(4-(n-(4-溴丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯和噻吩-2-磺酰胺為原料，摩爾比為1:1.5。收率：85.7％。
實(shí)施例22：2-(4-(n-(4-(2-三氟甲氧基苯磺酰胺)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯的制備
參考實(shí)施例15。以2-(4-(n-(4-溴丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯和2-三氟甲氧基苯磺酰胺為原料，摩爾比為1:1.5。收率：89.77％。
實(shí)施例23：2-(4-(n-(4-(2-三氟甲氧基苯磺酰胺)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯的制備
參考實(shí)施例15。以2-(4-(n-(4-溴丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯和2-三氟甲氧基苯磺酰胺為原料，摩爾比為1:1.5。收率：62％。
實(shí)施例24：2-(4-(n-(4-(4-叔丁基苯磺酰胺)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯的制備
參考實(shí)施例15。以2-(4-(n-(4-溴丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯和4-叔丁基苯磺酰胺為原料，摩爾比為1:1.5。收率：86％。
實(shí)施例25：2-(2-(2-(4-(n-(4-(4-甲基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酰氨基)乙酰氨基)乙酸的制備
將0.42g(0.742mmol)中間體2-(4-(n-(4-(4-甲基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯溶于4ml的thf，降溫到0℃，緩慢滴加0.047g(1.11mmol)lioh的水溶液，0～5℃攪拌，tlc跟蹤。待反應(yīng)完全，0℃加入1mol/lhcl水溶液調(diào)節(jié)ph至酸性。乙醚萃取三遍，收集有機(jī)相，有機(jī)相鹵水洗滌三次，無水na2so4干燥。過濾旋干得到黃色油狀物0.3869g，產(chǎn)率88％；將0.135g(0.81mmol)雙甘肽甲酯鹽酸鹽加到5ml的ch3cn中，降溫至0℃，加入0.21g(1.62mmol)dipea，攪拌1min，再加入0.382g(0.67mmol)黃色油狀物、0.11g(0.81mmol)hobt、0.156g(0.81mmol)edcl，50℃攪拌。待反應(yīng)完全，旋去溶劑，用ch2cl2復(fù)溶，鹵水洗滌三遍，干燥、制沙，柱層析提純，得0.207g黃色粉末狀物質(zhì)，產(chǎn)率：44.2％。將0.128g(0.188mmol)黃色粉末溶于5ml乙腈/水(95:5)，加入0.087g(0.866mmol)et3n，降溫至10℃，一次性加入0.04g(0.94mmol)licl，50℃攪拌，tlc跟蹤。待反應(yīng)完全，過濾固體，濾餅溶于thf，體系降溫至0℃,用1m的hcl水溶液調(diào)節(jié)ph至酸性。加入ch2cl2，水相用ch2cl2萃取三遍。收集有機(jī)相，用鹵水洗滌三次，無水na2so4干燥。過濾旋干，用乙醚打漿得到0.1g黃色固體，產(chǎn)率：87％，mp：120-123℃。
1h-nmr(300m,dmso):1.39(t,j＝7.41hz,2h,-ch2-),1.56(t,j＝7.45hz,2h,-ch2-),2.36(s,3h,-ch3),2.73(m,2h,-ch2nh-),3.47(t,j＝6.45hz,2h,-ch2n-),3.56(d,j＝4.95hz,2h,-nch2co-),3.79(d,j＝5.64hz,2h,-nch2co-),4.58(s,2h,-och2co-),7.02(d,j＝8.61hz,2h,ar-h),7.27(t,j＝8.73hz,2h,ar-h),7.37(d,j＝6.48hz,4h,ar-h),7.47(m,3h,ar-h),7.66(d,j＝8.04hz,2h,ar-h),7.80(s,1h,-nhco-),8.37(t,j＝5.46hz,1h,-nhco-)；ms:calcd.m/z[m]680.20,foundm/z[m-h]-679.4.
實(shí)施例26：2-(2-(2-(4-(n-(4-苯磺酰胺基丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酰氨基)乙酰氨基)乙酸的制備
參考實(shí)施例25。以2-(4-(n-(4-苯磺酰胺基丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯為原料，lioh與原料摩爾比為1.5:1，得到黃色油狀物；以該黃色油狀物為原料，雙甘肽甲酯鹽酸鹽與原料的摩爾比為1.2:1，dipea與原料的摩爾比為2.4:1，hobt與原料的摩爾比為1.2:1，edcl與原料的摩爾比為1.2:1，得到黃色粉末；以該粉末為原料，licl與原料的摩爾比為1.1:1，最終得到黃色固體，mp：86-89℃。
1h-nmr(300m,dmso):1.38(m,2h,-ch2-),1.56(m,2h,-ch2-),2.78(t,j＝6hz,2h,-ch2nh-),3.47(t,j＝6hz,2h,-ch2n-),3.75(d,j＝5.1hz,2h,-nch2co-),3.81(d,j＝5.7hz,2h,-nch2co-),4.58(s,2h,-och2co-),7.02(d,j＝8.7hz,2h,ar-h),7.27(t,j＝9hz,2h,ar-h),7.38(d,j＝8.7hz,2h,ar-h),7.46(d,j＝8.4hz,2h,ar-h),7.58(m,4h,ar-h),7.77(d,j＝7.8hz,2h,ar-h),8.16(s,1h,-nhco-),8.34(d,j＝6.9hz,1h,-nhco-)；ms:calcd.m/z[m]666.67,foundm/z[m-h]-665.4.
實(shí)施例27：2-(2-(2-(4-(n-(4-(4-氟苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酰氨基)乙酰氨基)乙酸的制備
參考實(shí)施例25。以2-(4-(n-(4-(4-氟苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯為原料，lioh與原料摩爾比為1.5:1，得到黃色油狀物；以該黃色油狀物為原料，雙甘肽甲酯鹽酸鹽與原料的摩爾比為1.2:1，dipea與原料的摩爾比為2.4:1，hobt與原料的摩爾比為1.2:1，edcl與原料的摩爾比為1.2:1，得到黃色粉末；以該粉末為原料，licl與原料的摩爾比為1.1:1，最終得到黃色固體，mp：97-101℃。
1h-nmr(500m,dmso):1.52(m,2h,-ch2-),1.67(m,2h,-ch2-),2.89(t,j＝6.3hz,2h,-ch2nh-),3.58(t,j＝6.75hz,2h,-ch2n-),3.96(d,j＝5.15hz,2h,-nch2co-),4.06(d,j＝5.15hz,2h,-nch2co-),4.56(s,2h,-och2co-),6.95(d,j＝8.75hz,2h,ar-h),7.07(t,j＝8.55hz,2h,ar-h),7.17(t,j＝8.4hz,2h,ar-h),7.47(m,4h,ar-h),7.72(m,2h,ar-h),7.87(dd,j＝5.2,8.5hz,2h,1h,-nhco-)；ms:calcd.m/z[m]684.17,foundm/z[m-h]-683.4.
實(shí)施例28：2-(2-(2-(4-(n-(4-(4-三氟甲基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酰氨基)乙酰氨基)乙酸的制備
參考實(shí)施例25。以2-(4-(n-(4-(4-三氟甲基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯為原料，lioh與原料摩爾比為1.5:1，得到黃色油狀物；以該黃色油狀物為原料，雙甘肽甲酯鹽酸鹽與原料的摩爾比為1.2:1，dipea與原料的摩爾比為2.4:1，hobt與原料的摩爾比為1.2:1，edcl與原料的摩爾比為1.2:1，得到黃色粉末；以該粉末為原料，licl與原料的摩爾比為1.1:1，最終得到黃色固體，mp：125-129℃。
1h-nmr(300m,dmso):1.42(t,j＝7.29hz,2h,-ch2-),1.57(t,j＝7.14hz,2h,-ch2-),2.82(m,2h,-ch2nh-),3.49(t,j＝6.18hz,2h,-ch2n-),3.68(d,j＝5.4hz,2h,-nch2co-),3.80(d,j＝5.7hz,2h,-nch2co-),4.58(s,2h,-och2co-),7.02(d,j＝8.79hz,2h,ar-h),7.26(t,j＝8.88hz,2h,ar-h),7.37(d,j＝8.73hz,2h,ar-h),7.45(m,2h,ar-h),7.87(m,1h,-nhco-),7.98(m,5h,ar-h),8.35(d,j＝5.37hz,1h,-nhco-)；ms:calcd.m/z[m]734.17,foundm/z[m-h]-733.4.
實(shí)施例29：2-(2-(2-(4-(n-(4-(3-溴苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酰氨基)乙酰氨基)乙酸的制備
參考實(shí)施例25。以2-(4-(n-(4-(3-溴苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯為原料，lioh與原料摩爾比為1.5:1，得到黃色油狀物；以該黃色油狀物為原料，雙甘肽甲酯鹽酸鹽與原料的摩爾比為1.2:1，dipea與原料的摩爾比為2.4:1，hobt與原料的摩爾比為1.2:1，edcl與原料的摩爾比為1.2:1，得到黃色粉末；以該粉末為原料，licl與原料的摩爾比為1.1:1，最終得到黃色固體，mp：104-107℃。
1h-nmr(500m,dmso):1.40(t,j＝7.45hz,2h,-ch2-),1.55(m,2h,-ch2-),2.78(t,j＝6.65hz,2h,-ch2nh-),3.33(m,2h,-ch2n-),3.47(t,j＝6.4hz,2h,-nch2co-),3.75(d,j＝5.6hz,2h,-nch2co-),4.59(s,2h,-och2co-),7.02(d,j＝8.75hz,2h,ar-h),7.28(t,j＝8.8hz,2h,ar-h),7.37(d,j＝8.45hz,3h,ar-h),7.44(d,j＝5.6hz,2h,ar-h),7.54(t,j＝7.9hz,1h,ar-h),7.78(d,j＝7.8hz,1h,ar-h),7.83(d,j＝5.9hz,1h,ar-h),7.91(s,1h,-nhco-),8.48(t,j＝5.55hz,1h,-nhco-)；ms:calcd.m/z[m]744.09,foundm/z[m-h]-743.3.
實(shí)施例30：2-(2-(2-(4-(n-(4-(4-乙基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酰氨基)乙酰氨基)乙酸的制備
參考實(shí)施例25。以2-(4-(n-(4-(4-乙基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯為原料，lioh與原料摩爾比為1.5:1，得到黃色油狀物；以該黃色油狀物為原料，雙甘肽甲酯鹽酸鹽與原料的摩爾比為1.2:1，dipea與原料的摩爾比為2.4:1，hobt與原料的摩爾比為1.2:1，edcl與原料的摩爾比為1.2:1，得到黃色粉末；以該粉末為原料，licl與原料的摩爾比為1.1:1，最終得到黃色固體，mp：95-98℃。
1h-nmr(300m,dmso):1.18(t,j＝7.59hz,3h,-ch3),1.39(t,j＝6.9hz,2h,-ch2-),1.56(t,j＝5.94hz,2h,-ch2-),2.66(m,2h,-phch2-),2.73(m,2h,-ch2nh-),3.47(t,j＝6.48hz,-ch2n-),3.60(d,j＝5.13hz,2h,-nch2co-),3.79(d,j＝5.82hz,2h,-nch2co-),4.58(s,2h,-och2co-),7.02(d,j＝8.76hz,2h,ar-h),7.27(t,j＝8.82hz,2h,ar-h),7.37(d,j＝8.75hz,2h,ar-h),7.39(m,4h,ar-h),7.48(m,3h,ar-h),7.68(d,j＝8.19hz,2h,ar-h),7.89(s,1h,-nhco-),8.44(m,1h,-nhco-)；ms:calcd.m/z[m]694.12,foundm/z[m-h]-693.4.
實(shí)施例31：2-(2-(2-(4-(n-(4-(噻吩-2-磺酰胺)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酰氨基)乙酰氨基)乙酸的制備
參考實(shí)施例25。以2-(4-(n-(4-(噻吩-2-磺酰胺)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯為原料，lioh與原料摩爾比為1.5:1，得到黃色油狀物；以該黃色油狀物為原料，雙甘肽甲酯鹽酸鹽與原料的摩爾比為1.2:1，dipea與原料的摩爾比為2.4:1，hobt與原料的摩爾比為1.2:1，edcl與原料的摩爾比為1.2:1，得到黃色粉末；以該粉末為原料，licl與原料的摩爾比為1.1:1，最終得到黃色固體，mp：108-110℃。
1h-nmr(300m,dmso):1.44(t,j＝7.32hz,2h,-ch2-),1.59(m,2h,-ch2-),2.86(m,2h,-ch2nh-),3.49(t,j＝6.36hz,2h,-ch2n-),3.73(d,j＝5.49hz,2h,-nch2co-),3.80(d,j＝5.91hz,2h,-nch2co-),4.58(s,2h,-och2co-),7.02(d,j＝8.67hz,2h,ar-h),7.15(m,1h,thiophene–h4),7.27(t,j＝8.79hz,2h,ar-h),7.38(d,j＝8.64hz,2h,ar-h),7.45(dd,j＝5.94,8.28hz,2h,ar-h),7.56(d,j＝3.69hz,1h,thiophene–h3),7.71(s,1h,-cooh),7.88(d,j＝4.98hz,1h,-nhco-)；8.12(s,1h,thiophene–h5),8.33(s,1h,-nhco-)；ms:calcd.m/z[m]672.14,foundm/z[m-h]-671.3.
實(shí)施例32：2-(2-(2-(4-(n-(4-(2-三氟甲氧基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酰氨基)乙酰氨基)乙酸的制備
參考實(shí)施例25。以2-(4-(n-(4-(2-三氟甲氧基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯為原料，lioh與原料摩爾比為1.5:1，得到黃色油狀物；以該黃色油狀物為原料，雙甘肽甲酯鹽酸鹽與原料的摩爾比為1.2:1，dipea與原料的摩爾比為2.4:1，hobt與原料的摩爾比為1.2:1，edcl與原料的摩爾比為1.2:1，得到黃色粉末；以該粉末為原料，licl與原料的摩爾比為1.1:1，最終得到黃色固體，mp：85-88℃。
1h-nmr(300m,dmso):1.42(d,j＝7.2hz,2h,-ch2-),1.55(d,j＝5.7hz,2h,-ch2-),2.92(d,j＝5.4hz,2h,-ch2nh-),3.46(d,j＝6.3hz,2h,-ch2n-),3.75(d,j＝5.7hz,2h,-nch2co-),3.81(d,j＝5.7hz,2h,-nch2co-),4.58(s,2h,-och2co-),7.02(d,j＝8.7hz,2h,ar-h),7.27(t,j＝8.7hz,2h,ar-h),7.37(d,j＝8.4hz,2h,ar-h),7.43(d,j＝5.7hz,2h,ar-h),7.54(d,j＝6.9hz,2h,ar-h),7.73(t,j＝7.2hz,1h,ar-h),7.82(s,1h,ar-h),7.91(d,j＝7.5hz,1h,ar-h),8.15(s,1h,-nhco-),8.32(s,1h,-nhco-)；ms:calcd.m/z[m]750.16,foundm/z[m-h]-751.2.
實(shí)施例33：2-(2-(2-(4-(n-(4-(4-三氟甲氧基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酰氨基)乙酰氨基)乙酸的制備
參考實(shí)施例25。以2-(4-(n-(4-(4-三氟甲氧基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯為原料，lioh與原料摩爾比為1.5:1，得到黃色油狀物；以該黃色油狀物為原料，雙甘肽甲酯鹽酸鹽與原料的摩爾比為1.2:1，dipea與原料的摩爾比為2.4:1，hobt與原料的摩爾比為1.2:1，edcl與原料的摩爾比為1.2:1，得到黃色粉末；以該粉末為原料，licl與原料的摩爾比為1.1:1，最終得到黃色固體，mp：138-142℃。
1h-nmr(300m,dmso):1.42(d,j＝5.7hz,2h,-ch2-),1.56(d,j＝5.4hz,2h,-ch2-),2.80(d,j＝5.4hz,2h,-ch2nh-),3.47(s,2h,-ch2n-),3.76(d,j＝5.4hz,2h,-nch2co-),3.81(d,j＝5.4hz,2h,-nch2co-),4.57(s,2h,-och2co-),7.01(d,j＝8.7hz,2h,ar-h),7.26(t,j＝8.7hz,2h,ar-h),7.37(d,j＝8.1hz,2h,ar-h),7.44(t,j＝6.9hz,2h,ar-h),7.57(d,j＝8.1hz,2h,ar-h),7.72(s,1h,ar-h),7.91(d,j＝8.4hz,2h,ar-h),8.17(s,1h,-nhco-),8.32(s,1h,-nhco-)；ms:calcd.m/z[m]750.16,foundm/z[m-h]-749.3.
實(shí)施例34：2-(2-(2-(4-(n-(4-(4-叔丁基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酰氨基)乙酰氨基)乙酸的制備
參考實(shí)施例25。以2-(4-(n-(4-(4-叔丁基苯磺酰胺基)丁基)-3-(4-氟苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮)苯氧基)乙酸甲酯為原料，lioh與原料摩爾比為1.5:1，得到黃色油狀物；以該黃色油狀物為原料，雙甘肽甲酯鹽酸鹽與原料的摩爾比為1.2:1，dipea與原料的摩爾比為2.4:1，hobt與原料的摩爾比為1.2:1，edcl與原料的摩爾比為1.2:1，得到黃色粉末；以該粉末為原料，licl與原料的摩爾比為1.1:1，最終得到黃色固體，mp：115-119℃。
1h-nmr(300m,dmso):1.29(s,9h,-c(ch3)3),1.41(d,j＝6.96hz,2h,-ch2-),1.55(d,j＝7.26hz,2h,-ch2-),2.74(d,j＝5.82hz,2h,-ch2nh-),3.46(d,j＝6.48hz,2h,-ch2n-),3.65(d,j＝5.04hz,2h,-nch2co-),3.79(d,j＝5.64hz,2h,-nch2co-),4.58(s,2h,-och2co-),7.02(d,j＝8.61hz,2h,ar-h),7.27(t,j＝8.76hz,2h,ar-h),7.37(d,j＝8.67hz,2h,ar-h),7.43(d,j＝5.91hz,2h,ar-h),7.50(m,1h,ar-h),7.59(d,j＝8.58hz,2h,ar-h),7.70(d,j＝8.16hz,2h,ar-h)),8.00(s,1h,-nhco-),8.36(m,1h,-nhco-)；ms:calcd.m/z[m]722.24,foundm/z[m-h]-721.5.
實(shí)施例35：n-(4-(4-氟苯磺酰胺基)乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
將0.2g(0.392mmol)1-(2-溴乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮溶于5ml的乙腈中，加入0.103g(0.588mmol)的對氟苯磺酰胺、98mg(0.588mmol)的ki和108mg(0.784mmol)的k2co3，回流反應(yīng)過夜。反應(yīng)完全后，減壓蒸餾除去溶劑，乙酸乙酯復(fù)溶，飽和食鹽水洗三次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸餾除去溶劑，柱層析(pe∶ea＝5∶1→pe∶ea＝3∶1)得黃色油狀物128mg，收率：54％。
1h-nmr(300m，cdcl3):3.31(m,2h,j＝5.4hz,-ch2-),3.66(s,1h,-nh-),3.73(t,2h,j＝5.7hz,-ch2-),3.82(s,3h,ch3o-),5.01(s,2h,phch2o-),6.94(dd,4h,j＝6.3,8.4hz,ar-h),7.05(m,4h,ar-h),7.42(m,6h,ar-h),7.85(m,2h,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]604.15,foundm/z[m+na]+627.3.
實(shí)施例36：n-(4-(4-乙基苯磺酰胺基)乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
參考實(shí)施例35。以1-(2-溴乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮和對乙基苯磺酰胺為原料，摩爾比為1:1.5，收率：42.5％。
實(shí)施例37：n-(4-(4-三氟甲基苯磺酰胺基)乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
參考實(shí)施例35。以1-(2-溴乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮和對三氟甲基苯磺酰胺為原料，摩爾比為1:1.5，收率：53.9％。
實(shí)施例38：n-(4-(4-三氟甲氧基苯磺酰胺基)乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
參考實(shí)施例35。以1-(2-溴乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮和對三氟甲氧基苯磺酰胺為原料，摩爾比為1:1.5，收率：45.8％。
實(shí)施例39：n-(4-(4-氟苯磺酰胺基)丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
參考實(shí)施例35。以1-(2-溴丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮和對氟苯磺酰胺為原料，摩爾比為1:1.5，收率：97.5％。
實(shí)施例40：n-(4-(4-乙基苯磺酰胺基)丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
參考實(shí)施例35。以1-(2-溴丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮和對乙基苯磺酰胺為原料，摩爾比為1:1.5，收率：80.3％。
實(shí)施例41：n-(4-(4-三氟甲基苯磺酰胺基)丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
參考實(shí)施例35。1-(2-溴丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮和對三氟甲基苯磺酰胺為原料，摩爾比為1:1.5，收率：95.3％。
實(shí)施例42：n-(4-(4-三氟甲氧基苯磺酰胺基)丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
參考實(shí)施例35。以1-(2-溴丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮和對三氟甲氧基苯磺酰胺為原料，摩爾比為1:1.5，收率：84.6％。
實(shí)施例43：n-(4-(4-氟苯磺酰胺基)乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-羥基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
將128mg(0.212mmol)n-(4-(4-氟苯磺酰胺基)乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮溶于2.12ml乙酸中，90℃反應(yīng)過夜。反應(yīng)完全后，減壓蒸餾除去溶劑，乙酸乙酯復(fù)溶，飽和食鹽水洗三次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸餾除去溶劑，柱層析(pe∶ea＝3∶1→pe∶ea＝2∶1)得到黃色固體66.4mg，收率：64.7％，mp：174-176℃。
1h-nmr(300m，cdcl3):3.31(q,2h,j＝5.7hz,-ch2-),3.73(t,2h,j＝5.7hz,-ch2-),4.96(d,1h,j＝5.4hz,-nhso2-),6.82(d,2h,j＝8.7hz,ar-h),7.08(m,4h,ar-h),7.38(d,2h,j＝8.7hz,ar-h),7.46(m,2h,ar-h),7.84(m,2h,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]484.09,foundm/z[m-h]+483.0.
實(shí)施例44：n-(4-(4-乙基苯磺酰胺基)乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-羥基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
參考實(shí)施例43。以n-(4-(4-乙基苯磺酰胺基)乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮為原料，乙酸體積(ml)與原料摩爾數(shù)(mmol)比為10:1，收率：82.4％，mp：170-175℃。
1h-nmr(500m，cdcl3):1.22(t,3h,j＝7.5hz,-ch2ch3),2.65(q,2h,j＝5.5hz,-ch2ch3),3.28(m,2h,j＝5.5hz,-ch2-),3.73(t,2h,j＝5.5hz,-ch2-),4.92(s,1h,-nhso2-),6.81(d,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.06(t,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.27(d,2h,j＝8hz,ar-h),7.38(d,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.46(m,2h,ar-h),7.74(d,2h,j＝8.5hz,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]494.13,foundm/z[m-h]+493.4.
實(shí)施例45：n-(4-(4-三氟甲基苯磺酰胺基)乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-羥基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
參考實(shí)施例43。以n-(4-(4-三氟甲基苯磺酰胺基)乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮為原料，乙酸體積(ml)與原料摩爾數(shù)(mmol)比為10:1，收率：61.8％，mp：165-167℃。
1h-nmr(500m，cdcl3):1.22(t,3h,j＝7.5hz,-ch2ch3),2.65(q,2h,j＝5.5hz,-ch2ch3),3.28(m,2h,j＝5.5hz,-ch2-),3.73(t,2h,j＝5.5hz,-ch2-),4.92(s,1h,-nhso2-),6.81(d,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.06(t,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.27(d,2h,j＝8hz,ar-h),7.38(d,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.46(m,2h,ar-h),7.74(d,2h,j＝8.5hz,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]494.13,foundm/z[m-h]+493.4.
實(shí)施例46：n-(4-(4-三氟甲氧基苯磺酰胺基)乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-羥基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
參考實(shí)施例43。以n-(4-(4-三氟甲氧基苯磺酰胺基)乙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮為原料，乙酸體積(ml)與原料摩爾數(shù)(mmol)比為10:1，收率：82.4％，mp：170-175℃。
1h-nmr(500m，cdcl3):1.22(t,3h,j＝7.5hz,-ch2ch3),2.65(q,2h,j＝5.5hz,-ch2ch3),3.28(m,2h,j＝5.5hz,-ch2-),3.73(t,2h,j＝5.5hz,-ch2-),4.92(s,1h,-nhso2-),6.81(d,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.06(t,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.27(d,2h,j＝8hz,ar-h),7.38(d,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.46(m,2h,ar-h),7.74(d,2h,j＝8.5hz,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]494.13,foundm/z[m-h]+493.4.
實(shí)施例47：n-(4-(4-氟苯磺酰胺基)丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-羥基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
參考實(shí)施例43。以n-(4-(4-氟苯磺酰胺基)丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮為原料，乙酸體積(ml)與原料摩爾數(shù)(mmol)比為10:1，收率：54.8％，mp：70-74℃。
1h-nmr(500m，cdcl3):1.85(m,2h,j＝6hz,-ch2-),2.96(t,2h,j＝6hz,-ch2-),3.70(t,2h,j＝6hz,-ch2-),5.26(s,1h,-nhso2-),6.81(d,2h,j＝9hz,ar-h),7.05(d,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.11(t,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.36(d,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.44(m,2h,ar-h),7.87(m,2h,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]498.11,foundm/z[m-h]+497.2.
實(shí)施例48：n-(4-(4-乙基苯磺酰胺基)丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-羥基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
參考實(shí)施例43。以n-(4-(4-乙基苯磺酰胺基)丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮為原料，乙酸體積(ml)與原料摩爾數(shù)(mmol)比為10:1，收率：81.8％，mp：122-124℃。
1h-nmr(500m，cdcl3):1.23(t,3h,j＝7.5hz,-ch2ch3),1.83(m,2h,j＝6hz,-ch2-),2.68(q,2h,j＝7.5hz,-ch2ch3),2.96(d,2h,j＝5.5hz,-ch2-),3.69(t,2h,j＝6hz,-ch2-),5.19(s,1h,-nhso2-),6.80(d,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.04(t,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.26(d,2h,j＝7.5hz,ar-h),7.36(d,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.46(m,2h,ar-h),7.76(d,2h,j＝8.5hz,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]508.15,foundm/z[m-h]+507.1.
實(shí)施例49：n-(4-(4-三氟甲基苯磺酰胺基)丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-羥基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
參考實(shí)施例43。以n-(4-(4-三氟甲基苯磺酰胺基)丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮為原料，乙酸體積(ml)與原料摩爾數(shù)(mmol)比為10:1，收率：77.6％，mp：72-74℃。
1h-nmr(500m，cdcl3):1.86(m,2h,j＝6hz,-ch2-),2.98(q,2h,j＝6hz,-ch2-),3.71(t,2h,j＝6hz,-ch2-),5.48(t,1h,j＝6.5hz,-nhso2-),6.80(d,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.05(t,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.36(d,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.44(m,2h,ar-h),7.69(d,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.98(d,2h,j＝8.5hz,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]548.10,foundm/z[m-h]+547.3.
實(shí)施例50：n-(4-(4-三氟甲氧基苯磺酰胺基)丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-羥基苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮的制備
參考實(shí)施例43。以n-(4-(4-三氟甲氧基苯磺酰胺基)丙基)-3-(4-氟苯基)-4-(4-((4-甲氧基芐基)氧基)苯基)-1h-吡咯烷-2,5-二酮為原料，乙酸體積(ml)與原料摩爾數(shù)(mmol)比為10:1，收率：67.8％，mp：68-72℃。
1h-nmr(500m，cdcl3):1.86(m,2h,j＝6hz,-ch2-),2.98(q,h,j＝6hz,-ch2-),3.71(t,2h,j＝6hz,-ch2-),5.35(t,1h,j＝6.5hz,-nhso2-),6.81(d,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.06(t,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.26(d,2h,j＝6hz,ar-h),7.37(d,2h,j＝8.5hz,ar-h),7.45(m,2h,ar-h),7.91(d,2h,j＝8.5hz,ar-h)；ms:calcd.m/z[m]564.10,foundm/z[m-h]+563.0.
實(shí)施例51：藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
1細(xì)胞、試劑及儀器
1.1細(xì)胞
caco-2細(xì)胞，訂購單位：中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院細(xì)胞資源中心
1.2試劑
膽固醇購自sigma公司，貨號：c8667-5g
penicillin-streptomycinsolution購自hyclone公司，貨號sv30010
dmem購自wisent公司，貨號310-011-cl
0.25％trypsin-edta購自gibco公司，貨號：25200-072
sodiumtauroclatehydrate購自sigma公司，貨號：86339-1g
甘油單油酸酯購自sigma公司，貨號：m7765-50mg
bca蛋白濃度測定試劑盒購自碧云天(beyotime)公司，貨號：p0012
ripa裂解液(強(qiáng))購自碧云天(beyotime)公司，貨號：p0013b
nacl購自biosharp，批號：2012/09
na2hpo4購自sigma公司，貨號：s5136-100g
kcl購自amresco公司，貨號：0395-500g
kh2po4購自amresco公司，貨號：0781-500g
三氟乙酸購自國藥集團(tuán)，貨號：20120608
1.3受試藥物、陽性藥物以及實(shí)驗(yàn)過程中用到的試劑的配置
培養(yǎng)基的配制：dmem培養(yǎng)基中加入20％的fbs和1％的青霉素-鏈霉素溶液，混勻后4℃保存待用。
pbs緩沖液的配制：1l超純水中加入8gnacl、0.2gkcl、1.44gna2hpo4和0.24gkh2po4，超聲溶清，高溫滅菌。
豆甾醇膠束的配制：稱取0.08065g?；悄懰徕c、0.000535g油酸單甘油酯和0.2063g豆甾醇加入到200ml的dmem培養(yǎng)基中，超聲助溶2h，再經(jīng)0.22μm的濾膜過濾，4℃冰箱保存待用。
細(xì)胞裂解液的配制：按照ripa裂解液(強(qiáng))∶蛋白酶抑制劑＝100∶1的比例配制，冰浴保存，現(xiàn)配現(xiàn)用。
jones試劑的配制：配制4mol/l的h2so4以及4mol/l的cro3水溶液，分別經(jīng)0.22μm濾膜過濾，常溫保存，使用前取等體積混勻使用。
陽性藥(ezetimibe)及受試化合物溶液的配制：將ezetimibe或受試藥用dmso配成100mmol/l的母液待用。
1.4實(shí)驗(yàn)儀器
酶標(biāo)儀購自bio-tek公司，型號：synergyht
高效液相購自日本島津公司，型號：lc-20at
2實(shí)驗(yàn)方法
培養(yǎng)caco-2細(xì)胞于6孔板中，實(shí)驗(yàn)分為空白對照組、模型組、陽性藥組和受試藥組。
每組6個(gè)平行組，當(dāng)細(xì)胞培養(yǎng)到80％，將含有100μmol/l受試藥的培養(yǎng)基加入到每孔中，每孔1.5ml，陽性藥一樣，另外空白組與模型組加入純培養(yǎng)基，一起培養(yǎng)24h。24h后將培養(yǎng)液吸去，用pbs洗2遍，空白組每孔加1ml的dmem培養(yǎng)24h，模型組、陽性藥組和受試藥組每孔加入1ml的豆甾醇膠束培養(yǎng)24h。吸取膽固醇膠束，用pbs洗2遍，最后破碎細(xì)胞，測蛋白含量及細(xì)胞內(nèi)豆甾醇的含量。
3實(shí)驗(yàn)結(jié)果
表2
以上藥理學(xué)數(shù)據(jù)顯示，本發(fā)明通式(i)化合物具有較強(qiáng)的降低細(xì)胞內(nèi)膽固醇作用。