專利名稱：一種青藤堿的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥提取分離技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種青藤堿的制備方法。
背景技術(shù)：
蝙蝠葛(Menis permum dauricum)是傳統(tǒng)中藥植物，其干燥根莖可作藥用，稱“北豆根”。蝙蝠葛具有抗心律失常、降壓、解痙和抗癌等作用，并從該植物中分離出了蝙蝠葛堿、蝙蝠葛諾林堿、蝙蝠葛可林堿等一些有效成分，但關(guān)于蝙蝠葛莖葉化學(xué)成分的研究報(bào)道較少。劉瑞等(西北林學(xué)院學(xué)報(bào)，2010，25 (5):176-178)對蝙蝠葛莖葉進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，其中含有尖防己堿、青藤堿等一些有效成分。青藤M(fèi)(Sinomenine),別名(9alpha, 13alpha, 14alpha) -7, 8- 二脫氫-4-羥基-3，7- 二甲氧基-17-甲基嗎啡喃-6-酮，分子式=C19H23NO4,針狀結(jié)晶，溶于乙醇、丙酮、氯仿和稀堿，微溶于水、乙醚和苯。青藤堿具有明顯的鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抑制免疫、降血壓、抗炎作用，為植物中很強(qiáng)的組織胺釋放劑。動物實(shí)驗(yàn)提示在休克和器官損害中有保護(hù)作用，臨床上用于治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和神經(jīng)痛。青藤堿是一種效果好、副作用小的非甾體消炎止痛藥，并有望成為良好的戒毒藥。侯文峰(中醫(yī)研究，2002，15 (6) :25_26)對青風(fēng)藤提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果表明最佳工藝為加8倍70%乙醇，回流提取2次，每次1. ^！。該方法只能得到總提取物。中國專利 (授權(quán)公告號CNl 174983C) “一種青藤堿的純化方法”將青風(fēng)藤提取物用中性氧化鋁拌勻，干燥粉碎后，用乙酸乙酯洗脫，收集洗脫液，回收乙酸乙酯，殘留物經(jīng)真空干燥，粉碎即得青藤堿。該方法解決了原工藝用有毒液體苯進(jìn)行逆流提取的問題，但產(chǎn)品純度很難達(dá)到98%以上。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種青藤堿的制備方法。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案加以實(shí)現(xiàn)的
(1)將干燥蝙蝠葛莖葉粉碎，加0.5-1%鹽酸或硫酸水溶液浸泡2-8h，超聲處理30min， 過濾得到提取液；
(2)提取液調(diào)節(jié)pH至7.5-8. 5，加入超濾膜超濾，再加入納濾膜納濾，得到濃縮液；
(3)濃縮液調(diào)pH9.5-11，用氯仿萃取，取有機(jī)層，回收氯仿，干燥得到粗品；
(4)粗品采用制備型液相色譜分離，紫外在線檢測，收集目標(biāo)成分，低溫干燥即得青藤堿產(chǎn)品。所述步驟(2)超濾膜為截留分子量為3000-10000的超濾膜，納濾膜為截留分子量為200-500的納濾膜。所述步驟(4)中制備液相的流動相為乙腈-0. 3%乙二胺水溶液，體積比為27 :73， 紫外檢測波長為^4nm。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于
(1)本發(fā)明采用酸水浸提，有效減少雜質(zhì)的溶出，超聲處理，能更好地溶出有效成分，效
率尚；
(2)采用膜分離能濾除多種雜質(zhì)，屬物理除雜，不影響有效成分的性質(zhì)；
(3)制備型液相色譜具有制備量大、產(chǎn)品純度高、簡單易行等優(yōu)點(diǎn)，可產(chǎn)業(yè)規(guī)?；?。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行說明。實(shí)施例1
將干燥蝙蝠葛莖葉粉碎，取1kg，加1%鹽酸或硫酸水溶液浸泡池，超聲處理30min，過濾得到提取液，調(diào)節(jié)PH至7. 5，加入截留分子量為3000-10000的超濾膜超濾，再加入截留分子量為200-500的納濾膜納濾，得到濃縮液，調(diào)pHIO，用氯仿萃取，取有機(jī)層，回收氯仿， 干燥得到粗品；粗品用95%乙醇溶解，配成濃度為50mg/ml的溶液，經(jīng)0. 45 μ m微濾膜過濾， 得到樣品溶液，制備柱以C8鍵合相為填料，粒徑為ΙΟμπι，柱長為15cm、直徑為7cm，六通閥進(jìn)樣，進(jìn)樣體積為25ml，以乙腈-0. 3%乙二胺水溶液為流動相，體積比為27 :73，控制流速為 50ml/min,紫外在線檢測，檢測波長為沈4歷，收集目標(biāo)成分，低溫干燥，得到純度為98. 2% 的青藤堿。實(shí)施例2:
將干燥蝙蝠葛莖葉粉碎，取lkg，加0. 5%鹽酸或硫酸水溶液浸泡他，超聲處理30min，過濾得到提取液，調(diào)節(jié)PH至8. 5，加入截留分子量為3000-10000的超濾膜超濾，再加入截留分子量為200-500的納濾膜納濾，得到濃縮液，調(diào)pH9. 5，用氯仿萃取，取有機(jī)層，回收氯仿，干燥得到粗品；粗品用95%乙醇溶解，配成濃度為100mg/ml的溶液，經(jīng)0. 45 μ m微濾膜過濾， 得到樣品溶液，制備柱以C18鍵合相為填料，粒徑為20 μ m,柱長為10cm、直徑為1cm，六通閥進(jìn)樣，進(jìn)樣體積為5ml，以乙腈-0. 3%乙二胺水溶液為流動相，體積比為27 :73，控制流速為 10ml/min,紫外在線檢測，檢測波長為沈4歷，收集目標(biāo)成分，低溫干燥，得到純度98. 6%的青藤堿。實(shí)施例3:
將干燥蝙蝠葛莖葉粉碎，取^g，加0. 8%鹽酸或硫酸水溶液浸泡他，超聲處理30min， 過濾得到提取液，調(diào)節(jié)PH至8，加入截留分子量為3000-10000的超濾膜超濾，再加入截留分子量為200-500的納濾膜納濾，得到濃縮液，調(diào)pHll，用氯仿萃取，取有機(jī)層，回收氯仿，干燥得到粗品；粗品用75%乙醇溶解，配成濃度為80mg/ml的溶液，經(jīng)0. 45 μ m微濾膜過濾，得到樣品溶液，制備柱以C18鍵合相為填料，粒徑為15 μ m，柱長為50cm、直徑為10cm，六通閥進(jìn)樣，進(jìn)樣體積為30ml，以乙腈-0. 3%乙二胺水溶液為流動相，體積比為27 :73，控制流速為 250ml/min,紫外在線檢測，檢測波長為264nm，收集目標(biāo)成分，低溫干燥，得到純度98. 1%的青藤堿。實(shí)施例4:
將干燥蝙蝠葛莖葉粉碎，取10kg，加0. 5%鹽酸或硫酸水溶液浸泡他，超聲處理30min， 過濾得到提取液，調(diào)節(jié)PH至8. 5，加入截留分子量為3000-10000的超濾膜超濾，再加入截留分子量為200-500的納濾膜納濾，得到濃縮液，調(diào)pHIO，用氯仿萃取，取有機(jī)層，回收氯仿，干燥得到粗品；粗品用95%乙醇溶解，配成濃度為120mg/ml的溶液，經(jīng)0. 45 μ m微濾膜過濾，得到樣品溶液，制備柱以C18鍵合相為填料，粒徑為5 μ m,柱長為40cm、直徑為6cm，六通閥進(jìn)樣，進(jìn)樣體積為50ml，以乙腈-0. 3%乙二胺水溶液為流動相，體積比為27 :73，控制流速為300ml/min，紫外在線檢測，檢測波長為沈4歷，收集目標(biāo)成分，低溫干燥，得到純度99. 0% 的青藤堿。
實(shí)施例5:
將干燥蝙蝠葛莖葉粉碎，取10kg，加0. 8%鹽酸或硫酸水溶液浸泡幾，超聲處理30min， 過濾得到提取液，調(diào)節(jié)PH至8，加入截留分子量為3000-10000的超濾膜超濾，再加入截留分子量為200-500的納濾膜納濾，得到濃縮液，調(diào)pHIO，用氯仿萃取，取有機(jī)層，回收氯仿，干燥得到粗品；粗品用95%乙醇溶解，配成濃度為100mg/ml的溶液，經(jīng)0. 45 μ m微濾膜過濾， 得到樣品溶液，制備柱以C18鍵合相為填料，粒徑為10 μ m,柱長為45cm、直徑為km，六通閥進(jìn)樣，進(jìn)樣體積為40ml，以乙腈-0. 3%乙二胺水溶液為流動相，體積比為27 :73，控制流速為 350ml/min,紫外在線檢測，檢測波長為沈4歷，收集目標(biāo)成分，低溫干燥，得到純度98. 5%的青藤堿。
權(quán)利要求
1.一種青藤堿的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)將干燥蝙蝠葛莖葉粉碎，加0.5-1%鹽酸或硫酸水溶液浸泡2-8h，超聲處理30min， 過濾得到提取液；(2)提取液調(diào)節(jié)pH至7.5-8. 5，加入超濾膜超濾，再加入納濾膜納濾，得到濃縮液；(3)濃縮液調(diào)pH9.5-11，用氯仿萃取，取有機(jī)層，回收氯仿，干燥得到粗品；(4)粗品采用制備型液相色譜分離，紫外在線檢測，收集目標(biāo)成分，低溫干燥即得青藤堿產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種青藤堿的制備方法，其特征在于所述步驟(2)超濾膜為截留分子量為3000-10000的超濾膜，納濾膜為截留分子量為200-500的納濾膜。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種青藤堿的制備方法，其特征在于所述步驟(4)中制備液相的流動相為乙腈-0. 3%乙二胺水溶液，體積比為27 :73，紫外檢測波長為^4nm。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種青藤堿的制備方法，它是將干燥蝙蝠葛莖葉粉碎，加0.5-1%鹽酸或硫酸水溶液提取，提取液調(diào)節(jié)pH至7.5-8.5，加入超濾膜超濾，再加入納濾膜納濾，濃縮液調(diào)pH9.5-11，用氯仿萃取，萃取液濃縮后再采用制備型液相色譜分離，紫外在線檢測，收集目標(biāo)成分，低溫干燥即得青藤堿產(chǎn)品。本發(fā)明能耗低，污染少，產(chǎn)品含量高，可達(dá)98%以上，既適合小型實(shí)驗(yàn)，也可以用于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07D221/28GK102267945SQ20111026484
公開日2011年12月7日 申請日期2011年9月8日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月8日
發(fā)明者萬冬梅, 劉東鋒 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司