專利名稱：：6-o-甲基紅霉素a晶型ⅲ的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及具有治療作用的化合物及其制備方法。具體地講本發(fā)明涉及新化合物6-O-甲基紅霉素A晶型III,其制備方法，含該化合物的藥用組合物及作為治療物的使用方法。
背景技術(shù)：
：6-0-甲基紅霉素A(甲紅霉素)是下式(1)的半合成大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，6-0-甲基紅霉素A對(duì)革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌，一些革蘭氏陰性細(xì)菌、厭氧細(xì)菌、衣原體和支原體具有優(yōu)異的抗菌活性。它在酸性條件下是穩(wěn)定的而且口服有效。已確定的6-O-甲基紅霉素A的結(jié)晶型式，稱為晶型"III",結(jié)晶型式是通過(guò)粉末或單晶的衍射圖確定。見(jiàn)圖l。發(fā)明概述已知的6-0-甲基紅霉素a存在四種結(jié)晶型式，指定為"0"型、't，型、"ii"型和"a"型。見(jiàn)美國(guó)專利5.858.986、5.844.105及中國(guó)專利971814325、03106552.X，通過(guò)粉末X射線衍射確定。美國(guó)專利5.858.986指出"I"型晶體具有良好的體內(nèi)溶解性，而穩(wěn)定性較差。美國(guó)專利.844.105指出"II"型晶體具有較好的熱穩(wěn)定性，但體內(nèi)溶解性較差。中國(guó)專利971814325指出"0"型晶體是"1"、"II"晶體的中間體，是濕晶。中國(guó)專利03106552.X是另一種結(jié)晶型式，6-0-甲基紅霉素A晶型III與晶型"0"、"1"、"11"、"A"具有相同的抗菌活性譜，對(duì)比"o"、"r，、"n"、"a"其優(yōu)越性在于晶型"nr'，具有更優(yōu)良的體內(nèi)溶解性，晶型"nr相對(duì)晶型"r、"n"、"a"的優(yōu)良易溶性可增加抗菌素的生物利用度和提供有意義的配制優(yōu)點(diǎn)，特別是對(duì)比晶型"r、"n"等晶體6-o-甲基紅霉素A晶型III配制成注劑時(shí)，完全消除了注射過(guò)程中的靜脈炎及疼痛等嚴(yán)重副反應(yīng)，在臨床上有廣泛應(yīng)用意義。6-o-甲基紅霉素a晶型ni的特征在于粉末x射線衍射2-6的特征峰值為4.94±0.2、6.42±0.2、9.05±0.5、io.oi土0.2、11.21±0.2、12.04±0.2、1196±0.2、15.12±0.2、15.49±0.2、16.16±0.2、16.91±0.2、18.36±0.2、18.71±0.2、19.45±0.2、20.26±0.2、22.71±0.2、23.69±0.2、24.98±0.2、25.85±0.2,其在粉末X-射線衍射2-6對(duì)應(yīng)的1/10值為U.852.825.01003.938.230.438.919.738.31.816.629.66.615.516.813.717.85.019.4發(fā)明詳述6-0-甲基紅霉素A晶型m通過(guò)將紅霉素A的6—羥基團(tuán)甲基化制備。代表性6-0-甲基紅霉素A制備方法描述于美國(guó)專利43311803、4670549和4990602及中國(guó)的991062310,在此將它們引為參考，通過(guò)多種合成途徑由紅霉素A制備6-0-甲基紅霉素A,特別有用的一種方法包括將紅霉素A9肟及2，、4"分別保護(hù)，使用的保護(hù)基如三甲基甲硅烷基、叔一丁基二苯甲基甲硅烷基等單一或混合保護(hù)基，然后脫保護(hù)去肟化得6-0-甲基紅霉素A。至于"藥學(xué)上可接受的鹽"，它的意思是指在正確的醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)，適合用于與人和較低等動(dòng)物組織接觸，并無(wú)過(guò)度的毒性、刺激性、過(guò)敏反應(yīng)等，以及與合理的利益/風(fēng)險(xiǎn)(benefit/risk)比相稱的鹽。本領(lǐng)域熟知藥學(xué)上可接受的鹽。例如，S.M.Berge等在J.PharmaceuticalSciences,1977.66:1-19中詳細(xì)介紹藥學(xué)上可接受的鹽。在本發(fā)明化合物最后的分離和純化過(guò)程中原地制備所述鹽或使游離堿官能團(tuán)與適當(dāng)有機(jī)酸反應(yīng)分離所述鹽。代表性的酸加成鹽包括乙酸鹽、已二酸鹽、藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬氨酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、環(huán)腺苷酸磺酸鹽(camphersulfonate)、檸檬酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙碘酰鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽(hemisulfate)、庚酸鹽、已酸鹽、氫溴酸鹽、鹽酸鹽、氫磷酸鹽、2-羥基-乙磺酸鹽、乳糖酸鹽、乳酸鹽、月桂酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果本鹽、馬來(lái)酸鹽、丙二酸鹽、甲碘酸鹽、2-萘烯磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、pamoate、果膠酯酸鹽、過(guò)硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫腈酸鹽、甲苯橫酸鹽、十一烷酸鹽、戊酸鹽等。有代表性的堿或堿土金屬鹽包括鈉、鋰、鉀、鎂等，以及無(wú)毒的銨、季銨和氨陽(yáng)離子，包括(但不限于此)四甲基銨、四乙基銨、甲銨、二甲銨、三甲銨、三乙胺、乙胺等。在本發(fā)明的方法中，將通過(guò)上述任何方法制備的6-0-甲基紅霉素A懸浮于所需溶劑中，如乙醇并加熱至大約該溶劑的回流溫度。繼續(xù)加熱并將懸浮液攪拌足夠的時(shí)間以便使大部份固體溶解，一般約IO分鐘至35分鐘。然后，將此懸浮液進(jìn)行熱過(guò)濾，如果需要，可將此濾液在該溶劑的回流溫度或該溫度左右加熱以形成清澈的溶液，然后慢慢地將此濾液冷卻至室溫，任選地在冰洛中進(jìn)一步冷卻。在此說(shuō)明書中，室溫是約2(TC-25°C，然后分離6-0-甲基紅霉素A,并在約4(TC-約78。C常壓或真空干燥得6-0-甲基紅霉素A晶型III。優(yōu)選分離6-0—甲基紅霉素A晶型III的溶劑是乙醇、乙酸異丙酯、四氫^^喃和異丙醇及含5%-10%水份的乙醇。最優(yōu)選分離6-0—甲基紅霉素A晶型m的溶劑是乙醇。本發(fā)明也提供藥用組合物，其中包括6-0-甲基紅霉素A晶型ni與一種或多種無(wú)毒的藥學(xué)上可接受的載體配制，可專門配制藥用組合物為口服藥的固體或液體型式、非腸道注射或直腸給藥。對(duì)人和其它動(dòng)物可以經(jīng)口服、直腸、非直腸、腦池內(nèi)、陰道內(nèi)、腹膜內(nèi)、局部(如粉劑、軟膏劑或滴劑)、舌下或作為口腔或鼻腔噴霧劑給予本發(fā)明的藥用組合物。在此所用的術(shù)語(yǔ)"胃腸外"給藥指靜脈輸注的給藥模式。對(duì)非腸道注射的本發(fā)明藥用組合物包括藥學(xué)可接受的無(wú)菌水溶液或非水溶液、分散液、懸浮液或乳化液以及使用前將無(wú)菌粉末再組合成無(wú)菌可注射溶液或分散液。合適的水溶的和非水溶的載體、稀釋劑、溶劑或溶媒包括水、乙醇、多元醇(如丙三醇、丙二醇、聚乙二醇等)和其適合的混合物、植物油(如橄欖油)、和可注射的有機(jī)酯如油酸乙酯。例如使用包衣材料(如卵磷酯)，在分散的情況下保持所需的粒度和使用表面活性劑來(lái)保持適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)性。所述的組合物也含有輔料如保護(hù)劑、潤(rùn)濕劑、乳化劑和分散劑。為了確保防止微生物的作用可加入各種抗菌劑和抗真菌劑，例如對(duì)羥基苯甲酸酯類、氯丁醇、山梨酸苯酚酯等。含有等滲劑如糖、氯化鈉等也是所需的。通過(guò)加入延緩吸收劑如單硬脂酸鋁和明膠可引起可注射的藥用型式的延長(zhǎng)吸收。通過(guò)在生物降解聚合物如聚交酯一聚乙交酯中型成藥物的微囊基質(zhì)可制備注射的儲(chǔ)藥型式。根據(jù)藥物對(duì)聚合物的比率和所用具體聚合物的性質(zhì)，可以控制藥物的釋放速度，其它生物降解聚合物的實(shí)例包括聚(原酸酯)和聚(酐)。通過(guò)在脂質(zhì)體或?yàn)樯眢w組織相容的微乳劑中截留藥物也可制備儲(chǔ)藥可注射的制劑。例如通過(guò)除菌過(guò)濾器過(guò)濾或?qū)⑾緞┘尤霟o(wú)菌固體組合物型式(在使用之前用無(wú)菌水或其它無(wú)菌可注射的介質(zhì)溶解或分散)來(lái)使可注射的制劑滅茵?？诜o藥的固體劑型包括膠囊、片劑、丸劑、粉劑和顆粒劑。在這樣的固體劑型中，將活性化合物混合于至少一種惰性，藥學(xué)上可接受的賦型劑或載體如檸檬酸鈉或磷酸二鈣和/或a)填充劑或膨脹劑如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸，b)粘合劑例如像羧甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯樹(shù)膠，c)濕潤(rùn)劑如甘油，d)崩解劑如瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯淀粉、藻酸、某些硅酸鹽和碳酸鈉，e)溶液抑制劑如石蠟，f)加速吸收劑如季銨化合物，g)潤(rùn)濕劑例如像十六烷醇和單硬脂酸甘油酯，、h)吸收劑如高嶺土和皂土和O潤(rùn)滑劑如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月桂基硫酸鈉和其混合物。在膠囊、片劑和丸劑情況下，劑型也可包括緩沖劑。使用像乳糖或乳糖這樣的賦型劑以及高分子量聚乙二醇等作為軟和硬填充明膠膠囊的填充劑也可以用于相似類型的固體制劑。用包衣和外層如腸溶衣和藥學(xué)制劑技術(shù)上熟知的其它包衣可制備片劑、糖衣丸、膠囊、丸劑和顆粒劑的固體劑型。它們可任選含有不透明劑和也是僅釋放活性成分的制劑或優(yōu)選在某部分腸道，優(yōu)選以延緩方式釋放。所用的包埋組合物實(shí)例包括聚合物和蠟?；钚曰衔镆部梢允轻枘野菩停艉线m與一種或多種上述賦型劑組合。口服給藥的液體劑型包括藥學(xué)上可接受的乳化劑、溶液、懸浮液、糖漿劑和酏劑。除活性化合物外，液體劑型可含有本領(lǐng)域中所常用的惰性稀釋劑，例如像水或其它溶劑、增溶劑和乳化劑如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、芐醇、苯甲酸芐酯、丙二醇、1,3丁二醇、二甲基甲酰胺、油(特別是棉仔油、落花生油、谷物油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油)、丙三醇、四氫呋喃基醇、聚乙二醇和脫水山梨醇脂肪酸酯，及其混合物。除隋性稀釋劑外，口服制劑也包括輔料如潤(rùn)濕劑、乳化劑和懸浮劑，甜味劑、調(diào)味劑和香味劑。除活性化合物外，懸浮液可含有懸浮劑例如像乙氧化異十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脫水山梨醇酯，微晶纖維素、偏氫氧化鋁(aluminummetahydroxide)皂土、瓊脂和黃蓍膠及其混合物。直腸或陰道給藥的制劑優(yōu)選栓劑，通過(guò)將本發(fā)明化合物與合適的非刺激性的賦型劑或載體如可可脂、聚乙二醇混合或在室溫為固體但在體溫為液體的栓劑蠟來(lái)制備，因而可在直腸或陰道腔融化并釋放活性化合物。本發(fā)明化合物也可以是脂質(zhì)體型式給藥。如本領(lǐng)域所熟知，脂質(zhì)體一般衍生于磷脂或其它脂質(zhì)物質(zhì)。通過(guò)分散于含水介質(zhì)中的單一或多薄層水化液晶來(lái)型成脂質(zhì)體?？梢允褂萌魏螣o(wú)毒、生理上可接受的和能型成脂質(zhì)體的可代謝脂質(zhì)。除本發(fā)明化合物外，本發(fā)明的脂質(zhì)體型式的制劑可含有穩(wěn)定劑、防腐劑、賦型劑等。優(yōu)選的脂質(zhì)是磷脂和磷脂酰膽堿(卵磷脂)，兩者可以是天然的和合成的。本領(lǐng)域熟知型成脂質(zhì)體的方法。例如見(jiàn)Prescott,Ed.，MethodsinlCellBi0L0gy，VolumeXIV,AcademicPress,NewYork,N，Y,(1976)，P.33etseq本發(fā)明化合物的表面給藥劑型包括粉劑、噴霧劑、軟膏劑和吸入劑、在無(wú)菌條件下將活性化合物混合于藥學(xué)上可接受的載體和任何需要的防腐劑、緩沖劑或拋射劑(需要時(shí))中.眼科(Opthalmic)用制劑、眼膏、粉劑和溶液也設(shè)計(jì)在本發(fā)明范圍內(nèi)。對(duì)特定患者、制劑及給藥模式而言，本發(fā)明的藥用制劑中活性成分的實(shí)際劑量水平是可以改變的，以使獲得有效取得所需的治療反應(yīng)的活性化合物用量。選擇劑量水平將取決于特定化合物的活性，給藥途徑、所治療病癥的嚴(yán)重性和所治療患者的癥狀和治療史。然而，在本領(lǐng)域技術(shù)人員內(nèi)開(kāi)始的化合物劑量水平低于所要求取得所需的治療效果的用量并逐步增加劑量直到取得所需的效果為止。對(duì)哺乳綱病者每天每公斤體重一般給予約1至約900mg,更優(yōu)選約5至約200mg的6-0—甲基紅霉素A晶型III的劑量水平。若所需，有效的日劑量可以分為多次劑量的給藥方式，如每日分為2-4次開(kāi)的劑量。提供下面實(shí)施例使本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠?qū)嵤┍景l(fā)明，但僅僅為說(shuō)明本發(fā)明。它們并不構(gòu)成如權(quán)利要求中所定義的對(duì)本發(fā)明范圍的限制。實(shí)施例1:制備6-0—甲基紅霉素A晶型m按照通過(guò)C-9羥肟化，保護(hù)C-9肟羥基，C-2，和C-4"羥基。將C-6羥基甲基化，去肟化并除去保護(hù)基，并用乙醇重結(jié)晶，由紅霉素A制備6-0—甲基紅霉素A。將上述制備的6-0—甲基紅霉素A(10.Og)和95°/。乙醇UOml)的混合物加熱至回流并濾去不溶物質(zhì)(3.2g),將此濾液轉(zhuǎn)移至清潔的燒瓶中并加熱至回流。將此清澈的溶液冷卻至室溫，然后再在冰浴中冷卻，將此液體傾析，濕固體在78。C下干燥得6-0—甲基紅霉素A晶型III(3.3g)。實(shí)施例26-o—甲基紅霉素a晶型"i"、"n"、"a"、"in"的溶解速率使用恒定表面積(13/32"直徑)的藥塊，在37"C于300ml的0.05M轔酸鹽緩沖液在60rpm下進(jìn)行溶解性研究。定時(shí)除去等分量(alliquote)并經(jīng)HPLC[5cmx4.6mm+3uODS-2"LittleChamp"(Regis)柱;50:50乙腈-O.05MpH4.0轔酸鹽緩沖液流動(dòng)相；1.Oml/min流速]直接測(cè)定。如表1所示6-0—甲基紅霉素A晶型"1"、"n"、"a"、"III"的固有溶解速率。表16-0—甲基紅霉素A晶型"1"、"n"、"a"、"III"的固有溶解速率<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>說(shuō)明書圖1為X射線衍射圖譜，其樣品名為6—0—甲Ji3^霉素A晶型m。其特征26(度)為4.9386.4227.8129.0510.01311.20612.03612.56713.96315.12015.49116.16416.91217.36318.36018.71319.4520.25521.2522.70523.69324.97725.84727.46129.36933.131其對(duì)應(yīng)的d值為17.882313.752511.30789.76338.82627.88957.34707.03776.33735.85495.71525.47885.23835.10324.82824.73804.56004.38054.17773.91313.75223.56213.44423.24533.03862.7017其對(duì)應(yīng)的1/1。為12.852.87.525.01003.938.21.830.438.919.738.31.81.616.629.66.615.516.813.717.85.019.45.57.62.9其對(duì)應(yīng)的I.cps值為1258517973624499812385374817529833812193437621751601630290064515221653134117454941901540750287其對(duì)應(yīng)的FWHM值為0.390.210.310.310.200.320.220.310.340.240.350.340.430.320.310.350.390.270.310.210.2權(quán)利要求1、指定為6-O-甲基紅霉素A晶型III的化合物，其在粉末X-射線衍射2-θ的特征峰值為4.94±0.2、6.42±0.2、9.05±0.5、10.01±0.2、11.21±0.2、12.04±0.2、13.96±0.2、15.12±0.2、15.49±0.2、16.16±0.2、16.91±0.2、18.36±0.2、18.71±0.2、19.45±0.2、20.26±0.2、22.71±0.2、23.69±0.2、24.98±0.2、25.85±0.2，其在粉末X-射線衍射2-θ對(duì)應(yīng)的I/I0值為12.852.825.01003.938.230.438.919.738.31.816.629.66.615.516.813.717.85.019.4或其藥學(xué)上可接受的鹽。2、包括治療有效量的6-0-甲基紅霉素A晶型III與藥學(xué)上可接受的載體組合的制劑。3、對(duì)需要此種治療的宿主哺乳動(dòng)物治療細(xì)菌感染的方法，該方法包括對(duì)所述哺乳動(dòng)物給予治療有效量的6-0-甲基紅霉素A晶型III。4、制備6-0-甲基紅霉素A晶型III的方法，其包括(a)將紅霉素A轉(zhuǎn)化為6-0-甲基紅霉素A;(b)用選自下面的溶劑處理6-0-甲基紅霉素A(I)乙醇(II)乙酸異丙酯(III)異丙醇(c)分離步驟(b)中型成的結(jié)晶的6-0-甲基紅霉素A;(d)在室溫至78X:的溫度下干燥步驟(c)中分離的6-0-甲基紅霉素A型成6-0-甲基紅霉素A晶型III。5、權(quán)利要求4的方法，其中在從約40。C至78'C的溫度干燥所述的6-0-甲基紅霉素A。6、權(quán)利要求4的方法，其中步驟(a)包括(I)將紅霉素A轉(zhuǎn)化成紅霉素A9-肟；(II)保護(hù)步驟a中制備的紅霉素A9-膀2，和4"羥基；(III)使步驟b的產(chǎn)物與甲基化試劑反應(yīng)；(IV)將步驟c產(chǎn)物脫保護(hù)和脫肟型成6-0-甲基紅霉素A。7、權(quán)利要求6的方法，其中6-0-甲基紅霉素A是在從約4(TC至約78'C溫度下進(jìn)行常壓或真空干燥的。8、根據(jù)權(quán)利要求7的制備6-O-甲基紅霉素A晶型ni的方法，其中所述溶劑選自(a)乙醇(b)乙酸異丙酯(c)異丙醇9、根據(jù)權(quán)利要求7的制備6-0-甲基紅霉素A晶型III的方法，其中所述的溶劑是乙醇。全文摘要本發(fā)明涉及新化合物6-O-甲基紅霉素A晶型III，其制備方法，含該化合物的藥用組合物及作為治療物的使用方法。文檔編號(hào)C07H17/08GK101190933SQ200610164410公開(kāi)日2008年6月4日申請(qǐng)日期2006年11月30日優(yōu)先權(quán)日2006年11月30日發(fā)明者王凌峰申請(qǐng)人:王凌峰