一種恢復(fù)脫細(xì)胞血管殘余應(yīng)力和殘余應(yīng)變的方法及其試劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種恢復(fù)脫細(xì)胞血管殘余應(yīng)力和殘余應(yīng)變的方法，包括：1)配制體積百分?jǐn)?shù)為0.01?0.05％亞甲藍(lán)的水溶液；2)將脫細(xì)胞血管放入裝有上述水溶液的透明容器中，置于紫外光照射1?4小時；3)清洗脫細(xì)胞血管去除殘留物。本發(fā)明的方法能夠顯著恢復(fù)脫細(xì)胞血管的殘余應(yīng)力和殘余應(yīng)變，不具有溶血作用，符合國家醫(yī)用材料要求。
【專利說明】
一種恢復(fù)脫細(xì)胞血管殘余應(yīng)力和殘余應(yīng)變的方法及其試劑
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及小口徑人工血管領(lǐng)域，尤其涉及一種恢復(fù)脫細(xì)胞血管殘余應(yīng)力和殘余 應(yīng)變的方法及其試劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 大量研究表明心血管疾病病發(fā)率伴隨年齡的增長而增長，隨著中國人口的老齡化 嚴(yán)重，將出現(xiàn)越來越多的心腦血管患者，其中相當(dāng)一部分心腦血管患者會出現(xiàn)血管堵塞和 血管壞死，這種情況下就需要血管移植。目前可將他人正常血管移植體內(nèi)，但此方法供給體 數(shù)量少，價格昂貴，且具有強烈的排異;也有用自身其他部分血管移植，如:大隱靜脈，乳動 脈等，但此方法會損壞其他部位組織，因此從治療條件看發(fā)展人工血管尤為重要。
[0003] 目前大口徑人工血管已經(jīng)應(yīng)用的比較成熟，但相比自體血管移植的遠(yuǎn)期通暢率仍 相差甚遠(yuǎn)，幾乎僅為自體血管通暢率的一半;而在小口徑血管的制備中使用的材料除了大 口徑血管常用的高分子材料外，生物材料、復(fù)合材料均被應(yīng)用到制備中，雖然出現(xiàn)了不少在 小口徑血管研究上的突破，但在臨床上的應(yīng)用仍極為有限，效果極差，遠(yuǎn)期通暢率不好。究 其原因，可能是由于血管材料性能與原血管差異較大導(dǎo)致的，當(dāng)血液與人工血管管壁接觸 時，由于血管壁粗糙度高、彈性較差，不能像正常血管那樣根據(jù)血液的脈動進(jìn)行收縮，容易 形成應(yīng)力集中，引發(fā)了血小板破裂、聚集形成血栓造成血管狹窄，進(jìn)而影響血管的通暢率， 并有報道表明細(xì)胞外基質(zhì)架構(gòu)對動脈粥樣硬化等心血管疾病具有重要影響。因此發(fā)展與人 體血管材料類似，力學(xué)性能相仿的人工血管尤為重要。
[0004] 近年來，脫細(xì)胞血管一度成為了研究的熱點，脫細(xì)胞血管的制備原理是利用物理、 化學(xué)、生物等方法將異體血管中的細(xì)胞清除，保留細(xì)胞的外基質(zhì)，細(xì)胞外基質(zhì)貢獻(xiàn)了血管的 大部分力學(xué)性能，因此脫細(xì)胞血管保留原有血管的大部分力學(xué)性能，這有助于細(xì)胞的粘附 與生長。近年來，對脫細(xì)胞血管力學(xué)性質(zhì)的研究報道不少，但絕大多數(shù)對脫細(xì)胞血管力學(xué)研 究主要是在血管常規(guī)的力學(xué)性能研究，譬如血管消化前后彈性模量的變化、爆破壓力、縫線 耐受力等機(jī)械性能的檢測指標(biāo)，且他們的研究結(jié)論較為一致，脫細(xì)胞血管的爆破壓力、縫線 耐受力測試與未處理血管沒有顯著性差異，彈性模量增大了。表面上看，經(jīng)過消化過后的血 管去除排異反應(yīng)的同時，機(jī)械性能并沒有太多變化，然而本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)消化處理破壞了 平滑肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、彈性纖維、膠原纖維相互之間的連接使得脫細(xì)胞血管的殘余應(yīng)力減 小，而殘余應(yīng)力對保持血管原有的生理狀態(tài)意義重大。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005] 為克服現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，本發(fā)明提供一種恢復(fù)脫細(xì)胞血管殘余應(yīng)力和殘余應(yīng)變 的方法，包括：1)配制體積百分?jǐn)?shù)為0.01-0.05%亞甲藍(lán)的水溶液;2)將脫細(xì)胞血管放入裝 有上述水溶液的透明容器中，置于紫外光照射2-4小時;3)清洗脫細(xì)胞血管去除殘留物。
[0006] 作為優(yōu)選，本發(fā)明恢復(fù)脫細(xì)胞血管力學(xué)性能的方法，包括：1)配制含有50-200u/ml 肝素，體積百分?jǐn)?shù)為〇. 01-0.03 %亞甲藍(lán)和體積百分?jǐn)?shù)為0.125 %的雙氧水的水溶液;2)將 脫細(xì)胞血管放入裝有上述水溶液的透明容器中，置于紫外光照射2-4小時;3)清洗脫細(xì)胞血 管去除殘留物。
[0007]作為進(jìn)一步優(yōu)選，步驟1)還包括向水溶液中通入氧氣。
[0008] 本發(fā)明還提供一種用于恢復(fù)脫細(xì)胞血管殘余應(yīng)力和殘余應(yīng)變的試劑，所述試劑包 括體積百分?jǐn)?shù)為〇. 〇 I -〇. 03 %亞甲藍(lán)的水溶液。
[0009] 作為優(yōu)選，本發(fā)明的試劑中還包括抗凝劑和/或殺菌劑。
[0010]進(jìn)一步優(yōu)選，抗凝劑包括但不限于肝素，EDTA，草酸鈉，枸櫞酸鹽中的一種或幾種。 更優(yōu)選，50-200u/ml肝素。
[0011] 進(jìn)一步優(yōu)選，殺菌劑包括但不限于雙氧水。更優(yōu)選，體積百分?jǐn)?shù)為0.125%的雙氧 水。
[0012] 本發(fā)明還提供一種體積百分?jǐn)?shù)為0.01-0.03%亞甲藍(lán)水溶液用于恢復(fù)脫細(xì)胞血管 殘余應(yīng)力和殘余應(yīng)變的用途。
【附圖說明】
[0013] 圖1戊二醛交聯(lián)與脫細(xì)胞血管張開角均值比較
[0014] 圖2不同條件下的光氧化交聯(lián)張開角均值比較 [0015]圖3正常血管、脫細(xì)胞血管與最佳交聯(lián)血管張開角比較 [0016]圖4正常血管、脫細(xì)胞血管、交聯(lián)血管內(nèi)外壁應(yīng)變均值比較
【具體實施方式】
[0017] 以下由特定的具體實施例說明本發(fā)明的實施方式，熟悉此技術(shù)的人士可由本說明 書所揭露的內(nèi)容輕易地了解本發(fā)明的其他優(yōu)點及功效。
[0018] 制備例1:脫細(xì)胞血管的制備
[0019] 1.1大鼠左頸總動脈的獲取
[0020] 所有大鼠均來自中國人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心，動物性別為雄性， 體重300g±25,采用斷頸法將大鼠處死。待大鼠死亡后，將大鼠固定在泡沫板上，然后使用 無菌鑷子和剪刀將大鼠頸部的毛剪掉，破開頸部尋找到大鼠左頸總動脈，找到大鼠左頸總 動脈后，沿著左頸總動脈下端(連接心臟處)至上端(動脈分叉處)逐步將附著其上的神經(jīng)和 肌肉組織去除使其僅保留血管。待去除左頸總動脈表面的神經(jīng)與肌肉后，用相機(jī)拍下在體 管并測量其長度，之后從左頸總動脈下端(連接心臟處）、上端(動脈分叉處)剪下血管并用 相機(jī)拍下其離體照片并測量其長度。
[0021] 1.2大鼠左頸總動脈的預(yù)處理
[0022]取下大鼠左頸總動脈之后，立即放入裝有PBS溶液的容器內(nèi)，取用鑷子將殘留在血 管壁上的神經(jīng)纖維與肌肉組織撕掉，用注射器往血管內(nèi)腔灌注PBS溶液將滯留在血管內(nèi)部 的血液沖洗干凈，沖洗5-8次即可，然后進(jìn)行預(yù)處理，預(yù)處理步驟如下：
[0023] 1)取得的大鼠左頸總動脈放于裝有三蒸水的EP管內(nèi)，并在搖床上低滲處理24小時 以便使血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞破裂，溫度為37°C，轉(zhuǎn)速120r/min;
[0024] 2)在低滲處理之后將EP管內(nèi)的蒸餾水倒掉，裝入PBS溶液，然后放于-80 °C冰箱、37 °C水浴鍋交替處理3次，每次處理時間2小時，-80°C、37°C水浴鍋處理分別1小時，旨在進(jìn)一 步破壞血管壁細(xì)胞；
[0025] 3)反復(fù)凍融之后，將EP內(nèi)的PBS溶液倒掉，再往EP管內(nèi)加入70 %的酒精，并用注射 器往血管內(nèi)腔灌注酒精使其充滿液體，然后在室溫下處理24小時進(jìn)行去脂處理，并在第2、 4、8、14小時換液，最后一次換成PBS溶液。
[0026] 1.3大鼠左頸總動脈的消化處理
[0027] 在大鼠左頸總動脈經(jīng)過預(yù)處理后，緊接著便進(jìn)行消化處理，消化處理的具體步驟 如下：
[0028] 1)預(yù)處理后的大鼠左頸總動脈放入PBS溶液的EP管內(nèi)，用注射器向血管內(nèi)部灌注 溶液進(jìn)行清洗，清洗5-8次，然后置于搖床上處理2小時，每隔半小時換液，每次換液時同樣 用注射器進(jìn)行沖洗，溫度為37°C，轉(zhuǎn)速120r/min;
[0029] 2)待經(jīng)預(yù)處理的血管清洗完畢后，將其放入0.125 %胰酶溶液中處理1.5小時，并 置于搖床上，轉(zhuǎn)速120r/min，溫度37 °C，放入胰酶溶液之前用注射器將胰酶溶液向血管腔內(nèi) 灌注，使其腔內(nèi)充滿溶液，且每隔半小時用注射器灌注一次；
[0030] 3)將經(jīng)過胰酶消化處理后的血管放入PBS溶液的EP管內(nèi)，并置于床上處理2小時， 每隔半小時換液，期間每次用注射器沖洗，溫度為37°C，轉(zhuǎn)速120r/min。
[0031 ]制備例2:脫細(xì)胞血管的戊二醛交聯(lián)-對照組
[0032]戊二醛交聯(lián)一般是酸催化交聯(lián)，戊二醛上的醛基會與羥基或者氨基進(jìn)行反應(yīng)，可 將單體、線型高分子轉(zhuǎn)變成三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的物質(zhì)，從而提高膠原纖維的拉伸強度及抗降解 能力，并對其生物力學(xué)性質(zhì)有一定的影響，因此本發(fā)明選用戊二醛作為其中一種交聯(lián)試劑， 方法如下：
[0033] ①用PBS將50%的戊二醛溶液稀釋為0.25% ;
[0034]②用注射器將0.25%的戊二醛溶液向脫細(xì)胞血管管腔內(nèi)注入，使管腔內(nèi)充滿液 體，之后再整根浸泡于溶液中30分鐘，環(huán)境為4 °C冰箱內(nèi)；
[0035]③交聯(lián)完成后取出血管放入PBS中，并用注射器反復(fù)沖洗內(nèi)部，然后置于搖床上6 小時，間每隔一小時換液。
[0036] 制備例3_5(本發(fā)明組1-3)
[0037] 實驗步驟如下：
[0038] ①0.01%亞甲藍(lán)+紫外照射（2h)
[0039] 1)配置含有10011/1111肝素、0.01%亞甲藍(lán)的去離子水；
[0040] 2)向配置的溶液中通氧，并加入雙氧水溶液使其濃度為0.125% ;
[0041] 3)將脫細(xì)胞血管放入裝有配置溶液的透明EP管內(nèi)，并用注射器向脫細(xì)胞血管管腔 灌注溶液，然后置于中波長的紫外光下照射2小時；
[0042] 4)待脫細(xì)胞血管經(jīng)過紫外交聯(lián)完后，將其放入PBS溶液的EP管內(nèi)，并置于搖床上處 理2小時，每隔半小時換液，轉(zhuǎn)速為120r/min，溫度為37°C。
[0043] ②0.03%亞甲藍(lán)+紫外照射(4h)
[0044] 1)配置含有100u/ml肝素、0.03%亞甲藍(lán)的去離子水；
[0045] 2)向配置的溶液中通氧，并加入雙氧水溶液使其濃度為0.125% ;
[0046] 3)將脫細(xì)胞血管放入裝有配置溶液的透明EP管內(nèi)，并用注射器向脫細(xì)胞血管管腔 灌注溶液，然后置于中波長的紫外光下照射4小時；
[0047] 4)待脫細(xì)胞血管經(jīng)過紫外交聯(lián)完后，將其放入PBS溶液的EP管內(nèi)，并置于搖床上處 理2小時，每隔半小時換液，轉(zhuǎn)速為120r/min，溫度為37°C。
[0048] ③0.005%亞甲藍(lán)+紫外照射Ih
[0049] 1)配置含有100u/ml肝素、0.005%亞甲藍(lán)的去離子水；
[0050] 2)向配置的溶液中通氧，并加入雙氧水溶液使其濃度為0.125% ;
[0051] 3)將經(jīng)過預(yù)處理的脫細(xì)胞血管放入裝有配置溶液的透明EP管內(nèi)，并用注射器向脫 細(xì)胞血管管腔灌注溶液，然后置于中波長的紫外光下照射1小時；
[0052] 4)待脫細(xì)胞血管經(jīng)過紫外交聯(lián)完后，將其放入PBS溶液的EP管內(nèi)，并置于搖床上處 理2小時，每隔半小時換液，轉(zhuǎn)速為120r/min，溫度為37°C。
[0053] 效果例1:張開角測定
[0054] 分組:正常血管組，脫細(xì)胞血管組，交聯(lián)劑對照組，本發(fā)明組1-3,每組各用3根血管 進(jìn)行測定，遴選每根血管在點0 %、20 %、40 %、60 %、80 %、100 %的張開角，并求得在各個點 的平均值，通過各點的平均值可求得每根血管的平均值，然后再將每根血管的平均值再求 平均值以求得正常血管組，脫細(xì)胞血管組，交聯(lián)血管組的張開角平均值。
[0055]張開角的測量方式如下：
[0056]①取出新鮮的大鼠左頸總動脈血管(或脫細(xì)胞血管，交聯(lián)血管），浸泡在PBS緩沖液 中；
[0057]②在顯微鏡下進(jìn)行觀察，拍攝照片；
[0058]③用手術(shù)刀將血管沿軸向切成圓環(huán)，血管環(huán)寬度Imm;
[0059]④在顯微鏡下對每個環(huán)的橫向（血管管腔朝向水平)和豎向（血管管腔朝上)進(jìn)行 觀察，拍照；
[0060]⑤將血管環(huán)剪開，靜止一段時間（約1分鐘），觀察并拍攝圖片；
[0061]⑥用image tools處理所拍攝的圖片，測量張開角，并進(jìn)行分析。
[0062] 測定結(jié)果如圖1-3 [0063]測走結(jié)果表明：
[0064] 1)脫細(xì)胞血管的張開角均值小于正常血管的張開角均值，且具有顯著性差異，表 明經(jīng)過消化處理的血管管壁殘余應(yīng)力減小。
[0065] 2)經(jīng)過戊二醛交聯(lián)的脫細(xì)胞血管張開角沒有增大反而大幅度減小且具有極顯著 性差異，表明經(jīng)戊二醛交聯(lián)后的血管壁殘余應(yīng)力減小了。
[0066] 3)本發(fā)明組1-3通過亞甲藍(lán)處理+紫外照射后的脫細(xì)胞血管相對于亞甲藍(lán)處理前 的脫細(xì)胞血管，殘余應(yīng)力均有恢復(fù)。通過〇.01%亞甲藍(lán)+紫外照射兩小時的交聯(lián)方式對脫細(xì) 胞血管的殘余應(yīng)力恢復(fù)最明顯。通過SPSS作T檢驗發(fā)現(xiàn)，0.005 %亞甲藍(lán)+紫外照射Ih交聯(lián)方 法與0.01%亞甲藍(lán)+紫外照射2h的每組張開角均值具有顯著性差異;0.03%亞甲藍(lán)+紫外照 4h相比0.01%亞甲藍(lán)+紫外照射2h的張開角均值略小，但不具有顯著性差異。
[0067]效果例2
[0068]殘余應(yīng)變測定:反映血管內(nèi)外壁力學(xué)情況
[0069] 分組:正常血管組，脫細(xì)胞血管組，交聯(lián)劑對照組，本發(fā)明組1，每組各用3根血管進(jìn) 行測定，遴選每根血管在點0 %、20 %、40 %、60 %、80%、100 %的應(yīng)變值并求得在各個點的 平均值，通過各點的平均值可求得每根血管的平均值，然后再將每根血管的平均值再求平 均值以求的正常血管組，脫細(xì)胞血管組，交聯(lián)血管組的內(nèi)外壁殘余應(yīng)變平均值。
[0070] 本發(fā)明在計算血管的殘余應(yīng)變時為了使結(jié)果更接近血管的實際情況采用image too 1 實
[0071] 測血管內(nèi)外壁周長。
[0072]具體操作步驟如下：
[0073] 1)取出新鮮的大鼠左頸總動脈血管(或脫細(xì)胞血管、交聯(lián)血管），浸泡在PBS緩沖液 中；
[0074] 2)在顯微鏡下進(jìn)行觀察，拍攝照片；
[0075] 3)用手術(shù)刀將血管沿軸向切成圓環(huán)，血管環(huán)寬度Imm;
[0076] 4)在顯微鏡下對每個環(huán)的橫向（血管管腔朝向水平)和豎向（血管管腔朝上)進(jìn)行 觀察，拍照；
[0077]
[0078] 5)將血管環(huán)剪開，靜止一段時間（約1分鐘），觀察并拍攝圖片；
[0079] 6)用image tools處理所拍攝的圖片，測量整根血管長度、血管環(huán)橫向長度、血管 環(huán)剪開前內(nèi)外壁周長、血管環(huán)剪開后內(nèi)外壁周長，然后根據(jù)格西-格林的應(yīng)變張量公式求得 殘余應(yīng)變，公式為
表示剪開前血管環(huán)的 內(nèi)壁周長，LunItia/5表示剪開前血管環(huán)的外壁周長，LQ- stres，表示剪開后血管環(huán)的內(nèi)壁周長， Lo-stresse0表示剪開后血管環(huán)的外壁周長。
[0080] 測定結(jié)果如圖4
[0081] 實驗結(jié)果表明：
[0082] 通過比對3組正常血管、3組脫細(xì)胞血管和3組交聯(lián)血管內(nèi)外壁殘余應(yīng)變均值，并作 相應(yīng)的T檢驗，可以得出結(jié)論：
[0083] 1)正常血管的外壁殘余應(yīng)變均值的絕對值大于內(nèi)壁殘余應(yīng)變均值的絕對值，且存 在極顯著性差異;脫細(xì)胞血管的內(nèi)壁殘余應(yīng)變均值的絕對值與外壁殘余應(yīng)變均值的絕對值 不存在顯著性差異。
[0084] 2)正常血管內(nèi)壁殘余應(yīng)變均值與脫細(xì)胞血管的內(nèi)壁殘余應(yīng)變均值不存在顯著性 差異;正常血管的外壁殘余應(yīng)變均值大于脫細(xì)胞血管的外壁殘余應(yīng)變均值且存在極顯著性 差異。
[0085] 3)在對脫細(xì)胞血管與交聯(lián)血管的殘余應(yīng)變均值比較中發(fā)現(xiàn)，脫細(xì)胞血管與交聯(lián)血 管內(nèi)壁殘余應(yīng)變變化不大，不存在顯著性差異，而交聯(lián)血管外壁殘余應(yīng)變均值比脫細(xì)胞血 管的外壁殘余應(yīng)變均值大，存在顯著性差異。
[0086] 效果例3:交聯(lián)血管的血液相容性實驗
[0087] 選取本發(fā)明組1交聯(lián)血管3組，陰性對照3組，陽性對照3組，通過分光光度計測得數(shù) 值如下：
[0088] 表1脫細(xì)胞血管血液相容性相關(guān)數(shù)值
[0090]根據(jù)紅細(xì)胞溶血率(Erythrocyte hemolysis rate，EHR)計算公式： rnno11 實驗組OD均值-陰性對照組Ο?均值 陽性照組OD均值-陰性對照組OD均值
[0092] 可得經(jīng)交聯(lián)后的脫細(xì)胞紅細(xì)胞溶血率為2.8%。因此可以判定經(jīng)交聯(lián)后的脫細(xì)胞 血管不具有
[0093] 溶血作用。
[0094] 效果例4:交聯(lián)血管的細(xì)胞毒性實驗
[0095] 細(xì)胞相對增殖率（（Relative growth rate ,RGR)計算公式如下： Γηη〇Λ? 實-驗組OD 均值 1ΑΛα/
[0096] RGR = ---- X100% 對照組OD均值
[0097] 其中毒性反應(yīng)0-1級為合格醫(yī)用材料。
[0098] 表2細(xì)胞毒性實驗的反應(yīng)分級標(biāo)準(zhǔn)
[0102] 細(xì)胞毒性實驗表明該交聯(lián)血管符合醫(yī)用材料的要求。
[0103] 任何熟悉此技術(shù)的人士皆可在不違背本發(fā)明的精神及范疇下，對上述實施例進(jìn)行 修飾或改變。因此，舉凡所屬技術(shù)領(lǐng)域中具有通常知識者在未脫離本發(fā)明所揭示的精神與 技術(shù)思想下所完成的一切等效修飾或改變，仍應(yīng)由本發(fā)明的權(quán)利要求所涵蓋。
【主權(quán)項】
1. 一種恢復(fù)脫細(xì)胞血管殘余應(yīng)力和殘余應(yīng)變的方法，其特征在于，包括如下步驟：1)配 制包含體積百分?jǐn)?shù)為0.01-0.03 %亞甲藍(lán)的水溶液;2)將脫細(xì)胞血管放入裝有上述水溶液 的透明容器中，置于紫外光照射2-4小時;3)清洗脫細(xì)胞血管去除殘留物。2. 如權(quán)利要求1所述恢復(fù)脫細(xì)胞血管殘余應(yīng)力和殘余應(yīng)變的方法，其特征在于，包括如 下步驟：1)配制含有50-20011/ 1111肝素，體積百分?jǐn)?shù)為0.01-0.03%亞甲藍(lán)和體積百分?jǐn)?shù)為 0.125%的雙氧水的水溶液;2)將脫細(xì)胞血管放入裝有上述水溶液的透明容器中，置于紫外 光照射2-4小時;3)清洗脫細(xì)胞血管去除殘留物。3. 如權(quán)利要求1或2所述恢復(fù)脫細(xì)胞血管殘余應(yīng)力和殘余應(yīng)變的方法，其特征在于，步 驟1)還包括向水溶液中通入氧氣。4. 一種用于恢復(fù)脫細(xì)胞血管恢復(fù)脫細(xì)胞血管殘余應(yīng)力和殘余應(yīng)變的試劑，其特征在 于，包括體積百分?jǐn)?shù)為〇. 〇 1 -〇. 03 %亞甲藍(lán)水溶液。5. 如權(quán)利要求4所述試劑，其特征在于，所述水溶液中還包括抗凝劑和/或殺菌劑。6. 如權(quán)利要求5所述試劑，其特征在于，所述抗凝劑包括但不限于肝素，EDTA，草酸鈉或 枸櫞酸鹽中的一種或幾種。7. 如權(quán)利要求5所述試劑，其特征在于，所述抗凝劑為50-200u/ml肝素。8. 如權(quán)利要求5所述試劑，其特征在于，所述殺菌劑為雙氧水。9. 如權(quán)利要求8所述試劑，其特征在于，所述雙氧水的體積百分?jǐn)?shù)為0.125 %。10. 如權(quán)利要求4至9中任意一項所述試劑用于恢復(fù)脫細(xì)胞血管殘余應(yīng)力和殘余應(yīng)變的 用途。
【文檔編號】A61L27/36GK105963784SQ201610291908
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年5月5日
【發(fā)明人】葉志義, 王貴學(xué), 駱青松, 潘君
【申請人】重慶大學(xué)