本發(fā)明涉及桑黃乙醇提取物在機體中治療尿毒癥的新用途，屬于醫(yī)藥技術(shù)領域。
背景技術(shù)：
尿毒癥是影響人類健康的重大疾病之一。隨著高血壓和糖尿病患病率的增加，尿毒癥的發(fā)生率在持續(xù)上升。尿毒癥是指在各種慢性腎臟疾病發(fā)病的基礎上，不可逆地喪失腎功能和腎單位，導致以代謝產(chǎn)物和酸堿平衡紊亂以及內(nèi)分泌失調(diào)為特征的臨床綜合征。國際腎臟病協(xié)會統(tǒng)計結(jié)果顯示尿毒癥在自然人群中的年發(fā)病率為98-198/100萬，經(jīng)濟發(fā)達的日本和美國的發(fā)病率分別達996/100萬和802/100萬。
目前常用內(nèi)科療法、透析療法及腎臟移植等。這些療法可以改善臨床癥狀，減輕臨床患者的痛苦，但內(nèi)科療法尚難以徹底阻斷病理進展，且副作用大；透析只能解決腎臟的部分代謝問題，尚不能較好改善腎臟的內(nèi)分泌功能；腎移植的腎源有限，且免疫排斥現(xiàn)象一時還難以解決。加之透析療法和腎臟移植費用昂貴，使眾多患者望而卻步。
隨著各種疾病發(fā)病率的上升，藥物的使用越來越多，因藥物引起的腎損傷發(fā)生率很高（大部分藥物及其代謝產(chǎn)物經(jīng)腎臟排出體外）。研究顯示藥物導致急性腎小管壞死或急性腎間質(zhì)腎炎的發(fā)生率高達18.3%，目前臨床常見的對腎損傷的藥物有抗感染類（氨基糖苷類、萬古霉素、β-內(nèi)酰胺類抗生素、兩性霉素B、抗病毒制劑）；免疫制劑（環(huán)孢素、它克莫司）；抗腫瘤藥物（順鉑、異環(huán)磷酰胺、甲氨蝶呤、多柔比星、二炭磷酸鹽化合物）、甾體類抗炎藥（乙酰水楊酸、對乙酰氨基酚、雙氯芬酸）；天然產(chǎn)物化學成分（馬兜鈴酸、雷公藤甲素）及利尿藥（甘露醇）等，其中抗生素腎損害的發(fā)生率達36%。藥物性腎損傷位居與腎臟有關的疾病的首位，特別是引起醫(yī)學界的廣泛關注。藥物性腎損傷也是新藥開發(fā)過程中的常見問題，它是導致藥物撤市的重要原因之一，消耗了大量的人力和財力。因此，如何有效防治尿毒癥一直是全球關注的難點和熱點之一，繼續(xù)堅持不懈地研究和探尋治療尿毒癥新藥物仍是當前醫(yī)學研究的一項艱巨任務。
目前，尿毒癥的治療有西藥藥用活性炭和中藥復方尿毒清顆粒、百令膠囊等。西藥雖然有一定的療效，但存在毒副作用大且復發(fā)率高等不足，如藥用活性炭在疾病的初期階段有效，但后期反而會使病情加重，不能改善增加血肌酐和尿素，出現(xiàn)難以控制的癥狀，最終會發(fā)展為更嚴重的后果。中醫(yī)藥在防病治病方面有著獨特的特點。
尿毒癥病多由慢性腎臟病進一步發(fā)展而來，尿毒癥屬危急重癥范疇。中醫(yī)認為尿毒癥特點是脾腎陽虛，濕毒內(nèi)潴，濁邪滯留，壅而化熱，內(nèi)攻上逆和腎絡淤血，氣化不利、下關上格。在病機上存在著“濁”與“瘀”的共性，同時又因人體素質(zhì)差異而表現(xiàn)有“虛”與“逆”等虛實夾雜，錯綜復雜的癥候群。雖然透析或腎移植是尿毒癥患者生存的治療手段，但是在尿毒癥的早、中期，在治療原發(fā)病的基礎上，采用行之有效的藥物治療措施以有效地阻止或延緩尿毒癥進展是一個較為理想的方法。研究表明中藥對尿毒癥早、中期患者可有效地阻止或延緩腎功能的進行性惡化，延緩尿毒癥的發(fā)展。目前使用的單味中藥（豬苓、冬蟲夏草、大黃等）或復方中藥（百令膠囊、腎衰寧、尿毒清顆粒等）在治療尿毒癥方面顯示著獨特的療效，有著巨大的發(fā)展?jié)摿?。從中藥中尋找活性強且低毒的能減輕或延緩尿毒癥進展的新藥物，對治療尿毒癥有著重要的意義。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種天然藥物桑黃提取物，特別是一種乙醇提取物；
本發(fā)明的另一目的是提供上述桑黃提取物的制備方法；
本發(fā)明還有一個目的是克服現(xiàn)有治療尿毒癥藥物的缺點，提供桑黃提取物在制備尿毒癥藥物中的應用。
本發(fā)明實現(xiàn)過程如下：
桑黃乙醇提取物提取和制備工藝：桑黃粉碎后，用6-8倍體積的80-95%乙醇浸泡12-36小時，超聲提取2-5次，回收乙醇，濃縮得棕色膏狀物。
將桑黃乙醇提取物作為活性成分，與適宜的賦形劑相結(jié)合，制成各種藥物制劑，包括顆粒劑、片劑、膠囊、口服液等口服劑型，以及注射劑型，上述的制劑可按照各種制劑常規(guī)的制備工藝制成。
上述制劑中可含有輔助物質(zhì)、穩(wěn)定劑、潤濕劑和其它常用的添加劑，如檸檬酸、乳糖、硬脂酸、酒石酸、石膏粉、硬脂酸鎂、蔗糖、滑石粉、玉米淀粉、瓊脂、明膠、花生油、果膠、可可脂、橄欖油、抗壞血酸、乙二醇、甘露醇等。
本發(fā)明桑黃乙醇提取物可以降低腎功能的生化指標血尿素和血肌酐，能改善腎功能、減少腺嘌呤代謝產(chǎn)物對腎臟的病理性損害具有較好保護作用，為臨床提供一種新的治療尿毒癥的藥物，具有廣闊的應用前景。
具體實施方式
實施例1桑黃乙醇提取物的制備
目前提取藥材的方法有滲漉法、加熱回流法、超聲提取法、索式提取法等。申請者采用簡單快速的超聲提取方法，考察桑黃經(jīng)干燥、粉碎后，用6-8倍體積的85%乙醇浸泡約24小時，超聲時間（15分鐘、30分鐘、45分鐘、60分鐘）和超聲次數(shù)（2次和3次）對提取率（提取浸膏/生藥量）的影響。結(jié)果顯示在超聲提取2次的前提下，超聲時間為15分鐘、30分鐘、45分鐘、60分鐘時的提取率分別為2.0%、2.2%、2.7%、3.2%；在超聲提取3次的前提下，超聲時間為15分鐘、30分鐘、45分鐘、60分鐘時的提取率分別為2.5%、2.9%、3.5%、3.7%。最終超聲提取的條件是：超聲提取3次，每次45分鐘。超聲提取液回收乙醇，濃縮得棕色膏狀物即為桑黃提取物。
實施例2
為了驗證桑黃乙醇提取物對尿毒癥治療的效果，申請人采用腺嘌呤誘導的尿毒癥大鼠模型進行了藥效學試驗，各種試驗情況如下：
1. 實驗藥物和實驗動物
桑黃乙醇提取物懸濁液，含2%的阿拉伯樹膠粉的自來水配制。健康雄性SD大鼠，體重220-240g，購買于第四軍醫(yī)大學動物中心。
實驗儀器和試劑
ZH-B6型大鼠代謝籠（安徽淮北正華生物儀器有限公司）；美特列-托利多十萬分之一分析天平；腺嘌呤購于sigma公司（批號：A8626-5g，純度≥99%）。
實驗方法
1）腺嘌呤誘導尿毒癥模型建立及桑黃乙醇提取物治療試驗
健康雄性SD大鼠購置后一周適應環(huán)境，根據(jù)其體重、隨機分為正常組、腺嘌呤模型組、腺嘌呤+桑黃乙醇提取物治療組，每組均為8只。實驗期間動物自由飲水、攝食。實驗開始后，正常組以自來水10ml/kg/d灌胃；模型組和腺嘌呤+桑黃乙醇提取物灌胃200 mg/kg/d腺嘌呤，持續(xù)3周；3個小時后腺嘌呤+桑黃乙醇提取物組再給10g/kg生藥灌胃桑黃乙醇提取物進行治療，治療給予另外的3周進行治療。所有動物于實驗第6周末置于代謝籠留取24小時的尿液后，大鼠麻醉后頸動脈取血，解刨取心、肝、腎等組織。分析桑黃乙醇提取物對尿毒癥大鼠的臟器指數(shù)、血清生化指標及血液學指標，并作統(tǒng)計學分析。結(jié)果見表1、2、3。
2）實驗動物生化指標和血液學指標檢測方法
各種臟器用美特列-托利多十萬分之一分析天平稱量并記錄。生化指標和血液學指標的測定委托西安醫(yī)學院附屬醫(yī)院完成。
3）藥效計算與統(tǒng)計分析
結(jié)果以平均值±標準偏差表示，采用t檢驗，計算p值，將腺嘌呤模型組與正常對照組、桑黃乙醇提取物組與腺嘌呤模型組進行組間差異性比較，t檢驗，p<0.05為有顯著性差異，p<0.01為有非常顯著性差異，判斷藥物對尿毒癥的治療效果。
4）腺嘌呤誘導尿毒癥模型及桑黃乙醇提取物對該模型治療的結(jié)果
（1）桑黃乙醇提取物治療組對尿毒癥大鼠的病理學的影響
正常組的大鼠腎臟顏色鮮紅且表面光滑，而模型組的大鼠腎臟體積增大、明顯腫大，顏色蒼白、腎臟表面出現(xiàn)凹凸不平現(xiàn)象，與人的大白腎類似，部分腎臟體積較正常組增大2倍以上。腎臟出現(xiàn)明顯的炎細胞浸潤，部分腎小管擴張，上皮細胞脫落壞死，甚至呈囊性，最后導致腎間質(zhì)纖維化?？梢姶笮〔灰?、數(shù)量不等的棕褐色結(jié)晶或異物肉芽腫形成及粉染勻質(zhì)的管型。與正常對照組相比，腎重指數(shù)、左右腎的長度和寬度增大且存在統(tǒng)計學上的顯著性差異。腺嘌呤模型組尿量也增大且存在統(tǒng)計學上的顯著性差異（表1）。桑黃乙醇提取物對尿毒癥模型有較好的防治作用，主要表現(xiàn)為腎臟體積減小，顏色蒼白度減輕、腎重指數(shù)、腎臟長度和寬度減?。ū?）且部分指標存在統(tǒng)計學上的顯著性差異。另外，尿量與模型組比較出現(xiàn)降低的趨勢但沒有達到統(tǒng)計學上的顯著差異，這些結(jié)果證明桑黃乙醇提取物對腺嘌呤誘導的尿毒癥有較好的保護作用。
（2）桑黃乙醇提取物治療組腎功能和脂質(zhì)代謝生化指標的影響
模型組血中尿素和血肌酐與正常組比較顯著升高且存在統(tǒng)計學上的非常顯著差異?？偟鞍住⒖偰懝檀?、甘油三酯和尿酸升高，均存在統(tǒng)計學上的非常顯著差異（表2）。與模型組比較，桑黃乙醇提取物治療組逆轉(zhuǎn)在模型組增加的尿素、血清肌酐和尿酸并存在統(tǒng)計學上的顯著差異（表2）。桑黃乙醇提取物治療組也同時改善脂質(zhì)代謝的生化指標總膽固醇和甘油三酯的異常變化（表2）。但是桑黃乙醇提取物治療組對腺嘌呤導致的總蛋白的沒有統(tǒng)計學上的顯著性差異。這些生化指標的變化說明桑黃乙醇提取物不僅能促進體內(nèi)的氮質(zhì)化合物的排出，而且對紊亂的脂質(zhì)代謝也有較好的改善作用，表明桑黃乙醇提取物對腺嘌呤誘導的尿毒癥有較好治療作用。
討論和結(jié)論
腺嘌呤的致病原理是高濃度腺嘌呤進入體內(nèi)，通過黃嘌呤氧化酶的作用生成極難溶于水的2,8-二羥基腺嘌呤沉積在腎小管，影響氮質(zhì)化合物的排泄和電解質(zhì)等物質(zhì)的代謝。病理反應是腺嘌呤代謝物的結(jié)晶沉積以及圍繞其所生成的肉芽腫，致使腎小管擴張或萎縮、間質(zhì)水腫、淋巴細胞浸潤及腎間質(zhì)纖維組織的增生。這與人類腎小管功能減退的病理損害類似。桑黃乙醇提取物在腺嘌呤所致尿毒癥的大鼠體內(nèi)進行治療實驗。實驗表明桑黃乙醇提取物可以降低腎功能的生化指標血尿素和血肌酐且存在統(tǒng)計學上非常顯著差異。桑黃乙醇提取物能改善腎功能、減少腺嘌呤代謝產(chǎn)物對腎臟的病理性損害具有較好保護作用。此外，桑黃乙醇提取物對尿毒癥的脂質(zhì)代謝的紊亂也有較好的改善作用，桑黃乙醇提取物不僅可以改善影響氮質(zhì)代謝產(chǎn)物的排泄，而且對脂質(zhì)類代謝產(chǎn)物有較好的改善作用，可為臨床提供一種新的治療尿毒癥的藥物，具有廣闊的應用前景。