一種含抗癌藥物及其增效劑的抗癌組合物的制作方法

專利名稱：一種含抗癌藥物及其增效劑的抗癌組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含抗癌藥物及其增效劑的抗癌組合物，屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域。具體而言，本發(fā)明提供一種含抗癌藥物及其增效劑的抗癌緩釋注射劑和緩釋植入劑。該抗癌組合物可有效地抑制或破壞實(shí)體腫瘤間質(zhì)及腫瘤血管，并能抑制腫瘤的新生血管，有效降低腫瘤內(nèi)的張力、間質(zhì)壓力、間質(zhì)粘性，進(jìn)而提高其間質(zhì)液導(dǎo)率，有利于藥物進(jìn)入實(shí)體腫瘤以及在腫瘤內(nèi)的有效擴(kuò)散，還可增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)藥物的敏感性。
背景技術(shù)：
傳統(tǒng)的化療不具選擇性，難于腫瘤局部形成有效藥物濃度或治療劑量，效果差，毒性大，單純提高藥物或放射劑量又受到全身毒性反應(yīng)的限制。參見(jiàn)孔等“瘤內(nèi)放置順鉑加系統(tǒng)卡莫司汀治療大鼠腦腫瘤”《外科腫瘤雜志》69期76-82頁(yè)，1998年(Kong Q et al.，J SurgOncol.1998 Oct；69(2)76-82)。低劑量的抗癌藥物治療不僅能夠增加癌細(xì)胞的藥物耐受性，而且還可促進(jìn)其浸潤(rùn)性生長(zhǎng)”，參見(jiàn)梁等“抗癌藥物脈沖篩選后增加了人肺癌細(xì)胞的藥物耐受性及體外浸潤(rùn)能力并伴有基因表達(dá)的改變”《國(guó)際癌癥雜志》111期484-93頁(yè)，2004年(Liang Y，et al.，Int J Cancer.2004；111(4)484-93)。
抗腫瘤藥物局部應(yīng)用能夠較好地克服以上缺陷，不僅能夠明顯提高腫瘤局部的藥物濃度，而且可以顯著降低全身毒性反應(yīng)。大量體內(nèi)外試驗(yàn)已顯示出對(duì)實(shí)體腫瘤的治療效果，參見(jiàn)孔慶忠等“瘤內(nèi)放置順鉑加系統(tǒng)卡莫司汀治療大鼠腦腫瘤”《外科腫瘤雜志》69期76-82頁(yè)，1998年(Kong Q et al.，J Surg Oncol.1998 Oct；69(2)76-82)和孔慶忠等“瘤內(nèi)放置順鉑治愈大鼠原發(fā)腦腫瘤”《外科腫瘤雜志》64期268-273頁(yè)(1997年)(Kong Q et al.，JSurg Oncol.1997 Oct；64268-273)。還可參見(jiàn)中國(guó)專利(ZL00111093.4；ZL96115937.5；申請(qǐng)?zhí)?01111264，001111272)及美國(guó)發(fā)明專利(專利號(hào)6,376,525B1；5,651,986；5,626,862)。
然而，實(shí)體腫瘤間質(zhì)中的血管不僅為腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)提供了支架及必不可少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，還影響了化療藥物在腫瘤周圍及腫瘤組織內(nèi)的滲透和擴(kuò)散，參見(jiàn)尼提等“細(xì)胞外間質(zhì)的狀況對(duì)實(shí)體腫瘤內(nèi)藥物運(yùn)轉(zhuǎn)的影響”《癌癥研究》60期2497-503頁(yè)，2000年(Netti PA，Cancer Res.2000，60(9)2497-503)。腫瘤間質(zhì)中的血管對(duì)常規(guī)化療藥物不敏感，但藥物化療常導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞對(duì)抗癌藥物的耐受性的增強(qiáng)，其結(jié)果是治療失敗。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種新的抗癌藥物組合物，含抗癌藥物和增效劑。更具體而言，是抗實(shí)體腫瘤的緩釋劑，主要為緩釋植入劑和緩釋注射劑。該組合物局部應(yīng)用可有效地抑制或破壞腫瘤的血管并能抑制腫瘤的新生血管；除能抑制腫瘤生長(zhǎng)外，還能增加腫瘤細(xì)胞對(duì)抗癌藥物的敏感性；該抗實(shí)體腫瘤緩釋劑還有效降低腫瘤內(nèi)的張力、間質(zhì)壓力、間質(zhì)粘性，進(jìn)而提高其間質(zhì)液導(dǎo)率，有利于藥物進(jìn)入實(shí)體腫瘤以及在腫瘤內(nèi)的有效擴(kuò)散。
除此之外，將抗癌藥物制成緩釋劑(主要為緩釋注射劑和緩釋植入劑)不僅能夠極大地提高腫瘤局部的藥物濃度、降低藥物在循環(huán)系統(tǒng)中的藥物濃度、降低藥物對(duì)正常組織的毒性，還能夠極大方便藥物注射、減少手術(shù)操作的并發(fā)癥、降低病人的費(fèi)用。抗癌藥物除能抑制腫瘤生長(zhǎng)外，還能增加腫瘤細(xì)胞對(duì)抗癌藥物的敏感性。以上意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的主要內(nèi)容。
本發(fā)明抗實(shí)體腫瘤緩釋劑包括抗癌有效成分和藥用輔料，抗癌有效成分選自紫杉烷、烷化劑和/或植物生物堿，其增效劑為雷帕霉素及其類似物。
本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，抗癌藥物和雷帕霉素制成的抗癌藥物緩釋劑(主要為緩釋注射劑和緩釋植入劑)不僅能夠極大地提高腫瘤局部的藥物濃度、降低藥物在循環(huán)系統(tǒng)中的藥物濃度、降低藥物對(duì)正常組織的毒性，還能夠極大方便藥物注射、減少手術(shù)操作的并發(fā)癥、降低病人的費(fèi)用?？拱┧幬锍芤种颇[瘤生長(zhǎng)外，還能增加腫瘤細(xì)胞對(duì)抗癌藥物的敏感性。以上意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的主要內(nèi)容。
本發(fā)明的復(fù)方藥物組合物可制成任意制劑形式，如，但不限于，膠囊、緩釋劑、顆粒劑、丸劑、片劑、散劑、注射劑、軟膏、貼劑、植入劑、緩釋劑植入劑、緩釋劑注射劑等。其中以緩釋劑為優(yōu)選，以緩釋劑植入劑和緩釋劑注射劑為最優(yōu)選。
本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種新的含雷帕霉素和抗癌藥物的緩釋注射劑。
本發(fā)明的緩釋注射劑，由緩釋微球和溶媒組成。具體而言，該抗癌緩釋注射劑由以下成分組成(A)緩釋微球，包括抗癌有效成分 0.01-60％緩釋輔料 40-99％助懸劑0.0-30％以上為重量百分比和(B)溶媒，為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒。
其中，抗癌有效成分為雷帕霉素和抗癌藥物，抗癌藥物選自紫杉烷、烷化劑和/或植物生物堿；緩釋輔料粘度范圍IV(dl/g)為0.1～0.8，選自外消旋聚乳酸(D，L-PLA)、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物(D，L-PLGA)、單甲基聚乙二醇/聚乳酸(MPEG-PLA)、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物(MPEG-PLGA)、聚乙二醇/聚乳酸(PLA-PEG-PLA)、聚乙二醇/聚乳酸共聚物(PLGA-PEG-PLGA)、端羧基聚乳酸(PLA-COOH)、端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物(PLGA-COOH)、聚苯丙生、雙脂肪酸與癸二酸共聚物(PFAD-SA)、聚(芥酸二聚體-癸二酸)[P(EAD-SA)]、聚(富馬酸-癸二酸)[P(FA-SA)]、聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)、聚對(duì)二氧環(huán)己酮(PDO)、聚三亞甲基碳酸酯(PTMC)、木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠、殼聚糖、泊洛沙姆、蛋白膠之一或其組合；助懸劑選自羧甲基纖維素鈉、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、土溫20、土溫40和土溫80之一或其組合。
公知的藥用輔料有數(shù)百種以上，具有緩釋作用的藥用輔料，特別是能將本發(fā)明中所選的有效成份在人體或動(dòng)物體內(nèi)于一定的時(shí)間內(nèi)緩慢釋放并非顯而易見(jiàn)，特定的緩釋輔料與可緩釋藥物組合的選擇及其配比更需要經(jīng)過(guò)大量的創(chuàng)造性勞動(dòng)才能確定。釋放過(guò)慢不足以獲得有效藥物濃度，因而不能有效殺死腫瘤細(xì)胞；若釋放過(guò)快會(huì)造成突釋，則容易像常規(guī)注射一樣引起全身毒性反應(yīng)。本發(fā)明相關(guān)數(shù)據(jù)(見(jiàn)相關(guān)試驗(yàn)和實(shí)施例)，特別是動(dòng)物體內(nèi)釋放特性的數(shù)據(jù)需要經(jīng)過(guò)體內(nèi)外大量創(chuàng)造性的實(shí)驗(yàn)才能獲得，并非經(jīng)過(guò)有限的實(shí)驗(yàn)就能確定，具有非顯而易見(jiàn)性。
雷帕霉素除具有抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的作用外，可有效地抑制或破壞腫瘤的血管并能抑制腫瘤的新生血管的形成，進(jìn)而不僅使腫瘤細(xì)胞失去生長(zhǎng)所需的支架及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的來(lái)源，明顯促進(jìn)化療藥物進(jìn)入腫瘤及在腫瘤周圍及腫瘤組織內(nèi)的滲透和擴(kuò)散。
雷帕霉素在緩釋劑中所占的比例因具體情況而定，可為0.01％-60％，以0.1％-20％為佳，1％-10％為最佳。
抗癌有效成分中的紫杉烷(Taxanes)類抗癌藥物主要選自紫杉醇(Taxol)、多烯紫杉醇(Docetaxel，紫杉特爾、多西他賽)、2’-羥基紫杉醇(paclitaxel-2’-hydroxy)、10-去乙酰紫杉醇(10-deacetyl taxol)、7-表-紫杉醇(7-epi-taxol)。以紫杉醇和多西他賽為優(yōu)選。
烷化劑包括選阿雌莫司汀、阿莫司汀、氨莫司汀、卡莫司汀、尼莫司汀、二硫莫司汀、波呋莫司汀、苯達(dá)莫司汀、加莫司汀、雷莫司汀、福莫司汀、依莫司汀、依考莫司汀、雌莫司汀、合莫司汀、奈莫司汀、甘露莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀、潑尼莫司汀、烏拉莫司汀、?；悄就?、他莫司汀、螺莫司汀、鏈佐星、薩莫司汀、司莫司汀、甲基洛莫司汀、鏈佐星、咪妥唑胺中的一種或其組合。以上烷化劑還包括它們的鹽，如，但不限于，硫酸鹽、磷酸鹽、鹽酸鹽、乳糖酸鹽、醋酸鹽、天冬酸鹽、硝酸鹽、枸櫞酸鹽、嘌呤或嘧啶鹽、琥珀酸鹽及馬來(lái)酸鹽等。
上述烷化劑在緩釋劑中的重量百分比從1％-50％，以2％-40％為佳，以5％-30％為最佳。
植物生物堿主要選自長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春花堿、長(zhǎng)春瑞濱、長(zhǎng)春地辛、長(zhǎng)春倍酯、長(zhǎng)春羅新、長(zhǎng)春西醇、長(zhǎng)春甘酯、長(zhǎng)春磷汀、長(zhǎng)春米特、長(zhǎng)春氟寧、長(zhǎng)春匹定、長(zhǎng)春利定、長(zhǎng)春曲醇、長(zhǎng)春羅定、野百合堿或三尖杉?jí)A。
植物生物堿在組合物中所占的比例因具體情況而定，一般而言，重量百分比可從1％-50％，以2％-40％為佳，以5％-30％為最佳。。
當(dāng)藥物緩釋微球中的抗癌藥物僅為雷帕霉素或抗癌藥物時(shí)，抗癌緩釋注射劑主要用于增加其它途徑應(yīng)用的雷帕霉素或抗癌藥物的作用效果，或用于對(duì)放療或其它療法的增效。當(dāng)藥物緩釋微球中的抗癌藥物僅為雷帕霉素或抗癌藥物時(shí)，抗癌緩釋注射劑的應(yīng)用及增效方式為(1)含雷帕霉素的緩釋注射劑局部注射，而抗癌藥物經(jīng)其他途徑應(yīng)用；(2)局部注射含抗癌藥物的緩釋注射劑，其他途徑應(yīng)用雷帕霉素；(3)局部注射含雷帕霉素的緩釋注射劑與含抗癌藥物的緩釋注射劑；或(4)局部注射含雷帕霉素和抗癌藥物的緩釋注射劑。
局部應(yīng)用的抗癌緩釋注射劑還用于對(duì)放療或其它療法的增效。其他途徑指，但，不限于，動(dòng)脈、靜脈、腹腔、皮下、腔內(nèi)給藥。
抗癌有效成分雷帕霉素和/或抗癌藥物在藥物緩釋微球中的重量比為1-99∶1和1∶1-99，以1-19∶1到1∶1-19為優(yōu)選。
本發(fā)明抗癌緩釋注射劑微球中的抗癌有效成分優(yōu)選如下，均為重量百分比(a)0.01-20％的雷帕霉素與2-40％的紫杉醇、多西紫杉醇、2’-羥基紫杉醇、10-去乙酰紫杉醇或7-表-紫杉醇的組合；(b)0.01-20％的雷帕霉素與2-40％的阿雌莫司汀、阿莫司汀、氨莫司汀、卡莫司汀、尼莫司汀、二硫莫司汀、波呋莫司汀、苯達(dá)莫司汀、加莫司汀、雷莫司汀、福莫司汀、依莫司汀、依考莫司汀、雌莫司汀、合莫司汀、奈莫司汀、甘露莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀、潑尼莫司汀、烏拉莫司汀、?；悄就　⑺就　⒙菽就?、鏈佐星、薩莫司汀、司莫司汀、甲基洛莫司汀、鏈佐星或咪妥唑胺的組合；或(c)0.01-20％的雷帕霉素與2-40％的長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春花堿、長(zhǎng)春瑞濱、長(zhǎng)春地辛、長(zhǎng)春倍酯、長(zhǎng)春羅新、長(zhǎng)春西醇、長(zhǎng)春甘酯、長(zhǎng)春磷汀、長(zhǎng)春米特、長(zhǎng)春氟寧、長(zhǎng)春匹定、長(zhǎng)春利定、長(zhǎng)春曲醇、長(zhǎng)春羅定、野百合堿或三尖杉?jí)A的組合。
緩釋輔料選自外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸、端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物、聚苯丙生、雙脂肪酸與癸二酸共聚物、聚(芥酸二聚體-癸二酸)、聚(富馬酸-癸二酸)、聚乳酸、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物、木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠、殼聚糖、泊洛沙姆和蛋白膠之一或其組合。
本發(fā)明緩釋微球中緩釋輔料及其重量百分比最優(yōu)選如下(1)55-95％的PLA；(2)50-95％的PLGA；(3)50-95％的聚苯丙生；(4)55-95％的雙脂肪酸與癸二酸共聚物；(5)30-60％的聚苯丙生和30-60％的PLA或30-60％的PLGA的組合；(6)40-95％的木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠、殼聚糖、泊洛沙姆或白蛋膠；或(7)40-95％的外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物。
在各種高分子聚合物中，以聚乳酸、癸二酸、含聚乳酸或葵二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物為首選，混合物和共聚物可選自，但不限于，PLA、PLGA、乙醇酸和羥基羧酸的混合物、葵二酸與芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物。乙醇酸和羥基羧酸的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和羥基羧酸共聚時(shí)的含量分別為重量百分比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是聚苯丙生[聚(1，3-二(對(duì)羧基苯氧基)丙烷-癸二酸)(p(CPP-SA))、雙脂肪酸-癸二酸共聚物(PFAD-SA)]、聚(芥酸二聚體-癸二酸)[P(EAD SA)]和聚(富馬酸-癸二酸)[P(FA-SA)]等。對(duì)羧苯氧基丙烷(p-CPP)與癸二酸共聚時(shí)的含量分別為重量百分比10-60％和20-90％，共混重量比是10-40∶50-90，最好是重量比15-30∶65-85。
聚乳酸的分子量峰值可為，但不限于，5000-100,000，但以20,000-60,000為優(yōu)選，以5,000-30,000為最優(yōu)選；聚乙醇酸的分子量可為，但不限于，5000-100,000，但以5,000-50,000為優(yōu)選，以10,000-30,000為最優(yōu)選；以上聚羥基酸可單選或多選。當(dāng)單選時(shí)，以聚乳酸(PLA)或羥基羧酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)為優(yōu)選，共聚物的分子量可為，但不限于，5000-100,000，但以20,000-60,000為優(yōu)選，以30,000-50,000為最優(yōu)選；當(dāng)多選時(shí)，以高分子多聚物或不同高分子多聚物組成的復(fù)合多聚物或共聚物為優(yōu)選，以含不同分子量聚乳酸或癸二酸的復(fù)合多聚物或共聚物為最優(yōu)選，如，但不限于，分子量為1000到30000的聚乳酸與分子量為20000到50000的聚乳酸混合、分子量為10000到30000的聚乳酸與分子量為30000到80000的PLGA混合、分子量為20000到30000的聚乳酸與癸二酸混合、分子量為30000到80000的PLGA與癸二酸混合。所用聚乳酸以左旋聚乳酸(L-PLA)為優(yōu)選。左旋聚乳酸(L-PLA)粘度范圍IV(dl/g)為0.2～0.8，玻璃化轉(zhuǎn)變溫度范圍為55～65℃，熔點(diǎn)175～185℃。
除上述緩釋輔料外，還可選用其他物質(zhì)見(jiàn)美國(guó)專利(專利號(hào)4757128；4857311；4888176；4789724)及《藥用輔料大全》(第123頁(yè)，四川科學(xué)技術(shù)出版社1993年出版，羅明生和高天惠主編)中已有詳細(xì)描述。另外，中國(guó)專利(申請(qǐng)?zhí)?6115937.5；91109723.6；9710703.3；01803562.0)及美國(guó)發(fā)明專利(專利號(hào)5,651,986)也列舉了某些藥用輔料，包括充填劑、增溶劑、吸收促進(jìn)劑、成膜劑、膠凝劑、制(或致)孔劑、賦型劑或阻滯劑等。
為調(diào)節(jié)藥物釋放速度或改變本發(fā)明的其它特性，可以改變聚合物的單體成分或分子量、添加或調(diào)節(jié)藥用輔料的組成及配比，添加水溶性低分子化合物，如，但不限于，各種糖或鹽等。其中糖可為，但不限于，木糖醇、低聚糖、(硫酸)軟骨素及甲殼素等，其中鹽可為，但不限于，鉀鹽和鈉鹽等；也可添加其它藥用輔料，如但不限于，充填劑、增溶劑、吸收促進(jìn)劑、成膜劑、膠凝劑、制(或致)孔劑、賦型劑或阻滯劑等緩釋注射劑中，藥物緩釋系統(tǒng)可制成微球、亞微球、微乳、納米球、顆?；蚯蛐涡⊥?，然后與注射溶媒混合后制成注射劑使用。在各種緩釋注射劑中以混懸型緩釋注射劑為優(yōu)選，混懸型緩釋注射劑是將含抗癌成分的藥物緩釋系統(tǒng)懸浮于注射液中所得的制劑，所用的緩釋輔料為上述緩釋輔料中的一種或其組合，所用溶媒為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒。普通溶媒為，但不限于，蒸餾水、注射用水、生理沖液、無(wú)水乙醇或各種鹽配制的緩沖液。助懸劑的目的在于有效懸浮含藥微球，從而利于注射之用。為方便注射，助懸劑的黏度為100cp-3000cp(20℃-30℃時(shí))，優(yōu)選1000cp-3000cp(20℃-30℃時(shí))，最優(yōu)選1500cp-3000cp(20℃-30℃時(shí))。助懸劑選自羧甲基纖維素鈉、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、土溫20、土溫40和土溫80之一或其組合。
助懸劑在普通溶媒中的含量因其的特性而定，可為0.1-30％因具體情況而定。優(yōu)選助懸劑的組成為A)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+0.1-0.5％土溫80；或B)5-20％甘露醇+0.1-0.5％土溫80；或C)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+5-20％山梨醇+0.1-0.5％土溫80。
溶媒的制備則取決于溶媒的種類，普通溶媒有市售，也可以自制，如蒸餾水、注射用水、生理沖液、無(wú)水乙醇或各種鹽配制的緩沖液，但必須嚴(yán)格按照有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。特殊溶媒需考慮到助懸劑的種類及其組成、溶媒所懸浮的藥物、緩釋微球(或微囊)的組成、性質(zhì)及其需要量及注射劑的制備方法，如將羧甲基纖維素鈉(1.5％)+甘露醇和/或山梨醇(15％)和/或吐溫80(0.1％)溶于生理鹽水中得相應(yīng)溶媒，黏度在10cp-650cp(20℃-30℃時(shí))。
本發(fā)明發(fā)現(xiàn)影響藥物和/或緩釋微球懸浮和/或注射的關(guān)鍵因素是溶媒的黏度，黏度越大，懸浮效果越好，可注射性越強(qiáng)。這種意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成了本發(fā)明的主要指數(shù)特征之一。溶媒的黏度取決于助懸劑的黏度，助懸劑的黏度為100cp-3000cp(20℃-30℃時(shí))，優(yōu)選1000cp-3000cp(20℃-30℃時(shí))，最優(yōu)選1500cp-3000cp(20℃-30℃時(shí))。按照此條件所制得的溶媒的黏度為10cp-650cp(20℃-30℃時(shí))，優(yōu)選20cp-650cp(20℃-30℃時(shí))，最優(yōu)選60cp-650cp(20℃-30℃時(shí))。
注射劑的制備有多種方法，一種是將助懸劑為“0”的緩釋微粒(A)直接混于特殊溶媒中，得到相應(yīng)的緩釋微粒注射劑；另一種是將助懸劑不為“0”的緩釋微粒(A)混于特殊溶媒或普通溶媒中，得到相應(yīng)的緩釋微粒注射劑；再一種是將緩釋微粒(A)混于普通溶媒中，然后加入助懸劑混勻，得到相應(yīng)的緩釋微粒注射劑。除外，還可先將緩釋微粒(A)混于特殊溶媒中制得相應(yīng)的混懸液，然后用真空干燥等辦法去除混懸液中的水分，之后再用特殊溶媒或普通溶媒混懸，得到相應(yīng)的緩釋微粒注射劑。以上方法只是用于說(shuō)明而非限制本發(fā)明。值得注意的是，懸浮藥物或緩釋微球(或微囊)在注射劑中的濃度因具體需要而定，可為，但不限于，10-400mg/ml，但以30-300mg/ml為優(yōu)選，以50-200mg/ml最優(yōu)選。注射劑的黏度為50cp-1000cp(20℃-30℃時(shí))，優(yōu)選100cp-1000cp(20℃-30℃時(shí))，最優(yōu)選200cp-650cp(20℃-30℃時(shí))。此黏度適用于18-22號(hào)注射針頭和特制的內(nèi)徑更大的(至3毫米)注射針頭。
緩釋注射劑的制備方法是任意的，可用若干種方法制備如，但不限于，混合法、熔融法、溶解法、噴霧干燥法制備微球、溶解法結(jié)合冷凍(干燥)粉碎法制成微粉、脂質(zhì)體包藥法及乳化法等。其中以溶解法(即溶劑揮發(fā)法)、干燥法、噴霧干燥法和乳化法為優(yōu)選。微球則可用于制備上述各種緩釋注射劑，其方法是任意的。所用微球的粒徑范圍可在5-400um之間，以10-300um之間為優(yōu)選，以20-200um之間為最優(yōu)選。
微球還可用于制備其他緩釋注射劑，如凝膠注射劑、嵌段共聚物膠束注射劑。其中，嵌段共聚物膠束由疏水-親水嵌段共聚物在水溶液中形成，具有球形內(nèi)核-外殼結(jié)構(gòu)，疏水嵌段形成內(nèi)核，親水嵌段形成外殼。載藥膠束注射進(jìn)入體內(nèi)達(dá)到控制藥物釋放或靶向治療的目的。所用藥物載體為上述任意一種或其組合。其中優(yōu)選分子量為1000-15000的聚乙二醇(PEG)作為膠束共聚物的親水嵌段，優(yōu)選生物降解聚合物(如PLA、聚丙交酯、聚己內(nèi)酯及其共聚物(分子量1500-25000))作為膠束共聚物的疏水嵌段。嵌段共聚物膠束的粒徑范圍可在10-300um之間，以20-200um之間的為優(yōu)選。凝膠注射劑系將生物降解聚合物(如PLA、PLGA或DL-LA和ε-己內(nèi)酯共聚物)溶于某些兩親性溶媒，再加入藥物與之混溶(或混懸)后形成流動(dòng)性較好的凝膠，可經(jīng)瘤周或瘤內(nèi)注射。一旦注入，兩親性溶媒很快擴(kuò)散至體液，而體液中的水分則滲入凝膠，使聚合物固化，緩慢釋放藥物。
緩釋微球還可用于制備緩釋植入劑，所用的藥用輔料可為上述藥用輔料中的任何一種或多種物質(zhì)，但以水溶性高分子聚合物為主選，在各種高分子聚合物中，以聚乳酸、葵二酸、含聚乳酸或葵二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物為首選，混合物和共聚物可選自，但不限于，PLA、PLGA、PLA與PLGA的混合物、葵二酸與芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物、雙脂肪酸與癸二酸共聚物(PFAD-SA)、聚(芥酸二聚體-癸二酸)[P(EAD-SA)]、聚(富馬酸-癸二酸)[P(FA-SA)]。聚乳酸(PLA)與聚乙醇酸的的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和乳酸共聚時(shí)的含量分別為重量百分比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是對(duì)羧苯基丙烷(p-CPP)，對(duì)羧苯基丙烷(p-CPP)與葵二酸共聚時(shí)的含量分別為重量百分比10-60％和20-90％，共混重量比是10-40∶50-90，最好是重量比15-30∶65-85。
本發(fā)明抗癌藥物緩釋劑的又一種形式是抗癌藥物緩釋劑為緩釋植入劑?？拱┲踩雱┑挠行С煞挚删鶆虻匕b于整個(gè)藥用輔料中，也可包裝于載體支持物中心或其表面；可通過(guò)直接擴(kuò)散和/或經(jīng)多聚物降解的方式將有效成分釋放。
緩釋植入劑的特點(diǎn)在于所用的緩釋輔料除高分子聚合物外，還含有上述任意一種或多種其它輔料。添加的藥用輔料統(tǒng)稱為添加劑。添加劑可根據(jù)其功能分為充填劑、致孔劑、賦型劑、分散劑、等滲劑、保存劑、阻滯劑、增溶劑、吸收促進(jìn)劑、成膜劑、膠凝劑等。
緩釋植入劑的主要成份可制成多種劑型。如，但不限于，膠囊、緩釋劑、植入劑、緩釋劑植入劑等；呈多種形狀，如，但不限于，顆粒劑、丸劑、片劑、散劑、球形、塊狀、針狀、棒狀、柱狀及膜狀。在各種劑型中，以體內(nèi)緩慢釋放植入劑為優(yōu)選?？蔀?.1-5mm(粗)×1-10mm(長(zhǎng))的棒狀，也可為片狀等其它形狀。
緩釋植入劑的最佳劑型為生物相容性、可降解吸收的緩釋劑植入，可因不同臨床需要而制成各種形狀及各種劑型。其主要成份的包裝方法和步驟在美國(guó)專利中(US5651986)已有詳細(xì)描述，包括若干種制備緩釋制劑的方法如，但不限于，(i)把載體支持物粉末與藥物混合然后壓制成植入劑，即所謂的混合法；(ii)把載體支持物熔化，與待包裝的藥物相混合，然后固體冷卻，即所謂的熔融法；(iii)把載體支持物溶解于溶劑中，把待包裝的藥物溶解或分散于聚合物溶液中，然后蒸發(fā)溶劑，干燥，即所謂的溶解法；(iv)噴霧干燥法；及(v)冷凍干燥法等。
緩釋植入劑的抗癌有效成分可參照緩釋注射劑，但優(yōu)選如下，均為重量百分比(a)0.01-20％的雷帕霉素與2-40％的紫杉醇、多西紫杉醇、2’-羥基紫杉醇、10-去乙酰紫杉醇或7-表-紫杉醇的組合；(b)0.01-20％的雷帕霉素與2-40％的阿雌莫司汀、阿莫司汀、氨莫司汀、卡莫司汀、尼莫司汀、二硫莫司汀、波呋莫司汀、苯達(dá)莫司汀、加莫司汀、雷莫司汀、福莫司汀、依莫司汀、依考莫司汀、雌莫司汀、合莫司汀、奈莫司汀、甘露莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀、潑尼莫司汀、烏拉莫司汀、牛磺莫司汀、他莫司汀、螺莫司汀、鏈佐星、薩莫司汀、司莫司汀、甲基洛莫司汀、鏈佐星或咪妥唑胺的組合；或(c)0.01-20％的雷帕霉素與2-40％的長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春花堿、長(zhǎng)春瑞濱、長(zhǎng)春地辛、長(zhǎng)春倍酯、長(zhǎng)春羅新、長(zhǎng)春西醇、長(zhǎng)春甘酯、長(zhǎng)春磷汀、長(zhǎng)春米特、長(zhǎng)春氟寧、長(zhǎng)春匹定、長(zhǎng)春利定、長(zhǎng)春曲醇、長(zhǎng)春羅定、野百合堿或三尖杉?jí)A的組合。
緩釋輔料可為各種水溶性或非水溶性高分子多聚物。本發(fā)明緩釋植入劑中緩釋輔料及其重量百分比最優(yōu)選如下(1)55-95％的PLA；(2)50-95％的PLGA；(3)50-95％的聚苯丙生；(4)55-95％的雙脂肪酸與癸二酸共聚物；(5)30-60％的聚苯丙生和30-60％的PLA或30-60％的PLGA的組合；(6)40-95％的木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠、殼聚糖、泊洛沙姆或白蛋膠；或(7)40-95％的外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物。
給藥途徑取決于多種因素，為于原發(fā)或轉(zhuǎn)移腫瘤所在部位獲得有效濃度，藥物可經(jīng)多種途徑給予，如皮下、腔內(nèi)(如腹腔、胸腔及椎管內(nèi))、瘤內(nèi)、瘤周注射或放置、選擇性動(dòng)脈注射、淋巴結(jié)內(nèi)及骨髓內(nèi)注射。以選擇性動(dòng)脈注射、腔內(nèi)、瘤內(nèi)、瘤周注射或放置為優(yōu)選。
緩釋植入劑的應(yīng)用及增效方式同抗癌緩釋注射劑，即局部放置的化療增效劑與其它途徑給藥的抗癌藥物的聯(lián)合、局部放置的抗癌藥物與其它途徑給藥的化療增效劑的聯(lián)合、局部放置的抗癌藥物與局部放置的化療增效劑的聯(lián)合。其中局部應(yīng)用的抗癌藥物與化療增效劑可單獨(dú)或聯(lián)合生產(chǎn)、包裝、銷售、使用。包裝指藥物對(duì)輔料而言的載藥過(guò)程以及含藥緩釋劑對(duì)運(yùn)輸和/或儲(chǔ)存而言的內(nèi)外包裝。載藥過(guò)程包括，但不限于，稱量、溶解、混合、干燥、成形、包衣、噴霧、制粒等。
本發(fā)明可以用于制備治療人及動(dòng)物的各種腫瘤的藥物制劑，主要為緩釋注射劑或緩釋植入劑，所指腫瘤包括起源于大腦、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、腎臟、肝、膽囊、頭頸部、口腔、甲狀腺、皮膚、黏膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結(jié)、肺臟、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻咽部、子宮、卵巢、子宮內(nèi)膜、子宮頸、前列腺、膀胱、結(jié)腸、直腸的原發(fā)或轉(zhuǎn)移的癌或肉瘤或癌肉瘤。
本發(fā)明所制的緩釋注射劑或緩釋植入劑中還可加入其它藥用成分，如，但不限于，抗菌素、止疼藥、抗凝藥、止血藥等。
通過(guò)如下試驗(yàn)和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方法作進(jìn)一步的描述試驗(yàn)1、不同方式應(yīng)用雷帕霉素后的局部藥物濃度比較以大白鼠為試驗(yàn)對(duì)象，將2×105個(gè)前列腺腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長(zhǎng)至1厘米直徑后將其分組。每組劑量均為0.25mg/kg雷帕霉素。測(cè)定不同時(shí)間腫瘤內(nèi)藥物含量(％)，結(jié)果表明，雷帕霉素經(jīng)不同方式應(yīng)用后的局部藥物濃度差異顯著，局部給藥能夠明顯提高并有效維持腫瘤所在部位的有效藥物濃度，其中以瘤內(nèi)放置緩釋植入劑和瘤內(nèi)注射緩釋注射劑的效果最好。然而，瘤內(nèi)注射緩釋注射劑操作最方便、容易。這一發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的重要特征。以下的相關(guān)抑瘤試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)了這一點(diǎn)。
試驗(yàn)2、不同方式應(yīng)用雷帕霉素后的體內(nèi)抑瘤作用比較以大白鼠為試驗(yàn)對(duì)象，將2×105個(gè)胰腺腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長(zhǎng)至0.5厘米直徑后將其分組。每組劑量均為0.05mg/kg雷帕霉素。治療后20天測(cè)量腫瘤體積大小，比較治療效果。結(jié)果表明，雷帕霉素經(jīng)不同方式應(yīng)用后的抑瘤作用差異顯著，局部給藥能夠明顯提高并有效維持腫瘤所在部位的有效藥物濃度，其中以瘤內(nèi)放置緩釋植入劑和瘤內(nèi)注射緩釋注射劑的效果最好。然而，瘤內(nèi)注射緩釋注射劑操作最方便、容易。不僅療效好，毒副作用也小。
試驗(yàn)3、雷帕霉素和抗癌藥物(緩釋注射劑)的體內(nèi)抑瘤作用以大白鼠為試驗(yàn)對(duì)象，將2×105個(gè)乳腺腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長(zhǎng)14天后將其分為以下10組(見(jiàn)表1)。第一組為對(duì)照，第2到10組為治療組，藥物經(jīng)瘤內(nèi)注射。雷帕霉素為1.5mg/kg，抗癌藥物為7.5mg/kg。治療后第21天測(cè)量腫瘤體積大小，比較治療效果(見(jiàn)表1)。
表1
以上結(jié)果表明，雷帕霉素和紫杉烷類抗癌藥物(紫杉醇、多烯紫杉醇、2’-羥基紫杉醇、7-表-紫杉醇)在該濃度單獨(dú)應(yīng)用時(shí)對(duì)多種腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可表現(xiàn)出顯著的增效作用。這一發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明又一重要特征。
試驗(yàn)4、雷帕霉素和抗癌藥物(緩釋注射劑)的抑瘤作用所用的腫瘤細(xì)胞包括腦腫瘤(CNS-1、C6)、胃腺上皮癌(SA)、骨腫瘤(BC)、乳腺癌(BA)、肺癌(LH)、甲狀腺乳頭狀腺癌(PAT)等。雷帕霉素為0.05mg/kg，抗癌藥物均為2.5mg/kg。治療后第21天測(cè)量腫瘤體積大小，其腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率(％)見(jiàn)表2所示。
表2
以上結(jié)果表明，所用抗癌藥物(卡莫司汀、尼莫司汀、福莫司汀)及雷帕霉素在該濃度單獨(dú)應(yīng)用時(shí)對(duì)多種腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可表現(xiàn)出顯著的增效作用。同樣的效果還見(jiàn)于其他類型腫瘤，如食道癌、卵巢癌、胰腺癌、肝癌、腸癌等。
試驗(yàn)5、雷帕霉素及抗癌藥物(緩釋注射劑)的抑瘤作用以大白鼠為試驗(yàn)對(duì)象，將2×105個(gè)前列腺腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長(zhǎng)14天后將其分為以下10組(見(jiàn)表3)。第一組為對(duì)照，第2到10組為治療組，緩釋植入劑經(jīng)瘤內(nèi)放置。雷帕霉素為2.5mg/kg，抗癌藥物均為15mg/kg。治療后第20天測(cè)量腫瘤體積大小，比較治療效果(見(jiàn)表3)。
表3
以上結(jié)果表明，所用雷帕霉素及抗癌藥物-烷化劑(尼莫司汀、卡莫司汀、福莫司汀、薩莫司汀)在該濃度單獨(dú)應(yīng)用時(shí)對(duì)多種腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可表現(xiàn)出顯著的增效作用。這一發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明又一重要特征。
試驗(yàn)6、雷帕霉素和抗癌藥物(緩釋注射劑)的抑瘤作用以大白鼠為試驗(yàn)對(duì)象，將2×105個(gè)胰腺腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長(zhǎng)14天后將其分為陰性對(duì)照(空白)、單藥治療組(雷帕霉素或抗癌藥物)和聯(lián)合治療組(雷帕霉素和抗癌藥物)。藥物經(jīng)瘤內(nèi)注射。雷帕霉素為0.25mg/kg，抗癌藥物均為5mg/kg。治療后第20天測(cè)量腫瘤體積大小，比較治療效果(見(jiàn)表3)。治療后第20天測(cè)量腫瘤體積大小，用腫瘤生長(zhǎng)抑制率作指標(biāo)比較治療效果(見(jiàn)表4)。
表4
以上結(jié)果表明，所用雷帕霉素及抗癌藥物-烷化劑(司莫司汀、洛莫司汀、雌莫司汀、鏈佐星)在該濃度單獨(dú)應(yīng)用時(shí)對(duì)多種腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可表現(xiàn)出顯著的增效作用。
試驗(yàn)7、雷帕霉素和抗癌藥物(緩釋注射劑)的抑瘤作用以大白鼠為試驗(yàn)對(duì)象，將2×105個(gè)乳腺腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長(zhǎng)14天后將其分為陰性對(duì)照(空白)、單藥治療組、聯(lián)合治療組。藥物經(jīng)瘤內(nèi)注射。劑量均為2.5mg/kg。治療后第20天測(cè)量腫瘤體積大小，用腫瘤生長(zhǎng)抑制率作指標(biāo)比較治療效果(見(jiàn)表5)。
表5
以上結(jié)果表明，所用雷帕霉素及抗癌藥物-烷化劑(加莫司汀、雷莫司汀、福莫司汀、他莫司汀)在該濃度單獨(dú)應(yīng)用時(shí)對(duì)多種腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可表現(xiàn)出顯著的增效作用。這一發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明又一重要特征。
試驗(yàn)8、雷帕霉素和抗癌藥物(緩釋注射劑)的抑瘤作用以大白鼠為試驗(yàn)對(duì)象，將2×105個(gè)乳腺腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長(zhǎng)14天后將其分為陰性對(duì)照(空白)、單藥治療組、聯(lián)合治療組。緩釋植入劑經(jīng)瘤內(nèi)放置。雷帕霉素為5mg/kg，抗癌藥物均為2.5mg/kg。治療后第20天測(cè)量腫瘤體積大小，用腫瘤生長(zhǎng)抑制率作指標(biāo)比較治療效果(見(jiàn)表6)。
表6
以上結(jié)果表明，所用雷帕霉素及抗癌藥物-植物生物堿(長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春花堿、長(zhǎng)春瑞濱、長(zhǎng)春地辛)在該濃度單獨(dú)應(yīng)用時(shí)對(duì)多種腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可表現(xiàn)出顯著的增效作用。這一發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明又一重要特征。
試驗(yàn)9、雷帕霉素和抗癌藥物(緩釋注射劑)的抑瘤作用按試驗(yàn)7所述方法測(cè)定雷帕霉素和抗癌藥物(緩釋注射劑)的抑瘤作用，結(jié)果表明雷帕霉素能顯著增強(qiáng)卡莫司汀、尼莫司汀、苯達(dá)莫司汀、加莫司汀、雷莫司汀、福莫司汀、雌莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀、螺莫司汀、鏈佐星、薩莫司汀、司莫司汀、甲基洛莫司汀、鏈佐星或咪妥唑胺等烷化劑對(duì)乳腺癌和前列腺癌的抑瘤效果，增效作用在38-70％(P＜0.01)。
試驗(yàn)10、雷帕霉素和抗癌藥物(緩釋注射劑)的抑瘤作用按試驗(yàn)7所述方法測(cè)定雷帕霉素和抗癌藥物(緩釋注射劑)的抑瘤作用，結(jié)果表明能顯著增強(qiáng)紫杉醇、多西紫杉醇、2’-羥基紫杉醇、10-去乙酰紫杉醇或7-表-紫杉醇等紫杉烷類抗癌藥對(duì)肺癌和胰腺癌的抑瘤效果，增效作用50-80％(P＜0.01)。
試驗(yàn)11、抗癌藥物(緩釋注射劑)的抑瘤作用按試驗(yàn)7所述方法測(cè)定雷帕霉素和抗癌藥物(緩釋注射劑)的抑瘤作用，結(jié)果表明雷帕霉素能顯著增強(qiáng)長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春花堿、長(zhǎng)春瑞濱、長(zhǎng)春地辛、長(zhǎng)春羅新、長(zhǎng)春西醇、長(zhǎng)春羅定、野百合堿或三尖杉?jí)A對(duì)胃癌和結(jié)腸癌的抑瘤效果，增效作用在60-80％(P＜0.01)。
試驗(yàn)12、不同分子量聚乳酸制成的雷帕霉素緩釋植入劑的體內(nèi)釋放比較以大白鼠為試驗(yàn)對(duì)象，分組(3只/組)并于皮下給予含不同分子量(MW)的聚乳酸(PLA)承載的等量雷帕霉素緩釋植入劑。然后分別于1、3、7、14、21、28和35天測(cè)藥物于植入劑內(nèi)的剩余量，進(jìn)而得出其體內(nèi)釋放速度(％)。結(jié)果表明，分子量為20000的釋放為1天(8％)、3(28％)、7(56％)、14(82％)、21(90)、28(94)和35(98％)。比較不同分子量聚乳酸制成的雷帕霉素膠原蛋白緩釋植入劑的體內(nèi)釋放發(fā)現(xiàn)，隨分子量增加而變慢，以第7天為例，與全身給藥組相比，腫瘤抑制率隨聚乳酸分子量增加而提高，依次為68％(MW5000)、66％(MW15000)、54％(MW25000)、50％(MW40000)和48(MW60000)。
特別注意的是，本發(fā)明的緩釋劑，特別是緩釋注射劑操作簡(jiǎn)單方便、重復(fù)性好。不僅療效好，毒副作用小。
不同的藥物包裝與不同的生物降解高分子的是要特性不同。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，最適宜于本發(fā)明藥物緩釋的緩釋輔料為外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸、端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物、聚苯丙生、雙脂肪酸與癸二酸共聚物、聚(芥酸二聚體-癸二酸)、聚(富馬酸-癸二酸)、聚乳酸、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物、木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠、殼聚糖、泊洛沙姆、白蛋白膠之一或其組合。上述緩釋輔料制成的緩釋制劑無(wú)明顯的藥物突釋現(xiàn)象；最適宜的助懸劑為甲基纖維素、羥甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、土溫20、土溫40、土溫80之一或其組合。
總之，所用雷帕霉素和各種抗癌藥物單獨(dú)應(yīng)用時(shí)對(duì)多種腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可表現(xiàn)出顯著的增效作用。因此，本發(fā)明所述的有效成分為雷帕霉素與任意一種抗癌藥物。含有以上有效成分的藥物可制成緩釋微球，進(jìn)而制成緩釋注射劑和植入劑，其中以與含助懸劑的特殊溶媒組合形成的混懸注射劑為優(yōu)選。
緩釋注射劑或緩釋植入劑還可通過(guò)以下實(shí)施方式得以進(jìn)一步說(shuō)明。上述實(shí)施例及以下實(shí)施例只是對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，并非對(duì)其內(nèi)容和使用作任何限制。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1.
將79mg聚苯丙生(對(duì)羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)為20∶80)共聚物放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入20mg紫杉醇和1mg雷帕霉素，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含20％紫杉醇和1％雷帕霉素的注射用微球。然后將微球懸浮于含15％甘露醇的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑，黏度為220cp-460cp(20℃-30℃時(shí))。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為20-28天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為210-28天左右。
實(shí)施例2.
加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例1相同，但所不同的是所用的聚苯丙生為50∶50，所含抗癌有效成分及其重量百分比為(a)0.01-10％的雷帕霉素與2-40％的紫杉醇、多西紫杉醇、2’-羥基紫杉醇、10-去乙酰紫杉醇或7-表-紫杉醇的組合；(b)0.01-10％的雷帕霉素與2-40％的卡莫司汀、尼莫司汀、苯達(dá)莫司汀、加莫司汀、雷莫司汀、福莫司汀、雌莫司汀、薩莫司汀、甲基洛莫司汀、鏈佐星或咪妥唑胺的組合；或(c)0.01-10％的雷帕霉素與2-40％的長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春花堿、長(zhǎng)春瑞濱或長(zhǎng)春地辛的組合。緩釋注射劑的黏度為160cp-600cp(20℃-30℃時(shí))。
實(shí)施例3.
將84mg分子量峰值為10000-25000的聚乳酸(PLGA，75∶25)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入1mg雷帕霉素和15mg尼莫司汀，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機(jī)溶劑。將干燥后的含藥固體組合物冷凍粉碎制成含1％雷帕霉素和15％尼莫司汀的微粉，然后懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑，黏度為320cp-420cp(20℃-30℃時(shí))。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為20-55天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為20-30天左右。
實(shí)施例4加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例3相同，但所不同的是所用的PLGA分子量峰值為25000-45000，乙交酯∶丙交酯為50∶50，含抗癌有效成分及其重量百分比為2-10％的雷帕霉素與2-40％的卡莫司汀、尼莫司汀、苯達(dá)莫司汀、加莫司汀、雷莫司汀、福莫司汀、雌莫司汀、洛莫司汀、他莫司汀、螺莫司汀、薩莫司汀、鏈佐星或咪妥唑胺的組合。
實(shí)施例5.
將70mg分子量峰值為10000-25000的聚乳酸(PLA)放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混勻后，加入28毫克長(zhǎng)春新堿和2毫克雷帕霉素，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含28％長(zhǎng)春新堿和2％雷帕霉素的注射用微球。然后將微球懸浮于含5-15％山梨醇的注射液中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑，黏度為100cp-200cp(20℃-30℃時(shí))。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為10-15天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為20-30天左右。
實(shí)施例6.
加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例5相同，但所不同的聚乳酸的分子量峰值為25000-45000，所含抗癌有效成分為5％的雷帕霉素與20％的長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春花堿、長(zhǎng)春瑞濱或長(zhǎng)春地辛的組合。
實(shí)施例7.
將70份雙脂肪酸與癸二酸共聚物(PFAD-SA)共聚物放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入20份紫杉醇和10份雷帕霉素，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含20％紫杉醇與10％雷帕霉素的注射用微球。然后將微球懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉和0.5％吐溫80的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑，黏度為80cp-150cp(20℃-25℃時(shí))。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為30-35天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為30-35天左右。
實(shí)施例8.
加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例7相同，但所不同的是所用輔料為聚(芥酸二聚體-癸二酸)，含抗癌有效成分為20％的紫杉醇或多西他賽與10％的雷帕霉素的組合。
實(shí)施例9將80mg聚(富馬酸-癸二酸)共聚物放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入18mg多烯紫杉醇和2mg雷帕霉素，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含18％多烯紫杉醇和2％雷帕霉素注射用微球。然后將微球懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉和15％山梨醇和0.2％吐溫80的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑，黏度為560cp-640cp(20℃-30℃時(shí))。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為30-35天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為30-38天左右。
實(shí)施例10加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例9相同，但所不同的是所含抗癌有效成分為10-25％紫杉醇或多烯紫杉醇與1-10％的雷帕霉素的組合。
實(shí)施例11將30mg聚苯丙生(20∶80)和50mg分子量峰值為10000-25000的聚乳酸(PLA)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入15mg卡莫司汀和5mg雷帕霉素，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含15％卡莫司汀和5％雷帕霉素的注射用微球。然后將微球經(jīng)壓片法制得相應(yīng)的緩釋植入劑。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為10-15天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為30-40天左右。
實(shí)施例12加工成緩釋植入劑的方法步驟與實(shí)施例11相同，但所不同的是緩釋輔料為聚苯丙生(40∶60)和分子量峰值為25000-45000的聚乳酸，所含抗癌有效成分為1-5％的雷帕霉素與10-25％的尼莫司汀、苯達(dá)莫司汀、卡莫司汀、加莫司汀、福莫司汀、雌莫司汀、洛莫司汀、司莫司汀、雷莫司汀、薩莫司汀、牛磺莫司汀、鏈佐星、他莫司汀、螺莫司汀或咪妥唑胺的組合。
實(shí)施例13將40mg分子量峰值為15000-35000的聚乳酸(PLGA，50∶50)和40mg聚苯丙生(20∶80)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入4mg雷帕霉素和16mg長(zhǎng)春瑞濱，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含4％雷帕霉素和16％長(zhǎng)春瑞濱的注射用微球。然后將微球經(jīng)壓片法制得相應(yīng)的緩釋植入劑。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為28天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為30-40天左右。
實(shí)施例14加工成緩釋植入劑的方法步驟與實(shí)施例11、13相同，但所不同的是所含抗癌有效成分為(a)0.05-15％的雷帕霉素與10-35％的紫杉醇或多西他賽的組合；(b)0.05-15％的雷帕霉素與5-20％的尼莫司汀、卡莫司汀、福莫司汀、雌莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀、苯達(dá)莫司汀或、雷莫司汀或咪妥唑胺的組合；或(c)0.05-15％的雷帕霉素與5-35％的長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春花堿、長(zhǎng)春瑞濱、長(zhǎng)春地辛、長(zhǎng)春羅新、長(zhǎng)春匹定、長(zhǎng)春利定、長(zhǎng)春曲醇或長(zhǎng)春羅定的組合。
實(shí)施例15.
將80份分子量峰值為15000-35000的聚乳酸(PLA)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入15份雷帕霉素和5份長(zhǎng)春花堿，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機(jī)溶劑。將干燥后的含藥固體組合物冷凍粉碎制成含15％雷帕霉素和5％長(zhǎng)春花堿的微粉，然后懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑，黏度為220cp-260cp(25℃-30℃時(shí))。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為10-15天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為20-30天左右。
實(shí)施例16加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例15相同，但所不同的是所含抗癌有效成分及其重量百分比為1-20％的雷帕霉素與5-30％的長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春花堿、長(zhǎng)春瑞濱、長(zhǎng)春地辛或三尖杉?jí)A的組合。
實(shí)施例17.
將70份分子量峰值為10000-30000的雙脂肪酸與葵二酸(SA)共聚物(雙脂肪酸∶葵二酸為20∶80)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入10份雷帕霉素和20份長(zhǎng)春新堿，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機(jī)溶劑。將干燥后的含藥固體組合物冷凍粉碎制成含10％雷帕霉素和20％長(zhǎng)春新堿的微粉，然后懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑，黏度為380cp-460cp(25℃-30℃時(shí))。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為10-15天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為20-30天左右。
實(shí)施例18.
加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例17相同，但所不同的是所含抗癌有效成分及其重量百分比為5-10％雷帕霉素與15％的春新堿、長(zhǎng)春花堿、長(zhǎng)春瑞濱、長(zhǎng)春地辛、或長(zhǎng)春羅新的組合。
實(shí)施例19加工成緩釋劑的方法步驟與實(shí)施例1-18相同，但所不同的是所用的緩釋輔料為下列之一或其組合a)聚乳酸(PLA)，分子量峰值為10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；b)聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)，其中，聚乙醇酸和羥基乙酸的比例為50-95∶50-50，分子量峰值為10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；c)聚苯丙生和聚乳酸或聚乙醇酸和羥基乙酸共聚物的組合；d)聚苯丙生，對(duì)羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)為10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40；e)雙脂肪酸與癸二酸共聚物(PFAD-SA)；f)聚(芥酸二聚體-癸二酸)[P(EAD-SA)]；g)聚(富馬酸-癸二酸)[P(FA-SA)]；
h)木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠、殼聚糖、泊洛沙姆或白蛋白膠；i)外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物。
實(shí)施例20加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例1-19相同，但所不同的是所用的助懸劑分別為下列之一或其組合a)0.5-3.0％羧甲基纖維素(鈉)；b)5-15％甘露醇；c)5-15％山梨醇；d)0.1-1.5％表面活性物質(zhì)；e)0.1-0.5％吐溫20。
實(shí)施例21加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例1-20相同，但所不同的是所含抗癌有效成分為1-5％的雷帕霉素與5-25％的紫杉醇、多西他賽、尼莫司汀、卡莫司汀、福莫司汀、洛莫司汀、咪妥唑胺、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春花堿或長(zhǎng)春瑞濱的組合。
實(shí)施例22加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例1-20相同，但所不同的是所含抗癌有效成分為(a)0.1-5％的雷帕霉素與5-35％的紫杉醇或多西他賽的組合；(b)0.1-10％的雷帕霉素與5-20％的尼莫司汀、卡莫司汀、福莫司汀、雌莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀、苯達(dá)莫司汀或、雷莫司汀或咪妥唑胺的組合；或(c)0.1-15％的雷帕霉素與10-30％的長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春花堿、長(zhǎng)春瑞濱、長(zhǎng)春地辛、長(zhǎng)春羅新、長(zhǎng)春匹定、長(zhǎng)春利定、長(zhǎng)春曲醇或長(zhǎng)春羅定的組合。
上述實(shí)施例是為了舉例說(shuō)明而不是要限定本發(fā)明的范圍。實(shí)際上，除本文所示和所述之外的本發(fā)明的各種改變，對(duì)于本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員來(lái)說(shuō)都可從說(shuō)明書和圖表中顯而易見(jiàn)。當(dāng)然這些改變應(yīng)在所附的權(quán)利要求的范圍內(nèi)。因此，應(yīng)該認(rèn)識(shí)到前面的說(shuō)明書著重公開了本發(fā)明的某些特定實(shí)施方式及對(duì)其所做的等同改變或替換都是在所附權(quán)利要求書所述的構(gòu)思和范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種含抗癌藥物及其增效劑的抗癌組合物，其特征在于該組合物中的抗癌藥物選自紫杉烷、烷化劑和/或植物生物堿，增效劑為雷帕霉素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述之抗癌組合物，其特征在于抗癌組合物的抗癌有效成分用于制備抗癌緩釋劑，選自緩釋注射劑或緩釋植入劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述之緩釋注射劑，其特征在于緩釋注射劑由以下成分組成(A)緩釋微球，包括抗癌有效成分 0.01-60％緩釋輔料 40-99％助懸劑0.0-30％以上為重量百分比和(B)溶媒，為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒。其中，抗癌有效成分選自雷帕霉素與紫杉烷、烷化劑和/或植物生物堿的組合；助懸劑選自羧甲基纖維素鈉、碘甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、土溫20、土溫40和土溫80之一或其組合；助懸劑的黏度為100-3000cp(20℃-30℃時(shí))。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述之緩釋注射劑，其特征在于所用的助懸劑選自下列之一或其組合a)0.5-3.0％羧甲基纖維素(鈉)；b)5-15％甘露醇；c)5-15％山梨醇；d)0.1-1.5％表面活性物質(zhì)；e)0.1-0.5％吐溫20；f)(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇或卡波姆；g)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+0.1-0.5％土溫80；h)5-20％甘露醇+0.1-0.5％土溫80；或i)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+5-20％山梨醇+0.1-0.5％土溫80。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述之抗癌緩釋植入劑，其特征在于抗癌緩釋植入劑由抗癌有效成分和緩釋輔料組成。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述之抗癌組合物，其特征在于雷帕霉素和抗癌藥物的重量比為1-99∶1到1∶1-99。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述之抗癌緩釋注射劑，其特征在于紫杉烷選自紫杉醇、多烯紫杉醇、2’-羥基紫杉醇、10-去乙酰紫杉醇或7-表-紫杉醇。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述之抗癌緩釋注射劑，其特征在于烷化劑選自阿雌莫司汀、阿莫司汀、氨莫司汀、尼莫司汀、苯達(dá)莫司汀、二硫莫司汀、波呋莫司汀、卡莫司汀、依莫司汀、依考莫司汀、二硫氮芥、加莫司汀、福莫司汀、雌莫司汀、合莫司汀、奈莫司汀、甘露莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀、司莫司汀、雷莫司汀、潑尼莫司汀、烏拉莫司汀、薩莫司汀、?；悄就?、鏈佐星、他莫司汀、螺莫司汀、咪妥唑胺之一或其組合。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述之抗癌緩釋注射劑，其特征在于植物生物堿選自長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春花堿、長(zhǎng)春瑞濱、長(zhǎng)春地辛、長(zhǎng)春倍酯、長(zhǎng)春羅新、長(zhǎng)春西醇、長(zhǎng)春甘酯、長(zhǎng)春磷汀、長(zhǎng)春米特、長(zhǎng)春氟寧、長(zhǎng)春匹定、長(zhǎng)春利定、長(zhǎng)春曲醇、長(zhǎng)春羅定、野百合堿或三尖杉?jí)A。
10.根據(jù)權(quán)利要求2所述之抗癌緩釋劑，其特征在于所述緩釋輔料選自下列之一或其組合a)聚乳酸；b)聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；c)聚苯丙生；d)聚苯丙生和聚乳酸或聚乙醇酸和羥基乙酸共聚物的組合；e)雙脂肪酸與癸二酸共聚物；f)聚(芥酸二聚體-癸二酸)共聚物；g)聚(富馬酸-癸二酸)共聚物；h)外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物。
全文摘要
含抗癌藥物及其增效劑的抗癌組合物為緩釋注射劑，由緩釋微球和溶媒組成。其中緩釋微球包括選自紫杉烷、烷化劑和/或植物生物堿等的抗癌藥物、雷帕霉素和緩釋輔料；溶媒為含助懸劑的特殊溶媒，助懸劑的黏度為100cp－3000cp(25℃3－0℃時(shí))，選自羧甲基纖維素鈉等；緩釋輔料選自外消旋聚乳酸及其乙醇酸共聚物、聚乙二醇及其聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸共聚物、脂肪酸與癸二酸共聚物等；緩釋微球還可制成緩釋植入劑，腫瘤內(nèi)或瘤周注射或放置該緩釋劑，能于局部釋藥達(dá)約40天左右，因此，在選擇性提高局部藥物濃度同時(shí)顯著增強(qiáng)放化療等非手術(shù)療法的治療效果?？拱┧幬锛捌湓鲂┞?lián)合應(yīng)用可有效地破壞腫瘤的血管并能抑制腫瘤生長(zhǎng)外，還能增加腫瘤細(xì)胞對(duì)藥物的敏感性。
文檔編號(hào)A61K31/4353GK1973819SQ200610201340
公開日2007年6月6日 申請(qǐng)日期2006年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2006年12月20日
發(fā)明者孔慶忠, 鄒會(huì)鳳 申請(qǐng)人:山東藍(lán)金生物工程有限公司, 孔慶忠