本發(fā)明屬于畜牧業(yè)動物營養(yǎng)技術(shù)研究領(lǐng)域，涉及一種以丁酸梭菌和嗜酸乳桿菌為飼料添加劑的飼料配方，更具體的說是一種提高斷奶仔豬腸道上皮細(xì)胞因子表達(dá)，促進(jìn)腸道黏膜發(fā)育和調(diào)節(jié)血清炎癥因子含量等方面的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
保障仔豬健康、提高其抗病力等方面一直是近年來豬營養(yǎng)與飼料研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)和難點(diǎn)，飼料添加劑的研究正在向著無殘留、無耐藥性和對人類健康和環(huán)境無危害的方向發(fā)展。飼料添加劑丁酸梭菌和嗜酸乳桿菌因為其特有的多能性、益生作用及不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)在動物生產(chǎn)中被廣泛應(yīng)用。
嗜酸乳桿菌主要存在小腸中，釋放乳酸、乙酸和一些對有害菌起作用的抗生素，抑制腸道不良微生物飼喂增殖，但是益菌作用比較弱。嗜酸乳桿菌和雙歧桿菌聯(lián)用可以迅速使腸道內(nèi)的菌群恢復(fù)平衡，抑制腐敗菌繁殖。而丁酸梭菌可以維持或恢復(fù)宿主腸道優(yōu)勢菌群，促進(jìn)腸道乳酸菌、雙歧桿菌等益生菌的生長繁殖，并抑制沙門氏菌、大腸桿菌等有害菌的生長。
抗生素類生長促進(jìn)劑是通過干擾細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)物質(zhì)肽聚糖的生物合成從而抑制細(xì)菌的繁殖，但其在飼料工業(yè)中的大量使用導(dǎo)致諸多問題出現(xiàn)，如病原菌產(chǎn)生耐藥性、動物免疫機(jī)能下降、體內(nèi)菌群失調(diào)、畜禽產(chǎn)品中的藥物殘留等。而丁酸梭菌和嗜酸乳桿菌作為外源益生菌，在維持腸上皮的完整性、促進(jìn)動物腸道發(fā)育方面發(fā)揮著重要作用。丁酸梭菌具有耐熱、耐酸和耐多種抗生素等生物學(xué)特性，嗜酸乳桿菌適合在動物腸道生存，對腸道致病菌產(chǎn)生拮抗作用，二者可共同調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡、產(chǎn)生益生物質(zhì)、提高機(jī)體免疫力及促進(jìn)動物生長，同時具有無污染、無有害殘留等特點(diǎn)，逐漸成為熱門的抗生素替代品之一。目前國內(nèi)外研究結(jié)果表明：在動物日糧中單獨(dú)添加一定量丁酸梭菌或單獨(dú)添加一定量的嗜酸乳桿菌可以增加胃腸道有益菌數(shù)量，改善小腸形態(tài)，提高動物免疫力，從而提高動物的抗病力。查閱近年來文獻(xiàn)表明：斷奶仔豬營養(yǎng)一直是豬營養(yǎng)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)和難點(diǎn)，仔豬抗病力這一領(lǐng)域的創(chuàng)新性有待于提高。通過丁酸梭菌和嗜酸乳桿菌調(diào)節(jié)機(jī)體的腸上皮細(xì)胞因子表達(dá)、腸道形態(tài)發(fā)育等功能，我們研究了一種斷奶仔豬抗病飼糧組方，以此來改善仔豬腸道發(fā)育和抗病力的營養(yǎng)調(diào)控，在一定程度上提高養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的一個目的是公開了一種斷奶仔豬抗病飼糧的組方及應(yīng)用。
本發(fā)明的另一個目的是公開了所配制的飼糧對斷奶仔豬腸上皮細(xì)胞NLRPs表達(dá)、腸道黏膜發(fā)育和血清炎癥因子含量的應(yīng)用效果。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明公開了如下的技術(shù)內(nèi)容
一種調(diào)節(jié)斷奶仔豬抗病力的飼糧，其特征在于在飼料原料中使用丁酸梭菌和嗜酸乳桿菌飼料添加劑，進(jìn)行合理配制日糧，由下述重量份數(shù)的原料組成：
玉米58-63豆粕16-24全脂奶粉2-5
魚粉4-9小麥麩1-5葡萄糖1-3
酸化劑0.1-0.5 磷酸氫鈣0.5-1.5石粉0.5-1.1
食鹽0.1-0.5 L-賴氨酸鹽酸鹽0.3-0.7DL-蛋氨酸0.2-0.7
蘇氨酸0.2-0.6 仔豬預(yù)混料1-4
丁酸梭菌添加劑0.001-0.01（凍干粉中活菌含量為1×109CFU/g，飼糧中濃度為1×104~1×105CFU/g）
嗜酸乳桿菌添加劑0.001-0.01（凍干粉中活菌含量為1×109CFU/g，飼糧中濃度為1×104~1×105CFU/g）；
其中所述的仔豬預(yù)混料是指每千克預(yù)混料中含有：14,600 mg鐵，630 mg銅，410 mg 錳，10,400 mg鋅，15,000μg碘，17,000μg硒，227,600 IU VA，22,800 IU VD3，1,100 mg VE，30 mg VK3，700 mg VB2，200 mg VB6，1,340 mg泛酸，2,300 mg煙酸，8 mg生物素。
本發(fā)明所述酸化劑指的是上海美農(nóng)飼料有限公司產(chǎn)品，主要成分是乳酸、正磷酸、檸檬酸、富馬酸、甲酸。
本發(fā)明所述的斷奶仔豬配合飼料的制備方法：將玉米、豆粕兩種原料粉碎，其他原料均不需要粉碎，按照重量比例分別進(jìn)行稱量，在小型混合機(jī)中混勻即可。
本發(fā)明一個優(yōu)選的配方（重量份數(shù)）：
玉米60豆粕19全脂奶粉4
魚粉6小麥麩2.5葡萄糖3
酸化劑0.4 磷酸氫鈣1.2石粉0.5
食鹽0.3 L-賴氨酸鹽酸鹽0.4 DL-蛋氨酸0.4
蘇氨酸0.3 仔豬預(yù)混料2
丁酸梭菌添加劑0.001（飼糧中丁酸梭菌濃度為1 × 104 CFU/g）
嗜酸乳桿菌添加劑0.001（飼糧中嗜酸乳桿菌濃度為1 × 104 CFU/g）；
其中所述的仔豬預(yù)混料是指每千克預(yù)混料中含有：14,600 mg鐵，630 mg銅，410 mg 錳，10,400 mg鋅，15,000μg碘，17,000μg硒，227,600 IU VA，22,800 IU VD3，1,100 mg VE，30 mg VK3，700 mg VB2，200 mg VB6，1,340 mg泛酸，2,300 mg煙酸，8 mg生物素。
本發(fā)明另一個優(yōu)選的配方（重量份數(shù)）：：
玉米59.5豆粕18.5全脂奶粉3.48
魚粉6小麥麩5葡萄糖3
酸化劑0.4 磷酸氫鈣1.3石粉0.7
食鹽0.4L賴氨酸鹽酸鹽0.3 DL-蛋氨酸0.2
蘇氨酸0.2 仔豬預(yù)混料1
丁酸梭菌添加劑0.01（飼糧中丁酸梭菌濃度為1 × 105 CFU/g）
嗜酸乳桿菌添加劑0.01（飼糧中嗜酸乳桿菌濃度為1 × 105 CFU/g）；
其中所述的仔豬預(yù)混料是指每千克預(yù)混料中含有：14,600 mg鐵，630 mg銅，410 mg 錳，10,400 mg鋅，15,000μg碘，17,000μg硒，227,600 IU VA，22,800 IU VD3，1,100 mg VE，30 mg VK3，700 mg VB2，200 mg VB6，1,340 mg泛酸，2,300 mg煙酸，8 mg生物素。
本發(fā)明在斷奶仔豬飼料中添加丁酸梭菌和嗜酸乳桿菌能顯著提高空腸NLRPs的相對表達(dá)，顯著提高空腸中段和回腸各腸段絨毛高度，顯著降低十二指腸、空腸中段和回腸隱窩深度；降低了血清中IL-1β因子含量，提高了血清中IL-10因子含量，從而提高仔豬抗病力。
本發(fā)明的斷奶仔豬抗病飼糧組方試驗結(jié)果表明：
（1）日糧中添加丁酸梭菌和嗜酸乳桿菌，顯著提高了空腸中NLRPs的表達(dá)，表明該飼料配方能有效增加有益菌的數(shù)量，提高腸道黏膜屏障功能；
（2）日糧中添加丁酸梭菌和嗜酸乳桿菌顯著提高了十二指腸、空腸中段和回腸各腸段絨毛高度，顯著降低了十二指腸和回腸隱窩深度，并提高了絨毛高度與隱窩深度的比值，表明這種飼料配方能促進(jìn)斷奶仔豬腸道健康發(fā)育，利于營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。
（3）日糧中添加丁酸梭菌和嗜酸乳桿菌降低了血清中促炎因子IL-1β的含量，提高了抗炎因子IL-10的含量。
為了更進(jìn)一步說明本發(fā)明的積極效果，提供如下的試驗：
1．試驗動物及分組
采用單因子試驗設(shè)計，選取體重6.97 ± 0.48 kg的健康“杜×長×大”三元雜交斷奶仔豬48頭，隨機(jī)分為2個處理，每個處理分為4個重復(fù)，每個重復(fù)6頭豬。每個處理組分別飼喂不同日糧：飼喂基礎(chǔ)日糧(NC)、飼喂基礎(chǔ)日糧+0.01%丁酸梭菌（濃度為1 × 105 CFU/g）+0.01%嗜酸乳桿菌（濃度為1 × 105 CFU/g）（試驗組）。丁酸梭菌和嗜酸乳桿菌為市售產(chǎn)品。
2．基礎(chǔ)飼糧配方及營養(yǎng)水平
根據(jù)NRC（1998）配制豬基礎(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)水平如表1所示；
表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平（飼喂基礎(chǔ)）
a 每千克預(yù)混料中含有：14,600 mg鐵，630 mg銅，410 mg 錳，10,400 mg鋅，15,000μg碘，17,000μg硒，227,600 IU VA，22,800 IU VD3，1,100 mg VE，30 mg VK3，700 mg VB2，200 mg VB6，1,340 mg泛酸，2,300 mg煙酸，8 mg生物素。
b 根據(jù)NRC（1998）飼料成分表計算。
3．試驗規(guī)程
試驗在一個商品萬頭豬場進(jìn)行，試驗期28天。飼喂、管理、免疫按豬場規(guī)定程序進(jìn)行。飼喂4周后，從每個處理的每個重復(fù)組中隨機(jī)選取3頭斷奶仔豬采血、屠宰，取十二指腸、空腸中段和回腸，進(jìn)行腸上皮細(xì)胞NLRPs表達(dá)分析、并制作組織切片分析腸絨毛高度和隱窩深度的生長情況。整個試驗過程中觀察仔豬的健康狀況，記錄死、淘仔豬以及腹瀉、用藥情況。
4．測定指標(biāo)
空腸上皮細(xì)胞NLRPs表達(dá)和血清指標(biāo)測定：試驗結(jié)束后，從每個重復(fù)中隨機(jī)選3頭仔豬，用真空促凝管進(jìn)行采血，前腔靜脈采血后處死，無菌條件下迅速打開腹腔，分離并采集空腸中段5 cm左右腸管，用PBS沖洗后分裝于凍存管中于-80 ℃保存，用于NLRP3、NLRP6和NLRP12的測定。采用ELISA試劑盒測定血清中促炎因子IL-1β和抗炎因子IL-10的含量；
小腸黏膜形態(tài)的測定：于十二指腸、空腸中段和回腸切取1cm腸斷，用生理鹽水沖洗后迅速放入預(yù)先配制好的福爾馬林溶液中固定。按常規(guī)方法制作石蠟切片，蘇木精-伊紅染色，測量絨毛高度和隱窩深度。
5．統(tǒng)計分析
采用SAS統(tǒng)計軟件下的Compare Means模塊中的One-Way ANOVA進(jìn)行方差分析，并采用Duncan’s多重比較進(jìn)行組間差異顯著性檢驗，P<0.05為差異顯著。
本發(fā)明公開的斷奶仔豬抗病飼糧組方在斷奶仔豬飼料中的應(yīng)用效果，主要包括：
（1）腸道上皮細(xì)胞NLRPs的表達(dá)：
由表2可知，試驗組極顯著（P <0.01）提高了空腸上皮細(xì)胞NLRP12的相對表達(dá)，顯著（P<0.05）提高了NLRP3和NLRP6的相對表達(dá)；
表2 對空腸上皮細(xì)胞中NLRPs表達(dá)的影響
注：同行肩注小寫字母不同表示差異顯著P <0.05，肩注大寫字母不同表示差異極顯著P <0.01，無肩注字母表示差異不顯著P >0.05。**表示P <0.01。下表同。
（2）小腸發(fā)育：
由表3可知，絨毛高度：試驗組的十二指腸和空腸絨毛高度極顯著高于對照組（P ＜0.01），試驗組回腸絨毛高度比對照組提高了6.84%；隱窩深度：試驗組的十二指腸和空腸隱窩深度均顯著低于對照組（P ＜0.05），試驗組回腸隱窩深度比對照組降低了16.67%；絨毛高度/隱窩深度：試驗組十二指腸絨毛高度/隱窩深度比極顯著（P ＜0.01）高于對照組、試驗組空腸和回腸絨毛高度/隱窩深度比顯著（P ＜0.05）高于對照組；
表3 對仔豬小腸發(fā)育的影響
注：同行肩注小寫字母不同表示差異顯著P <0.05，肩注大寫字母不同表示差異極顯著P <0.01，無肩注字母表示差異不顯著P >0.05。**表示P <0.01。
（3）血清因子含量：
由表4可知，試驗組的促炎因子IL-1β含量降低了5.95%，抗炎因子IL-10含量提高了21.78%；
表4 對仔豬血清細(xì)胞因子含量的影響
試驗結(jié)果表明：
（1）日糧中添加丁酸梭菌和嗜酸乳桿菌，極顯著（P <0.01）提高了空腸上皮細(xì)胞NLRP12的相對表達(dá)，顯著（P <0.05）提高了NLRP3和NLRP6的相對表達(dá)，表明該飼糧組方能有效增加腸道黏膜屏障功能。
（2）日糧中添加丁酸梭菌和嗜酸乳桿菌，極顯著提高了十二指腸和空腸中段絨毛高度，顯著降低了十二指腸和空腸中段隱窩深度。并且試驗組中的絨毛高度與隱窩深度的比值比對照組均顯著提高，表明該飼糧組方能促進(jìn)斷奶仔豬腸道健康發(fā)育，利于營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。
（3）日糧中添加丁酸梭菌（濃度為1 × 105 CFU/g）和嗜酸乳桿菌（濃度為1 × 105CFU/g）（菌濃度比1:1）降低了血清中促炎因子IL-1β含量，提高了抗炎因子IL-10含量，表明該飼糧組方能有效幫助益生菌順利定居腸道，增強(qiáng)機(jī)體免疫力。
本發(fā)明對以丁酸梭菌和嗜酸乳桿菌為飼料添加劑的飼料配方進(jìn)行了安全性和生長性能實(shí)驗，其方法如下：
（1）步驟：
材料和方法：選擇6.59±0.61 kg斷奶的“杜×長×大”仔豬168頭，臨床健康、發(fā)育正常，按隨機(jī)區(qū)組設(shè)計分為7個處理，每個處理4個重復(fù)，每個重復(fù)6頭仔豬，飼養(yǎng)于專用代謝籠中，試驗期4周。7個處理組分別飼喂：
1）對照組：基礎(chǔ)飼糧（不含菌）；
2）試驗2組：基礎(chǔ)飼糧＋0.001丁酸梭菌添加劑（濃度為1 × 104 CFU/g）；
3）試驗3組：基礎(chǔ)飼糧＋0.001嗜酸乳桿菌添加劑（濃度為1 × 104 CFU/g）；
4）試驗4組：基礎(chǔ)飼糧＋0.0005丁酸梭菌添加劑（濃度為0.5 × 104 CFU/g）＋0.0005嗜酸乳桿菌添加劑（濃度為0.5 × 104 CFU/g）；
5）試驗5組：基礎(chǔ)飼糧＋0.001丁酸梭菌添加劑（濃度為1 × 104 CFU/g）＋嗜酸乳桿菌添加劑0.001（濃度為1 × 104 CFU/g）；
6）試驗6組：基礎(chǔ)飼糧＋0.01丁酸梭菌添加劑（濃度為1 × 105 CFU/g）＋0.01嗜酸乳桿菌添加劑（濃度為1 × 105 CFU/g）；
7）試驗7組：基礎(chǔ)飼糧＋0.015丁酸梭菌添加劑（濃度為1.5 × 105 CFU/g）＋0.015嗜酸乳桿菌添加劑（濃度為1.5 × 105 CFU/g）。試驗期內(nèi)隨時觀察中毒表現(xiàn)及死亡情況。
（2）飼喂的仔豬基礎(chǔ)飼料原料組成：
包括玉米62.66、豆粕19、全脂奶粉2.7、魚粉6、小麥麩3、葡萄糖2、酸化劑0.3、磷酸氫鈣0.6、石粉0.6、食鹽0.3、L-賴氨酸鹽酸鹽0.3、DL-蛋氨酸0.3、蘇氨酸0.2、仔豬預(yù)混料2。
結(jié)果：給斷奶仔豬飼喂上述試驗飼糧，連續(xù)飼喂28天，未見明顯中毒現(xiàn)象，觀察期內(nèi)無死亡，隨機(jī)尸檢第7組中一頭仔豬，各主要臟器未見明顯異常。生長性能結(jié)果見表5；
表5不同劑量的丁酸梭菌對斷奶仔豬生長性能的影響
注：同行之間肩注，無字母或小寫字母相同表示差異不顯著（P＞0.05），小寫字母不同表示差異顯著（P＜0.05）。下表同。
結(jié)論：
1)由此可知，與對照組相比，除試驗2和試驗3組外，試驗組均顯著提高了仔豬平均日增重（ADG）（P＜0.05），但試驗2組和試驗3組的ADG和ADFI均比對照組有所提高，F(xiàn)/G均比對照組有所下降，因此，添加丁酸梭菌和嗜酸乳桿菌是能促進(jìn)生長性能的，但是兩菌單獨(dú)在飼糧中為濃度為1 × 104 CFU/g時效果不顯著（P＞0.05）；
2)組合總添加量與各菌單獨(dú)添加量相同，試驗4組兩菌的組合ADG和ADFI顯著（P＜0.05）優(yōu)于試驗2組和試驗3組，F(xiàn)/G低于試驗2組和試驗3組，由此表明，組合效果優(yōu)于單獨(dú)添加，但飼糧中濃度分別為0.5 × 104 CFU/g時還不是最優(yōu)組合；
3)試驗5組、試驗6組、試驗7組的F/G均顯著高于試驗4組（P＜0.05），試驗5組和試驗7組生長性能差異不顯著（P＞0.05），因此在飼糧中丁酸梭菌濃度為1 × 104 CFU/g~1.5 × 105 CFU/g＋飼糧中嗜酸乳桿菌濃度為1 × 104 CFU/g~1.5 × 105 CFU/g時均可顯著提高仔豬生長性能；
4)試驗6組：基礎(chǔ)飼糧＋0.01丁酸梭菌添加劑（濃度為1 × 105 CFU/g）＋0.01嗜酸乳桿菌添加劑（濃度為1 × 105 CFU/g）的料重比（F/G）顯著（P＜0.05）低于其它各組，因此，綜合考慮飼喂效果和成本因素，此組為最佳添加量。
⑤因此，此組方給出的丁酸梭菌和嗜酸乳桿菌添加量范圍均為0.001~0.01（飼糧中濃度為1 × 104 CFU/g~1 × 105 CFU/g）。
具體實(shí)施方式
通過以下實(shí)施例對本發(fā)明作一步說明，但不作為本發(fā)明的限制。本發(fā)明的實(shí)施例中所述的重量份數(shù)原料指的是克、公斤或噸，可根據(jù)生產(chǎn)實(shí)際的需要加以調(diào)整。本發(fā)明所用到的各種原料例如：玉米、豆粕、全脂奶粉、小麥麩、磷酸氫鈣、石粉、食鹽、L-賴氨酸鹽酸鹽、DL-蛋氨酸、蘇氨酸、酸化劑、預(yù)混料、丁酸梭菌、嗜酸乳桿菌等對外均有售；其中下面的產(chǎn)品均有市售：
酸化劑指的是上海美農(nóng)飼料有限公司產(chǎn)品；
全脂奶粉指的是湖南百宜飼料科技有限公司；
1-4%仔豬預(yù)混料和豆粕購買于正大預(yù)混料（天津）有限公司；
丁酸梭菌添加劑指的是鄭州金百合生物工程有限公司產(chǎn)品；
嗜酸乳桿菌添加劑指的是武漢遠(yuǎn)城科技發(fā)展有限公司產(chǎn)品；
玉米指的是天津玉米世紀(jì)科技有限公司產(chǎn)品；
魚粉指的是進(jìn)口秘魯魚粉；
小麥麩和葡萄糖指的是天津市鼎圣飼料有限公司產(chǎn)品。
實(shí)施例1
斷奶仔豬的配合飼料原料組成：
包括玉米61.59、豆粕20、全脂奶粉2.5、魚粉6、小麥麩2、葡萄糖3、酸化劑0.4、磷酸氫鈣0.7、石粉0.7、食鹽0.3、L-賴氨酸鹽酸鹽0.4、DL-蛋氨酸0.2、蘇氨酸0.2、仔豬預(yù)混料2、丁酸梭菌0.01（飼糧中濃度為1 × 105 CFU/g）、嗜酸乳桿菌0.001（飼糧中濃度為1 × 104 CFU/g）。其中所述的仔豬預(yù)混料是指每千克預(yù)混料中含有：14,600 mg鐵，630 mg銅，410 mg 錳，10,400 mg鋅，15,000μg碘，17,000μg硒，227,600 IU VA，22,800 IU VD3，1,100 mg VE，30 mg VK3，700 mg VB2，200 mg VB6，1,340 mg泛酸，2,300 mg煙酸，8 mg生物素。
制備方法：將玉米、豆粕兩種原料粉碎，其他原料均不需要粉碎，按照重量比例分別進(jìn)行稱量，在小型混合機(jī)中混勻即可。
實(shí)施例2
斷奶仔豬的抗病配合飼料原料組成：
包括玉米60、豆粕19.49、全脂奶粉4、魚粉6、小麥麩3.9、葡萄糖3、酸化劑0.3、磷酸氫鈣0.7、石粉0.6、食鹽0.3、L-賴氨酸鹽酸鹽0.3、DL-蛋氨酸0.2、蘇氨酸0.2、仔豬預(yù)混料1、丁酸梭菌0.001（飼糧中濃度為1×104CFU/g）、嗜酸乳桿菌0.01（飼糧中濃度為1×105CFU/g）。
其中所述的仔豬預(yù)混料是指每千克預(yù)混料中含有：14,600 mg鐵，630 mg銅，410 mg 錳，10,400 mg鋅，15,000μg碘，17,000μg硒，227,600 IU VA，22,800 IU VD3，1,100 mg VE，30 mg VK3，700 mg VB2，200 mg VB6，1,340 mg泛酸，2,300 mg煙酸，8 mg生物素。
制備方法：將玉米、豆粕兩種原料粉碎，其他原料均不需要粉碎，按照重量比例分別進(jìn)行稱量，在小型混合機(jī)中混勻即可。
實(shí)施例3
一種斷奶仔豬的抗病配合飼料由下述重量份數(shù)的原料組成：
包括玉米58、豆粕21、全脂奶粉3.08、魚粉5、小麥麩4、葡萄糖3、酸化劑0.4、磷酸氫鈣0.7、石粉0.7、食鹽0.4、L-賴氨酸鹽酸鹽0.3、DL-蛋氨酸0.2、蘇氨酸0.2、仔豬預(yù)混料3、丁酸梭菌0.01（飼糧中濃度為1×105CFU/g）、嗜酸乳桿菌0.01（飼糧中濃度為1×105CFU/g）。
制備方法：將玉米、豆粕兩種原料粉碎，其他原料均不需要粉碎，按照重量比例分別進(jìn)行稱量，在小型混合機(jī)中混勻即可。
實(shí)施例4
采用斷奶仔豬的配合飼料飼喂斷奶仔豬的方法：
此系列配方適用斷奶仔豬，適用期為30~45天，根據(jù)情況讓仔豬自由采食即可，必須提供充足的飲水，其他按正常的飼養(yǎng)管理進(jìn)行。
實(shí)施例5
比較試驗
常規(guī)的仔豬飼料：
方法：配制玉米-豆粕型仔豬飼糧，不添加丁酸梭菌和嗜酸乳桿菌。選擇4頭7±0.52 kg仔豬，試驗期28天。試驗結(jié)束后對4頭仔豬進(jìn)行屠宰，取十二指腸、空腸和回腸。
步驟：采用HE染色，測定十二指腸、空腸和回腸絨毛高度和隱窩深度。
結(jié)果：三個腸段絨毛高度分別為314μm、325μm、226μm；隱窩深度分別為399μm、287μm、193μm。
日糧中添加丁酸梭菌和嗜酸乳桿菌后飼料：
方法：配制玉米-豆粕型仔豬日糧，添加0.01%丁酸梭菌和0.01%嗜酸乳桿菌。選擇4頭7.02±0.62kg仔豬，試驗期28天。試驗結(jié)束后對4頭仔豬進(jìn)行屠宰，取十二指腸、空腸和回腸。
步驟：采用HE染色，測定十二指腸、空腸和回腸絨毛高度和隱窩深度。
結(jié)果：十二指腸、空腸和回腸絨毛高度分別為384μm、358μm、279μm；隱窩深度分別為286μm、241μm、172μm。
結(jié)論：日糧中添加丁酸梭菌和嗜酸乳桿菌能提高仔豬小腸絨毛長度、降低隱窩深度。通過比較試驗說明：日糧中添加丁酸梭菌和嗜酸乳桿菌能調(diào)節(jié)仔豬腸道發(fā)育，提高仔豬抗病力。