專利名稱：一種沙丁胺醇人工抗原及其制備的抗體的制作方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及ー種沙丁胺醇人工抗原及其制備的抗體。
背景技術(shù)：
沙丁胺醇(Salbutamol)，是ー種選擇性β 2_受體激動劑(β -興奮劑)，醫(yī)療中用于治療喘息型支氣管炎、支氣管哮喘、肺氣腫所致的支氣管痙攣。該藥物不是獸藥，也不是飼料添加剤。由于沙丁胺醇檢測手段的相對滯后，但又與克倫特羅具有同樣促生長效果，因而逐步取代克倫特羅成為新一代“瘦肉精”，用于非法謀取經(jīng)濟利益。沙丁胺醇作為營養(yǎng)重分配劑添加到飼料中，可以促進動物瘦肉生長、減少脂肪產(chǎn)生、提升單位經(jīng)濟價值，但同時也會造成藥物蓄積、殘留在動物機體中。沙丁胺醇一次性攝入量較多時對人體存在多種毒副作用，可導致體內(nèi)聚集濃度升高而繼發(fā)心臟肥大，并造成心臟跳動過速，嚴重時會出現(xiàn)心 肌梗死，長期攝入過量沙丁胺醇，可能產(chǎn)生生殖內(nèi)分泌毒性。世界衛(wèi)生組織、美國、歐盟及一些發(fā)達國家等都先后立法禁止在畜禽生產(chǎn)中使用β-興奮劑作為促動物生長飼料添加剤。我國在農(nóng)業(yè)部第235號公告中明確規(guī)定了禁止使用沙丁胺醇，并不得在所有動物性食品中檢出。目前，國家標準和行業(yè)標準中對飼料及動物源性食品中沙丁胺醇殘留的檢測常采用液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法。雖然此方法特異性強、靈敏度高，但是樣品前處理操作步驟繁瑣，成本較高，也不適用于大批量樣品的篩選檢測。免疫分析，由于在抗原抗體的定性定量方面獨特的優(yōu)勢和操作簡便快速、成本低、靈敏度較高、分析樣本量大的優(yōu)點彌補了理化分析的不足，在β_興奮劑的殘留檢測中起著越來越重要的作用。影響免疫化學分析質(zhì)量的根本因素是抗體的特異性與親和性，這些性質(zhì)又決定于免疫半抗原分子的結(jié)構(gòu)，因此免疫半抗原的分子設計與合成就是產(chǎn)生特異性抗體和建立小分子獸藥殘留快速檢測技術(shù)最基礎和最關(guān)鍵的步驟。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供ー種沙丁胺醇人工抗原及其制備的抗體。本發(fā)明提供了ー種化合物，即式(I)所示化合物。式(I)所示化合物為將沙丁胺醇進行結(jié)構(gòu)改造得到的化合物，在沙丁胺醇的苯酚基上引入活性官能團結(jié)構(gòu)，既最大程度保留了沙丁胺醇的特征結(jié)構(gòu)，又具有可以與載體蛋白發(fā)生偶聯(lián)的活性基團。本發(fā)明還保護式(I)所示化合物的制備方法，包括如下步驟將沙丁胺醇與こニ醇ニ縮水甘油醚反應，獲得所述化合物。所述反應具體可在碳酸氫鈉水溶液中進行。優(yōu)選濃度為3% (質(zhì)量比)的碳酸氫鈉水溶液。所述沙丁胺醇與こニ醇ニ縮水甘油醚的物質(zhì)的量比具體可為1:1。
權(quán)利要求
1.式⑴所示化合物；
2.權(quán)利要求I所述化合物的制備方法，包括如下步驟將沙丁胺醇與こニ醇ニ縮水甘油醚反應，獲得所述化合物。
3.權(quán)利要求I所述化合物與載體蛋白的偶聯(lián)物。
4.如權(quán)利要求3所述的偶聯(lián)物，其特征在于所述載體蛋白為牛血清白蛋白或卵清白蛋白。
5.權(quán)利要求3或4所述偶聯(lián)物在制備沙丁胺醇特異性抗體中的應用。
6.如權(quán)利要求5所述的應用，其特征在于所述抗體為單克隆抗體或多克隆抗體。
7.以權(quán)利要求3或4所述偶聯(lián)物為免疫原制備得到的單克隆抗體。
8.抗沙丁胺醇單克隆抗體雜交瘤細胞2E9，它的保藏編號為CGMCCNo. 5791。
9.權(quán)利要求8所述雜交瘤細胞分泌的單克隆抗體。
10.權(quán)利要求3或4所述偶聯(lián)物，或，權(quán)利要求7或9所述單克隆抗體在檢測沙丁胺醇中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種沙丁胺醇人工抗原及其制備的抗體。本發(fā)明提供了一種化合物，即式(I)所示化合物。式(I)所示化合物為將沙丁胺醇進行結(jié)構(gòu)改造得到的化合物，在沙丁胺醇的苯酚基上引入活性官能團結(jié)構(gòu)，既最大程度保留了沙丁胺醇的特征結(jié)構(gòu)，又具有可以與載體蛋白發(fā)生偶聯(lián)的活性基團。本發(fā)明還保護一種沙丁胺醇人工抗原，為將式(I)所示化合物與載體蛋白歐聯(lián)得到的偶聯(lián)物。將所述沙丁胺醇人工抗原免疫動物，可獲得高特異性的單克隆抗體和多克隆抗體，方法簡便、易行。所述人工抗原可用于檢測沙丁胺醇。所述抗體可用于檢測沙丁胺醇。式(I)
文檔編號C12N5/20GK102617516SQ20121004428
公開日2012年8月1日 申請日期2012年2月23日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月23日
發(fā)明者丁雙陽, 史為民, 張素霞, 曹興元, 李建成, 江海洋, 沈建忠, 王戰(zhàn)輝 申請人:中國農(nóng)業(yè)大學