一種蛹蟲草栽培過程中真菌污染的處理方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種蛹蟲草栽培過程中真菌污染的處理方法，將栽培過程中出現(xiàn)真菌污染的培養(yǎng)基表面以吸附有殺真菌劑的河沙進行覆蓋。本發(fā)明提供的處理方法操作簡便，原材料來源廣泛，成本低廉，能夠方便、快速處理蛹蟲草栽培過程中出現(xiàn)的真菌污染。處理之后得到的蛹蟲草子實體產量高、質量好，因此，本發(fā)明提供的處理方法具有廣闊的應用前景。
【專利說明】一種蛹蟲草栽培過程中真菌污染的處理方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及蛹蟲草的栽培領域，具體涉及一種蛹蟲草栽培過程中真菌污染的處理方法。
【背景技術】
[0002]蛹蟲草(Cordyceps militaris (L.Fr) Link),又名蠶蟲草、北冬蟲夏草，屬子囊菌門(Ascomycota)、核菌綱(Pyrenomycetes)、球殼目(Sphaeriales)、麥角菌科(Clavicipitaceae)、蟲草屬(Cordyceps (F r.) Link)真菌。蛹蟲草是蟲草屬真菌的模式種，在自然界多寄生在多寄生在多種鱗翅日昆蟲的幼蟲和蛹上。
[0003]近年來，很多研究都表明，人工栽培的蛹蟲草化學成分及藥理作用與冬蟲夏草相似，但價格卻遠遠低于冬蟲夏草，因此，蛹蟲草的開發(fā)應用具有極大的潛在市場。
[0004]目前的規(guī)?；枷x草生產中均采用了半人工合成培養(yǎng)基進行規(guī)?；耘啵饕脑蚴窃?大米、小米、高粱、玉米、奶粉、黃豆等)的來源廣泛且容易保存不受季節(jié)的限制。但由于在培養(yǎng)基輔料中添加了葡萄糖、奶粉、豆?jié){等物質所以在培養(yǎng)過程中很容易造成真菌污染。真菌污染不但影響產量，而其會造成產品雜菌超標，從而導致衛(wèi)生學指標不合格，而且污染容器的處理費時費力。
【發(fā)明內容】
[0005]為克服現(xiàn)有蛹蟲草栽培過程中易出現(xiàn)真菌污染、從而影響子實體生長的技術缺陷，本發(fā)明的目的是提供一種蛹蟲草栽培過程中真菌污染的處理方法。
[0006]本發(fā)明提供的處理方法為:將栽培過程中出現(xiàn)真菌污染的培養(yǎng)基表面以吸附有殺真菌劑的河沙進行覆蓋。
[0007]所述河沙覆蓋的厚度可根據(jù)真菌污染情況、選取的殺真菌劑種類、濃度等來確定，以能殺滅真菌污染、防止其擴散為準，優(yōu)選地，河沙覆蓋的厚度為I~20mm，更優(yōu)選5~IOmm0
[0008]所述處理過程在蛹蟲草的暗培養(yǎng)階段結束后開始并貫穿整個光培養(yǎng)階段。
[0009]所述殺真菌劑選自酒精、碘酒、硫酸、鹽酸、高錳酸鉀溶液、雙氧水中的一種或多種。
[0010]本發(fā)明采用的殺真菌劑主要分為兩大類:強氧化劑(硫酸、鹽酸、高錳酸鉀、雙氧水等)和蛋白變性劑(酒精、碘酒等)。選取此殺真菌劑的主要原因是成本低廉、無殘留，且不會對未污染部分的蛹蟲草子實體造成食用安全危害。
[0011]優(yōu)選地，所述碘酒為常規(guī)市售碘酒；所述酒精的質量百分比濃度為70~90%，最優(yōu)選質量百分比濃度為75%的醫(yī)用酒精；所述硫酸、鹽酸的質量百分比濃度為2~10% ;所述高錳酸鉀溶液為質量百分比濃度為0.05~0.5%的水溶液；所述雙氧水的質量百分比濃度為I~10% ο
[0012]所述吸附有殺真菌劑的河沙的制備過程如下:選取60~80目的河沙，滅菌后將其浸入所述殺真菌劑中，備用。
[0013]優(yōu)選地，所述吸附有殺真菌劑的河沙的制備過程如下:選取60~80目的河沙，采用質量百分比濃度為10~20%的稀鹽酸浸泡20~30小時，清水洗至中性，然后在120~200°C下干法滅菌90~120min，滅菌后將其浸入所述殺真菌劑中，備用。
[0014]以上技術方案中的處理方法還包括在所述河沙上加蓋器皿。由于以上采用的殺真菌劑多為易揮發(fā)的物質如酒精、碘酒、雙氧水等，為保證殺真菌劑在真菌污染物表面發(fā)揮作用，因此采用器皿將河沙進行覆蓋，防止揮發(fā)。
[0015]優(yōu)選地，用于覆蓋河沙的所述器皿為蓋狀結構的器皿，扣于所述河沙之上并壓緊。
[0016]所述蓋狀器皿更優(yōu)選采用耐酸堿、耐腐蝕的塑料瓶蓋，如各種飲料瓶、礦泉水瓶或者試劑瓶蓋，采用蓋狀器皿覆蓋在河沙上并壓緊的目的是為了防止殺真菌劑揮發(fā)，同時，還可以將真菌污染物進行隔離，控制在蓋狀器皿之中，防止真菌污染的擴散。
[0017]所述蓋狀器皿的高度為I~5cm ;優(yōu)選I~3cm。
[0018]上述器皿在使用之前浸泡于酒精中備用，以殺滅細菌。優(yōu)選浸泡于質量百分比為75%的醫(yī)用酒精中備用。
[0019]本發(fā)明提供的處理方法操作簡便，原材料來源廣泛，成本低廉，能夠方便、快速地處理蛹蟲草栽培過程中出現(xiàn)的真菌污染。處理之后得到的蛹蟲草子實體產量高、質量好，因此，本發(fā)明提供的處理方法具有廣闊的應用前景。
【具體實施方式】
[0020]以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。
[0021]實施例1蛹蟲草的栽培
[0022]一、時間:2012 年 4 月:
[0023]二、材料:
[0024](I)菌種:采用菌株編號為HX-64的蛹蟲草菌株(購自北京市農林科學院生物中心)。
[0025](2 )菌種固體培養(yǎng)基:PDA斜面。
[0026](3)液體搖瓶用培養(yǎng)基:去皮土豆250克(煮汁)、葡萄糖8克、蛋白胨2.5克、磷酸二氫鉀0.6克、硫酸鎂1.2克、水1000毫升，pH自然。
[0027](4)子實體生產營養(yǎng)液:黃豆2.2%、葡萄糖1.5%、奶粉4.5%、磷酸二氫鉀0.8%、硫酸鎂0.06%、維生素BI 15mg/1000ml的比例配成營養(yǎng)液，調整pH在5.6~7.2。
[0028](5)常規(guī)栽培培養(yǎng)容器:高12cm，直徑8cm，裝大米30克，營養(yǎng)液45ml。
[0029]三、吸附殺真菌劑河沙、蓋狀器皿的制備
[0030](I)將河沙用60目過篩，棄去大顆粒及雜質，再用80目過篩，去掉細沙。用吸鐵石吸去鐵質，放入容器中用質量百分比濃度為10%的稀鹽酸浸泡，24小時后倒去鹽酸，用水洗泡數(shù)次直至表面為中性，將河沙置于金屬容器中于160°C下干熱滅菌120min左右，然后裝Λ 500ml的容量瓶中，裝量為整個容量瓶的2/3左右。
[0031](2)選用質量百分比濃度為75%的醫(yī)用酒精作為殺真菌劑，然后將殺真菌劑裝入上述容量瓶中，使滅菌河沙完全浸沒在殺真菌劑中，備用。
[0032](3)蓋狀器皿選用高度約為1.0cm、直徑約為1.5cm的礦泉水瓶塑料蓋，使用之前將其清洗干凈、烘干，浸泡到質量百分比濃度為75%的醫(yī)用酒精中備用。
[0033]四、栽培過程:
[0034]( I)培養(yǎng)基的滅菌:
[0035]121°C、20分鐘常規(guī)滅菌。
[0036](2)接種工藝:
[0037]將接種頭做成蓮蓬狀進行噴淋式接種。
[0038](3)暗培養(yǎng)階段:
[0039]將接種后的培養(yǎng)容器直接放入暗培養(yǎng)室進行培養(yǎng)即可，保持溫度18_22°C進行避光培養(yǎng)，6天后菌絲覆蓋整個培養(yǎng)基表面后，暗培養(yǎng)結束。
[0040](4)污染培養(yǎng)容器的處理:
[0041]將暗培養(yǎng)結束后發(fā)現(xiàn)有真菌污染的培養(yǎng)容器全部挑選出，隨機分成兩組。一組不進行任何處理，繼續(xù)進行光培養(yǎng)；另一組采用本發(fā)明所述的方法進行處理，過程如下:將待處理的培養(yǎng)容器集中，在超凈工作臺內，打開培養(yǎng)容器，用塑料勺從裝有河沙的容量瓶中撈取浸滿殺真菌劑的無菌河沙，輕輕的覆蓋到真菌污染物的表面，形成約5mm的均勻一層，此時不能有游離的殺真菌劑存在，并要防止液體殺真菌劑滴落到未污染的部分，然后把浸泡在酒精中的塑料蓋取出，扣在河沙之上，壓緊，防止殺真菌劑的揮發(fā)，同時也將被真菌污染的部分控制于塑料蓋的覆蓋下，防止污染物在平面方向的擴散。上述操作完畢之后，處理下一個污染點，直至培養(yǎng)基表面上凡是有真菌污染的部分，全部用河沙和器皿覆蓋進行處理，處理完畢的組進行光培養(yǎng)。
[0042](5)光照培養(yǎng):
[0043]培養(yǎng)室溫度應為(20~23) °C。
[0044](6)采收:
[0045]當子實體高度為5-8cm時及時采收。
[0046]實施例2
[0047]采用質量百分比濃度為5%的稀鹽酸溶液作為殺真菌劑，其余同
[0048]實施例1。
[0049]實施例3
[0050]采用質量百分比濃度為3%的稀硫酸溶液作為殺真菌劑，其余同實施例1。
[0051]實施例4
[0052]采用質量百分比濃度為0.1%的高錳酸鉀水溶液作為殺真菌劑，其余同實施例1。
[0053]實施例5
[0054]采用質量百分比濃度為3%的雙氧水作為殺真菌劑，其余同實施例1。
[0055]實施例1-5中未做任何處理的組中，真菌污染在暗培養(yǎng)結束后的基礎上繼續(xù)蔓延，蔓延的部分無子實體形成，且瓶內子實體的正常生長收到很大影響，造成嚴重減產，采收時污染真菌形成的孢子對蛹蟲草子實體產生了嚴重的污染。
[0056]按照本發(fā)明所述處理方法處理后的組中，真菌污染在暗培養(yǎng)結束后的得到了嚴格控制，沒有蔓延到其它部分，且對子實體的正常生長沒有影響，子實體生長正常，采收時污染真菌形成的孢子也沒有對蛹蟲草子實體產生污染。
[0057]綜上所述，采用了本發(fā)明所述方法處理后收獲的蛹蟲草子實體，產率明顯高于未經污染處理得到的子實體，而且質量也明顯優(yōu)于未經污染處理得到的子實體，符合蛹蟲草的各項指標要求。
[0058] 雖然，上文中已經用一般性說明及具體實施方案對本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎上，可以對之作一些修改或改進，這對本領域技術人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎上所做的這些修改或改進，均屬于本發(fā)明要求保護的范圍。
【權利要求】
1.一種蛹蟲草栽培過程中真菌污染的處理方法，其特征在于，將栽培過程中出現(xiàn)真菌污染的培養(yǎng)基表面以吸附有殺真菌劑的河沙進行覆蓋。
2.根據(jù)權利要求1所述的處理方法，其特征在于，所述處理在蛹蟲草的暗培養(yǎng)階段結束后開始并貫穿整個光培養(yǎng)階段。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的處理方法，其特征在于，所述殺真菌劑選自酒精、碘酒、硫酸、鹽酸、高錳酸鉀溶液、雙氧水中的一種或多種。
4.根據(jù)權利要求3所述的處理方法，其特征在于，所述酒精的質量百分比濃度為70~90% ;所述硫酸、鹽酸的質量百分比濃度為2~10% ;所述高錳酸鉀溶液為質量百分比濃度0.05~0.5%的水溶液；所述雙氧水的質量百分比濃度為I~10%。
5.根據(jù)權利要求3或4所述的處理方法，其特征在于，所述吸附有殺真菌劑的河沙的制備過程如下:選取60~80目的河沙，滅菌后將其浸入所述殺真菌劑中，備用。
6.根據(jù)權利要求5所述的處理方法，其特征在于，所述吸附有殺真菌劑的河沙的制備過程如下:選取60~80目的河沙，采用質量百分比濃度為10~20%的稀鹽酸浸泡20~30小時，清水洗至中性，然后在120~200 V下干法滅菌90~120min，滅菌后將其浸入所述殺真菌劑中，備用。
7.根據(jù)權利要求1-6任一項所述的處理方法，其特征在于，所述處理方法還包括在所述河沙上加蓋器皿。
8.根據(jù)權利要求7所述的處理方法，其特征在于，所述器皿為為蓋狀器皿，扣于所述河沙之上并壓緊。
9.根據(jù)權利要求8所述的處理方法，其特征在于，所述蓋狀器皿的高度為I~5cm。
10.根據(jù)權利要求7-9任一項所述的處理方法，其特征在于，所述器皿在使用之前浸泡于酒精中備用。
【文檔編號】A01G1/04GK103563647SQ201210279740
【公開日】2014年2月12日 申請日期:2012年8月7日 優(yōu)先權日:2012年8月7日
【發(fā)明者】胡健 申請人:北京中怡遠大機電設備有限公司