專利名稱：毛細管電泳裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及毛細管電泳，通常稱作“毛細管區(qū)域電泳”(CZE)，且特別涉及將樣品引入毛細管柱內(nèi)和對上述毛細管柱的溫度進行控制以改善分辨率的自動方法和裝置。
最近幾年，在微量分離技術(shù)方面已取得了顯著的進展。該技術(shù)的主要優(yōu)點是適用于對極小的樣品量進行分析，即當(dāng)樣品量為微升或次微升時的情況。由于生物樣品通常是相當(dāng)小的，因此能夠分析這樣小的量對生物領(lǐng)域里的大量的研究是非常重要的。
毛細管技術(shù)的顯著問題之一是將樣品引入毛細管。在毛細管電泳中所采用的一種稱為樣品注入的方法是電遷移，這是包含電泳和電滲透效應(yīng)的集合術(shù)語(見喬根森J.W.(Jorgeson，J.W.)和盧卡克斯K.D.(Lukacs，K.D.)，色層分離法雜志(J.Chromatography)，1981，218卷，209-216頁;喬根森J.W.(Jorgenson，J.W.)和盧卡克斯K.D.(Lukacs，K.D.)，科學(xué)(science)，1983，222卷，266-272頁;沃林福德R.A.(Wallingford，R.A.)和尤因A.G.(Ewing，A.G.)，分析化學(xué)(Anal.Chem.)，1987，59卷，681-684頁)。在這個方法中，將毛細管的一端和電泳正極放入樣品，然后短暫地施加一個電壓，使少量的樣品電遷移進入毛細管。這種樣品注入的方法受到采樣分辨率的影響，這是由于具有較高遷移率的溶質(zhì)將優(yōu)先遷入電泳管柱內(nèi)，因而改變了樣品的相對構(gòu)成。為避免這種問題的發(fā)生，也有報導(dǎo)機械(physically)注入樣品的嘗試(喬根森(Jorgenson)和盧卡克斯(Lukacs)，科學(xué)(sience)，出處同上)。然而，這些直接注入方法增大了取樣量，顯然這是由于注入過程中產(chǎn)生的層流斷面。
其它不太常用的注入方法包括引力流(見楚達A.(Tsuda，A.)等人，色層分離法雜志，1983，264卷，385-392頁)，虹吸(見杭達S.(Honda，S.)等人，色層分離法雜志，1987，404卷，313-320頁)，以及采用電子樣品分離器(見德姆爾M.(DemlM.)等人，色層分離法雜志，1985，320卷，159-165頁)。這些注入方法都能將次毫微升的樣品放入電泳管柱內(nèi)而增量最小。然而，引力流或虹吸注入法是不精確的并且不能提供絕對體積量的精度，因為樣品取出后而改變的樣品液面的位置不可靠。后者僅在初始樣品量大于注入樣品量的條件下可忽略。用電子分離器，要求較大的初始樣品量，以便能使之分離成管柱要求的較小的量。因此，一些樣品可能會浪費掉，或許沒有足夠的樣品以完成分離。后面的這種方法也更復(fù)雜，因它需要一個附加的受控電源以及對分離器每個管腳電阻的非常小心的控制。進一步而言，對較大初始樣品量的需要大大地限制了其應(yīng)用范圍。
總之，所需的是一種簡單的、自動樣品注入方法，它適用于微量樣品分離，能提供精確的樣品量，并使其增量最小。
根據(jù)本發(fā)明的最佳實施例，公開了一個用于提供毛細管電泳的裝置，它包括借助毛細管末端的真空自動將樣品引入毛細管的電子控制閥系統(tǒng)。這一吸收樣品的方法是非常準(zhǔn)確并能再現(xiàn)的，且產(chǎn)生最小增量。此外，它易于使得整個毛細管電泳系統(tǒng)自動化。
該裝置包括第一和第二儲液器，為了存放電泳溶劑，它們彼此在電氣方面絕緣，一個樣品儲液器位于第一儲液器的附近以存放將被電泳化的樣品，并將一個高壓電源接在第一和第二儲液器之間。第一氣體的第一壓力源具有第一已知壓力，一般為環(huán)境氣壓。它用于給第一儲液器和樣品儲液器提供一種環(huán)境，因此，第一儲液器中的電泳溶劑和樣品儲液器中的樣品是在第一壓力下。該裝置包括一壓力儲氣罐，用于容納具有第二壓力的氣體(通常也為空氣)，它低于第一壓力。該裝置還有一個使樣品在其中電泳化的毛細管。為了固定第一和第二儲液器，壓力儲氣罐，高壓電源和樣品儲液器，且為了固定第二儲液器中的毛細管的一端，設(shè)置了一個托架裝置。氣體聯(lián)接系統(tǒng)將第二儲液器聯(lián)接到壓力儲氣罐上，該聯(lián)接系統(tǒng)具有一個閥門以使聯(lián)接系統(tǒng)與第一壓力源相通，當(dāng)與第一壓力源相聯(lián)時，阻斷第二儲液器與壓力儲氣罐的聯(lián)系。該裝置還有一個插入元件以將毛細管的另一端插入樣品儲液器和第一儲液器。在最佳模式中，裝置包括一個計算機系統(tǒng)，以控制插入元件和閥門，因此當(dāng)毛細管的另一端位于樣品儲液器之中時，閥門將第二儲液器與壓力儲氣罐接通，以控制將樣品吸入毛細管的時間。此外，在最佳模式中，當(dāng)樣品吸入毛細管后，計算機系統(tǒng)使得毛細管的另一端轉(zhuǎn)換到第一儲液器。在樣品進入毛細管且毛細管轉(zhuǎn)換到第一儲液器后，電泳開始。
最佳實施例的另一個重要特征是提供了能夠使毛細管(即溶劑/溶質(zhì)系統(tǒng))溫度在電泳期間可控的自動溫度控制系統(tǒng)。這對許多緩沖劑而言是特別有利的，PH值是溫度的強變函數(shù);因此，溫度的控制對PH值而言是非常直接的控制。此外，PH值對電泳的遷移率具有直接的作用，因此，可有效地進行分離。
在發(fā)明的另一個實施例中，毛細管被預(yù)先洗滌并使之均衡以在毛細管壁上基本達到零電荷，從而基本上消除了電滲透流并且真正地改善了分辨率。
圖1表示本發(fā)明的裝置。
圖2的表格表示預(yù)洗滌的毛細管對電滲透遷移率的影響。
圖3是表示圖2結(jié)果的曲線。
在圖3中⊙表示用NaOH處理過的毛細管。
表示用HCl處理過的毛細管。
圖1剖面地表示了根據(jù)本發(fā)明自動毛細管電泳儀的最佳實施例，此后稱CZE。在這個最佳模式中，裝置包括一個封閉外殼11，它有一個通道口(沒表示出)，和通過外殼壁以聯(lián)接外殼內(nèi)外元件的各種連通線。電泳在外殼內(nèi)的毛細管13里進行，通常是由熔氧化硅做成，可用于高靈敏度的溶液或氣體色層分析。毛細管13的一端沉浸在第一個容器21中的緩沖溶液19內(nèi)以待試驗用，且另一端沉浸在第二個容器17內(nèi)的緩沖溶液15中。緩沖溶液15和19為典型的相同溶液，許多在技術(shù)中是眾所周知的。盡管在以前的技術(shù)中，對各種緩沖劑已采用了許多不同的PH值，這取決于所進行的特定實驗，在該最佳實施例中，已發(fā)現(xiàn)對毛細電泳而言較低的PH值是最佳的。在該最佳實施例中，為取得最佳分離，PH值被調(diào)整到緩沖劑-毛細管結(jié)合的零電荷點，即毛細管壁上沒有電荷的那一點。象后面將要詳細討論的那樣零電荷點的變化取決于采用的緩沖劑和管柱的預(yù)處理。然而，象實際那樣通常低于大約2.5的PH值將滿足需要。同樣象后面將要討論的那樣，有時采用由溫度決定的特殊緩沖劑，即它們的PH值隨溫度發(fā)生強烈的變化，或換言之dPk/dT相對較大。
視圖23是毛細管13在橫斷面上的放大圖。毛細管內(nèi)徑D1隨樣品的不同和其它原因而變化。D1的典型值為0.05mm，并且一般在0和200微米之間變化。毛細管13的壁厚應(yīng)足夠小且導(dǎo)管是柔性的，一般的操作不致破裂。并且小的管徑能有效地傳遞熱量。
第2個容器17具有一個密封蓋25。毛細管13通過保持密封的塞子27進入第二容器。另外有兩個穿入物通過密封蓋25。空心管29通過塞子引進入并且電極33通過另一個塞子35進入。塞子35一般是電絕緣材料。自電極33的電線37引到電引線39，電引線39允許電信號或電源穿過外殼壁而不致對外殼短路。在外殼外，電線41與高壓電源43的端子相聯(lián)接。
自電源43的相反一端，另一根電線45與另一根引線47相連。在外殼內(nèi)，導(dǎo)線49通到沉浸在緩沖溶液19中的電極51，緩沖溶液19在第一容器21內(nèi)。借助于緩沖溶液、毛細管中的樣品材料以及沉浸在兩個容器的緩沖溶液中的毛細管兩端，電源43、電線、引線和電極可用來維持一個穿過毛細管內(nèi)材料的電位。
第二個容器放置在支架53上，并在容器和支架之間有一個電絕緣體55。如果容器和支架導(dǎo)電的話，需要用這個絕緣體。第一個容器21放置在一個可移動的滑動支架57和絕緣體59上。
探測器61放置在毛細管側(cè)以測量毛細管中的電泳結(jié)果。這樣的探測器在該領(lǐng)域中是眾所周知的，例如包括一個應(yīng)用生物系統(tǒng)783型光譜流UV/可見探測器，它是一個專門用于管柱探測的可變波長可編程探測器。通過引線63的電線傳送電力和儀器的信號。也許要用兩根以上的電線來表示。
當(dāng)完成一個樣品的電泳過程，并需要另一個樣品進入毛細管分析時，新的樣品可輸入而不需人為的干涉或移動封閉外殼。電動機65由通過引線67的導(dǎo)線提供電力并由托架69支撐以用來旋轉(zhuǎn)螺桿71。螺母73安裝在帶有夾子77的元件75上，以牢靠地夾住毛細管13，因此旋轉(zhuǎn)螺桿71將使毛細管在擋板79和81之間的距離內(nèi)升高或降低。這個設(shè)定的距離對毛細管13的低端被升高到容器21的邊緣之上是足夠的，并可再一次降低。
當(dāng)毛細管13升到容器21的邊緣之上時，通過引線85的導(dǎo)線起動電動機83以旋轉(zhuǎn)螺桿87沿支架89移動滑板57。帶有象93那樣的多個微量容器的樣品容器91預(yù)先準(zhǔn)備好并放在滑板57上靠近容器21的地方并與容器排成一行。每個微量容器可包含一個待分析的樣品。在該模式中，典型的注入體積一般是1nl到10nl。當(dāng)然根據(jù)用來容納樣品的儲液器的容積和管柱的尺寸，也可選擇其它的樣品體積。借助于對電動機83的控制來移動滑板57，容器91中的任何一個微量容器可被正好移到毛細管13的管端之下，然后由控制電機65將毛細管13的這端降低并進入微量容器。一旦一個新的樣品被吸入，毛細管可被再一次提起，容器21歸位，通過降低毛細管使其端頭重新浸入緩沖溶液。
為注入一個新的樣品，當(dāng)毛細管的一端位于一個樣品材料微量容器之中時，借助于封閉外殼中的管子29，在第二個容器17內(nèi)形成相對真空?？刂齐姍C95以轉(zhuǎn)動一個三方向旋轉(zhuǎn)閥97使管29與真空容器99接通。通過隔離閥103的真空泵101可保持容器處于一個理想的真空度。帶有可編程信號點的真空傳感器115監(jiān)視容器99中的真空度。該泵由電機105驅(qū)動。小心地控制定時和真空度可非常準(zhǔn)確地將預(yù)先確定好的樣品材料量吸進毛細管并具有其它優(yōu)點。舉一個例子，在真空容器和外殼11之間的壓力差為12.7cm汞柱，65cm長的熔氧化硅毛細管的內(nèi)徑為50微米。閥97的第二次開放時間為2秒，產(chǎn)生5毫微升水溶液的注入量。
根據(jù)發(fā)明，該裝置的另一個重要特征是能夠控制封閉外殼11內(nèi)的溫度。加熱元件107通過穿通線109供電以提供熱量，且熱感應(yīng)元件111通過導(dǎo)線113監(jiān)視溫度。象后面將要討論的那樣，這樣的溫控措施是很有用的，由于一些緩沖劑的PH值由溫度決定，對于這些緩沖劑，借助于控制溫度能自動地控制PH值。在整個分離期間如采用同一溫度，則避免了其它各種變化，因此溫度控制在更一般的場合也是有用的。例如粘度，以及遷移率經(jīng)常隨溫度發(fā)生很大變化，因此對于再現(xiàn)性而言需要溫度控制。
與最佳實施例裝置有關(guān)的所有電氣設(shè)備的電源線和控制線由導(dǎo)線管121接到控制接口119，它提供電源終端和控制用信號的切換?？刂平涌谂c計算機117相連并由計算機控制，可給計算機預(yù)編程序以保持臨界參數(shù)并可由裝置自動完成一系列分析。例如，所需真空度可作為控制數(shù)據(jù)輸入計算機，通過控制接口監(jiān)視來自真空閥115的信號，并打開和關(guān)閉真空隔離閥103來嚴格保持所需真空度。另舉一例，計算機借助于監(jiān)測溫度探測器111和控制加熱元件107的電源來控制封閉外殼內(nèi)的溫度以維持所需的設(shè)計溫度。使用預(yù)先放進容器91中的微量容器內(nèi)幾個樣品，按要求的順序控制電氣裝置，編好程序的計算機也能做出一系列分析。可以設(shè)定程序以對所有的微量容器樣品一個接一個地進行分析或允許人為起動和干預(yù)每次分析。計算機控制的另一個重要特征是計算機能夠使毛細管的極性翻轉(zhuǎn)。因此，對于反向充電的溶質(zhì)，可改變?nèi)苜|(zhì)顆粒遷移的方向。因而可在固定的位置上使用UV檢測器，有關(guān)計算機程序結(jié)構(gòu)的詳細情況請見附錄A。
PH值的控制在自由液體和一些膠體的毛細管電泳中，帶不同電荷(絕對)的溶質(zhì)具有不同的電泳遷移率，因此能被分離。如果在電泳活動期間能夠改變兩個或兩個以上溶質(zhì)之間的選擇性(即電泳遷移率的相對差)可改善析出率。獲得這種改善的一種方法是改變分離物質(zhì)有效電荷的相對差。在許多情況下，毛細管中的溶液大部分是緩沖劑，其PH值(或PK)決定了遵循酸/堿平衡定律的溶質(zhì)上的電荷。例如，水中的CHES(環(huán)己烯基胺乙烷磺酸)建立的化學(xué)平衡依賴特殊的溫度由下例方程式表達
兩性離子陰離子PK(20℃)＝9.55在PH＝9.55，50%的CHES處于兩性離子態(tài)，50%處于陰性離子態(tài)。把PH值增加到10.55，陰離子(RSO-3)的濃度將為兩性離子濃度的十倍，PH值增加到11.55，平衡將幾乎全部驅(qū)于陰離子一邊。在那點上，僅有1%的CHES處于兩性離子態(tài)。陰離子具有一定的電泳遷移性，而電中性的兩性離子則不具有電泳遷移性，這意味著當(dāng)PH值約為7.55時，CHES溶質(zhì)實際上將不具有電泳遷移性，在PH值約為11.55時，它將具有近乎陰離子的遷移性。因此，變化溶液的PH值可改變?nèi)苜|(zhì)的遷移率。
如前所述在許多情況下，緩沖溶液的PH(或PK)是其溫度的函數(shù)，且不同的緩沖溶液具有不同的溫度特性(見熱生物化學(xué)文獻目錄(CALBIOCHEMCATALOG)，表四、16頁)。隨時間或空間變化緩沖溶液的溫度，可產(chǎn)生隨時間和空間變化的PH值，因此，可控制物質(zhì)的遷移率。大體上，溶液的PK由下式給出PK＝PH-Log｛RSO-3｝/｛R+SO-3｝，式中｛RSO-3｝對應(yīng)于陰離子RSO-3的濃度，如此等等。在許多情況下，PK具有很強的溫度特性。舉一個析出過程中如何利用這個溫度特性的例子，假定析出將在含有A、B和C的三種溶質(zhì)的溶液里進行，A和B的析出最適合在第一個溫度T1下進行且A最先析出，B和C的析出最適合在溫度T2下進行，首先在溫度T1下進行直到A從B和C中分離出來為止，然后將溫度變?yōu)門2，直到B和C析出為止。類似地，對于特殊溶質(zhì)的分離，可采用更復(fù)雜的溫度安排，如需要的話，可采用連續(xù)的程序控制。
應(yīng)該認識到分離的溶質(zhì)也遵循酸/堿平衡定律，因此也能用溫度改變其離子濃度。溶質(zhì)的效果與溶劑(緩沖劑)PH值的變化有關(guān)，因此根據(jù)緩沖劑和溶質(zhì)結(jié)合的選擇，能使遷移率差增加、遷移率差減少或遷移率差根本不變。因此，為取得理想的效果，應(yīng)選擇不同的緩沖劑和溶質(zhì)的組合。
作為PH值溫度變化的一個特例，進行了研究兩種蛋白相對電泳遷移率的試驗，兩種蛋白為肌紅蛋白(Wsm)和肌紅蛋白(hh)。采用了一個熔氧化硅毛細管，它到探測器的長度為55cm，總長70cm且內(nèi)徑為0.050mm。使用10mMTris-HCl緩沖劑和20KV的電壓，測得兩種蛋白電泳遷移率的相對差(即選擇性)在溫度26.9C(PH＝8.90)和62.4C(PH＝7.90)之間變化，且為-45%。
象前述那樣，為取得高選擇性，特別在蛋白分離方面，該發(fā)明的另一個重要方向是消除毛細管壁上的電荷。目的是消除電滲流，因此在試驗期間，管柱沒有偏差，可在管柱內(nèi)提供一個較長的分離時間(較低的物質(zhì)分離的平均速度)，因而分辨率更高。另外借助于消除管壁上的電荷，正離子(例如，蛋白質(zhì))不會吸附在管壁上，這一點不同于管壁帶負電荷的一般情況。在管壁上達到零電荷的一種方法是對PH值的控制。一般而言，電滲速度與ξ位能乘以所施加的電場除以粘度成比例。ξ位能說明了兩相之間雙層界面內(nèi)的靜電力，其中包括離子吸收差的作用。當(dāng)沒有電滲流時，ξ位能為零且在毛細管壁上沒有電荷。因此當(dāng)改變PH值以取得零遷移率時，借助于測量電滲透遷移率即電滲透速率除以所施加的電場，可決定管壁上的零電荷點。
由改變PH值引起的對電滲透遷移率的影響和對毛細管進行不同處理的一些驚人結(jié)果的例子表示在圖二的表格和圖三中。在這些試驗中，為了覆蓋大范圍的PH值，使用了許多緩沖劑;由于象一般的準(zhǔn)則那樣，任何一種緩沖劑都有一個相對有限的有效PH值范圍。使用的毛細管是由多微(Polymicro)技術(shù)提供的熔氧化硅毛細管，到探測器的長度為30cm，總長50cm，內(nèi)徑0.05mm。施加的電場為360V/cm。除了為檢查可逆性而顛倒處理順序的試驗4(即步驟4、5和6在步驟1、2和3之前)以外，毛細管準(zhǔn)備的步驟如下1.用1MNaOH洗滌毛細管3分鐘;
2.用緩沖劑均衡5分鐘;
3.用萊基氧化物作為中性標(biāo)志并根據(jù)標(biāo)志來測量洗提時間;
4.用1MHCl洗滌毛細管3分鐘;
5.用緩沖劑均衡5分鐘;
6.用萊基氧化物進行試驗并測量洗提時間。
使用的緩沖劑為CAPS(即3-(環(huán)己胺)丙烷磺酸)，BICINE(即，N，N-重(2-羥基乙基)甘氨酸)，MES(即，2-(N-嗎啉代)乙烷磺酸鈉鹽)，和檸檬酸。
圖3所示的電滲透遷移率曲線生動地表示了降低PH值的結(jié)果。顯然，隨著PH值的降低，遷移率急速下降，這表明管壁上的電荷迅速趨于零。用NaOH處理過的毛細管，PH值約低于2.5時基本對應(yīng)管壁上的零電荷(基本影響與電流成正比，因此實際上采用低電流和低的PH值的緩沖劑是重要的)。然而，更驚人的是預(yù)洗滌的效果。盡管NaOH是通常用于洗滌玻璃的典型強堿，顯然如果目的是消除毛細管壁上的電荷，采用象HCl這樣的強酸預(yù)洗滌效果更好。例如，如果用HCl進行毛細管的預(yù)洗，PH值約為4.0時消除了毛細管壁上約97%的電荷，并產(chǎn)生了低于用NaOH預(yù)洗、PH值為2.5時的電滲透遷移率。此外，不同的預(yù)洗滌效果基本上是彼此無關(guān)的，由于在步驟4兩種預(yù)洗滌的順序被顛倒，結(jié)果基本一樣。實際上，無論哪種預(yù)洗滌方法，為達到高的分辨率毛細管電泳重要的是移去毛細管壁上95%或更多的電荷。然而，如果毛細管在使用前用酸而不是用堿預(yù)洗滌，更容易消除電荷且允許采用更高和更容易達到的PH值。
熟悉此領(lǐng)域的人可采納幾種控制溶劑/溶質(zhì)系統(tǒng)溫度的方法。例如，已說明的一種方法是對封閉外殼11采用一加熱系統(tǒng)。另一種方法是用一個或一個以上的電加熱器環(huán)繞在毛細管周圍，且在毛細管上采用一個或一個以上的絕熱圈。熟悉此領(lǐng)域的人無疑能用其它等效的方法來控制溫度以影響電泳的遷移率。在有些情況下，可不必將所有這些元件放在外殼11內(nèi)。例如，進行UV檢測時，有時可將探測器以及毛細管的對應(yīng)部分放置在外殼外。這種方法可簡化UV探測器系統(tǒng)的維護。升高或降低滑板支架也可使毛細管從樣品和緩沖劑儲液器中移出或插入而不需升高或降低毛細管。顯然也可采用電泳媒介而不用水溶液，例如，也可使用有機液，特例是乙腈。
權(quán)利要求
1.毛細管電泳裝置，它包括存儲第一電泳溶液的第一儲液器；與上述第一儲液器電絕緣的用于存儲第二電泳溶液的第二儲液器；位于上述第一儲液器附近存儲待極化樣品的樣品儲液器；連接于上述第一儲液器和第二儲液器之間的高壓電源；第一氣體第一壓力源設(shè)備，用于向上述第一儲液器和樣品儲液器提供具有第一已知壓力的環(huán)境，因此在上述第一儲液器中的第一電泳溶液和在上述樣品儲液器中的樣品處于上述第一壓力下；存儲低于上述第一壓力的第二壓力氣體的壓力儲氣罐；上述樣品在其中產(chǎn)生電泳的毛細管；固定裝置，用于固定上述第一儲液器和第二儲液器，固定上述壓力儲氣罐、固定高壓電源，固定上述樣品儲液器及上述第二儲液器中的毛細管的一端；連接設(shè)備，用于將上述第二儲液器與壓力儲氣罐相連，上述連接設(shè)備由閥門設(shè)備組成，它使上述連接設(shè)備與上述第一壓力源相連且當(dāng)與上述第一壓力源設(shè)備相連時，切斷上述第二儲液器與上述壓力源的連接。插入設(shè)備，用于將上述毛細管的另一端插入上述樣品儲液器和第一儲液器。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的裝置，它還包括控制上述插入設(shè)備和上述閥門設(shè)備的計算機裝置，當(dāng)上述毛細管的另一端位于上述樣品儲液器中時，上述閥門設(shè)備允許上述第二儲液器與壓力儲氣罐連通一段時間以將上述樣品吸入上述毛細管。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的裝置，其中上述的計算機設(shè)備使得在上述樣品吸入毛細管后，毛細管的另一端轉(zhuǎn)換到第一儲液器。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的裝置，其中所述的計算機設(shè)備包括在上述毛細管的另一端變換到第一儲液器中后控制上述高壓電源的設(shè)備，以使得在毛細管內(nèi)產(chǎn)生電泳。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的裝置，它還包括控制上述毛細管溫度的溫度控制設(shè)備。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的裝置，其中所述的溫度控制設(shè)備是與計算機設(shè)備結(jié)合在一起的，上述計算機設(shè)備還包括控制上述溫度控制設(shè)備的設(shè)備。
7.進行毛細管電泳的方法，它包括預(yù)洗滌毛細管;用電泳溶劑均衡毛細管以調(diào)節(jié)毛細管的PH值直至毛細管內(nèi)壁上的電荷基本為零為止;將樣品引入毛細管;施加電場于毛細管內(nèi)以產(chǎn)生電泳;探測引入毛細管內(nèi)的樣品。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中毛細管的預(yù)洗滌是用酸完成的。
9.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中毛細管的預(yù)洗滌是用酸完成的。
10.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中在均衡中是將PH值調(diào)至低于4.0。
11.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中在均衡中是將PH值調(diào)至低于2.5。
12.進行毛細管電泳的方法，它包括將電泳溶劑引入毛細管;將樣品引入毛細管;對毛細管施加電場以產(chǎn)生電泳;在電泳期間，調(diào)整毛細管的溫度可改變PH值以在樣品中產(chǎn)生析出差;檢測引入毛細管的樣品。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中調(diào)整的步驟是電泳在第一溫度下工作第一段時間，然后在第二溫度下工作第二段時間。
14.根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中調(diào)整步驟為根據(jù)預(yù)選的溫度分布，在電泳期間改變毛細管的溫度。
15.引入樣品進入毛細管的方法，它包括將毛細管的一端放入存有上述樣品的樣品儲液器，在樣品儲液器中的上述樣品處于第一壓力下，上述毛細管的另一端位于上述第一壓力下的第二儲液器內(nèi);將上述第二儲液器與存放低于上述第一壓力的第二壓力氣體的壓力儲氣罐相連一段時間，以將一定量的上述樣品吸入上述毛細管。
全文摘要
這里公開了一個裝置，用于提供毛細管電泳，它包括借助于在毛細管的一端的真空自動將樣品引入毛細管的電子控制閥系統(tǒng)。這種吸入樣品的方法非常之精確且可再現(xiàn)并使其增量最小。此外，它使得整個毛細管電泳系統(tǒng)易于自動化。同時該裝置設(shè)有自動溫度控制系統(tǒng)，它使得電泳期間毛細管(即溶液/溶質(zhì)系統(tǒng))的溫度可控，從而更直接地控制pH值和電泳遷移率。在另一個實施例中，預(yù)洗滌并均衡毛細管以在毛細管壁上基本達到零電荷，因此基本上消除了電滲透流且極大地改善了分辨率。
文檔編號G01N27/447GK1036265SQ8910058
公開日1989年10月11日 申請日期1989年2月16日 優(yōu)先權(quán)日1988年2月16日
發(fā)明者亨克·H·勞爾, 保羅·D·格羅斯曼, 丹尼斯·E·米德 申請人:應(yīng)用生物系統(tǒng)公司