用于測(cè)定樣品中正辛醇含量的方法與流程

本發(fā)明涉及材料檢測(cè)和分析技術(shù)領(lǐng)域，具體地指一種用于測(cè)定樣品中正辛醇含量的方法。

背景技術(shù)：

正辛醇是一種無色液體，經(jīng)常用于萃取或反萃取過程中，以有利于提取相應(yīng)物質(zhì)，如h酸的反萃取過程和林可霉素的反萃取過程，在反萃取過后，需要檢測(cè)反萃液中的正辛醇含量，以檢查判斷產(chǎn)品的質(zhì)量。

現(xiàn)有技術(shù)通常直接采用氣相色譜法和液相色譜法對(duì)樣品中的正辛醇進(jìn)行分析檢測(cè)，其檢出限高，通常在5ppm以上，并且抗干擾性差，檢測(cè)結(jié)果易受其他雜質(zhì)的影響，測(cè)量結(jié)果的專屬性低，作為判定正辛醇?xì)埩舻膮?shù)結(jié)果而言，存在著較大的缺陷，進(jìn)一步地，會(huì)直接影響相關(guān)產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定性檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

實(shí)際上，為了降低檢測(cè)結(jié)果的檢出限，人們想到采用更精密的檢測(cè)儀器如質(zhì)譜來進(jìn)行檢測(cè)，為了提高其檢測(cè)專屬性，則需要對(duì)樣品進(jìn)行前處理以使得待測(cè)樣品在進(jìn)行檢測(cè)之前與雜質(zhì)盡量分離開來，如頂空進(jìn)樣、采用氣相色譜柱對(duì)樣品進(jìn)行分離等。

申請(qǐng)公布號(hào)為cn104237403a的中國(guó)發(fā)明專利公開了一種對(duì)雞肉香基進(jìn)行區(qū)分的方法，其采用頂空-氣相色譜-質(zhì)譜連用的方法對(duì)雞肉中揮發(fā)性的風(fēng)味物質(zhì)進(jìn)行采集和分析，能夠有效地對(duì)雞肉香基進(jìn)行區(qū)分。

目前的現(xiàn)有技術(shù)中，尚未發(fā)現(xiàn)采用此法對(duì)樣品中的正辛醇進(jìn)行檢測(cè)和分析的先例。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的就是要提供一種檢測(cè)方法，用于低檢出限、高專屬性地對(duì)樣品中的正辛醇進(jìn)行檢測(cè)。

在檢測(cè)之前，要進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：用溶劑配置濃度為1-1200ppm的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行檢測(cè)，建立峰高和/或峰面積與濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后檢測(cè)的時(shí)候，將峰高或峰面積代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中得到正辛醇的濃度。

用于測(cè)定樣品中正辛醇含量的方法，包括如下步驟：

①第一前處理步驟：將樣品置于容器中，采用靜態(tài)頂空法進(jìn)行第一步預(yù)處理；靜態(tài)頂空法的條件參數(shù)為：平衡溫度60~90℃，平衡時(shí)間30~60分鐘；

②第二前處理步驟：第一前處理所得樣品隨載氣進(jìn)入到氣相色譜柱內(nèi)，用氣相色譜進(jìn)行第二步預(yù)處理；氣相色譜的條件參數(shù)為：載氣為氦氣，載氣流量為1.0~2.0ml/min，；初始柱溫為50~100℃；進(jìn)樣口溫度為200~280℃；進(jìn)樣口分流比為20:1~40:1；氣相色譜柱為毛細(xì)管色譜柱，柱長(zhǎng)不小于30米；

③檢測(cè)步驟：樣品經(jīng)氣相色譜柱分離后導(dǎo)入質(zhì)譜內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)，質(zhì)譜的檢測(cè)條件參數(shù)為：電離能量50~70ev；離子源溫度200~250℃；四級(jí)桿溫度100~200℃；傳輸線溫度250~300℃。

靜態(tài)頂空主要用于測(cè)量可揮發(fā)的分析物以及難以進(jìn)行前處理的樣品，當(dāng)樣品在上方的氣相中達(dá)到相態(tài)的分布平衡后，抽取上方氣體進(jìn)行檢測(cè)。

氣相色譜柱利用樣品中各組分在氣相與固定液兩相間分配系數(shù)的差異而將各組分物質(zhì)分開，能夠在某個(gè)時(shí)間段內(nèi)對(duì)想要的物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。

質(zhì)譜的離子源通常采用ei源。

所述氣相色譜柱的長(zhǎng)度至少為30米。

作為上述技術(shù)方案的優(yōu)選，第一前處理步驟中，將樣品與溶劑混合置于容器中，所述溶劑為乙醇、甲醇、乙醇與水的混合溶液或甲醇與水的混合溶液中的任一種。

作為上述技術(shù)方案的優(yōu)選，所述溶劑為乙醇與水的混合溶液，其中乙醇與水的體積比為95:5~5:95。

作為上述技術(shù)方案的優(yōu)選，靜態(tài)頂空法的條件參數(shù)為：平衡溫度80℃，平衡時(shí)間40分鐘；進(jìn)樣一次，每次進(jìn)樣量為1ml。

作為上述技術(shù)方案的優(yōu)選，氣相色譜的條件參數(shù)為：載氣流量為1.0ml/min；初始柱溫為70℃；進(jìn)樣口溫度為200℃；進(jìn)樣口分流比為20:1。

作為優(yōu)選，氣相色譜柱采用db-5ms型或其他等效色譜柱。

作為上述技術(shù)方案的優(yōu)選，氣相色譜柱的柱溫采用程序升溫：保持初始柱溫1~5分鐘，然后以2~20℃/min的速度升溫至200~280℃，并保持2~5分鐘。

作為上述技術(shù)方案的優(yōu)選，氣相色譜柱的柱溫采用程序升溫：保持初始柱溫3分鐘，然后以10℃/min的速度升溫至200℃，并保持3分鐘。

作為上述技術(shù)方案的優(yōu)選，質(zhì)譜的檢測(cè)條件參數(shù)為：電離能量70ev；離子源溫度230℃；四級(jí)桿溫度150℃；傳輸線溫度280℃。

作為上述技術(shù)方案的優(yōu)選，質(zhì)譜采用sim模式進(jìn)行掃描。

作為上述技術(shù)方案的優(yōu)選，檢測(cè)步驟后還包括加標(biāo)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)：在待測(cè)樣品中加入正辛醇，重復(fù)步驟①、②、③進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)定正辛醇的含量，算出加標(biāo)回收率，以確定本方法是否精確可靠。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)及有益效果：

（1）本發(fā)明所述的正辛醇含量的檢測(cè)方法較為靈敏，檢出限低，可達(dá)0.05ppm；

（2）本發(fā)明所述的正辛醇含量的檢測(cè)方法抗干擾能力強(qiáng)，質(zhì)譜可以用sim模式對(duì)正辛醇進(jìn)行檢測(cè)，專屬性好；

（3）本發(fā)明所述的正辛醇含量的檢測(cè)方法適用范圍廣，可用于檢測(cè)復(fù)雜待測(cè)物中的正辛醇的含量。

附圖說明

圖1為h酸反萃液的sim總離子流圖；

圖2為h酸反萃液的scan總離子流圖；

圖3為h酸反萃液的在保留時(shí)間為9.334min的質(zhì)譜圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述：

實(shí)施例1：測(cè)定h酸反萃液中正辛醇含量的方法，包括如下步驟：

標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定：稱取1.0482g正辛醇，用乙醇稀釋定容至100ml，搖勻，制得濃度為10482ppm的儲(chǔ)備液，然后取10ml儲(chǔ)備液用乙醇稀釋定容至100ml，制得1048.2ppm的標(biāo)準(zhǔn)使用液，然后用乙醇分別稀釋100、25、15、10、2.5倍，得到濃度為10.482ppm、41.928ppm、69.880ppm、104.82ppm、419.28ppm的工作液，各取樣10ml于頂空瓶中進(jìn)行測(cè)試。測(cè)得各濃度下的正辛醇的峰面積，并以該峰面積對(duì)濃度作圖，擬合得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。

第一前處理步驟：取10mlh酸反萃液混合乙醇于20ml頂空瓶中，采用靜態(tài)頂空法進(jìn)行第一步預(yù)處理；靜態(tài)頂空法的條件參數(shù)為：平衡溫度80℃，平衡時(shí)間40分鐘，進(jìn)樣一次，進(jìn)樣量1ml；

第二前處理步驟：樣品由載氣帶入到氣相色譜柱內(nèi)，用氣相色譜進(jìn)行第二步預(yù)處理；氣相色譜的條件參數(shù)為：載氣為氦氣，載氣流量為1.0ml/min，；初始柱溫為70℃，保持3分鐘，升溫速率為10℃/min，升溫至200℃，保持3分鐘；進(jìn)樣口溫度為200℃；進(jìn)樣口分流比為20:1；氣相色譜柱為毛細(xì)管色譜柱，規(guī)格為30m×0.25mm×0.25μm；

檢測(cè)步驟：樣品經(jīng)氣相色譜柱分離后導(dǎo)入質(zhì)譜內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)，質(zhì)譜的檢測(cè)條件參數(shù)為：電離能量70ev；離子源溫度230℃；四級(jí)桿溫度150℃；傳輸線溫度280℃，采集模式為sim模式，溶劑延遲2min，定量離子為56，定性離子為55，70。

檢測(cè)時(shí)，一共取4個(gè)樣，然后進(jìn)行測(cè)定，得到正辛醇的峰面積分別為5361、5360、5361、5362，將平均值5361代入上述標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，得樣品中正辛醇的含量為147.0105ppm。待測(cè)樣品的sim總離子流圖（即ticsim圖）如圖1所示，此外，除溶劑延遲改為0min之外，其他測(cè)試條件均相同，做了待測(cè)樣品的全掃描，待測(cè)樣品的scan總離子流圖（即tic掃描圖）如圖2所示，保留時(shí)間為9.334min的質(zhì)譜圖如圖3所示，可見tic圖上保留時(shí)間為9.334min左右的峰為正辛醇。

加標(biāo)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)：加標(biāo)回收率測(cè)定：向100mlh酸反萃液中加入0.0123g正辛醇（即加入123ppm），得到待測(cè)樣品的加標(biāo)液，取10ml加標(biāo)液于20ml頂空瓶中，取4個(gè)樣進(jìn)行測(cè)定，儀器的測(cè)定條件與工作液測(cè)定條件相同，得到正辛醇的峰面積分別為10480、10482、10482、10481，將平均值10481.25代入上述標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，得加標(biāo)液中正辛醇的含量為269.9994ppm，計(jì)算得加標(biāo)回收率為99.99%，可見本發(fā)明的方法精確可靠。

實(shí)施例2：測(cè)定林可霉素反萃液中正辛醇含量的方法，包括如下步驟：

標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定同實(shí)施例1。

第一前處理步驟：取10ml林可霉素反萃液混合甲醇水溶液于20ml頂空瓶中，采用靜態(tài)頂空法進(jìn)行第一步預(yù)處理；靜態(tài)頂空法的條件參數(shù)為：平衡溫度60℃，平衡時(shí)間60分鐘，進(jìn)樣一次，進(jìn)樣量1ml；

第二前處理步驟：樣品由載氣帶入到氣相色譜柱內(nèi)，用氣相色譜進(jìn)行第二步預(yù)處理；氣相色譜的條件參數(shù)為：載氣為氦氣，載氣流量為2.0ml/min，；初始柱溫為50℃，保持5分鐘，升溫速率為2℃/min，升溫至200℃，保持5分鐘；進(jìn)樣口溫度為200℃；進(jìn)樣口分流比為40:1；氣相色譜柱為毛細(xì)管色譜柱，規(guī)格為30m×0.25mm×0.25μm；

檢測(cè)步驟：樣品經(jīng)氣相色譜柱分離后導(dǎo)入質(zhì)譜內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)，質(zhì)譜的檢測(cè)條件參數(shù)為：電離能量50ev；離子源溫度200℃；四級(jí)桿溫度200℃；傳輸線溫度250℃，采集模式為sim模式，溶劑延遲2min，定量離子為56，定性離子為55，70。

檢測(cè)時(shí)，一共取4個(gè)樣，然后進(jìn)行測(cè)定，得到正辛醇的峰面積分別為198、197、198、197，將平均值197.5代入上述標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，得樣品中正辛醇的含量為22.9827ppm。

加標(biāo)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)：加標(biāo)回收率測(cè)定：向100ml林可霉素反萃液中加入0.0241g正辛醇（即加入241ppm），得到待測(cè)樣品的加標(biāo)液，取10ml加標(biāo)液于20ml頂空瓶中，取4個(gè)樣進(jìn)行測(cè)定，儀器的測(cè)定條件與工作液測(cè)定條件相同，得到正辛醇的峰面積分別為10231、10231、10232、10232，將平均值10231.5代入上述標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，得加標(biāo)液中正辛醇的含量為264.0004ppm，計(jì)算得加標(biāo)回收率為100.01%，可見本發(fā)明的方法精確可靠。

實(shí)施例3：測(cè)定桃醛溶液中正辛醇含量的方法，包括如下步驟：

標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定同實(shí)施例1。

第一前處理步驟：取10ml桃醛溶液混合乙醇于20ml頂空瓶中，采用靜態(tài)頂空法進(jìn)行第一步預(yù)處理；靜態(tài)頂空法的條件參數(shù)為：平衡溫度90℃，平衡時(shí)間30分鐘，進(jìn)樣一次，進(jìn)樣量1ml；

第二前處理步驟：樣品由載氣帶入到氣相色譜柱內(nèi)，用氣相色譜進(jìn)行第二步預(yù)處理；氣相色譜的條件參數(shù)為：載氣為氦氣，載氣流量為2.0ml/min，；初始柱溫為100℃，保持1分鐘，升溫速率為20℃/min，升溫至280℃，保持2分鐘；進(jìn)樣口溫度為280℃；進(jìn)樣口分流比為20:1；氣相色譜柱為毛細(xì)管色譜柱，規(guī)格為30m×0.25mm×0.25μm；

檢測(cè)步驟：樣品經(jīng)氣相色譜柱分離后導(dǎo)入質(zhì)譜內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)，質(zhì)譜的檢測(cè)條件參數(shù)為：電離能量50ev；離子源溫度250℃；四級(jí)桿溫度100℃；傳輸線溫度300℃，采集模式為sim模式，溶劑延遲2min，定量離子為56，定性離子為55，70。

檢測(cè)時(shí)，一共取4個(gè)樣，然后進(jìn)行測(cè)定，得到正辛醇的峰面積分別為134、135、134、135，將平均值134.5代入上述標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，得樣品中正辛醇的含量為15.6515ppm。

加標(biāo)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)：加標(biāo)回收率測(cè)定：向100ml桃醛溶液中加入0.0097g正辛醇（即加入97ppm），得到待測(cè)樣品的加標(biāo)液，取10ml加標(biāo)液于20ml頂空瓶中，取4個(gè)樣進(jìn)行測(cè)定，儀器的測(cè)定條件與工作液測(cè)定條件相同，得到正辛醇的峰面積分別為973、972、974、973，將平均值973代入上述標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，得加標(biāo)液中正辛醇的含量為113.2262ppm，計(jì)算得加標(biāo)回收率為100.59%，可見本發(fā)明的方法精確可靠。

對(duì)比例1：高效液相色譜法測(cè)定h酸反萃液中正辛醇的含量，包括如下步驟：

標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定：稱取1.0531g正辛醇，用甲醇稀釋定容至100ml，搖勻，制得濃度為10531ppm的儲(chǔ)備液，然后取10ml儲(chǔ)備液用甲醇稀釋定容至100ml，制得1053.1ppm的標(biāo)準(zhǔn)使用液，然后用甲醇分別稀釋100、25、15、10、2.5倍，得到濃度為10.531ppm、42.124ppm、70.207ppm、105.31ppm、421.24ppm的工作液，各取樣2ml于液相樣品瓶中進(jìn)行測(cè)試。測(cè)得各濃度下的正辛醇的峰面積，并以該峰面積對(duì)濃度作圖，擬合得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。

樣品處理：取10mlh酸反萃液于小燒杯中，置于80℃水浴中蒸干，用1.0ml甲醇溶解，并用甲醇定容至10ml，搖勻待測(cè)；

樣品檢測(cè)：取2ml樣品于液相樣品瓶中進(jìn)行測(cè)試，檢測(cè)時(shí)，一共取4個(gè)樣，然后進(jìn)行測(cè)定，得到正辛醇的峰面積分別為10999、10230、11020、12009，將平均值11064.5代入上述標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，得樣品中正辛醇的含量為36.3386ppm。

加標(biāo)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)：加標(biāo)回收率測(cè)定：向100mlh酸反萃液中加入0.0254g正辛醇（即加入254ppm），得到待測(cè)樣品的加標(biāo)液，取10ml加標(biāo)液于于小燒杯中，置于80℃水浴中蒸干，用1.0ml甲醇溶解，并用甲醇定容至10ml，搖勻待測(cè)；取4個(gè)樣進(jìn)行測(cè)定，儀器的測(cè)定條件與工作液測(cè)定條件相同，得到正辛醇的峰面積分別為77920、77563、77998、77854，將平均值77833.75代入上述標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，得加標(biāo)液中正辛醇的含量為252.0085ppm，計(jì)算得加標(biāo)回收率為84.91%，可見采用本發(fā)明的方法測(cè)定正辛醇的含量較采用高效液相色譜法測(cè)定更加精確可靠。