一種銀杏葉藥材實(shí)時(shí)放行檢測(cè)方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種銀杏葉藥材實(shí)時(shí)放行檢測(cè)方法，通過(guò)采集不同產(chǎn)地和批次的銀杏葉藥材，測(cè)定銀杏葉中水分、浸出物及黃酮醇苷的含量，采集銀杏葉藥材粉末的近紅外光譜數(shù)據(jù)，建立銀杏葉各質(zhì)控指標(biāo)的定量分析模型和實(shí)時(shí)放行的定量標(biāo)準(zhǔn)，建立銀杏葉藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)的定性分析模型和實(shí)時(shí)放行的定性標(biāo)準(zhǔn)。本發(fā)明引入近紅外光譜技術(shù)作為銀杏葉藥材實(shí)時(shí)放行檢測(cè)方法，用于快速測(cè)定銀杏葉藥材中水分、浸出物和黃酮醇苷含量并定性判斷藥材質(zhì)量是否合格，根據(jù)定量、定性測(cè)定結(jié)果對(duì)銀杏葉藥材進(jìn)行實(shí)時(shí)放行檢測(cè)，同時(shí)符合定性、定量實(shí)時(shí)放行標(biāo)準(zhǔn)的藥材方可放行進(jìn)入后續(xù)生產(chǎn)工藝環(huán)節(jié)，從而保證銀杏葉制劑批次間的穩(wěn)定性和均一性，提高銀杏葉制劑的質(zhì)量水平。
【專利說(shuō)明】一種銀杏葉藥材實(shí)時(shí)放行檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于過(guò)程分析【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種銀杏葉藥材實(shí)時(shí)放行檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]銀杏葉為銀杏科植物銀杏(6b/?知如L.)的干燥綠葉，有效成分主要是黃酮醇苷類化合物和萜類內(nèi)酯類化合物，具有很高的保健和藥用價(jià)值，深受國(guó)內(nèi)外學(xué)者和企業(yè)家的重視。我國(guó)藥典中記載銀杏葉有斂肺、平喘、活血化瘀、止痛功能，用于肺虛咳喘、冠心病、心絞痛、高血脂等均具有良好的藥效。目前，銀杏葉是我國(guó)中藥制劑生產(chǎn)中常用的原料藥材之一,但其來(lái)源廣泛，品種繁多，同一品種藥材因其生長(zhǎng)條件、采收季節(jié)、加工方式及貯藏條件的不同而在質(zhì)量上存在差異。這些質(zhì)量參差不齊的銀杏葉原藥材如果直接進(jìn)入到制劑的提取、濃縮等后續(xù)生產(chǎn)過(guò)程，將影響中藥制劑成品的質(zhì)量。
[0003]2004年，美國(guó)FDA為提高生產(chǎn)效率和產(chǎn)品質(zhì)量，發(fā)布了過(guò)程分析技術(shù)(PAT)的工業(yè)指南——((PAT——?jiǎng)?chuàng)新藥物的研發(fā)，生產(chǎn)和質(zhì)量保證的框架》。在該指南中首次提出了“實(shí)時(shí)放行(RTR，Real-Time Release)”的概念，即根據(jù)工藝數(shù)據(jù)，評(píng)估和保證中間品和/或成品達(dá)到可接受質(zhì)量的能力。在2009年，ICH Q8中“RTR”被修訂為“RTRT”，即實(shí)時(shí)放行檢測(cè)(RTRT，Real-Time Release Testing)。其定義與FDA關(guān)于“RTR”的表述一致，即將被測(cè)量物料屬性和工藝控制等的數(shù)據(jù)進(jìn)行有效結(jié)合，據(jù)此評(píng)估和保證中間產(chǎn)品或最終成品質(zhì)量的能力。故針對(duì)銀杏葉原藥材的質(zhì)量特點(diǎn)，引入實(shí)時(shí)放行檢測(cè)，將符合實(shí)時(shí)放行標(biāo)準(zhǔn)的銀杏葉藥材放行進(jìn)入下一個(gè)生產(chǎn)工藝環(huán)節(jié)，從而提高銀杏葉制劑成品的質(zhì)量 。目前，拉曼光譜分析技術(shù)及近紅外光譜分析技術(shù)等具有良好應(yīng)用前景的過(guò)程分析技術(shù)，均可作為實(shí)時(shí)放行檢測(cè)方法。
[0004]近紅外光譜分析技術(shù)具有樣品處理簡(jiǎn)單、無(wú)損耗、分析快速、無(wú)需試劑消耗等特點(diǎn)，已經(jīng)陸續(xù)用于藥效成分的含量測(cè)定、制藥過(guò)程的在線檢測(cè)和監(jiān)控、天然藥物鑒別、中藥材的產(chǎn)地鑒別等。將近紅外光譜技術(shù)應(yīng)用于銀杏葉藥材的實(shí)時(shí)放行檢測(cè)，對(duì)銀杏葉藥材質(zhì)量在入庫(kù)和投料前進(jìn)行快速檢測(cè)，符合實(shí)時(shí)放行標(biāo)準(zhǔn)的銀杏葉藥材方能進(jìn)入后續(xù)提取、濃縮等生產(chǎn)工藝環(huán)節(jié)，從銀杏葉制劑生產(chǎn)的源頭上控制其質(zhì)量，從而保證最終產(chǎn)品質(zhì)量的安全性、穩(wěn)定性、均一性和有效性。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005]本發(fā)明目的是提供一種銀杏葉藥材實(shí)時(shí)放行檢測(cè)方法，可作為實(shí)時(shí)放行檢測(cè)的最小二乘法方法，應(yīng)用該方法能方便快速地從定量(水分含量、浸出物含量及黃酮醇苷含量)和定性兩個(gè)方面對(duì)銀杏葉藥材質(zhì)量進(jìn)行實(shí)時(shí)放行檢測(cè)，同時(shí)符合定量、定性實(shí)時(shí)放行標(biāo)準(zhǔn)的銀杏葉藥材方可放行進(jìn)入后續(xù)生產(chǎn)工藝環(huán)節(jié)，從而保證中藥制劑成品質(zhì)量的均一性、穩(wěn)定性和安全性。
[0006]本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):
(I)采集銀杏葉藥材:采集不同產(chǎn)地的銀杏葉藥材樣本，藥材經(jīng)粉碎后，過(guò)80目篩，得到粒度較均勻的銀杏葉藥材粉末。
[0007](2)測(cè)定銀杏葉藥材質(zhì)控指標(biāo):選取水分含量、浸出物含量、黃酮醇苷(黃酮醇苷含量以槲皮素、山奈酚和異鼠李素的含量折算)含量作為銀杏葉藥材的關(guān)鍵質(zhì)控指標(biāo)；水分含量采用烘干稱重法測(cè)定，浸出物含量采用熱浸法測(cè)定，水分含量和浸出物含量測(cè)定方法參照2010版《中國(guó)藥典》中對(duì)銀杏葉的相關(guān)測(cè)定方法；黃酮醇苷含量采用高效液相色譜法測(cè)定。
[0008]黃酮醇苷含量采用高效液相色譜測(cè)定方法:取銀杏葉藥材粉末約I g，精密稱定，精密加25 mL的70%乙醇，超聲提取I h，放冷，用70% (v/v)的乙醇補(bǔ)足失重，精密加6 mL的25% (v/v)鹽酸，回流酸解I h，溫度為90 °C，放冷，用70%的乙醇補(bǔ)足失重。酸解液置1.5 mL的離心管中離心10 min，轉(zhuǎn)速為13000 r/min，取上清液，既得。液相色譜條件:色譜柱:Agilent SB-C18 分析柱(4.6X250 mm, 5 μ m);流動(dòng)相:甲醇-0.4% 磷酸溶液(50:50，v/v);檢測(cè)波長(zhǎng)360 nm,流速為I mL/min,進(jìn)樣量為10 μ L。理論塔板數(shù)按槲皮素算應(yīng)不低于2500 ；
總黃酮醇苷含量=(槲皮素含量+山奈酚含量+異鼠李素含量)Χ2.51。
[0009](3)采集銀杏葉藥材近紅外光譜數(shù)據(jù)
精密稱取銀杏葉藥材粉末2 g，置于稱量瓶中，保持粉末表面平整，采用漫反射法采集近紅外光譜，以空氣為參比，掃描次數(shù)為32，分辨率為8 cnT1，掃描光譜范圍為4000-10000cm 1O
[0010](4)建立銀杏葉藥材各質(zhì)控指標(biāo)的近紅外定量模型和實(shí)時(shí)放行的定量標(biāo)準(zhǔn)
應(yīng)用化學(xué)計(jì)量學(xué)軟件將所得的近紅外光譜信息與參比方法所測(cè)得的標(biāo)準(zhǔn)值進(jìn)行關(guān)聯(lián)，采用偏最小二乘(PLS)法建立近紅外光譜與質(zhì)控指標(biāo)之間的定量校準(zhǔn)模型；根據(jù)183個(gè)銀杏葉樣品的近紅外光譜的馬氏距離及杠桿值大小剔除異常光譜，并采用一階導(dǎo)數(shù)、Savitzky-Golay平滑、Norris平滑、標(biāo)準(zhǔn)正則變換及多元散射校正(MSC)對(duì)所得光譜預(yù)處理，同時(shí)根據(jù)相關(guān)系數(shù)值和光譜標(biāo)準(zhǔn)偏差值的大小選擇合適的波段，最后采用留一交互驗(yàn)證法比較不同預(yù)處理方法和波段對(duì)近紅外模型性能的影響，從而確定各質(zhì)控指標(biāo)最優(yōu)的定量模型。
[0011]最終確定各質(zhì)控指標(biāo)的最優(yōu)建模條件:水分含量的模型采用一階導(dǎo)數(shù)和MSC預(yù)處理，建模波段為4246.9-7501.9 cnT1 ;浸出物含量模型采用一階導(dǎo)數(shù)、MSC和Norris平滑預(yù)處理，建模波段為5150.0-7501.9 cnT1 ;黃酮醇苷含量模型采用一階導(dǎo)數(shù)、MSC和Norris平滑預(yù)處理，建模波段為4246.6-9403.4 cm—1。
[0012]所建立的校正模型采用相關(guān)系數(shù)(R)、校正集均方差(RMSEC)和交叉驗(yàn)證均方根(RMSECV)三個(gè)參數(shù)考察模型性能，同時(shí)采用預(yù)測(cè)均方差(RMSEP)、相對(duì)偏差(RSEP)來(lái)評(píng)價(jià)模型對(duì)未知樣品的預(yù)測(cè)能力，當(dāng)R值接近于I，RMSEC和RMSEP值較小而且近時(shí)，評(píng)價(jià)模型穩(wěn)定性好、預(yù)測(cè)精準(zhǔn)度高，當(dāng)RSEP值小于10%時(shí)評(píng)價(jià)模型具有較好的預(yù)測(cè)能力，能夠滿足銀杏葉藥材質(zhì)量實(shí)時(shí)放行檢測(cè)的要求。
[0013]使用上述所建立的3個(gè)近紅外定量模型來(lái)測(cè)定銀杏葉藥材中的3個(gè)質(zhì)控指標(biāo)的含量，當(dāng)未知銀杏葉藥材中水分含量< 12%，浸出物含量> 25%，黃酮醇苷含量> 0.4%時(shí)，判斷銀杏葉藥材的質(zhì)控指標(biāo)含量符合質(zhì)量要求，方可放行進(jìn)入原藥材質(zhì)量近紅外定性判別環(huán)節(jié)；所述％均指質(zhì)量％:指水分質(zhì)量、浸出物質(zhì)量及黃酮醇苷質(zhì)量占干燥藥材質(zhì)量的百分比。[0014](5)建立銀杏葉藥材質(zhì)量的近紅外定性模型和實(shí)時(shí)放行的定性標(biāo)準(zhǔn)
采用判別分析(Discriminant Analysis)方法定性判別銀杏葉藥材質(zhì)量是否合格。采用MSC和Savitzky- Golay平滑預(yù)處理銀杏葉藥材的近紅外光譜數(shù)據(jù)，選擇4500-5950 cnT1為建模波段，主成分?jǐn)?shù)為10，通過(guò)馬氏距離計(jì)算未知樣品到標(biāo)準(zhǔn)樣品光譜中心的距離(MDh)和到不合格樣品光譜中心的距離(MDn)。馬氏距離值越小且越接近零時(shí)表示未知樣品與該類樣品的匹配程度越接近，當(dāng)樣品的MDh < 1--且1?11 < 2時(shí)，判斷銀杏葉藥材質(zhì)量合格，可放行進(jìn)入原藥材投料及提取等后續(xù)生產(chǎn)工藝環(huán)節(jié)。
[0015]銀杏葉藥材分別經(jīng)過(guò)近紅外定量模型和定性模型的分析，其質(zhì)量同時(shí)符合定量、定性的實(shí)時(shí)放行標(biāo)準(zhǔn)，方可放行進(jìn)入原藥材投料及提取等后續(xù)生產(chǎn)工藝環(huán)節(jié)。
[0016]本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供上述方法在銀杏葉藥材實(shí)時(shí)放行檢測(cè)中應(yīng)用。
[0017]本發(fā)明對(duì)銀杏葉藥材進(jìn)行實(shí)時(shí)放行檢測(cè)，將近紅外光譜分析技術(shù)引入到銀杏葉藥材的實(shí)時(shí)放行檢測(cè)過(guò)程中，實(shí)現(xiàn)對(duì)銀杏葉藥材各質(zhì)控指標(biāo)(水分含量、浸出物含量及黃酮醇苷含量)的快速測(cè)定和藥材質(zhì)量是否合格的定性判斷，同時(shí)符合定量、定性實(shí)時(shí)放行標(biāo)準(zhǔn)的銀杏葉藥材方可進(jìn)入中藥制劑的后續(xù)生產(chǎn)工藝環(huán)節(jié)，有利于提高銀杏葉制劑的質(zhì)量控制水平，保正銀杏葉制劑成品質(zhì)量的安全、有效。
【專利附圖】
【附圖說(shuō)明】
[0018]附圖1是銀杏葉藥材粉末水分含量實(shí)測(cè)值與近紅外預(yù)測(cè)值的相關(guān)圖。
[0019]附圖2是銀杏葉藥材粉末浸出物含量實(shí)測(cè)值與近紅外預(yù)測(cè)值的相關(guān)圖。
[0020]附圖3是銀杏葉藥材粉末黃酮醇苷含量實(shí)測(cè)值與近紅外預(yù)測(cè)值的相關(guān)圖。
[0021]附圖4是銀杏葉藥材粉末水分含量實(shí)測(cè)值與近紅外預(yù)測(cè)值的趨勢(shì)對(duì)照?qǐng)D。
[0022]附圖5是銀杏葉藥材粉末浸出物含量實(shí)測(cè)值與近紅外預(yù)測(cè)值的趨勢(shì)對(duì)照?qǐng)D。
[0023]附圖6是銀杏葉藥材粉末黃酮醇苷含量實(shí)測(cè)值與近紅外預(yù)測(cè)值的趨勢(shì)對(duì)照?qǐng)D。
[0024]附圖7是銀杏葉藥材到合格樣品光譜的馬氏距離和到不合格樣品的馬氏距離的分布圖。
【具體實(shí)施方式】
[0025]本發(fā)明結(jié)合附圖和實(shí)施例作進(jìn)一步的說(shuō)明。
[0026]實(shí)施例1:銀杏葉藥材質(zhì)量定量的實(shí)時(shí)放行檢測(cè)方法 (O銀杏葉藥材近紅外光譜數(shù)據(jù)采集
將183個(gè)銀杏葉藥材經(jīng)粉碎后，過(guò)80目篩，得到粒度較均勻的銀杏葉藥材粉末；精密稱取銀杏葉藥材粉末2 g，置于稱量瓶中，保持粉末表面平整，采用漫反射法采集近紅外光譜，以空氣為參比，掃描次數(shù)為32，分辨率為8 cnT1，掃描光譜范圍為4000-10000 cnT1，重復(fù)采集183個(gè)銀杏葉藥材的光譜。
[0027](2)銀杏葉藥材各質(zhì)控指標(biāo) 的測(cè)定
①水分測(cè)定方法:銀杏葉藥材的水分測(cè)定根據(jù)藥典的烘干稱重法，取烘干至恒重(連續(xù)兩次稱重差異小于5 mg)的扁形瓶(Xtl),取2 g銀杏葉藥材，精密稱重(X1),置真空烘箱中105 °C*5 h,取出置干燥器中冷卻30 min,稱重,再置真空烘箱中烘I h,稱重(X2),重量差異5 mg以上者繼續(xù)置烘箱中烘，直至差異小于5 mg。根據(jù)減失的重量，計(jì)算供試品中含水量(％x
[0028]水分含量(％)= (X1 - X2 + X0) /X1X 100。
[0029]②浸出物測(cè)定方法:取樣品lg，精密稱定(X1)，置50 mL的錐形瓶中，精密加稀乙醇25 mL，密塞，稱定重量，靜置I h后超聲提取I h。放冷后，再稱定重量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，置于15 mL離心管中離心30 min，轉(zhuǎn)速為3800 r/min，精密量取上清液10mL，置已干燥至恒重的扁形瓶中(Xtl),在水浴上蒸干后，于105 °C干燥3 h，置干燥器中冷卻30 min,迅速精密稱定重量(X2)。以干燥品計(jì)算供試品中浸出物的含量(％)。
[0030]浸出物的含量(％) = (X2 — X0) X2.5/%X 100。
[0031]③黃酮醇苷采用高效液相色譜測(cè)定:a.預(yù)處理方法為:取銀杏葉藥材粉末約Ig，精密稱定，精密加25 ml的70% (v/v)乙醇，超聲提取I h，放冷，用70% (v/v)的乙醇補(bǔ)足失重，精密加6 mL的25% (v/v)鹽酸，回流酸解I h，溫度為90 °C，放冷，用70% (v/v)的乙醇補(bǔ)足失重。酸解液置1.5 mL的離心管中離心10 min，轉(zhuǎn)速為13000 r/min，取上清液，既得；b.液相色譜條件:色譜柱:Agilent SB-C18分析柱(4.6 X 250 mm, 5 μπι);流動(dòng)相:甲醇-0.4%磷酸溶液(50:50，v/v);檢測(cè)波長(zhǎng)360 nm，流速為I mL/min，進(jìn)樣量為10 μ L。理論塔板數(shù)按槲皮素算應(yīng)不低于2500 ；
總黃酮醇苷含量=(槲皮素含量+山奈酚含量+異鼠李素含量)Χ2.51。
[0032](3)建立銀杏葉藥材各質(zhì)控指標(biāo)的定量分析模型
運(yùn)用偏最小二乘(PLS)法建立樣品中3個(gè)指標(biāo)的近紅外定量分析模型。模型建立前對(duì)校正集光譜進(jìn)行異常點(diǎn)判別，以提高模型精度，同時(shí)原始光譜在平滑、微分等適宜的光譜預(yù)處理方法下來(lái)消除儀器背景或漂移對(duì)信號(hào)的影響，選擇合適的波段提取有效信息，減少計(jì)算量，縮短建模時(shí)間。選擇合適的建模波段，以交互驗(yàn)證誤差均方根(RMSECV)為指標(biāo)，運(yùn)用留一交互驗(yàn)證法確定最佳PLS主因子數(shù)。
[0033]剔除異常樣本后，隨機(jī)選擇163個(gè)樣本作為校正集，剩余15個(gè)樣本作為驗(yàn)證集用于預(yù)測(cè)。模型對(duì)校正集樣本和驗(yàn)證集樣本的預(yù)測(cè)誤差分別用校正集預(yù)測(cè)誤差均方根(RMSEC)和驗(yàn)證集預(yù)測(cè)誤差均方根(RMSEP)來(lái)考察。當(dāng)模型相關(guān)系數(shù)R越接近1，說(shuō)明模型越穩(wěn)定，分析準(zhǔn)確度越高。當(dāng)RMSEC和RMSEP值越小且彼此越接近時(shí)，模型具有較高的預(yù)測(cè)能力。同時(shí)用相對(duì)偏差(RSEP)來(lái)評(píng)價(jià)模型預(yù)測(cè)的準(zhǔn)確度，當(dāng)RSEP值小于10%時(shí)評(píng)價(jià)模型具有較好的預(yù)測(cè)能力，能夠滿足銀杏葉藥材質(zhì)量實(shí)時(shí)放行檢測(cè)的要求。
[0034]最終確定各質(zhì)控指標(biāo)的最優(yōu)建模條件:水分含量的模型采用一階導(dǎo)數(shù)和MSC預(yù)處理，建模波段為4246.9-7501.9cm ;浸出物含量模型采用一階導(dǎo)數(shù)、MSC和Norris平滑預(yù)處理，建模波段為5150.0-7501.9 cnT1 ;黃酮醇苷含量模型采用一階導(dǎo)數(shù)、MSC和Norris平滑預(yù)處理，建模波段為4246.6-9403.4 cm—1 ；
表I為3個(gè)指標(biāo)的近紅外模型的建模結(jié)果比較，從表I可以看出，3個(gè)指標(biāo)的近紅外模型的線性良好，相關(guān)系數(shù)均在0.94以上，RMSEC值在0.97以下，RMSECV值在1.5以下，說(shuō)明所建立的近紅外定量校正模型效果較好。水分含量的實(shí)測(cè)值和預(yù)測(cè)值之間的相關(guān)圖見(jiàn)附圖1，浸出物含量的實(shí)測(cè)值和預(yù)測(cè)值之間的相關(guān)圖見(jiàn)附圖2，黃酮醇苷含量的實(shí)測(cè)值和預(yù)測(cè)值之間的相關(guān)圖見(jiàn)附圖3。
【權(quán)利要求】
1.一種銀杏葉藥材實(shí)時(shí)放行檢測(cè)方法，其特征在于，通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn): (1)采集銀杏葉藥材:采集不同產(chǎn)地的銀杏葉藥材樣本，經(jīng)粉碎后，過(guò)80目篩，得到粒度較均勻的銀杏葉藥材粉末； (2)測(cè)定銀杏葉藥材質(zhì)控指標(biāo):選取水分含量、浸出物含量、黃酮醇苷含量作為銀杏葉藥材的關(guān)鍵質(zhì)控指標(biāo)；水分含量采用烘干稱重法測(cè)定，浸出物含量采用熱浸法測(cè)定，均參照2010版《中國(guó)藥典》中對(duì)銀杏葉的相關(guān)測(cè)定方法；黃酮醇苷含量采用高效液相色譜法測(cè)定，其中液相色譜條件:色譜柱=Agilent SB-C18分析柱，4.6X250 mm, 5 4 111;流動(dòng)相:甲醇-0.4%磷酸溶液50:50 ;檢測(cè)波長(zhǎng)360 nm，流速為I mL/min，進(jìn)樣量為10 μ L ; (3)采集銀杏葉藥材近紅外光譜數(shù)據(jù):稱取銀杏葉藥材粉末，置于稱量瓶中，保持粉末表面平整，采用漫反射法采集近紅外光譜，以空氣為參比，掃描次數(shù)為32，分辨率為8 cm-1,掃描光譜范圍為4000-10000 CnT1 ； (4)建立銀杏葉藥材各質(zhì)控指標(biāo)的近紅外定量模型和實(shí)時(shí)放行的定量標(biāo)準(zhǔn):應(yīng)用化學(xué)計(jì)量學(xué)軟件將所得的近紅外光譜信息與參比方法所測(cè)得的標(biāo)準(zhǔn)值進(jìn)行關(guān)聯(lián)，采用偏最小二乘法建立近紅外光譜與質(zhì)控指標(biāo)之間的定量校準(zhǔn)模型； (5)建立銀杏葉藥材質(zhì)量的近紅外定性模型和實(shí)時(shí)放行的定性標(biāo)準(zhǔn):采用MSC和Savitzky- Golay平滑預(yù)處理銀杏葉藥材的近紅外光譜數(shù)據(jù)，選擇4500-5950 cnT1為建模波段，主成分?jǐn)?shù)為10，通過(guò)馬氏距離計(jì)算未知樣品到標(biāo)準(zhǔn)樣品光譜中心的距離(MDh)和到不合格樣品光譜中心的距離(MDn)，馬氏距離值越小且越接近零時(shí)表示未知樣品與該類樣品的匹配程度越接近，當(dāng)樣品的MDh < MDn且MDh < 2時(shí)，判斷銀杏葉藥材質(zhì)量合格，放行進(jìn)入原藥材投料及提取等后續(xù)生產(chǎn)工藝環(huán)節(jié)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種銀杏葉藥材實(shí)時(shí)放行檢測(cè)方法，其特征在于，步驟(2)所述黃酮醇苷含量采用高效液相色譜測(cè)定方法:稱定銀杏葉藥材粉末，加25 mL的70%乙醇，超聲提取I h，放冷，用70%的乙醇補(bǔ)足失重，精密加6 mL的25%鹽酸，回流酸解I h，溫度為90 °C，放冷，用70%的乙醇補(bǔ)足失重，酸解液置1.5 mL的離心管中離心10 min，轉(zhuǎn)速為13000 r/min，取上清液，既得；液相色譜條件:色譜柱:Agilent SB-C1Av析柱，4.6X250mm, 5 μ m ;流動(dòng)相:甲醇:0.4%磷酸溶液為50:50 ;檢測(cè)波長(zhǎng)360 nm,流速為I mL/min,進(jìn)樣量為10 μ L，理論塔板數(shù)按槲皮素算應(yīng)不低于2500，黃酮醇苷以槲皮素、山奈酚和異鼠李素的含量折算，總黃酮醇苷含量=(槲皮素含量+山奈酚含量+異鼠李素含量)Χ2.51。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種銀杏葉藥材實(shí)時(shí)放行檢測(cè)方法，其特征在于，步驟(4)所建水分含量的模型采用一階導(dǎo)數(shù)和MSC預(yù)處理，建模波段為4246.9-7501.9 cnT1 ;浸出物含量模型采用一階導(dǎo)數(shù)、MSC和Norris平滑預(yù)處理，建模波段為5150.0-7501.9 cnT1 ;黃酮醇苷含量模型采用一階導(dǎo)數(shù)、MSC和Norris平滑預(yù)處理，建模波段為4246.6-9403.4 cm—1 ； 當(dāng)未知銀杏葉藥材中水分含量< 12%，浸出物含量> 25%，黃酮醇苷含量> 0.4%時(shí)，判斷銀杏葉藥材的質(zhì)控指標(biāo)含量符合質(zhì)量要求，放行進(jìn)入原藥材質(zhì)量近紅外定性判別環(huán)節(jié)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種銀杏葉藥材實(shí)時(shí)放行檢測(cè)方法在銀杏葉藥材檢測(cè)中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK103439288SQ201310372406
【公開(kāi)日】2013年12月11日 申請(qǐng)日期:2013年8月24日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月24日
【發(fā)明者】金葉, 劉雪松, 陳勇, 杜文俊, 耿姝, 吳永江 申請(qǐng)人:浙江大學(xué)