專利名稱：：皮革中農(nóng)藥殘留量的測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于分析化學(xué)領(lǐng)域，涉及氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定皮革中農(nóng)藥殘留量的方法。具體涉及通過正己烷和乙腈超聲提取皮革樣品，用液液萃取、凝膠滲透色譜(GPC)、吸附劑層析柱、固相萃取柱(SPE柱)分離凈化樣品提取液中的農(nóng)藥，氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定其含量。
背景技術(shù)：
：農(nóng)藥廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和工業(yè)生產(chǎn)中，在發(fā)揮其殺蟲殺菌滅害作用的同時(shí)，農(nóng)藥也成為了重要的污染物之一。日常生活中食品及生活用品中殘留的農(nóng)藥通過消化道、呼吸道及皮膚接觸等方式侵入人體，從而對(duì)人們的健康造成損害。不同的農(nóng)藥對(duì)人體有不同的危害，有機(jī)氯類農(nóng)藥易產(chǎn)生慢性中毒；有機(jī)磷及氨基甲酸酯類農(nóng)藥易產(chǎn)生急性中毒，有時(shí)嚴(yán)重危及生命。隨著人們對(duì)農(nóng)藥污染的認(rèn)識(shí)和重視，對(duì)農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)需求日益增長，其檢測(cè)對(duì)象涉及食品、農(nóng)產(chǎn)品、紡織品、中草藥等。皮革生產(chǎn)中，農(nóng)藥作為殺菌防蟲劑使用。而殘留于皮革制品中的農(nóng)藥，通過皮膚接觸，對(duì)人體造成傷害，這種情況已經(jīng)引起一些大型服裝生產(chǎn)廠商的觀注，并提出了相應(yīng)的檢測(cè)需求。然而，目前對(duì)于皮革中的農(nóng)藥殘留量檢測(cè)還沒有相對(duì)完善的方法，更沒有標(biāo)準(zhǔn)方法可循。經(jīng)過反復(fù)實(shí)驗(yàn)，本發(fā)明確定了針對(duì)于皮革中殘留的農(nóng)藥的氣相色譜-質(zhì)譜檢測(cè)方法，填補(bǔ)了農(nóng)藥殘留量檢測(cè)領(lǐng)域的這一空白。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了一種氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定皮革中農(nóng)藥殘留量的方法。皮革樣品中殘留的農(nóng)藥經(jīng)正己烷和乙腈超聲提取，提取液經(jīng)多種凈化方法凈化分離后使用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀對(duì)農(nóng)藥含量進(jìn)行檢測(cè)。l.提取與凈化A.提取a.稱取混合均勻的2g-10g皮革樣品于150mL燒杯中；b.加入30mL-100mLTH己垸，充分混勻后，于30。C-60。C水浴中超聲50min-100min，提取液經(jīng)濾紙濾入250mL分液漏斗中；c.樣品殘?jiān)屑尤?0mL-100mL乙腈，于30。C-60。C水浴中超聲50min-100min，合并乙腈相于分液漏斗中；B.凈化a.液液萃取分液漏斗在振蕩器上振蕩20min-50min，將乙腈層轉(zhuǎn)移至平底燒瓶中，正己烷相再分別用20mL-50mL乙腈振蕩提取2_4次，每次振蕩30min-50min，合并乙腈相于平底燒瓶中；合并的乙腈提取液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮近干，加入5mL-15mL的環(huán)己烷和乙酸乙酯(1:1)溶液，再次濃縮近干后用環(huán)己烷和乙酸乙酯(1:1)溶液定容至10mL。b.GPC凈化將定容至10mL的樣品提取液經(jīng)0.45ym針式過濾器濾入GPC進(jìn)樣小瓶，使用Bio-Beads,S-X3(200-400目)的色譜柱進(jìn)行GPC凈化。收集液轉(zhuǎn)移入平底燒瓶中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，加入10mL正己垸，再次旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干；GPC凈化條件采集時(shí)間20min-32min4進(jìn)樣體積5mL流動(dòng)相環(huán)己垸和乙酸乙酯(1:1)溶液流速5mL/minc.層析柱凈化層析柱的制備采用濕法填裝法，用含0.2%-0.8%丙酮的正己烷溶液在玻璃層析柱中加入0.5cm-1.5cm高的無水硫酸鈉，10g-20g弗羅里硅土，10g-20g硅膠，頂端再加入約0.5cm-l.5cm高的無水硫酸鈉，敲實(shí)，用含0.2%-0.8%丙酮的正己烷溶液10mL-30tnL活化柱子，備用。上樣與淋洗用含0.2%-0.8%丙酮的正己烷溶液約5mL-10mL洗滌b中的平底燒瓶，將溶液轉(zhuǎn)移入制備好的層祈柱中，用含0.2%-0.8%丙酮的正己烷溶液20mL-30mL淋洗，棄去淋洗液。再加入含10%-20%丙酮的正己烷溶液100mL-150mL淋洗層析柱，收集淋洗液于平底燒瓶中，濃縮至近干；d.SPE柱凈化用5mL-10mL的含20%_30%丙酮的正己烷溶液活化石墨化碳小柱，將經(jīng)層析柱凈化并已濃縮的樣品溶液轉(zhuǎn)移入小柱，用5mL-15mL的含20%-30%丙酮的正己垸淋洗小柱，收集淋洗液，濃縮近干后加入5mL-10mL正己烷再濃縮至近干，用正己烷定容至lmL，用GC.-MS進(jìn)行分析。2.設(shè)定GC-MS儀器參數(shù)A.GC條件氣相色譜儀ThermoDSQII色譜柱HP-5MS毛細(xì)管柱0.25mmX30mX0.25ym進(jìn)樣口溫度250°C-300°C傳輸線溫度25CTC-30(TC載氣流速1.OmL/min，恒流進(jìn)樣模式不分流進(jìn)樣進(jìn)樣體積1UL程序升溫初始溫度為IO(TC，保持2rain后以8°C/min的升溫速度升至250°C。250'C保持5min后，以15°C/min的速度升至320。C，保持5min。B.質(zhì)譜條件檢測(cè)器溫度250°C-300°C離子源溫度250°C-300°C電離方式EI采集方式S頂模式本發(fā)明針對(duì)皮革樣品中的油脂、染料和各種助劑提供了多種凈化分離的的方法，其特征在于液液萃取、GPC、吸附劑層析柱、SPE凈化柱凈化分離方法聯(lián)合使用，去除皮革樣品中的油脂、染料及多種皮革處理助劑。本發(fā)明采用氣相色譜-質(zhì)譜連用法，應(yīng)用優(yōu)化了的升溫程序?qū)崿F(xiàn)了雜質(zhì)和待測(cè)物的分離，有效測(cè)定了皮革樣品中殘留的農(nóng)藥。具體實(shí)施例實(shí)施例一豬皮樣品中農(nóng)藥的檢測(cè)51.提取與凈化A.提取a.稱取混合均勻的5.0g樣品于150mL燒杯中；b.加入50mL正己烷，充分混勻后，于5(TC水浴中超聲60min，提取液經(jīng)濾紙濾入250mL分液漏斗中；c.樣品殘?jiān)屑尤?0mL乙腈，于5(TC水浴中超聲60min，合并乙腈相于分液漏斗中；B.凈化a.液液萃取分液漏斗在振蕩器上振蕩30min，將乙腈層轉(zhuǎn)移至平底燒瓶中，正己垸相再分別用30mL乙腈振蕩提取2次，每次振蕩40min，合并乙腈相并合并入平底燒瓶中；合并的乙腈提取液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮近干，加入10mL的環(huán)己垸和乙酸乙酯(1:1)溶液，濃縮近干后用環(huán)己烷和乙酸乙酯(1:1)溶液定容至10mL。b.GPC凈化將定容至10mL的樣品提取液經(jīng)0.45um針式過濾器濾入GPC進(jìn)樣小瓶，進(jìn)行GPC凈化。收集液轉(zhuǎn)移入平底燒瓶中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，加入10mL正己垸，蒸發(fā)至近干；GPC凈化條件采集時(shí)間20min-32min進(jìn)樣體積5mL流動(dòng)相環(huán)己烷和乙酸乙酯(1:1)溶液流速5mlVminc.層析柱凈化層析柱的制備采用濕裝的方法，用含0.5%丙酮的正己烷溶液在玻璃層析柱中加入lcm高的無水硫酸鈉，加入10g弗羅里硅土，加入10g硅膠，頂端再加入lcm高的無水硫酸鈉，敲實(shí)，用含0.5%丙酮的TH己烷溶液20mL活化柱子，備用。上樣與淋洗用含0.5。/。丙酮的正己垸溶液約5mL洗滌平底燒瓶，將溶液轉(zhuǎn)移入制備好的層析柱中，用含0.5%丙酮的正己烷溶液25mL淋洗，棄去淋洗液。再加入含15%丙酮的正己烷溶液110mL淋洗層析柱，收集淋洗液于平底燒瓶中，濃縮至近干；d.SPE柱凈化用5mL含25%丙酮的正己烷溶液活化石墨化碳小柱，將經(jīng)層析柱凈化并已濃縮的樣品溶液轉(zhuǎn)移入小柱，用10mL含25%丙酮的正己烷淋洗小柱，收集淋洗液，濃縮近干后加入10mLiH己烷再濃縮至近干，用正己垸定容至lmL，用GC-MS進(jìn)行分析。2.設(shè)定GC-MS儀器參數(shù)A.GC條件氣相色譜儀ThermoDSQII色譜柱HP-5MS毛細(xì)管柱0.25國X30mX0.25ym進(jìn)樣口溫度250°C傳輸線溫度280°C載氣流速1.0mL/min，恒流進(jìn)樣模式不分流進(jìn)進(jìn)樣體積luL程序升溫升溫速度(°C/min)溫度rc)保持時(shí)間(min)100282505153205B.質(zhì)譜條件檢測(cè)器溫度300°C離子源溫度250°C電離方式EI采集方式S頂模式C.有機(jī)磷農(nóng)藥的特征離子:<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>3.定性和定量A.定性經(jīng)樣品峰和標(biāo)準(zhǔn)品峰的保留時(shí)間相比較，樣品峰質(zhì)譜圖和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)譜圖相比較，確定化合物。B.定量采用標(biāo)準(zhǔn)曲線外標(biāo)法定量。實(shí)施例二牛皮樣品中農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)1.提取與凈化A.提取a.稱取混合均勻的3.0g樣品于150mL燒杯中；b.加入40mL正己烷，充分混勻后，于60'C水浴中超聲80min，提取液經(jīng)濾紙濾入250mL分液漏斗中；c.樣品殘?jiān)屑尤?0mL乙腈，于6(TC水浴中超聲80min，合并乙腈相于分液漏斗中；B.凈化a.液液萃取分液漏斗在振蕩器上振蕩40min，將乙腈層轉(zhuǎn)移至平底燒瓶中，正己烷相再分別用30mL乙腈振蕩提取3次，每次振蕩30min，合并乙腈相并合并入平底燒瓶中；合并的乙腈提取液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮近干，加入8mL的環(huán)己垸和乙酸乙酯(l:l)溶液，濃縮近干后用環(huán)己烷和乙酸乙酯(1:1)溶液定容至10mL。b.GPC凈化將定容至10mL的樣品提取液經(jīng)0.45um針式過濾器濾入GPC進(jìn)樣小瓶，進(jìn)行GPC凈化。收集液轉(zhuǎn)移入平底燒瓶屮，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，加入lOmL正己烷，蒸發(fā)至近干；GPC凈化條件采集時(shí)間20min-32min進(jìn)樣體積5mL流動(dòng)相環(huán)己烷和乙酸乙酯(1:1)溶液流速5mlVminc.層析柱凈化層析柱的制備采用濕裝的方法，用含0.8%丙酮的iH己垸溶液在玻璃層析柱中加入1cm高的無水硫酸鈉，加入10克弗羅里硅土，加入10克硅膠，頂端再加入lcm高的無水硫酸鈉，敲實(shí)，用含0.8%丙酮的正己垸溶液18mL活化柱子，備用。上樣與淋洗用含0.8%丙酮的正己烷溶液約5mL洗滌平底燒瓶，將溶液轉(zhuǎn)移入制備好的層析柱屮，用含0.8%丙酮的正己烷溶液25mL淋洗，棄去淋洗液。再加入含18%丙酮的正己烷溶液120mL淋洗層析柱，收集淋洗液于平底燒瓶中，濃縮至近干；d.SPE柱凈化用8mL的含20y。丙酮的iH己烷溶液活化石墨化碳小柱，將經(jīng)層析柱凈化并已濃縮的樣品溶液轉(zhuǎn)移入小柱，用15mL的含20%丙酮的正己垸淋洗小柱，收集淋洗液，濃縮近干后加入lOmLIH己烷.再濃縮至近干，用TH己烷定容至lmL，用GC-MS進(jìn)行分析。2.設(shè)定GC-MS儀器參數(shù)A.GC條件氣相色譜儀The，DSQII色譜柱HP-5MS毛細(xì)管柱0.25mmX30raX0.25wm進(jìn)樣口溫度280°C傳輸線溫度300aC載氣流速LOmL/min，恒流進(jìn)樣模式不分流進(jìn)樣進(jìn)樣體積liiL程序升溫升溫速度(°C/min)8溫度rc)100250保持時(shí)間(min)_25選擇離子229,266，264，268123,167，224125,158，173291，139，155346，137,181,238_^_B.質(zhì)譜條件檢測(cè)器溫度300°C離子源溫度250°C電離方式EI采集方式SIM模式C.有機(jī)磷農(nóng)藥的特征離子320序號(hào)化合物中文名化合物英文名CASNo.1四氯間苯二腈Chlorothalonil1897—45—62N，N-二甲基-N-苯基-(N-氟二氯甲硫基)-磺酰胺Dichlofluanid1085—98—9二硫代磷酸0,o-二甲基-S-(1,2-二乙酯基乙基)酉旨Malathion121—75—5o，o-二乙基-o-對(duì)硝Parathion-ethyl56—38—2N-(二氯氟甲)硫基-N-對(duì)甲苯基-N',N'-二甲基硫酰二胺Tolyfluranid731—27—1^__a-六氮硫環(huán)a-endosulfan959-98-8339,241,265^__g-六氮硫環(huán)e-endosulfan33213-65-9339,241,2658六氯-環(huán)氧八氫-二Dieldrin60-57-1345,380,237,79__甲撐萘____91，1，1-三氯-2，2-Methoxychlor72-43-5227,228,153雙(4-甲氧基苯基)乙烷910二氯苯醚酯permethrin52645-53-1183,163，1273.定性和定量A.定性經(jīng)樣品峰和標(biāo)準(zhǔn)品峰的保留時(shí)間相比較，樣品峰質(zhì)譜圖和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)譜圖相比較，確定樣品中是否檢出目標(biāo)化合物。B.定量采用標(biāo)準(zhǔn)曲線外標(biāo)法定量。實(shí)施例三羊皮中農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)l.提取與凈化A.提取a.稱取混合均勻的5.0g樣品于150mL燒杯中；b.加入50mL正己垸，充分混勻后，于5(TC水浴中超聲60min，提取液經(jīng)濾紙濾入250mL分液漏斗中；c.樣品殘?jiān)屑尤?0mL乙腈，于5(TC水浴中超聲60m工n，合并乙腈相于分液漏斗中；B.凈化a.液液萃取分液漏斗在振蕩器上振蕩30rain，將乙腈層轉(zhuǎn)移至平底燒瓶中，TH己垸相再分別用30mL乙腈振蕩提取3次，每次振蕩40min，合并乙腈相并合并入平底燒瓶中；合并的乙腈提取液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮近干，加入lOmL的環(huán)己烷和乙酸乙酯(1:1)溶液，濃縮近干后用環(huán)己烷和乙酸乙酯(1:1)溶液定容至10mL。b.GPC凈化將定容至lOmL的樣品提取液經(jīng)0.45tim針式過濾器濾入GPC進(jìn)樣小瓶，進(jìn)行GPC凈化。收集液轉(zhuǎn)移入平底燒瓶中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，加入lOmL正己烷，蒸發(fā)至近干；GPC凈化條件采集時(shí)間20min-32min進(jìn)樣體積5mL流動(dòng)相環(huán)ci院和乙酸乙酯(1:1)溶液流速5mL/minc.層析柱凈化層析柱的制備采用濕裝的方法，用含0.5%丙酮的iE己烷溶液在玻璃層析柱中加入1cm高的無水硫酸鈉，加入10克弗羅里硅土，加入10克硅膠，頂端再加入lcm高的無水硫酸鈉，敲實(shí)，用含0.5%丙酮的lH己垸溶液20mL活化柱子，備用。上樣與淋洗用含0.5%丙酮的正己烷溶液約5mL洗滌平底燒瓶，將溶液轉(zhuǎn)移入制備好的層析柱中，用含0.5%丙酮的正己垸溶液25mL淋洗，棄去淋洗液。再加入含15%丙酮的正己烷溶液llOmL淋洗層析柱，收集淋洗液于平底燒瓶中，濃縮至近干；d.SPE柱凈化用5mL含25》。丙酮的+:己垸溶液活化石墨化碳小柱，將經(jīng)層析柱凈化并已濃縮的樣品溶液轉(zhuǎn)移入小柱，用10mL含25%丙酮的正己烷淋洗小柱，收集淋洗液，濃縮近干后加入10mL100.25腿X30mX0.25um正己垸再濃縮至近干，用正己烷定容至lmL，用GC-MS進(jìn)行分析。2.設(shè)定GC-MS儀器參數(shù)A.GC條件氣相色譜儀ThermoDSQII色譜柱HP-5MS毛細(xì)管柱進(jìn)樣口溫度250°C傳輸線溫度280°C載氣流速1.0mL/min，恒流進(jìn)樣模式不分流進(jìn)樣進(jìn)樣體積IWL程序升溫<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>B.質(zhì)譜條件檢測(cè)器溫度300°C離子源溫度250°C電離方式RT采集方式S頂模式c.有機(jī)磷農(nóng)藥的特征離子<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>1，1,1-三氯-2，2-雙(4-甲氧基苯基)乙烷Methoxychlor72-43-5227,228，15310二氯苯醚酯permethrin52645-53-1183,163,1273.定性和定量A.定性經(jīng)樣品峰和標(biāo)準(zhǔn)品峰的保留時(shí)間相比較，樣品峰質(zhì)譜圖和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)譜圖相比較，確定樣品中是否檢出目標(biāo)化合物。B.定量采用標(biāo)準(zhǔn)曲線外標(biāo)法定量。實(shí)施例四軟牛皮中農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)l.提取與凈化A.提取a.稱取混合均勻的10.0g樣品丁150mL燒杯中；b.加入lOOmLIE己烷，充分混勻后，于6(TC水浴中超聲100min，提取液經(jīng)濾紙濾入250mL分液漏斗屮；c.樣品殘?jiān)屑尤?00mL乙腈，于6(TC水浴中超聲100min，合并乙腈相于分液漏斗中；B.凈化a.液液萃取分液漏斗在振蕩器上振蕩50min，將乙腈層轉(zhuǎn)移至平底燒瓶中，正己烷相再分別用50mL乙腈振蕩提取4次，每次振蕩40min，合并乙腈相并合并入平底燒瓶中；合并的乙腈提取液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮近干，加入15mL的環(huán)己垸和乙酸乙酯(1:1)溶液，濃縮近干后用環(huán)己烷和乙酸乙酯(1:1)溶液定容至10mL。b.GPC凈化將定容至10mL的樣品提取液經(jīng)0.45ym針式過濾器濾入GPC進(jìn)樣小瓶，進(jìn)行GPC凈化。收集液轉(zhuǎn)移入平底燒瓶中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，加入10mL正己烷，蒸發(fā)至近干；GPC凈化條件采集時(shí)間20min-32min進(jìn)樣體積5mL流動(dòng)相環(huán)己烷和乙酸乙酯(1:1)溶液流速5mL/minc.層析柱凈化層析柱的制備X用濕裝的方法，用含0.5%丙酮的正己垸溶液在玻璃層析柱中加入lcm高的無水硫酸鈉，加入10克弗羅里硅土，加入10克硅膠，頂端再加入lcm高的無水硫酸鈉，敲實(shí)，用含0.5%丙酮的正己烷溶液20niL活化柱子，備用。上樣與淋洗用含0.5%丙酮的正己烷溶液約lOmL洗滌平底燒瓶，將溶液轉(zhuǎn)移入制備好的層析柱中，用含0.5%丙酮的正己垸溶液30mL淋洗，棄去淋洗液。再加入含2(F。丙酮的正d烷溶液150mL淋洗層析柱，收集淋洗液于平底燒瓶中，濃縮至近干；12d.SPE柱凈化用10mL的含3(TO丙酮的正己垸溶液活化石墨化碳小柱，將經(jīng)層析柱凈化并已濃縮的樣品溶液轉(zhuǎn)移入小柱，用15mL的含30%丙酮的正己烷淋洗小柱，收集淋洗液，濃縮近干后加入10mL正己垸再濃縮至近干，用正己烷定容至lmL，用GC-MS進(jìn)行分析。2.設(shè)定GC-MS儀器參數(shù)A.GC條件氣相色譜儀ThermoDSQII色譜柱HP-5MS毛細(xì)管柱進(jìn)樣口溫度250°C傳輸線溫度300°C0.25腿X30mX0.25um載氣流速進(jìn)樣模式進(jìn)樣體積程序升溫1.OmL7min，恒流不分流進(jìn)樣1yL升溫速度rC/min)溫度(°c)保持時(shí)間(min)100282505153205B.質(zhì)譜條件檢測(cè)器溫度300°C離子源溫度250°C電離方式EI采集方式SIM模式C.有機(jī)磷農(nóng)藥的特征離子<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>7e-六氮硫環(huán)P-endosulfan33213-65-9339,241,2658六氯-環(huán)氧八氫-二甲撐萘Dieldrin60-57-1345,380，237,7991，1，l-三氯-2，2-雙(4-甲氧基苯基)乙院Methoxychlor72-43-5227,228，15310二氯苯醚酯permethrin52645-53-1183,163,1273.定性和定量A.定性經(jīng)樣品峰和標(biāo)準(zhǔn)品峰的保留時(shí)間相比較，樣品峰質(zhì)譜圖和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)譜圖相比較，確定樣品中是否檢出目標(biāo)化合物。B.定量采用標(biāo)準(zhǔn)曲線外標(biāo)法定量。1權(quán)利要求1.一種氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)測(cè)定皮革中農(nóng)藥殘留量的方法，其特征在于對(duì)皮革樣品經(jīng)超聲提取，采用液液萃取、凝膠滲透色譜(GPC)、吸附劑層析柱、固相萃取柱(SPE柱)聯(lián)合使用的方法，分離凈化提取液中殘留的農(nóng)藥，并使用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測(cè)量其含量，其中，所說的凈化分離皮革樣品提取液中農(nóng)藥包括以下步驟A.超聲提取稱取2g-10g混合均勻的皮革樣品于燒杯中，加入30mL-100mL正己烷，充分混勻后，于30℃-60℃水浴中超聲50min-100min，提取液經(jīng)濾紙濾入分液漏斗中，樣品殘?jiān)屑尤?0mL-100mL乙腈，于30℃-60℃水浴中超聲50min-100min，將正己烷相和乙腈相合并于分液漏斗中；B.液液萃取將皮革樣品的正己烷和乙腈提取液轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，并在分液漏斗振蕩器上振蕩20min-50min，將乙腈層轉(zhuǎn)移至平底燒瓶中，正己烷相再分別用20mL-50mL乙腈振蕩提取2-4次，每次振蕩30min-50min，合并乙腈相并于平底燒瓶中，合并的乙腈提取液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮后，加入5mL-15mL的環(huán)己烷和乙酸乙酯(1:1)溶液，再次濃縮后用環(huán)己烷和乙酸乙酯(1:1)溶液定容至10mL；C.GPC凈化將定容至10mL的樣品提取液用針式過濾器濾入GPC進(jìn)樣小瓶，進(jìn)行GPC凈化，收集液轉(zhuǎn)移入平底燒瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上進(jìn)行濃縮后，加入10mL正己烷，蒸發(fā)至0.1mL-0.5mL；GPC凈化條件為采集時(shí)間20min-32min進(jìn)樣體積5mL流動(dòng)相環(huán)己烷和乙酸乙酯(1:1)溶液流速5mL/minD.吸附劑層析柱凈化用含0.2％-0.8％丙酮的正己烷溶液5mL-10mL洗滌C步驟中的平底燒瓶，將溶液轉(zhuǎn)移入制備好的層析柱中，用含0.2％-0.8％丙酮的正己烷溶液20mL-30mL淋洗，棄去淋洗液，再用含10％-20％丙酮的正己烷溶液100mL-150mL淋洗層析柱，收集淋洗液于平底燒瓶中，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮淋洗液；E.SPE凈化用約5mL-10mL的含20％-30％丙酮的正己烷溶液活化SPE小柱，將經(jīng)層析柱凈化并已濃縮的樣品溶液轉(zhuǎn)移入小柱，用5mL-15mL的含20％-30％丙酮的正己烷淋洗小柱，收集淋洗液，濃縮近干后加入5mL-10mL正己烷再濃縮至近干，用正己烷定容至1mL；F.氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定提取液，其中參數(shù)為色譜條件進(jìn)樣口溫度可以是250℃-300℃，升溫程序如下設(shè)置初始溫度為100℃，保持2min后以8℃/min的升溫速度升至250℃，250℃保持5min后，以15℃/min的速度升至320℃，保持5min；質(zhì)譜條件檢測(cè)器溫度250℃-300℃離子源溫度250℃-300℃電離方式EI采集方式SIM模式。2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于GPC凈化方法中使用填充材料為Bio-Beads，S-X3(200-400目)的色譜柱。3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于吸附劑層析柱凈化中的層析柱填料為無水硫酸鈉、弗羅里硅土和硅膠，三種填料分層單獨(dú)填充，依次填充0.5cm-1.5cm高的無水硫酸鈉，10g-20g弗羅里硅土，10g-20g硅膠，頂端再加入0.5cm-l.5cm高的無水硫酸鈉，用10mL-30tnL含0.2%-0.8%丙酮的正己垸溶液進(jìn)行活化。4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于SPE柱凈化小柱是石墨化碳小柱。5.如權(quán)利要求1所述，其特征在于方法針對(duì)皮革中農(nóng)藥殘留量的氣相色譜質(zhì)譜檢測(cè)，農(nóng)藥為四氯間苯二腈(百菌清，Chlorothaloni丄)、N，N-二甲基-N-苯基-(N-氟二氯甲硫基)-磺酰胺(抑菌靈，Dichlofluanid)、二硫代磷酸0,0-二甲基-S-(1,2-二乙酯基乙基)酯(馬拉硫磷，Malathion)、0，0-—一乙基-0-對(duì)硝基苯基酯(乙基對(duì)硫磷，Parathion-ethyl)、N-(二氯氟甲)硫基-N-對(duì)甲苯基-N'，N'二甲基硫酰二胺(甲苯氟磺胺，Tolyfluranid)、a-六氮硫環(huán)(a-硫丹，a-endosulfan)、六氮硫環(huán)(e-硫丹，0-endosulfan)、六氯-環(huán)氧八氫-二甲撐萘(狄氏劑，Dieldrin)、1，1，1-三氯-2，2-雙(4-甲氧基苯基)乙垸(甲氧氯，Methoxychlor)、二氣苯鵬酉旨(氣菊酉旨，permethriri)。全文摘要本發(fā)明屬于分析化學(xué)領(lǐng)域，涉及皮革中農(nóng)藥殘留量的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定。方法采用正己烷及乙腈對(duì)皮革樣品進(jìn)行超聲提取，并針對(duì)皮革樣品油脂含量高、殘留的加工用助劑復(fù)雜等特點(diǎn)采用了液液萃取、凝膠滲透色譜、吸附劑層析柱、固相萃取柱等多種手段對(duì)樣品提取液進(jìn)行分離和凈化，凈化后的樣品提取液使用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法進(jìn)行農(nóng)藥含量的測(cè)定。本發(fā)明具有選擇性強(qiáng)、適用性廣、檢測(cè)限低的特點(diǎn)。本發(fā)明實(shí)現(xiàn)了皮革中農(nóng)藥殘留量的測(cè)定，開辟了皮革中農(nóng)藥殘留測(cè)試的新思路，填補(bǔ)了農(nóng)藥殘留量檢測(cè)的空白。文檔編號(hào)G01N27/64GK101498692SQ20081005416公開日2009年8月5日申請(qǐng)日期2008年8月18日優(yōu)先權(quán)日2008年8月18日發(fā)明者俞安敏,軍李,李耀青,王培花,王大章,陳志強(qiáng)申請(qǐng)人:通標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)服務(wù)(天津)有限公司