專利名稱：一株嗜鹽假單胞菌及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于微生物應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一株嗜鹽假單胞菌及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
近年來，全球水體有害藻類水華爆發(fā)日漸頻繁，嚴(yán)重程度也越來越高，發(fā)生地點遍布全球各地。因此，防治有害藻類的發(fā)生，降低其對水環(huán)境、人類生活環(huán)境，以及水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的危害，已成為人們及各國普遍關(guān)注的大問題。正常的水體系統(tǒng)處于一種相互制約的動態(tài)平衡中，當(dāng)水華發(fā)生時，少數(shù)種類的藻大量繁殖，水面形成很厚的藍(lán)綠色聚集體。因為有害藻鋪滿水面，水面被覆蓋使水體透明度降低，水體變色，水體pH改變，水體溶氧下降，水體粘稠度下降。藻類本身也會因過量繁殖大量死亡，這時藻類和水生植物的尸體被微生物大量分解，造成水體大面積缺氧，甚至無氧，最終造成水生動物的大量死亡。藻類的腐解還會產(chǎn)生大量的有毒氣體和毒素，更嚴(yán)重的增加了水質(zhì)的惡化程度，破壞了整個生態(tài)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能。隨著水體富營養(yǎng)化的加劇，藻類所引起的水污染問題已越來越引起人們的關(guān)注，而淡水藻類污染已成為全球性的環(huán)境衛(wèi)生問題。近年來，在物理化學(xué)方法治理水華不夠理想的情況下，微生物的方法控制有害藻類是生物控制點的研究熱點，而且，溶藻菌在控制水華爆發(fā)方面有巨大的潛力和應(yīng)用前景。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一株嗜鹽假單胞菌及其應(yīng)用。所述嗜鹽假單胞菌能高效抑制藻類尤其是水華藻類的生長，可廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖及污水處理。
本發(fā)明一方面提供了一株嗜鹽假單胞菌，該菌株命名為嗜鹽假單胞菌YZ7(Halomonas sulfidaeris YZ7),已于2013年3月6日保藏于中國武漢武漢大學(xué)的中國典型培養(yǎng)物保藏中心，其保藏編號為CCTCC N0:M2013070o本發(fā)明另一方面提供了含有上述嗜鹽假單胞菌的微生物制劑及其應(yīng)用。上述嗜鹽假單胞菌YZ7可以菌粉的形式制成微生物添加劑，制備過程為:將嗜鹽假單胞菌YZ7活化、擴(kuò)大培養(yǎng)，經(jīng)液態(tài)發(fā)酵，離心收集菌泥，加入淀粉載體，烘干制成菌量為100 1000億/g的菌粉。上述嗜鹽假單胞菌YZ7菌粉按IO-1OOppm的比例，活化后均勻潑灑至水體中，可有效抑制水體中藻類的生長，尤其是水華藻類的繁殖。本發(fā)明提供的嗜鹽假單胞菌YZ7具有抑制水華藻類的能力，且該菌株營養(yǎng)需要簡單，可開發(fā)為水產(chǎn)養(yǎng)殖微生物制劑及污水處理劑，應(yīng)用前景廣闊。
具體實施例方式實施例1:嗜鹽假單胞菌YZ7分離篩選及鑒定1、實驗材料
選用藍(lán)藻中的銅綠微囊藻(Microcystis aeruginosa) FACHB469,藻種經(jīng)活化后，在25°C，光照強(qiáng)度為25001x及光暗比為12h:12h條件下培養(yǎng)。溶藻細(xì)菌的富集培養(yǎng)采用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基:牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaC15g,蒸懼水100mL。LB培養(yǎng)基:蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaC15g，蒸餾水100mL。藻培養(yǎng)用BGll 改良培養(yǎng)基:NaN03150mg, K2HP044mg, MgSO4.7H207.5mg,CaCl2.2H203.6mg, Na2SiO3.9Η205.8mg,檸檬酸 0.6mg,檸檬酸鐵銨 0.6mg, EDTA0.lmg,Na2C032mg, A5 溶液 0.1mL,蒸餾水 99.9mL.A5 溶液:H3B03286mg, MnCl2.4H20181mg,nS04.7H2022mg, CuSO4.5Η207.9mg, Na2MoO4.2H203.9mg，蒸餾水 IOOmL02、微生物篩選從浙江某富營養(yǎng)化烏鱧養(yǎng)殖塘中采集水樣，按10%的比例接入預(yù)培養(yǎng)7d的銅綠微囊藻，于25°C混合培養(yǎng)7d。7d后將黃化的藻液作為分離溶藻菌的材料,取黃化藻液按不同濃度梯度稀釋，平板涂布，30°C培養(yǎng)48h后，劃線分離，獲得純培養(yǎng)的菌株，本實驗獲得10株純培養(yǎng)的菌株，并分別依次命名為YZ1、YZ2、YZ3至YZ10。將分離獲得的菌株，進(jìn)行溶藻實驗以確定其溶藻效果。3、溶藻實驗將銅綠微囊藻用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)至對數(shù)生長期，再將上述10株菌株于30°C培養(yǎng)36h后(此時細(xì)菌數(shù)達(dá)到108cfu/mL以上)，按5%的接種量分別接種至預(yù)培養(yǎng)7d的銅綠微囊藻中，實驗水體為500mL，設(shè)空白對照，將實驗組及對照組置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)96h，培養(yǎng)期間溫度控制在30°C，光暗比12:12，每天早晚各搖動一次，4d后在顯微鏡下用血球計數(shù)板計數(shù)各組中的銅綠微囊藻數(shù)`量。其中YZ7菌株對銅綠微囊藻的抑制率最高，為93.24% (表 I)。表1:不問囷株對銅綠微囊操的抑制率
權(quán)利要求
1.一種嗜鹽假單胞菌，其保藏編號為CCTCC N0:M2013070o
2.權(quán)利要求1所述的嗜鹽假單胞菌在抑制有害藻類生長中的應(yīng)用。
3.權(quán)利要求1所述的嗜鹽假單胞菌在制備微生物制劑中的應(yīng)用。
4.一種微生物制劑，所述的微生物制劑包含有權(quán)利要求1所述的嗜鹽假單胞菌。
5.如權(quán)利要求4所述的微生物制劑，其正在于該微生物制劑為權(quán)利要求1所述的嗜鹽假單胞菌的菌粉。
6.權(quán)利要求4或5所述的微生物`制劑在抑制水華藻銅綠微囊藻中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明的目的是提供一株嗜鹽假單胞菌，該菌株命名為嗜鹽假單胞菌YZ7(Halomonas sulfidaeris YZ7)，已于2013年3月6日保藏于中國武漢武漢大學(xué)的中國典型培養(yǎng)物保藏中心，其保藏編號為CCTCC NO:M 2013070。本發(fā)明提供的嗜鹽假單胞菌YZ7具有抑制水華藻類的能力，且該菌株營養(yǎng)需要簡單，可開發(fā)為水產(chǎn)養(yǎng)殖微生物制劑及污水處理劑，應(yīng)用前景廣闊。
文檔編號C02F3/34GK103146619SQ20131009339
公開日2013年6月12日 申請日期2013年3月21日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月21日
發(fā)明者武玉強(qiáng), 孫超 申請人:青島蔚藍(lán)天成生物科技有限公司