超聲微波協(xié)同法提取鵝去氧膽酸的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明的實(shí)施方式涉及中藥領(lǐng)域，更具體地，本發(fā)明的實(shí)施方式涉及一種超聲微波協(xié)同法提取鵝去氧膽酸的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]現(xiàn)目前，除了從熊膽汁中制備鵝去氧膽酸(CDCA)外，行業(yè)內(nèi)也致力于開發(fā)新的膽汁源制備鵝去氧膽酸，并且已經(jīng)成功的從鵝膽汁、雞膽汁、鴨膽汁和豬膽汁等家禽家畜膽汁中提取或制備鵝去氧膽酸。
[0003]專利CN201010577847.8公開了一種從禽膽汁中提取鵝去氧膽酸的工藝，向禽膽汁加入燒堿后煮沸水解，水解液中加入有機(jī)溶劑和二氧化碳組成的膨脹溶劑，加壓攪拌酯化并萃取出鵝去氧膽酸粗品；然后進(jìn)行純化，方法是加入鈣鹽析出膽酸鹽，膽酸鹽用水洗滌后加鹽酸調(diào)節(jié)PH使鵝去氧膽酸析出，沉淀用氨水中和后真空干燥，再用有機(jī)溶劑與二氧化碳組成的膨脹溶劑加壓萃取，降壓析出，即得鵝去氧膽酸。
[0004]專利CN201110354130.1公開了一種酯化法制備豬膽汁中鵝去氧膽酸的方法，以甲醇、濃硫酸、氫氧化鈉進(jìn)行酯化，以乙酸酐進(jìn)行?；檬兔演腿?，通過乙醇、石油醚實(shí)現(xiàn)一次結(jié)晶、二次結(jié)晶，利用氫氧化鈉水解酸化，得到鵝去氧膽酸粗品;然后進(jìn)行純化，方法是利用乙酸乙酯和活性炭進(jìn)行結(jié)晶，干燥得到鵝去氧膽酸。
[0005]專利CN201310160479.0公開了一種從鵝膽汁中分離提純鵝去氧膽酸的方法，具體是先用氫氧化鈉將鵝膽汁皂化，然后加入氯化鈣得到總膽酸鈣鹽，用水?dāng)嚢杩偰懰徕}鹽，離心收集上清液，用鹽酸調(diào)PH獲得沉淀即為鵝去氧膽酸粗品;然后進(jìn)行純化，方法是用氫氧化鈉水溶液溶解鵝去氧膽酸用大孔樹脂層析，乙醇溶液洗脫，氫氧化鈉溶液洗脫，洗脫液用鹽酸調(diào)節(jié)PH后離心即得鵝去氧膽酸。
[0006]雖然上述個(gè)別方法能夠獲得純度較高的鵝去氧膽酸精品，但制備鵝去氧膽酸粗品步驟較為簡單的技術(shù)方案其純化步驟復(fù)雜，而鵝去氧膽酸粗品純化步驟較為簡單的技術(shù)方案其鵝去氧膽酸制備步驟又比較復(fù)雜，且上述制備方法的產(chǎn)率低，降低了鵝去氧膽酸制備效率。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0007]本發(fā)明克服了現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種超聲微波協(xié)同法提取鵝去氧膽酸的方法，以期望簡化鵝去氧膽酸的制備步驟，提高生產(chǎn)效率。
[0008]為解決上述的技術(shù)問題，本發(fā)明的一種實(shí)施方式采用以下技術(shù)方案:
[0009]—種超聲微波協(xié)同法提取鵝去氧膽酸的方法，包括以下步驟:
[0010]首先，將膽膏進(jìn)行皂化后用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH至3?4，析出膽汁酸粗品；
[0011 ]然后，將膽汁酸粗品在55?60°C真空干燥，粉碎，得到膽汁酸粉末粗品；
[0012]接著，將膽汁酸粉末粗品和乙酸乙酯按照料液比1:3.0?3.5加入超聲微波協(xié)同萃取儀，在超聲功率100?105W、微波功率145?150W的條件下萃取2.5?3.5min，獲得萃取試樣；
[0013]再將所述萃取試樣離心，收集上清液，沉淀用乙酸乙酯洗滌，將洗滌液與上清液合并后在65?70°C真空濃縮，得到鵝去氧膽酸粗品；
[0014]最后，將鵝去氧膽酸粗品用氯仿結(jié)晶精制獲得鵝去氧膽酸精品。
[0015]進(jìn)一步的技術(shù)方案是，超聲微波協(xié)同法提取鵝去氧膽酸的方法包括以下步驟:
[0016]首先，將膽膏進(jìn)行皂化后用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH至3，析出膽汁酸粗品；
[0017]然后，將膽汁酸粗品在60°C真空干燥，粉碎，得到膽汁酸粉末粗品；
[0018]接著，將膽汁酸粉末粗品和乙酸乙酯按照料液比1:3加入超聲微波協(xié)同萃取儀，在超聲功率100W、微波功率150W的條件下萃取3min，獲得萃取試樣；
[0019]再將所述萃取試樣離心，收集上清液，沉淀用乙酸乙酯洗滌，將洗滌液與上清液合并后在70°C真空濃縮，得到鵝去氧膽酸粗品；
[0020]最后，將鵝去氧膽酸粗品用氯仿結(jié)晶精制獲得鵝去氧膽酸精品。
[0021]上述超聲微波協(xié)同法提取鵝去氧膽酸的方法中，所述膽膏為雞膽膏或者豬膽膏。
[0022]上述超聲微波協(xié)同法提取鵝去氧膽酸的方法中，所述皂化是指將膽膏與氫氧化鈉按照質(zhì)量比100:35投入水中，水與膽膏質(zhì)量比2:1，密閉升溫至120°C，攪拌反應(yīng)12h，然后降至室溫O
[0023]上述超聲微波協(xié)同法提取鵝去氧膽酸的方法中，所述膽汁酸粗品經(jīng)真空干燥至干燥失重<3%。
[0024]上述超聲微波協(xié)同法提取鵝去氧膽酸的方法中，所述粉碎得到的膽汁酸粉末粗品過60目篩網(wǎng)。
[0025]下面對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行進(jìn)一步的說明。
[0026]雞膽膏和豬膽膏是用雞膽汁或豬膽汁濃縮而得的膏狀物，其鵝去氧膽酸含量通常>20%，本發(fā)明先用氫氧化鈉與膽膏進(jìn)行皂化反應(yīng)，使結(jié)合型膽汁酸(?；蛆Z去氧膽酸、?；悄懰?、?；秦i去氧膽酸等)轉(zhuǎn)變?yōu)橛坞x型膽汁酸(鵝去氧膽酸、膽酸、豬去氧膽酸等)，然后用鹽酸調(diào)節(jié)PH使膽汁酸粗品析出(其中雞膽膏中膽汁酸主要為鵝去氧膽酸、膽酸等;豬膽膏中膽汁酸主要為鵝去氧膽酸、豬去氧膽酸等)，膽汁酸粗品粉末以乙酸乙酯為溶劑，在超聲波和微波的共同作用下，快速的將鵝去氧膽酸萃取出來，然后離心，上清液是鵝去氧膽酸粗品，其中含有雜質(zhì)通常<15%，且鵝去氧膽酸粗品收率高，將鵝去氧膽酸粗品用氯仿結(jié)晶精制即可獲得雜質(zhì)含量<5%的鵝去氧膽酸精品。
[0027]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果之一是:本發(fā)明的鵝去氧膽酸提取方法結(jié)合了超聲微波協(xié)同法，簡化了提取步驟，可以獲得雜質(zhì)含量<5%的鵝去氧膽酸精品，且鵝去氧膽酸精品收率明顯提尚，達(dá)到20%左右。
【附圖說明】
[0028]圖1為本發(fā)明實(shí)施例1膽汁酸粉末粗品的高效液相色譜圖。
[0029]圖2為本發(fā)明實(shí)施例1鵝去氧膽酸粗品的高效液相色譜圖。
[0030]圖3為本發(fā)明實(shí)施例1鵝去氧膽酸精品的高效液相色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0031]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0032]實(shí)施例1
[0033]將10g鵝去氧膽酸含量27.1%的雞膽膏投入200mL水中，加入35g氫氧化鈉，密閉升溫至1