4]在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供2'，2'-二氣-5-氮脫氧胞喀晚、其正位異構(gòu)體（a 和e)及其鹽。
[0045] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供2'，2'-二氣-5, 6-二氨-5-氮脫氧胞喀晚、其 正位異構(gòu)體（a和0)及其鹽。
[0046] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供2'-脫氧-2'，2'-二氣折布拉林、其正位異構(gòu)體 (曰和e)及其鹽。
[0047] 適合的鹽包括藥學(xué)上可接受的鹽。有代表性的鹽包括乙酸鹽、己二酸鹽、天冬氨 酸鹽、苯甲酸鹽、苯橫酸鹽化enzenesulfonate)(苯橫酸鹽化esylate))、硫酸氨鹽、下酸 鹽、巧樣酸鹽、精腦酸鹽、精腦橫酸鹽、環(huán)戊燒丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、1，2-乙 二橫酸鹽（1，2-ethanedisulfonate)(乙二橫酸鹽（edisylate))、乙橫酸鹽（ethane sulfonate)(乙橫酸鹽（esylate))、甲酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽（glucoheptanoate)、甘 油憐酸鹽、徑乙酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氨漠酸鹽、氨艦酸鹽、2-徑基乙橫 酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲橫酸鹽（methanesulfonate)(甲橫酸鹽（mes}date))、2-糞橫 酸鹽（2-naphthalenesulfonate)(糞橫酸鹽（napsylate))、煙酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、撲酸 鹽（palmoate)、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、憐酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、 水楊酸鹽、班巧酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氯酸鹽、甲苯橫酸鹽和十一酸鹽。
[0048] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供藥物組合物，其包含本發(fā)明的至少一種氣化喀晚類似 物與適合于人或動(dòng)物受試者施用的藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑，該藥物組合物可W單獨(dú) 施用或與另外的治療劑和/或抗癌藥聯(lián)用?？蒞將本發(fā)明的氣化喀晚類似物配制成還包含 適合的藥學(xué)上可接受的載體（包括賦形劑）和有利于氣化喀晚類似物施用于哺乳動(dòng)物受試 者的其它化合物的制劑。該藥物組合物用于施用氣化喀晚類似物W便治療癌癥。
[0049] 施用包括一種或多種本發(fā)明的氣化喀晚類似物的組合物W便遞送治療有效量的 氣化喀晚類似物。氣化喀晚類似物的治療有效量的范圍一般至多為最大耐受劑量，但濃度 并不關(guān)鍵且可W廣泛改變。當(dāng)然，臨床醫(yī)師使用的精確用量根據(jù)化合物、施用途徑、患者的 健康狀況和其它因素的不同而改變。可W將每日劑量作為單劑量施用或?qū)⒚咳談┝糠殖啥?個(gè)施用劑量。本發(fā)明氣化喀晚類似物的施用通過任意有效途徑進(jìn)行，例如，胃腸外或口服。
[0050] 本發(fā)明氣化喀晚類似物的實(shí)際施用量為治療有效量，本文所用的該術(shù)語表示產(chǎn)生 主要的有益效果所需的用量。可W從來源于體外或動(dòng)物模型測試系統(tǒng)的劑量響應(yīng)曲線中外 推有效劑量。動(dòng)物模型也典型地用于確定期望的劑量范圍和施用途徑。然后運(yùn)樣的信息可 W用于測定在人或其它哺乳動(dòng)物中的有用的劑量和施用途徑。有效劑量的測定充分屬于本 領(lǐng)域技術(shù)人員的能力范圍。因此，實(shí)際施用的用量取決于治療所施用的個(gè)體且優(yōu)選為優(yōu)化 用量，W便達(dá)到期望的效果，而沒有明顯的副作用。 具體實(shí)施方案
[0051] 在本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供用于制備氣化喀晚類似物的方法。實(shí)施例1中提供 了 2'，2' -二氣-5-氮脫氧胞喀晚（NUCO13)的制備。實(shí)施例2中提供了 2'，2' -二氣-5, 6-二 氨-5-氮脫氧胞喀晚（NUC014)的制備。實(shí)施例3中提供了 2'，2' -二氣折布拉林（NUC019) 的制備。
[0052]在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供使用本發(fā)明的氣化化合物治療患有細(xì)胞增殖性疾病 (例如癌癥）的人或動(dòng)物受試者的方法。可用本發(fā)明化合物治療的有代表性的細(xì)胞增殖性 疾病包括血癌，例如白血病、淋己瘤和骨髓瘤；和非血液癌，例如實(shí)體瘤癌（例如乳腺癌、卵 巢癌、膜腺癌、結(jié)腸癌、結(jié)腸直腸癌、非小細(xì)胞肺癌、腎癌和膀脫癌）、肉瘤和神經(jīng)膠質(zhì)瘤。本 發(fā)明提供對需要運(yùn)種治療的人或動(dòng)物受試者的治療方法，包括對該受試者施用治療有效量 的本發(fā)明的一種或多種氣化喀晚類似物，可W將其單獨(dú)地施用或與一種或多種另外的治療 劑和/或抗癌藥聯(lián)用。
[0053] 有代表忡的氣化略暗化合物
[0054] 研發(fā)該族分子的主要原理基于使用吉西他濱注意到的自我增強(qiáng)機(jī)制，不過，運(yùn)種 分子可W提供另外的有意義的特征。
[00巧]NUCO13. 2'，2' -二氣-5-氮脫氧胞喀晚（NUCO13)(參見圖5)是新的胞巧類似物， 其設(shè)及5-氮雜胞喀晚核巧和地西他濱，由此產(chǎn)生已知的代謝物。已知的代謝物有利于通過 降低無法預(yù)料的毒性風(fēng)險(xiǎn)而有利于臨床研發(fā)。例如，代謝物毒性使得5-氣脫氧胞巧作為 DNMTI的臨床研發(fā)復(fù)雜化。
[0056] 已經(jīng)在細(xì)胞系中篩選了NUC013的活性并且與5-氮雜胞喀晚核巧和地西他濱相比 較。參見表1。
[0057] 表1.NUC013與地西他濱和5-氮雜胞喀晚核巧相比較的體外細(xì)胞毒性
[0059] 正如可W從表1中觀察到的，NUC013對各種腫瘤細(xì)胞系（既可W是實(shí)體瘤也可W 是血癌）的細(xì)胞毒性具有獨(dú)特的特性。NUC013對耐受地西他濱的細(xì)胞系、特別是實(shí)體瘤細(xì) 胞系具有活性。
[0060] 還測試了NUC013的DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制作用（參見圖6)。在結(jié)腸癌細(xì)胞中， NUC013的有效性約為作為DNMTI的5-氮胞喀晚（aza巧tine)的10-倍之大。然而，當(dāng)在 該細(xì)胞系中5-氮雜胞喀晚核巧的細(xì)胞毒性大于NUC013時(shí)（分別為0. 62yM與4. 54yM 的GIJ，能夠在NUC013與5-氮雜胞喀晚核巧相比較細(xì)胞毒性低的藥物濃度下基本上達(dá)到 DNMT的抑制作用。
[006。圖7比較NUC013與地西他濱對白血病細(xì)胞系THP-I和Kasumi1的活性。圖8比 較NUC013和地西他濱值A(chǔ)C)對Kasumi-I白血病細(xì)胞系的活性。NUC013展示出對THP-I白 血病細(xì)胞生長的抑制作用強(qiáng)于地西他濱，但在等摩爾濃度下在Kasumi-I細(xì)胞中的作用稍 弱。圖9示例比較地西他濱和NUC013在THP-I和Kasumi-I細(xì)胞系中對DNMTl的抑制活性 的蛋白質(zhì)印跡。
[006引與地西他濱相比，NUC013耗盡DNMTl顯示出與圖5和6中顯示的細(xì)胞減少相關(guān)。 實(shí)際上，在圖7中測試的兩種濃度下，根據(jù)與等摩爾地西他濱在THP-I細(xì)胞中比較的蛋白質(zhì) 印跡，NUC013顯示類似的DNMT抑制作用，同時(shí)顯示更強(qiáng)的細(xì)胞減少作用，而對設(shè)及較弱細(xì) 胞減少作用的Kasumi-I細(xì)胞具有較弱的DNMTl抑制作用。運(yùn)些數(shù)據(jù)進(jìn)一步證實(shí)NUC013是 DNMT抑制劑。
[006引圖10比較用地西他濱或NUC013處理與載體對照品處理相對比的THP-I細(xì)胞的 吉姆薩染料染色。圖11比較用地西他濱或NUC013處理（與載體對照品處理相對比）的Kasumi-I細(xì)胞的吉姆薩染料染色。
[0064] 正如圖8和9中所示，用NUC013或地西他濱處理THP-I或Kasumi-I細(xì)胞導(dǎo)致啟 示細(xì)胞分化的形態(tài)改變，其中對于NUC013處理的THP-I觀察到的作用大于對Kasumi-I細(xì) 胞處理的作用，與在THP-I細(xì)胞中的較大DNMTl抑制作用可相比擬。
[0065] 實(shí)施例1中描述了 2'，2' -二氣-5-氮脫氧胞喀晚（NUC013)的制備。實(shí)施例4中 描述了NUC013的體外細(xì)胞毒性（非小細(xì)胞肺癌、結(jié)腸直腸癌、白血病和乳腺癌）。實(shí)施例5 中描述了體外NUC013的DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制作用。
[0066]NUCO14.NUC014 是NUC013 的 5, 6-二氨衍生物。圖 12 示例 2'，2' -二氣-5, 6-二 氨-5-氮脫氧胞喀晚（NUC014)的化學(xué)結(jié)構(gòu)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)它在水性環(huán)境中是穩(wěn)定的且不會(huì)在 胞喀晚的6-位上發(fā)生水解裂解。將NUC014的有代表性的體外細(xì)胞毒性概括在表2中。
[0067] 表2.NUCO14的體外細(xì)胞毒性。
[0069] 抓〇)14顯示對白血病細(xì)胞系11210的中度細(xì)胞毒性。基于5,6-二氨-5-氮 雜-2'-脫氧胞巧值HADC)與地西他濱相對比顯示較低細(xì)胞毒性的可得到的數(shù)據(jù)，NUC014的 細(xì)胞毒性也低于NUC013并不令人驚奇。
[0070] 2'，2' -二氣-5, 6-二氨-5-氮脫氧胞喀晚（NUC014)的制備如實(shí)施例2中所述。
[0071]NUC019巧NUC020.NUC019是折布拉林的衍生物。圖13示例2' -脫氧-2'，2' -二 氣折布拉林（NUC019)的化學(xué)結(jié)構(gòu)。將折布拉林和折布拉林衍生物NUC019及其a-正位異 構(gòu)體NUC020的有代表性的體外細(xì)胞毒性概括在表3中。
[0072] 表3.折布拉林和折布拉林衍生物的體外細(xì)胞毒性
[0074]實(shí)施例3中描述了 2' -脫氧-2'，2' -二氣折布拉林（NUC019)的制備。實(shí)施例4 中描述了NUC019的體外細(xì)胞毒性（非小細(xì)胞肺癌、結(jié)腸直腸癌、白血病和乳腺癌）。
[00巧]提供下列實(shí)施例的目的在于示例本發(fā)明，而非限定本發(fā)明。
[0076] 實(shí)施例1
[0077] 2\2'-二氣|-5-氣脫氣胸略暗伯110)13)的制備
[0078]方案I中所示的兩種可選路徑用于制備2