一種生物樣本檢測(cè)裝置及基于該裝置的基因檢測(cè)方法與流程

本發(fā)明涉及了生物檢測(cè)技術(shù)，主要涉及一種基因檢測(cè)裝置。

本發(fā)明還涉及了基因檢測(cè)的方法，包括核酸的提取、擴(kuò)增、檢測(cè)等操作流程。

背景技術(shù)：

基因檢測(cè)是從人體的血液、其他體液或組織中提取細(xì)胞，檢測(cè)個(gè)人dna的遺傳多態(tài)性和基因型。

基因檢測(cè)主要目的有兩個(gè)，一是用于疾病的診斷，例如白血病的診斷分類等，都需要進(jìn)行相關(guān)的基因檢測(cè)；二是用于疾病的預(yù)防，就是檢測(cè)健康人的基因型以及某些遺傳多態(tài)性，分析基因與疾病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系，并向受檢者提出生活上的指導(dǎo)，避免疾病的發(fā)生。

雖然基因檢測(cè)具有很多優(yōu)勢(shì)，但是目前并沒(méi)有得到普及。主要是因?yàn)榛驒z測(cè)的操作流程過(guò)于復(fù)雜，必須由專業(yè)人士操作。因?yàn)樵诨驒z測(cè)的試驗(yàn)過(guò)程中，會(huì)涉及到核酸的提取，擴(kuò)增，以及檢測(cè)等步驟，需要對(duì)樣本溶液進(jìn)行移液，過(guò)濾等操作。無(wú)專業(yè)知識(shí)背景的人，難以操作試驗(yàn)過(guò)程。

而市場(chǎng)上的基因檢測(cè)設(shè)備過(guò)于復(fù)雜，價(jià)格昂貴，所面向的銷售對(duì)象主要是針對(duì)醫(yī)院，診所和研究基地等。市場(chǎng)上缺乏一種普通群眾有能力購(gòu)買(mǎi)，并且可操作的檢測(cè)裝置。所以發(fā)明一種普通群眾可以快速、方便的完成基因檢測(cè)的方法和用以實(shí)現(xiàn)該方法的生物樣本檢測(cè)裝置就顯得非常有必要，能大力推廣生物檢測(cè)技術(shù)的普及。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了克服上述基因檢測(cè)方法和基因檢測(cè)設(shè)備的缺陷，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種快速、操作簡(jiǎn)單的基因檢測(cè)方法；

與此相應(yīng)，本發(fā)明另一個(gè)要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供能實(shí)現(xiàn)快速、操作簡(jiǎn)單的基因檢測(cè)方法的生物樣本檢測(cè)裝置。

一種生物樣本檢測(cè)裝置，主要的結(jié)構(gòu)包括收樣區(qū)2，提取區(qū)5，擴(kuò)增區(qū)8，檢測(cè)區(qū)10，一號(hào)隔層4，二號(hào)隔層6，三號(hào)隔層11，各個(gè)功能區(qū)（包含收樣區(qū)2，提取區(qū)5，擴(kuò)增區(qū)8，檢測(cè)區(qū)10）之間連接為一個(gè)整體，并且各個(gè)功能區(qū)相互連接處都具有一隔層（包含一號(hào)隔層4，二號(hào)隔層6，三號(hào)隔層11），隔層可以打開(kāi)，也可以關(guān)閉。在該裝置上可以實(shí)現(xiàn)核酸快速提取，恒溫?cái)U(kuò)增，以及通過(guò)核酸試紙條檢測(cè)，讀取結(jié)果。

所述的一號(hào)隔層4，二號(hào)隔層6，三號(hào)隔層11都是由兩塊帶有漏孔的板狀結(jié)構(gòu)組成，在外力擠壓裝置外壁時(shí)，當(dāng)兩個(gè)漏孔相互重疊，液體經(jīng)漏孔進(jìn)入下一個(gè)功能區(qū)。當(dāng)外力消失，兩塊板狀恢復(fù)原來(lái)位置時(shí)，板狀的漏孔會(huì)相互堵住，阻止液體在搖勻時(shí)，回流到上一個(gè)功能區(qū)，確保各個(gè)功能區(qū)一直具備良好的密閉性。

所述的收樣區(qū)2一端帶有螺旋蓋1，另一端與提取區(qū)5相連且連接處有一號(hào)隔層4，通過(guò)外力擠壓收樣區(qū)2外壁，可以使一號(hào)隔層4打開(kāi)，讓樣本進(jìn)入到提取區(qū)5。

所述的提取區(qū)5一端與收樣區(qū)2相連，另一端與擴(kuò)增區(qū)8相連，并且與擴(kuò)增區(qū)8相連處有二號(hào)隔層6，在二號(hào)隔層6下方有一濾膜7，濾膜7與提取區(qū)5內(nèi)壁緊密相連，無(wú)間隙。提取區(qū)5內(nèi)附著有用于提取核酸的核酸提取試劑，通過(guò)擠壓提取區(qū)5外壁，使得二號(hào)隔層6打開(kāi)，提取區(qū)5內(nèi)的溶液經(jīng)過(guò)濾膜7后，過(guò)濾掉除核酸以外的物質(zhì)，只剩下核酸溶液進(jìn)入擴(kuò)增區(qū)8。

所述的擴(kuò)增區(qū)8一端與提取區(qū)5相連，一端與檢測(cè)區(qū)10相連，擴(kuò)增區(qū)8的外表面貼有升溫貼9，內(nèi)部含有擴(kuò)增反應(yīng)所需的各種干粉。與檢測(cè)區(qū)10相連處有三號(hào)隔層11，在三號(hào)隔層11下方有一導(dǎo)向嘴12，導(dǎo)向嘴12與檢測(cè)區(qū)10的樣本墊13相連。通過(guò)擠壓擴(kuò)增區(qū)8的外壁可打開(kāi)三號(hào)隔層11，讓擴(kuò)增后的液體通過(guò)導(dǎo)向嘴12進(jìn)入樣本墊13。

所述的升溫貼9其內(nèi)部組成主要包括鐵、活性炭、無(wú)機(jī)鹽、水等合成的混合物，可在空氣中氧氣的作用下發(fā)生放熱反應(yīng)，而這個(gè)反應(yīng)是從撕開(kāi)升溫貼9外表層開(kāi)始，它可以連續(xù)釋放50°以上的熱量，升溫貼9的發(fā)熱時(shí)間可以保證擴(kuò)增區(qū)8在核酸擴(kuò)增階段的溫度保持恒定。

所述的檢測(cè)區(qū)10由腔筒14和試紙條15組成。腔筒14由透明材質(zhì)構(gòu)成，將試紙條15包圍，形成一個(gè)與大氣隔絕的空間，并在其中固定一個(gè)試紙條15,腔筒14在顯示試紙條15結(jié)果那面呈微凸型，形成一個(gè)小型的放大鏡，便于判讀結(jié)果。

所述的收樣區(qū)2，提取區(qū)5，擴(kuò)增區(qū)8由具有良好彈性、可擠壓及對(duì)溶液無(wú)吸附性的材質(zhì)組成。

一種基于所述的生物樣本檢測(cè)裝置的基因檢測(cè)方法，其方法包括步驟：

a.待檢測(cè)的樣本溶液，是在密閉的空間下進(jìn)行核酸提?。?/p>

b.提取后的溶液，是在密閉的空間下進(jìn)行恒溫?cái)U(kuò)增；

c.樣本溶液經(jīng)提取、擴(kuò)增后，通過(guò)核酸試紙條進(jìn)行檢測(cè)；

樣本溶液完成核酸提取，可以直接進(jìn)入核酸擴(kuò)增階段；當(dāng)樣本溶液完成核酸擴(kuò)增階段，可以直接進(jìn)行核酸檢測(cè)，試驗(yàn)過(guò)程中無(wú)需進(jìn)行移液等操作。

作為本發(fā)明基因檢測(cè)方法的改進(jìn)，試紙條15上包含有樣本墊13、有色顆粒結(jié)合墊16、纖維膜17和吸水濾紙墊18，上述各部分在相鄰處部分重疊，纖維膜17上還包含有檢測(cè)線19和質(zhì)控線20。

檢測(cè)結(jié)果判斷，a.當(dāng)質(zhì)控線20顯色，檢測(cè)線19顯色，表示此次檢測(cè)有效，樣本溶液中含有待測(cè)基因；b.當(dāng)質(zhì)控線20顯色，檢測(cè)線19不顯色，表示此次檢測(cè)有效，樣本溶液中不含有待測(cè)基因；c.當(dāng)質(zhì)控線20不顯色時(shí)，表示此次檢測(cè)無(wú)效。

綜上所述，本發(fā)明的有益效果：

本發(fā)明所提供的基因檢測(cè)方法，操作簡(jiǎn)單，無(wú)需進(jìn)行額外的移液，過(guò)濾等操作，極大的簡(jiǎn)化了操作流程，普通群眾也可以獨(dú)自快速、方便的完成基因檢測(cè)，并且結(jié)果可直接觀測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程只需40分鐘便可完成。

與本發(fā)明的基因檢測(cè)方法相對(duì)應(yīng)的生物樣本檢測(cè)裝置，使用了隔層將各個(gè)功能區(qū)之間隔開(kāi)，在外力擠壓裝置時(shí)，隔層打開(kāi)，外力消失時(shí)，隔層閉合，很好的保證了功能區(qū)之間的反應(yīng)液不回流，各個(gè)功能區(qū)具有良好的密閉性，溶液不會(huì)交叉污染，使得裝置的檢測(cè)結(jié)果更為精確、可靠。

整個(gè)裝置結(jié)構(gòu)與現(xiàn)有技術(shù)中的生物檢測(cè)裝置相比，也更為簡(jiǎn)單，體積小，不需要外部供源，成本價(jià)格更低，具有更好的經(jīng)濟(jì)效益，同時(shí)使用非常方便且不需要笨重的輔助設(shè)備，并且操作的簡(jiǎn)便性使得非專業(yè)人員都可自行進(jìn)行檢測(cè)及判讀結(jié)果，消除了信息滯后性。

本發(fā)明的生物樣本檢測(cè)裝置為密閉性良好的一次性用品，消除了污染的可能性。

附圖說(shuō)明

圖1是本發(fā)明一種生物樣本檢測(cè)裝置的整體結(jié)構(gòu)圖；

螺旋蓋1

收樣區(qū)2

刻度線3

一號(hào)隔層4

提取區(qū)5

二號(hào)隔層6

濾膜7

擴(kuò)增區(qū)8

升溫貼9

檢測(cè)區(qū)10

三號(hào)隔層11

導(dǎo)向嘴12

樣本墊13

腔筒14

試紙條15

有色顆粒結(jié)合墊16

纖維膜17

吸水濾紙墊18

檢測(cè)線19

質(zhì)控線20

圖2是試紙條的平面圖；

圖3是隔層的平面圖；

圖4是隔層的立體結(jié)構(gòu)圖。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合附圖進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但并非限制本發(fā)明。

如圖1所示，檢測(cè)棒裝置：包含收樣區(qū)2、提取區(qū)5、擴(kuò)增區(qū)8、檢測(cè)區(qū)10?？焖偬崛≡谔崛^(qū)5完成；恒溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)在擴(kuò)增區(qū)8完成；核酸試紙條檢測(cè)方式和實(shí)時(shí)解讀結(jié)果在檢測(cè)區(qū)10完成。

本實(shí)施例1以酒精基因檢測(cè)為例，檢測(cè)人體中adh1b基因的活性：

實(shí)施具體步驟如下：

1.打開(kāi)螺旋蓋1，向收樣區(qū)2加入被檢樣本（唾液、血液）200ul，收樣區(qū)2的外壁有刻度線3。

2.用力擰緊螺旋蓋1之后，再擠壓收樣區(qū)2的外壁，打開(kāi)第一隔層4，讓樣本進(jìn)入提取區(qū)5。

3.上下顛倒1min，溶解混勻提取區(qū)5內(nèi)附著的干態(tài)裂解試劑、蛋白酶k、carrierrna等核酸提取試劑干粉，混勻放置10min后，擠壓提取區(qū)5的外壁打開(kāi)第二隔層6，讓液體流經(jīng)濾膜7后進(jìn)入擴(kuò)增區(qū)8。

4.上下顛倒1min，溶解混勻擴(kuò)增區(qū)8內(nèi)附著的擴(kuò)增體系的干粉，撕開(kāi)擴(kuò)增區(qū)8外表面的升溫貼9的外膜，升溫貼9開(kāi)始給擴(kuò)增區(qū)8持續(xù)加熱，保證擴(kuò)增區(qū)8是在一個(gè)恒溫條件下進(jìn)行的擴(kuò)增，放置20min后，擠壓擴(kuò)增區(qū)8的外壁打開(kāi)第三隔層11，讓液體通過(guò)導(dǎo)向嘴12后進(jìn)入檢測(cè)區(qū)10的樣本墊13。

5.在吸水濾紙墊18的作用下，進(jìn)入了樣本墊13的樣本會(huì)依次經(jīng)過(guò)有色顆粒結(jié)合墊16、纖維膜17、吸水濾紙墊18、檢測(cè)線19、質(zhì)控線20，整個(gè)試紙條15的檢測(cè)在5min內(nèi)完成。

6.所述的有色顆粒結(jié)合墊16上含有c抗原，質(zhì)控線20含有c抗體，所以不管擴(kuò)增產(chǎn)物是否有目的基因，質(zhì)控線20都會(huì)顯色，如果不顯色表明此結(jié)果不準(zhǔn)確。

檢測(cè)線19含有待檢測(cè)基因的抗體。

7.結(jié)果判讀：

1.當(dāng)質(zhì)控線20不顯色，則表示此次檢測(cè)不成功；

2.當(dāng)質(zhì)控線20顯色的情況下：

檢測(cè)線19顯色，表示adh1b有活性，不顯色則adh1b沒(méi)活性。

以上所述僅為本發(fā)明的實(shí)施例，并非因此限制本發(fā)明的專利范圍，凡是利用本發(fā)明說(shuō)明書(shū)內(nèi)容所作的等效變換，或直接或間接運(yùn)用在其他相關(guān)的技術(shù)領(lǐng)域，均同理包括在本發(fā)明的專利保護(hù)范圍內(nèi)。