本發(fā)明屬于藥物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，主要涉及一種具有抗腫瘤活性的2h-苯并[b][1,4]噁嗪并吡唑化合物的制備方法。
背景技術(shù)：
雜環(huán)化合物是有機(jī)化合物中最龐大的一類，約占65％以上，而且在自然界分布也十分廣泛，其化學(xué)結(jié)構(gòu)千變?nèi)f化，各自有著特殊的性質(zhì)和重要用途。苯并噁嗪類物質(zhì)(benzoxazinoid,bx)是一類廣泛存在于喬本科植物中的次生代謝物，具有廣譜抗病抗蟲活性。這些化合物以丁布為代表，是研究昆蟲和植物相互關(guān)系的重要化合物?；诒讲f嗪化合物的重要作用，近年來人們對(duì)這類化合物進(jìn)行了廣泛的研究，合成了不少具有生物活性的化合物。吡唑擁有多種生理作用，包括止痛、抗發(fā)炎、退燒、抗心律失常、鎮(zhèn)靜、松弛肌肉、精神興奮、抗痙攣、一元胺氧化酶抑制劑，抗糖尿病和抗菌。吡唑可作為某些醫(yī)藥、農(nóng)藥的中間體，在醫(yī)藥、農(nóng)藥的研究開發(fā)中占有十分重要的地位。吡唑類化合物因其作用譜廣、藥效強(qiáng)烈等特點(diǎn)而受到越來越多的關(guān)注。在醫(yī)藥應(yīng)用上吡唑類化合物對(duì)許多的疾病具有療效；在農(nóng)藥應(yīng)用上，吡唑類化合物具有殺蟲、殺菌和除草活性，并且表現(xiàn)出高效、低毒和結(jié)構(gòu)多樣性。因此，吡唑類藥物具有廣闊的研究和開發(fā)前景。吡唑也可作為某些光敏材料單體的側(cè)鏈，具有廣泛的應(yīng)用。結(jié)合兩種結(jié)構(gòu)的優(yōu)勢(shì)，我們?cè)O(shè)計(jì)合成出一系列新的2h-苯并[b][1,4]噁嗪并吡唑化合物，并對(duì)其進(jìn)行了抗腫瘤活性測(cè)試。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明解決的技術(shù)問題是提供了一種合成方法簡(jiǎn)單，分子結(jié)構(gòu)新穎，具有抗腫瘤活性的2h-苯并[b][1,4]噁嗪并吡唑化合物及其制備方法。
本發(fā)明為解決上述技術(shù)問題采用如下技術(shù)方案，一種新型的具有抗腫瘤活性的2h-苯并[b][1,4]噁嗪并吡唑化合物的制備方法，其特征在于具體步驟為：
a、鄰氨基苯乙基溴與一氧化碳，在醋酸鈀作為催化劑，碳酸鈉作為堿性物質(zhì)，甲苯作為溶劑，反應(yīng)得到苯并哌啶酮。
b、苯并哌啶酮在勞森試劑作用下，甲苯作為溶劑，反應(yīng)得到苯并哌啶硫酮。
c、苯并哌啶硫酮在乙二胺作用下經(jīng)過烯醇式轉(zhuǎn)變得到化合物3,4-二氫化氮雜萘-2-硫醇
d、3,4-二氫化氮雜萘-2-硫醇與溴代丙醛在三乙胺作用下得到
e、
f、
g、
h、
進(jìn)一步限定，步驟a的具體過程為：在高壓釜中，把鄰氨基苯乙基溴、一定量的醋酸鈀和一定量的碳酸鈉加入甲苯中，用氮?dú)庵脫Q反應(yīng)釜中的氣體后，在真空條件下通入一氧化碳使反應(yīng)釜中的壓力達(dá)到0.2mpa；緩慢升高溫度至50℃，反應(yīng)4h后tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全，過濾反應(yīng)液，在真空條件下蒸除溶劑，剩余物加入二氯甲烷中，再用純凈水洗滌三次，有機(jī)相經(jīng)無水硫酸鈉干燥后，蒸除溶劑得到苯并哌啶酮。
進(jìn)一步限定，步驟b的具體過程為：在反應(yīng)瓶中加入苯并哌啶酮、勞森試劑和苯酚，加熱回流10h，把反應(yīng)液加入冰水中冷卻，用二氯甲烷萃取三次，合并有機(jī)相，減壓蒸餾出二氯甲烷，得到苯并哌啶硫酮。
進(jìn)一步限定，步驟c的具體過程為：在反應(yīng)瓶中，把苯并哌啶硫酮加入丙酮中，再加入一定量的二乙胺，加入回流一點(diǎn)時(shí)間后，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全，蒸除溶劑得到化合物3,4-二氫化氮雜萘-2-硫醇。
進(jìn)一步限定，步驟d的具體過程為：在反應(yīng)瓶中，把3,4-二氫化氮雜萘-2-硫醇加入到dmf中，再加入一定量的三乙胺和溴代丙醛，升溫至110℃反應(yīng)1h，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全，把反應(yīng)液倒入冰水中，有大量固體析出，抽濾反應(yīng)液，濾餅為純品化合物
進(jìn)一步限定，步驟e的具體過程為：在反應(yīng)瓶中，把
進(jìn)一步限定，步驟f的具體過程為：在反應(yīng)瓶中，把
進(jìn)一步限定，步驟a的具體過程為：在高壓釜中，把
進(jìn)一步限定，步驟n的具體過程為：在反應(yīng)瓶中，把
本發(fā)明所述的具有抗腫瘤活性的2h-苯并[b][1,4]噁嗪并吡唑化合物的制備方法中的合成路線為：
本發(fā)明合成了一系列具有抗腫瘤活性的2h-苯并[b][1,4]噁嗪并吡唑化合物，發(fā)現(xiàn)該化合物對(duì)肺癌細(xì)胞a549具有較好的抑制作用。
具體實(shí)施方式
以下通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容做進(jìn)一步詳細(xì)說明，但不應(yīng)該將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)施例，凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例1
在高壓釜中，把鄰氨基苯乙基溴20g(0.1mol)、醋酸鈀2g和碳酸鈉20g加入甲苯100ml中，用氮?dú)庵脫Q反應(yīng)釜中的氣體后，在真空條件下通入一氧化碳使反應(yīng)釜中的壓力達(dá)到0.2mpa；緩慢升高溫度至50℃，反應(yīng)4h后tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全，過濾反應(yīng)液，在真空條件下蒸除溶劑，剩余物加入二氯甲烷200ml中，再用純凈水50ml洗滌三次，有機(jī)相經(jīng)無水硫酸鈉干燥后，蒸除溶劑得到苯并哌啶酮13g
實(shí)施例2
在反應(yīng)瓶中加入苯并哌啶酮15g(0.1mol)、勞森試劑30g和甲苯100ml，加熱回流10h，把反應(yīng)液加入冰水中冷卻，用二氯甲烷100ml萃取三次，合并有機(jī)相，減壓蒸餾出二氯甲烷，得到苯并哌啶硫酮15g
實(shí)施例3
在反應(yīng)瓶中，把苯并哌啶硫酮16.3g加入丙酮200ml中，再加入二乙胺50ml，加熱回流一段時(shí)間后，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全，蒸除溶劑得到化合物3,4-二氫化氮雜萘-2-硫醇16g
實(shí)施例4
在反應(yīng)瓶中，把3,4-二氫化氮雜萘-2-硫醇16g加入到dmf100ml中，再加入三乙胺30ml和溴代丙醛12g(0.1mol)，升溫至110℃反應(yīng)1h，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全，把反應(yīng)液倒入冰水中，有大量固體析出，抽濾反應(yīng)液，濾餅為純品化合物
實(shí)施例5
在反應(yīng)瓶中，把
實(shí)施例6
在反應(yīng)瓶中，把
實(shí)施例7
在高壓釜中，把
實(shí)施例8
反應(yīng)瓶中，把
實(shí)施例9
抗腫瘤活性測(cè)試
收集生長(zhǎng)期肺癌細(xì)胞a549，以mts法測(cè)定一下化合物的抗癌活性，將細(xì)胞以適當(dāng)濃度(每毫升4×104個(gè)細(xì)胞)加到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中(含10％胎小牛血清得培養(yǎng)液配成單個(gè)細(xì)胞懸液)，培養(yǎng)24小時(shí)后，在37℃、體積濃度為5％的co2條件下與不同濃度的化合物作用72小時(shí)，然后將mts(最終質(zhì)量濃度2mg/ml)和dms(最終摩爾濃度30μm)的混合物直接加入含細(xì)胞的培養(yǎng)基中，繼續(xù)置培養(yǎng)箱孵育4h。作用4h后，棄去上清液，每孔加入150μldmso，振蕩，細(xì)胞存活率通過其對(duì)mts作用的代謝物在酶聯(lián)免疫監(jiān)測(cè)儀490nm波長(zhǎng)下的吸收率測(cè)定。
初步生物活性測(cè)試表明，該類化合物苯磺酸上的鄰位取代基為吸電子基團(tuán)比給電子基團(tuán)對(duì)肺癌細(xì)胞a549的抑制作用要好。
綜上所述，本發(fā)明提供了一種具有抗腫瘤活性的2h-苯并[b][1,4]噁嗪并吡唑化合物及其制備方法，這是該類化合物該用途的首次發(fā)現(xiàn)，具有重大的研發(fā)潛力。
以上實(shí)施例描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征及優(yōu)點(diǎn)，本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)施例的限制，上述實(shí)施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明原理的范圍下，本發(fā)明還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)均落入本發(fā)明保護(hù)的范圍內(nèi)。