本發(fā)明屬于青蒿酸提取
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體的說，涉及一種從生產(chǎn)青蒿素的提取液中提取青蒿酸的方法。
背景技術(shù)：
：青蒿素是從植物黃花蒿莖葉中提取的有過氧基團的倍半萜內(nèi)酯藥物。其對鼠瘧原蟲紅內(nèi)期超微結(jié)構(gòu)的影響，主要是瘧原蟲膜系結(jié)構(gòu)的改變，該藥首先作用于食物泡膜、表膜、線粒體，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，此外對核內(nèi)染色質(zhì)也有一定的影響。提示青蒿素的作用方式主要是干擾表膜-線粒體的功能?？赡苁乔噍锼刈饔糜谑澄锱菽?，從而阻斷了營養(yǎng)攝取的最早階段，使瘧原蟲較快出現(xiàn)氨基酸饑餓，迅速形成自噬泡，并不斷排出蟲體外，使瘧原蟲損失大量胞漿而死亡。體外培養(yǎng)的惡性瘧原蟲對氚標記的異亮氨酸的攝入情況也顯示其起始作用方式可能是抑制原蟲蛋白合成。青蒿素來源主要是從青蒿中直接提取得到，而在提取青蒿中會產(chǎn)生含量較高的副產(chǎn)物青蒿酸，從青蒿中提取青蒿素的方法是以萃取原理為基礎(chǔ)，主要有乙醚浸提法和溶劑汽油浸提法。產(chǎn)生的青蒿酸還可以加工成為青蒿素，所以，青蒿酸的利用價值仍然很高，但是在青蒿素的提取過程中則會造成青蒿酸的大量浪費，資源得不到有效利用。技術(shù)實現(xiàn)要素：為解決以上技術(shù)問題，本發(fā)明的目的在于提供一種從生產(chǎn)青蒿素的提取液中提取青蒿酸的方法，由于青蒿酸是在生產(chǎn)青蒿素過程中可得的一種副產(chǎn)物，且又是半合成青蒿素的原料，因此在生產(chǎn)中能及時分離出含量相對較高的青蒿酸，作為一種產(chǎn)品，能顯著降低青蒿素的生產(chǎn)成本。本發(fā)明目的是這樣實現(xiàn)的：一種從生產(chǎn)青蒿素的提取液中提取青蒿酸的方法，其特征在于按以下步驟進行：a、收集青蒿素生產(chǎn)過程中的石油醚-乙酸乙酯洗脫液；b、將收集的石油醚-乙酸乙酯洗脫液濃縮后以層析法進行分離，然后用甲醇、乙醇、丙酮或乙酸乙酯溶劑進行洗脫，收集富含青蒿酸的洗脫液；c、將收集的富含青蒿酸洗脫液濃縮后靜置結(jié)晶，得粗晶；d、將青蒿酸粗晶以石油醚溶解，并進行重結(jié)晶即得青蒿酸成品。所述青蒿酸成品在重氮甲烷/碘甲烷/酸的催化下與甲醇反應，再在氯化鎳存在的條件下，被硼氫化鈉選擇性還原得到二氫青蒿酸甲酯；二氫青蒿酸甲酯在四氫呋喃或乙醚溶液中用氫化鋁鋰還原成青蒿醇；青蒿醇在甲醇/二氯甲烷/氯仿/四氯化碳溶液中被臭氧氧化后得到過氧化物，抽干后再在二甲苯中用對甲苯磺酸處理得到環(huán)狀烯醚；環(huán)狀烯醚溶解于溶劑中，在光敏劑玫瑰紅/亞甲基藍/竹紅菌素等存在下進行光氧化合生成二氧四環(huán)中間體，再用酸處理得到脫羧青蒿素；脫羧青蒿素在四氧化釕氧化體系或鉻酸類氧化劑的作用下氧化得到青蒿素?？偟寐始s為35～50％。優(yōu)選地，上述步驟b中石油醚-乙酸乙酯洗脫液洗脫液濃縮至該洗脫液原體積的1/2～1/5。優(yōu)選地，上述步驟b中石油醚-乙酸乙酯洗脫液濃縮至該洗脫液原體積的1/5。優(yōu)選地，上述步驟b中的柱層析介質(zhì)為氧化鋁、活性炭或硅膠。優(yōu)選地，上述柱層析介質(zhì)為硅膠。優(yōu)選地，上述層析硅膠的活性為80～300％。優(yōu)選地，上述層析硅膠的活性優(yōu)選為200％。優(yōu)選地，上述步驟b中層析分離采用的洗脫溶劑為甲醇。優(yōu)選地，上述步驟c中富含青蒿酸洗脫液的濃縮比為該洗脫液原體積的1/20～1/100。優(yōu)選地，上述富含青蒿酸洗脫液的濃縮比為原體積的1/80。一、硅膠活性對青蒿酸提取的影響首先收集相同批次青蒿素生產(chǎn)過程中的石油醚-乙酸乙酯洗脫液，分為8組，體積均為2400l，并均濃縮至480l，每組分別將活性為80％、120％、160％、200％、240％、280％、300％、320％的硅膠上柱進行層析分離，以不同濃度梯度的甲醇溶液洗脫，收集富含青蒿酸洗脫液，濃縮比1/80，結(jié)晶，得粗晶。粗晶以石油醚為溶劑加熱溶解后，放置冷卻結(jié)晶，干燥，得青蒿酸，并稱重記錄。表1硅膠活性對青蒿酸提取的影響實驗組硅膠活性(％)青蒿酸成品(kg)1800.9921201.0431601.0742001.1052401.0862801.0573001.0283200.80結(jié)果說明：硅膠的活性在200％時，青蒿酸成品的產(chǎn)量最高。二、石油醚-乙酸乙酯洗脫液濃縮比對青蒿酸提取的影響首先收集相同批次青蒿素生產(chǎn)過程中的石油醚-乙酸乙酯洗脫液，分為5組，體積均為2400l，各組的洗脫液分別按濃縮比1/6、1/5、1/4、1/3、1/2濃縮至400l、480l、600l、800l、1200l，并將活性為200％的硅膠上柱進行層析分離，以不同濃度梯度的甲醇溶液洗脫，收集富含青蒿酸洗脫液，濃縮比1/80，結(jié)晶，得粗晶。粗晶以石油醚為溶劑加熱溶解后，放置冷卻結(jié)晶，干燥，得青蒿酸，并稱重記錄。表2石油醚-乙酸乙酯洗脫液濃縮比對青蒿酸提取的影響實驗組濃縮比青蒿酸成品(kg)11/60.8121/51.1031/41.0741/31.0451/21.01結(jié)果說明：石油醚-乙酸乙酯洗脫液濃縮比為1/5時，青蒿酸成品的產(chǎn)量最高。有益效果：本發(fā)明一種從生產(chǎn)青蒿素的提取液中提取青蒿酸的方法，由于青蒿酸是在生產(chǎn)青蒿素過程中可得的一種副產(chǎn)物，且又是半合成青蒿素的原料，因此在生產(chǎn)中能及時分離出含量相對較高的青蒿酸，作為一種產(chǎn)品，能顯著降低青蒿素的生產(chǎn)成本。具體實施方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步說明。實施例1：收集某批青蒿素生產(chǎn)過程中石油醚-乙酸乙酯洗脫液2000l，濃縮至400l，以活性為200％的硅膠上柱進行層析分離，以不同濃度梯度甲醇洗脫，富集含青蒿酸洗脫液，濃縮至其原體積的1/80，結(jié)晶，得粗晶。粗晶以石油醚為溶劑加熱溶解后，放置冷卻結(jié)晶，干燥，得青蒿素酸1.02kg。實施例2：收集某批青蒿素生產(chǎn)過程中石油醚-乙酸乙酯洗脫液2200l，濃縮至600l，以活性為240％的硅膠上柱進行層析分離，以不同濃度梯度乙醇洗脫，富集含青蒿酸洗脫液，濃縮至其原體積的1/60，結(jié)晶，得粗晶。粗晶以石油醚為溶劑加熱溶解后，放置冷卻結(jié)晶，干燥，得青蒿素酸0.99kg。實施例3：收集某批青蒿素生產(chǎn)過程中石油醚-乙酸乙酯洗脫液2400l，濃縮至500l，以活性為180％的硅膠上柱進行層析分離，以不同濃度梯度甲醇洗脫，富集含青蒿酸洗脫液，濃縮至其原體積的1/70，結(jié)晶，得粗晶。粗晶以石油醚為溶劑加熱溶解后，放置冷卻結(jié)晶，干燥，得青蒿素酸1.04kg。實施例4：收集某批青蒿素生產(chǎn)過程中石油醚-乙酸乙酯洗脫液1800l，濃縮至600l，以活性為260％的硅膠上柱進行層析分離，以不同濃度梯度乙醇洗脫，富集含青蒿酸洗脫液，濃縮至其原體積的1/90，結(jié)晶，得粗晶。粗晶以石油醚為溶劑加熱溶解后，放置冷卻結(jié)晶，干燥，得青蒿素酸1.01kg。實施例5：收集某批青蒿素生產(chǎn)過程中石油醚-乙酸乙酯洗脫液2100l，濃縮至700l，以活性為200％的硅膠上柱進行層析分離，以丙酮洗脫，富集含青蒿酸洗脫液，濃縮至其原體積的1/30，結(jié)晶，得粗晶。粗晶以石油醚為溶劑加熱溶解后，放置冷卻結(jié)晶，干燥，得青蒿素酸0.97kg。實施例6：收集某批青蒿素生產(chǎn)過程中石油醚-乙酸乙酯洗脫液2300l，濃縮至600l，以活性為220％的硅膠上柱進行層析分離，以乙酸乙酯洗脫，富集含青蒿酸洗脫液，濃縮至其原體積的1/20，結(jié)晶，得粗晶。粗晶以石油醚為溶劑加熱溶解后，放置冷卻結(jié)晶，干燥，得青蒿素酸0.98kg。實施例7：收集某批青蒿素生產(chǎn)過程中石油醚-乙酸乙酯洗脫液2400l，濃縮至480l，以活性為200％的硅膠上柱進行層析分離，以甲醇洗脫，富集含青蒿酸洗脫液，濃縮至其原體積的1/80，結(jié)晶，得粗晶。粗晶以石油醚為溶劑加熱溶解后，放置冷卻結(jié)晶，干燥，得青蒿素酸1.08kg。實施例8：收集某批青蒿素生產(chǎn)過程中石油醚-乙酸乙酯洗脫液2400l，濃縮至1200l，以活性為80％的硅膠上柱進行層析分離，以乙酸乙酯洗脫，富集含青蒿酸洗脫液，濃縮其原體積的1/80，結(jié)晶，得粗晶。粗晶以石油醚為溶劑加熱溶解后，放置冷卻結(jié)晶，干燥，得青蒿素酸0.94kg。最后需要說明的是，上述描述僅僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員在本發(fā)明的啟示下，在不違背本發(fā)明宗旨及權(quán)利要求的前提下，可以做出多種類似的表示，這樣的變換均落入本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。當前第1頁12