本發(fā)明涉及一種中國被毛飽菌的生產(chǎn)方法,特別是一種能輔助降血糖的中國被毛孢菌粉的生產(chǎn)方法。
背景技術(shù):
:隨著社會經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和人們膳食結(jié)構(gòu)和生活方式的改變,糖尿(diabetesmellitus,DM)已經(jīng)成為嚴(yán)重危害人類健康的慢性疾病。飲食和營養(yǎng)治療是糖尿病治療的重要組成部分。通過膳食和保健食品預(yù)防和控制糖尿病成為一種趨勢。輔助降血糖保健食品主要是天然植物性食品或提取物,其來源廣泛,降糖效果和作用機(jī)理也不盡相同。冬蟲夏草是我國二級保護(hù)物種,是我國名貴的中藥材瑰寶,它在我國民間流傳應(yīng)用也已有兩千多年的歷史。冬蟲夏草不僅是具有良好保健功能的藥用真菌,而且是具有很高營養(yǎng)價值的高檔滋補(bǔ)食用真菌,隨著人們生活水平和生活質(zhì)量的提高,對功能保健產(chǎn)品的需求也日趨擴(kuò)大。由于野生冬蟲夏草分布地區(qū)狹窄、自然寄生率低、對生活環(huán)境條件要求苛刻,所以本身資源比較有限。近年來冬蟲夏草主產(chǎn)地生態(tài)環(huán)境遭到人為嚴(yán)重破壞,大量盲目不合理采挖致使資源日趨減少,產(chǎn)量逐年下降。而冬蟲夏草由于可以藥食兩用,且人們不斷發(fā)現(xiàn)其新的藥理作用,所以多個國家對它的需要倍增,價格逐年上漲,國際市場日益緊缺。因野生資源逐年枯竭,冬蟲夏草的資源保護(hù)和可持續(xù)利用一直是行業(yè)內(nèi)外廣泛關(guān)注的焦點,人工發(fā)酵方法生產(chǎn)的冬蟲夏草菌絲粉慢慢被人們知曉和認(rèn)可。冬蟲夏草無性型菌種中國被毛孢(HirsutellasinensisLu,Guo,YuetZeng),目前國內(nèi)許多個人和單位研究和公開冬蟲夏草培養(yǎng)基和發(fā)酵生產(chǎn)方法,但是,這些技術(shù)多采用微生物發(fā)酵常用培養(yǎng)基,基本上以蛋、奶、馬鈴薯作為發(fā)酵食源,培養(yǎng)基成分的選擇,雖然都是按照微生物學(xué)的發(fā)酵原理使菌種能夠生長,但食源的不同必然造成菌絲體的性質(zhì)有所差異,所生產(chǎn)的冬蟲夏草發(fā)酵產(chǎn)品在化學(xué)成分和活性物質(zhì)與天然冬蟲夏草有差異,因而現(xiàn)有技術(shù)中培育出的冬蟲夏草普遍存在質(zhì)量差,營養(yǎng)成分含量較低。目前還沒有見到用中國被毛孢菌來進(jìn)行降低血糖的報道。技術(shù)實現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的是要克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷,提供一種能輔助降血糖的中國被毛孢菌粉的生產(chǎn)方法。本發(fā)明的技術(shù)方案是:其點是該方法含有以下步驟:步驟一:中國被毛孢菌的培養(yǎng)固體培養(yǎng)的培養(yǎng)基(一)按重量百分比如下:菊芋洗凈切塊10~50%,麩皮1~5%,葡萄糖1~3%,蛋白胨0.3~3%,少量微量元素和維生素其余為水,按總體積添加0.1~1%的瓊脂做凝固劑;分裝滅菌接種培養(yǎng);培養(yǎng)條件:溫度10~20℃,PH6.5~7.5,通氣量0.2~2VVM,微量自然光或避光培養(yǎng);培養(yǎng)28~45天;固體培養(yǎng)的培養(yǎng)基(二)按重量百分比如下:菊芋洗凈切塊10~50%,葡萄糖0.5~1%,大米10~20%,麩皮1~5%,蛋白胨0.1~1%,酵母膏0.2~2%,少量微量元素和維生素其余為水,按總體積添加0.1~1%的瓊脂做凝固劑;分裝滅菌接種培養(yǎng);培養(yǎng)條件:溫度10~20℃,PH6.5~7.5,通氣量0.2~2VVM,微量自然光或避光培養(yǎng);培養(yǎng)28~45天;液體培養(yǎng)基(一)按重量百分比:菊芋洗凈切塊10~50%,麩皮1~5%,葡萄糖1~3%,蛋白胨0.3~3%,少量微量元素和維生素其余為水,上述各種原料按百分比投料,加水1.5倍煮開保持20~40分鐘,沉淀過濾;培養(yǎng)條件:溫度10~20℃,PH6.5~7.5,通氣量0.2~2VVM,微量自然光或避光培養(yǎng);4級培養(yǎng),每級7~10天;液體培養(yǎng)基(二)按重量百分比:菊芋洗凈切塊10~50%,葡萄糖0.5~1%,大米10~20%,麩皮1~5%,蛋白胨0.1~1%,酵母膏0.2~2%,少量微量元素和維生素其余為水,上述各種原料按百分比投料,加水1.5倍煮開保持20~40分鐘,沉淀過濾;培養(yǎng)條件:溫度10~20℃,PH6.5~7.5,通氣量0.2~2VVM,微量自然光或避光培養(yǎng);4級培養(yǎng),每級7~10天;步驟二:濃縮,干燥,粉碎,得中國被毛孢菌粉。優(yōu)選的微量元素為K或Na或Mg或Zn或Cu或Mn中的一種或任意幾種;按培養(yǎng)基重量百分比0.01~1%添加。本發(fā)明具有如下的優(yōu)點和效果:1、對動物降低血糖有明顯的效果。建立動物模型:胰島損傷高血糖模型,觀察不同劑量的冬蟲夏草對該模型損傷的修復(fù)作用。實驗方法:購入成年昆明小鼠50只,適應(yīng)1天后,隨機(jī)取10只為正常對照組,其余小鼠禁食12小時(自由飲水),注射四氧嘧啶(用前新鮮配制)造模。測血糖,血糖值10-25mmol/L為高血糖模型成功。隨機(jī)選1個模型對照組和3個冬蟲夏草菌粉劑量組。劑量組給予不同濃度冬蟲夏草粉混懸液(1g/(kg·d)、2g/(kg·d)、3.0g/(kg·d)),模型對照組給予空白溶劑,連續(xù)15天,按照試劑盒說明進(jìn)行測定血糖及胰島素值。冬蟲夏草菌粉對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖濃度及胰島素的影響組別動物數(shù)血糖(mmol/L)胰島素(pmol/L)正常對照組108.596±2.016446.913±10.904模型組1024.227±5.36218.432±4.221樣品1g/(kg·d)1017.569±3.26540.135±12.998樣品2g/(kg·d)1014.104±2.96838.553±10.985樣品3.0g/(kg·d)1012.108±3.82938.521±9.554與模型對照組相比,冬蟲夏草菌粉各劑量對小鼠血糖降低有明顯效果,并能對胰島素的破壞有一定的抑制作用。2、對人體具有明顯的降低血糖的效果。人體試食:王女士胰腺炎伴糖尿病2年,控制階段無胰島素注射1月,30天前空腹16.55,餐后2小時20.23,口服冬蟲夏草菌粉每日6克,持續(xù)30天,空腹血糖,8.14,餐后2小時血糖9.17,、糖化血紅蛋白(或糖化血清蛋白)、血脂四項指標(biāo)均無明顯升高。高血糖人群服用冬蟲夏草菌粉30~45天血糖改善情況(服用量每日6克)試食人員服用前服用后餐前血糖(mmol/L)服用后餐后血糖(mmol/L)郭先生41歲15.448.54610.12趙女士39歲13.627.8818.32譚先生55歲19.219.8311.25朱先生57歲15.3910.2612.04經(jīng)過幾位試食者實驗,中國被毛孢菌粉對幾位受試者血糖輔助降低方面有明顯效果。具體實施方式實施例1中國被毛孢菌的培養(yǎng)方法:步驟一:中國被毛孢菌的培養(yǎng)固體培養(yǎng)的培養(yǎng)基(一)按重量百分比如下:菊芋洗凈切塊10%,麩皮1%,葡萄糖1%,蛋白胨0.3%,磷酸氫二鉀0.005%,硫酸鎂0.005%,微量維生素,其余為水,按總體積添加0.1%的瓊脂做凝固劑;分裝滅菌接種培養(yǎng);培養(yǎng)條件:溫度10℃,PH6.5,通氣量0.2VVM,微量自然光或避光培養(yǎng);培養(yǎng)28天;固體培養(yǎng)的培養(yǎng)基(二)按重量百分比如下:菊芋洗凈切塊10%,葡萄糖0.5%,大米10%,麩皮1%,蛋白胨0.1%,酵母膏0.2%,磷酸氫二鉀0.02%,微量維生素,其余為水,按總體積添加0.1%的瓊脂做凝固劑;分裝滅菌接種培養(yǎng);培養(yǎng)條件:溫度10℃,PH6.5,通氣量0.2VVM,微量自然光或避光培養(yǎng);培養(yǎng)28天;液體培養(yǎng)基(一)按重量百分比:菊芋洗凈切塊10%,麩皮1%,葡萄糖1%,蛋白胨0.3%,氯化錳0.05%,微量維生素,其余為水,上述各種原料按百分比投料,加水1.5倍煮開保持20分鐘,沉淀過濾;培養(yǎng)條件:溫度10℃,PH6.5,通氣量0.2VVM,微量自然光或避光培養(yǎng);4級培養(yǎng),每級7天;液體培養(yǎng)基(二)按重量百分比:菊芋洗凈切塊10%,葡萄糖0.5%,大米10%,麩皮1%,蛋白胨0.1%,酵母膏0.2%,氯化鈉0.02%、硫酸鎂0.01%、氯化鋅0.01%、硫酸銅0.02%、微量維生素,其余為水,上述各種原料按百分比投料,加水1.5倍煮開保持20分鐘,沉淀過濾;培養(yǎng)條件:溫度10℃,PH6.5,通氣量0.2VVM,微量自然光或避光培養(yǎng);4級培養(yǎng),每級7天;步驟二:濃縮,干燥,粉碎,得中國被毛孢菌粉。實施例2中國被毛孢菌的培養(yǎng)方法:步驟一:中國被毛孢菌的培養(yǎng)固體培養(yǎng)的培養(yǎng)基(一)按重量百分比如下:菊芋洗凈切塊50%,麩皮5%,葡萄糖3%,蛋白胨3%、氯化鈉0.04%,硫酸銅0.04%,氯化錳0.02%,微量維生素,其余為水,按總體積添加1%的瓊脂做凝固劑;分裝滅菌接種培養(yǎng);培養(yǎng)條件:溫度20℃,PH7.5,通氣量2VVM,微量自然光或避光培養(yǎng);培養(yǎng)45天;固體培養(yǎng)的培養(yǎng)基(二)按重量百分比如下:菊芋洗凈切塊50%,葡萄糖1%,大米20%,麩皮5%,蛋白胨1%,酵母膏2%,磷酸氫二鉀0.02%,氯化鈉0.01%,硫酸鎂0.02%,氯化鋅0.01%,硫酸銅0.02%,氯化錳0.01%,微量維生素,其余為水,少量微量元素和維生素其余為水,按總體積添加1%的瓊脂做凝固劑;分裝滅菌接種培養(yǎng);培養(yǎng)條件:溫度20℃,PH7.5,通氣量2VVM,微量自然光或避光培養(yǎng);培養(yǎng)45天;液體培養(yǎng)基(一)按重量百分比:菊芋洗凈切塊50%,麩皮5%,葡萄糖3%,蛋白胨3%,磷酸氫二鉀0.03%,硫酸鎂0.04%,硫酸銅0.03%,微量維生素,其余為水,上述各種原料按百分比投料,加水1.5倍煮開保持40分鐘,沉淀過濾;培養(yǎng)條件:溫度20℃,PH7.5,通氣量2VVM,微量自然光或避光培養(yǎng);4級培養(yǎng),每級10天;液體培養(yǎng)基(二)按重量百分比:菊芋洗凈切塊50%,葡萄糖1%,大米20%,麩皮5%,蛋白胨1%,酵母膏2%,硫酸鎂0.03%,氯化鋅0.03%,硫酸銅0.02%,氯化錳0.02%,微量維生素,其余為水,上述各種原料按百分比投料,加水1.5倍煮開保持40分鐘,沉淀過濾;培養(yǎng)條件:溫度20℃,PH7.5,通氣量2VVM,微量自然光或避光培養(yǎng);4級培養(yǎng),每級10天;步驟二:濃縮,干燥,粉碎,得中國被毛孢菌粉。實施例3中國被毛孢菌的培養(yǎng)方法:步驟一:中國被毛孢菌的培養(yǎng)固體培養(yǎng)的培養(yǎng)基(一)按重量百分比如下:菊芋洗凈切塊30%,麩皮3%,葡萄糖2%,蛋白胨1.5%,氯化錳0.03%,微量維生素,其余為水,按總體積添加0.5%的瓊脂做凝固劑;分裝滅菌接種培養(yǎng);培養(yǎng)條件:溫度15℃,PH7,通氣量1VVM,微量自然光或避光培養(yǎng);培養(yǎng)38天;固體培養(yǎng)的培養(yǎng)基(二)按重量百分比如下:菊芋洗凈切塊30%,葡萄糖0.7%,大米15%,麩皮3%,蛋白胨0.5%,酵母膏1.2%,硫酸銅0.03%,氯化錳0.05%,微量維生素,其余為水,按總體積添加0.6%的瓊脂做凝固劑;分裝滅菌接種培養(yǎng);培養(yǎng)條件:溫度16℃,PH7,通氣量1.5VVM,微量自然光或避光培養(yǎng);培養(yǎng)39天;液體培養(yǎng)基(一)按重量百分比:菊芋洗凈切塊30%,麩皮2%,葡萄糖2%,蛋白胨1.6%,磷酸氫二鉀0.02%,氯化鋅0.02%,硫酸銅0.02%,氯化錳0.02%,微量維生素,其余為水,上述各種原料按百分比投料,加水1.5倍煮開保持30分鐘,沉淀過濾;培養(yǎng)條件:溫度18℃,PH6.7,通氣量1.2VVM,微量自然光或避光培養(yǎng);4級培養(yǎng),每級9天;液體培養(yǎng)基(二)按重量百分比:菊芋洗凈切塊35%,葡萄糖0.8%,大米16%,麩皮2%,蛋白胨0.6%,酵母膏1.6%,磷酸氫二鉀0.02%,氯化鈉0.02%,硫酸鎂0.02%,氯化鋅0.02%,硫酸銅0.02%,微量維生素,其余為水,上述各種原料按百分比投料,加水1.5倍煮開保持35分鐘,沉淀過濾;培養(yǎng)條件:溫度17℃,PH7,通氣量1.4VVM,微量自然光或避光培養(yǎng);4級培養(yǎng),每級9天;步驟二:濃縮,干燥,粉碎,得中國被毛孢菌粉。當(dāng)前第1頁1 2 3