本發(fā)明涉及一種根皮素的提純方法，確切地說(shuō)是一種從湖北海棠葉中提純根皮素的方法。
背景技術(shù)：
根皮素化學(xué)名：3-(4-羥基苯基)-1-(2、4、6-三羥基苯基)-1-丙酮，是黃酮類(lèi)物質(zhì)。根皮素具有很強(qiáng)的保濕作用，同時(shí)還具有良好的抗氧化、抗癌、美白等作用。隨著高純度根皮素的需求量不斷增加，使其具有廣闊的市場(chǎng)前景。
對(duì)于根皮素的提取，一般是先提取根皮苷，再進(jìn)行酶解或酸解后得到根皮素。如專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)枺?01010510889.x，該發(fā)明以蘋(píng)果、海棠葉為原料，將提取液經(jīng)大孔樹(shù)脂純化后，通過(guò)生物酶解，制備得到純度96％以上的根皮素。但酶解法由于具有成本高、反應(yīng)條件苛刻等條件限制了其應(yīng)用。酸解法具有成本低、反應(yīng)速度快等優(yōu)點(diǎn)，但有可能帶來(lái)環(huán)境污染。
湖北海棠廣泛分布于我國(guó)很多省份，枝條和葉中含有豐富的根皮苷，各部位含量在0.9～13％不等，其嫩葉中含量最高，(方榮，等，湖北海棠中根皮苷含量測(cè)定，食品科技，2008年33卷6期)，可以作為提取根皮苷的來(lái)源。從湖北海棠葉中提取根皮苷的報(bào)道相對(duì)較多，如專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)枺?01410346970.7，該發(fā)明利用水提法從湖北海棠葉或嫩枝中提取得到了根皮苷提取物，但并未對(duì)其進(jìn)行進(jìn)一步純化。為了得到純度較高的根皮苷，現(xiàn)有技術(shù)大多用到了大孔樹(shù)脂富集純化，如專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)枺?01510053556.1，該發(fā)明公開(kāi)了一種從湖北海棠嫩枝綠葉中提取不同純度根皮苷的方法，通過(guò)大孔樹(shù)脂吸附和洗脫制備得到了高純度的根皮苷。但由于大孔樹(shù)脂層析具有周期長(zhǎng)，溶劑用量大等缺點(diǎn)，大大限制了產(chǎn)業(yè)化的可能性。
為了克服現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，本發(fā)明采取新的提純方法，為湖北海棠葉中根皮素的開(kāi)發(fā)利用提供了方便。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明旨在為湖北海棠葉中根皮素的開(kāi)發(fā)利用提供數(shù)據(jù)支持。本發(fā)明提供了一種工藝簡(jiǎn)單、成本低廉的根皮素生產(chǎn)工藝，得到的根皮素純度大于98％，并適合進(jìn)行放大生產(chǎn)。
本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
一種從湖北海棠葉中提純根皮素的方法，其特征在于該方法包括如下步驟：
①溶劑回流提取：取湖北海棠嫩葉，每次加入8～12倍的乙醇水溶液，回流提取2次，每次2小時(shí)，合并提取液，減壓濃縮至密度為1.1～1.2。具體的，乙醇水溶液的濃度優(yōu)化為30％～70％；
②醇沉除雜：向①得到的濃縮液中加入3-5倍體積的無(wú)水乙醇進(jìn)行醇沉，4℃條件下過(guò)夜，過(guò)濾得到濾液并減壓濃縮至無(wú)醇味；
③萃?。合虿襟E②得到濃縮液中加入0.3-1體積的中等極性溶劑萃取2次，將萃取液濃縮，烘干得萃取物。具體的，中等極性的溶劑優(yōu)選為為乙酸乙酯、二氯甲烷或乙酸丁酯中的一種；
④結(jié)晶：向步驟③所得萃取物中加入5-10倍量的水進(jìn)行回流溶解，過(guò)濾去除不溶物，在攪拌的條件下，冷卻析晶，過(guò)濾、干燥后得到淡黃色晶體；
⑤酸水解：向步驟④所得晶體中加入其干重8-12倍量一定濃度的鹽酸，在85～95℃條件下攪拌水解4h，冷卻至室溫，調(diào)pH為5～6后過(guò)濾得根皮素粗品。具體的，鹽酸的濃度優(yōu)化為0.5～1.5mol/L；
⑥提取精制：加入步驟⑤所得根皮素粗品干重8-12倍量的中等極性溶劑進(jìn)行回流提取2次，將提取液濃縮后真空干燥即得純度大于98％的根皮素，收率在70％以上。具體的，中等極性的溶劑優(yōu)選為乙酸乙酯、丙酮或二氯甲烷中的一種。
具體的，一種從湖北海棠葉中提純根皮素的方法，其特征在于該方法包括如下步驟：
①溶劑回流提?。喝『焙Ｌ哪廴~，每次加入8～12倍的乙醇水溶液，回流提取2次，每次2小時(shí)，合并提取液，減壓濃縮至密度為1.1～1.2；
②醇沉除雜：向①得到的濃縮液中加入3倍體積的無(wú)水乙醇進(jìn)行醇沉，4℃條件下過(guò)夜，過(guò)濾得到濾液并減壓濃縮至無(wú)醇味；
③萃?。合虿襟E②得到濃縮液中加入0.5倍體積的中等極性溶劑萃取2次，將萃取液濃縮，烘干得萃取物；
④結(jié)晶：向步驟③所得萃取物中加入8倍量的水進(jìn)行回流溶解，過(guò)濾去除不溶物，在攪拌的條件下，冷卻析晶，過(guò)濾、干燥后得到淡黃色晶體；
⑤酸水解：向步驟④所得晶體中加入其干重10倍量的鹽酸，在85～95℃條件下攪拌水解4h，冷卻至室溫，調(diào)pH為5～6后過(guò)濾得根皮素粗品；
⑥提取精制：加入步驟⑤所得根皮素粗品干重10倍量的中等極性溶劑進(jìn)行回流提取2次，將提取液濃縮后真空干燥即得。
與現(xiàn)有提取技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：
1.本發(fā)明中的工藝摒棄了傳統(tǒng)的大孔樹(shù)脂柱純化步驟，節(jié)約了大量時(shí)間和成本；
2.本發(fā)明根皮苷的水解采用的是酸解后中和的方法，避免了酶解帶來(lái)的高額成本以及酸解帶來(lái)的環(huán)境污染；
3.本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單，可以制備得到純度大于98％的根皮素，收率在70％以上。
具體實(shí)施方式
下面通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，但并不因此將本發(fā)明限制在所述的實(shí)施例中。
實(shí)施例1
取湖北海棠干葉5kg(根皮苷含量10.3％)，投入提取罐中，分別加入50L、40L的30％的乙醇回流提取2次，每次2h，提取液過(guò)濾后，減壓濃縮至密度為1.15，加入4倍體積無(wú)水乙醇，醇沉過(guò)夜后過(guò)濾，濾液濃縮至無(wú)醇味，加入1/2體積的乙酸丁酯萃取2次，萃取液濃縮，烘干得到萃取物。加入萃取物8倍量水回流溶解后過(guò)濾，濾液在攪拌的條件下，冷卻析晶，過(guò)濾，干燥后得到淡黃色晶體460.5g，含量93.2％。
將淡黃色晶體加入到10倍量1.5mol/L的鹽酸中，在85～95℃條件下反應(yīng)4h，冷卻至室溫調(diào)pH為5～6，過(guò)濾后濃縮得到根皮素粗品。粗品加入10倍量的丙酮回流提取2次，濾液濃縮，真空干燥得到根皮素240.5g，含量98.3％，總收率為73.1％。
實(shí)施例2
取湖北海棠干葉5kg(根皮苷含量10.3％)，投入提取罐中，分別加入60L、50L的50％的乙醇回流提取2次，每次2h，提取液過(guò)濾后，濾液減壓濃縮至密度為1.18，加入4倍體積無(wú)水乙醇，醇沉過(guò)夜后過(guò)濾，濃縮至無(wú)醇味，加入1/2體積的乙酸乙酯萃取2次，萃取液濃縮，烘干得到萃取物。加入萃取物8倍量水回流溶解后過(guò)濾，濾液在攪拌的條件下，冷卻析晶，過(guò)濾，干燥后得到淡黃色晶體463.0g，含量92.5％。
將淡黃色晶體加入到10倍量1.5mol/L的鹽酸中，在85～95℃條件下反應(yīng)4h，冷卻至室溫調(diào)pH為5～6，過(guò)濾后濃縮得到根皮素粗品。粗品加入10倍量的二氯甲烷回流提取2次，濾液濃縮，真空干燥得到根皮素248.2g，含量99.2％，總收率為76.1％。
實(shí)施例3
取湖北海棠干葉10kg(根皮苷含量10.3％)，投入提取罐中，分別加入120L、80L的70％的乙醇回流提取2次，每次2h，提取液過(guò)濾后，減壓濃縮至密度為1.12，加入4倍體積無(wú)水乙醇，醇沉過(guò)夜后過(guò)濾，濾液濃縮至無(wú)醇味，加入1/2體積的二氯甲烷萃取2次，萃取液濃縮，烘干得到萃取物。加入萃取物8倍量水回流溶解后過(guò)濾，濾液在攪拌的條件下，冷卻析晶，過(guò)濾，干燥后得到淡黃色晶體918.3g，含量91.6％。
將淡黃色晶體加入到10倍量0.5mol/L的鹽酸中，在85～95℃條件下反應(yīng)4h，冷卻至室溫調(diào)pH為5～6，過(guò)濾后濃縮得到根皮素粗品。粗品加入10倍量的乙酸乙酯回流提取2次，濾液濃縮，真空干燥得到根皮素490.0g，含量98.1％，總收率為74.3％。
實(shí)施例4
取湖北海棠干葉10kg(根皮苷含量10.3％)，投入提取罐中，分別加入100L、80L的50％的乙醇回流提取2次，每次2h，提取液過(guò)濾后，減壓濃縮至密度為1.16，加入4倍體積無(wú)水乙醇，醇沉過(guò)夜后過(guò)濾，濾液濃縮至無(wú)醇味，加入1/2體積的乙酸丁酯萃取2次，萃取液濃縮，烘干得到萃取物。加入萃取物8倍量水回流溶解后過(guò)濾，濾液在攪拌的條件下，冷卻析晶，過(guò)濾，干燥后得到淡黃色晶體922.8g，含量92.9％。
將淡黃色晶體加入到10倍量1.0mol/L的鹽酸中，在85～95℃條件下反應(yīng)4h，冷卻至室溫調(diào)pH為5～6，過(guò)濾后濃縮得到根皮素粗品。粗品加入10倍量的乙酸乙酯回流提取2次，濾液濃縮，真空干燥得到根皮素496.3g，含量98.8％，總收率為75.8％。
實(shí)施例5
取湖北海棠干葉5kg(根皮苷含量10.3％)，投入提取罐中，分別加入60L、50L的50％的乙醇回流提取2次，每次2h，提取液過(guò)濾后，濾液減壓濃縮至密度為1.18，加入3倍體積無(wú)水乙醇，醇沉過(guò)夜后過(guò)濾，濃縮至無(wú)醇味，加入0.3體積的乙酸乙酯萃取2次，萃取液濃縮，烘干得到萃取物。加入萃取物5倍量水回流溶解后過(guò)濾，濾液在攪拌的條件下，冷卻析晶，過(guò)濾，干燥后得到淡黃色晶體460.0g，含量92.5％。
將淡黃色晶體加入到8倍量1.0mol/L的鹽酸中，在85～95℃條件下反應(yīng)2h，冷卻至室溫調(diào)pH為5～6，過(guò)濾后濃縮得到根皮素粗品。粗品加入8倍量的乙酸乙酯回流提取2次，濾液濃縮，真空干燥得到根皮素496.3g，含量98.5％，總收率為75.5％。
實(shí)施例6
取湖北海棠干葉10kg(根皮苷含量10.3％)，投入提取罐中，分別加入100L、80L的50％的乙醇回流提取2次，每次2h，提取液過(guò)濾后，減壓濃縮至密度為1.16，加入5倍體積無(wú)水乙醇，醇沉過(guò)夜后過(guò)濾，濾液濃縮至無(wú)醇味，加入1體積的乙酸乙酯萃取2次，萃取液濃縮，烘干得到萃取物。加入萃取物10倍量水回流溶解后過(guò)濾，濾液在攪拌的條件下，冷卻析晶，過(guò)濾，干燥后得到淡黃色晶體918.8g，含量92.7％。
將淡黃色晶體加入到12倍量1.0mol/L的鹽酸中，在85～95℃條件下反應(yīng)6h，冷卻至室溫調(diào)pH為5～6，過(guò)濾后濃縮得到根皮素粗品。粗品加入12倍量的丙酮回流提取2次，濾液濃縮，真空干燥得到根皮素493.1g，含量98.3％，總收率為74.9％。