二氫吡啶并吡嗪?1,8?二酮和它們在治療、改善或預防病毒疾病中的用途的制作方法

發(fā)明領域

本發(fā)明涉及通式(v)的化合物，其任選是藥學上可接受的鹽、溶劑合物、多晶型物、共用藥物(codrug)、共晶(cocrystal)、前藥、互變異構體、外消旋物、對映體或非對映體或其混合物的形式，

其可用于治療、改善或預防病毒疾病。此外，本發(fā)明還公開了特定的組合治療。

發(fā)明背景

最近一些年，流感病毒感染對全球的公共健康所造成的嚴重威脅已經凸顯在以下方面：首先，高致病性鳥甲型流感病毒h5n1病毒株向人類的持續(xù)性低傳播(在被感染的人中死亡率為63％，http://www.who.int/csr/disease/avian_influenza/en/)，第二，在2009年出乎預料地出現(xiàn)了新的大流行流感病毒株a/h1n1，其已經迅速擴散到全世界(http://www.who.int/csr/disease/swineflu/en/)。盡管該新病毒株具有高度接觸傳染性、但目前通常僅產生輕度疾患，然而這種病毒將來的演變是不可預期的。在一種嚴重得多的、但是高度合理的情形中，h5n1和相關的高致病性鳥流感病毒可能獲得了使其在人之間更容易傳播的突變或者新的a/h1n1可能變得毒力更強且僅單點突變將足以產生對奧塞米韋的抗性(neumann等,nature,2009(18；459(7249)931-939))；如許多季節(jié)性h1n1病毒株最近已經顯示的那樣(dharan等,thejournaloftheamericanmedicalassociation,2009年3月11日；301(10),1034-1041；moscona等,thenewenglandjournalofmedicine,2009(3月5日；360(10)pp953-956))。在這種情況下，生產和使用疫苗的延遲(在a/h1n1的較有利的情況下為～6個月，對于h5n1而言仍然是沒有解決的問題)在人類生活和社會瓦解方面可能已經是災難性的代價。

廣泛公認的是，為了跨越可獲得新疫苗并治療嚴重情況以及克服病毒抗藥性問題之前的這段時間，需要更寬泛的抗流感藥選擇。因此，在獲得神經氨酸酶抑制劑后大制藥公司已經大半放棄了開發(fā)新的抗流感藥，但開發(fā)新的抗流感藥已經再次變得具有高度優(yōu)先性。

開發(fā)抗病毒藥的一個良好起點是重要病毒蛋白質的結構信息。因此，例如流感病毒表面抗原神經氨酸酶的晶體結構測定(vonitzstein,m.等,(1993),nature,363,pp.418-423)直接導致了開發(fā)具有抗病毒活性的神經氨酸酶抑制劑，其阻止病毒從細胞中被釋放，但是不阻止病毒產生本身。隨后這些神經氨酸酶抑制劑以及它們的衍生物已經被開發(fā)成抗流感藥扎那米韋(glaxo)和奧塞米韋(roche)，它們目前被許多國家作為對抗可能的大流行病的一線防御措施進行儲備。然而，這些藥物僅縮短臨床疾病的持續(xù)時間。或者，其它種類的被批準的抗流感化合物(例如金剛烷胺和金剛乙胺)靶向于病毒m2離子通道蛋白，其位于病毒膜中，干擾細胞內病毒顆粒的脫殼。然而，由于其副作用和迅速發(fā)生抗藥性病毒突變體，它們已經不被廣泛使用(magden,j.等,(2005),appl.microbiol.biotechnol.,66,pp.612-621)。另外，已經證明另一些非特異性病毒藥物例如利巴韋林對治療流感和其它病毒感染有效(eriksson,b.等,(1977),antimicrob.agentschemother.,11,pp.946-951)。然而，可能是由于其嚴重的副作用，利巴韋林僅在少數(shù)幾個國家獲得批準(furuta等,antimicrobialagentsandchemotherapy,2005,p.981–986)。顯然，需要新的抗病毒化合物，優(yōu)選對抗不同靶標的新的抗病毒化合物。

流感病毒以及托高土病毒(thogotovirus)和傳染性鮭魚貧血病毒屬病毒(isavirus)屬于正粘病毒科家族，正粘病毒科家族以及本雅病毒科(bunyaviridae)家族(包括漢灘病毒屬、內羅畢羊病病毒屬、正本雅病毒屬(orthobunyavirus)和白蛉熱病毒屬)尤其是負鏈rna病毒。它們的基因組被分段并以核糖核蛋白顆粒的形式出現(xiàn)，所述核糖核蛋白顆粒包括rna依賴性rna聚合酶，其進行(i)單鏈負義病毒rna(vrna)向病毒mrna中的初始拷貝(即，轉錄)和(ii)vrna復制。該酶是由亞單位pa、pb1和pb2構成的三聚體復合物，對病毒的生命周期而言至關重要，因為它負責病毒rna的復制和轉錄。在以前的工作中，已經鑒定所述聚合酶的兩個關鍵結構域的原子結構—pb2亞單位中的mrna帽結合結構域(guilligay等,naturestructural&molecularbiology2008；5月；15(5):500-506)和位于pa亞單位中的內切核酸酶活性部位(dias等,nature2009,458,914-918)，并且已經表征了它們的分子結構。這兩個部位對于流感病毒和某些該種類的其它病毒家族用于產生病毒mrna的獨特的“搶帽(cap-snatching)”模式、從而啟動mrna轉錄而言很重要。5'帽是已經被加入信使rna的5'末端的修飾的鳥嘌呤核苷酸。所述5'帽(也稱為rna帽或rnam7g帽)通過5'-5'-三磷酸鍵與第一個轉錄的核苷酸連接的末端7-甲基鳥苷殘基組成。病毒聚合酶與細胞mrna分子的5’rna帽結合并將rna帽連同10-15個核苷酸的一段序列一起斷裂。然后加帽的rna片段用作合成病毒mrna的引物(plotch,s.j.等,(1981),cell,23,pp.847-858；kukkonen,s.k.等(2005),arch.virol.,150,pp.533-556；leahy,m.b.等,(2005),j.virol.,71,pp.8347-8351；noah,d.l.等,(2005),adv.virusres.,65,pp.121-145)。

聚合酶復合物似乎是適宜的抗病毒藥靶標，因為它對于病毒mrna的合成和病毒復制而言非常重要，并且含有可能與宿主細胞蛋白中發(fā)現(xiàn)的功能活性部位顯著不同的多種功能活性部位(magden,j.等,(2005),appl.microbiol.biotechnol.,66,pp.612-621)。因此，例如，已經嘗試了用類似于pb1內的pa-結合結構域的25-氨基酸肽來干擾聚合物亞單位的裝配(ghanem,a.等,(2007),j.virol.,81,pp.7801-7804)。此外，還已經靶向于所述聚合酶的內切核酸酶活性，并且作為流感病毒中這一活性的選擇性抑制劑已經鑒定了一系列4-取代的2,4-二氧代丁酸化合物(tomassini,j.等,(1994),antimicrob.agentschemother.,38,pp.2827-2837)。另外，已經證明在delitschiaconfertaspora(一個真菌種類)的提取物中鑒定的flutimide(一種取代的2,6-二酮基哌嗪)抑制流感病毒的內切核酸酶(tomassini,j.等,(1996),antimicrob.agentschemother.,40,pp.1189-1193)。而且，已經嘗試了用核苷類似物例如2’-脫氧-2’-氟鳥苷干擾病毒轉錄(tisdale,m.等,(1995),antimicrob.agentschemother.,39,pp.2454-2458)。

wo2006/066414涉及某些羥基二氫吡啶并吡嗪-1,8-二酮，聲稱其適合用于抑制hiv整合酶。

ep-a-1544199公開了被描述為hiv整合酶抑制劑的特定的含氮稠環(huán)化合物。

本發(fā)明的一個目的是鑒定有效對抗病毒疾病且具有改善的藥理學性質的另外的化合物。

附圖簡要說明

圖1

用于quantigeneta測定法探針組設計的從頭合成的病毒mrna的序列：將標記延伸物(labelextender)(le)雜交至5'-端的來源于所提供的合成rna底物的加帽引物序列和從頭合成的病毒mrna的前幾個堿基(le1)和3'-端的多聚a尾(le2)。俘獲延伸物(captureextender)(ce1–9)特異性地雜交至基因特異性區(qū)并且同時將俘獲的rna固定至板上。封閉探針(bp)雜交至從頭合成的病毒mrna的不同段序列。用3'-rlmrace驗證了3'-端以斜體字顯示的序列(未顯示完整序列)。所述探針組由panomics以全部三個的混合物形式提供。

發(fā)明概述

因此，在第一個實施方案中，本發(fā)明提供了通式(v)的化合物。

應當理解的是，在本申請文件中，除非另有說明，否則術語“通式(v)的化合物”涵蓋藥學上可接受的鹽、溶劑合物、多晶型物、前藥、共用藥物、共晶、互變異構體、外消旋物、對映體或非對映體或者其混合物。

本發(fā)明的另一個實施方案涉及藥物組合物，其包含通式(v)的化合物，并且任選地包含一種或多種藥學上可接受的賦形劑和/或載體。

通式(v)的化合物可用于治療、改善或預防病毒疾病。

已經令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的化合物使用帽-結合和內切核酸酶核心的最佳的連接和取代模式通過連接基系統(tǒng)(蝴蝶構象)提供了帽-結合和內切核酸酶片段的組合。在考慮耐受的藥物樣性質的情況下這種方法提供了化學和代謝穩(wěn)定性并且將連接基策略翻譯至雜交方法，因為兩種核心片段被連接，但是替代了選擇性配體的相應相關部分。

在目前的化合物中，二環(huán)環(huán)系形式的雙金屬結合首基(headgroup)與大的疏水性基團連接，從而提供了額外的相互作用，這對于增加配體效能和對流感聚合酶的選擇性、從而獲得比目前現(xiàn)有的治療選擇更優(yōu)的體內有效性的化合物而言是重要的。作為疏水性基團，不同芳族環(huán)系的廣泛變化形式被耐受，以便優(yōu)化與另外的官能團的結合親和性。雙金屬首基官能團與疏水性取代基之間的起連接作用的連接基確保兩種片段的最佳空間排布，并且還影響決定細胞滲透性的分子的總體極性。本發(fā)明的化合物的帽-片段確保了最佳的平面核心，從而提供了平的帽-結合袋內的顯著的π-疊加相互作用。

發(fā)明詳述

在下面詳細描述本發(fā)明之前，應當理解的是，本發(fā)明不限于本文所述的具體的方法、方案和試劑，因為它們可以變化。還應當理解的是，本文所用的術語是僅為了描述具體實施方案，不旨在限制本發(fā)明的范圍，其將僅由所附的權利要求書來限定。除非另有定義，否則本文所用的所有技術和科學術語具有與本領域技術人員通常理解的含義相同的含義。

優(yōu)選地，本文所用的術語如“amultilingualglossaryofbiotechnologicalterms:(iupacrecommendations)”,leuenberger,h.g.w,nagel,b.和h.編輯(1995),helveticachimicaacta,ch-4010巴塞爾,瑞士中所述的那樣進行定義。

除非上下文另有要求，否則在本說明書和隨后的權利要求書中，詞語“包含”及其變體例如“包括”和“含有”均應理解為表示包括所給出的整數(shù)或步驟或者整數(shù)組或步驟組，但是不排除任何其它整數(shù)或步驟或者整數(shù)組或步驟組。在下面的段落中，更詳細地定義了本發(fā)明的不同方面。如此定義的每個方面可以與任意另外的一個或多個方面組合，有清楚的相反說明時除外。特別地，所給出的任意優(yōu)選的或有利的特征可以與任意另外的一個或多個優(yōu)選的或有利的特征組合。

在本說明書的正文中引用了多個文獻。無論是上文引用的，還是下文引用的，將本文所引用的每篇文獻(包括所有專利、專利申請、科學出版物、制造商說明書、使用說明等)通過引用整體合并入本文中。本文中的任何內容均不應理解為承認這類公開內容構成本發(fā)明的現(xiàn)有技術。

定義

術語“烷基”指飽和的直鏈或支鏈烴鏈。

術語“芳基”優(yōu)選指含有6個碳原子的芳族單環(huán)、含有10個碳原子的芳族二環(huán)環(huán)系或含有14個碳原子的芳族三環(huán)環(huán)系。實例有苯基、萘基或蒽基，優(yōu)選苯基。

術語“包含10-14個環(huán)原子和1-4個氮原子的二環(huán)稠合環(huán)系”指包括至少2個彼此稠合的環(huán)、即共用價鍵的環(huán)系。構成該環(huán)系的環(huán)可以是飽和的、不飽和的或芳族的。典型的實例是環(huán)系，其中具有5、6或7個環(huán)原子的兩個環(huán)稠合在一起。在本發(fā)明的化合物中所用的二環(huán)稠合環(huán)系中，環(huán)原子中的1-4個是氮原子。此外，所述二環(huán)稠合環(huán)系可以被羰基(＝o)或所附的權利要求中所定義的其它取代基取代。

術語“環(huán)烷基”表示環(huán)形式的“烷基”。術語“環(huán)烷基”還包括其二環(huán)、三環(huán)和多環(huán)形式。除非另有規(guī)定，否則環(huán)烷基可具有3–12個碳原子。

術語“碳環(huán)基”涵蓋環(huán)中不包含雜原子的任意5或6元烴環(huán)。術語“碳環(huán)基環(huán)”涵蓋飽和環(huán)(包括環(huán)烷基環(huán))、不飽和環(huán)和芳族環(huán)(包括芳基環(huán))。

“hal”或“鹵素”表示f、cl、br和i。

術語“雜芳基”優(yōu)選指5或6元芳族環(huán)，其中環(huán)中的一個或多個碳原子已經被1、2、3或4個(對于5元環(huán)而言)或者1、2、3、4或5個(對于6元環(huán)而言)相同或不同的雜原子代替，其中所述雜原子選自o、n和s。雜芳基的實例包括吡咯、吡咯烷、氧雜環(huán)戊烷、呋喃、咪唑烷、咪唑、吡唑、唑烷、唑、噻唑、哌啶、吡啶、嗎啉、哌嗪和二氧戊環(huán)。

術語“雜環(huán)基”涵蓋其中環(huán)中的至少一個碳原子已經被1、2、3或4個(對于5元環(huán)而言)或者1、2、3、4或5個(對于6元環(huán)而言)相同或不同的雜原子代替的任意5或6元環(huán)，其中所述雜原子選自o、n和s。術語“雜環(huán)基環(huán)”涵蓋飽和的、不飽和的環(huán)和芳族環(huán)(包括雜芳基環(huán))。實例包括吡咯、吡咯烷、氧雜環(huán)戊烷、呋喃、咪唑烷、咪唑、吡唑、唑烷、唑、噻唑、哌啶、吡啶、嗎啉、哌嗪和二氧戊環(huán)。

如果一個化合物或基團被稱為是“任選被取代的”，則它在每種情況下可以包括一個或多個所給出的取代基，其中所述取代基可以相同或不同。

術語“藥學上可接受的鹽”指本發(fā)明的化合物的鹽。適合的藥學上可接受的鹽包括酸加成鹽，其可以例如通過將本發(fā)明的化合物的溶液與藥學上可接受的酸的溶液混合來形成，所述的藥學上可接受的酸例如鹽酸、硫酸、富馬酸、馬來酸、琥珀酸、乙酸、苯甲酸、檸檬酸、酒石酸、碳酸或磷酸。此外，在化合物帶有酸性基團的情況下，其適合的藥學上可接受的鹽可以包括堿金屬鹽(例如，鈉鹽或鉀鹽)；堿土金屬鹽(例如，鈣鹽或鎂鹽)；以及與適合的有機配體形成的鹽(例如，銨鹽、季銨鹽和使用抗衡陰離子如鹵素離子、氫氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、磷酸根、硝酸根、烷基磺酸根和芳基磺酸根形成的胺陽離子)。藥學上可接受的鹽的舉例說明性實例包括但不限于乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬氨酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、碳酸氫鹽、硫酸氫鹽、酒石酸氫鹽、硼酸鹽、溴化物、丁酸鹽、乙二胺四乙酸鈣鹽(calciumedetate)、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、樟磺酸鹽、碳酸鹽、氯化物、檸檬酸鹽、克拉維酸鹽(clavulanate)、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、二鹽酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙二胺四乙酸鹽、乙二磺酸鹽、依托酸鹽、乙磺酸鹽、乙烷磺酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡萄糖庚酸鹽(glucoheptonate)、葡糖酸鹽、谷氨酸鹽、甘油磷酸鹽、乙醇酰阿散酸鹽(glycolylarsanilate)、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、己基間苯二酚鹽、哈胺(hydrabamine)、氫溴酸鹽、鹽酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基-乙烷磺酸鹽、羥基萘酸鹽、碘化物、異硫代硫酸鹽(isothionate)、乳酸鹽、乳糖酸鹽、月桂酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、甲烷磺酸鹽、甲基硫酸鹽、粘酸鹽、2-萘磺酸鹽、萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、n-甲基葡糖胺銨鹽、油酸鹽、草酸鹽、撲酸鹽(雙羥萘酸鹽)、棕櫚酸鹽、泛酸鹽、果膠酯酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽/二磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、聚半乳糖醛酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、硫酸鹽、堿式乙酸鹽(subacetate)、琥珀酸鹽、單寧酸鹽、酒石酸鹽、茶氯酸鹽、甲苯磺酸鹽、triethiodide、十一烷酸鹽、戊酸鹽等(參見例如s.m.berge等,"pharmaceuticalsalts",j.pharm.sci.,66,pp.1-19(1977))。

當本發(fā)明的化合物是結晶形式時，該結構可以含有溶劑分子。所述溶劑典型地是藥學上可接受的溶劑，尤其包括水(水合物)或有機溶劑?？赡艿娜軇┖衔锏膶嵗ㄒ掖己衔锖彤惐己衔铩?/p>

術語“共用藥物”指通過共價化學鍵鍵合的兩種或更多種治療化合物。詳細的定義可見于例如n.das等,europeanjournalofpharmaceuticalsciences,41,2010,571–588。

術語“共晶”指一種多組分晶體，其中所有組分當是其純形式時在環(huán)境條件下均是固體。這些組分以化學計量比或非化學計量比的靶標分子或離子(即，本發(fā)明的化合物)和一種或多種中性分子共晶形成物的形式共存。詳細討論可見于例如ningshan等,drugdiscoverytoday,13(9/10),2008,440-446和d.j.good等,cryst.growthdes.,9(5),2009,2252–2264中。

本發(fā)明的化合物也可以是前藥、即其在體內代謝成活性代謝物的化合物的形式。適合的前藥是例如酯。適合基團的具體實例尤其在us2007/0072831的第[0082]–[0118]段在標題前藥和保護基下給出。前藥的優(yōu)選實例包括其中r⁵¹選自–c(o)–r、–c(o)–or、–po(or^a)(or^b)或–oc(o)or的化合物，其中r、r^a和r^b獨立地選自c1–6烷基、芳基或雜芳基，其中所述烷基、芳基或雜芳基可以任選被取代，例如任選被–oh或o–c1–6烷基取代。r的實例包括c1–6烷基(ch3、叔丁基)、苯基、苯基–oh或苯基–och3。

通式(v)的化合物

本發(fā)明提供了通式(v)的化合物。

本發(fā)明提供了通式(v)的化合物，其中適用下面的定義。

r⁵¹選自–h、–(任選被取代的c1–6烷基)和–c(o)–(任選被取代的c1–6烷基)；優(yōu)選r⁵¹選自–h和–c1–6烷基；更優(yōu)選r⁵¹是–h。

r⁵²選自–h、–(任選被取代的c1–6烷基)、–(ch2)q–(任選被取代的雜環(huán)基)、–(ch2)q–(任選被取代的碳環(huán)基)、–(ch2)p–or⁵⁵和–(ch2)p–nr⁵⁶r⁵⁷；優(yōu)選r⁵²選自–h和–c1–6烷基。

r⁵³選自–r⁵⁴和–x⁵¹r⁵⁴；優(yōu)選r⁵³是–x⁵¹r⁵⁴。

r⁵⁴是包含10-14個環(huán)原子和1-4個氮原子作為環(huán)原子的二環(huán)稠合環(huán)系，其中該二環(huán)稠合環(huán)系可以是任選被取代的。優(yōu)選r⁵⁴是包含兩個稠合環(huán)的二環(huán)稠合環(huán)系，其中所述稠合環(huán)獨立地選自5元環(huán)、6元環(huán)和7元環(huán)。更優(yōu)選r⁵⁴是包含兩個稠合環(huán)的二環(huán)稠合環(huán)系，其中所述稠合環(huán)獨立地選自5元環(huán)和6元環(huán)，特別地，r⁵⁴是包含兩個稠合環(huán)的二環(huán)稠合環(huán)系，其中所述稠合環(huán)是5元環(huán)和6元環(huán)。該二環(huán)稠合環(huán)系包含1-4個氮原子，優(yōu)選2-3個氮原子。

該二環(huán)稠合環(huán)系可以任選被一個或多個(例如1、2或3個)取代基取代，所述取代基獨立地選自(＝o)、鹵素、–cn、–cf3、–(ch2)s–x⁵²–r⁵⁸、–c1–6烷基、–c3–7碳環(huán)基、–c1–4烷基–c3–7碳環(huán)基、–(具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)和–c1–4烷基–(具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)。在這方面優(yōu)選的取代基是(＝o)、鹵素、–cn、–cf3和–c3–7碳環(huán)基，更優(yōu)選地，一個或多個取代基選自(＝o)、鹵素和–c3–7碳環(huán)基，甚至更優(yōu)選(＝o)和鹵素。

在一個優(yōu)選的實施方案中，r⁵⁴選自：

其中

表示與分子其余部分的連接點；且

其中所述基團可以任選被一個或多個取代基取代，所述取代基選自鹵素、–cn、–cf3、–(ch2)s–x⁵²–r⁵⁸、–c1–6烷基、–c3–7碳環(huán)基、–c1–4烷基–c3–7碳環(huán)基、–(具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)和–c1–4烷基–(具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)，優(yōu)選地，一個或多個取代基選自鹵素、–cn、–cf3和–c3–7碳環(huán)基，更優(yōu)選地，一個或多個取代基選自鹵素和–c3–7碳環(huán)基，甚至更優(yōu)選鹵素。

r⁵⁵選自–h、–c1–6烷基和–(ch2ch2o)rh。

r⁵⁶選自–h、–(任選被取代的c1–6烷基)、–(任選被取代的c3–7碳環(huán)基)、–c1–4烷基–(任選被取代的c3–7碳環(huán)基)、–(任選被取代的具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)和–c1–4烷基–(任選被取代的具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)；優(yōu)選–h和–(任選被取代的c1–6烷基)，更優(yōu)選–h和–c1–6烷基。

r⁵⁷選自–h、–(任選被取代的c1–6烷基)、–(任選被取代的c3–7碳環(huán)基)、–c1–4烷基–(任選被取代的c3–7碳環(huán)基)、–(任選被取代的具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)和–c1–4烷基–(任選被取代的具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)；優(yōu)選–h和–(任選被取代的c1–6烷基)；更優(yōu)選–h和–c1–6烷基。

r⁵⁸選自–h和–c1–6烷基。

x⁵¹選自–l1–(a–(l2)m)n–；優(yōu)選x⁵¹選自–l1–和–l1–a–l2–。

x⁵²選自nr⁵⁶、n(r⁵⁶)c(o)、c(o)nr⁵⁶、o、c(o)、c(o)o、oc(o)；n(r⁵⁶)so2、so2n(r⁵⁶)、s、so和so2；優(yōu)選x⁵²選自n(r⁵⁶)c(o)、c(o)nr⁵⁶、n(r⁵⁶)so2和so2n(r⁵⁶)。

l1選自nr⁵⁶、n(r⁵⁶)c(o)、c(o)nr⁵⁶、o、c(o)、c(o)o、oc(o)；n(r⁵⁶)so2、so2n(r⁵⁶)、n(r⁵⁶)so2n(r⁵⁶)、s、so、so2和(任選被取代的具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)–nr⁵⁶；優(yōu)選l1選自nr⁵⁶、n(r⁵⁶)c(o)、c(o)nr⁵⁶、c(o)o、oc(o)、o和(任選被取代的具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)–nr⁵⁶。一個實例是其可以任選被取代，例如任選被鹵素例如f取代。

l2選自nr⁵⁶、n(r⁵⁶)c(o)、c(o)nr⁵⁶、o、c(o)、c(o)o、oc(o)；n(r⁵⁶)so2、so2n(r⁵⁶)、n(r⁵⁶)so2n(r⁵⁶)、s、so、so2和(任選被取代的具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)–nr⁵⁶；優(yōu)選l2選自nr⁵⁶、n(r⁵⁶)c(o)、c(o)nr⁵⁶、c(o)o、oc(o)、o和(任選被取代的具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)–nr⁵⁶。一個實例是其可以任選被取代，例如任選被鹵素例如f取代。

a選自(cr*r**)t、任選被取代的c3–7碳環(huán)基、任選被取代的具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基，其中所述碳環(huán)基或所述雜環(huán)基的環(huán)原子中至少一個(例如1、2或3個)分別與基團l1和l2或r⁵⁴在鏈上鍵合。兩個或更多個基團a的組合也可以存在。例如，兩個基團a可以彼此共價鍵合，得到基團–l1–(a–a–(l2)m)n–。在一種選擇中，a可以選自(cr*r**)t、環(huán)己基和苯基及其組合。(cr*r**)t的實例包括–(ch2)t–和–(chr^*)t–。

r*每次出現(xiàn)時獨立地選自–h、–(任選被取代的c1–6烷基)、–(任選被取代的c3–7碳環(huán)基)、–c1–4烷基–(任選被取代的c3–7碳環(huán)基)、–(任選被取代的具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)和–c1–4烷基–(任選被取代的具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)；優(yōu)選r*每次出現(xiàn)時獨立地選自–h、–(任選被取代的c1–6烷基)、–(任選被取代的c3–7碳環(huán)基)、–c1–4烷基–(任選被取代的c3–7碳環(huán)基)、–(任選被取代的具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)和–c1–4烷基–(任選被取代的具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)；更優(yōu)選–h、–(c1–6烷基)、–(任選被取代的c3–7碳環(huán)基)和–c1–4烷基–(任選被取代的c3–7碳環(huán)基)。

r**每次出現(xiàn)時獨立地選自–h、–(任選被取代的c1–6烷基)、–(任選被取代的c3–7碳環(huán)基)、–c1–4烷基–(任選被取代的c3–7碳環(huán)基)、–(任選被取代的具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)和–c1–4烷基–(任選被取代的具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)；優(yōu)選r**每次出現(xiàn)時獨立地選自–h、–(任選被取代的c1–6烷基)、–(任選被取代的c3–7碳環(huán)基)、–c1–4烷基–(任選被取代的c3–7碳環(huán)基)、–(任選被取代的具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)和–c1–4烷基–(任選被取代的具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)；更優(yōu)選–h、–(c1–6烷基)、–(任選被取代的c3–7碳環(huán)基)和–c1–4烷基–(任選被取代的c3–7碳環(huán)基)。

在一個供替代選擇的實施方案中，r*和r**與它們所連接的碳原子一起形成任選被取代的c3–7碳環(huán)基或任選被取代的具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基，優(yōu)選任選被取代的c3–7碳環(huán)基。

r***每次出現(xiàn)時獨立地是–h、–c1–6烷基或被一個或多個鹵素原子取代的–c1–6烷基。

m是0或1。

n是0或1。

p是1-4。

q是0-4。

r是1-3。

s是0-4。

t是1-6。

所述烷基可以任選被一個或多個取代基取代，所述取代基獨立地選自鹵素、–cn、–nr⁵⁶r⁵⁷、–oh和–o–c1–6烷基。

所述烴基、雜環(huán)基和/或碳環(huán)基可以任選被一個或多個取代基取代，所述取代基獨立地選自鹵素、–cn、–cf3、–(ch2)s–x⁵²–r⁵⁸、–c1–6烷基、–c3–7碳環(huán)基、–c1–4烷基–c3–7碳環(huán)基、–(具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)和–c1–4烷基–(具有3-7個環(huán)原子的雜環(huán)基)；優(yōu)選鹵素、–cn、–nr⁵⁶r⁵⁷、–oh和–o–c1–6烷基。

上面的定義和優(yōu)選定義的所有組合也是本發(fā)明的發(fā)明人的構思。

本發(fā)明的發(fā)明人已經令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，具有特定的連接基–(cr***r***)–r⁵³的本發(fā)明的化合物與不具有這類連接基的相應化合物相比具有改善的藥理學性質。不希望受理論的束縛，認為本申請的化合物不僅提供雙金屬結合，而且提供促成配體的內在結合性質的疏水性相互作用。將雙金屬首基與大的疏水性取代基組合的更靈活的連接基提供了更高的構象靈活性，從而提供了正確的載體，其適于特異性相互作用并且以更優(yōu)的方式通過更高的構象靈活性與結合袋的幾個氨基酸相互作用，但不釋放熵貢獻(一個分子)。

本發(fā)明的化合物可以以藥物組合物的形式施用于患者，所述藥物組合物可任選包含一種或多種藥學上可接受的賦形劑和/或載體。

本發(fā)明的化合物可以通過各種公知的途徑施用，包括口服、直腸、胃內(intragastrical)、顱內和腸胃外施用，例如靜脈內、肌內、鼻內、真皮內、皮下，以及類似的施用途徑。特別優(yōu)選的是口服、鼻內和腸胃外施用。根據(jù)施用途徑的不同，需要不同的藥物制劑，這些施用途徑中的一些可能需要給藥物制劑涂敷保護性包衣以防止本發(fā)明的化合物在例如消化道內降解。

因此，優(yōu)選地，本發(fā)明的化合物被配制成糖漿、輸液或注射液、噴霧劑、片劑、膠囊、膠囊形片劑(caplet)、錠劑、脂質體、栓劑、膏藥、繃帶(band-aid)、延遲釋放膠囊(retardcapsule)、散劑或緩慢釋放制劑。優(yōu)選地，稀釋劑是水、緩沖劑、緩沖鹽溶液或鹽溶液，載體優(yōu)選選自可可脂和vitebesole。

用于施用本發(fā)明的化合物的特別優(yōu)選的藥物形式是適合注射使用的形式，包括無菌的水性溶液或分散體和用于即時制備無菌注射溶液或分散體的無菌粉末。在所有情況中，最終的溶液或分散體形式必須是無菌的并且是流體。典型地，這類溶液或分散體將包含溶劑或分散介質，其含有例如水-緩沖水溶液例如生物相容性的緩沖劑、乙醇、多元醇例如甘油、丙二醇、聚乙二醇、其適合的混合物，表面活性劑或植物油。本發(fā)明的化合物也可以被配制成脂質體，特別是用于腸胃外施用的脂質體。脂質體提供在循環(huán)中半衰期增加的優(yōu)點(如果與游離藥物相比)以及所包裹的藥物的延長的更均勻的釋放。

輸液和注射液的滅菌可以通過任意數(shù)量的本領域公認的技術來實現(xiàn)，包括但不限于加入防腐劑如抗細菌劑或抗真菌劑，例如尼泊金酯(parabene)、三氯叔丁醇、苯酚、山梨酸或硫柳汞(thimersal)。此外，還可以在輸液和注射液中摻入等張劑，例如糖或鹽，特別是氯化鈉。

含有一種或多種本發(fā)明的化合物的無菌注射液的生產通過以下方法完成：將所需量的各化合物摻入酌情具有上面列出的各種成分的適宜溶劑中，然后滅菌。為了獲得無菌粉末，將上述溶液按照需要真空干燥或冷凍干燥。本發(fā)明的優(yōu)選的稀釋劑是水、生理學上可接受的緩沖劑、生理學上可接受的緩沖鹽溶液或鹽溶液。優(yōu)選的載體是可可脂和vitebesole?？梢耘c本發(fā)明的化合物的各種藥物形式一起使用的賦形劑可選自下面的非限制性列表：

a)粘合劑，例如乳糖、甘露醇、結晶山梨醇、磷酸氫鹽、磷酸鈣鹽(calciumphosphates)、糖、微晶纖維素、羧甲基纖維素、羥乙基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮等；

b)潤滑劑，例如硬脂酸鎂、滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅、硬脂酸、氫化植物油、亮氨酸、甘油酯和硬脂酰醇富馬酸鈉，

c)崩解劑，例如淀粉、交聯(lián)羧甲基纖維素、甲基纖維素鈉、瓊脂、膨潤土、海藻酸、羧甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮等。

在一個實施方案中，制劑用于口服施用，并且制劑包含下列成分中的一種或多種或全部：預膠化淀粉、滑石粉、聚乙烯吡咯烷酮k30、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、硬脂酰醇富馬酸鈉、明膠、二氧化鈦、山梨醇、檸檬酸一鈉、黃原膠、二氧化鈦、矯味劑、苯甲酸鈉和糖精鈉。

如果在一個優(yōu)選的實施方案中本發(fā)明的化合物被鼻內施用，其可以以干粉末吸入器或來自使用適合的拋射劑例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、氫氟烷如1,1,1,2-四氟乙烷(hfa134a^tm)或1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷(hfa227ea^tm)、二氧化碳、或其它適合的氣體的加壓容器、泵、噴霧器或霧化器中的噴霧劑的形式被施用。所述的加壓容器、泵、噴霧器或霧化器可以含有本發(fā)明的化合物的溶液或混懸液，例如使用乙醇和拋射劑作為溶劑的溶液或混懸液，其還可以含有潤滑劑，例如三油酸山梨坦。

其它適合的賦形劑可見于美國藥學協(xié)會(americanpharmaceuticalassociation)出版的藥物賦形劑手冊(handbookofpharmaceuticalexcipients)，通過引用將其合并入本文。

應當理解的是，根據(jù)可用本發(fā)明的化合物之一治療的障礙的嚴重性和具體類型，以及根據(jù)待治療的各個患者例如患者的總體健康狀態(tài)等，需要不同劑量的各化合物來產生治療或預防效果。適宜劑量的確定由主治醫(yī)師酌情確定。認為在本發(fā)明的治療或預防應用中本發(fā)明的化合物的劑量應當在約0.1mg至約1g活性成分(即，本發(fā)明的化合物)/千克體重范圍內。然而，在一個優(yōu)選的本發(fā)明的應用中，將本發(fā)明的化合物以1.0-500mg/kg體重、優(yōu)選1-200mg/kg體重的量施用于需要其的個體。用本發(fā)明的化合物治療的持續(xù)時間將根據(jù)所治療的疾病的嚴重性以及每個單個患者的情況和特質反應而變化。在一個優(yōu)選的預防或治療應用的實施方案中，每天給成年人口服施用10mg–200mg化合物，這取決于疾病的嚴重性和/或暴露于疾病載體的程度。

如本領域中已知的那樣，給定化合物的藥學有效量還取決于施用途徑。一般而言，如果施用是通過胃腸道(例如用栓劑)、直腸或通過胃內探針進行，則所需的量較高，如果施用途徑是腸胃外例如靜脈內，則所需的量較低。典型地，如果使用直腸或胃內施用，則本發(fā)明的化合物將以50mg–1g/kg體重、優(yōu)選10mg–500mg/kg體重被施用，如果使用腸胃外施用，則本發(fā)明的化合物將以1–100mg/kg體重被施用。對于鼻內施用，使用1–100mg/kg體重。

如果已知一個人具有發(fā)生可用本發(fā)明的化合物治療的疾病的風險，則可以預防性施用生物學活性血清或本發(fā)明的藥物組合物。在這些情況下，本發(fā)明的各化合物優(yōu)選以天為基礎以上述優(yōu)選的和特別優(yōu)選的劑量被施用。優(yōu)選地，每天一次0.1mg–1g/kg體重，優(yōu)選10–200mg/kg體重。該施用可以持續(xù)至發(fā)生各病毒性障礙的風險已經減小。然而，在大部分情況下，在已經診斷出疾病/障礙后施用本發(fā)明的化合物。在這些情況中，優(yōu)選的是每天施用首劑量的本發(fā)明的化合物一次、兩次、三次或四次。

本發(fā)明的化合物特別可用于治療、改善或預防病毒疾病。對病毒疾病的類型沒有特別限制?？赡艿牟《炯膊〉膶嵗ǖ幌抻谟梢韵虏《疽鸬牟《炯膊。憾徊《究啤捳畈《究?、腺病毒科、乳頭瘤病毒科(papillomaviridae)、多瘤病毒科(polyomaviridae)、微小病毒科、嗜肝脫氧核糖核酸病毒科、呼腸孤病毒科、絲狀病毒科、副粘病毒科、彈狀病毒科、正粘病毒科、本雅病毒科、沙粒病毒科、冠狀病毒科、微小核糖核酸病毒科、肝炎病毒科(hepeviridae)、嵌杯樣病毒科、星狀病毒科(astroviridae)、披膜病毒科、黃熱病病毒科、δ病毒屬(deltavirus)、博爾納病毒科(bornaviridae)和朊病毒。優(yōu)選由皰疹病毒科、絲狀病毒科、副粘病毒科、彈狀病毒科、正粘病毒科、本雅病毒科、沙粒病毒科、冠狀病毒科、微小核糖核酸病毒科、披膜病毒科、黃熱病病毒科引起的病毒疾病，更優(yōu)選由正粘病毒科引起的病毒疾病。

在下面的表中給出了各種病毒的實例。

優(yōu)選地，本發(fā)明的化合物用于治療流感。本發(fā)明涵蓋屬于正粘病毒科家族的所有病毒屬，特別是甲型、乙型和丙型流感病毒、傳染性鮭魚貧血病和托高土病毒。在本發(fā)明內，術語“流感”包括由任意流感病毒例如甲型、乙型和丙型流感病毒(包括它們的各種病毒株和分離物(isolate))導致的流感，還涵蓋通常被稱為鳥流感(birdflu)和豬流感的甲型流感病毒株。對待治療的個體沒有特別限制，其可以是任意脊椎動物，例如鳥和哺乳動物(包括人)。

不希望受理論束縛，認為本發(fā)明的化合物能抑制內切核酸酶活性、特別是流感病毒的內切核酸酶活性。更具體地，認為它們直接干擾具有內切核酸酶活性且對于流感病毒復制而言所必需的流感病毒pa蛋白的n-末端部分。流感病毒復制在細胞內發(fā)生在細胞核內。因此，被設計用于抑制pa內切核酸酶活性的化合物需要跨過細胞膜和核膜二者，該性質主要取決于設計的所述化合物的物理化學性質。

此外，也不希望受理論束縛，認為本發(fā)明的化合物能抑制宿主mrna帽結構與帽結合結構域(cbd)、特別是流感病毒的帽結合結構域結合。更具體地，認為它們直接干擾流感pb2蛋白質的cbd。然而，將化合物遞送入細胞可以代表一個問題，其取決于例如化合物的溶解度或其通過細胞膜的能力。

本發(fā)明顯示要求保護的化合物具有體外內切核酸酶抑制活性以及體外聚合酶抑制活性。

式(v)的化合物的體外內切核酸酶抑制活性的一種可能測定法是本文所公開的基于fret(熒光共振能量轉移)的內切核酸酶活性測定法。優(yōu)選地，在該fret測定法中所述化合物在25μm下表現(xiàn)出至少約50％的％降低。在該語境中，％降低是被測量為與未處理的樣品相比化合物處理后被流感病毒內切核酸酶亞單位(pa-nter)裂解的雙標記的rna底物的熒光增加的初始反應速度(v0)的％降低。優(yōu)選地，在該測定法中所述化合物表現(xiàn)出小于約50μm、更優(yōu)選小于約20μm的ic50。半數(shù)最大抑制濃度(ic50)是化合物抑制生物學或生物化學功能的有效性的量度，是由從最大100μm–至少2nm范圍內的給定濃度系列的初始反應速度(v0)計算得到的。

通式(v)的化合物可以與一種或多種其它藥劑組合使用。對所述的其它藥劑的類型沒有特別限制，取決于待治療的障礙。優(yōu)選地，所述的其它藥劑是可用于治療、改善或預防病毒疾病的另外的藥劑，更優(yōu)選是可用于治療、改善或預防由流感病毒感染導致的流感和與該病毒感染相關的病癥例如病毒性肺炎或繼發(fā)性細菌性肺炎的另外的藥劑以及治療諸如受寒、發(fā)熱、咽喉痛(sorethroat)、肌肉疼痛、嚴重頭痛、咳嗽、虛弱和疲勞等癥狀的藥劑。此外，通式(v)的化合物可以與抗炎藥組合使用。

下面的藥劑組合被認為是特別適合的：

(i)內切核酸酶和帽結合抑制劑(特別是靶向于流感的)的組合。對所述的內切核酸酶抑制劑沒有特別限制，可以是任意內切核酸酶抑制劑，特別是任意病毒內切核酸酶抑制劑。優(yōu)選的內切核酸酶抑制劑是美國申請us2013/0102600、us2013/0317022、us2013/0317021和us2014/0038990中所定義的那些。通過引用將這些申請的全部公開內容合并入本文。特定地，將這些美國申請的關于化合物通式、各取代基的優(yōu)選實施方案以及所述化合物的醫(yī)學效用和優(yōu)點的所有描述通過引用合并入本文。

另外的優(yōu)選的內切核酸酶抑制劑是美國序號61/750,023(2013年1月8日提交)中所定義的通式(ii)的化合物和美國序號61/750,023(2013年1月8日提交)中所定義的通式(v)的化合物，通過引用將其全部公開內容合并入本文。特定地，將關于這些化合物的通式、各取代基的優(yōu)選實施方案以及所述化合物的醫(yī)學效用和優(yōu)點的所有描述通過引用合并入本文。這些化合物可以任選地是藥學上可接受的鹽、溶劑合物、多晶型物、共用藥物、共晶、前藥、互變異構體、外消旋物、對映體或非對映體或者其混合物的形式。

對所述的帽結合抑制劑也沒有特別限制，可以是任意帽結合抑制劑，特別是任意病毒帽結合抑制劑。優(yōu)選的帽結合抑制劑是美國申請2013/0102601中所定義的通式(ii)的那些和/或wo2011/000566中所公開的化合物，通過引用將其全部公開內容合并入本文。特定地，將關于us2013-0102601或wo2011/000566的化合物的通式、各取代基的優(yōu)選實施方案以及所述化合物的醫(yī)學效用和優(yōu)點的所有描述通過引用合并入本文。

在大流行的和季節(jié)性出現(xiàn)的病毒株二者中均出現(xiàn)了對兩類獲得許可的流感抗病毒藥(m2離子通道抑制劑(金剛烷類)和神經氨酸酶抑制劑(例如奧塞米韋))的廣泛抗藥性，使得這些藥物在治療方式中僅具有最低限度的效用。對于m2離子通道抑制劑而言，病毒抗藥性的頻率自從2003年以來一直在增加，對于季節(jié)性流感a/h3n2而言，金剛烷類現(xiàn)在被認為是無效的。實際上，所有2009h1n1和季節(jié)性h3n2病毒株均對金剛烷類(金剛乙胺和金剛烷胺)具有抗藥性，對于奧塞米韋(最廣泛被開具處方的神經氨酸酶抑制劑(nai))，who報告了在2007/2008流感季節(jié)開始的顯著出現(xiàn)的流感a/h1n1抗藥性；并且在南半球持續(xù)了2008年的第二和第三季度。在2008年的第四季度公開了甚至更嚴重的數(shù)字(北半球)，其中所有測試的分離物的95％顯示對奧塞米韋不敏感?？紤]到現(xiàn)在大多數(shù)國家的政府已經作為它們的流感大流行準備計劃的一部分儲備奧塞米韋的事實，顯然對新的有效藥物的需求大大增加。為了解決對更有效的療法的需求，已經用具有不同作用機制的抗病毒藥的二聯(lián)或甚至三聯(lián)組合進行了初步研究。對金剛烷類和神經氨酸酶抑制劑的組合在體外和體內進行了分析，發(fā)現(xiàn)它們高度協(xié)同作用。然而，已知的是，非常迅速地出現(xiàn)了對這兩類抗病毒藥均有抗藥性的病毒，這一問題無法通過組合使用這些已有的抗病毒藥來解決。

流感病毒聚合酶抑制劑是靶向于聚合酶的轉錄活性的新藥。針對病毒聚合酶的帽結合和內切核酸酶活性部位的選擇性抑制劑通過停止病毒增殖周期而大幅度地減弱病毒感染。這兩個靶標位于聚合酶復合物的不同亞單位內，因此代表獨特的藥物靶標。由于兩個功能都是所謂的“搶帽”機制(其是病毒轉錄所必需的)所需要的這一事實，預期同時抑制兩種功能會高度協(xié)同地起作用。這種高度有效的藥物組合將導致更低的物質濃度，并且因此導致改善的劑量-響應關系和更佳的副作用特性。

在所有甲型流感病毒株(例如鳥和人)、甚至乙型流感病毒中這兩個活性部位都是高度保守的，因此這種高度的序列保守性為這些靶標不可能引發(fā)迅速抗藥病毒產生的認知提供了依據(jù)。另外，與宿主蛋白質的緊密相互作用使得這些病毒蛋白質更不容易突變。因此，無論是何種病毒株，各自和組合使用的內切核酸酶和帽結合抑制劑是對抗季節(jié)性和大流行流感這二者的理想藥物候選物。

內切核酸酶抑制劑和帽結合抑制劑的組合或靶向于內切核酸酶活性部位和帽結合結構域二者的雙重特異性聚合酶抑制劑將有效對抗對金剛烷類和神經氨酸酶抑制劑有抗藥性的病毒株，而且合并了對產生抗藥性的低敏感性的優(yōu)點與對抗寬范圍的病毒株的活性。

(ii)不同抗病毒靶標的抑制劑(特別是靶向于流感的)的組合集中于作為雙或多組合療法的具有(優(yōu)選流感病毒)聚合酶抑制劑的組合。流感病毒聚合酶抑制劑是靶向于聚合酶轉錄和復制活性的新藥。針對病毒聚合酶的選擇性抑制劑通過停止病毒增殖周期而大幅度地減弱了病毒感染。預計特別針對病毒細胞內靶標的聚合酶抑制劑與不同抗病毒靶標的抑制劑的組合高度協(xié)同地起作用。這基于以下事實：這些不同類型的抗病毒藥表現(xiàn)出完全不同的作用機制，其需要有利地、協(xié)同地作用于所述組合的抗病毒功效的不同的藥動學性質。

這種高度有效的藥物組合會導致更低的物質濃度，并且從而導致改善的劑量-響應關系和更佳的副作用特性。此外，以上針對聚合酶抑制劑所述的優(yōu)點普遍存在于不同抗病毒靶標的抑制劑與聚合酶抑制劑的組合中。

典型地，將選自第一組聚合酶抑制劑的至少一種化合物(例如，帽結合和內切核酸酶抑制劑)與選自第二組聚合酶抑制劑的至少一種化合物組合。

能用于該類型的組合療法的所述的第一組聚合酶抑制劑包括但不限于通式(v)的化合物。

能用于該類型的組合療法的所述的第二組聚合酶抑制劑包括但不限于美國申請us2013/0102600中所定義的通式(v)的化合物、美國申請us2013/0102601中所定義的通式(ii)的化合物、wo2011/000566、wo2010/110231、wo2010/110409、wo2006/030807或us5,475,109中所公開的化合物以及flutimide及其類似物、法匹拉韋(favipiravir)及其類似物、表棓兒茶素棓酸酯(epigallocatechingallate)及其類似物、以及核苷類似物例如利巴韋林。

(iii)聚合酶抑制劑與神經氨酸酶抑制劑的組合

流感病毒聚合酶抑制劑是靶向于聚合酶的轉錄和復制活性的新藥。預計特異性地針對病毒細胞內靶標的聚合酶抑制劑與不同的細胞外抗病毒靶標、尤其是(例如病毒)神經氨酸酶的抑制劑的組合高度協(xié)同地起作用。這基于以下事實：這些不同類型的抗病毒藥表現(xiàn)出完全不同的作用機制，其需要有利地、協(xié)同地作用于所述組合的抗病毒功效的不同的藥動學性質。

這種高度有效的藥物組合會導致更低的物質濃度，并且從而導致改善的劑量-響應關系和更佳的副作用特性。此外，以上針對聚合酶抑制劑所述的優(yōu)點普遍存在于不同抗病毒靶標的抑制劑與聚合酶抑制劑的組合中。

典型地，將選自上述的第一組聚合酶抑制劑的至少一種化合物與至少一種神經氨酸酶抑制劑組合。

對所述的神經氨酸酶抑制劑(特別是流感神經氨酸酶抑制劑)沒有特別限制。實例包括扎那米韋、奧塞米韋、帕拉米韋(peramivir)、kdndana、fana和環(huán)戊烷衍生物。

(iv)聚合酶抑制劑與m2通道抑制劑的組合

流感病毒聚合酶抑制劑是靶向于聚合酶的轉錄和復制活性的新藥。預計特異性地針對病毒細胞內靶標的聚合酶抑制劑與不同的細胞外和細胞質抗病毒靶標、尤其是病毒m2離子通道的抑制劑的組合高度協(xié)同地起作用。這基于以下事實：這些不同類型的抗病毒藥表現(xiàn)出完全不同的作用機制，其需要有利地、協(xié)同地作用于所述組合的抗病毒功效的不同的藥動學性質。

這種高度有效的藥物組合會導致更低的物質濃度，并且從而導致改善的劑量-響應關系和更佳的副作用特性。此外，以上針對聚合酶抑制劑所述的優(yōu)點普遍存在于不同抗病毒靶標的抑制劑與聚合酶抑制劑的組合中。

典型地，將選自上述的第一組聚合酶抑制劑的至少一種化合物與至少一種m2通道抑制劑組合。

對m2通道抑制劑(特別是流感m2通道抑制劑)沒有特別限制。實例包括金剛烷胺和金剛乙胺。

(v)聚合酶抑制劑與α葡糖苷酶抑制劑的組合

流感病毒聚合酶抑制劑是靶向于聚合酶的轉錄和復制活性的新藥。預計特異性地針對病毒細胞內靶標的聚合酶抑制劑與不同的宿主細胞靶標、尤其是α葡糖苷酶的抑制劑的組合高度協(xié)同地起作用。這基于以下事實：這些不同類型的抗病毒藥表現(xiàn)出完全不同的作用機制，其需要有利地、協(xié)同地作用于所述組合的抗病毒功效的不同的藥動學性質。這種高度有效的藥物組合會導致更低的物質濃度，并且從而導致改善的劑量-響應關系和更佳的副作用特性。此外，以上針對聚合酶抑制劑所述的優(yōu)點普遍存在于與病毒復制相互作用的細胞靶標的抑制劑與聚合酶抑制劑的組合中。

典型地，將選自上述的第一組聚合酶抑制劑的至少一種化合物與至少一種α葡糖苷酶抑制劑組合。

對α葡糖苷酶抑制劑沒有特別限制。實例包括chang等,antiviralresearch2011,89,26-34中所述的化合物。

(vi)聚合酶抑制劑與其它流感靶標的配體的組合

流感病毒聚合酶抑制劑是靶向于聚合酶的轉錄和復制活性的新藥。預計特異性地針對病毒細胞內靶標的聚合酶抑制劑與不同的細胞外、細胞質或細胞核抗病毒靶標的抑制劑的組合高度協(xié)同地起作用。這基于以下事實：這些不同類型的抗病毒藥表現(xiàn)出完全不同的作用機制，其需要有利地、協(xié)同地作用于所述組合的抗病毒功效的不同的藥動學性質。

這種高度有效的藥物組合會導致更低的物質濃度，并且從而導致改善的劑量-響應關系和更佳的副作用特性。此外，以上針對聚合酶抑制劑所述的優(yōu)點普遍存在于不同抗病毒靶標的抑制劑與聚合酶抑制劑的組合中。

典型地，將選自上述的第一組聚合酶抑制劑的至少一種化合物與至少一種另外的流感靶標的配體組合。

對另外的流感靶標的配體沒有特別限制。實例包括作用于唾液酸酶融合蛋白的化合物(例如，fludase(das181)、sirna和硫代磷酸寡核苷酸)、信號轉導抑制劑(例如，erbb酪氨酸激酶、abl激酶家族、map激酶、pkca-介導的erk信號發(fā)放的活化)以及干擾素(誘導物)。

(vii)(優(yōu)選流感)聚合酶抑制劑與用作最小化疾病癥狀的輔藥(adjuvant)的化合物(抗生素、抗炎藥如cox抑制劑(例如，cox-1/cox-2抑制劑、選擇性cox-2抑制劑)、脂氧化酶抑制劑、ep配體(特別是ep4配體)、緩激肽配體和/或大麻素配體(例如，cb2激動劑)的組合。流感病毒聚合酶抑制劑是靶向于聚合酶的轉錄和復制活性的新藥。特異性地針對病毒細胞內靶標的聚合酶抑制劑與用作最小化疾病癥狀的輔藥的化合物的組合解決了病毒感染的起因性和癥狀性病理結果。預計該組合協(xié)同地其作用，因為這些不同類型的藥物表現(xiàn)出完全不同的作用機制，其需要有利地、協(xié)同地作用于所述組合的抗病毒功效的不同的藥動學性質。

這種高度有效的藥物組合會導致更低的物質濃度，并且從而導致改善的劑量-響應關系和更佳的副作用特性。此外，以上針對聚合酶抑制劑所述的優(yōu)點普遍存在于不同抗病毒靶標的抑制劑與聚合酶抑制劑的組合中。

在不脫離本發(fā)明的范圍的情況下本發(fā)明的各種調整和變型對于本領域技術人員而言是顯而易見的。盡管已經使用具體的優(yōu)選實施方案對本發(fā)明進行了描述，但是應當理解的是要求保護的發(fā)明不應當被不合理地局限于這些具體的實施方案。實際上，對于相關領域的技術人員而言顯而易見的所述的實施本發(fā)明的方式的各種調整也被本發(fā)明所涵蓋。

下面的實施例僅用于對本發(fā)明進行舉例說明，絕不應當理解為是對所附的權利要求所給出的本發(fā)明范圍的限制。

實施例

fret內切核酸酶活性測定法

如dias等,nature2009；4月16日；458(7240),914-918中所述的那樣制備并純化了具有流感內切核酸酶活性的甲型流感病毒(iav)pa-nter片段(氨基酸1–209)。將該蛋白質溶解在含有20mmtrisph8.0、100mmnacl和10mmβ-巰基乙醇的緩沖液中，將等分試樣貯存在–20℃。

將20個堿基的用5′-fam熒光團和3′-bhq1猝滅劑雙重標記的rnaoligo作為通過pa-nter的內切核酸酶活性被裂解的底物。rna底物的裂解從猝滅劑中釋放出熒光團，從而導致熒光信號增加。

將所有測定組分稀釋在含有20mmtris-hclph8.0、100mmnacl、1mmmncl2、10mmmgcl2和10mmβ-巰基乙醇的測定緩沖液中。pa-nter的終濃度是0.5μm和1.6μmrna底物。將測試化合物溶解在dmso中，一般在兩個濃度或者濃度系列下測試，從而使得最終的板孔dmso濃度是0.5％。在其中化合物在該濃度下不溶解的那些情況中，將它們在最高可溶的濃度下進行測試。

在一式八份的白色384孔微量滴定板(perkinelmer)的孔中提供5μl每種化合物稀釋液。加入pa-nter稀釋液后，將板密封并在室溫下孵育30min，然后加入1.6μm用測定緩沖液稀釋的rna底物。隨后，在微量滴定板讀數(shù)器(synergyht,biotek)中在485nm的激發(fā)波長和535nm的發(fā)射波長下測量裂解的rna的增加的熒光信號。動力學讀數(shù)間隔是35秒，敏感度是35。使用20min期間的熒光信號數(shù)據(jù)計算底物裂解的初始速度(v0)。最終讀數(shù)是與未處理的樣品相比化合物處理的樣品的v0的％降低。半數(shù)最大抑制濃度(ic50)是化合物抑制生物學或生物化學功能的有效性的量度，并且由最大100μm–至少2nm范圍內的給定濃度系列下的初始反應速度(v0)計算得到。

細胞致病作用(cpe)測定法

甲型流感病毒(iav)獲自美國組織培養(yǎng)物保藏中心(americantissueculturecollection)(a/aichi/2/68(h3n2)；vr-547)。通過以下方法制備病毒儲備液：在mardin-darby犬腎(mdck；atccccl-34)細胞上繁殖病毒，如reed,l.j.和h.muench.1938,am.j.hyg.27:493-497中所述用50％組織培養(yǎng)物感染劑量(tcid50)分析測定病毒儲備液的感染滴度。

用含有10％胎牛血清(fbs)、2mml-谷氨酰胺和1％抗生素(全部來自paa)的dmem/ham’sf-12(1:1)培養(yǎng)基將mdck細胞以2×10⁴個細胞/孔接種在96孔板中。直至感染前，將細胞在37℃、5.0％co2下孵育5小時，從而在孔的底部形成～80％匯合單層。將每種測試化合物溶解在dmso中，一般在25μm和250μm下進行測試。在其中化合物在該濃度下不溶的那些情況中，將它們在最高可溶濃度下進行測試。將化合物稀釋在感染培養(yǎng)基(dmem/ham’sf-12(1:1)，含有5μg/ml胰蛋白酶和1％抗生素)中，以便最終板孔dmso濃度為1％。將病毒儲備液稀釋在感染培養(yǎng)基(dmem/ham’sf-12(1:1)，含有5μg/ml胰蛋白酶、1％dmso和1％抗生素)中，以便理論感染復數(shù)(moi)為0.05。

除去培養(yǎng)基并且用pbs進行一個洗滌步驟后，將病毒和化合物一起加入到細胞中。在用于細胞毒性測定的孔中(即，不存在病毒感染)，不加入病毒混懸液。代之以加入感染培養(yǎng)基。每個處理均一式兩份地進行。在37℃、5％co2下孵育48小時后，用顯微鏡觀察每個孔的表觀細胞毒性、沉淀物形成或其它值得注意的異常。然后，用celltiter-glo發(fā)光細胞生存力測定法(promega)測定細胞生存力。小心地取出上清液，向每個孔中加入65μl重構的試劑，在溫和振搖下于室溫孵育15min。然后，將60μl溶液轉移到不透明的板中，用synergyht板讀數(shù)器(biotek)測量發(fā)光(rlu)。

用與未感染的未處理的細胞相比的未感染的處理的細胞的相對細胞生存力值評價化合物的細胞毒性。將在測試濃度下相對生存力低于80％的物質視為是細胞毒性的，在更低濃度下再進行測試。

如下計算經化合物處理的病毒介導的細胞致病作用(cpe)的降低：從感染的處理的樣品的響應(rlu)中減去感染的未處理的樣品的響應(rlu)，然后用相應的未感染的樣品的生存力歸一化，得到％cpe降低。半數(shù)最大抑制濃度(ic50)是化合物抑制生物學或生物化學功能的有效性的量度，是由最大100μm–至少100nm范圍內的給定濃度系列的rlu響應計算得到的。

biacore測定法

根據(jù)制造商的方案，通過胺偶聯(lián)將鳥h5n1流感病毒的pb2帽結合結構域(cbd)固定在cm7傳感器芯片(gehealthcare)表面上。用ph6.5的10mm磷酸鹽緩沖液稀釋蛋白質。作為用于固定化的運行緩沖液，使用hbs-ep緩沖液(10mmhepes,150mmnacl,3mmedta,0,005％表面活性劑p20)。使用30μg/ml的蛋白質濃度和12min的接觸時間，達到了約8000ru(相對響應單位)的固定水平。

為了進行化合物篩選，使用含有10mmtris,3mmedta,150mmnacl,0.005％surfactantp20(gehealthcare/biacore),1mmdtt,0.5％dmso的運行緩沖液。用不含dmso的1.005x樣品緩沖液(1.005xtris/edta/nacl/p20/dtt；由10x儲備溶液稀釋的)將每種化合物的2mmdmso儲備溶液稀釋至10μm和0.5％dmso終濃度。分別用m7gtp(sigmaaldrich)和sav-7160

作為參比和濃度為4mm和10μm的芯片穩(wěn)定性對照。制備每種參比化合物的儲備溶液并且將等分試樣貯存在–20℃。

對于緩沖液，如下計算體效應(bulkeffect)(基質)：從活性流動細胞fc2中減去用參比流動細胞fc1得到的響應，得到相對響應單位(ru)，其反映化合物與配體的結合。緩沖液中的有機溶劑例如dmso導致高的體效應，由于配體固定其在參比流動細胞與活性流動細胞之間有區(qū)別。為了解釋這些差異，建立了校正曲線。測定緩沖液中在0.1％-1.5％范圍內的8個dmso濃度，通過繪制fc2-fc1與fc1的關系圖計算線性校正曲線。然后用通過校正曲線上的各個fc1信號和對應的fc2-fc1差所得到的溶劑因子校正每種樣品的相對響應。為了解釋化合物的不同大小，將緩沖液和溶劑校正的響應單位用分子量標準化。

通過測量200μm-1nm濃度范圍內分析物與配體的結合親和性來測定親和常數(shù)(kd值)。kd值是這樣一種濃度，在該濃度下，50％的結合位點是飽和的且使用線性曲線擬合模型計算。

ic50值的測定–轉錄測定法(ta測定法)

ta測定法原理

為了分析所述抑制劑的活性，使用完整的rnp復合物在不含細胞的環(huán)境中進行轉錄測定法(ta)，但不使用放射性標記的核苷酸。

體外合成的加帽的mrnaoligo用作病毒mrna合成的引物，同時使用2.0技術檢測用于病毒rnp和新合成的病毒mrna的搶帽(cap-snatching)底物。(qg)技術基于與包被的96-孔板結合的rna雜交，然后是分支dna(bdna)信號擴增。三種不同類型的探針負責特異性雜交至所關注的基因。俘獲延伸物(ce)雜交至特異性基因區(qū)并且同時將rna固定于qg俘獲板上。標記延伸物(le)也特異性地雜交至所關注的基因，提供用于信號擴增樹的序列，以便通過preamplifier(preamp)、amplifier(amp)和堿性磷酸酶標記探針的依次雜交疊加。然后通過添加化學發(fā)光底物和使用用于讀數(shù)的微量培養(yǎng)板發(fā)光計檢測信號。第三探針阻斷非特異性相互作用(blockingprobe；bp)。通常，用于iav檢測的探針組被設計用于檢測反義基因組vrna或合成的正義rna(+rna)，對于翻譯而言在crna或mrna之間無區(qū)分。對于ta測定法，采取探針組和qg2.0方案，并且對其進行調整以適合生化測定目的，該生化測定適合于測試無細胞環(huán)境中的抗病毒化合物。

材料和方法

化合物

所有化合物均溶于dmso并且貯存在4℃。所有其它試劑均得自sigma–aldrich，另有說明的除外。

rna底物的制備

所用的底物rna來源于根據(jù)制造商的方案(但使用16hr的延長的孵育時間)生產的用t7高收率rna合成試劑盒(newenglandbiolabsinc.)合成的體外轉錄的rna。使用mirneasy小型試劑盒(qiagen)凝膠純化rna產物。使用scriptcapm7g加帽系統(tǒng)(cellscript,madisonwi)以酶促方式給rna加帽。得到的加帽的rna寡核苷酸(5’-m7gpppg-gggaauacucaagcuaugcaucgcauuaggcacgucgaagua-3‘；seqidno:1)用作流感病毒聚合酶的引物。

rnp的制備

所有實驗均用iav株a/pr/8/34進行，其在含胚雞蛋中擴增或由charlesriverlaboratories純化和濃縮獲得。將蛋-擴增的病毒用4％w/vpeg8000在含有100mmnacl的2mmtris-hcl(ph8.0)緩沖液中進行peg-沉淀(4℃,45min)，在4℃以3600g離心45min。將沉淀物混懸在含有100mmnacl和6％w/v蔗糖的10mmtris-hcl(ph8.0)緩沖液中，然后通過30％w/v蔗糖墊純化(109,000g,120min,4℃)。

如之前所公開的那樣(進行一些調整)(klumpp等2001.influenzavirusendoribonuclease,p.451-466,342ed.)進行rnp純化。將病毒凍干物以2mg/ml的病毒蛋白質終濃度溶解在1x裂解緩沖液(1％w/vtritonx-100,1mg/ml溶血卵磷脂,2.5mmmgcl2,100mmkcl,5mmdtt,2.5％v/v甘油,20mmtris-hcl(ph8.0),20u/mlrnase抑制劑)中，然后在30℃孵育60分鐘。將3.3ml得到的裂解物荷載至甘油梯度(2ml70％v/v，1.5ml50％v/v，0.75ml40％v/v和3.6ml33％v/v–在20mmtris-hcl、50mmnacl、5mmdtt、5mm2-巰基乙醇中緩沖)。在4℃、240,000g下用sorvall超速離心機ah641轉子將所述梯度旋轉6小時。從梯度上部收集級分(0.5ml)。將含有rnp顆粒的級分合并，用10kdvivaspin2柱進一步濃縮，貯存在-20℃。通過uv光譜法測定rnp濃度，使用1.0＝60mg/mlrnp的od260nm作為換算因子(klumpp等2001.influenzavirusendoribonuclease,p.451-466,342ed.)。

rna分析和轉錄測定法(ta測定法)

通過使用設計用于檢測反義基因組vrna(-rna；目錄號sf-10318)、新合成的正義rna(+rna；目錄號sf-10049)或新合成的病毒mrna(ta測定法；sf-10542)的特異性探針組根據(jù)制造商的說明(不同之處在于操作過程中的所有孵育步驟均是在49℃下進行的)分析所有類型的病毒rna。

對于標準反應，將80pmrnp在30℃下與在反應緩沖液(55mmtris-hcl,20mmkcl,1mmmgcl2,0.2％v/vtritonx-100,0.25u/μlrnaseout,12.5mmnacl,1.25mmdtt,1.25mm2-巰基乙醇,12.5％v/v甘油)中的1％v/v最終dmso濃度的抑制劑稀釋液系列一起孵育2小時。然后加入2nm加帽的rna底物，然后在30℃下孵育2小時。通過在95℃下孵育5min終止反應。

為了檢測合成的mrna，將2.0(panomics.2007.quantigene2.0reagentsystem.usermanual)與專用的探針組一起使用。該探針組由俘獲延伸劑(ce)、標記延伸劑(le)和封閉探針(bp)組成，由affymetrix/panomics生產且以所有3種的混合物的形式提供。探針序列如seqidnos：5－20所示，也如圖1中所示。

使用graphpadprism分析響應值(相對發(fā)光單位)，以便使用4-參數(shù)邏輯方程測定ic50值和95％置信區(qū)間。包括陽性對照和陰性對照以便定義用于擬合曲線的上限值和下限值。

通過將純化的rnp與已知序列的加帽的rna底物一起孵育生成了從頭合成的病毒mrna。

探針組“ta測定法”檢測新合成的編碼核蛋白(np)的病毒mrna，標記延伸劑(le1和le2)分別特異性地雜交至從44-merrna底物上裂解的搶帽序列5’-帽-gggggaauacucaag-3’(seqidno:2)和多聚a序列。俘獲延伸劑(ce1-9)特異性地雜交至iavnp基因的編碼區(qū)內的區(qū)。探針組“+rna”通過特異性地結合該基因內的多于10個的不同區(qū)檢測編碼np的正義病毒rna。該探針組的le和ce雜交至核苷酸1與1540之間的區(qū)(genbankcy147505)并且在病毒mrna與病毒crna之間無區(qū)分。第三探針組“-rna”特異性地雜交至編碼非結構蛋白質(ns)的反義rna(nsrna)。

本發(fā)明的化合物的ta測定法結果

使用上述ta測定法，測定了本發(fā)明的化合物的ic50值。

合成實施例

在下文中，除非給出具體的合成方法，否則化合物是按照通用方案制備的。

d-1-01

d-01-02的合成

將叔丁基4-氯-1h-吡唑并[4,3-c]吡啶(tert-butyl4-chloro-1h-pyrazolo[4,3-c]pyridine)(30.6mg,0.2mmol)和e-001(68mg,0.2mmol)的混合物在100℃加熱過夜。加入meoh(2ml)，通過制備型-tlc(乙酸乙酯/石油醚＝1/1)純化所得物，得到d-01-02(50mg,54.5％)，為黃色油狀物。

d-1-01的合成：

向d-01-02(50mg，0.1mmol)在dcm(2ml)中的溶液中加入tfa(2ml)。將該溶液在室溫攪拌至lcms證實d-01-02消失。然后減壓濃縮所得物，通過制備型-hplc純化殘余物，得到產物d-1-01(24.8mg，61％)，為淺黃色固體。

6-((1h-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基氨基)甲基)-9-羥基-2-異丙基-3，4-二氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-1，8(2h)-二酮

得到d-1-01，為淺黃色固體。

收率：33％

mp：

ms(esi)：369(m+h)⁺

1hnmr(d6-dmso，400hz)：

δ8.63(s，1h)，7.67-7.68(m，1h)，7.22(d，j＝7.2hz，1h)，6.50(s，1h)，4.87(s，2h)，4.75-4.79(m，1h)，4.29(s，2h)，3.71(s，2h)，1.22(d，j＝6.8hz，6h).

d-2-01：

d-2-01的合成：

將6-溴-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-3(2h)-酮(21.4mg，0.1mmol)和e-001(34mg，0.1mmol)的混合物在100℃加熱過夜。加入meoh(2ml)，通過制備型-tlc(乙酸乙酯/石油醚＝1/1)純化所得物，得到d-2-01(1.5mg，3.5％)，為白色固體。

6-((6-氨基吡啶-3-基氨基)甲基)-9-(芐基氧基)-2-異丙基-3，4-二氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-1，8(2h)-二酮

得到d-2-01，為白色固體。

收率：3.5％

mp：

ms(esi)：432(m-h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ7.45-7.47(m，2h)，7.31-7.36(m，6h)，7.25-7.27(m，1h)，6.59(s，1h)，5.18(s，2h)，4.71-4.74(m，1h)，4.24-4.26(m，2h)，3.81(s，2h)，3.76(s，2h)，3.40-3.43(m，2h)，1.21(d，j＝6.8hz，6h)

d-2-02：

d-2-02-1的合成：

向2-(1h-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基氧基)乙醇(36mg，0.2mmol)在dmf(2ml)中的混合物中加入nah(7.6mg，0.3mmol)和e-002(68mg，0.2mmol)。將該混合物在30℃攪拌3h。通過制備型-tlc(乙酸乙酯/石油醚＝1/1)純化所得物，得到d-2-02-1(50mg，50％)，為黃色油狀物。

d-2-02的合成：

按照與d-1-01相同的方式，通過制備型-hplc純化，得到d-2-02(5.8mg，1.3％)，為棕色油狀物。

6-((2-(1h-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基氧基)乙氧基)甲基)-9-羥基-2-異丙基-3，4-二氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-1，8(2h)-二酮

得到d-2-02，為棕色固體。

收率：0.7％

mp：

ms(esi)：414(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.35(s，1h)，7.98(s，1h)，7.27(br，1h)，6.32(s，1h)，5.95(s，2h)，4.85-4.93(m，1h)，4.60-4.62(m，4h)，3.99(t，j＝4.4hz，2h)，3.81(s，2h)，1.30(d，j＝6.8hz，6h).

d-2-03：

d-2-03-1的合成：

將e-001(68mg，0.2mmol)和5-溴-3-氧代-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-2(3h)-甲酸叔丁酯(62.8mg，0.2mmol)、pd(dppf)cl2(5mg)、cs2co3(130mg，0.4mmol)在1，4-二烷(3ml)中的混合物在155℃攪拌50min。通過硅膠柱色譜法(乙酸乙酯/石油醚＝1/1)純化所得物，得到dual-008-1(35mg，13％)，為黃色油狀物。

d-2-03的合成：

按照與d-1-01相同的方式，通過制備型-hplc純化，得到d-2-03(6.9mg，29.6％)，為棕色固體。

9-羥基-2-異丙基-6-((3-氧代-2，3-二氫-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-5-基氨基)甲基)-3，4-二氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-1，8(2h)-二酮

得到d-2-03，為棕色固體。

收率：3.8％

mp：

ms(esi)：385(m+h)⁺

1hnmr(d6-dmso，400hz)：

δ12.39(s，1h)，8.35(s，1h)，6.93-6.95(m，1h)，6.28-6.31(m，2h)，6.29(d，j＝7.2hz，1h)，4.72-4.75(m，1h)，4.49(s，2h)，4.19(s，2h)，3.64(s，2h)，1.19(d，j＝6.8hz，6h)，

d-2-04：

d-2-04-1的合成：

向n1-(1h-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-基)乙烷-1,2-二胺(35.4mg,0.2mmol)在dmf(2ml)中的混合物中加入k2co3(40mg,0.3mmol)和e-002(68mg,0.2mmol)。將該混合物在30℃攪拌3h。通過制備型-tlc(乙酸乙酯/石油醚＝1/1)純化所得物，得到d-2-04-1(50mg,50％)，為棕色油狀物。d-2-04的合成：

按照與d-1-01相同的方式，通過制備型-hplc純化，得到d-2-04(5.8mg,1.3％)，為棕色固體。

6-((2-(1h-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-基氨基)乙基氨基)甲基)-9-羥基-2-異丙基-3,4-二氫-1h-吡啶并[1,2-a]吡嗪-1,8(2h)-二酮

得到d-2-04，為棕色固體。

收率：0.7％

mp：

ms(esi)：412(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.50(s，1h)，7.62(d，j＝6.8hz，1h)，7.12(d，j＝6.8hz，1h)，6.80(s，1h)，4.52-4.60(m，1h)，4.46(s，2h)，4.29(s，2h)，4.01(s，2h)，3.73(s，2h)，3.52(s，2h)，1.28(d，j＝6.8hz，6h).

d-3-01-2：

d-3-01的合成：

向3-氧代-2，3-二氫-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-6-甲酸(50mg，0.28mmol)在dcm(5ml)中的溶液中依次加入草酰二氯(71mg，0.56mmol)和dmf(1滴)。將反應混合物在室溫攪拌3h。減壓濃縮，得到粗d-3-01(50mg，91％)，將其直接用于下一步。

d-3-01-3-3的合成：

向3-氨基苯甲酸甲酯(38mg，0.25mmol)、tea(50mg，0.50mmol)在dcm(5ml)中的溶液中滴加d-3-01(50mg，0.25mmol)。將該溶液在室溫攪拌過夜，然后濃縮。通過制備型-tlc(meoh/dcm＝1/15)純化殘余物，得到d-3-01-3-3(59mg，76％)，為黃色油狀物。

d-3-01-3-2的合成：

將d-3-01-3-3(59mg，0.19mmol)和lioh(9mg，0.38mmol)在meoh(3ml)中的混合物在室溫攪拌過夜。真空除去溶劑。加入水，用2nhcl將該溶液的ph調整至5。過濾產物，用水洗滌固體，得到d-3-01-3-2(41mg，77％)，為淺黃色固體。

d-3-01-3-1的合成：

將d-3-01-3-2(41mg，0.15mmol)和hatu(68mg，0.18mmol)在dmf(3ml)中的混合物在室溫攪拌0.5h。此后，加入tea(30mg，0.30mmol)和e-001(51mg，0.15mmol)。將反應混合物在室溫攪拌過夜。通過制備型-tlc純化產物，得到d-3-01-3-1(29.5mg，36％)，為黃色油狀物。

d-3-01-3的合成：

按照與d-1-01相同的方式，通過制備型-hplc純化，得到d-3-01-1(2.5mg，10％)，為棕色固體。

n-(3-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基甲?；?苯基)-3-氧代-2，3-二氫-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-6-甲酰胺

得到d-3-01-3，為棕色固體。

收率：1.6％

mp：

ms(esi)：532(m+h)⁺

1hnmr(d6-dmso，400hz)：

δ12.70(s，1h)，10.54(s，1h)，9.10(s，1h)，8.76(s，1h)，8.27(s，1h)，7.97(d，j＝8.0hz，1h)，7.60-7.67(m，2h)，7.50(t，j＝8.0hz，1h)，7.32(d，j＝10.0hz，1h)，6.41(s，1h)，4.70-4.75(m，1h)，4.56(s，2h)，4.29(s，2h)，3.76(s，2h)，1.18(d，j＝6.8hz，6h).

d-3-01-4：

按照與d-3-01-3載體的方式合成了d-3-01-4。通過制備型-hplc純化得到d-3-01-4(2.2mg,8％)，為棕色固體。

(r)-n-(3-(3-氯苯基)-1-((9-羥基-2-異丙基-1,8-二氧代-2,3,4,8-四氫-1h-吡啶并[1,2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基)-1-氧代丙烷-2-基)-3-氧代-2,3-二氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-6-甲酰胺

得到d-3-01-4，為棕色固體。

收率：1.3％

mp：

ms(esi)：594(m+h)⁺

1hnmr(d6-dmso，400hz)：

δ12.65(br，1h)，8.93-8.98(m，1h)，8.73-8.75(m，1h)，7.35-7.51(m，2h)，7.23-7.28(m，6h)，5.32(t，j＝4.8hz，1h)，4.66-4.73(m，2h)，4.37-4.46(m，2h)，4.03(br，1h)，3.07-3.12(m，2h)，2.97-3.03(m，2h)，1.17(d，j＝7.2hz，6h).

d-3-01-5：

按照與d-3-01-3相同的方式合成了d-3-01-5。通過制備型-hplc純化，得到d-3-01-5(3.3mg，13％)，為棕色固體。

(r)-n-(2-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基)-2-氧代-1-苯基乙基)-3-氧代-2，3-二氫-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-8-甲酰胺

得到d-3-01-5，為棕色固體。

收率：1.3％

mp：

ms(esi)：546(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.38(br，1h)，7.44-7.58(m，2h)，7.21-7.38(m，5h)，7.09(br，1h)，5.42(br，1h)，5.24(t，j＝4.4hz，1h)，4.41(br，2h)，4.00-4.16(m，2h)，3.40-3.53(m，2h)，1.18-1.20(m，6h).

d-3-02-1：

按照與d-3-01-3類似的方式合成了d-3-02-1-1。通過制備型-hplc純化，得到d-3-02-1(9.5mg，38％)，為黃色固體。

n-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基)-3-氧代-2，3-二氫-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-8-甲酰胺

得到d-3-02-1，為黃色固體。

收率：7％

mp：

ms(esi)：413(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.09(d，j＝6.4hz，2h)7.02(s，1h)，6.85(t，j＝6.8hz，1h)，4.90-4.93(m，1h)，4.81(s，2h)，4.56(s，2h)，3.81(s，2h)，1.30(d，j＝6.8hz，6h).

d-3-02-3：

d-3-02-3-2的合成：

將d-3-02-2(60mg，0.33mmol)和hatu(153mg，0.40mmol)在dmf(3ml)中的混合物在室溫攪拌0.5h。此后，依次加入tea(67mg，0.66mm0l)和1-氨基環(huán)己烷甲酸(47mg，0.33mmol)。將反應混合物在室溫攪拌3h。過濾產物，濃縮濾液，得到粗d-3-02-3-1。向粗d-3-02-3-1在dmf中的溶液(3ml)中依次加入tea(67mg，0.66mmol)、hatu(153mg，0.40mmol)和e-001(112mg，0.33mm0l)。將該混合物在室溫攪拌過夜，然后濃縮。通過制備型-tlc(meoh/dcm＝1/10)純化殘余物，得到d-3-02-3-2(30mg，14％)，為黃色油狀物。

d-3-02-3的合成：

按照與d-1-01相同的方式，通過制備型-hplc純化，得到d-3-02-3(8mg，31％)，為淺黃色固體。

n-(1-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基甲酰基)環(huán)己基)-3-氧代-2，3-二氫-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-8-甲酰胺

得到d-3-02-3，為淺黃色固體。

收率：4％

mp：

ms(esi)：512(m+h)⁺

1hnmr(d6-dmso，400hz)：

δ12.93(s，1h)，8.85(t，j＝4.8hz，1h)，8.81(d，j＝8.4hz，1h)，8.10(d，j＝5.6hz，1h)，7.97(d，j＝6.4hz，1h)，6.78(d，j＝6.8hz，1h)，6.51(s，1h)，4.70-4.73(m，1h)，4.53-4.56(m，1h)，4.43(s，2h)，4.24(s，2h)，3.63(s，2h)，2.15-2.16(m，1h)，1.13-1.18(m，6h)，0.95(d，j＝6.4hz.6h).

d-3-02-4：

按照與d-3-01-3類似的方式合成了d-3-02-4。通過制備型-hplc純化，得到d-3-02-4(6.5mg，26％)，為黃色固體。

3-氧代-2，3-二氫-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-8-甲酸(9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基酯

得到d-3-02-4，為黃色固體。

收率：4.8％

mp：

ms(esi)：414(m+h)⁺

1hnmr(d6-dmso，400hz)：

612.72(s，1h)，12.68(br，1h)，8.12(d，j＝7.2hz，1h)，8.02(d，j＝6.0hz，1h)，6.70(t，j＝6.8hz，1h)，6.47(s，1h)，5.38(s，2h)，4.73-4.76(m，1h)，4.24-4.27(m，2h)，3.61-3.64(m，2h)，1.18(d，j＝6.8hz，6h).

d-3-02-5：

按照與d-3-02-3類似的方式合成了d-3-02-5。通過制備型-hplc純化，得到d-3-02-5(4.1mg，16％)，為淺黃色固體。

n-(1-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基)-1-氧代丁烷-2-基)-3-氧代-2，3-二氫-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-8-甲酰胺

得到d-3-02-5，為淺黃色固體。

收率：2.1％

mp：

ms(esi)：498(m+h)⁺

1hnmr(d6-dmso，400hz)：

δ8.85(d，j＝7.2hz，1h)，8.79(s，1h)，8.09(d，j＝6.0hz，1h)，7.96(d，j＝6.0hz，1h)，6.77(t，j＝6.4hz，1h)，6.18(s，1h)，4.71-4.74(m，1h)，4.57-4.59(m，1h)，4.35(s，2h)，4.09(s，2h)，3.58(s，2h)，3.09-3.11(m，2h)，1.16-1.19(m，6h)，0.91(d，j＝7.2hz，3h).

d-3-02-6：

按照與d-3-01-3類似的方式合成了d-3-02-6。通過制備型-hplc純化，得到d-3-02-6(3.2mg，13％)，為棕色固體。

(r)-n-(2-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基)-2-氧代-1-苯基乙基)-3-氧代-2，3-二氫-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-8-甲酰胺

得到d-3-02-6，為棕色固體。

收率：1.3％

mp：

ms(esi)：546(m+h)⁺

1hnmr(d6-dmso，400hz)：

δ12.91-12.94(m，1h)，9.45-9.49(m，1h)，9.08(br，1h)，8.09(d，j＝6.0hz，1h)，7.94(d，j＝6.4hz，1h)，7.37-7.49(m，6h)，6.76-6.78(m，1h)，5.68-5.70(m，1h)，4.69-4.72(m，1h)，4.42-4.48(m，2h)，3.92(br，2h)，3.82(br，2h)，1.12(d，j＝6.8hz，6h).

(r)-n-(3-(3-氯苯基)-1-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基)-1-氧代丙烷-2-基)-3-氧代-2，3-二氫-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-8-甲酰胺

按照與d-3-01-3相同的方式得到d-3-02-7，為棕色固體。

收率：4.6％

mp：

ms(esi)：594(m+h)⁺

1hnmr(d6-dmso，400hz)：

δ12.94(s，1h)，8.84(d，j＝7.2hz，1h)，8.08(d，j＝7.2hz，1h)，7.91(d，j＝6.8hz，1h)，7.28(s，1h)，7.24(s，2h)，7.15(s，1h)，6.75(d，j＝6.8hz，1h)，6.36(s，1h)，4.85-4.88(m，1h)，4.75-4.78(m，1h)，4.35(s，2h)，4.06(s，2h)，3.57(s，2h)，3.02-3.12(m，2h)，1.17(d，j＝6.8hz，6h).

d-3-03-1：

d-3-03-1的合成：

將4-氯-1h-吡唑并[4，3-c]吡啶(30.6mg，0.2mmol)和3-氨基苯甲酸甲酯(30.2mg，0.2mmol)的混合物在100℃加熱過夜。加入meoh(2ml)，通過制備型-tlc(乙酸乙酯/石油醚＝1/1)純化所得物，得到d-3-03-1-1(38mg，71％)，為白色固體。

在后面的步驟中，按照與d-3-01-3類似的方式合成了d-3-03-1。通過制備型-hplc純化，得到d-3-03-1(2.8mg，13％)，為棕色固體。

3-(1h-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基氨基)-n-((9-(芐基氧基)-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基)苯甲酰胺

得到d-3-03-1，為棕色固體。

收率：2％

mp：

ms(esi)：488(m+h)⁺

1hnmr(d6-dmso，400hz)：

δ14.08(br，1h)，11.25(br，1h)，9.23(t，j＝4.8hz，1h)，8.49(s，1h)，8.10(s，1h)，7.94(d，j＝7.6hz，1h)，7.83(d，j＝6.8hz，1h)，7.64-7.71(m，2h)，7.18(d，j＝6.8hz，1h)，6.54(s，1h)，4.74(t，j＝6.8hz，1h)，4.62(d，j＝4.2hz，2h)，4.34(s，2h)，3.51(s，2h)，1.19(d，j＝6.8hz，6h).

d-5-01：

按照與d-3-01-3類似的方式合成了d-5-01。通過制備型-hplc純化，得到d-5-01(8.7mg，62％)，為淺黃色油狀物。

2-(5-氟-2-(5-氟-1h-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基氨基)-n-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基)丁酰胺

得到d-5-01，為淺黃色油狀物。

收率：26％

mp：

ms(esi)：568(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.48(s，1h)，8.31(s，1h)，8.26(d，j＝7.6hz，1h)，6.72(s，1h)，5.36(t，j＝4.8hz，1h)，4.59-4.64(m，3h)，4.35-4.39(m，1h)，3.76-3.81(m，1h)，3.40-3.44(m，2h)，3.04-2.09(m，2h)，1.32(d，j＝6.8hz，6h)，1.12(t，j＝7.2hz，3h).

d-5-02：

按照與d-3-01-3類似的方式合成了d-5-02。通過制備型-hplc純化，得到d-5-02(4.5mg，32％)，為棕色油狀物。

6-(5-氟-2-(5-氟-1h-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基氨基)-n-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基)己酰胺

得到d-5-02，為棕色油狀物。

收率：12％

mp：

ms(esi)：596(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.63(s，1h)，8.39(d，j＝5.2hz，1h)，8.29(d，j＝4.4hz，1h)，6.65(s，1h)，4.80-4.85(m，1h)，4.47(s，2h)，4.35(s，2h)，3.82(t，j＝6.8hz，2h)，3.72(s，2h)，2.38(t，j＝7.2hz，2h)，1.87-1.90(m，2h)，1.77-1.81(m，2h)，1.56-1.59(m，2h)，1.27(d，j＝6.8hz，6h).

d-5-03：

按照與d-3-01-3類似的方式合成了d-5-03。通過制備型-hplc純化，得到d-5-03(6.2mg，42％)，為淺黃色油狀物。

(s)-2-(5-氟-2-(5-氟-1h-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基氨基)-n-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基)-3-甲基丁酰胺

得到d-5-03，為淺黃色油狀物。

收率：17％

mp：

ms(esi)：582(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.52(s，1h)，8.37(d，j＝2.8hz，1h)，8.30(dd，j＝8.0hz，2.4hz，1h)，6.94(s，1h)，4.63-4.71(m，1h)，4.52-4.59(m，3h)，4.44(d，j＝7.2hz，1h)，4.06-4.10(m，1h)，3.47-3.57(m，2h)，2.37-2.42(m，1h)，1.17-1.22(m，12h).

d-2-06：

按照與d-2-04類似的方式合成了d-2-06。通過制備型-hplc純化，得到d-2-06(3.8mg，1.3％)，為白色固體。

6-((2-(4-氯-1h-吡唑并[4，3-c]吡啶-6-基氨基)乙基氨基)甲基)-9-羥基-2-異丙基-3，4-二氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-1，8(2h)-二酮

得到d-2-06，為白色固體。

收率：0.7％

mp：

ms(esi)：446(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.09(s，1h)，6.50(s，1h)，6.28(s，1h)，4.84-4.88(m，1h)，4.35-4.38(m，2h)，3.83(s，2h)，3.49(t，j＝5.2hz，2h)，3.42(t，j＝5.2hz，2h)，2.97(t，j＝6.0hz，2h)，1.20(d，j＝6.8hz，6h).

d-4-01-5：

d-4-01-5-1的合成：

向d-4-01-1(30mg，0.18mmol)在dcm(3ml)中的混合物中加入草酰二氯(2ml)。將反應混合物在室溫攪拌3h。濃縮該溶液，將殘余物溶于dcm(3ml)。然后加入tea(37mg，0.37mmol)和(r)-2-氨基-3-(3-氯苯基)丙酸(36mg，0.18mmol)，將該溶液在室溫攪拌過夜。濃縮產物，得到d-4-01-5-1(20mg，32％)，將其直接用于下一步。

d-4-01-5的合成：

將d-4-01-5-1(20mg，0.06mmol)和hatu(33mg，0.08mmol)在dmf(3ml)中的混合物在室溫攪拌0.5h。此后，加入tea(14mg，0.14mmol)和e-001(20mg，0.08mmol)。將反應混合物在室溫攪拌過夜。通過制備型-hplc純化所得物，得到d-4-01-5(1.5mg，4％)，為淺白色固體。

(r)-n-(3-(3-氯苯基)-1-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基)-1-氧代丙烷-2-基)-1h-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-甲酰胺

得到d-4-01-5，為淺白色固體。

收率：1％

mp：

ms(esi)：578(m+h)⁺

1hnmr(d6-dmso，400hz)：

δ14.22(br，1h)，12.56(br，1h)，8.55-8.74(m，2h)，8.42-8.45(m，1h)，7.42(s，1h)，7.17-7.36(m，4h)，6.23(s，1h)，4.70-4.80(m，2h)，4.38-4.43(m，1h)，4.25-4.30(m，1h)，4.04(s，2h)，4.35(s，2h)，3.16(d，j＝6.4hz，2h)，1.14(d，j＝6.4hz，6h).

d-5-06：

按照與d-1-01類似的方式合成了d-5-06。通過制備型-hplc純化，得到d-5-06(3.2mg，10％)，為橙色油狀物。

6-((5-氟-2-(5-氟-1h-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基氨基)甲基)-9-羥基-2-異丙基-3，4-二氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-1，8(2h)-二酮

得到d-5-06，為橙色油狀物。

收率：7％

mp：

ms(esi)：483(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.54(s，1h)，8.39(d，j＝3.6hz，1h)，8.29-8.31(m，1h)，7.04(s，1h)，5.08(s，2h)，4.93-4.98(m，1h)，4.71(t，j＝5.2hz，2h)，3.83-3.86(m，2h)，1.32(d，j＝6.8hz，6h).

d-6-03：

按照與d-3-01-3類似的方式合成了d-6-03。通過制備型-hplc純化，得到d-6-03(2.2mg，9％)，為棕色油狀物。

2-環(huán)丙基-n-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基)-5h-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺

得到d-6-03，為棕色油狀物。

收率：15％

mp：

ms(esi)：438(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.41(br，1h)，8.25(s，1h)，6.78(br，1h)，5.44-5.51(m，2h)，5.06-5.10(m，2h)，4.50(br，1h)，3.75(br，2h)，2.29(br，1h)，1.28-1.35(m，6h)，1.04(s，4h).

d-6-04：

按照與d-3-01-3類似的方式合成了d-6-04。通過制備型-hplc純化，得到d-6-04(4.0mg，10％)，為淺白色固體。

2-環(huán)丙基-n-(2-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基)-2-氧代乙基)-5h-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺

得到d-6-04，為淺白色固體。

收率：4％

mp：

ms(esi)：494(m+h)⁺

1hnmr(d6-dmso，400hz)：

δ12.78(br，1h)，12.60(s，1h)，8.63-8.68(m，2h)，8.38(s，1h)，8.30(d，j＝2.8hz，1h)，6.48(s，1h)，4.72-4.75(m，1h)，4.46(d，j＝5.2hz，2h)，4.22-4.25(m，2h)，4.13-4.16(m，2h)，3.65(s，2h)，2.32-2.35(m，1h)，1.18(d，j＝6.8hz，6h)，1.00-1.10(m，4h).

d-2-05：

按照與d-1-01類似的方式合成了d-2-05。通過制備型-hplc純化，得到d-2-05(13mg，76％)，為黃色油狀物。

6-((4-氯-1h-吡唑并[4，3-c]吡啶-6-基氨基)甲基)-9-羥基-2-異丙基-3，4-二氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-1，8(2h)-二酮

得到d-2-05，為黃色油狀物。

收率：55％

mp：

ms(esi)：403(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.81(s，1h)，7.20(s，1h)，6.84(s，1h)，4.92-5.11(m，3h)，4.76(d，j＝1.2hz，2h)，3.86-3.89(m，2h)，1.32(d，j＝6.8hz，6h).

d-3-01-2：

按照與d-3-01-3類似的方式合成了d-3-01-2。通過制備型-hplc純化，得到d-3-01-2(5mg,25％)，為淺黃色油狀物。

n-(2-((9-羥基-2-異丙基-1,8-二氧代-2,3,4,8-四氫-1h-吡啶并[1,2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基)-2-氧代乙基)-3-氧代-2,3-二氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-6-甲酰胺

得到d-3-01-2，為淺黃色油狀物。

收率：4％

mp：

ms(esi)：470(m+h)⁺

1hnmr(d6-dmso，400hz)：

δ12.67(s，1h)，9.09(t，j＝5.2hz，1h)，8.66(d，j＝5.6hz，1h)，8.49-8.52(m，2h)，7.54(t，j＝9.2hz，1h)，7.24-7.29(m，1h)，6.71(s，1h)，4.73(t，j＝6.8hz，1h)，4.41-4.46(m，2h)，4.23-4.32(m，2h)，3.90-3.96(m，2h)，3.52-3.68(m，2h)，1.13-1.24(m，6h).

d-3-02-8：

按照與d-3-02-3類似的方式合成了d-3-02-8。通過制備型-hplc純化，得到d-3-02-8(8mg，31％)，為淺黃色固體。

n-(1-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基甲酰基)環(huán)己基)-3-氧代-2，3-二氫-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-8-甲酰胺

得到d-3-02-8，為淺黃色固體。

收率：4％

mp：

ms(esi)：538(m+h)⁺

1hnmr(d6-dmso，400hz)：

δ12.41(s，1h)，8.33(s，1h)，8.09-8.14(m，1h)，7.94(d，j＝6.8hz，1h)，6.78(t，j＝6.8hz，1h)，4.72(t，j＝6.8hz，1h)，4.21-4.35(m，2h)，4.06(s，1h)，3.51-3.54(m，1h)，3.07(d，j＝6.0hz，4h)，2.06-2.14(m，2h)，1.73-1.79(m，2h)，1.57-1.63(m，2h)，1.45-1.47(m，2h)，1.16(t，j＝7.2hz，6h).

d-3-02-9：

d-3-02-9-1的合成：

將d-3-02-2(60mg，0.33mmol)和hatu(165mg，0.42mmol)在dcm(5ml)中的混合物在室溫攪拌0.5h。此后，加入diea(84mg，0.66mmol)和2-羥基乙基氨基甲酸叔丁酯(204mg，0.33mmol)。將反應混合物在室溫攪拌過夜。通過制備型-tlc(meoh/dcm＝1/5)純化所得物，得到d-3-02-9-1(60mg，55％)，為黃色固體。

d-3-02-9-2的合成：

向d-3-02-9-1(60mg，0.18mmol)在meoh(3ml)中的混合物中加入6nhcl(6ml)。將該混合物在室溫攪拌0.5h，然后濃縮。通過制備型-tlc(meoh/dcm＝1/2)純化殘余物，得到d-3-02-9-2(30mg，73％)，為黃色油狀物。

d-3-02-9-3的合成：

將d-3-02-9-2(30mg，0.13mmol)、k2co3(37mg，0.27mmol)和e-002(48mg，0.13mmol)在dmf(3ml)中的混合物在室溫攪拌3h。過濾該混合物，減壓濃縮。通過制備型-tlc(meoh/dcm＝1/5)純化殘余物，得到d-3-02-9-3(20mg，27％)，為黃色油狀物。

d-3-02-9的合成：

按照與d-1-01相同的方式，通過制備型-hplc純化，得到d-3-02-9(9mg，53％)，為棕色固體。

3-氧代-2，3-二氫-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-8-甲酸2-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基)乙基酯

得到d-3-02-9，為棕色固體。

收率：6％

mp：

ms(esi)：457(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ7.97(d，j＝12.0hz，2h)，6.90(s，1h)，6.76(s，1h)，5.37(s，2h)，4.75-4.80(m，1h)，4.50-4.55(m，2h)，3.70(br，2h)，3.61(br，2h)，3.57(br，2h)，1.17(d，j＝6.4hz，6h).

d-4-01：

按照與d-3-01-3類似的方式合成了d-4-01。通過制備型-hplc純化，得到d-4-01(3mg，18％)，為棕色固體。

n-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基)-1h-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-甲酰胺

得到d-4-01，為棕色固體。

收率：6％

mp：

ms(esi)：397(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.60-8.63(m，2h)，7.38(d，j＝3.2hz，1h)，7.19(s，1h)，4.85-4.90(m，3h)，4.66(s，2h)，3.85(s，2h)，1.26-1.31(m，6h).

d-4-01-3：

按照與d-3-01-3類似的方式合成了d-4-01-3。通過制備型-hplc純化，得到d-4-01-3(10mg，27％)，為棕色固體。

n-(6-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基)-6-氧代己基)-1h-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-甲酰胺

得到d-4-01-3，為棕色固體。

收率：10％

mp：

ms(esi)：510(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.56-8.63(m，2h)，7.31-7.34(m，1h)，6.57(s，1h)，5.03-5.09(m，1h)，4.46(s，2h)，4.31(s，2h)，3.69(d，j＝15.6hz，2h)，3.40-3.46(m，2h)，2.30-2.34(m，2h)，1.66-1.72(m，4h)，1.39-1.46(m，2h)，1.21-1.31(m，6h).

d-4-01-4：

按照與d-3-01-3類似的方式合成了d-4-01-4。通過制備型-hplc純化，得到d-4-01-4(6mg，33％)，為淺白色固體。

n-(3-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基甲?；?苯基)-1h-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-甲酰胺

得到d-4-01-4，為淺白色固體。

收率：6％

mp：

ms(esi)：516(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.70(d，j＝6.0hz，2h)，8.43(s，1h)，7.93-8.00(m，1h)，7.70(s，1h)，7.55(s，1h)，7.34-7.40(m，2h)，4.90-5.12(m，3h)，4.74(s，2h)，3.90(s，2h)，1.32(d，j＝6.0hz，6h).

d-5-04：

按照與d-3-01-3類似的方式合成了d-5-04。通過制備型-hplc純化，得到d-5-04(5mg,71％)，為棕色油狀物。

3-環(huán)丙基-3-(5-氟-2-(5-氟-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基氨基)-n-((9-羥基-2-異丙基-1,8-二氧代-2,3,4,8-四氫-1h-吡啶并[1,2-a]吡嗪-6-基)甲基)丙酰胺

得到d-5-04，為棕色油狀物。

收率：29％

mp：

ms(esi)：594(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.56-8.59(m，2h)，8.26(d，j＝4.4hz，1h)，6.64(s，1h)，4.77(s，1h)，4.50(d，j＝4.0hz，1h)，4.36-4.46(m，4h)，3.54-3.63(m，2h)，2.88(d，j＝4.8hz，2h)，1.28(d，j＝6.8hz，1h)，1.19-1.24(m，6h)，0.43-0.79(m，4h).

d-5-05：

按照與d-3-01-3類似的方式合成了d-5-05。通過制備型-hplc純化，得到d-5-05(5mg，19％)，為棕色油狀物。

順式-3-(5-氟-2-(5-氟-1h-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基氨基)-n-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基)環(huán)己烷甲酰胺

得到d-5-05，為棕色油狀物。

收率：15％

mp：

ms(esi)：608(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.63(s，1h)，8.39(d，j＝6.8hz，1h)，8.32(d，j＝4.4hz，1h)，6.77(s，1h)，5.01(d，j＝9.6hz，2h)，4.54(d，j＝3.2hz，2h)，4.41-4.47(m，2h)，3.73(s，2h)，2.83(s，1h)，2.23-2.31(m，2h)，1.81(s，1h)，1.68(s，1h)，1.55-1.58(m，2h)，1.28-1.32(m，2h)，1.20-1.26(m，6h).

d-6-01：

d-6-02的合成：

將c-003(3.60g，10.1mmol)、環(huán)丙基硼酸(1.30g，15.2mmol)、cs2co3(6.60g，20.3mmol)和pd(dppf)cl2(0.37g，0.51mmol)在二烷(100ml)中的混合物在n2氣氛下回流5h。減壓除去溶劑，通過硅膠柱色譜法(乙酸乙酯/石油醚＝1/50～1/10)純化殘余物，得到d-6-02(2.61g，81％)，為淺黃色固體。

d-6-02-1的合成：

向d-6-02(3.00g，9.5mmol)和磷酸二氫鈉(3.90g，33.1mmol)在叔丁醇/水(50ml/4ml)中的混合物中加入2-甲基-2-丁烯(3.31g，47.0mmol)。然后滴加亞氯酸鈉(2.62g，28.4mmol)在水(4ml)中的混合物。將該混合物在室溫攪拌5h。減壓除去溶劑，用2mhcl將所得物調整至ph＝6.0。用乙酸乙酯(2x30ml)萃取該混合物。干燥有機相，濃縮，得到d-6-02-1(2.61g，83％)，為淺黃色固體。在后面的步驟中，按照與d-6-05類似的方式合成d-6-01。通過制備型-hplc純化，得到d-6-01(5.2mg，24％)，為棕色油狀物。

2-環(huán)丙基-n-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基)-5h-吡咯并[3，2-b]吡嗪-7-甲酰胺(d-6-01)

得到d-6-01，為棕色油狀物。

收率：1％

mp：

ms(esi)：437(m+h)⁺

¹hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.35(s，1h)，8.30(s，1h)，7.17(s，1h)，4.95-5.00(m，3h)，4.67(br，2h)，3.86(br，2h)，2.34(br，1h)，1.31(d，j＝6.4hz，6h)，1.10-1.14(m，4h).

¹³cnmr(d6-dmso，300hz)：

d-6-05：

按照與d-3-02-3-2類似的方式合成d-6-05-1。向d-6-05-1(20mg,0.03mmol)在dcm(3ml)中的溶液中加入tfa(2ml)。將該溶液在室溫攪拌2h，然后濃縮。將殘余物再溶于dcm(5ml)，加入4nnaoh(5ml)。將該溶液在室溫攪拌過夜。用2nhcl將該溶液的ph調整至7。濃縮所得物，用meoh/dcm＝1/10(8mlx3)洗滌固體。濃縮有機相，通過制備型-hplc純化殘余物，得到產物d-6-05(6mg,43％)，為淺白色固體。

(s)-2-環(huán)丙基-n-(1-((9-羥基-2-異丙基-1,8-二氧代-2,3,4,8-四氫-1h-吡啶并[1,2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基)-3-甲基-1-氧代丁烷-2-基)-5h-吡咯并[3,2-b]吡嗪-7-甲酰胺

得到d-6-05，為淺白色固體。

收率：19％

mp：

ms(esi)：536(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ9.01(d，j＝6.8hz，1h)，8.38(s，1h)，8.23(s，1h)，7.07(s，1h)，4.90(s，1h)，4.68(d，j＝5.2hz，1h)，4.56-4.60(m，1h)，4.50(s，3h)，3.74-3.77(m，2h)，2.33-2.35(m，2h)，1.26-1.29(m，4h)，1.11-1.17(m，12h).

d-6-06：

按照與d-6-05類似的方式合成了d-6-06。通過制備型-hplc純化，得到d-6-06(5mg，36％)，為白色固體。

2-環(huán)丙基-n-(1-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基)-1-氧代丁烷-2-基)-5h-吡咯并[3，2-b]吡嗪-7-甲酰胺

得到d-6-06，為白色固體。

收率：16％

mp：

ms(esi)：522(m+h)⁺

1hnmr(d6-dmso，400hz)：

δ12.62(s，1h)，8.82(d，j＝5.6hz，1h)，8.73(d，j＝7.6hz，1h)，8.41(s，1h)，8.29(d，j＝2.8hz，1h)，6.59(s，1h)，4.70-4.74(m，1h)，4.60-4.64(m，1h)，4.45-4.49(m，2h)，4.25-4.33(m，2h)，3.66(s，2h)，2.34(d，j＝8.0hz，1h)，1.77-1.87(m，2h)，1.17(d，j＝4.8hz，6h)，1.06(t，j＝3.2hz，4h)，0.93-1.02(m，3h).

d-6-07：

按照與d-6-05類似的方式合成了d-6-07。通過制備型-hplc純化，得到d-6-07(3mg，21％)，為白色固體。

(r)-2-環(huán)丙基-n-(2-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基)-2-氧代-1-苯基乙基)-5h-吡咯并[3，2-b]吡嗪-7-甲酰胺

得到d-6-07，為白色固體。

收率：9％

mp：

ms(esi)：570(m+h)⁺

1hnmr(d6-dmso，400hz)：

δ12.62(s，1h)，9.34(d，j＝8.0hz，1h)，9.05(s，1h)，8.43(s，1h)，8.30(d，j＝1.4hz，1h)，7.52(d，j＝7.2hz，2h)，7.41(t，j＝7.2hz，2h)，7.35(d，j＝7.2hz，1h)，6.36(s，1h)，5.73(d，j＝7.6hz，1h)，4.68(d，j＝6.8hz，1h)，4.40-4.44(m，1h)，4.07-4.09(m，2h)，3.47-3.49(m，2h)，3.34-3.38(m，2h)，2.33(d，j＝3.6hz，1h)，1.22-1.23(m，6h)，1.13-1.15(m，4h).

d-6-08：

按照與d-6-05類似的方式合成了d-6-08。通過制備型-hplc純化，得到d-6-08(10mg，71％)，為淺白色固體。

2-環(huán)丙基-n-(6-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基)-6-氧代己基)-5h-吡咯并[3，2-b]吡嗪-7-甲酰胺

得到d-6-08，為淺白色固體。

收率：31％

mp：

ms(esi)：550(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.34(s，1h)，8.21(s，1h)，7.11(s，1h)，4.57-4.64(m，4h)，4.11(d，j＝7.2hz，1h)，3.81(s，2h)，3.53(s，2h)，2.33-2.39(m，2h)，2.04(d，j＝9.2hz，1h)，1.72-1.77(m，4h)，1.54(s，2h)，1.24-1.31(m，6h)，1.09-1.15(m，4h).

d-6-09：

按照與d-3-02-3類似的方式合成了d-6-09。通過制備型-hplc純化，得到d-6-09(5mg，42％)，為棕色油狀物。

(3r)-3-(5-氟-2-(3-氧代-3，8a-二氫-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-6-基)嘧啶-4-基氨基)-n-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基)-4-甲基戊酰胺

得到d-6-09，為棕色油狀物。

收率：16％

mp：

ms(esi)：594(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.64(s，1h)，7.94-8.09(m，2h)，7.23(t，j＝9.6hz，1h)，6.56(s，1h)，4.91(s，1h)，4.72-4.80(m，2h)，4.52(s，2h)，4.34-4.37(m，2h)，3.67(s，1h)，2.73-2.80(m，2h)，1.95-2.00(m，1h)，1.20-1.32(m，6h)，1.00-1.12(m，6h).

d-6-10：

按照與d-6-05類似的方式合成了d-6-10。通過制備型-hplc純化，得到d-6-10(10mg，71％)，為棕色固體。

2-環(huán)丙基-n-(1-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基甲?；?環(huán)己基)-5h-吡咯并[3，2-b]吡嗪-7-甲酰胺

得到d-6-10，為棕色固體。

收率：31％

mp：

ms(esi)：562(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.92(s，1h)，8.39(s，1h)，8.21(s，1h)，7.07(s，1h)，4.94(s，1h)，4.45-4.48(m，4h)，3.75(d，j＝9.2hz，2h)，2.30-2.38(m，4h)，1.91-1.98(m，1h)，1.79-1.82(m，4h)，1.67-1.70(m，2h)，1.29-1.37(m，6h)，1.12-1.18(m，4h).

d-6-11：

按照與d-3-02-3類似的方式合成了d-6-11。通過制備型-hplc純化，得到d-6-11(5mg,55％)，為棕色固體。

(2s)-2-(5-氟-2-(3-氧代-3,8a-二氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-6-基)嘧啶-4-基氨基)-n-((9-羥基-2-異丙基-1,8-二氧代-2,3,4,8-四氫-1h-吡啶并[1,2-a]吡嗪-6-基)甲基)-3-甲基丁酰胺

得到d-6-11，為棕色固體。

收率：29％

mp：

ms(esi)：580(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.50(s，1h)，8.18(s，1h)，8.01(d，j＝5.6hz，1h)，7.14(d，j＝9.6hz，1h)，6.59(s，1h)，4.85-4.90(m，1h)，4.68-4.71(m，2h)，4.29-4.33(m，2h)，4.17-4.26(m，1h)，3.80(d，j＝5.6hz，1h)，3.45-3.50(m，1h)，2.25-2.28(m，1h)，1.08-1.19(m，12h).

d-6-12：

按照與d-3-02-3類似的方式合成了d-6-12。通過制備型-hplc純化，得到d-6-12(3mg，23％)，為黃色固體。

6-(5-氟-2-(3-氧代-3，8a-二氫-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-6-基)嘧啶-4-基氨基)-n-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基)己酰胺

得到d-6-12，為黃色固體。

收率：19％

mp：

ms(esi)：594(m+h)⁺

1hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.73(s，1h)，8.08-8.12(m，2h)，7.24-7.27(m，1h)，6.78(s，1h)，4.52(s，1h)，4.40-4.42(m，2h)，3.75(s，2h)，3.64(t，j＝6.8hz，2h)，2.37(t，j＝6.8hz，2h)，1.77(t，j＝6.8hz，4h)，1.49-1.53(m，2h)，1.30-1.33(m，2h)，1.27(d，j＝6.8hz，6h)

d-6-13：

d-6-13-1的合成：

將e-002(30.00mg，0.1mmol)在乙烷-1，2-二胺(0.5ml)中的混合物在室溫攪拌0.5h。通過制備型-hplc純化所得物，得到d-6-13-1(19.20mg，50％)，為白色固體。

d-6-13-2的合成：

向d-6-02-1(16.65mg，0.05mmol)和d-6-13-1(19.20mg，0.05mmol)在dmf(1ml)中的混合物中加入三乙胺(10.10mg，0.10mmol)和hatu(28.50mg，0.075mmol)。將該混合物在室溫攪拌10h。通過制備型-tlc純化所得物，得到d-6-13-2(15.70mg，45％)，為白色固體。

d-6-13的合成：

在20℃向d-6-13-2(15.70mg，0.022mmol)在二氯甲烷(1ml)中的溶液中加入三氟乙酸(0.5ml)。6h后，真空濃縮該混合物。將殘余物混懸于thf(1ml)中，加入2.0mnaoh水溶液(1ml)。將混合物在室溫攪拌15h，然后真空濃縮。加入水(5ml)，用乙酸乙酯(2x2ml)萃取所得物。干燥有機相，真空濃縮。通過制備型-hplc純化殘余物，得到d-6-13(4.3mg，40％)，為淺白色固體。

2-環(huán)丙基-n-(2-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基)乙基)-5h-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺(d-6-13)

得到d-6-13，為淺白色固體。

收率：1％

mp：

ms(esi)：480(m+h)⁺

¹hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.18(d，j＝5.6hz，2h)，6.61(s，1h)，4.75(s，1h)，4.42(s，2h)，4.30-4.31(m，2h)，3.80-3.81(m，2h)，3.64-3.65(m，2h)，3.40-3.41(m，2h)，2.21(s，1h)，1.17(d，j＝6.8hz，6h)，0.94-0.96(m，4h)

¹³cnmr(d6-dmso，300hz)：

d-6-14：

按照與d-3-01-3類似的方式合成了d-6-14。通過制備型-hplc純化，得到d-6-14(10.00mg，46％)，為淺黃色固體。

(s)-2-環(huán)丙基-n-(3-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基)-3-氧代-1-苯基丙基)-5h-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺(d-6-14)

得到d-6-14，為淺黃色固體。

收率：1％

mp：

ms(esi)：584(m+h)⁺

¹hnmr(cd3od，400hz)：

δ8.34(s，1h)，8.15(s，1h)，7.45(d，j＝7.2hz，2h)，7.36(t，j＝7.2hz，2h)，7.29(t，j＝7.2hz，1h)，6.87(s，1h)，5.63(t，j＝4.0hz，1h)，4.85-4.90(m，1h)，4.49(s，2h)，4.26(t，j＝5.2hz，2h)，3.59-3.65(m，2h)，2.92-3.00(m，2h)，2.28-2.33(m，1h)，1.30-1.32(m，1h)，1.27(d，j＝6.8hz，7h)，1.09-1.15(m，2h)，0.98-1.02(m，1h).

¹³cnmr(d6-dmso，300hz)：

向d-6-02-1(33.30mg,0.10mmol)和(s)-2-氨基-2-環(huán)丙基乙酸甲酯鹽酸鹽(16.51mg,0.10mmol)在dmf(1ml)中的混合物中加入三乙胺(20.20mg,0.20mmol)和hatu(57.00mg,0.15mmol)。將該混合物在室溫攪拌10h。通過制備型-tlc純化所得物，得到d-6-15-1(30.00mg,67％)，為白色固體。

d-6-15-2的合成：

將d-6-15-1(30.00mg,0.068mmol)和氫氧化鋰水合物(5.40mg,0.14mmol)在乙醇(1ml))中的混合物在室溫攪拌4h。真空除去溶劑，將所得物調整至ph＝5。過濾出形成的沉淀，真空干燥，得到d-6-15-2(20.00mg,69％)，為白色固體。

d-6-15-3的合成：

向d-6-15-2(20.00mg,0.047mmol)和e-001(15.86mg,0.047mmol)在dmf(1ml)中的混合物中加入k2co3(12.84mg,0.093mmol)和hatu(26.51mg,0.070mmol)。將該混合物在30℃攪拌5h。通過制備型-tlc純化所得物，得到d-6-15-3(20.00mg,57％)，為淺黃色固體。

d-6-15的合成：

在20℃向d-6-15-3(20.00mg,0.027mmol)在二氯甲烷(1ml)中的溶液中加入三氟乙酸(0.5ml)。6h后，真空濃縮該混合物。將殘余物混懸于thf(1ml)中，加入2.0mnaoh水溶液(1ml)。將該混合物在室溫攪拌15h，然后真空濃縮。加入水(5ml)，用乙酸乙酯(2x2ml)萃取所得物。干燥有機相，真空濃縮。通過制備型-hplc純化殘余物，得到d-6-15(8.2mg,58％)，為白色固體。

(r)-2-環(huán)丙基-n-(1-環(huán)丙基-2-((9-羥基-2-異丙基-1,8-二氧代-2,3,4,8-四氫-1h-吡啶并[1,2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基)-2-氧代乙基)-5h-吡咯并[3,2-b]吡嗪-7-甲酰胺(d-6-15)

得到d-6-15，為淺白色固體。

收率：1％

mp：

ms(esi)：534(m+h)⁺

¹hnmr(d6-dmso，400hz)：

δ12.97(br，s，1h)，12.63(d，j＝2.8hz，1h)，8.77-8.85(m，2h)，8.49(s，1h)，8.28(d，j＝2.8hz，1h)，6.69(s，1h)，4.71-4.76(m，1h)，4.48-4.53(m，2h)，4.32-4.38(m，2h)，4.21-4.28(m，1h)，3.68(t，j＝5.2hz，2h)，2.31-2.37(m，1h)，1.17-1.26(m，8h)，1.01-1.13(m，3h)，0.50-0.58(m，3h)，0.41-0.45(m，1h).

¹³cnmr(d6-dmso，300hz)：

2-環(huán)丙基-n-(1-環(huán)丙基-3-((9-羥基-2-異丙基-1，8-二氧代-2，3，4，8-四氫-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-6-基)甲基氨基)-3-氧代丙基)-5h-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺(d-6-16)

按照與d-6-15相同的方式得到d-6-16，為淺白色固體。

收率：1％

mp：

ms(esi)：548(m+h)⁺

¹hnmr(d6-dmso，400hz)：

δ13.05(br，s，1h)，12.57(d，j＝2.8hz，1h)，8.71(t，j＝5.6hz，1h)，8.38(s，1h)，8.35(d，j＝8.8hz，1h)，8.19(d，j＝3.2hz，1h)，6.79(s，1h)，4.66-4.73(m，1h)，4.45-4.48(m，2h)，4.28-4.32(m，2h)，3.94(t，j＝8.0hz，1h)，3.62(d，j＝3.2hz，2h)，2.58-2.61(m，2h)，2.29-2.34(m，1h)，0.98-1.18(m，11h)，0.41-0.49(m，2h)，0.30-0.34(m，1h)，0.22-0.27(m，1h)

¹³cnmr(d6-dmso，300hz)：