两个人的电影免费视频_国产精品久久久久久久久成人_97视频在线观看播放_久久这里只有精品777_亚洲熟女少妇二三区_4438x8成人网亚洲av_内谢国产内射夫妻免费视频_人妻精品久久久久中国字幕

一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法

文檔序號(hào):3662502閱讀:296來源:國(guó)知局
專利名稱:一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于半乳糖乙烯酯材料的制備領(lǐng)域,特別涉及一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法。
背景技術(shù)
電噴法又稱靜電霧化法,是一個(gè)比較新且簡(jiǎn)單的制備微球或者微米至納米級(jí)物質(zhì)的方法。電噴法的原理與靜電紡的類似,通過靜電作用力對(duì)聚合物溶液進(jìn)行拉伸,關(guān)鍵在于聚合物的溶液濃度要低于某個(gè)臨界濃度,使得聚合物溶液不連續(xù)成絲而是形成一個(gè)個(gè)小球。電噴過程中,不同的電壓、推進(jìn)速度、接收距離等條件因素下得到的一系列不同粒徑及微觀形態(tài)的微球。D-半乳糖能夠與肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞表面特有的去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)特異性結(jié)合,因而具有公認(rèn)的肝靶向性, 許多糖類聚合物具有糖簇效應(yīng),ASGPR對(duì)半乳糖基的識(shí)別作用依賴于配體分子表面的半乳糖基單位的密度。N-乙烯基己內(nèi)酰胺(NVCL)屬于乙烯基化的內(nèi)酰胺化合物,其LCST值處于生理溫度范圍內(nèi)(3(Γ40° C)。具有良好的生物適應(yīng)性,并且其聚合物水解后沒有毒性,沒有氨基衍生物的生成,使得其系列高聚物在生物和醫(yī)藥材料中具有極其廣泛的應(yīng)用前景。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法,本發(fā)明的方法融合了綠色高效的合成和安全易操作的電噴法;本發(fā)明制備的納米級(jí)顆粒具有溫度可控的釋放特性,同時(shí)又具備特異的生物相容性。本發(fā)明的一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法,包括:( I)將己二酸二乙烯酯與半乳糖溶于無水吡啶中,利用酶促合成技術(shù)合成半乳糖二酸二乙烯酯,分離提純,其中己二酸二乙烯酯與半乳糖的摩爾比為1:廣1:4 ;(2)將半乳糖二酸二乙烯酯與N-乙烯基己內(nèi)酰胺加入到溶劑中,溶解,加入引發(fā)劑,抽真空充氮?dú)獗Wo(hù)下加熱至6(T70°C,恒溫,進(jìn)行自由基聚合反應(yīng),其中半乳糖二酸二乙烯酯與N-乙烯基己內(nèi)酰胺按摩爾比1:廣1:20,引發(fā)劑的加入量占總混合物質(zhì)量的
0.5% 2.5% ;(3)自由基聚合結(jié)束后,混合物進(jìn)行溶解,聚沉,棄去上清液得到溫敏性的半乳糖酯聚合物;(4)將上述得到的溫敏性半乳糖酯聚合物,干燥,加入無水乙醇,攪拌,超聲后得到電噴液,然后進(jìn)行電噴,即得到溫敏性半乳糖酯的納米顆粒,其中電噴液的質(zhì)量體積濃度為5% 25%。所述步驟(I)中酶促合成技術(shù)為:所用的酶為枯草芽孢桿菌堿性蛋白酶,質(zhì)量濃度為5% 25%,反應(yīng)是在4(T50° C的恒溫振蕩器中進(jìn)行的,振蕩器的轉(zhuǎn)速為220r/min,反應(yīng)時(shí)間為3 4天。
所述步驟(1)中分離提純方法為:硅膠層析柱分離提純,洗脫劑為乙酸乙酯,展開劑為體積比為17:3:1的乙酸乙酯、甲醇和水,用I2顯色。所述步驟(2)中的溶劑為N,N-二甲基甲酰胺DMF。所述步驟(2)中自由基聚合反應(yīng)時(shí)間為12 24h。所述步驟(2)中的引發(fā)劑為偶氮二異丁腈AIBN。所述步驟(2)中引發(fā)劑的加入量占總質(zhì)量的1°/Γ2%。所述步驟(3)中溶解添加試劑為甲醇,聚沉添加試劑為無水乙醚。所述步驟(4)中電噴液的質(zhì)量體積濃度為5%,10%, 15%或25%。所述步驟(4)中的電噴工藝參數(shù)為:注射器規(guī)格為1ml,針頭內(nèi)徑為0.4、.6mm,噴出流速0.6 1.5ml/h,靜電壓l(Tl5kv,接收屏采用鋁箔接地接收,接收距離為l(Tl5cm,調(diào)節(jié)電噴參數(shù)進(jìn)行電噴。所述步驟(4)中所得納米顆粒的粒徑為20(T300nm。電噴液的濃度用質(zhì)量體積濃度:g/100ml,1%就是10mg/ml。溫敏性半乳糖乙烯酯聚合物經(jīng)電噴法制得的納米顆粒,其大小受聚合物的濃度的影響較小,因?yàn)楫?dāng)其處于較低的濃度時(shí),都可以通過電噴得到納米顆粒,在相同的電噴條件下,不同濃度的電噴液得到的電噴顆粒大小幾近相同,只有當(dāng)濃度高于某一濃度值時(shí),可以通過靜電紡的方法制備得納米纖維。但是電噴顆粒的大小受電壓,電噴流速的影響較大,發(fā)現(xiàn)通過電噴流速的調(diào)節(jié)得到的納米顆粒粒徑越來越小,當(dāng)同一流速下提高電壓時(shí)發(fā)現(xiàn)電噴顆粒變得更小更均勻。有益.效果(I)本發(fā)明的方法融合了綠色高效的合成和安全易操作的電噴法;(2)本發(fā)明的制備方法操作簡(jiǎn)單、產(chǎn)物易處理并且經(jīng)濟(jì)環(huán)保;(2)本發(fā)明的納米級(jí)顆粒具有溫度可控的釋放特性,同時(shí)又具備特異的生物相容性。


圖1:N-乙烯基己內(nèi)酰胺(NVCL)、Poly (VAG-co-NVCL)、6_0_ 乙烯己二酰-D-葡萄糖(VAG)的紅外光譜;圖2:N-乙烯基己內(nèi)酰胺、Poly (VAG-co-NVCL)、6_0_乙烯己二酰-D-葡萄糖的核磁共振氫譜;圖3 =Poly(VAG-co-NVCL)聚合物納米顆粒的發(fā)射掃描電子顯微鏡圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例,進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解,這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解, 在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后,本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改,這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書所限定的范圍。實(shí)施例1將己二酸二乙烯酯與半乳糖按摩爾比為1:4加入到無水吡啶中,利用酶促合成技術(shù)合成得到半乳糖乙烯酯。反應(yīng)結(jié)束后,粗產(chǎn)物用硅膠層析柱分離提純,洗脫劑為乙酸乙酯,展開劑選擇體積比為17:3:1的乙酸乙酯、甲醇和水,用I2顯色。收集到的洗脫液經(jīng)真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去洗脫劑,得到白色雪花狀半乳糖乙烯酯化合物。將上述半乳糖乙烯酯以及NVCL按摩爾比為1:8放于微量聚合管中,加入DMF(Img/μ I)溶解上述的兩種聚合物單體,用偶氮二異丁腈(AIBN)(占聚合物單體總的質(zhì)量分?jǐn)?shù)的2%),密封,抽真空充氮?dú)夥磸?fù)多次,在氮?dú)獾谋Wo(hù)下置于6(T70°C的油浴鍋中,攪拌反應(yīng)12h,反應(yīng)結(jié)束,得到的溫敏性半乳糖乙烯酯用少量的甲醇稀釋,之后加入無水乙醚將聚合物沉降出來,反復(fù)多次利用甲醇溶解,無水乙醚沉降,最后得到的白色固體置于真空干燥箱中37°C出去殘余的有機(jī)溶劑,得到干燥的溫敏性半乳糖乙烯酯聚合物Poly(VAG-co-NVCL ),經(jīng)紅外檢測(cè)和核磁氫譜測(cè)試確定。將溫敏性半乳糖酯聚合物Poly (VAG-co-NVCL) (VAG和NVCL摩爾比為1:6)溶解到乙醇中,得到質(zhì)量體積濃度為20%的聚合物的電噴液。攪拌數(shù)小時(shí)后超聲15分鐘,得到氣泡較少,濃度均一的電噴液。用注射器抽取Poly (VAG-co-NVCL)聚合物,固定于靜電紡絲裝置上,控制噴出流速1.5ml/h,靜電壓12kv,接收屏采用鋁箔接地接收,針頭與接收屏的距離為12cm,得到直徑為20(T300nm的納米顆粒;放入真空干燥箱中37°C恒溫干燥,纖維照片如圖3所示。實(shí)施例2將己二酸二乙烯酯與半乳糖按摩爾比為1`:4加入到無水吡啶中,利用酶促合成技術(shù)合成得到半乳糖乙烯酯。反應(yīng)結(jié)束后,粗產(chǎn)物用硅膠層析柱分離提純,洗脫劑為乙酸乙酯,展開劑選擇體積比為17:3:1的乙酸乙酯、甲醇和水,用I2顯色。收集到的洗脫液經(jīng)真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去洗脫劑,得到白色雪花狀半乳糖乙烯酯化合物。將上述半乳糖乙烯酯以及NVCL按摩爾比為1:8放于微量聚合管中,加入DMF(Img/μ I)溶解上述的兩種聚合物單體,用偶氮二異丁腈(AIBN)(占聚合物單體總的質(zhì)量分?jǐn)?shù)的2%),密封,抽真空充氮?dú)夥磸?fù)多次,在氮?dú)獾谋Wo(hù)下置于6(T70°C的油浴鍋中,攪拌反應(yīng)12h,反應(yīng)結(jié)束,得到的溫敏性半乳糖乙烯酯用少量的甲醇稀釋,之后加入無水乙醚將聚合物沉降出來,反復(fù)多次利用甲醇溶解,無水乙醚沉降,最后得到的白色固體置于真空干燥箱中37°C出去殘余的有機(jī)溶劑,得到干燥的溫敏性半乳糖乙烯酯聚合物Poly(VAG-co-NVCL),經(jīng)紅外檢測(cè)和核磁氫譜測(cè)試確定。將溫敏性半乳糖酯聚合物Poly (VAG-co-NVCL) (VAG和NVCL摩爾比為1:6)溶解到乙醇中,得到質(zhì)量體積濃度為20%的聚合物的電噴液。攪拌數(shù)小時(shí)后超聲15分鐘,得到氣泡較少,濃度均一的電噴液。用注射器抽取Poly (VAG-co-NVCL)聚合物,固定于靜電紡絲裝置上,控制噴出流速1.0ml/h,靜電壓12kv,接收屏采用鋁箔接地接收,針頭與接收屏的距離為12cm,得到直徑為20(T300nm的納米顆粒;放入真空干燥箱中37°C恒溫干燥,電噴顆粒的電鏡照片如圖3所示。實(shí)施例3將己二酸二乙烯酯與半乳糖按摩爾比為1:4加入到無水吡啶中,利用酶促合成技術(shù)合成得到半乳糖乙烯酯。反應(yīng)結(jié)束后,粗產(chǎn)物用硅膠層析柱分離提純,洗脫劑為乙酸乙酯,展開劑選擇體積比為17:3:1乙酸乙酯、甲醇和水,用I2顯色。收集到的洗脫液經(jīng)真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去洗脫劑,得到白色雪花狀半乳糖乙烯酯化合物。將上述半乳糖乙烯酯以及NVCL按摩爾比為1:8放于微量聚合管中,加入DMF(Img/μ I)溶解上述的兩種聚合物單體,用偶氮二異丁腈(AIBN)(占聚合物單體總的質(zhì)量分?jǐn)?shù)的2%),密封,抽真空充氮?dú)夥磸?fù)多次,在氮?dú)獾谋Wo(hù)下置于6(T70°C的油浴鍋中,攪拌反應(yīng)12h,反應(yīng)結(jié)束,得到的溫敏性半乳糖乙烯酯用少量的甲醇稀釋,之后加入無水乙醚將聚合物沉降出來,反復(fù)多次利用甲醇溶解,無水乙醚沉降,最后得到的白色固體置于真空干燥箱中37°C出去殘余的有機(jī)溶劑,得到干燥的溫敏性半乳糖乙烯酯聚合物Poly(VAG-co-NVCL),經(jīng)紅外檢測(cè)和核磁氫譜測(cè)試確定。將溫敏性半乳糖酯聚合物Poly (VAG-co-NVCL) (VAG和NVCL摩爾比為1:6)溶解到乙醇中,得到質(zhì)量體積濃度為15%,20%的聚合物的電噴液。攪拌數(shù)小時(shí)后超聲15分鐘,得到氣泡較少,濃度均一的電噴液。用注射器抽取Poly (VAG-co-NVCL)聚合物,固定于靜電紡絲裝置上,控制噴出流速0.8ml/h,靜電壓12kv,接收屏采用鋁箔接地接收,針頭與接收屏的距離為12cm,得到直徑為20(T300nm的納米顆粒;放入真空干燥箱中37°C恒溫干燥,電噴顆粒的電鏡照片如圖3所示。實(shí)施例4將己二酸二乙烯酯與半乳糖按摩爾比為1:4加入到無水吡啶中,利用酶促合成技術(shù)合成得到半乳糖乙烯酯。反應(yīng)結(jié)束后,粗產(chǎn)物用硅膠層析柱分離提純,洗脫劑為乙酸乙酯,展開劑選擇體積比為17:3:1乙酸乙酯、甲醇和水,用I2顯色。收集到的洗脫液經(jīng)真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去洗脫劑,得到白色雪花狀半乳糖乙烯酯化合物。將上述半乳糖乙烯酯以及NVCL按摩爾比為1:8放于微量聚合管中,加入DMF(Img/μ I)溶解上述的兩種聚合物單體,用偶氮二異丁腈(AIBN)(占聚合物單體總的質(zhì)量分?jǐn)?shù)的2%),密封,抽真空充氮 氣反復(fù)多次,在氮?dú)獾谋Wo(hù)下置于6(T70°C的油浴鍋中,攪拌反應(yīng)12h,反應(yīng)結(jié)束,得到的溫敏性半乳糖乙烯酯用少量的甲醇稀釋,之后加入無水乙醚將聚合物沉降出來,反復(fù)多次利用甲醇溶解,無水乙醚沉降,最后得到的白色固體置于真空干燥箱中37°C出去殘余的有機(jī)溶劑,得到干燥的溫敏性半乳糖乙烯酯聚合物Poly(VAG-co-NVCL),經(jīng)紅外檢測(cè)和核磁氫譜測(cè)試確定。將溫敏性半乳糖酯聚合物Poly (VAG-co-NVCL) (VAG和NVCL摩爾比為1:6)溶解到乙醇中,得到質(zhì)量體積濃度為20%的聚合物的電噴液。攪拌數(shù)小時(shí)后超聲15分鐘,得到氣泡較少,濃度均一的電噴液。用注射器抽取Poly (VAG-co-NVCL)聚合物,固定于靜電紡絲裝置上,控制噴出流速0.6ml/h,靜電壓12kv,15kv,接收屏采用鋁箔接地接收,針頭與接收屏的距離為12cm,得到直徑為20(T300nm的納米顆粒;放入真空干燥箱中37°C恒溫干燥,電噴顆粒的電鏡照片如圖3所示。
權(quán)利要求
1.一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法,包括: (1)將己二酸二乙烯酯與半乳糖溶于無水吡啶中,利用酶促合成技術(shù)合成半乳糖二酸二乙烯酯,分離提純,其中己二酸二乙烯酯與半乳糖的摩爾比為1:廣1:4 ; (2)將半乳糖二酸二乙烯酯與N-乙烯基己內(nèi)酰胺加入到溶劑中,溶解,加入引發(fā)劑,抽真空充氮?dú)獗Wo(hù)下加熱至6(T70°C,恒溫,進(jìn)行自由基聚合反應(yīng),其中半乳糖二酸二乙烯酯與N-乙烯基己內(nèi)酰胺按摩爾比1:廣1:20,引發(fā)劑的加入量占總混合物質(zhì)量的0.59Γ2.5% ; (3)自由基聚合結(jié)束后,混合物進(jìn)行溶解,聚沉,棄去上清液得到溫敏性的半乳糖酯聚合物; (4)將上述得到的溫敏性半乳糖酯聚合物,干燥,加入無水乙醇,攪拌,超聲后得到電噴液,然后進(jìn)行電噴,即得到溫敏性半乳糖酯的納米顆粒,其中電噴液的質(zhì)量體積濃度為5% 25%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法,其特征在于:所述步驟(I)中酶促合成技術(shù)為:所用的酶為枯草芽孢桿菌堿性蛋白酶,質(zhì)量濃度為5% 25%,反應(yīng)是在4(T50° C的恒溫振蕩器中進(jìn)行的,振蕩器的轉(zhuǎn)速為220r/min,反應(yīng)時(shí)間為:Γ4天。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法,其特征在于:所述步驟(I)中分離提純方法為:硅膠層析柱分離提純,洗脫劑為乙酸乙酯,展開劑為體積比為17:3:1的乙酸乙酯、甲醇和水,用I2顯色。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法,其特征在于:所述步驟(2)中的溶劑為N,N- 二甲基甲酰胺DMF。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法,其特征在于:所述步驟(2)中自由基聚合反應(yīng)時(shí)間為12 24h。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法,其特征在于:所述步驟(2)中的引發(fā)劑為偶氮二異丁腈AIBN。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法,其特征在于:所述步驟(2)中引發(fā)劑的加入量占總質(zhì)量的19Γ2%。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法,其特征在于:所述步驟(3)中溶解添加試劑為甲醇,聚沉添加試劑為無水乙醚。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法,其特征在于:所述步驟(4)中電噴液的質(zhì)量體積濃度為5%,10%, 15%或25%。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法,其特征在于:所述步驟(4)中的電噴工藝參數(shù)為:注射器規(guī)格為1ml,針頭內(nèi)徑為0.4^0.6mm,噴出流速0.6 1.5ml/h,靜電壓l(Tl5kv,接收屏采用鋁箔接地接收,接收距離為l(Tl5cm,調(diào)節(jié)電噴參數(shù)進(jìn)行電噴。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法,其特征在于:所述步驟(4)中所得納米顆粒的粒徑為20(T300nm。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法,包括(1)將己二酸二乙烯酯與半乳糖溶于無水吡啶中,利用酶促合成技術(shù)合成半乳糖二酸二乙烯酯,分離提純;(2)將半乳糖二酸二乙烯酯與N-乙烯基己內(nèi)酰胺加入到DMF中,溶解,加入引發(fā)劑,抽真空充氮?dú)獗Wo(hù)下,進(jìn)行自由基聚合反應(yīng);(3)上述混合物溶解,然后聚沉,棄去上清液得到溫敏性的半乳糖酯聚合物;(4)將上述得到的溫敏性半乳糖酯聚合物,干燥,加入無水乙醇,攪拌,超聲后得到電噴液,然后進(jìn)電噴,即得到溫敏性半乳糖酯的納米顆粒。本發(fā)明的方法融合了綠色高效的合成和安全易操作的電噴法;納米級(jí)顆粒具有溫度可控的釋放特性,同時(shí)又具備特異的生物相容性。
文檔編號(hào)C08F226/06GK103073682SQ20121059430
公開日2013年5月1日 申請(qǐng)日期2012年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月31日
發(fā)明者朱利民, 石萌, 權(quán)靜, 孫衎, 武晉嫻 申請(qǐng)人:東華大學(xué)
網(wǎng)友詢問留言 已有0條留言
  • 還沒有人留言評(píng)論。精彩留言會(huì)獲得點(diǎn)贊!
1
岛国在线观看网站| 男女床上黄色一级片免费看| 日日干狠狠操夜夜爽| 一级作爱视频免费观看| 久久久久久久久免费视频了| 亚洲中文字幕日韩| 国产91精品成人一区二区三区| 国产伦人伦偷精品视频| 两人在一起打扑克的视频| 91老司机精品| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 在线视频色国产色| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 欧美日韩一级在线毛片| 高潮久久久久久久久久久不卡| 九色亚洲精品在线播放| 美女大奶头视频| 久久精品人人爽人人爽视色| 国产伦人伦偷精品视频| 无人区码免费观看不卡| 中文字幕高清在线视频| 97碰自拍视频| 麻豆久久精品国产亚洲av | 日韩欧美在线二视频| 一区二区三区国产精品乱码| 激情视频va一区二区三区| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 丰满饥渴人妻一区二区三| 国产主播在线观看一区二区| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 一二三四社区在线视频社区8| av网站免费在线观看视频| 国产精品亚洲av一区麻豆| 一级毛片高清免费大全| 韩国精品一区二区三区| 国产亚洲欧美在线一区二区| tocl精华| 国产精品电影一区二区三区| 久久久久久人人人人人| 女性生殖器流出的白浆| 在线观看日韩欧美| 色播在线永久视频| 国产野战对白在线观看| 天堂中文最新版在线下载| 亚洲欧美激情综合另类| 老司机深夜福利视频在线观看| 国产男靠女视频免费网站| 五月开心婷婷网| 欧美乱妇无乱码| 天堂影院成人在线观看| 女性被躁到高潮视频| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 少妇粗大呻吟视频| 99国产精品一区二区三区| 日韩精品中文字幕看吧| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 一级a爱视频在线免费观看| 亚洲成人久久性| 亚洲自拍偷在线| 亚洲国产精品999在线| 美女午夜性视频免费| avwww免费| 国产精品二区激情视频| 丝袜美腿诱惑在线| 亚洲av熟女| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 热99re8久久精品国产| 欧美另类亚洲清纯唯美| 淫妇啪啪啪对白视频| 99久久99久久久精品蜜桃| 中文字幕精品免费在线观看视频| 欧美成人午夜精品| 久久人人97超碰香蕉20202| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 欧美成人性av电影在线观看| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 色老头精品视频在线观看| 丁香欧美五月| 午夜福利在线观看吧| 免费av中文字幕在线| 一级a爱视频在线免费观看| 他把我摸到了高潮在线观看| 国产av又大| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 久久九九热精品免费| 久久人妻av系列| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲av日韩精品久久久久久密| bbb黄色大片| 美女福利国产在线| 免费看a级黄色片| 国产av精品麻豆| 国产精品亚洲av一区麻豆| 热99国产精品久久久久久7| 成人三级黄色视频| 久久精品成人免费网站| 国产99久久九九免费精品| 12—13女人毛片做爰片一| 国产一区二区三区综合在线观看| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 精品高清国产在线一区| 亚洲国产精品999在线| 满18在线观看网站| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 少妇 在线观看| 午夜免费观看网址| 久99久视频精品免费| 国产成人免费无遮挡视频| 大型黄色视频在线免费观看| 大陆偷拍与自拍| 十分钟在线观看高清视频www| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 亚洲五月婷婷丁香| 亚洲色图综合在线观看| 91成人精品电影| 精品免费久久久久久久清纯| 正在播放国产对白刺激| 老熟妇仑乱视频hdxx| 国产三级黄色录像| 99久久综合精品五月天人人| 久久香蕉精品热| 长腿黑丝高跟| 十分钟在线观看高清视频www| 色婷婷久久久亚洲欧美| 亚洲第一青青草原| 精品国产一区二区久久| 色老头精品视频在线观看| 亚洲视频免费观看视频| 真人一进一出gif抽搐免费| 免费在线观看日本一区| 亚洲成人精品中文字幕电影 | 热re99久久国产66热| 99国产极品粉嫩在线观看| 免费观看人在逋| 国产亚洲欧美精品永久| 12—13女人毛片做爰片一| 亚洲av电影在线进入| 精品久久蜜臀av无| 一边摸一边做爽爽视频免费| 久久久精品欧美日韩精品| 最新在线观看一区二区三区| av免费在线观看网站| 亚洲成人国产一区在线观看| 婷婷六月久久综合丁香| 99精品久久久久人妻精品| 美女福利国产在线| 两个人免费观看高清视频| 桃红色精品国产亚洲av| 美国免费a级毛片| 国产又爽黄色视频| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 狂野欧美激情性xxxx| 欧美日韩av久久| 日韩欧美三级三区| 桃色一区二区三区在线观看| 国产精品亚洲一级av第二区| 天堂√8在线中文| 精品无人区乱码1区二区| 高清欧美精品videossex| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 女警被强在线播放| a级毛片黄视频| 久久狼人影院| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 亚洲一区二区三区不卡视频| 国产91精品成人一区二区三区| 在线观看日韩欧美| 国产精品99久久99久久久不卡| 亚洲第一青青草原| 中文字幕色久视频| 妹子高潮喷水视频| 一夜夜www| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 12—13女人毛片做爰片一| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 午夜免费鲁丝| 日本欧美视频一区| 国产av又大| 日日爽夜夜爽网站| 日本欧美视频一区| 一进一出抽搐动态| 国产精品免费视频内射| 亚洲av电影在线进入| 国产激情久久老熟女| 亚洲精品国产区一区二| 日本a在线网址| 搡老乐熟女国产| 欧美+亚洲+日韩+国产| 高清黄色对白视频在线免费看| 黑人欧美特级aaaaaa片| 99re在线观看精品视频| 热99re8久久精品国产| 美女国产高潮福利片在线看| 欧美激情极品国产一区二区三区| 久久伊人香网站| 日韩免费av在线播放| 天堂中文最新版在线下载| svipshipincom国产片| 97人妻天天添夜夜摸| 亚洲精品一区av在线观看| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 欧美激情极品国产一区二区三区| 久久久久九九精品影院| 两人在一起打扑克的视频| 一级毛片高清免费大全| 色哟哟哟哟哟哟| 精品国产美女av久久久久小说| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 成人精品一区二区免费| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 国产91精品成人一区二区三区| 麻豆av在线久日| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 国产熟女xx| 自线自在国产av| www.999成人在线观看| 女人精品久久久久毛片| 国产精品综合久久久久久久免费 | 中文欧美无线码| 91九色精品人成在线观看| 国产精品久久久人人做人人爽| 免费在线观看黄色视频的| 免费日韩欧美在线观看| videosex国产| 国产在线精品亚洲第一网站| 欧美黑人精品巨大| 少妇的丰满在线观看| 夜夜看夜夜爽夜夜摸 | 国产1区2区3区精品| 亚洲国产看品久久| 极品人妻少妇av视频| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 天堂中文最新版在线下载| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 黄色女人牲交| 婷婷丁香在线五月| 亚洲伊人色综图| 免费看十八禁软件| 午夜福利影视在线免费观看| 成人免费观看视频高清| 天堂影院成人在线观看| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 日本一区二区免费在线视频| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 国产有黄有色有爽视频| 91精品国产国语对白视频| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 成人三级做爰电影| 无遮挡黄片免费观看| 久久性视频一级片| 九色亚洲精品在线播放| 高清黄色对白视频在线免费看| 国产精品野战在线观看 | 久久国产亚洲av麻豆专区| 午夜福利一区二区在线看| 久久这里只有精品19| 丰满饥渴人妻一区二区三| 一夜夜www| 国产成人免费无遮挡视频| 他把我摸到了高潮在线观看| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 村上凉子中文字幕在线| 99久久国产精品久久久| 99久久久亚洲精品蜜臀av| cao死你这个sao货| 不卡av一区二区三区| 国产三级黄色录像| 看免费av毛片| 国产精品二区激情视频| 久久影院123| 亚洲第一av免费看| 日本vs欧美在线观看视频| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 可以免费在线观看a视频的电影网站| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 国产成人欧美在线观看| 日韩精品青青久久久久久| 18美女黄网站色大片免费观看| 午夜福利影视在线免费观看| 久久久精品欧美日韩精品| 我的亚洲天堂| 亚洲精品一二三| 欧美一级毛片孕妇| 亚洲少妇的诱惑av| 亚洲人成电影免费在线| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 在线观看免费日韩欧美大片| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 国产亚洲欧美精品永久| 美女大奶头视频| 美女 人体艺术 gogo| 妹子高潮喷水视频| 波多野结衣av一区二区av| 麻豆国产av国片精品| 老司机亚洲免费影院| 亚洲成人国产一区在线观看| 青草久久国产| 久久热在线av| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 日本 av在线| 男人操女人黄网站| 91九色精品人成在线观看| 黄色女人牲交| 桃红色精品国产亚洲av| 日日夜夜操网爽| 中文亚洲av片在线观看爽| 国产精品国产高清国产av| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 视频区欧美日本亚洲| 精品欧美一区二区三区在线| 国产精品久久久久成人av| 亚洲久久久国产精品| 国产单亲对白刺激| 丰满饥渴人妻一区二区三| 丝袜美腿诱惑在线| 色尼玛亚洲综合影院| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 香蕉丝袜av| 日韩欧美在线二视频| 日本五十路高清| 中亚洲国语对白在线视频| 咕卡用的链子| 久久天堂一区二区三区四区| 亚洲五月天丁香| 一级毛片女人18水好多| 色在线成人网| 真人一进一出gif抽搐免费| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 久久精品91无色码中文字幕| 精品日产1卡2卡| 窝窝影院91人妻| 多毛熟女@视频| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 麻豆成人av在线观看| 国产一区二区激情短视频| 国产国语露脸激情在线看| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产精品久久久人人做人人爽| 欧美日韩一级在线毛片| 黄色a级毛片大全视频| 9色porny在线观看| 国产成人免费无遮挡视频| 久久精品国产清高在天天线| 无人区码免费观看不卡| 欧美日韩精品网址| 在线免费观看的www视频| 国产国语露脸激情在线看| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 国产亚洲欧美在线一区二区| 亚洲国产中文字幕在线视频| 国产精品综合久久久久久久免费 | 日韩精品免费视频一区二区三区| av福利片在线| 亚洲av五月六月丁香网| 欧美黄色片欧美黄色片| 精品无人区乱码1区二区| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 男女下面进入的视频免费午夜 | 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 男女下面进入的视频免费午夜 | 激情视频va一区二区三区| 成在线人永久免费视频| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 午夜精品国产一区二区电影| 久久人妻熟女aⅴ| 国产精品一区二区在线不卡| 久久久久亚洲av毛片大全| 人人妻人人澡人人看| 亚洲全国av大片| 人人妻人人澡人人看| 男人舔女人的私密视频| 操美女的视频在线观看| 国产在线观看jvid| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 国产免费av片在线观看野外av| 日本三级黄在线观看| 婷婷六月久久综合丁香| 最近最新中文字幕大全电影3 | 亚洲欧美激情在线| 男人操女人黄网站| 久久香蕉精品热| 在线看a的网站| 丝袜美足系列| 欧美在线黄色| 欧美黑人精品巨大| 后天国语完整版免费观看| 在线观看66精品国产| 日本免费a在线| 人人澡人人妻人| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 99久久精品国产亚洲精品| ponron亚洲| 大香蕉久久成人网| 精品卡一卡二卡四卡免费| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 一进一出抽搐动态| 欧美精品啪啪一区二区三区| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 99久久综合精品五月天人人| 精品人妻1区二区| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 欧美日韩亚洲高清精品| 成年人黄色毛片网站| 亚洲欧美激情在线| 欧美午夜高清在线| 国产精品永久免费网站| 精品一区二区三卡| 欧美黄色淫秽网站| 久久欧美精品欧美久久欧美| 男人的好看免费观看在线视频 | 欧美乱色亚洲激情| 日韩欧美三级三区| 少妇的丰满在线观看| 国产99白浆流出| 91av网站免费观看| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 日本 av在线| 青草久久国产| 亚洲一区中文字幕在线| 国产一区二区在线av高清观看| 操美女的视频在线观看| 国产成+人综合+亚洲专区| 日韩欧美三级三区| 亚洲人成电影免费在线| 亚洲国产欧美网| 欧美午夜高清在线| 大码成人一级视频| 男人舔女人的私密视频| 欧美丝袜亚洲另类 | 久久中文字幕一级| 亚洲国产精品合色在线| 国产黄色免费在线视频| 欧美一区二区精品小视频在线| 亚洲人成伊人成综合网2020| 在线视频色国产色| 国产av一区在线观看免费| 亚洲成人国产一区在线观看| 国产精品野战在线观看 | 又紧又爽又黄一区二区| 国产av又大| 日韩欧美国产一区二区入口| 精品国产一区二区久久| 亚洲国产精品999在线| √禁漫天堂资源中文www| 亚洲成人国产一区在线观看| 美女福利国产在线| 满18在线观看网站| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 美女 人体艺术 gogo| 美女大奶头视频| svipshipincom国产片| 国产精品久久久人人做人人爽| 精品久久久久久久久久免费视频 | 美女福利国产在线| 中文字幕人妻丝袜制服| 亚洲精品成人av观看孕妇| 久久午夜亚洲精品久久| 免费看a级黄色片| 美女扒开内裤让男人捅视频| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 一区二区三区国产精品乱码| 欧美成人性av电影在线观看| 日本黄色视频三级网站网址| 精品久久久久久电影网| 国产主播在线观看一区二区| 免费观看精品视频网站| 欧美激情高清一区二区三区| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 香蕉国产在线看| 欧美+亚洲+日韩+国产| 大码成人一级视频| 岛国视频午夜一区免费看| 一区二区三区国产精品乱码| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 欧美丝袜亚洲另类 | 久久久久国内视频| 男人舔女人的私密视频| 成熟少妇高潮喷水视频| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 看黄色毛片网站| 大型av网站在线播放| 热re99久久精品国产66热6| 亚洲人成伊人成综合网2020| 日韩欧美一区视频在线观看| 亚洲精品av麻豆狂野| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 亚洲精品成人av观看孕妇| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 最好的美女福利视频网| 一区在线观看完整版| 夜夜看夜夜爽夜夜摸 | 级片在线观看| 18禁观看日本| 欧美日韩一级在线毛片| 韩国精品一区二区三区| 精品熟女少妇八av免费久了| 999久久久精品免费观看国产| 国产伦人伦偷精品视频| 色播在线永久视频| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 久久精品人人爽人人爽视色| 脱女人内裤的视频| 18禁国产床啪视频网站| www.精华液| 日本 av在线| 欧美成人免费av一区二区三区| 波多野结衣av一区二区av| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 国产精品综合久久久久久久免费 | 日本a在线网址| 精品久久久精品久久久| 黑丝袜美女国产一区| 精品高清国产在线一区| 国产精品日韩av在线免费观看 | 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 免费在线观看完整版高清| 国产精品 欧美亚洲| 另类亚洲欧美激情| 国产高清国产精品国产三级| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 韩国av一区二区三区四区| 这个男人来自地球电影免费观看| 国产精品影院久久| 国产人伦9x9x在线观看| 极品教师在线免费播放| 女同久久另类99精品国产91| 国产麻豆69| 欧美黑人精品巨大| 热re99久久国产66热| 最近最新免费中文字幕在线| 亚洲成人久久性| 成人黄色视频免费在线看| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 国产精华一区二区三区| 人妻久久中文字幕网| 亚洲欧美激情在线| 日韩有码中文字幕| 美女大奶头视频| 欧美丝袜亚洲另类 | 老鸭窝网址在线观看| 老司机在亚洲福利影院| av网站免费在线观看视频| 9热在线视频观看99| 国产精品久久视频播放| 久热爱精品视频在线9| 国产成人影院久久av| 757午夜福利合集在线观看| 人成视频在线观看免费观看| 九色亚洲精品在线播放| 1024视频免费在线观看| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 中国美女看黄片| 夜夜看夜夜爽夜夜摸 | 免费在线观看日本一区| 99在线人妻在线中文字幕| 日日夜夜操网爽| 成年人免费黄色播放视频| av国产精品久久久久影院| 视频区欧美日本亚洲| 久久精品国产综合久久久| 久久中文字幕一级| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 国产成人精品久久二区二区91| 国产精品一区二区精品视频观看| 午夜精品在线福利| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产1区2区3区精品| 亚洲一区二区三区欧美精品| 自线自在国产av| 搡老乐熟女国产| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 999精品在线视频| 亚洲男人的天堂狠狠| 国产免费现黄频在线看| 亚洲熟女毛片儿| 精品久久蜜臀av无| av有码第一页| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 国产单亲对白刺激| 亚洲精品粉嫩美女一区| av免费在线观看网站| 亚洲成a人片在线一区二区| 99精品欧美一区二区三区四区| 美国免费a级毛片| 一区在线观看完整版| 日韩欧美一区视频在线观看| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 久久久久久久精品吃奶| 丰满饥渴人妻一区二区三| 热99re8久久精品国产| 国产精品免费一区二区三区在线| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 久久人妻福利社区极品人妻图片| 日本三级黄在线观看| 久久香蕉精品热| 成人手机av| 波多野结衣高清无吗| 婷婷丁香在线五月| 老鸭窝网址在线观看| 动漫黄色视频在线观看| 免费在线观看亚洲国产| 在线观看一区二区三区| 国产成人啪精品午夜网站| 国产主播在线观看一区二区| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 亚洲激情在线av| 亚洲 欧美一区二区三区| 国产一区二区三区综合在线观看| 亚洲中文日韩欧美视频| 午夜亚洲福利在线播放| 黄色成人免费大全| 一级作爱视频免费观看| 亚洲色图av天堂|