專利名稱：青稞中β-葡聚糖提取和純化工藝的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及植物成分的提取方法，特別是青稞中β-葡聚糖提取和純化工藝。
背景技術：
青稞是禾本科大麥屬的一種禾谷類作物，因其內(nèi)外穎殼分離，籽粒裸露，故又稱裸大麥、元麥、米大麥。青稞具有豐富的營養(yǎng)價值和特殊功效，青稞是世界上麥類作物中β一葡聚糖最高的作物，據(jù)檢測青稞β-葡聚糖平均含量為6.57％，優(yōu)良品種青稞25可8.6％，是小麥平均含量的50倍。β-葡聚糖通過減少腸道粘膜與致癌物質(zhì)的接觸和間接抑制致癌維生物作用來預防結腸癌；通過降血脂和降膽固醇的合成預防心血管疾病通過控制血糖防治糖尿病。具有提高機體防御能力、調(diào)節(jié)生理節(jié)律的作用。
本發(fā)明從青稞中提取具有豐富的營養(yǎng)價值和特殊功效β-葡聚糖，確定了先堿提后酶解淀粉的提取和純化工藝。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種青稞中β-葡聚糖提取和純化工藝，以使青稞中β-葡聚糖提取率和純度更高，符合工業(yè)大生產(chǎn)要求。
本發(fā)明的目的通過以下技術方案實現(xiàn)一種青稞中β-葡聚糖提取和純化工藝，按以下步驟順次進行a)、取青稞粉碎過60目篩；b)、85℃干燥滅酶2小時，按料水比1∶22加水，c)、加碳酸鈉調(diào)PH8.0，80℃提取1.5h，放冷，離心，得上清液。d)、調(diào)上清液PH值為6.0，按4u/g加入耐高溫a-淀粉酶，水浴溫度為90-95℃進行酶解去淀粉30min，碘液檢查不含淀粉為止，冷卻至室溫。e)、調(diào)PH為4.5，冷藏過液，離心，得上清液。f)、調(diào)PH8.0，加0.25g胰酶(溶解后加入)，47℃酶解2.5h，離心得上清液。g)、上清液調(diào)PH為7.0，加入乙醇至含醇量為70％，冷藏過夜。h)、過濾得沉淀，沉淀加50倍水溶解，加入乙醇至含醇量為75％，冷藏過夜。i)、過濾得沉淀，冷凍干燥。
本發(fā)明以理論為依據(jù)，以實驗為基礎，并經(jīng)實驗反復驗證，本工藝的青稞中β-葡聚糖提取率相對較高，且滿足工業(yè)大生產(chǎn)要求，可以直接應用在工業(yè)生產(chǎn)中。
具體實施例方式 青稞中β-葡聚糖的制備工藝按以下步驟順次進行a)、取青稞粉碎過60目篩；b)、85℃干燥滅酶2小時，按料水比1∶22加水，c)、加碳酸鈉調(diào)PH8.0，80℃提取1.5h，放冷，離心，得上清液。d)、調(diào)上清液PH值為6.0，按4u/g加入耐高溫a-淀粉酶，水浴溫度為90-95℃進行酶解去淀粉30min，碘液檢查不含淀粉為止，冷卻至室溫。e)、調(diào)PH為4.5，冷藏過液，離心，得上清液。f)、調(diào)PH8.0，加0.25g胰酶(溶解后加入)，47℃酶解2.5h，離心得上清液。g)、上清液調(diào)PH為7.0，加入乙醇至含醇量為70％，冷藏過夜。h)、過濾得沉淀，沉淀加50倍水溶解，加入乙醇至含醇量為75％，冷藏過夜。i)、過濾得沉淀，冷凍干燥。
具體實驗研究如下 1材料與方法 1.1主要試劑 95％乙醇(分析純)；碳酸鈉(分析純)；鹽酸(分析純)；氫氧化鈉(分析純)；耐高溫a-淀粉酶；胰酶；果膠酶。
1.2主要試驗儀器 水浴鍋；離心機；紫外分光光度計；PH酸度計；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；恒溫振搖床。
1.3試驗方法 1.3.1考察是否粉碎對提取的而影響 取青稞粒、青稞粉各兩份，編號分別為1、2；3、4，每份80g，按料水比1∶22加水，并調(diào)PH8.0，提取1.5h，放冷，離心。得上清液。新配制100u/ml耐高溫a-淀粉酶液，調(diào)上清液PH值為6.0，水浴溫度為90-95℃，加入新配制的耐高溫a-淀粉酶液5ml，去淀粉30min，碘液檢查不含淀粉為止，冷卻至室溫。調(diào)PH為4.5，冷藏過液，離心，得上清液。調(diào)PH8.0，加0.25g胰酶(溶解后加入)，47℃酶解2.5h。離心得上清液。上清液調(diào)PH為7.0，加入乙醇至含醇量為70％，冷藏過夜。干燥沉淀，測定含量并記錄測定結果。
1.3.2烘烤、干燥滅酶方法比較 取其中90g分成均勻3份，用微波爐高火檔分別烘烤滅酶5min、15min、30min，觀察效果。100g粉碎過3號篩后置烘箱(80℃)干燥滅酶2h。隨時觀察效果。
1.3.3考察是否攪拌對提取的影響 取4份日喀則青稞粉，每份40g，編號為1、2、3、4，按料水比1∶22加水，并調(diào)PH8.0，1、2水浴提取(不攪拌)1.5h，3、4攪拌提取(攪拌器)提取1.5h，放冷，離心。得上清液。新配制100u/ml耐高溫a-淀粉酶液，調(diào)上清液PH值為6.0，水浴溫度為90-95℃，加入新配制的耐高溫a-淀粉酶液5ml，去淀粉30min，碘液檢查不含淀粉為止，冷卻至室溫。調(diào)PH為4.5，冷藏過液，離心，得上清液。調(diào)PH8.0，加0.25g胰酶(溶解后加入)，47℃酶解2.5h。離心得上清液。上清液調(diào)PH為7.0，加入乙醇至含醇量為70％，冷藏過夜。干燥沉淀，測定含量并記錄測定結果。
1.3.4考察加熱回流滅酶方法 本次實驗考察青稞提取前經(jīng)95％乙醇加熱回流處理對葡聚糖提取效果影響。
稱取青稞粉適量，按1∶6倍量加95％乙醇加熱回流2h，所得青稞渣揮乙醇后干燥，分成三份，每份30g。按料液比1∶22加水，20％碳酸鈉溶液調(diào)PH為8.0，于70℃水浴提取1.5h，離心得上清液。調(diào)PH為6.0，按4u/g加入耐高溫a-淀粉酶，于90～95℃水浴酶解30min。所得提取液加水至600ml，調(diào)PH為7.0。
分別精密量取1ml至25ml容量瓶，加適量水，于70℃水浴溶解完全，放置室溫后加水至刻度，至冰箱冷藏。精密量取1ml至10ml量瓶，加水補至2ml，加4ml剛果紅溶液反應10min，測最大吸收峰，545nm下吸收度。計算β-葡聚糖含量。
1.3.5考察青稞中β-葡聚糖的超聲提取和煎煮水提方法 取青稞適量揀選除雜，適當破碎，稱取兩份，各100g，各加600ml95％乙醇浸漬過夜。傾浸漬液，取青稞加95％乙醇加熱回流三次，每次1小時。濾出青稞，揮乙醇后干燥。兩份分別為A 94g；B 93.1g。取A份，加1000mlPH8.5碳酸鈉溶液，加入1/150倍的淀粉酶0.627g，于超聲機(60℃～70℃)超聲三次，每次1h。紗布過濾，冷藏。加稀鹽酸調(diào)PH至4.5，加0.3g糖化酶，60℃水浴酶解40分鐘。離心。取B份，加1000mlPH8.5碳酸鈉溶液，加入1/150倍的淀粉酶0.627g，水提煎煮三次，每次1小時。紗布過濾，冷藏。加稀鹽酸調(diào)PH至4.5，加0.3g糖化酶，60℃水浴酶解40分鐘。離心。醇沉A、B至含醇量60％，靜置過夜，過濾，取沉淀溶解月5倍量水，加20％硫酸銨，反應6小時，離心。所得沉淀用2倍量異丙醇洗滌2次，60℃真空干燥。
1.3.6考察水浴堿提和旋轉(zhuǎn)堿提 取青稞適量揀選除雜，適當破碎，過2號篩，得215g青稞粉。加800ml80％乙醇，攪拌均勻，再加100ml80％乙醇，加熱回流2小時。揮乙醇，得青稞粉，干燥。各取50g青稞粉共兩份，分別加15倍水，調(diào)PH至8，80℃提取兩次，每次1.5h，一份為水浴加熱，一份旋轉(zhuǎn)加熱。紗布過濾，得濾液A、B。分別調(diào)PH為6，加1.69g淀粉酶65℃水浴0.5h，濃縮至250ml，再醇沉至含醇量75％，過夜?；厥找掖迹恋碚婵崭稍?。
1.3.7考察耐高溫α-淀粉酶加入量 稱取青稞約1000g，揀選除雜。粉碎過3號篩后置烘箱(85℃)干燥滅酶1h，粉碎過1號篩。取過120目青稞粉600g，分成均勻兩份，每份300g，分別用1000ml95％乙醇回流2h。控制溫度在80℃左右。靜置放冷后回收乙醇，青稞渣揮干乙醇，置烘箱60℃至完全干燥。收集并稱量備用。
(1)取青稞渣，稱量并記錄。分別分成甲1/3、乙1/3、丙1/3，均加入10倍量水。其中甲用20％碳酸鈉溶液調(diào)PH值為7.0，乙PH值調(diào)為8.0，丙PH值調(diào)為9.0，觀察調(diào)PH值后溶液顏色變化。提取方法于80℃水浴提取兩次，每次1h。合并提取液，離心，收集上清液。甲、乙、丙液均用稀鹽酸調(diào)PH值為6.0，于90℃～95℃水浴預熱3min后，加入耐高溫a-淀粉酶液(根據(jù)上一步淀粉含量結果考慮分別按4u/g、8u/g、12u/g酶加入量)，酶解30min后取樣用碘測試液測淀粉，比色。根據(jù)情況考慮是否再酶解30min。酶解完畢后于100℃沸水滅酶10min。用碘測試液測淀粉，比色。
(2)取青稞渣，稱量并記錄。分別分成I 1/3、II 1/3、III 1/3，均加入5倍量水，于65℃糊化1h，(13∶15)再調(diào)PH值為6.0，加耐高溫a-淀粉酶液(分別按15u/g、100u/g、200u/g)于90℃～95℃水浴酶解1h，酶解完畢后于100℃沸水滅酶10min。用碘測試液測液中淀粉多寡，考察酶解效果。
1.3.8考察先堿提再酶解淀粉提取方法與先糊化酶解淀粉再堿提提取方法 稱取青稞約150g，揀選除雜。置烘箱(85℃)干燥滅酶1h。粉碎。過4號篩。乙醇回流去脂除酶。取青稞粉，用600ml 95％乙醇回流2h?？刂茰囟仍?0℃左右。靜置放冷后回收乙醇，適當揮乙醇，再置烘箱80℃至完全干燥。稱量備用。
稱取120g，分成A、B 2份，每份60g。再將A分成a、b、c 3份，每份20g；將B分成d、e、f每份20g。
(1)先堿提再酶解淀粉提取方法 1、取青稞渣(20g)，加入10倍量水(200ml)。用20％碳酸鈉溶液調(diào)PH值為8.0 提取方法于80℃水浴提取2h。離心10min(4500r/min)，收集上清液。
2、用稀鹽酸調(diào)上清液PH值為6.0，于90℃～95℃水浴預熱3min后，加入耐高溫a-淀粉酶液(按4u/g酶加入量)，酶解1h，酶解完畢后于100℃沸水滅酶10min。
3、a、b、c液分別過濾，放冷后測PH值并用20％碳酸鈉溶液調(diào)PH值為8.0。
4、攪拌加乙醇至含醇量達75％，醇沉過夜(冰箱4℃)。
5、過濾醇沉液，收集沉淀。
(2)先糊化酶解淀粉再堿提提取方法 1、取青稞渣(20g)，加入5倍量水(100ml)，于65℃糊化1h，再用稀鹽酸調(diào)PH值為6.0，加耐高溫a-淀粉酶液(按100u/g)于90℃～95℃水浴酶解1h，酶解完畢后于100℃沸水滅酶10min。
2、離心得沉淀，加10倍量水，用20％碳酸鈉溶液調(diào)PH值為8.0，水浴80℃旋轉(zhuǎn)提取2h。再離心收集上清液，過濾。
3、加乙醇至含醇量達55％醇沉過夜(冰箱4℃)。
4、過濾醇沉液，收集沉淀。
1.3.9篩選堿液提取工藝條件，優(yōu)選提取參數(shù)。
(1)正交試驗 取青稞粉碎過篩，于80℃滅酶1h。稱取九份，每份30g，編號1-9，置1000ml燒杯，按正交試驗因素水平表進行堿液提取(用20％碳酸鈉溶液調(diào)PH)。所得提取液經(jīng)5000r/min離心10min，得上清液，調(diào)體積至600ml，用稀鹽酸調(diào)PH值至6，于90～95℃水浴，按4u/g加耐高溫α-淀粉酶酶解淀粉30min。所得提取液調(diào)PH至7。
精密量取各提取液1ml至25ml容量瓶，加適量水，于70℃水浴溶解完全，放置室溫后加水至刻度，至冰箱冷藏。精密量取1ml至10ml量瓶，加水補至2ml，加4ml剛果紅溶液反應10min，測最大吸收峰處波長，及545nm下吸收度，計算β-葡聚糖含量。公式C＝144.3091A-3.2990 R＝0.9894。
表2-1正交試驗因素水平表
(2)正交試驗驗證 將上述所得1到9號提取液濃縮至200ml，加95％乙醇醇沉至含醇量為75％，冷藏過夜，真空抽濾得沉淀，干燥。稱重，分別精密稱取0.01g，至25ml容量瓶，加適量水于70℃水浴溶解，放置至室溫，精密量取1ml至10ml量瓶，補水至2ml，再加新配剛果紅溶液4ml，反應10min，測最大吸收峰處波長，及545nm下吸收度，計算含量。
1.3.10乙醇醇沉濃度 本次實驗比較醇沉含醇量50％～80％范圍內(nèi)最佳醇沉濃度。
取青稞見須按除雜后，粉碎過4號篩，烘箱80℃干燥1h，按料液比為1∶22，PH值調(diào)為8.0，于80℃水浴提取1.5小時。按4u/g加耐高溫α-淀粉酶酶解淀粉，濃縮至適量，分成4份，分別醇沉至50％、60％、70％、80％，冷藏過夜。離心得沉淀，干燥后剛果紅法測B-Glucan純度。
1.3.11比較不同提取方法 取3份日喀則青稞粉，每份40g，編號為1、2、3，按料水比1∶22加水，并調(diào)PH8.0，1一次堿提1.5h，2二次堿提(1.5h×2)，3微波提取(810w，12min)，放冷，離心。得上清液。新配制100u/ml耐高溫a-淀粉酶液，調(diào)上清液PH值為6.0，水浴溫度為90-95℃，加入新配制的耐高溫a-淀粉酶液5ml，去淀粉30min，碘液檢查不含淀粉為止，冷卻至室溫。調(diào)PH為4.5，冷藏過液，離心，得上清液。上清液調(diào)PH為7.0，加入乙醇至含醇量為70％，冷藏過夜。干燥沉淀，測定含量并記錄測定結果。
1.4青稞β-葡聚糖純化研究 1.4.1青稞β-葡聚糖的去除蛋白質(zhì)研究 本次實驗考察胰酶酶解蛋白質(zhì)結合等電點法除蛋白質(zhì)效果。
(1)考馬斯亮藍法標準曲線繪精密稱取牛血清白蛋白0.00502g，加水定容于50ml量瓶。的100ug/ml牛血清白蛋白溶液。精密稱取考馬斯亮藍G250 0.05g，加90％乙醇25ml，85％磷酸50ml溶解，補水至500ml，的考馬斯亮藍溶液。按下表測紫外吸收度。
表2-2考馬斯亮藍法標準曲線測定結果表
標準曲線C＝203.5046+3.9062 R＝0.9818 (2)取青稞，按最佳提取工藝提取，再按0.25g/40g胰酶量，ph8，47℃水浴下酶解2.5h，測蛋白質(zhì)、葡聚糖含量，在調(diào)ph4.5，冷藏過夜，測蛋白質(zhì)、葡聚糖含量。
1.4.2青稞β-葡聚糖過氧化氫、活性炭脫色考察 按最佳工藝提取青稞兩份A、B，每份50g，所得提取液用胰酶結合等電點法除蛋白質(zhì)，冷藏。離心，得上清液A液和B液。
A液共900ml，量取450ml，分成9份，每份50ml。按下表進行脫色實驗。稀釋10倍，剛果紅法測葡聚糖含量。
B液共500ml，分成5份，每份100ml，按下表進行脫色，脫色后測葡聚糖提取率。
1.4.3大孔樹脂純化方法 取提取粗品5g溶解于500ml，調(diào)PH4.5，4℃過夜。然后再調(diào)PH7.0取250ml直接醇沉。另外250ml過大孔樹脂柱。
(1)大孔樹脂預處理 首先用飽和食鹽水(36-100)浸泡18-20h，然后放盡鹽水，用清水漂洗凈使排出的水不顯黃色，再用2％-4％NaoH溶液浸泡2-4h，放盡后再沖洗樹脂至水接近中性待用。
(2)過柱 過D101大孔吸附樹脂，用蒸餾水洗至再洗脫液中加入95％乙醇至無沉淀為止，洗脫液濃分四段收集，分別為100ml、100ml、70ml、100ml。分別從中各取1ml加水1ml進行含量測定。
1.4.4青稞β-葡聚糖粗品中果膠的去除 精密稱定青稞提取物粗品1g(純度為34％)，加50ml水，按120u/g，加果膠酶，調(diào)PH值為4.5，于恒溫搖床中振搖5h，溫度為50-55℃，120r/min，觀察溶解情況，冷卻，調(diào)PH值為7.0，醇沉過夜。抽濾并干燥沉淀回收乙醇。測定含量。
1.4.5硫酸銨沉淀純化 取提取粗品5g溶解于500ml水后，在20-30％的硫酸銨溶液中再次沉淀，4℃冷藏過夜，過濾的沉淀，沉淀用透析袋透析后，溶液加乙醇至含醇量為75％，醇沉過夜，得沉淀，測定其含量。
2結果與分析 2.1提取實驗結果與分析 2.1.1是否粉碎對提取的影響考察結果 表2-3粉碎對提取的影響考察結果表 實驗結果表明粉碎可提高提取純度和提取率。
2.1.2烘烤、干燥滅酶放法比較結果 實驗結果表明取其中用微波爐高火檔分別烘烤滅酶5min、15min、30min，觀察效果。100g粉碎過3號篩后置烘箱(80℃)干燥滅酶2h。根據(jù)觀察結果，選擇烘箱(80℃)干燥滅酶2h烘烤方式。
2.1.3是否攪拌對提取的影響考察結果 表2-4否攪拌對提取的影響考察結果表 實驗結果表明攪拌能夠提高提取率和提取純度。
2.1.4加熱回流滅酶方法考察結果 表2-5加熱回流滅酶方法考察結果表 數(shù)據(jù)與表5未加熱回流直接堿提數(shù)據(jù)比較說明用95％乙醇加熱回流過的堿液提取青稞，β-葡聚糖提取率較低，損失較大。且耗用試劑量大，不予采用。
2.1.5青稞中β-葡聚糖的超聲提取和煎煮水提方法考察結果 實驗結果的超聲波提取方法干燥沉淀A 4.3g，水提煎煮提取方法干燥沉淀4.5g。
2.1.6水浴堿提和旋轉(zhuǎn)堿提考察結果 實驗結果得干燥物水浴堿提0.9g；旋轉(zhuǎn)堿提0.7g。選擇水浴堿提為提取方法。
2.1.7耐高溫α-淀粉酶加入量考察結果 實驗結果 方法(1)對應甲、乙、丙的酶解液加碘液均不變色，丙最小用量4u/g，達到酶解完全效果。
方法(2)對應I、II、III的酶解液加碘液I變色，對應酶用量18、107、204u/g，即100u/g酶解完全。
2.1.8先堿提再酶解淀粉提取方法與先糊化酶解淀粉再堿提提取方法考察結果 實驗結果沉淀干燥后得a 0.7g b 1.0g c 0.9g d 0.2g(e，f物沉淀)各取0.01g，定容于100ml，剛果紅法比色，545nm處，吸收度分別為0.403、0.406、0.424、0.315。則方法(1)含量較方法(2)高。先堿提后酶解淀粉較好。
2.1.9正交試驗結果 (1)正交實驗結果 表2-6正交實驗數(shù)據(jù)結果表
表2-7正交實驗分析表
實驗數(shù)據(jù)結果表明堿液提取過程中，因素B＞D＞A＞C，即料液比＞提取時間＞提取溫度＞堿液PH值，最佳組合為A3B3C1D2，即料液比為1∶22，提取液PH值調(diào)為8.0，于80℃水浴提取1.5小時。
(2)正交驗證實驗結果 表2-8干燥后數(shù)據(jù)結果表 表2-9干燥后正交實驗設計結果分析表
實驗數(shù)據(jù)分析結果表明最佳組合仍為A3B3C1D2。即料液比為1∶22，提取液PH值為8.0，于80℃水浴提取1.5小時。
2.1.10乙醇醇沉濃度考察結果 表2-10乙醇醇沉濃度考察結果表 實驗結果表明醇沉濃度70％最好。
2.1.11不同提取方法比較結果 表2-11不同提取方法比較結果表 實驗結果表明微波提取結果最好，但是提取難度較大，二次堿提不僅麻煩且純度不理想，故采用一次堿提。
2.2青稞純化實驗研究結果 2.2.1青稞的β-葡聚糖除蛋白質(zhì)的考察結果 表2-12去蛋白質(zhì)實驗結果表
實驗結果表明除蛋白質(zhì)效果明顯，并對對葡聚糖影提取率響不大。
2.2.2過氧化氫、活性炭脫色考察結果 表2-13A液9份實驗結果表
表2-14B液5份實驗結果表
試驗結果表明10％的過氧化氫加入量1.8ml/g，提取率最多。除2號外，混合1-9號，濃縮至200ml，醇沉75％，離心得沉淀，干燥測純度，過氧化氫脫色后的沉淀干燥后，色黃白，測純度4.83％，損失過大，該法不可取?；旌匣钚蕴棵撋?-4號，濃縮至170ml，此時提取液變渾濁，再用活性炭脫色，醇沉，沉淀干燥，得0.8227g，測得平均純度為21.1％，有一定損失，且所得干燥物仍然色深，脫色無效果。
2.2.3大孔樹脂純化實驗結果 表2-15大孔樹脂純化實驗測定結果表 表2-16干膏率含量測定結果(取50ml測) 實驗結果表明大孔樹脂純化方法不可行，含量反而下降。不予采用。
2.2.4青稞β-葡聚糖粗品中果膠的去除考察結果 表2-17青稞β-葡聚糖粗品中果膠的去除考察結果表 實驗結果表明果膠酶去除果膠不理想，并造成青稞中β-葡聚糖嚴重損失。不予采用。
2.2.5硫酸銨沉淀純化結果 表2-18硫酸銨沉淀前后比較表 實驗結果表明經(jīng)硫酸銨沉淀后，β-葡聚糖粗品純度提高不大，且透析過程復雜，不予采用。
3討論 通過單因素實驗，加熱乙醇回流滅酶β-葡聚糖提取率較低，損失較大。且耗用試劑量大，不予采用。粉碎對提取效果的影響較大，粉碎后不僅提取率增加提取純度也有所提高，所以待提取物需要粉碎。粉碎后采用80℃烘干2h，提取方法選擇堿提，并以一次堿提效果最好。堿提中先堿提后酶解淀粉較好，耐高溫α-淀粉酶加入量4u/g，即可去除淀粉。提取液醇沉，乙醇濃度為70％，效果最好。
通過正交實驗確定了青稞中提取β-葡聚糖的工藝條件，為料液比為1∶22，提取液PH值為8.0，于80℃水浴提取1.5小時。
通過純化實驗表明酶法和等電點去除蛋白質(zhì)都能達到良好的效果，采用二者去除蛋白質(zhì)，但脫色實驗表明，脫色無效果，且影響β-葡聚糖提取率，不能采用。大孔樹脂純化實驗和硫酸銨沉淀純化結果都不理想，不采用。
權利要求
1.一種青稞中β-葡聚糖提取和純化工藝，其特征是按以下步驟順次進行
a)、取青稞粉碎過60目篩；
b)、85℃干燥滅酶2小時，按料水比1∶22加水；
c)、加碳酸鈉調(diào)PH8.0，80℃提取1.5h，放冷，離心，得上清液；
d)、調(diào)上清液PH值為6.0，按4u/g加入耐高溫a-淀粉酶，水浴溫度為90-95℃進行酶解去淀粉30min，碘液檢查不含淀粉為止，冷卻至室溫；
e)、調(diào)PH為4.5，冷藏過液，離心，得上清液。f)、調(diào)PH8.0，加0.25g胰酶(溶解后加入)，47℃酶解2.5h，離心得上清液；
g)、上清液調(diào)PH為7.0，加入乙醇至含醇量為70％，冷藏過夜；
h)、過濾得沉淀，沉淀加50倍水溶解，加入乙醇至含醇量為75％，冷藏過夜。
i)、過濾得沉淀，冷凍干燥。
2.根據(jù)權利要求1所述青稞中β-葡聚糖提取和純化工藝，其特征是所述b)、85℃干燥滅酶2小時，按料水比1∶22加水c)、加碳酸鈉調(diào)PH8.0，80℃提取1.5h，放冷，離心，得上清液；d)、調(diào)上清液PH值為6.0，按4u/g加入耐高溫a-淀粉酶，水浴溫度為90-95℃進行酶解去淀粉30min，碘液檢查不含淀粉為止，冷卻至室溫。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種青稞中β-葡聚糖提取和純化工藝。按以下步驟順次進行a)取青稞粉碎過60目篩；b)85℃干燥滅酶2小時，按料水比1∶22加水，c)加碳酸鈉調(diào)pH8.0，80℃提取1.5h，放冷，離心，得上清液。d)調(diào)上清液pH值為6.0，按4u/g加入耐高溫a-淀粉酶，水浴溫度為90-95℃進行酶解去淀粉30min，碘液檢查不含淀粉為止，冷卻至室溫。e)調(diào)pH為4.5，冷藏過液，離心，得上清液。f)調(diào)pH8.0，加0.25g胰酶(溶解后加入)，47℃酶解2.5h，離心得上清液。g)上清液調(diào)pH為7.0，加入乙醇至含醇量為70％，冷藏過夜。h)過濾得沉淀，沉淀加50倍水溶解，加入乙醇至含醇量為75％，冷藏過夜。i)過濾得沉淀，冷凍干燥。
文檔編號C08B37/00GK101724666SQ20081004637
公開日2010年6月9日 申請日期2008年10月27日 優(yōu)先權日2008年10月27日
發(fā)明者吳志華, 嚴冬 申請人:吳志華