專利名稱：肝素生產(chǎn)新工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種肝素生產(chǎn)工藝，特別是一種用生物酶解法制備肝素的 新工藝。
背景技術(shù)：
肝素作為一種生物醫(yī)藥中間體，是一種天然抗凝血藥物，具有抗凝血 和防止血栓形成的作用，臨床上廣泛用于腎病患者的滲血、急性心皿塞、 輸血時(shí)預(yù)防血液凝固和保存鮮血等方面。肝素廣泛分布于哺乳動(dòng)物組織中， 例如腸粘膜、肺、肝中，特別是豬小腸粘膜中含量最高。傳統(tǒng)的肝素生產(chǎn) 工藝是鹽解法，即用堿性食鹽水與腸粘膜發(fā)生初級生物化學(xué)反應(yīng)，制得肝 素。但是這種生產(chǎn)工藝生產(chǎn)周期長，水解不完全、不徹底，制得的肝素、 純度低、收率低、效價(jià)低、產(chǎn)生大量的廢渣、廢水嚴(yán)重污染環(huán)境。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種用生物酶酶解法生產(chǎn)肝素的新工藝，它具有 生產(chǎn)周期短、收率高、成本低、耗能低、純度高、效價(jià)高、不污染環(huán)境的 特點(diǎn)。
本發(fā)明的目的由以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)，其生產(chǎn)工藝包括以下步驟 1)鮮胰漿的配制
① 首先配制生石灰水，將生石灰與tK按1: 3的比例混合，攪勻沉淀待用；
② 將新鮮胰臟除去結(jié)蒂組織、油脂、雜物，4交碎成糊狀；
③ 將沉淀好的生石灰上層清液與鉸碎的胰臟糊狀，按l:2—3的比例混 合成胰漿；
④ 用30-40%氫氧化鈉溶液調(diào)PH值至8.0，攪勻靜置2h,激活后即可
4使用；
① 首先將收集的腸粘膜投入反應(yīng)鍋中，加入0.1-0.3%的抑菌劑，并按 每0.8kg小腸粘膜加5-8kg水的比例配制成酶解液；
② 加熱升溫至30-50。C時(shí)，用30-40呢的氫氧化鈉溶液PH值至7-10,按 與酶解液1:20的比例加入鮮胰漿，繼續(xù)加熱升溫，進(jìn)行攪拌酶解反應(yīng)；
③ 當(dāng)鍋內(nèi)料溫升至40-60X:時(shí)，停止加熱升溫，保溫2-6小時(shí)，查看料 溫在55-65。C時(shí)，復(fù)查調(diào)PH值7-10,用鹽度計(jì)測鹽度為1.5-4.5;
④ 繼續(xù)加熱升溫至70-85。C，保溫30-60min,即刻過濾，收集過濾液用 于吸附，無廢渣；
3 )吸附
① 將收集待用的過濾液移入吸附罐內(nèi)，除去上層油膜；
② 待料液溫度降至60-50。C，按0.8kg小腸粘膜加入20-30g D254專用 吸附樹脂，攪拌吸附4-8h;
③ 過濾收集樹脂用于洗脫，過濾液棄去； 4)洗脫
① 將收集的樹脂用水清洗干凈后，移入洗脫桶內(nèi)，按樹脂2-3倍量加入 18-25%的氯化鈉溶液；
② 在30-50°C的保溫條件下攪拌洗脫4-6h;
③ 過濾收集過濾液用于沉淀待用，收集樹脂用于第二遍洗脫；
④ 按樹脂1-2倍量加入18-25%的氯化鈉溶液，在保溫30-50。C條件下攪 拌進(jìn)行第二遍洗脫2-4h;
⑤ 過濾收集過濾液用作下一次洗脫時(shí)的第一遍洗脫液，收集樹脂再生 處理待用；
5 )沉淀① 將收集的第一遍洗脫液過濾移入沉淀缸中，加入含量為85%以上的 乙醇，使沉淀液中的乙醇含量達(dá)到30-50%，調(diào)PH值至7-8.0,攪勻密封沉 淀6-24h;
② 虹吸上層清液用于回收乙醇，收集沉淀物用于脫鹽待用；
6) 脫鹽
① 將收集的沉淀物移入沉淀缸中，加入含量為75%以下的低濃度乙醇， 使沉淀液中的乙醇含量達(dá)到30-50%，調(diào)PH值至7-8.0，攪勻密封沉淀24h 以上；
② 虹吸上層清液用于回收乙醇，收集沉淀物用于脫水干燥待用；
7) 脫水干燥
①將收集的沉淀物濾干或用白滌良布吊干脫水；
即得肝素粗品。
所述抑菌劑是苯酚或高錳酸鉀或三氯鉀烷。 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是
① 彌補(bǔ)了鹽解法提取肝素的不足，更徹底全面地溶解腸粘膜，提高肝 素收率30%左右，提高產(chǎn)品質(zhì)量純度，雜質(zhì)少，效價(jià)高；
② 解決了鹽堿提取法溶解不徹底的缺點(diǎn)，無廢氣、廢渣、廢水排出污 染環(huán)境；
③ 節(jié)約原輔材料30。/。以上，提高了經(jīng)濟(jì)效益，符合國家節(jié)能P爭耗減排的 政策；
④ 使用該工藝生產(chǎn)無毒、無害、生物環(huán)保、并可大規(guī)j莫工業(yè)化生產(chǎn)；
⑤ 省工省時(shí)、省力、減輕勞動(dòng)強(qiáng)度40%以上；
節(jié)約煤、電能源20%以上，做到低成本，高產(chǎn)出，實(shí)現(xiàn)了效益最大化。
具體實(shí)施例方式
6以下通過實(shí)施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明。
實(shí)施例1:
本發(fā)明的生產(chǎn)工藝包括以下步驟
1) 鮮胰漿的配制
① 首先配制生石灰水，將生石灰與水按l: 3的比例混合，攪勻沉淀待用；
② 將新鮮胰臟除去結(jié)蒂組織、油脂、雜物，鉸碎成糊狀；
③ 將沉淀好的生石灰上層清液與鉸碎的胰臟糊狀，按l:2—3的比例混 合成胰漿；
④ 用30-40%氫氧化鈉溶液調(diào)PH值至8.0，攪勻靜置2h,激活后即可 使用；
2) 酶解
① 將收集的100kg腸粘膜"iO^反應(yīng)鍋中，加入(X2kg的苯酚溶液，并加 700kg水的比例配制成酶解液；
② 加熱升溫至45°C時(shí)，用45%的氫氧化鈉溶液調(diào)PH值至8.5，加入20kg 的鮮胰漿，繼續(xù)加熱升溫，進(jìn)行攪拌酶解反應(yīng)；
(D當(dāng)鍋內(nèi)料溫升至50。C時(shí)，停止加熱升溫，保溫3小時(shí)，查看料溫在 6(TC時(shí)，復(fù)查調(diào)PH值8，用鹽度計(jì)測鹽度為3;
④繼續(xù)加熱升溫至65°C,保溫45min，即刻過濾，收集過濾液用于吸 附，無廢渣；
3) 吸附
① 將收集待用的過濾液移入吸附罐內(nèi)，除去上層油膜；
② 待料液溫度降至55°C,加入D254專用吸附樹脂2kg，攪拌吸附6h;
③ 過濾收集樹脂用于洗脫，過濾液棄去；
4) 洗脫
①將收集的樹脂用水清洗干凈后，移入洗脫桶內(nèi)，加入18-25%的氯化鈉溶液3kg;
② 在45。C的保溫條件下攪拌洗脫5h;
③ 過濾收集過濾液用于沉淀待用，收集樹脂用于第二遍洗脫；
④ 加入18-25%的氯化鈉溶液15kg，在保溫40。C條件下攪拌進(jìn)行第二 遍洗脫2陽4h;
⑤ 過濾收集過濾液用作下一次洗脫時(shí)的第一遍洗脫液，收集樹脂再生 處理待用；
5) 沉淀
① 將收集的第一遍洗脫液過濾移入沉淀缸中，加入含量為85%以上的 乙醇，使沉淀液中的乙醇含量達(dá)到40%，調(diào)PH值至8.0，攪勻密封沉淀15h;
② 虹吸上層清液用于回收乙醇，收集沉淀物用于脫鹽待用；
6) 脫鹽
① 將收集的沉淀物移入沉淀缸中，加入含量為75%以下的低濃度乙醇， 使沉淀液中的乙醇含量達(dá)到30-50%,調(diào)PH值至7-8.0，攪勻密封沉淀24h 以上；
② 虹吸上層清液用于回收乙醇，收集沉淀物用于脫水干燥待用；
7) 脫水干燥
① 將收集的沉淀物濾干或用白滌良布吊干脫水；
② 將脫水后的沉淀物移入烘箱烘干或J 即得100g肝素粗品，產(chǎn)品效價(jià)為75 ~ 85U。
權(quán)利要求
1、一種肝素生產(chǎn)新工藝，其特征在于其生產(chǎn)工藝包括以下步驟1)鮮胰漿的配制①首先配制生石灰水，將生石灰與水按1:3的比例混合，攪勻沉淀待用；②將新鮮胰臟除去結(jié)蒂組織、油脂、雜物，鉸碎成糊狀；③將沉淀好的生石灰上層清液與鉸碎的胰臟糊狀，按1:2—3的比例混合成胰漿；④用30-40％氫氧化鈉溶液調(diào)PH值至8.0，攪勻靜置2h，激活后即可使用；2)酶解①首先將收集的腸粘膜投入反應(yīng)鍋中，加入0.1-0.3％的抑菌劑，并按每0.8kg小腸粘膜加5-8kg水的比例配制成酶解液；②加熱升溫至30-50℃時(shí)，用30-40％的氫氧化鈉溶液PH值至7-10，按與酶解液1:20的比例加入鮮胰漿，繼續(xù)加熱升溫，進(jìn)行攪拌酶解反應(yīng)；③當(dāng)鍋內(nèi)料溫升至40-60℃時(shí)，停止加熱升溫，保溫2-6小時(shí)，查看料溫在55-65℃時(shí)，復(fù)查調(diào)PH值7-10，用鹽度計(jì)測鹽度為1.5-4.5；④繼續(xù)加熱升溫至70-85℃，保溫30-60min，即刻過濾，收集過濾液用于吸附，無廢渣；3)吸附①將收集待用的過濾液移入吸附罐內(nèi)，除去上層油膜；②待料液溫度降至60-50℃，按0.8kg小腸粘膜加入20-30g D254專用吸附樹脂，攪拌吸附4-8h；③過濾收集樹脂用于洗脫，過濾液棄去；4)洗脫①將收集的樹脂用水清洗干凈后，移入洗脫桶內(nèi)，按樹脂2-3倍量加入18-25％的氯化鈉溶液；②在30-50℃的保溫條件下攪拌洗脫4-6h；③過濾收集過濾液用于沉淀待用，收集樹脂用于第二遍洗脫；④按樹脂1-2倍量加入18-25％的氯化鈉溶液，在保溫30-50℃條件下攪拌進(jìn)行第二遍洗脫2-4h；⑤過濾收集過濾液用作下一次洗脫時(shí)的第一遍洗脫液，收集樹脂再生處理待用；5)沉淀①將收集的第一遍洗脫液過濾移入沉淀缸中，加入含量為85％以上的乙醇，使沉淀液中的乙醇含量達(dá)到30-50％，調(diào)PH值至7-8.0，攪勻密封沉淀6-24h；②虹吸上層清液用于回收乙醇，收集沉淀物用于脫鹽待用；6)脫鹽①將收集的沉淀物移入沉淀缸中，加入含量為75％以下的低濃度乙醇，使沉淀液中的乙醇含量達(dá)到30-50％，調(diào)PH值至7-8.0，攪勻密封沉淀24h以上；②虹吸上層清液用于回收乙醇，收集沉淀物用于脫水干燥待用；7)脫水干燥①將收集的沉淀物濾干或用白滌良布吊干脫水；②將脫水后的沉淀物移入烘箱烘干或用蒸汽蒸干或使用石灰塊干燥，即得肝素粗品。
2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的肝素生產(chǎn)新工藝，其特征在于所述抑菌劑是苯酚或高錳酸鉀或三氯鉀烷。
全文摘要
本發(fā)明為一種肝素生產(chǎn)新工藝，首先制作鮮胰漿，然后將豬小腸粘膜通過生物酶解，得到含有肝素的溶液，再通過D254離子交換樹脂，吸附、洗脫，最后經(jīng)過沉淀、脫鹽、脫水干燥等步驟，即得肝素粗品。本發(fā)明具有生產(chǎn)周期短、節(jié)約原輔材料、耗能低、純度高、效價(jià)高、不污染環(huán)境的特點(diǎn)，產(chǎn)品的收率在效價(jià)為75-85U時(shí)，可達(dá)0.8-1g。
文檔編號C08B37/00GK101463095SQ20071005105
公開日2009年6月24日 申請日期2007年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月20日
發(fā)明者平 秦 申請人:大英縣茂森生物化工廠