水稻硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白nrt1.1b在提高植物氮利用效率中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了水稻硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NRT1.1B在提高植物氮利用效率中的應(yīng)用。所述蛋白NRT1.1B為序列表序列2所示的蛋白，可用于提高植物硝酸鹽含量或提高植物硝酸鹽的轉(zhuǎn)運(yùn)能力，進(jìn)而提高植物氮的利用效率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，過表達(dá)水稻中的硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NRT1.1B獲得的轉(zhuǎn)基因株系，其硝酸鹽含量明顯提高，表明硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NRT1.1B在提高植物氮利用效率中具有重要的應(yīng)用潛能。本發(fā)明為培育高氮肥利用率的作物提供了一個(gè)新的途徑。
【專利說明】水稻硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NRT1. 1B在提高植物氮利用效率中的 應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體為一種水稻硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NRTL IB在提高植物 氮利用效率中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 在各種營(yíng)養(yǎng)元素中，氮在植物生命活動(dòng)過程中占據(jù)首要地位。氮是植物體內(nèi)許多 重要化合物，如核酸（DNA、RNA)、蛋白質(zhì)（包括酶）、磷脂、葉綠素、光敏素、維生素（B1、B2、 B6等）、植物激素（IAA、CTK)、生物堿等組成成分，所以氮素在維持和調(diào)節(jié)植物生理功能上 具有多方面的作用。但在自然的土壤環(huán)境中，可以被植物直接吸收利用的氮源含量較低，所 以氮是影響植物生長(zhǎng)發(fā)育的一個(gè)重要限制因素。為促進(jìn)作物增產(chǎn)，氮肥在農(nóng)業(yè)中被大量使 用。上世紀(jì)80年代以來，我國(guó)氮肥用量急劇增加，在占世界7%的耕地上消耗了全球35% 的氮肥。中國(guó)糧食年產(chǎn)量從1981年（3. 25億噸）至2008年（5. 29億噸）增長(zhǎng)了 63%，而 氮肥消費(fèi)量卻增長(zhǎng)了近2倍。氮肥的大量使用不但增加了生產(chǎn)成本，而且還導(dǎo)致一系列嚴(yán) 重的環(huán)境問題。在施加的氮肥中，只有不到30%可以被作物所吸收，而大部分殘留的氮肥 會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的土壤酸化以及水體富營(yíng)養(yǎng)化。而我們國(guó)家的土壤酸化以及水體富營(yíng)養(yǎng)化的面 積正呈現(xiàn)逐年增大的趨勢(shì)。此外，氮肥的生產(chǎn)會(huì)消耗大量能源，據(jù)統(tǒng)計(jì)每生產(chǎn)1噸氮肥需要 消耗2800千克的優(yōu)質(zhì)煤及1600度電能，由此會(huì)造成大量碳排放，對(duì)大氣產(chǎn)生嚴(yán)重污染。此 夕卜，我們國(guó)家還面臨糧食生產(chǎn)的巨大缺口，需要逐年提高糧食產(chǎn)量。因此，氮肥過量使用對(duì) 農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展提出戰(zhàn)略性的挑戰(zhàn)。提高作物的氮肥利用效率，減少氮肥在農(nóng)業(yè)中的使用 將會(huì)是解決這一系列問題的關(guān)鍵。
[0003] 水稻作為最重要的糧食作物之一，超過世界三分之一的人口以稻米為主食。水稻 根系具有非常發(fā)達(dá)的通氣組織，使其根際微環(huán)境中易發(fā)生硝化作用，因此水稻中大約40% 的氮源是以硝酸鹽的形式被吸收。秈稻（indica)與粳稻（japonica)是亞洲栽培稻的兩個(gè) 主要的亞群，而且秈稻表現(xiàn)出更強(qiáng)的硝酸鹽利用能力。利用秈稻與粳稻硝酸鹽利用能力的 差異，對(duì)相關(guān)的基因位點(diǎn)進(jìn)行分離鑒定，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)利用關(guān)鍵基因位點(diǎn)培育氮高效的水稻新 品種。氯酸鹽是硝酸鹽的毒性類似物，可以被硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白吸收，進(jìn)而在硝酸還原酶的作 用下轉(zhuǎn)化為對(duì)植物具有毒害作用的次氯酸鹽。在擬南芥中，利用氯酸鹽進(jìn)行毒性篩選，已獲 得多個(gè)與硝酸鹽利用相關(guān)的突變體，并成功鑒定了相關(guān)的基因。氯酸鹽處理后，植物會(huì)表現(xiàn) 出明顯的生長(zhǎng)停滯及葉片黃化壞死等毒害表型，因此可以使用氯酸鹽敏感性作為水稻硝酸 鹽利用能力的評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)導(dǎo)致秈稻與粳稻氮利用效率差異相關(guān)基因位點(diǎn)進(jìn)行鑒定。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種水稻硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NRTL IB及其編碼基因在提 高植物氮利用效率中的應(yīng)用。
[0005] 上述應(yīng)用中，所述硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NRTL IB的氨基酸序列如SEQ ID No. 2所示。
[0006] 上述應(yīng)用中，所述硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NRTL IB的編碼基因序列如SEQ ID No. 1第 1-1791位核苷酸分子所示。
[0007] 上述應(yīng)用中，所述氮利用率的提高為硝酸鹽含量或硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)能力的提高。
[0008] 上述應(yīng)用中，所述植物為單子葉植物或雙子葉植物；所述單子葉植物具體為水稻。
[0009] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種構(gòu)建轉(zhuǎn)基因植物的方法。
[0010] 上述所述構(gòu)建轉(zhuǎn)基因植物的方法包括如下步驟：使權(quán)利要求1所述蛋白質(zhì)在受體 植物中過表達(dá)，獲得氮利用率提高的轉(zhuǎn)基因植株。
[0011] 上述方法中，所述使權(quán)利要求1所述蛋白質(zhì)在受體植物中過表達(dá)的方法為：向受 體植物中導(dǎo)入SEQ ID No. 1所示的硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NRTL IB的編碼基因序列，得到轉(zhuǎn)基因 植物；轉(zhuǎn)基因植物與受體植物相比，氮利用效率提高。
[0012] 上述方法中，所述氮利用效率的提高為硝酸鹽含量的提高。
[0013] 本發(fā)明最后一個(gè)目的是提供一種構(gòu)建近等基因系植物的方法。
[0014] 上述所述構(gòu)建近等基因系植物的方法包括如下步驟：將供體親本與受體親本進(jìn)行 雜交，再與受體親本繼續(xù)多次回交，得到近等基因系植物；近等基因系植物與受體親本和供 體未本相比，氣利用率提1?。
[0015] 上述方法中，所述的氮利用率提高體現(xiàn)在如下方面中的至少一種：
[0016] (1)硝酸鹽含量；
[0017] (2)氯酸鹽敏感性；
[0018] ⑶植物的株型；
[0019] ⑷單株的產(chǎn)量；
[0020] (5)單株的分蘗數(shù)；
[0021] (6)小區(qū)產(chǎn)量；
[0022] (7)氮利用效率。
[0023] 上述方法中，所述回交的次數(shù)具體為5次。
[0024] 上述方法中，所述的供體親本為秈稻品種IR24,所述的受體親本為粳稻品種日本 晴。
[0025] 實(shí)驗(yàn)證明，過表達(dá)蛋白NRTL IB的轉(zhuǎn)基因水稻株系中，隨著蛋白NRTL IB編碼基因 相對(duì)表達(dá)量的提高，其硝酸鹽含量也明顯提高。結(jié)果表明蛋白NRTL IB在提高植物對(duì)硝酸 鹽利用中具有重要的應(yīng)用潛能。本發(fā)明為培育高氮肥利用率的作物提供了一個(gè)新的途徑。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0026] 圖1中a為NRTL IB在950份水稻品種中的進(jìn)化分析；b為18份秈粳稻品種中 NRTL IB CDS分析；c為NRTL IB基因結(jié)構(gòu)示意圖。
[0027] 圖2中a為34份秈粳稻品種的硝酸鹽含量比較；b為134份秈粳稻品種的的氯酸 鹽敏感性比較。
[0028] 圖 3 為注射 NRTL IB-japonica (NBjap)及 NRTL lB-indica (NBind)cRNA 的爪蟾卵 母細(xì)胞15N-KN03吸收活性比較；CHLl為陽性對(duì)照。
[0029] 圖4中a為受體親本日本晴（Nip)，供體親本IR24及NIL的氯酸鹽敏感性分析，標(biāo) 尺為3cm ;b為受體親本日本晴（Nip)，供體親本IR24及NIL硝酸鹽含量分析。
[0030] 圖 5 中 a 為 NRTL IB-japonica 過表達(dá)轉(zhuǎn)基因株系（Jap-2/3/7)及 NRTL lB-indica 過表達(dá)轉(zhuǎn)基因株系（Ind-1/3/6)的硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)量分析；b為NRTL lB-indica過 表達(dá)轉(zhuǎn)基因株系中和NRTL lB-japonica過表達(dá)轉(zhuǎn)基因株系的硝酸鹽含量分析。
[0031] 圖6中a為受體親本日本晴（Nip)與NIL在不同硝酸鹽濃度下的生長(zhǎng)比較；b為 受體親本日本晴與NIL在不同硝酸鹽濃度下的葉綠素含量，光合速率及生物量分析。
[0032] 圖7中a為低氮條件下日本晴及NIL的株型比較；b為高氮條件下日本晴及NIL的 株型比較；c為低氮/高氮條件下日本晴及NIL的單株產(chǎn)量比較；d為低氮條件下日本晴及 NIL的分蘗數(shù)，單株產(chǎn)量，小區(qū)產(chǎn)量及氮利用效率比較；e為高氮條件下日本晴及NIL的分蘗 數(shù)，單株產(chǎn)量，小區(qū)產(chǎn)量及氮利用效率比較。
【具體實(shí)施方式】
[0033] 下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
[0034] 下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0035] 實(shí)施例1、秈稻和粳稻NRTL IB的⑶S區(qū)核苷酸變異情況
[0036] 通過對(duì)大規(guī)模水稻品種進(jìn)行進(jìn)化分析，結(jié)果表明：硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白編碼基因 NRTl. lB(L0C_0sl0g40600)在秈稻與粳稻品種間呈現(xiàn)顯著的分化（圖la)。序列分析的結(jié) 果表明，秈稻與粳稻的NRTL IB的CDS區(qū)存在兩個(gè)單核苷酸變異（SNP1，SNP2)，如圖Ib和圖 Ic所示，而且⑶S區(qū)第980位的SNPl (T〈C)導(dǎo)致了秈粳稻亞種間氨基酸的變異（Met〈Thr)。
[0037] 實(shí)施例2、秈稻和粳稻的15NCV含量和氯酸鹽敏感性測(cè)定
[0038] 改良木村營(yíng)養(yǎng)液的成分包括：2mM KN03、0. 36mM Ca(Cl)2 ? 4H20、 0? 54mMMgS04 ? 7H20、0. 18mM KH2PO4,40 u M Fe (11)-EDTA、18? 8 y M H3BO3, 13. 4 ii MMnCl2 .4H20、0. 32 ii M CuSO4.5H20、0. 3 ii M ZnSO4.4H20 以及 0? 03 ii M Na2MoO4.4H20。
[0039] 將秈稻和粳稻的幼苗培養(yǎng)2周后轉(zhuǎn)移至含有5mM 15N-KNO3的改良木村營(yíng)養(yǎng)液中， 吸收24h，然后使用0. Imm CaS04處理lmin，去離子水沖洗3次，取地上部分于70°C烘干。將 烘干后的樣品研磨至粉末，使用同位素比質(zhì)譜儀（Thermo Finnigan Delta plus XP ;Flash EA 1112)進(jìn)行15N含量測(cè)定。結(jié)果表明，秈稻品種較粳稻品種表現(xiàn)出更高的硝酸鹽含量，如 圖2a所示。
[0040] 氯酸鹽敏感性測(cè)定使用2mM KClO3。高濃度氯酸鹽處理時(shí)，先將萌發(fā)后的水稻種子 培養(yǎng)于含有2mM KNO3的改良木村培養(yǎng)液中生長(zhǎng)3d，然后轉(zhuǎn)移至含有2mM KClO3及2mM KNO3 的木村培養(yǎng)液中處理5d，然后進(jìn)行表型觀察。氯酸鹽敏感性的定量計(jì)算方法為：（正常培養(yǎng) 高度-氯酸鹽處理高度/正常培養(yǎng)高度）X100。結(jié)果表明，秈稻品種較粳稻品種表現(xiàn)出更 高的氯酸鹽敏感性，如圖2b所示。
[0041] 實(shí)施例3、秈稻和粳稻NRTL IB在爪蟾卵母細(xì)胞中的硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)能力測(cè)定
[0042] 分別提取秈稻IR24和粳稻日本晴的RNA，反轉(zhuǎn)錄為cDNA。分別以獲得的cDNA為 模板，采用下述引物序列分別對(duì)秈稻和粳稻的NRTL IB CDS進(jìn)行PCR擴(kuò)增。擴(kuò)增采用的引 物兩端分別引入限制性內(nèi)切酶BamH I和EcoR I的識(shí)別位點(diǎn)（如下劃線所示），引物序列： F:5, -GGATCCATGGCGATGGTGTTGCCG-3' ;R :5, -GAATTCTTAGTGGCCGACGGCGATGGT-3，。
[0043] 將擴(kuò)增的目的片段分別連接入爪蟾卵母細(xì)胞表達(dá)載體pCS2+，并使用 mMESSAGEmMACHINE(Ambion ;AM1340)試劑盒進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄。按照?qǐng)?bào)道的方法進(jìn)行cRNA的 注射及培養(yǎng)（Zhang et al.，1998)。將培養(yǎng)的卵母細(xì)胞進(jìn)行硝酸鹽（15N-KNO3)吸收實(shí)驗(yàn)及 15N含量測(cè)定（Liu et al.，1999)。結(jié)果表明，在爪蟾卵母細(xì)胞系統(tǒng)中，NRTL lB-indica與 NRTL lB-japonica 都表現(xiàn)出硝酸鹽的轉(zhuǎn)運(yùn)能力，且 NRTL lB-indica 較 NRTL lB-japonica 表現(xiàn)出更高的硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)活性（圖3)。
[0044] 實(shí)施例4、NRTL lB-indica近等基因系（NIL)的構(gòu)建及氯酸鹽敏感性及硝酸鹽含 量的測(cè)定
[0045] 以秈稻品種IR24為供體親本，以粳稻品種日本晴為受體親本進(jìn)行近等基因系的 構(gòu)建。將IR24與日本晴連續(xù)回交5次，得到BC5F2,使用分布于12條染色體上的PCR多態(tài) 標(biāo)記對(duì)回交后代進(jìn)行鑒定，以得到含有NRTL lB-indica的近等基因系。
[0046] 對(duì)受體親本日本晴（Nip)、供體親本IR24及得到含有NRTL lB-indica的近等基因 系NIL的15N03-含量和氯酸鹽敏感性進(jìn)行測(cè)定和比較。結(jié)果表明：NRTL lB-indica近等基 因系（NIL)相比受體親本（日本晴）和供體親本IR24,表現(xiàn)出更高的氯酸鹽敏感性及硝酸 鹽含量（圖4a和圖4b)。
[0047] 實(shí)施例5、NRTL lB-indica近等基因系（NIL)和受體親本（日本晴）氮利用效率 的比較
[0048] (一）將NRTL lB-indica近等基因系（NIL)和受體親本（日本晴）分別處于不同 濃度的（400yM、lmM、2mM)硝酸鹽的水培條件下，對(duì)NRTL lB-indica近等基因系（NIL)相 比受體親本（日本晴）的生長(zhǎng)狀態(tài)、葉綠素含量、光合速率及生物量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明： NIL相比受體親本（日本晴）表現(xiàn)出更好的生長(zhǎng)狀態(tài)，更高的葉綠素含量，光合速率及生物 量（圖6)。
[0049] (二）在大田種植條件下，比較低氮（LN)和高氮（HN)情況下NRTL lB-indica近 等基因系（NIL)和受體親本（日本晴）的株型、單株產(chǎn)量、單株分蘗數(shù)、小區(qū)產(chǎn)量及氮利用 效率。結(jié)果表明：無論在低氮（LN)還是高氮（HN)條件下，NIL較日本晴在株型、單株產(chǎn)量、 單株分蘗數(shù)、小區(qū)產(chǎn)量及氮利用效率等多個(gè)方面均表現(xiàn)出顯著的增加（圖7)。
[0050] 實(shí)施例6、NRTL lB-indica/japonica過表達(dá)轉(zhuǎn)基因株系的獲得及其硝酸鹽含量 的測(cè)定
[0051] ( 一）NRT1. lB-indica/japonica過表達(dá)轉(zhuǎn)基因株系的獲得
[0052] 分別提取秈稻IR24和粳稻日本晴的RNA，反轉(zhuǎn)錄為cDNA。分別以獲得的cDNA為 模板，采用下述引物序列分別對(duì)秈稻和粳稻的NRTL IB CDS進(jìn)行PCR擴(kuò)增。擴(kuò)增采用的引 物兩端分別引入限制性內(nèi)切酶Xma I和Xba I的識(shí)別位點(diǎn)（如下劃線所示），引物序列：F : 5, -CCCGGGATGGCGATGGTGTTGCCG-3' ;R :5, -TCTAGATTAGTGGCCGACGGCGATGGT-3，。
[0053] 用NcoI和PstI分別對(duì)花椰菜花葉病毒（CAMV) 35S啟動(dòng)子和pCambia2300 (購(gòu)自 Cambia)進(jìn)行雙酶切，將酶切后的花椰菜花葉病毒（CAMV) 35S啟動(dòng)子連入pCambia2300載體 中，獲得雙元表達(dá)載體pCambia2300-35S。用限制性內(nèi)切酶Xma I和Xba I分別對(duì)擴(kuò)增得 到的目的片段和雙元表達(dá)載體pCambia2300-35S進(jìn)行雙酶切，將酶切后的目的片段連接入 雙元表達(dá)載體pCambia2300-35S，獲得重組表達(dá)載體。將上述重組表達(dá)載體進(jìn)行測(cè)序驗(yàn)證， 結(jié)果表明：在pCambia2300-35S載體的Xma I和Xba I酶切位點(diǎn)間插入的秈稻的基因序列 如序列1中第1-1791位核苷酸所示，表明載體正確；在pCambia2300-35S載體的Xma I和 Xba I酶切位點(diǎn)間插入的粳稻的基因序列如序列3中第1-1791位核苷酸所示，表明載體正 確。序列1中第1-1791位核苷酸所編碼的蛋白如序列2中第1-596位的氨基酸所示，序列 3中第1-1791位核苷酸所編碼的蛋白如序列4中第1-596位的氨基酸所示。
[0054] 將上述獲得的重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌AGLl (購(gòu)自ATCC)，在分別轉(zhuǎn)化粳稻 品種中花11的愈傷組織，獲得了過表達(dá)序列1中第1-1791位核苷酸所編碼的蛋白的 NRTL lB-indica過表達(dá)轉(zhuǎn)基因株系和過表達(dá)序列3中第1-1791位核苷酸所編碼的蛋白的 NRTl. lB-japonica過表達(dá)轉(zhuǎn)基因株系。
[0055] 對(duì)上述獲得的NRTL lB-indica過表達(dá)轉(zhuǎn)基因株系和NRTL lB-japonica 過表達(dá)轉(zhuǎn)基因株系進(jìn)行熒光實(shí)時(shí)定量PCR。鑒定轉(zhuǎn)基因株系的引物序列是 F: 5 ' -GGCAGGCTCGACTACTTCTA-3 ' ； R: 5 ' -AGGCGCTTCTCCTTGTAGAC-3 '。結(jié)果表明，過表達(dá) NRTL IB的秈稻和粳稻的表達(dá)量相差不多（圖5a)。
[0056] (二）NRTL lB-indica/japonica過表達(dá)轉(zhuǎn)基因株系硝酸鹽含量的測(cè)定
[0057] 對(duì)上述獲得的NRTL lB-indica過表達(dá)轉(zhuǎn)基因株系和NRTL lB-japonica過表達(dá)轉(zhuǎn) 基因株系的硝酸鹽含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明：NRTL lB-indica過表達(dá)轉(zhuǎn)基因株系中的硝酸 鹽含量顯著高于NRTL lB-japonica過表達(dá)轉(zhuǎn)基因株系（圖5b)。
【權(quán)利要求】
1. 水稻硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NRT1. 1B及其編碼基因在提高植物氮利用率中的應(yīng)用。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NRT1. 1B的序列如 SEQ ID No. 2 所示； 所述硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NRT1. 1B的編碼基因序列如SEQ ID No. 1中第1-1791位核苷酸 分子所不。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于：所述氮利用率的提高為硝酸鹽含量 或硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)能力的提高。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的應(yīng)用，其特征在于：所述植物為單子葉植物或雙子葉 植物；所述單子葉植物具體為水稻。
5. -種構(gòu)建轉(zhuǎn)基因植物的方法，包括如下步驟：向受體植物中導(dǎo)入硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 NRT1. 1B的編碼基因序列，使硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NRT1. 1B在受體植物中過表達(dá)，得到轉(zhuǎn)基因植 物；轉(zhuǎn)基因植物與受體植物相比，氮利用效率提高。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于：所述硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NRT1. 1B的序列 如SEQ ID No. 2所示；所述硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NRT1. 1B的編碼基因序列如SEQ IDNo. 1中第 1-1791位核苷酸分子所示。
7. 根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其特征在于：所述氮利用效率的提高為硝酸鹽含 量的提1?。
8. -種構(gòu)建近等基因系植物的方法，包括如下步驟：將供體親本與受體親本進(jìn)行雜 交，再與受體親本繼續(xù)多次回交，得到近等基因系植物；近等基因系植物與受體親本和供體 未本相比，氣利用率提1?。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于：所述的氮利用率提高體現(xiàn)在如下方面中 的至少一種： (1) 硝酸鹽含量； (2) 氯酸鹽敏感性； (3) 植物的株型； (4) 單株的產(chǎn)量； (5) 單株的分蘗數(shù)； (6) 小區(qū)產(chǎn)量； (7) 氮利用效率。
10. 根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的方法，其特征在于：所述的供體親本為秈稻品種IR24， 受體親本為粳稻品種日本晴。
【文檔編號(hào)】C07K14/415GK104277101SQ201410495440
【公開日】2015年1月14日 申請(qǐng)日期:2014年9月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月24日
【發(fā)明者】?jī)?chǔ)成才, 胡斌, 王威, 張志華, 李華, 梁成真, 車榮會(huì) 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所