專利名稱：一種從橘紅中提取柚皮苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從化橘紅中提取柚皮苷的方法，尤其是提取高純度柚皮苷的方法。發(fā)明所稱的高純度柚皮苷是指純度在98%以上的柚皮苷。
背景技術(shù)：
柚皮苷是一種天然產(chǎn)物，廣泛存在于蕓香科植物中，尤以未成熟的果皮含量最高。它具有止咳、化痰、抗炎、抗腫瘤、抗衰老、降膽固醇、改善血管循環(huán)等生物活性。
獲得柚皮苷的方法分為兩種一種是化學(xué)合成法，但此種方法合成路線復(fù)雜，成本高；第二種方法，也是用得最廣泛的方法，即從蕓香科植物中提取。目前已報(bào)道的有，將含有柚皮苷的藥材經(jīng)水提、通過(guò)大孔樹(shù)脂、濃縮并收集沉淀后用水或乙醇重結(jié)晶后得到(蘇薇薇等，CN03113604. 4和CN03146997. 3);將化橘紅粗粉經(jīng)水提、調(diào)節(jié)pH、通過(guò)大孔樹(shù)脂、濃縮并收集沉淀后用無(wú)水乙醇重結(jié)晶后得到(王琳等，CN200910232802. 4);將枳殼生藥用60%乙醇提取后，通過(guò)大孔樹(shù)脂，最后用高速逆流色譜純化后得到(范國(guó)榮等，CN200410053284. 7)；將粉碎好的柚子粉經(jīng)高壓萃取釜萃取，萃取液濃縮后除去不溶物，調(diào)節(jié)PH后析晶，再用無(wú)水乙醇重結(jié)晶后得到(許晨等，CN200910229939. 4);賈冬英等報(bào)道了使用70%乙醇在60°C下提取后，用蒸餾水重結(jié)晶可得到純度在90%的柚皮苷(賈冬英，姚開(kāi)，譚敏，張銘讓.柚皮中柚皮苷的乙醇提取工藝研究[J].中草藥，2002,33 (9) :801);韋敏等報(bào)道了用95%乙醇的提取化橘紅，提取液經(jīng)大孔樹(shù)脂純化后冷凍干燥，可得純度達(dá)85%的柚皮苷(韋敏，楊中林，吳建民.大孔吸附樹(shù)脂法分離純化化橘紅中柚皮苷的研究[J].中成藥，2007，29 (3)352)。盡管方法眾多，但這些方法都不盡完善。在從藥材中提取出粗品的柚皮苷時(shí)，許多方法都有加入CaCl2或調(diào)節(jié)pH，而且?guī)缀醵际褂昧舜罂讟?shù)脂來(lái)進(jìn)行初步純化，這些操作復(fù)雜，在洗脫時(shí)會(huì)用到一些有毒溶劑，污染環(huán)境，且加入的物質(zhì)若不去除干凈，可能會(huì)傷害人體，不利于工業(yè)化大生產(chǎn)。且所得的柚皮苷純度不夠理想，入藥使用時(shí)容易產(chǎn)生毒副作用。雖然過(guò)高速逆流色譜和高壓萃取釜能夠獲得純度較高的柚皮苷，但對(duì)設(shè)備的要求較高，成本相對(duì)也較高，不利于工業(yè)化生產(chǎn)。
發(fā)明內(nèi)容
為了克服以上問(wèn)題，尋求一種簡(jiǎn)單易行的柚皮苷的提取純化方法，發(fā)明人對(duì)柚皮苷的提取純化工藝進(jìn)行了深入的研究，得到了操作簡(jiǎn)單、產(chǎn)量高的柚皮苷提取純化工藝。本發(fā)明的目的在于提供一種從化橘紅中提取純化柚皮苷的方法。該方法包括以下步驟(I)水提將化橘紅用水加熱提取I 4次，每次用水的體積為化橘紅質(zhì)量的8 16倍，時(shí)間為O. 5 4小時(shí)；過(guò)濾，合并水提濾液；(2)醇沉將上述水提濾液濃縮至其密度為I. 10 I. 30克/毫升；加乙醇，至醇濃度為40% 80% ;放置6 48小時(shí)，過(guò)濾，收集醇沉濾液；
(3)回收乙醇將醇沉濾液回收乙醇至無(wú)醇味，放置4 15天，過(guò)濾，干燥得柚皮昔粗品；(4)重結(jié)晶將柚皮苷粗品用20% 50%的乙醇水溶液進(jìn)行兩次重結(jié)晶干燥后得柚皮苷純品；每次重結(jié)晶的乙醇水溶液的體積均為固體質(zhì)量的4 10倍，析晶溫度為5 25°C;其中，第一次重結(jié)晶析晶時(shí)間為24 36小時(shí)，得第一次重結(jié)晶粗產(chǎn)品；第二次重結(jié)晶采用兩步析晶法，第一步析晶時(shí)間為6 8小時(shí)，第二步析晶時(shí)間為24 36小時(shí)。第(4)步驟中第二次重結(jié)晶采用兩步析晶法的目的是先濾除雜質(zhì)野漆樹(shù)苷，再將母液析晶析出柚皮苷，從而保證得到高純度的柚皮苷。所述步驟(4)中，第二次重結(jié)晶采用的兩步析晶法具體為取第一次重結(jié)晶粗產(chǎn)品加入所述乙醇水溶液,加熱攪拌至全溶,趁熱過(guò)濾,收集濾液,濾液冷卻至15 25°C，放置6 8小時(shí)，抽濾，棄去濾渣，所得濾液繼續(xù)放置24 36小時(shí)，抽濾，固體用水洗滌二次，每次用水量為固體質(zhì)量的I 4倍，抽干，收集固體并干燥后得柚皮苷純品。 上述工藝過(guò)程中所涉及的工藝參數(shù)范圍，均為采用正交設(shè)計(jì)或均勻設(shè)計(jì)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究后所確定。在上述工藝所指定工藝參數(shù)范圍進(jìn)行提取分離，均可以得到純度在98.0%以上的柚皮苷，上述工藝參數(shù)在所述范圍內(nèi)的改變僅對(duì)柚皮苷的得率有影響。在中試規(guī)模的多次實(shí)驗(yàn)中，采用本發(fā)明所述的提取純化方法得到的柚皮苷純品，經(jīng)外標(biāo)法測(cè)定產(chǎn)品純度均在98. 0%以上，為高純度柚皮苷。實(shí)驗(yàn)表明本工藝切實(shí)可行，有操作簡(jiǎn)單、溶劑低毒、對(duì)環(huán)境無(wú)污染、產(chǎn)品純度高、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)。
具體實(shí)施例方式下面通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。下述實(shí)施例中乙醇水溶液的濃度是指乙醇與水按體積比的百分比濃度。實(shí)施例I取化橘紅500公斤，加入其質(zhì)量10倍量體積的水提取I小時(shí)，濾過(guò)，濾渣再提取2次，每次加其質(zhì)量12倍量體積的水,每次提取I小時(shí),濾過(guò),合并濾液并于70°C濃縮至相對(duì)密度為I. 12克/毫升，加乙醇使乙醇的體積比濃度達(dá)到70%，放置12小時(shí)，濾過(guò)，棄去濾渣，將濾液回收乙醇至無(wú)醇味，放置5天，析出固體，濾過(guò)，將固體干燥，即得柚皮苷粗品73. 3公斤。實(shí)施例2取實(shí)施例I的柚皮苷粗品5公斤，加入其質(zhì)量6倍量體積的30%乙醇水溶液，加熱攪拌至全溶,趁熱過(guò)濾,收集濾液,濾液在25°C下放置24小時(shí)，析出固體，抽濾，固體用水洗滌二次，每次用水量為固體質(zhì)量的2倍，收集固體并干燥后得第一次重結(jié)晶粗產(chǎn)品。取第一次重結(jié)晶粗產(chǎn)品2. 7公斤，加入其質(zhì)量10倍量體積的40%乙醇水溶液，加熱攪拌至全溶，趁熱過(guò)濾，收集濾液，濾液冷卻至25°C時(shí)，繼續(xù)放置8小時(shí)，抽濾，棄去濾渣，母液繼續(xù)放置36小時(shí)，抽濾，固體用水洗滌二次，每次用水量為固體質(zhì)量的2倍，抽干，收集固體并干燥后得柚皮苷I. 7公斤，純度為98. 82%。實(shí)施例3取實(shí)施例I的柚皮苷粗品13公斤，加入其質(zhì)量6倍量體積的30%乙醇水溶液，加熱攪拌至全溶，趁熱過(guò)濾，收集濾液，濾液在20°C下放置30小時(shí)，析出固體，抽濾，固體用水洗滌二次，每次用水量為固體質(zhì)量的2倍，收集固體并干燥后得第一次重結(jié)晶粗產(chǎn)品。取第一次重結(jié)晶粗產(chǎn)品7. 5公斤，加入其質(zhì)量10倍量體積的50%乙醇水溶液，加熱攪拌至全溶，趁熱過(guò)濾，收集濾液，濾液冷卻至20°C時(shí)，繼續(xù)放置7小時(shí)，抽濾，棄去濾渣，母液繼續(xù)放置24小時(shí)，抽濾，固體用水洗滌二次，每次用水量為固體質(zhì)量的2倍，抽干，收集固體并干燥后得柚皮苷2. 9公斤，純度為98. 81%。實(shí)施例4取實(shí)施例I的柚皮苷粗品15公斤，加入其質(zhì)量6倍量體積的30%乙醇水溶液，加熱攪拌至全溶，趁熱過(guò)濾，收集濾液，濾液在15°C下放置36小時(shí)，析出固體，抽濾，固體用水洗滌二次，每次用水量為固體質(zhì)量的2倍，收集固體并干燥后得第一次重結(jié)晶粗產(chǎn)品。
取第一次重結(jié)晶粗產(chǎn)品9公斤，加入其質(zhì)量10倍量體積的40%乙醇水溶液，加熱攪拌至全溶，趁熱過(guò)濾，收集濾液，濾液冷卻至5°C時(shí)，繼續(xù)放置7小時(shí)，抽濾，棄去濾渣，母液繼續(xù)放置24小時(shí)，抽濾，固體用水洗滌二次，每次用水量為固體質(zhì)量的2倍，抽干，收集固體并干燥后得柚皮苷5. I公斤，純度為98. 92%。
權(quán)利要求
1.一種從化橘紅中提取柚皮苷的方法，其特征在于包括以下步驟 (1)水提將化橘紅用水加熱提取I 4次，每次用水的體積為化橘紅質(zhì)量的8 16倍，時(shí)間為0. 5 4小時(shí)；過(guò)濾，合并水提濾液； (2)醇沉將上述水提濾液濃縮至其密度為I.10 I. 30克/毫升；加乙醇，至醇濃度為40% 80% ;放置6 48小時(shí)，過(guò)濾，收集醇沉濾液； (3)回收乙醇將醇沉濾液回收乙醇至無(wú)醇味，放置4 15天，過(guò)濾，干燥得柚皮苷粗品; (4)重結(jié)晶將柚皮苷粗品用20% 50%的乙醇水溶液進(jìn)行兩次重結(jié)晶干燥后得柚皮苷 純品；每次重結(jié)晶的乙醇水溶液的體積均為柚皮苷粗品質(zhì)量的4 10倍，析晶溫度為5 25°C;其中，第一次重結(jié)晶析晶時(shí)間為24 36小時(shí)，得第一次重結(jié)晶粗產(chǎn)品；第二次重結(jié)晶采用兩步析晶法，第一步析晶時(shí)間為6 8小時(shí)，第二步析晶時(shí)間為24 36小時(shí)。
2.如權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于步驟(4)，所述的第二次重結(jié)晶采用的兩步析晶法具體為取第一次重結(jié)晶粗產(chǎn)品加入所述乙醇水溶液，加熱攪拌至全溶，趁熱過(guò)濾，收集濾液，濾液冷卻至15 25°C，放置6 8小時(shí)，抽濾，棄去濾渣，所得濾液繼續(xù)放置24 36小時(shí)，抽濾，固體用水洗滌二次，每次用水量為固體質(zhì)量的I 4倍，抽干，收集固體并干燥后得柚皮苷純品。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種從化橘紅中提取柚皮苷的方法，該方法包括水提、醇提回收和重結(jié)晶步驟。其中所述的重結(jié)晶進(jìn)行兩次，且第二次重結(jié)晶采用兩步析晶法，第一步析晶時(shí)間為6～8小時(shí)，第二步析晶時(shí)間為24～36小時(shí)，析晶溫度為5～25℃，溶劑為20%～50%的乙醇水溶液。相對(duì)于現(xiàn)有的同類提取技術(shù)本工藝具有切實(shí)可行，操作簡(jiǎn)單、溶劑低毒、對(duì)環(huán)境無(wú)污染、產(chǎn)品純度高、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)C07H1/08GK102964408SQ20121055521
公開(kāi)日2013年3月13日 申請(qǐng)日期2012年12月19日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月19日
發(fā)明者王永剛, 蘇薇薇, 吳忠, 劉孟華 申請(qǐng)人:廣東中大天翼生物科技發(fā)展有限公司