一種天名精內(nèi)酯酮的提純方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種天名精內(nèi)酯酮的提純方法，其包含下列步驟：步驟1）：無機強堿的水溶液中，0~100℃條件下，將北鶴虱在進行浸泡或者超聲提??；然后過濾，濾液用無機強酸調(diào)節(jié)pH至1~7，產(chǎn)生沉淀；步驟2）：將步驟1）產(chǎn)生的沉淀除去后，將上清液用有機溶劑進行萃取，得萃取液；步驟3）：將步驟2）得到的萃取液進行硅膠柱層析，即可得天名精內(nèi)酯酮。本發(fā)明的提純方法操作簡單，得到的天名精內(nèi)酯酮純度較高。
【專利說明】—種天名精內(nèi)酯酮的提純方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明具體的涉及一種天名精內(nèi)酯酮的提純方法。
【背景技術】
[0002]北鶴虱是菊科植物天名精的干燥成熟果實，具有殺蟲消積的作用，常用于治療蛔蟲、蟯蟲、絳蟲病、蟲積腹痛和小兒疳積等。該領域對于北鶴虱化學成分的研究比較少，目前的研究表明，北鶴虱含有特勒內(nèi)酯(劉翠周，許婧，桂麗萍等.北鶴虱的化學成分研究[J].藥物評價研究，2010，33(6):220-221)、天名精內(nèi)酯酮、天名精內(nèi)酯醇及各種脂肪酸。研究表明，天名精內(nèi)酯酮屬于倍半萜類化合物，具有殺菌和抑菌作用，為了實現(xiàn)其較好的抑菌效果，需要將其從北鶴虱中分離純化。由于北鶴虱中含有很多相似的天名精內(nèi)酯化合物，相互間極性差異很小，使得單體化合物的分離比較困難，如申請?zhí)枮?01010113236，名稱為《一種天名精總內(nèi)酯提取物》的中國發(fā)明專利，提供了從天名精中提取一種天名精總內(nèi)酯化合物的方法。該發(fā)明得到的是天名精總內(nèi)酯混合物，其中的天名精內(nèi)酯酮、天名精內(nèi)酯醇純度不高，不能滿足現(xiàn)實科研、生產(chǎn)的需求。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本發(fā)明所要解決的技術問題是為了克服現(xiàn)有的提純天名精內(nèi)酯酮的方法中，天名精內(nèi)酯酮純度不高的缺陷，而提供了一種天名精內(nèi)酯酮提純方法。本發(fā)明的提純方法操作簡單，得到的天名精內(nèi)酯酮純度較高。
[0004]本發(fā)明提供了一 種天名精內(nèi)酯酮的提純方法，其包含下列步驟:
[0005]步驟I):無機強堿的水溶液中，O~100°C條件下，將北鶴虱在進行浸泡或者超聲提取；然后過濾，濾液用無機強酸調(diào)節(jié)PH至f 7，產(chǎn)生沉淀；
[0006]步驟2):將步驟I)產(chǎn)生的沉淀除去后，將上清液用有機溶劑進行萃取，得萃取液；
[0007]步驟3):將步驟2)得到的萃取液進行硅膠柱層析，即可得天名精內(nèi)酯酮。
[0008]步驟I)中，所述的進行浸泡或者超聲提取的溫度較佳的為3(T70°C。所述的浸泡的時間較佳的為ltT24h。所述的超聲提取的時間較佳的為5~60分鐘，更佳的為10-15分鐘。所述的超聲提取的次數(shù)較佳的為廣3次。超聲提取的壓力較佳的為0.f 10.0MPa。步驟I)中，采用超聲處理，可縮短提取時間，提高提取效率。
[0009]步驟I)中，所述的pH較佳的為廣3。所述的北鶴虱與無機強堿的水溶液的質量比較佳的為1:1~1:30，更佳的為1: l(Tl: 15。所述的無機強堿較佳的為NaOH和/或Κ0Η。所述的無機強堿的水溶液中無機強堿的質量濃度較佳的為0.1%~20%，優(yōu)選0.1%~10%，進一步優(yōu)選0.59Tl%。所述的無機強酸較佳的為鹽酸、硫酸和硝酸中的一種或多種，更佳的為鹽酸，鹽酸較佳的以鹽酸水溶液的形式存在(優(yōu)選鹽酸質量濃度為0.1%~?%的鹽酸水溶液)。用無機強酸調(diào)節(jié)PH時，所調(diào)節(jié)的溶液的溫度較佳的為室溫，即(T40°C。本發(fā)明中，步驟I)采用堿-酸處理雜質，使得除雜方法簡單、經(jīng)濟。
[0010]步驟2)中，除去沉淀的方法可為離心，或者通過靜置和過濾。所述的將上清液用有機溶劑進行萃取中的有機溶劑可為常用的萃取用的，與水不互溶的有機溶劑，優(yōu)選乙酸乙酯、二氯甲烷、三氯化碳和四氯化碳中的一種或多種。
[0011]步驟3)中，所述的硅膠柱層析的方法和條件均可為本領域此類分離方法的常規(guī)方法和條件，本領域技術人員根據(jù)目標產(chǎn)物的極性(本發(fā)明中可以將現(xiàn)有的天名精內(nèi)酯酮作為標準品，通過對照檢測分離出的物質)，結合TLC檢測等方法，可以選擇出將本發(fā)明的目標產(chǎn)物天名精內(nèi)酯酮提純的條件。本發(fā)明特別優(yōu)選下述方法和條件:所用的洗脫劑較佳的為乙醚-丙酮，或者二氯甲烷-甲醇；其中，洗脫條件為等梯度洗脫，所述的乙醚-丙酮中，乙醚和丙酮的體積比較佳的為10:0-0:10(優(yōu)選4:1-6:1)。所述的二氯甲烷-甲醇中，二氯甲烷和甲醇的體積比較佳的為100:0-0:100 (優(yōu)選95:5)。所用的硅膠柱層析中的硅膠，可以是大孔硅膠、粗孔硅膠、B型硅膠或細孔硅膠。較佳的，洗脫過程中，將洗脫液點薄層硅膠板(TLC)，展開劑可為乙醚-丙酮(2:1-4:1)，顯色劑可為5%硫酸溶液，可在105°C加熱5min顯色，第一個圓點出現(xiàn)開始收集，合并第一個圓點的洗脫液，濃縮、揮去有機溶劑，即可得天名精內(nèi)酯酮。
[0012]本發(fā)明中，較佳的，在步驟3)之后還可以包含下列步驟4):
[0013]步驟4):將步驟3)制得的天名精內(nèi)酯酮溶于低極性溶劑與高極性溶劑的混合溶液中，濃縮至無色晶體析出，即可得到更高純度的天名精內(nèi)酯酮，其中低極性溶劑為乙醚、己烷、環(huán)己烷、二氯甲烷或戊烷，高極性溶劑為丙酮、乙酸乙酯、氯仿、甲醇或乙醇。
[0014]步驟4)中，較佳的，低極性溶劑與高極性溶劑的混合溶液為乙醚-丙酮混合溶液、環(huán)己烷-丙酮混合溶液，或者環(huán)己烷-乙酸乙酯混合溶液。所述的乙醚-丙酮混合溶液中，乙醚與丙酮的體積比較佳的為4: f 10:1 (更佳的為8:1)。所述的環(huán)己烷-丙酮混合溶液中，環(huán)己烷與丙酮的體積比較佳的為4: f 10:1 (更佳的為8:1)。所述的環(huán)己烷-乙酸乙酯混合溶液中，環(huán)己烷與乙酸乙酯的體積比較佳的為4: f 10:1 (更佳的為8:1)。
[0015]在不違背本領域常識的基礎上，上述各優(yōu)選條件，可任意組合，即得本發(fā)明。
[0016]本發(fā)明所用試劑和原料均市售可得。
[0017]本發(fā)明的積極進步效果在于:本發(fā)明的提純方法操作簡單，得到的天名精內(nèi)酯酮純度較高。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0018]圖1為本發(fā)明的天名精內(nèi)酯酮的提純方法的較佳實例的流程示意圖。
[0019]圖2為實施例1制得的最終產(chǎn)物天名精內(nèi)酯酮的1HNMR譜圖。
【具體實施方式】
[0020]下面通過實施例的方式進一步說明本發(fā)明，但并不因此將本發(fā)明限制在所述的實施例范圍之中。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，按照常規(guī)方法和條件，或按照商品說明書選擇。
[0021]實施例1
[0022]天名精內(nèi)酯酮的制備工藝，即以北鶴虱為原料，0.5%Na0H溶液為萃取劑，提取分離天名精內(nèi)酯酮的工藝，具體步驟如下:
[0023](1)取Ikg北鶴虱，用5L 0.5% (w/w)NaOH溶液，30°C超聲處理30min，用200目的濾布將北鶴虱分離出來，再用4L 0.5% (w/w)NaOH溶液在30°C超聲處理30min，用200目的濾布將北鶴虱分離出來；再用3L 0.5% (w/w) NaOH溶液在30°C超聲處理30min，用200目濾布將北鶴虱分離出來；合并三次所提取的提取液。
[0024](2)向提取液中加入1% (w/w)鹽酸溶液在室溫(25°C)條件下進行中和，調(diào)pH至3左右，產(chǎn)生沉淀，靜置。
[0025](3)將產(chǎn)生的沉底和上清液分離，沉淀沉重復(I)、(2)步；上清液加入IL乙酸乙酯進行萃取，萃取三次，合并三次的萃取液，濃縮。
[0026](4)將濃縮后的乙酸乙酯提取物上硅膠柱，用乙醚-丙酮混合液進行等梯度洗脫，其中，乙醚-丙酮體積比為4:1。在洗脫過程中，采用分段洗脫，用硅膠薄層板以乙醚-丙酮展開劑展開、進行定性測定，將含有相同化合物點得洗脫液進行合并。其中，將僅含第一個點得洗脫液濃縮、回收洗脫劑，獲得天名精內(nèi)酯酮3.75g，純度90%以上。
[0027](5)將獲得的天名精內(nèi)酯酮溶于乙醚-丙酮(V/V，體積比8:1)，濃縮至出現(xiàn)白色渾濁，有無色結晶析出，干燥，獲得3.65g純度99.5%以上的天名精內(nèi)酯酮。
[0028]產(chǎn)物天名精內(nèi)酯酮的核磁譜圖如圖1,具體數(shù)據(jù)如下: [0029]1HNMR (CDCl3) δ H:6.23(lH，d，J=2.8Hz，H_13)，5.56(lH，d，J=2.4Hz，H_13’) ,4.79(1H, ddd, J=6, g, 11，11.4Hz, H_8)，3.15 (1H, ddddd, J=7，9，13Hz, H_7)，2.16 (3H, s’ H-15)，1.08 (3H, s’ H-l.4)，0.45 (1H, m, H_5)，0.37 (1H, m, H_l)。
[0030]實施例2
[0031](I)取5kg北鶴虱，用20L 1% (w/w) NaOH溶液，30°C超聲處理30min，用200目的濾布將北鶴虱分離出來，再用15L 1% (?/?)似0!1溶液在301:超聲處理301^11，用200目的濾布將北鶴虱分離出來；再用IOL 1% (w/w)NaOH溶液在30°C超聲處理30min，用200目濾布將北鶴虱分離出來；合并三次所提取的提取液。
[0032](2)向提取液中加入3% (w/w)鹽酸溶液在室溫(25°C)條件下進行中和，調(diào)pH至2左右，產(chǎn)生沉淀，靜置。
[0033](3)將產(chǎn)生的沉底和上清液分離，沉淀沉重復⑴，(2)步驟；上清液加入2.5L乙酸乙酯進行萃取，萃取三次，合并三次的萃取液，濃縮。
[0034](4)將濃縮后的乙酸乙酯提取物上硅膠柱，用二氯甲烷-甲醇混合液進行等梯度洗脫，其中，二氯甲烷-甲醇體積比為95:5。在洗脫過程中，采用分段洗脫，用硅膠薄層板以乙醚-丙酮為展開劑展開、定性測定，將含有相同化合物的洗脫液合并。將僅含第一個化合物的洗脫液濃縮、回收洗脫劑，獲得天名精內(nèi)酯酮16.35g，純度90%以上。
[0035](5)將獲得的天名精內(nèi)酯酮溶于環(huán)己烷-丙酮(V/V，體積比8:1)，濃縮至出現(xiàn)白色渾濁，靜置，有結晶析出，干燥，獲得15.95g純度達99.5%以上的天名精內(nèi)酯酮。
[0036]產(chǎn)物天名精內(nèi)酯酮的核磁數(shù)據(jù)如下:
[0037]1HNMR (CDCl3) δ H:6.23(lH，d，J=2.8Hz，H_13)，5.56(lH，d，J=2.4Hz，H_13’) ,4.79(1H, ddd, J=6, g, 11，11.4Hz, H_8)，3.15 (1H, ddddd, J=7，9，13Hz, H_7)，2.16 (3H, s’ H-15)，1.08 (3H, s’ H-l.4)，0.45 (1H, m, H_5)，0.37 (1H, m, H-l)。
[0038]實施例3
[0039](I)取IOkg北鶴虱，用25L 2% (w/w)NaOH溶液，30°C超聲處理30min，用200目的濾布將北鶴虱分離出來，再用20L 2% (?/?)似0!1溶液在301:超聲處理301^11，用200目的濾布將北鶴虱分離出來；再用15L 2% (w/w)NaOH溶液在30°C超聲處理30min，用200目濾布將北鶴虱分離出來；合并三次所提取的提取液。
[0040](2)向北鶴虱提取物濾液中加入6% (w/w)鹽酸溶液在室溫(25°C)條件下進行中和，調(diào)pH至I左右，產(chǎn)生沉淀，靜置。
[0041](3)將產(chǎn)生的沉底和上清液分離，沉淀重復(I) (2)步；上清液加入4L乙酸乙酯進行萃取，萃取三次，合并三次的萃取液，濃縮。
[0042](4)將濃縮后的乙酸乙酯提取物上硅膠柱，用乙醚-丙酮混合液進行等梯度洗脫，其中，乙醚-丙酮體積比為4:1。在洗脫過程中，采用分段洗脫，用硅膠薄層板以乙醚-丙酮為展開劑展開、定性測定，將含有相同化合物的洗脫液合并。其中，將僅含第一個化合物的洗脫液濃縮、回收洗脫劑，獲得天名精內(nèi)酯酮29.6g，純度90%以上。
[0043](5)將獲得的天名精內(nèi)酯酮溶于環(huán)己烷與乙酸乙酯(V/V，體積比4:1)，濃縮至出現(xiàn)白色渾濁，靜置，有結晶析出，干燥所得結晶，獲得28.56g純度達99.5%以上的天名精內(nèi)酯酮。
[0044]產(chǎn)物天名精內(nèi)酯酮的核磁數(shù)據(jù)如下:
[0045]1HNMR (CDCl3) δ H:6.23(lH，d，J=2.8Hz，H_13)，5.56(lH，d，J=2.4Hz，H_13’) ,4.79(1H, ddd, J=6, g, 11，11.4Hz, H_8)，3.15 (1H, ddddd, J=7，9，13Hz, H_7)，2.16 (3H, s’ H-15)，
1.08 (3H, s’ H-l.4)，0.45 (1H`, m, H_5)，0.37 (1H, m, H-l)。
【權利要求】
1.一種天名精內(nèi)酯酮的提純方法，其特征在于包含下列步驟: 步驟I):無機強堿的水溶液中，(Tioo°c條件下，將北鶴虱在進行浸泡或者超聲提?。蝗缓筮^濾，濾液用無機強酸調(diào)節(jié)PH至f 7，產(chǎn)生沉淀； 步驟2):將步驟I)產(chǎn)生的沉淀除去后，將上清液用有機溶劑進行萃取，得萃取液； 步驟3):將步驟2)得到的萃取液進行硅膠柱層析，即可得天名精內(nèi)酯酮。
2.如權利要求1所述的提純方法，其特征在于:步驟I)中，所述的進行浸泡或者超聲提取的溫度為30-70°C;所述的浸泡的時間為ltT24h ;所述的超聲提取的時間為5-6O分鐘；所述的超聲提取的次數(shù)為1-3次。
3.如權利要求1所述的提純方法，其特征在于:步驟I)中，所述的pH為1-3。
4.如權利要求1所述的提純方法，其特征在于:步驟I)中，所述的北鶴虱與無機強堿的水溶液的質量比為1:1-1:30 ;所述的無機強堿為NaOH和/或KOH ;所述的無機強堿的水溶液中無機強堿的質量濃度為0.1%~20% ;所述的無機強酸為鹽酸、硫酸和硝酸中的一種或多種。
5.如權利要求4所述的提純方法，其特征在于:步驟I)中，所述的無機強堿的水溶液中無機強堿的質量濃度為0.1%~10%。
6.如權利要求1所述的提純方法，其特征在于:步驟I)中，用無機強酸調(diào)節(jié)PH時，所調(diào)節(jié)的溶液的溫度為0-40°C。
7.如權利要求1所述的提純方法，其特征在于:步驟2)中，所述的將上清液用有機溶劑進行萃取中的有機溶劑為乙酸乙酯、二氯甲烷、三氯化碳和四氯化碳中的一種或多種。
8.如權利要求1所述的提純方法，其特征在于:步驟3)中，所述的硅膠柱層析中，所用的洗脫劑為乙醚-丙酮，或者二氯甲烷-甲醇；其中，洗脫條件為等梯度洗脫，所述的乙醚-丙酮中，乙醚和丙酮的體積比為10:0-0:10 ;所述的二氯甲烷-甲醇中，二氯甲烷和甲醇的體積比為100:0^0:1OOo
9.如權利要求1所述的提純方法，其特征在于:在步驟3)之后還包含下列步驟4): 步驟4):將步驟3)制得的天名精內(nèi)酯酮溶于低極性溶劑與高極性溶劑的混合溶液中，濃縮至無色晶體析出，即可；其中低極性溶劑為乙醚、己烷、環(huán)己烷、二氯甲烷或戊烷，高極性溶劑為丙酮、乙酸乙酯、氯仿、甲醇或乙醇。
10.如權利要求9所述的提純方法，其特征在于:步驟4)中，低極性溶劑與高極性溶劑的混合溶液為乙醚-丙酮混合溶液、環(huán)己烷-丙酮混合溶液，或者環(huán)己烷-乙酸乙酯混合溶液，所述的乙醚-丙酮混合溶液中，乙醚與丙酮的體積比為4: f 10:1 ;所述的環(huán)己烷-丙酮混合溶液中，環(huán)己烷與丙酮的體積比為4: f 10:1 ;所述的環(huán)己烷-乙酸乙酯混合溶液中，環(huán)己烷與乙酸乙酯的體積比為4: f 10:1。
【文檔編號】C07D307/93GK103788037SQ201210434466
【公開日】2014年5月14日 申請日期:2012年11月2日 優(yōu)先權日:2012年11月2日
【發(fā)明者】段金友, 崔國庭, 張阿敏, 張武霞, 母海缽, 張琳, 牛紅, 王清潔, 董冬旗 申請人:西北農(nóng)林科技大學