專利名稱：一種藍(lán)萼甲素的純化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，特別涉及一種藍(lán)萼甲素的純化方法。
背景技術(shù)：
藍(lán)萼甲素(glaucocalyxin A)為貝殼杉烯型的ニ職類化合物，CAS號(hào)79498-31-0，分子式C2tlH28O4,分子量332. 43，分子結(jié)構(gòu)
H3C CH3 藍(lán)萼香茶菜為唇形科香茶菜屬植物，又叫香茶菜、山蘇子、回菜花、倒根野蘇。以全草入藥，具有清熱、除濕、解毒之功效，用于感冒、咽喉腫痛、扁桃體炎、胃炎、肝炎、乳腺炎、癌癥(食道癌、賁門癌、肝癌、乳腺癌)?，F(xiàn)在研究發(fā)現(xiàn)藍(lán)萼香茶菜中含有大量ニ萜類成分，主要是藍(lán)萼甲素成分，具有顯著細(xì)胞毒活性。藍(lán)萼甲素的純化方法，一般采用有機(jī)試劑回流提取和硅膠柱分離相結(jié)合。如項(xiàng)昭保等人采用對(duì)藍(lán)萼香茶菜80%こ醇提取物的こ酸こ酯部分進(jìn)行色譜分離，分別為藍(lán)萼甲素、藍(lán)萼こ素等ニ萜類物質(zhì)。再如專利(申請(qǐng)?zhí)?01010264658. 5) “ー種藍(lán)萼甲素的提取方法”，該方法藍(lán)萼香茶菜地上部分并粉碎，在常壓下用75 80%こ醇水溶液回流提取2 3次，毎次回流提取2 3小吋，濃縮提取液中加入硅膠并攪拌均勻，進(jìn)行硅膠柱層析，無水こ醇重結(jié)晶，得藍(lán)萼甲素晶體。如上所述，現(xiàn)有純化藍(lán)萼甲素的方法存在著純化周期長(zhǎng)、收率低而且方法繁瑣。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有技術(shù)的不足和缺陷，提供一種藍(lán)萼甲素的純化方法，該方法高效、快速。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案
一種藍(lán)萼甲素的純化方法，其特征在于以藍(lán)萼香茶菜為原料，粉碎過2(Γ80目篩投入萃取釜，通入液態(tài)CO2和夾帶劑進(jìn)行超臨界萃取，所得萃取物，采用高速逆流色譜法純化，紫外檢測(cè)器在線監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)成分，回收試劑，干燥即得。所述的超臨界CO2萃取條件為萃取溫度為35 50°C、壓カ為25 30MPa、時(shí)間為2 4h，C02流量為2(T25L/h，以こ酸こ酯為夾帶劑，夾帶劑用量為原料量的f 3倍量，解析溫度50飛0で、壓カ5 lOMPa。所述的高速逆流色譜法純化為取正己烷、こ酸こ酷、甲醇、7jC,按Γ3: 3^10: Γ5: 3^8混合，充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜管做固定相，開轉(zhuǎn)主機(jī)，轉(zhuǎn)速70(Tl000rpm,同時(shí)泵入下相做固定相,建立動(dòng)態(tài)平衡后,流速調(diào)節(jié)為l 4ml/min,用流動(dòng)相溶解萃取物，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測(cè)器在線監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)成分。本發(fā)明的積極效果是方法采用超臨界CO2萃取和高速逆流色譜純化結(jié)合，是ー種 高效、快速、清潔無污染的純化方法，解決了硅膠柱分離收率低、操作復(fù)雜的的技術(shù)缺陷，又克服了制備液相處理量小的技術(shù)不足，適合高純度的藍(lán)萼甲素的制備。
具體實(shí)施例方式 實(shí)施例I:
萃取藍(lán)萼香茶菜全草粉碎，過60目篩，取500g投入萃取釜中，通入處于超臨界狀態(tài)的CO2進(jìn)行萃取，設(shè)定萃取釜參數(shù)萃取溫度35°C，壓カ為25MPa，通入CO2流量為20L/h，待萃取罐內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定后，通入こ酸こ酯作為夾帶劑，流量500ml/h，萃取3h，設(shè)置分離釜的溫度50°C、壓カ8MPa，解析得萃取物。純化取正己烷、こ酸こ酷、甲醇、水，按1:3:2:3混合，充分分層后，取上相注入滿高速逆流色譜管做固定相，開轉(zhuǎn)主機(jī)，轉(zhuǎn)速700rpm，同時(shí)泵入下相做固定相，建立動(dòng)態(tài)平衡后，流速調(diào)節(jié)為2ml/min，用流動(dòng)相溶解萃取物，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測(cè)器在線監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)成分，連續(xù)制備，流分回收試劑，得3. 5g，含量98. 5%。實(shí)施例2:
萃取藍(lán)萼香茶菜全草粉碎，過80目篩，取500g投入萃取釜中，通入處于超臨界狀態(tài)的CO2進(jìn)行萃取，設(shè)定萃取釜參數(shù)萃取溫度45°C，壓カ為30MPa，通入CO2流量為25L/h，待萃取罐內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定后，通入こ酸こ酯作為夾帶劑，流量500ml/h，萃取2h，設(shè)置分離釜的溫度60°C、壓カlOMPa，解析得萃取物。純化取正己烷、こ酸こ酷、甲醇、水，按2:5:4:5混合，充分分層后，取上相注入滿高速逆流色譜管做固定相，開轉(zhuǎn)主機(jī)，轉(zhuǎn)速800rpm，同時(shí)泵入下相做固定相，建立動(dòng)態(tài)平衡后，流速調(diào)節(jié)為3ml/min，用流動(dòng)相溶解萃取物，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測(cè)器在線監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)成分，連續(xù)制備，流分回收試劑，得4. lg，含量97. 1%。實(shí)施例3:
萃取藍(lán)萼香茶菜全草粉碎，過40目篩，取500g投入萃取釜中，通入處于超臨界狀態(tài)的CO2進(jìn)行萃取，設(shè)定萃取釜參數(shù)萃取溫度40°C，壓カ為27MPa，通入CO2流量為22L/h，待萃取罐內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定后，通入こ酸こ酯作為夾帶劑，流量400ml/h，萃取3h，設(shè)置分離釜的溫度55°C、壓カ7MPa，解析得萃取物。純化取正己烷、こ酸こ酷、甲醇、水，按3:10:5:7混合，充分分層后，取上相注入滿高速逆流色譜管做固定相，開轉(zhuǎn)主機(jī)，轉(zhuǎn)速lOOOrpm，同時(shí)泵入下相做固定相，建立動(dòng)態(tài)平衡后，流速調(diào)節(jié)為lml/min，用流動(dòng)相溶解萃取物，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測(cè)器在線監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)成分，連 續(xù)制備，流分回收試劑，得3. 8g，含量95. 9%。
權(quán)利要求
1.一種藍(lán)萼甲素的純化方法，其特征在于以藍(lán)萼香茶菜為原料，粉碎過2(T80目篩投入萃取釜，通入液態(tài)CO2和夾帶劑進(jìn)行超臨界萃取，所得萃取物，采用高速逆流色譜法純化，紫外檢測(cè)器在線監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)成分，回收試劑，干燥即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的藍(lán)萼甲素的純化方法，其特征在于所述的超臨界CO2萃取條件為萃取溫度為35 50°C、壓力為25 30MPa、時(shí)間為2 4h，CO2流量為20 25L/h，以乙酸乙酯為夾帶劑，夾帶劑用量為原料量的廣3倍量，解析溫度5(T60°C、壓力5 10MPa。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的藍(lán)萼甲素的純化方法，其特征在于所述的高速逆流色譜法純化為取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按廣3:3 10:1飛:3 8混合，充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜管做固定相，開轉(zhuǎn)主機(jī)，轉(zhuǎn)速70(Tl000rpm,同時(shí)泵入下相做固定相,建立動(dòng)態(tài)平衡后，流速調(diào)節(jié)為f4ml/min，用流動(dòng)相溶解萃取物，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測(cè)器在線監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)成分。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種藍(lán)萼甲素的純化方法。方法是以藍(lán)萼香茶菜為原料，粉碎過20～80目篩投入萃取釜，通入液態(tài)CO2和夾帶劑進(jìn)行超臨界萃取，所得萃取物，采用高速逆流色譜法純化，紫外檢測(cè)器在線監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)成分，回收試劑，干燥即得。本方法具有高效、快速、環(huán)保的優(yōu)點(diǎn)，可工業(yè)化推廣使用。
文檔編號(hào)C07C45/78GK102850201SQ20121035666
公開日2013年1月2日 申請(qǐng)日期2012年9月24日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月24日
發(fā)明者蘇劉花 申請(qǐng)人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司