專利名稱：一種制備高純度狼毒乙素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種化合物的提取和純化方法，特別涉及一種制備高純度狼毒乙素的方法。
背景技術(shù)：
狼毒乙素是狼毒藥材中主要的抗結(jié)核成份之一，在醇中易溶，在水中微溶。作為狼毒藥材的一種化學(xué)對照品，狼毒乙素的純度直接影響著藥品質(zhì)量控制的準(zhǔn)確性和可靠度。常規(guī)的狼毒乙素提取和純化操作，一般是先將狼毒大戟破碎，之后水煮，將水煮液過濾，濃縮，之后進(jìn)行醇提和硅膠柱層析。何南生等報道的“狼毒大戟化學(xué)對照品的研究”中采用的就是這種方法，其公開的方法具體為取狼毒大戟加水蒸煮2次，每次2 h， 合并煎液、濾過、濾液濃縮，低溫烘干、粉碎、加75%乙醇回流提取3次，每次3 h，合并醇提取液，濃縮成稠膏狀，拌入70 g硅膠，烘干，進(jìn)行硅膠柱層析，以石油醚丙酮(10:3)洗脫，9 12流份，得粗結(jié)晶，合并后經(jīng)數(shù)次層析分離，95%的乙醇重結(jié)晶，得到狼毒乙素含量為98%純品。本發(fā)明人根據(jù)其公開的方法操作，發(fā)現(xiàn)要獲得進(jìn)行4 5次硅膠柱層析，才能獲得純度在98%左右的狼毒乙素，提取效率在10 15%之間。此方法提取和純化過程操作復(fù)雜，狼毒乙素的得率也較低，有必要對現(xiàn)有方法進(jìn)行改進(jìn)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種高純度狼毒乙素的制備方法。本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是
一種制備高純度狼毒乙素的方法，包括如下步驟
1)將狼毒大戟粉碎，用乙醇回流提取，提取液過濾，得濾液；
2)將濾液濃縮，回收乙醇，得到稠膏；
3)在稠膏中加入5 10倍量的硅膠，混勻，烘干，以硅膠為載體進(jìn)行柱層析，用洗脫液洗脫并收集洗脫液；
4)將洗脫液濃縮，回收溶劑，得到狼毒乙素粗結(jié)晶；
5)將粗結(jié)晶用乙醇溶解，加入硅膠混勻，烘干，再進(jìn)行硅膠柱層析2 3次，得到狼毒乙素純品。優(yōu)選的，上述方法包括如下步驟
1)將狼毒大戟粉碎為20目的粗粉，用60 80%(v/v)的乙醇回流提取3次，每次2小時，提取液合并過濾，得濾液；
2)將濾液濃縮，回收乙醇，得到稠膏；
3)在稠膏中加入5 10倍量的硅膠，混勻，60°C烘干，以硅膠為載體進(jìn)行柱層析，用洗脫液洗脫并收集洗脫液，洗脫液為石油醚乙酸乙酯=10 4 (v/v)的混合液；
4)將收集的洗脫液濃縮，回收溶劑，得到狼毒乙素粗結(jié)晶；5)將粗結(jié)晶用5 10倍量濃度為60 80% (v/v)的こ醇溶解，加入5 10倍量的硅膠，60°C烘干，之后再按上述方法進(jìn)行硅膠柱層析2 3次，得到狼毒こ素純品。優(yōu)選的，上述方法中，回流提取使用的こ醇濃度為70%(v/v)，回流提取使用的こ醇的量為狼毒大戟質(zhì)量的10 15倍。特別的，得到狼毒こ素粗結(jié)晶后再次進(jìn)行3次硅膠柱層析。本發(fā)明的有益效果是
本發(fā)明方法，直接使用こ醇回流，大大減少了粗提物中的雜質(zhì)含量，有利于減少后續(xù)的純化工藝；采用石油醚こ酸こ酯=10 4 (v/v)的混合液進(jìn)行洗脫，洗脫效果好，僅需洗脫2 3次即可使狼毒こ素的純度達(dá)99%以上。本發(fā)明方法較何南生等公開的方法相比，提取純化成本可降低約20%，同時，可以大幅減少能耗，并使狼毒こ素的提取效率提高到30%以上。本發(fā)明方法制備得到的狼毒こ素純度高，在99%以上，特別適用于作為狼毒藥材及相關(guān)制劑結(jié)核靈片的含量測定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例，進(jìn)ー步說明本發(fā)明。實施例I
一種制備高純度狼毒こ素的方法，包括如下步驟
1)將狼毒大戟粉碎為20目的粗粉，用13倍量70%(v/v)的こ醇回流提取3次，毎次2小時，提取液合并過濾，得濾液；
2)將濾液濃縮，回收こ醇，得到密度為I.15 g/ml的稠膏；
3)在稠膏中加入7倍質(zhì)量的硅膠，混勻，60°C烘干，以硅膠為載體進(jìn)行柱層析，用洗脫液洗脫并收集洗脫液，洗脫液為石油醚こ酸こ酯=10 4 (v/v)的混合液；
4)將收集的洗脫液濃縮，回收溶劑，得到狼毒こ素粗結(jié)晶；
5)將粗結(jié)晶用7倍質(zhì)量濃度為70%(v/v)的こ醇溶解，加入7倍質(zhì)量的硅膠，60°C烘干，之后使用相同的洗脫液進(jìn)行硅膠柱層析3次，得到狼毒こ素純品。經(jīng)檢測,得到的狼毒こ素純品的純度為99. 5%,狼毒こ素的提取效率為32. 4%。實施例2
一種制備高純度狼毒こ素的方法，包括如下步驟
1)將狼毒大戟粉碎為20目的粗粉，用10倍量80%(v/v)的こ醇回流提取3次，毎次2小時，提取液合并過濾，得濾液；
2)將濾液濃縮，回收こ醇，得到密度為I.20 g/ml的稠膏；
3)在稠膏中加入10倍質(zhì)量的硅膠，混勻，60°C烘干，以硅膠為載體進(jìn)行柱層析，用洗脫液洗脫并收集洗脫液，洗脫液為石油醚こ酸こ酯=10 4 (v/v)的混合液；
4)將收集的洗脫液濃縮，回收溶劑，得到狼毒こ素粗結(jié)晶；
5)將粗結(jié)晶用5倍質(zhì)量濃度為70%(v/v)的こ醇溶解，加入10倍質(zhì)量的硅膠，60°C烘干，之后使用相同的洗脫液進(jìn)行硅膠柱層析2次，得到狼毒こ素純品。
經(jīng)檢測,得到的狼毒こ素純品的純度為99. 1%,狼毒こ素的提取效率為35. 0%。實施例3一種制備高純度狼毒こ素的方法，包括如下步驟
1)將狼毒大戟粉碎為20目的粗粉，用15倍量60%(v/v)的こ醇回流提取3次，毎次2小時，提取液合并過濾，得濾液；
2)將濾液濃縮，回收こ醇，得到密度為I.13 g/ml的稠膏；
3)在稠膏中加入5倍質(zhì)量的硅膠，混勻，60°C烘干，以硅膠為載體進(jìn)行柱層析，用洗脫液洗脫并收集洗脫液，洗脫液為石油醚こ酸こ酯=10 4 (v/v)的混合液；
4)將收集的洗脫液濃縮，回收溶劑，得到狼毒こ素粗結(jié)晶；
5)將粗結(jié)晶用5倍質(zhì)量濃度為70%(v/v)的こ醇溶解，加入5倍質(zhì)量的硅膠，60°C烘干，之后使用相同的洗脫液進(jìn)行硅膠柱層析3次，得到狼毒こ素純品。、經(jīng)檢測,得到的狼毒こ素純品的純度為99. 2%,狼毒こ素的提取效率為30. 2%。
權(quán)利要求
1.一種制備高純度狼毒こ素的方法，包括如下步驟 1)將狼毒大戟粉碎，用こ醇回流提取，提取液過濾，得濾液； 2)將濾液濃縮，回收こ醇，得到稠膏； 3)在稠膏中加入5 10倍量的硅膠，混勻，烘干，以硅膠為載體進(jìn)行柱層析，用洗脫液洗脫并收集洗脫液； 4)將洗脫液濃縮，回收溶劑，得到狼毒こ素粗結(jié)晶； 5)將粗結(jié)晶用こ醇溶解，加入硅膠混勻，烘干，再進(jìn)行硅膠柱層析2 3次，得到狼毒こ素純品。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種制備高純度狼毒こ素的方法，其特征在于所述方法包括如下步驟 1)將狼毒大戟粉碎為20目的粗粉，用60 80%(v/v)的こ醇回流提取3次，毎次2小時，提取液合并過濾，得濾液； 2)將濾液濃縮，回收こ醇，得到稠膏； 3)在稠膏中加入5 10倍量的硅膠，混勻，60°C烘干，以硅膠為載體進(jìn)行柱層析，用洗脫液洗脫并收集洗脫液，洗脫液為石油醚こ酸こ酷=10 4 (v/v)的混合液； 4)將收集的洗脫液濃縮，回收溶劑，得到狼毒こ素粗結(jié)晶； 5)將粗結(jié)晶用5 10倍量濃度為60 80%(v/v)的こ醇溶解，加入5 10倍量的硅膠，60°C烘干，之后再按上述方法進(jìn)行硅膠柱層析2 3次，得到狼毒こ素純品。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的ー種制備高純度狼毒こ素的方法，其特征在于回流提取使用的こ醇濃度為70% (v/v)。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的ー種制備高純度狼毒こ素的方法，其特征在于回流提取使用的こ醇的量為狼毒大戟質(zhì)量的10 15倍。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的ー種制備高純度狼毒こ素的方法，其特征在于得到狼毒こ素粗結(jié)晶后再次進(jìn)行3次硅膠柱層析。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種制備高純度狼毒乙素的方法，包括如下步驟將狼毒大戟粉碎，用乙醇回流提取，提取液過濾，得濾液；將濾液濃縮，回收乙醇，得到稠膏；在稠膏中加入5～10倍量的硅膠，混勻，烘干，以硅膠為載體進(jìn)行柱層析，用洗脫液洗脫并收集洗脫液；將洗脫液濃縮，回收溶劑，得到狼毒乙素粗結(jié)晶；將粗結(jié)晶用乙醇溶解，加入硅膠混勻，烘干，再進(jìn)行硅膠柱層析2～3次，得到狼毒乙素純品。本發(fā)明方法提取純化成本可降低約20%，同時，可以大幅減少能耗，并使狼毒乙素的提取效率提高到30%以上。制備得到的狼毒乙素純度在99%以上，特別適用于作為狼毒藥材及相關(guān)制劑結(jié)核靈片的含量測定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。
文檔編號C07D311/32GK102702157SQ201210163870
公開日2012年10月3日 申請日期2012年5月24日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月24日
發(fā)明者馮淡開, 康麗紅, 江志華, 鐘慧敏, 黃奇建, 黃聰燕 申請人:廣東恒健制藥有限公司