專利名稱：一種靶向抗癌轉(zhuǎn)移化學(xué)藥物padm及制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于化學(xué)藥物領(lǐng)域，本發(fā)明涉及一種靶向Cath印sin B (Cat B)抗癌轉(zhuǎn)移的化合物PADM(Ac-Phe-Lys-PABC-ADM · HCl)，同時(shí)涉及該靶向治療藥物的制備方法，還涉及其在治療胃癌腹膜轉(zhuǎn)移癌中的應(yīng)用，PADM在胃癌腹膜轉(zhuǎn)移癌裸鼠模型中能高效抑制腹膜轉(zhuǎn)移癌形成，并顯著降低毒副作用，具有開發(fā)成治療胃癌腹膜轉(zhuǎn)移癌及其它高表達(dá)Cat B惡性腫瘤藥物的應(yīng)用價(jià)值。
背景技術(shù)：
胃癌是最常見的全球性惡性腫瘤，尤其是發(fā)展中國(guó)家，在男性腫瘤患者中胃癌發(fā)生率和死亡率分列第二和第三，女性患者中發(fā)生和死亡率均列第四。在我國(guó)，胃癌死亡率位列各大腫瘤第三位。胃癌綜合防治與人民群眾的生命健康息息相關(guān)。早期胃癌可以通過根治性手術(shù)治療得要很好的治療。但在我國(guó)，由于缺少必要的早期篩查計(jì)劃，且公眾自我預(yù)防意識(shí)不足，約80%的胃癌患者在確診或手術(shù)探查時(shí)已經(jīng)發(fā)生重要臟器，尤其是腹腔內(nèi)種植轉(zhuǎn)移。傳統(tǒng)胃癌治療方法包括手術(shù)治療、局部放療、輔助化療等，這些方案在一定程度上能夠延長(zhǎng)患者生存期。但國(guó)際合作研究，包括INT-0116試驗(yàn)、 MAGIC試驗(yàn)以及ACTS-GC試驗(yàn)均表明，單純手術(shù)治療或手術(shù)聯(lián)合術(shù)前或術(shù)后放化療，不能夠控制腹腔內(nèi)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。MAGIC試驗(yàn)表明含有蒽環(huán)類抗癌藥物如阿霉素(AdriamycimADM)的化療方案對(duì)胃癌有效。阿霉素作為一種重要的傳統(tǒng)化療藥物，毒副作用嚴(yán)重，主要包括心臟毒性、骨髓抑制、肝臟毒性等，臨床應(yīng)用嚴(yán)重受限。國(guó)內(nèi)外大量研究表明組織蛋白酶B(Cath印sin B，Cat B)與胃癌等惡性實(shí)體瘤侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。Cat B具有以下主要特性，即主要分布于惡性腫瘤細(xì)胞胞漿及包膜表面，在腫瘤侵襲前鋒部位含量最高，而正常組織細(xì)胞表達(dá)水平極低或不表達(dá)，同時(shí)Cat B能夠特異酶解特定修飾肽段Wre-Lys。本發(fā)明即基于Cat B的特性，在ADM分子上合成添加一段Cat B特異酶解修飾基，形成新藥 PADM(Ac-Phe-Lys-PABC-ADM 'HCl)。PADM本身不具細(xì)胞殺傷能力，在外周血中穩(wěn)定，對(duì)正常或不表達(dá)Cat B細(xì)胞無(低)毒副作用；而在腫瘤組織尤其在腫瘤侵襲前鋒部位，大量高活性Cat B特異酶解修飾肽段釋放大量ADM分子；ADM被腫瘤細(xì)胞攝取，從而實(shí)現(xiàn)靶向殺傷腫瘤細(xì)胞的目的。通過化學(xué)合成修飾ADM分子形成PADM，其具有靶向作用于Cat B,發(fā)揮抗癌及癌轉(zhuǎn)移作用，有望改善胃癌患者生存質(zhì)量，控制復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，延長(zhǎng)患者生存期。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是在于提供了一種靶向作用于Cat B的抗癌轉(zhuǎn)移化學(xué)藥 PADM(Ac-Phe-Lys-PABC-ADM 'HCl)。PADM易于合成，在血液中穩(wěn)定存在，在腫瘤組織中能夠發(fā)揮高效殺傷腫瘤細(xì)胞并抗癌轉(zhuǎn)移，同時(shí)顯著降低毒副作用。PADM對(duì)高表達(dá)Cat B惡性腫瘤組織具有靶向殺傷作用，具備阿霉素高效抗癌功能，避免了阿霉素嚴(yán)重心臟毒性。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是在于提供了一種靶向抗癌轉(zhuǎn)移化學(xué)藥物PADM的制備方法。該方法操作方便易行，條件穩(wěn)定，易于生產(chǎn)和制備高純度PADM。操作方便，經(jīng)濟(jì)適用，具有很好的靶向抗癌能力。本發(fā)明的再一個(gè)目的是在于提供了一種靶向抗癌轉(zhuǎn)移化學(xué)藥物PADM在胃癌腹膜轉(zhuǎn)移癌治療中的用途，PADM在胃癌腹膜轉(zhuǎn)移癌裸鼠模型中能高效抑制腹膜轉(zhuǎn)移癌形成，與傳統(tǒng)阿霉素相比，顯著降低毒副作用。為了實(shí)現(xiàn)上述的目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)措施一種靶向抗癌轉(zhuǎn)移化學(xué)藥物PADM，其具體分子式為C52H59N5O16. HC1，其具體結(jié)構(gòu)為 Ac-Phe-Lys-PABC-ADM · HCl，經(jīng)過純化分析得到高純度PADM鹽酸鹽。結(jié)構(gòu)為
權(quán)利要求
1. 一種靶向抗癌轉(zhuǎn)移化學(xué)藥物PADM，其分子式為C52H59N5016.HC1，結(jié)構(gòu)為
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種靶向抗癌轉(zhuǎn)移化學(xué)藥物PADM，其特征在于，所述的結(jié)構(gòu)式為Ac-Wie-Lys-PABC。
3.權(quán)利要求1所述的一種靶向抗癌轉(zhuǎn)移化學(xué)藥物PADM的制備方法。其步驟是(1) Fmoc-Lys芴甲氧羰基-賴氨酸在500ml三頸反應(yīng)瓶中加入Fmoc-Lys鹽酸鹽、無水二氯甲烷、二異丙基乙胺和三甲基氯硅烷，將此混合物加熱至80°C回流并保持1小時(shí)，然后將混合物冷卻至4°C，爾后加入二異丙基乙胺31ml，3. Ieq和4_甲氧基三苯甲基氯18. 29g, 1. 05eq，將反應(yīng)混合物在25°C下攪拌15小時(shí)，溶劑蒸發(fā)后，將殘留物用pH = 5緩沖溶液、7』C 和鹽水洗滌3次，然后用硫酸納干燥、過濾，蒸發(fā)后得到淺黃色粉末狀產(chǎn)品；O) Lys賴氨酸在250ml圓底三頸反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入第一步的中間體Fmoc-Lys (MMT)、二氯甲烷和乙腈，然后再加入二乙胺，反應(yīng)混合物在25°C下攪拌2小時(shí)，蒸餾除去溶劑，殘留物用熱乙腈洗滌，然后加入特丁基甲醚處理，固體產(chǎn)物用二氯甲烷和甲醇溶解1 1得到一混合溶液；(3)Ac-Phe-Lys乙?；?苯丙胺酰基-賴氨酸在一個(gè)250ml的三頸圓底燒瓶?jī)?nèi)加入水和1，2- 二甲氧基乙烷，于氮?dú)獗Ｗo(hù)下加入上一步反應(yīng)產(chǎn)物L(fēng)ys和氫氧化鋰，然后在攪拌中加入Ac-Phe-OSu溶液70ml 1，2- 二甲氧基乙烷，反應(yīng)混合物攪拌4小時(shí)成為一均相溶液，反應(yīng)進(jìn)行到18小時(shí)后，蒸發(fā)至干，殘留物用乙酸乙酯提取，用pH = 4緩沖溶液洗滌，再用水和鹽水洗滌，干燥濃縮后產(chǎn)生淺黃色固體產(chǎn)物；(4)Ac-Phe-Lys-PABOH乙酰基-苯丙胺?；?賴氨基-對(duì)氨基苯甲醇在一個(gè)250ml三頸圓底燒瓶中加入Ac-Phe-Lys、二氯甲烷和特丁基二碳酸酯，于氮?dú)獗Ｗo(hù)下再加入吡啶，反應(yīng)混合物在25°C下攪拌15分鐘后，加入對(duì)氨基苯甲醇，反應(yīng)混合物在25°C下攪拌18小時(shí)后，蒸發(fā)溶劑至干，殘留物在高真空下干燥后，用特丁基甲醚處理，固體產(chǎn)物用特丁基甲醚連續(xù)洗滌5次；(5)Ac-Phe-Lys-PAB-PNP乙?；?苯丙胺?；?賴氨基-對(duì)氨基苯甲氧基-對(duì)硝基苯碳酸酯在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，往一個(gè)250ml三頸圓底燒瓶中加入Ac-Phe-Lys-PABOH、二對(duì)硝基苯碳酸酯和新鮮分子篩，爾后在25°C下再加入二氯甲烷和二異丙基乙胺，反應(yīng)混合物在25°C 下攪拌18小時(shí)，爾后過濾除去固體雜質(zhì)，濾液蒸干后于高真空下干燥6小時(shí)，粗產(chǎn)品經(jīng)重結(jié)晶進(jìn)一步純化，固體產(chǎn)物經(jīng)過濾，洗滌；(6)Ac-Phe-Lys-PABC-ADM乙?；?苯丙胺?；?賴氨基-對(duì)氨基芐氧羰基-阿霉素 在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，往一個(gè)250ml三頸圓底燒瓶?jī)?nèi)加入Ac-Phe-Lys (MMT)-PABC-PNP、阿霉素鹽酸鹽、二甲基甲酰胺、二異丙基乙胺，反應(yīng)混合物在25°C下攪拌4 后，在加入400ml乙酸乙酯，有機(jī)相用水洗滌4次，然后蒸發(fā)至干，粗產(chǎn)品經(jīng)層析柱純化二氯甲烷甲醇為20 1 到15 1，得到桔黃色固體產(chǎn)品；(7)Ac-Phe-Lys-PABC-ADM -HCl乙?；?苯丙胺?；?賴氨基-對(duì)氨基芐氧羰基-阿霉素鹽酸鹽在氮?dú)獗Ｗo(hù)下往一個(gè)250ml三頸圓底燒瓶中加入1. 89g Ac-Phe-Lys-PABC_ADM、 茴香醚和二氯甲烷，反應(yīng)混合物在25°C下攪拌中加入二氯醋酸，反應(yīng)混合物在攪拌2小時(shí)后倒入乙酸乙酯中，然后在攪拌2小時(shí)，所得桔黃色固體經(jīng)過濾后再用乙酸乙酯洗滌5次， 固體粗產(chǎn)品溶解在甲醇中，所得溶液經(jīng)過離子交換樹脂住，所含產(chǎn)品組分離后蒸發(fā)至干，殘留物經(jīng)二氯甲烷處理后經(jīng)過濾得到最終產(chǎn)品。
4.權(quán)利要求1所述的一種靶向抗癌轉(zhuǎn)移化學(xué)藥物PADM在制備治療或預(yù)防胃癌腹膜轉(zhuǎn)移癌藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種靶向抗癌轉(zhuǎn)移化學(xué)藥物PADM及制備方法和用途，其具體結(jié)構(gòu)為Ac-Phe-Lys-PABC-ADM·HCl，經(jīng)過純化分析得到高純度PADM鹽酸鹽。步驟是(1)Fmoc-Lys(MMT)，(2)Lys(MMT)，(3)Ac-Phe-Lys(MMT)，(4)Ac-Phe-Lys(MMT)-PABOH，(5)Ac-Phe-Lys(MMT)-PAB-PNP，(6)Ac-Phe-Lys(MMT)-PABC-ADM，(7)Ac-Phe-Lys-PABC-ADM·HCl，殘留物經(jīng)二氯甲烷處理后經(jīng)過濾得到最終產(chǎn)品。一種靶向抗癌轉(zhuǎn)移化學(xué)藥物PADM在制備治療或預(yù)防胃癌腹膜轉(zhuǎn)移癌藥物中的應(yīng)用。簡(jiǎn)單易行，工藝穩(wěn)定，產(chǎn)率比較高，PADM具有高效抗癌功能。
文檔編號(hào)C07K1/18GK102504013SQ20111030092
公開日2012年6月20日 申請(qǐng)日期2011年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月28日
發(fā)明者李雁, 洪亞平, 瑞蒙德.費(fèi)斯通, 邵麗華 申請(qǐng)人:李雁