用于治療病毒感染和異常細胞增殖的修飾核苷類化合物的制作方法

專利名稱：用于治療病毒感染和異常細胞增殖的修飾核苷類化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明包括用于治療黃病毒科(Flaviviridae)、正粘病毒科 (Orthomyxoviridae)、副粘病毒科(Paramyxoviridae)感染和異常細胞增殖的化合物和方法。本申請要求下列美國臨時申請的優(yōu)先權(quán)其中一件申請?zhí)枮?0/241，488，于2000 年10月18日提交；另一件申請?zhí)枮?0/282，156，于2001年4月6日提交。
背景技術(shù)：
黃病毒科黃病毒科是一組正單鏈RNA病毒，其基因組大小為9-15kb。它們是約40-50nm的 有包膜病毒。國際病毒分類學(xué)委員會給出了黃病毒科分類的概述。黃病毒科由3個屬組成。1.昔病毒屬.該屬包括登革熱病毒群(登革熱病毒、1型登革熱病毒、2型登革熱 病毒、3型登革熱病毒、4型登革熱病毒)、日本腦炎病毒群(Alfuy病毒、日本腦炎病毒a、 Kookaburra病毒、Koutango病毒、Kunjin病毒、澳洲墨萊溪谷(Murray Valley)腦炎病毒、 圣路易斯腦炎病毒、Stratford病毒、Usutu病毒、西尼羅河病毒)、Modoc病毒群、Rio Bravo 病毒群(Apoi病毒、Rio Brovo病毒、Saboya病毒)、恩塔亞病毒群、蜱傳腦炎群(蜱傳腦炎 病毒)、Tyuleniy病毒群、烏干達S病毒群和黃熱病病毒群。除了這些主要群以外，還有某 些未分類的其他黃病毒。2. Hepaciviruses.該屬僅含有一類病毒，即丙型肝炎病毒(HCV)，其由多種分枝、 型和亞型組成。3.瘟病毒屬.該屬包括牛病毒性腹瀉病毒_2 (BVDV-2)、1型瘟病毒(包括BVDV)、 2型瘟病毒(包括豬霍亂病毒)和3型瘟病毒(包括Border病病毒)。人類中最重要的黃病毒科病毒感染之一是由丙型肝炎病毒(HCV)引起的。這是病 毒性肝炎的第二號主要原因，據(jù)估計全球有一億七千萬攜帶者(世界衛(wèi)生組織；丙型肝炎 全球流行，WeeklyEpidemiological Record，1997，72，341)，其中在美國有三百九十萬(疾 病控制中心；未公布的數(shù)據(jù)，http://www. cdc. gov/ncidod/diseases/hepatitis/heptab3. htm)0黃病毒科病毒的基因組結(jié)構(gòu)具有很多共有特征。丙型肝炎病毒(HCV)基因組經(jīng) 常被用作模型。HCV是小的有包膜的病毒，在核殼內(nèi)具有、.6kb的正單鏈RNA基因組。該 基因組含有一個開放讀框(0RF)，其編碼剛好3000個以上氨基酸的多蛋白，該蛋白裂解以 產(chǎn)生成熟的結(jié)構(gòu)和非結(jié)構(gòu)病毒蛋白。0RF的旁側(cè)是長度為幾百個核苷酸的5'和3'未翻 譯區(qū)域(NTRs)，該區(qū)域?qū)τ赗NA翻譯和復(fù)制很重要。翻譯的多蛋白含有結(jié)構(gòu)核(C)和在 N-末端的包膜蛋白(El、E2、p7)，之后是非結(jié)構(gòu)蛋白(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A、NS5B)。 成熟的結(jié)構(gòu)蛋白是通過被宿主信號肽酶裂解而產(chǎn)生的(參見Hijikata，M.等人.Proc.Nat. Acad. Sci.，USA,1991,88, 5547 ；Hussy, P.等人.Virology,1996,224,93 ；Lin, C.等 人 T. Virol. , 1994，68，5063 ；Mizushima, H 等人 T. Virol.，1994，68，2731 ；Mizushima, H.等人.T. Virol.，1994,68,6215 ； Santolini, E.等人.T. Virol. , 1994,68, 3631 :Selby, M. J.等人.Virology, 1994,204,114 禾口 Grakoui,A.等人.Proc. Nat. Acad. Sci. ,USA, 1993, 90,10538)。NS2與NS3之間的連接被NS2/NS3蛋白酶自催化地裂解(參見Hijikata， M.等人..T.Virol. , 1993,67,4665 和 Bartenschlager, R.等人..T.Virol.，1994，68，5045)， 而剩余的4個連接被與NS4A復(fù)合的NS3的N-末端絲氨酸蛋白酶域裂解(參見Failla， C.等人.T. Virol.，1994，68，3753 ；Lin, C.等人.T. Virol. , 1994,68,8147 :Tanii, Y.等 人.T. Virol.，1995,69,1575 和 Tai, C. L.等人 丄 Virol.，1996，70，8477)。 NS3 蛋白還 含有NTP-依賴性解旋酶活性，其在復(fù)制期間解開雙螺旋RNA。NS5B蛋白具有RNA-依賴性 RNA 聚合酶(RDRP)活性(參見Behrens，S. E.等人.EMB0 T.，1996，15，12 ；Lohmann,V.等 人.T. Virol. , 1997，71，8416-8428 和 Lohmann，V.等人.Virology, 1998，249，108)，這是病 毒復(fù)制所必需的(Ferrari，E.等人..T.Virol.，1999，73，1649)。在此需要強調(diào)的是，與HBV 或HIV不同，沒有DNA參與HCV的復(fù)制。最近，用鳥苷5'-—磷酸(GMP)、5' - 二磷酸(⑶P)、 5'-三磷酸(GTP)以及2'-脫氧和2' ,3' - 二脫氧鳥苷的5'-三磷酸(分別是dGTP 和ddGTP)進行了使用NS5B-HCV-RDRP的底物特異性的體外實驗。該作者聲稱，HCV-RDRP對 核糖核苷5'-三磷酸有嚴(yán)格的特異性，并需要2'-和3' -0H基團(Lohmarm Virology， 108)。他們的實驗表明，存在2'-和3'-取代基是核苷5'-三磷酸與HCV-RDRP相互作 用以及起底物或抑制劑作用的必要條件。已經(jīng)鑒定出的具有抗丙型肝炎黃病毒活性的抗病毒劑的實例包括1.干擾素和利巴韋林(Battaglia, A.M.等人.Ann. Pharmacother. 2000,34,487 ； Berenguer, M. ^A.Antivir. Ther. 1998，3 (Suppl. 3)，125)；2.基于底物的NS3蛋白酶抑制劑(Attwood等人.PCT W0 98/22496，1998 ； Attwood ^ A ■ Antiviral Chemistry and Chemotherapy 1999, 10,259 ；Attwood 等人.德 國專利公開DE 19914474 ；Tung等人 PCT W098/17679)，包括a -酮基酰胺類和胼基脲類， 以及末端是親電體例如硼酸或膦酸酯的抑制劑(Llinas Brimet等人.PCT W0 99/07734)；3.非基于底物的抑制劑例如2，4，6_三羥基-3-硝基-苯甲酰胺衍生物(Sudo K.等人 ，Biochemical and Biophysical ResearchCommunications,1997，238，643 禾口 Sudo K.等人.Antiviral Chemistryand Chemotherapy 1998，9，186)，包括 RD3-4082 和 RD3-4078，前者在酰胺上被具有14個碳的鏈取代，后者具有對苯氧基苯基；4.在用NS3/4A融合蛋白和NS5A/5B底物進行的反相HPLC測定中表現(xiàn)出相關(guān)抑制 作用的噻唑烷衍生物(Sudo K.等人，Antiviral Researchl996，32，9)，尤其是具有被長燒 基鏈取代的稠合肉桂酰基部分的化合物RD-1-6250、RD4 6205和RD4 6193 ；5.在 Kakiuchi N 等人.J. EBS Letters 421,217 和 Takeshita Ni 等 人.Analytical Biochemistry 1997，247，242中確定的噻唑烷類化合物和苯甲酰基苯胺化 合物；6.在SDS-PAGE和放射自顯影測定中具有抗HCV蛋白酶活性的從鏈霉菌屬發(fā)酵培 養(yǎng)肉湯中分離出來的菲醌化合物Sch 68631 (Chu M.等人.Tetrahedron Letters 1996，37， 7229)，和在閃爍親近測定中表現(xiàn)出活性的從真菌Penicillium griscofuluum中分離出來
22的 Sch 351633 (Chu Μ.等人· ,Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters 9，1949)；7.基于大分子elgin c的從水蛭中分離出來的選擇性NS3抑制劑(Qasim Μ. A.等 A· Biochemistry 1997，36，1598)；8. HCV 解旋酶抑制劑(Diana G. D.等人.，U. S.專利 5，633，358 和 DianaG. D.等 人.PCT WO 97/36554)；9. HCV聚合酶抑制劑例如核苷酸類似物、膠霉毒素(Ferrari R.等人.Tournal of Virology 1999，73，1649)和天然產(chǎn)物淺藍菌素(LohmannV.等人· Virology 1998,249, 108)；10.與下列序列互補的反義硫代磷酸寡脫氧核苷酸(S-ODN)至少一部分HCV的序 列(Anderson等人.U. S.專利6，174，868)，特別是在5'非編碼區(qū)域(NCR)中延伸的序列 (Alt Μ.等人.Heoatology 1995，22，707)，或包含NCR的3 ‘末端的核苷酸326-348和位 于 HCV RNA 的核編碼區(qū)域中的核苷酸 371-388 (Alt Μ.等人.Archives of Virologyl997, 142，589 和 Galderisi U.等人.，Tournal of Cellular Physiologyl999,81 :2151)；11. IRES-依賴性翻譯抑制劑(Ikeda N等人·日本專利公開JP-08268890 ；Kai Y.等人·日本專利公開JP-10101591)；12.核酸酶-抗性核酶(Maccjak D. J.等人.，Hepatology 1999,30, abstract 995)；13.金剛烷胺例如金剛乙胺(Smith, Abstract from Annual Meeting oftheAmerican Gastoenterological Association and AASLD,1996)；14.喹諾酮類例如氧氟沙星、環(huán)丙沙星和左氟沙星(AASLD Abstracts, Hepatology, Oct. 1994, Program Issue, 20(4), pt. 2, abstractno. 293)；15.核苷類似物(Ismaili 等人.WO 01/60315 ；Storer WO 01/32153)，包括 2'-脫氧-L-核苷(Watanabe 等人.WO 01/34618)和 1_( β-L-呋喃核糖基)_1，2，4_ 三 唑-3-甲酰胺(levovirin ) (Tam WO 01/46212)；和16.其它各種化合物，包括1-氨基-烷基環(huán)己烷(Gold等人.U. S.專利 6，034，134)、烷基脂類(Chojkier等人.U. S.專利5，922，757)、維生素E和其它抗氧 化劑(Chojkier等人.U. S.專利5，922，757)、角鯊烯、膽汁酸(Ozeki等人.U. S.專利 5，846，964)、N-(膦?；阴；?-L-天冬氨酸(Diana等人.U. S.專利5，830，905)、苯二 甲酰胺類(Diana等人.U. S.專利5，633，388)、多聚腺苷酸衍生物(Wang等人.U. S.專 利 5，496，546)、2'，3' -二脫氧肌苷(Yarchoan 等人.U. S.專利 5，026，687)、苯并咪唑 類(Colacino 等人· U. S.專利 5，891，874)、葡糖胺類(Mueller 等人· WO 01/08672)、取代 的-1,5-亞氨基-D-山梨醇化合物(Mueller等人· WO 00/47198)。ιΗ粘病毒科正粘病毒科是一組分節(jié)段的負單鏈RNA病毒，其基因組大小為10-13. 6kb。它們是 約80-120nm的有包膜病毒。國際病毒分類學(xué)委員會給出了正粘病毒科分類的概述。正粘 病毒科由3個屬組成，這3個屬是根據(jù)其核殼(NP)與基質(zhì)蛋白(M)之間的抗原差異來劃分 的。1.甲型流感病毒屬和乙型流感病毒屬.該屬包括分別含有8個不同的RNA片段的 甲型流感病毒和乙型流感病毒。乙型流感病毒在其表面糖蛋白中表現(xiàn)出很小的變異性，并僅感染人類。另一方面，甲型流感病毒在其表面糖蛋白中有很大的變異性，并且可根據(jù)其血 凝素(HA)和神經(jīng)酰胺酶(NA)糖蛋白的抗原性將它們分為亞型，其感染人以及豬、馬、海豹、 家禽、鴨子和多種其它種類的鳥。2.丙型流感病毒屬.該屬僅包括一類病毒一丙型流感病毒，其只包含7個不同的 RNA片段。丙型流感病毒僅具有一個多功能糖蛋白，并且主要感染人類，但是在中國也從豬 中分離出了該病毒。3. 丁型流感病毒屬.該屬包括丁型流感病毒，其僅是蜱傳病毒，在結(jié)構(gòu)和基因方 面與甲型、乙型和丙型流感病毒類似。人類中最重要的正粘病毒科病毒感染之一是由甲型流感病毒引起的。這些病毒是 高度觸染性的，并引起急性呼吸道疾病，從很早以前就由于流行而給人類社會帶來了很大 災(zāi)難。關(guān)于甲型流感流行病的一個最早記錄可追溯到公元前412年的希波克拉底。這些流 行病相當(dāng)頻繁，并且對于老年人經(jīng)常是致命的，然而，這些流行病非常不可預(yù)測。這些病毒 是獨特的呼吸道病毒，因為它們經(jīng)歷顯著的抗原變異。血凝素(HA)和神經(jīng)酰胺酶(NA)糖 蛋白都能夠發(fā)生抗原漂移和轉(zhuǎn)變。有14種已知的血凝素(H1-H14)糖蛋白和9種已知的神 經(jīng)酰胺酶(N1-N9)糖蛋白。例如，因為最早的人流感病毒是在1933年分離出來的，所以大 部分抗原轉(zhuǎn)變已發(fā)生了。在1957年，H2N2亞型(亞洲流感)代替了 Hmi亞型(西班牙流 感)。目前，流感的主要亞型是在1977年重新出現(xiàn)的Hmi和在1968年重新出現(xiàn)的H3N2。已經(jīng)用甲型流感病毒進行了針對流感病毒基因表達和RNA復(fù)制的大量研究。甲型 流感病毒顆粒的最顯著特征是有一層從脂質(zhì)包膜向外輻射的約500個刺突(10-14nm)。這 些刺突有兩種類型棒形的HA刺突和蘑菇型的NA刺突。HA與NA的比例不定，但是通常為 4-5 1。每個基因片段編碼其各自的蛋白，除了第7個片段編碼風(fēng)和禮，第8個片段編碼 NS:和NS2。每個vRNA的在3'-末端的前12個核苷酸和在5'-末端的前13個核苷酸在 所有8個RNA片段中都存在。具有其確定的核苷酸序列的第一個基因是HA。從那時以來， 已經(jīng)確定了所有14種已知的HA抗原亞型和在這些亞型內(nèi)的許多變種。在感染細胞中，vRNA都轉(zhuǎn)錄成mRNA并復(fù)制。mRNA的合成是不同的，因為RNA是以 源自新合成的宿主細胞RNA聚合酶II轉(zhuǎn)錄物的5'加帽的片段作為引物。mRNA鏈延長直 至尿苷殘基長度達到在vRNA 5'-末端前面的15-22個核苷酸，在此處轉(zhuǎn)錄末端和聚腺苷 酸被加到mRNAs中。為了開始復(fù)制，需要導(dǎo)致生成vRNA的全長拷貝的另一種轉(zhuǎn)錄。在mRNA 合成期間，全長轉(zhuǎn)錄不用引物即可開始，并且在聚(A)位點不終止。復(fù)制的第二步是將模板 RNA拷貝成vRNA。該合成也不用引物即可開始，這是因為vRNA含有5'-三磷?；┒?。 所有這三類病毒特異性RNA—mRNA、模板RNA和vRNA—都是在細胞核中合成的。已經(jīng)鑒定出的具有抗甲型流感病毒活性的抗病毒劑的實例包括1.放線菌素D(Barry，R. D.等人.“脫氧核糖核酸參與流感病毒增殖”Nature， 1962，194，1139-1140)；2.金剛烷胺(Van Voris,L. P.等人.“用于化學(xué)預(yù)防和治療流感的抗病毒劑”Semin Respir Infect，1992，7，61-70)；3. 4-氨基-或4-胍基-2-脫氧_2，3_ 二去氫_D_N_酰神經(jīng)氨酸_4_氨基-或 4-胍基-Neu 5 Ac2en(von Itzstein, M.等人.“流感病毒復(fù)制的基于唾液酸酶的有效抑 制劑的合理設(shè)計” Nature, 1993，363，418-423)；
24
4.利巴韋林(Van Voris,L. P.等人.“用于化學(xué)預(yù)防和治療流感的抗病毒劑”Semin Respir Infect,1992,7,61-70)；5.干擾素(Came，P.E.等人.“干擾素引起的合成聚合物的抗病毒活件"Proc Soc Exp Biol Med, 1969，131,443-446 ；Gerone, P. J.等人.“用合成雙鏈核糖核酸的氣霧劑抑 制小鼠的呼吸道病毒感染” Infect Immun, 1971,3,323-327 ；Takano, K.等人.“小鼠流感 中的被動干擾素保護” T Infect Pis, 1991，164，969-972)；6.滅活的甲型和乙型流感病毒疫苗(“流感疫苗的臨床研究-1978”Rev Infect Pis, 1983, 5, 721-764 ；Galasso, G. T.等人.“流感疫苗的臨床研究-1976” T Infect Pis, 1977，136 (suppl)，S341-S746 Jennings, R.等人.“志愿者對滅活的流感病毒疫苗的反 應(yīng)，，T Hyr, 1981，86，1-16 ；Kilbourne, E. D. “滅活的流感疫苗” In :Plothin SA, Mortimer EA, eds. Vaccines Philadelphia :Saunders, 1988,420-434 ；Meyer, H. M. , Jr.等人.“現(xiàn)有 流感疫苗綜沭”Am T ClinPathol, 1978,70,146-152 ；“每周死亡率和發(fā)病率報告.預(yù)防和控 制流感第 I 部分，疫苗 Recommendations of the Advisory Committeeon Immunication Practices (ACIP) ” MMWR, 1993,42 (RR-6), 1-14 :Palache, A.M.等人.“用不同劑量的疫苗 進行流感免疫接種后的抗體反應(yīng)在老年療養(yǎng)院和年輕志愿者中進行的雙盲、安慰劑對照、 多中心、劑量反應(yīng)實驗”Vaccine, 1993，11,3-9 ；Potter, C. ff. “滅活的流感病毒疫苗” In Beare AS, ed. Basic and applied influezaresearch, Boca Raton, FL :CRC Press, 1982, 119-158)。副粘病毒科副粘病毒科是一組負單鏈RNA病毒，其基因組大小為16_20kb。它們是約 150-300nm的有包膜病毒。國際病毒分類學(xué)委員會給出了副粘病毒科分類的概述。副粘病 毒科由2個亞科組成。1.副粘病毒亞科.該亞科含有3個屬a)副粘病毒屬.該屬的代表是仙臺病毒，并包括人副流感病毒1和3 ；b)腮腺炎病毒屬.該屬的代表是流行性腮腺炎病毒、猴病毒5、新城病病毒和人副 流感病毒2和4 ；c)麻瘡病毒屬.該屬的代表是麻瘡病毒和2.肺病毒亞科.該亞科編碼比其它亞科多的mRNA(10種，其它亞科是6種或7 種)，并且僅包括一個屬a)肺病毒屬.該屬的最典型代表是呼吸道合胞體病毒(RSV)，但是也包括牛 RSV(BRSV)、綿羊RSV(0RSC)、山羊RSV(CRSV)、小鼠肺炎病毒(PVM)和火雞鼻氣管炎病毒 (TRTV)。人類中最主要的正粘病毒科病毒感染之一是由呼吸道合胞體病毒(RSV)引起的。 RSV是世界范圍內(nèi)嬰兒和兒童中病毒性下呼吸道疾病的最主要原因。在大部分地區(qū)，RSV比 所有其它微生物病原體都更值得關(guān)注，因為它是不滿一歲的嬰兒發(fā)生肺炎和細支氣管炎的 原因。還已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，RSV感染是免疫抑制成人和老年人的重要致病體。此外，BRSV已經(jīng)在牛 中表現(xiàn)出給經(jīng)濟帶來嚴(yán)重損失的疾病?；蚪MRSV RNA的3'-末端由一個44-核苷酸基因外前導(dǎo)區(qū)構(gòu)成，據(jù)假設(shè)該前 導(dǎo)區(qū)包含主要的病毒啟動子。該前導(dǎo)區(qū)后面是10個病毒基因，之后是一個155-核苷酸基因外尾隨區(qū)。88%的基因組RNA通過0RF形成10種主要蛋白。每個基因都由保守的9-核 苷酸基因開始信號開始。對于每個基因，轉(zhuǎn)錄都是在該信號的第一個核苷酸上開始的。每 個基因都以指導(dǎo)轉(zhuǎn)錄終止和多腺苷酸化的半保守的12至13核苷酸基因末端信號終止。前 9個基因是未重疊的，并且通過大小為1-52個核苷酸的基因間區(qū)域隔開?；蜷g區(qū)域不含 任何保守序列基序或任何明顯的二級結(jié)構(gòu)特征。最后兩個RSV基因通過68個核苷酸重疊。 因此，一個基因開始信號位于另一個基因內(nèi)部，而不是在另一個基因后面。已經(jīng)鑒定出的具有抗RSV活性的抗病毒劑的實例包括1.利巴韋林(Hruska，J. F.等人.“通過利巴韋林在體內(nèi)抑制呼吸道合胞體病 毒” Antimicrob Agents Chemother, 1982, 21,125-130)；禾口2.純化的人靜脈內(nèi)IgG-IVIG(Prince，G. A.等人.“在棉大鼠呼吸道合胞體病毒 感染的實驗免疫治療中局部施用的中和件抗體的有效件” T Virol, 1987,61,1851-1954 ； Prince, G. A.等人.“免疫預(yù)防和免疫治療棉大鼠中的呼吸道合胞體病毒感染” Infect Immun,1982，42，81—87)。異常細胞增殖在多細胞生物體中，細胞的分化、生長、功能和死亡是由復(fù)雜的機制網(wǎng)絡(luò)在分子水 平上調(diào)控的。在健康的動物或人中，這些機制讓細胞進行其設(shè)計的功能，然后以程序化速度死亡。異常細胞增殖，尤其是過度增殖可由于多種因素所致，包括基因突變、感染、暴露 于毒素、自身免疫性障礙和良性或惡性腫瘤誘導(dǎo)。有多種與細胞過度增殖有關(guān)的皮膚病癥。例如，牛皮癬是人皮膚的良性疾病，其特 征一般是被增厚的鱗屑覆蓋的斑。該疾病是由未知原因的表皮細胞增殖增加引起的。在正 常細胞中，細胞從基礎(chǔ)層移動到上顆粒層所需的時間大約是5周。在牛皮癬中，該時間僅為 6-9天，部分原因是增殖的細胞數(shù)目增加以及分裂的細胞所占的比例增加(G. Grove，Int. J. Dermatol. 18 :111，1979)。在美國，大約2 %的人患有牛皮癬，在美國白人中該比例大約 是3%，在美國黑人中該比例大約是1%，而在美國土著人當(dāng)中很少有人患該疾病。慢性濕 疹也與嚴(yán)重的表皮過度增殖有關(guān)。由皮膚細胞過度增殖引起的其它疾病包括特應(yīng)性皮炎、 扁平苔癬、疣、尋常天皰瘡、光化性角化病、基底細胞癌和鱗狀細胞癌。其它過度增殖性細胞病癥包括血管增殖病癥、纖維變性病癥、自身免疫性病癥、移 植物對宿主排斥、腫瘤和癌癥。血管增殖性病癥包括血管生成和血管發(fā)生病癥。在血管組織的斑塊發(fā)展過程中的 平滑肌細胞增殖引起例如再狹窄、視網(wǎng)膜病和動脈粥樣硬化。嚴(yán)重的動脈粥樣硬化損傷是 由于對動脈壁的內(nèi)皮和平滑肌的損傷的過度炎性增殖性反應(yīng)所致(Ross，R. Nature, 1993， 362 :801-809)。細胞遷移和細胞增殖都在動脈粥樣硬化損傷的形成中起作用。纖維變性病癥經(jīng)常是由于細胞外基質(zhì)的異常形成所致。纖維變性病癥的實例包括 肝臟硬化和腎小球系膜增殖性細胞病癥。肝臟硬化的特征是細胞外基質(zhì)組分增加，從而導(dǎo) 致形成肝臟瘢痕。肝臟硬化可引起疾病例如肝硬化。導(dǎo)致肝臟瘢痕的細胞外基質(zhì)增加還可 能由病毒感染例如肝炎引起。脂細胞似乎在肝臟硬化中起主要作用。腎小球系膜病癥是由腎小球系膜細胞的異常增殖引起的。腎小球系膜過度增殖性 細胞病癥包括各種人腎疾病例如腎小球性腎炎、糖尿病性腎病、惡性腎硬化、血栓形成性微
26血管病綜合征、移植排斥和腎小球病。增殖性成分的另一種疾病是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎一般被認為是自身 免疫性疾病，據(jù)信其與自反應(yīng)性T細胞的活性有關(guān)(參見例如Harris，E. D.，Jr.，The New England Journal of Medicine，1990，322 :1277_1289)，以及由產(chǎn)生的抗膠原和 IgE 的自身 抗體引起?？砂ó惓＜毎鲋吵煞值钠渌“Y包括貝赫切特病、急性呼吸窘迫綜合征 (ARDS)、缺血性心臟病、透析后綜合征、白血病、獲得性免疫缺陷綜合征、結(jié)節(jié)性脈管炎、脂 性組織細胞增多癥、膿毒性休克和一般的炎癥。也稱為新生物的腫瘤是其中細胞增殖失控且進行性的組織新生長。良性腫瘤是沒 有侵襲和轉(zhuǎn)移性質(zhì)的腫瘤，并且通常環(huán)繞著纖維性被膜。惡性腫瘤(即癌癥)是既能侵襲 又能轉(zhuǎn)移的腫瘤。與良性腫瘤相比，惡性腫瘤還表現(xiàn)出更大程度的退行發(fā)育(即失去細胞 分化及其彼此之間和對其軸構(gòu)架組織的定向)。每年大約1200萬美國人被診斷為癌癥患者，其中8000位患者為兒童。此外，僅在 美國每年就有500000人死于癌癥。前列腺癌和肺癌是男性死亡的頭號原因，而乳腺癌和肺 癌是女性死亡的頭號原因。據(jù)估計，在美國，涉及癌癥的花費占疾病治療總花費的大約10% (CNN. Cancer. Factshttp//www. cnn. com/HEALTH/9511/conquer_cancer/facts/index, html, page 2 of 2, July 18，1999)。增殖性病癥目前是用各類化合物進行治療，包括烷化劑、抗代謝物、天然產(chǎn)物、酶、 生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑、各種其它治療劑、放療藥物(例如標(biāo)記在激素或抗體上的Y-90)、激素和 拮抗劑例如下面列出的那些。烷化劑氮芥類氮芥(霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤)、環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺(急性和慢性 淋巴細胞白血病、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、成神經(jīng)細胞瘤、乳腺癌、卵巢 癌、肺癌、維爾姆斯瘤、子宮頸、睪丸、軟組織肉瘤)、馬法蘭(L-苯丙氨酸氮芥)(多發(fā)性骨髓 瘤、乳腺癌、卵巢癌)、瘤可寧(慢性淋巴細胞白血病、原發(fā)性巨球蛋白血癥、霍奇金病、非霍 奇金淋巴瘤)。乙烯亞胺類和甲基蜜胺類六甲蜜胺(卵巢癌)、噻替哌(膀胱癌、乳腺癌、卵巢 癌)O烷基磺酸酯類白消安(慢性粒細胞性白血病)。亞硝基脲卡氮芥(BCNU)(霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、原發(fā)性腦腫瘤、多發(fā)性骨 髓瘤、惡性黑素瘤)、羅氮芥(CCNU)(霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、原發(fā)性腦腫瘤、小細胞肺 癌)、甲環(huán)亞硝脲(甲基-CCNU)(原發(fā)性腦腫瘤、胃癌、結(jié)腸癌)、鏈脲霉素(STR)(惡性胰腺 胰島瘤、惡性類癌瘤(carcinoin))。三氮烯屬達卡巴嗪(DTIC;二甲基三氮烯基咪唑甲酰胺)(惡性黑素瘤、霍奇金 病、軟組織肉瘤)?？勾x物葉酸類似物甲氨蝶呤(氨甲蝶呤)(急性淋巴細胞白血病、絨膜癌、蕈樣真菌病、 乳腺癌、頭頸癌、肺癌、骨原性肉瘤)。嘧啶類似物氟尿嘧啶(5-氟尿嘧啶；5-FU)、氟尿苷(氟脫氧尿苷；FUdR)(乳腺
27癌、結(jié)腸癌、胃癌、胰腺癌、卵巢癌、頭頸癌、泌尿膀胱癌、惡化惡習(xí)前皮膚損害)(局部)、阿 糖胞苷(阿糖胞苷)(急性粒細胞和急性淋巴細胞白血病)。嘌呤類似物和相關(guān)抑制劑巰基嘌呤(6-巰基嘌呤；6-MP)(急性淋巴細胞白血病、 急性粒細胞白血病和慢性粒細胞白血病)、硫鳥嘌呤(6-硫鳥嘌呤；TG)(急性粒細胞白血 病、急性淋巴細胞白血病和慢性粒細胞白血病)、噴司他丁(2' -deoxycyoformycin)(多毛 細胞白血病、蕈樣真菌病、慢性淋巴細胞白血病)。長春花屬生物堿長春花堿(VLB)(霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、乳腺癌、睪丸癌)、 長春新堿(急性淋巴細胞白血病、成神經(jīng)細胞瘤、維爾姆斯瘤、橫紋肌肉瘤、霍奇金病、非霍 奇金淋巴瘤、小細胞肺癌)。表鬼臼毒素依托泊苷(睪丸癌、小細胞肺癌和其它肺癌、乳腺癌、霍奇金病、非霍 奇金淋巴瘤、急性粒細胞白血病、卡波西肉瘤)、替尼泊苷(睪丸癌、小細胞肺癌和其它肺 癌、乳腺癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、急性粒細胞白血病、卡波西肉瘤)。天然產(chǎn)物抗生素更生霉素(放線菌素D)(絨膜癌、維爾姆斯瘤、橫紋肌肉瘤、睪丸癌、卡波 西肉瘤)、柔紅霉素(道諾霉素；正定霉素)(急性粒細胞白血病和急性淋巴細胞白血病)、 阿霉素(軟組織肉瘤、骨原性肉瘤骨原性肉瘤和其它肉瘤；霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、急 性白血病、乳腺癌、泌尿生殖器癌、甲狀腺癌、肺癌、胃癌、成神經(jīng)細胞瘤)、博萊霉素(睪丸 癌、頭頸癌、皮膚和食道癌、肺癌和泌尿生殖道癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤)、普卡霉素 (光輝霉素)(睪丸癌、惡性高鈣血)、絲裂霉素(自力霉素C)(胃癌、子宮頸癌、結(jié)腸癌、乳 腺癌、胰腺癌、膀胱癌、頭頸癌)。酶L_天冬酰胺酶(急性淋巴細胞白血病)。生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑a-干擾素(多毛細胞白血病、卡波西肉瘤、黑素瘤、類癌瘤、 腎細胞癌、卵巢癌、膀胱癌、非霍奇金淋巴瘤、蕈樣真菌病，多發(fā)性骨髓瘤、慢性粒細胞白血 病)。各種其它治療劑鉬配位絡(luò)合物順鉬(順式-DDP)、卡鉬(睪丸癌、卵巢癌、膀胱癌、頭頸癌、肺癌、 甲狀腺癌、子宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、成神經(jīng)細胞瘤、骨原性肉瘤)。蒽二酮類Mixtozantrone (急性粒細胞白血病、乳腺癌)。取代的脲類羥基脲(慢性粒細胞白血病、紅細胞增多癥、特發(fā)性血小板增多癥、 惡性黑素瘤)。甲基胼衍生物丙卡巴胼(N-甲基胼，MIH)(霍奇金病)。腎上腺皮質(zhì)抑制劑米托坦(o，p' -DDD)(腎上腺皮層癌)、氨魯米特(乳腺癌)。腎上腺類皮質(zhì)激素類強的松(急性和慢性淋巴細胞白血病、非霍奇金淋巴瘤、霍 奇金病、乳腺癌)。孕激素類己酸羥孕酮、乙酸甲羥孕酮、乙酸甲地孕酮(子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌)。抗血管生成劑Angiostatin、Endostatin。激素和拮抗劑雌激素類己烯雌酚、乙炔雌二醇(乳腺癌、前列腺癌)。
抗雌激素類他莫昔芬(乳腺癌)。雄激素類丙酸睪酮、氟甲睪酮(乳腺癌)?？剐奂に仡惙?前列腺癌)。促性腺素釋放激素類似物亮丙瑞林(前列腺癌)。與治療包括癌癥在內(nèi)的異常增殖性細胞有關(guān)的毒性部分是由于藥物在疾病和正 常細胞之間缺乏選擇性。為了克服該限制，現(xiàn)在正在探索增加治療增殖性病癥的藥物的特 異性并由此減小藥物毒性的治療策略。一種正在積極研究的策略是藥物靶向作用。從這些疾病的嚴(yán)重性以及它們在包括人在內(nèi)的動物中的流行來看，本發(fā)明的目的 是提供用于治療感染任何上述病毒，包括黃病毒或瘟病毒、流感病毒或呼吸道合胞體病毒 (“RSV”)的宿主，包括動物和尤其是人的化合物、方法和組合物。本發(fā)明的另一個目的是提供用于治療患有異常細胞增殖的宿主，包括動物和尤其 是人的方法和組合物。本發(fā)明的另一個目的是提供用于治療感染丙型肝炎病毒或BVDV的宿主，包括動 物和尤其是人的方法和組合物。本發(fā)明的另一個目的是提供用于治療感染流感病毒的宿主，包括動物和尤其是人 的方法和組合物。本發(fā)明的另一個目的是提供用于治療感染RSV的宿主，包括動物和尤其是人的方 法和組合物。本發(fā)明的另一個目的是提供用于治療患有腫瘤，包括惡性腫瘤的宿主，包括動物 和尤其是人的方法和組合物。本發(fā)明的另一個目的是提供定量測定宿主，包括動物、尤其是人中的病毒負載量， 特別是BVDV或HCV負載量的更有效方法。發(fā)明概述本發(fā)明提供了用于治療感染屬于黃病毒科、正粘病毒科和副粘病毒科的病毒的宿 主的式(I)-(XXIII)所示的0-D或0-L核苷或其可藥用鹽或前藥?；蛘?，本發(fā)明0-D或 3-L核苷(I)-(XXIII)或其可藥用鹽或前藥可用于治療異常細胞增殖。具體來說，本發(fā)明還包括治療或預(yù)防下列病癥的方法(a)黃病毒科病毒感染，包括所有Ifepacivirus屬(HCV)、瘟病毒屬(BVDV、CSFV、 BDV)或黃病毒屬(登革熱病毒、日本腦炎病毒群(包括西尼羅河病毒)和黃熱病病毒)病 毒感染；(b)正粘病毒科病毒感染，包括所有甲型流感病毒屬和乙型流感病毒屬，特別是甲 型流感病毒和所有相關(guān)亞型，包括Hmi和H3N2以及乙型流感病毒感染；(c)副粘病毒科病毒感染，包括呼吸道合胞體病毒(RSV)感染；和(d)異常細胞增殖，包括惡性腫瘤。在一個實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(I)或(II)的3-D核苷 或其可藥用鹽或前藥，其中每個D是氫、烷基、?；?、一磷酸、二磷酸、三磷酸、一磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯、 磷脂或氨基酸；每個W1和W2獨立地為CH或N ；每個X1 和 X2 獨立地為氫、鹵素(F、CI、Br 或 I)、NH2、NHR4、NR4R4 ‘、NH0R4、 NR4NR4 ‘ R4 〃、OH、OR4、SH 或 SR4 ；每個Y1 是 0、S 或 Se;每個Z是012或冊；每個R1和R1 ‘獨立地為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級炔基、芳基、烷基芳基、鹵 素爾、(1、81~或1)、朋2、朋1 5、殿51 5'、NHOR5、NR5NHR5'、NR5NR5' R5〃、OH、OR5、SH、SR5、NO2、 no、ch2oh、ch2or5、co2h、co2r5、conh2、conhr5、conr5r5 '或 CN ;每個R2 和 R2'獨立地為氫或鹵素(F、CI、Br 或 I)、OH、SH、0CH3、SCH3、NH2、NHCH3、 CH = CH2、CN、CH2NH2、CH20H、C02H ；每個R3 和 R3'獨立地為氫或鹵素(F、CI、Br 或 I)、OH、SH、0CH3、SCH3、NH2、NHCH3、 CH3、C2H5、CH = CH2、CN、CH2NH2、CH20H、C02H ；每個R4、R4'、R4"、R5、R5'和R5"獨立地為氫、低級烷基、低級鏈烯基、芳基或芳基 烷基例如未取代或取代的苯基或芐基；條件是對于每個通式⑴或(II)的核苷，R2和R2'當(dāng)中至少有一個是氫，且R3 和R3'當(dāng)中至少有一個是氫。在另一個本發(fā)明實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(IIII)或(IV) 的3 "L核苷 或其可藥用鹽或前藥，其中每個口、^1、^2]1、^、？1、？、! 1、! 1'、R2、R2'、R3和 R3'的定義同前，條件是對于每個通式(III)或(IV)核苷，R2和R2'當(dāng)中至少有一個是氫，且R3 和R3'當(dāng)中至少有一個是氫。在一個本發(fā)明實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(V)-(VII)的 3 -D-carba-糖核苷
或其可藥用鹽或前藥，其中
每個口、^1、^2、^、^、？1、？、! 1、!^、R2、R2'、R3 和 R3'的定義同前，
條件是對于每個通式(V)或(VI)核苷，R2和R2'當(dāng)中至少有一個是氫，且R3和
R3'當(dāng)中至少有一個是氫。在一個實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(VIII)-(X)的 3 -L-carba-糖核苷或其可藥用鹽或前藥，其中
每個口、^1、^2、^、^、？1、？、! 1、!^、R2、R2'、R3 和 R3'的定義同前，
條件是對于每個通式(VIII)或(IX)核苷，R2和R2'當(dāng)中至少有一個是氫，且R3
和R3'當(dāng)中至少有一個是氫。在另一個本發(fā)明實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L-核苷分別是通 式(XI)或(XII)核苷
的定義同前，[Xll-b]或其可藥用鹽或前藥，其中每個口、^1、^2]1]2、？1、？、! 1、! 1'、R2、R2'、R3禾口 R3每個Z1和Z2獨立地為0、S、CH2、NR6或Se ；每個R6是氫、低級烷基或低級酰基。在另一個本發(fā)明實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L-核苷，盡管優(yōu) 選B-D-核苷，是通式(XIII)核苷
的定義同前； 或其可藥用鹽或前藥，其中每個D、! 1、! 1'、R2、R2'、妒和妒每個Y2 是 0、S、NH 或 NR7 ；每個Y3 是 0、S、NH 或 NR8 ；每個X3是OR9或SR9 ；且每個R7、R8和R9是氫、CrC6低級烷基、芳基烷基或芳基；條件是對于每個通式(XIII-d)核苷，R2和R2'當(dāng)中至少有-且R3和R3 ‘當(dāng)中至少有一個是氫。
34
卜是氧，
或其可藥用鹽或前藥，其中
、rtR3'的定義同前,
在一個實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(XVI)的0-D或3-L在另一個實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的化合物是0-D或0-L-核苷，優(yōu)選 B-D-核苷，所述核苷是這樣獲得的將小分子例如次氯酸烷基酯、次溴酸烷基酯、次溴酸或 酰鹵加成到合適的嘧啶核苷上以形成式(XIV)核苷或其可藥用鹽或前藥，其中每個0、父1、￥1、21、1 1、1 2、1 2'、鏟和鏟'的定義同前，每個L1是氫、C1或Br ；每個L2 是 OH、0CH3、0C2H5、0C3H7、0CF3、OAc 或 OBz ；每個Z3可以是0或CH2。在另一個實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(XV) 二聚核苷(每個核 苷呈0 -D或0 -L構(gòu)型)，其中這兩個核苷是通過二硫鍵連接的
C-核苷
35 或其可藥用鹽或前藥，其中^^D,ff\X\X2,Y\Z,R\R2,R2'每個W3獨立地為N、CH或CR1 ；每個W4和W5獨立地為N、CH、CX1或CR1 ‘；且每個t和Z5獨立地為NH或C ( = Y1)；條件是如果Z4和Z5是通過共價鍵結(jié)合的，則當(dāng)Z5是C( = Y1)時，Z4不是C(= Y1)；并且環(huán)氮原子不超過3個。在一個實施方案中，抗病
或抗增殖有效的核苷是通式(XVII)的3-D或
3-L-支鏈糖核苷 或其可藥用鹽或前藥，其中每個0、妒、12、父1、父2、丫1、23、1 1、1 1'、R2、R2'、R3和 R3'的定義同前；每個X4 和 X5 獨立地為氫、鹵素(F、CI、Br 或 I)、N3、NH2、NHR8、NR8R8'、OH、OR8、SH 或SR8;且每個R8和R8'獨立地為氫、低級烷基、低級鏈烯基、芳基或芳基烷基例如未取代或 取代的苯基或芐基；條件是對于每個通式(XVII-a)或(XVII-b)核苷，X4不是0H或OR8。在一個實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(XVIII)的a-D或 a -L-核苷 或其可藥用鹽或前藥，其中
每個D、w’、w’、X‘、X’、Y’、R’、R真’ 、R一、R一’ 、R’和R’’ 的定義同前。
在一個本發(fā)明子實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的p—D或p—L核苷是式(X工X)核苷
或其可藥用鹽或前藥，其中
每個D、R’、R‘和R‘’的定義同上；
每個R信是氫、鹵素(F、Cl、Br或工)或。P‘；
每個P’是氫、低級烷基、低級鏈烯基、芳基、芳基烷基(例如未取代或取代的苯基或芐基)、。H、。R‘、N幾、NHR‘或NR‘R“ ；和每個P’和P’獨立地為氫、烷基、酰基、一MS、一TS、一磷酸、二磷酸、三磷酸、一磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯、磷脂或氨基酸，優(yōu)選為氫。
在一個本發(fā)明特別的子實施方案中，式(X工X)所示抗病毒或抗增殖有效的p—D或p—L核苷女口下
或其可藥用鹽或前藥，其中每個D和P2的定義同前。在優(yōu)選的實施方案中，D和P2獨立地為氫。在另一個本發(fā)明子實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L核苷是式 (XX)核苷 或其可藥用鹽或前藥，其中每個口、？1、？2、？3、! 1、! 4、! 4'和R9 的定義同前。在另一個本發(fā)明子實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L核苷是式 (XXI)核苷 或其可藥用鹽或前藥，其中每個口、？1、？2、？3、! 1、! 4*!^的定義同前。在一個本發(fā)明特別的子實施方案中，式(XXI)所示抗病毒或抗增殖有效的0 -D或 3 -L核苷如下 或其可藥用鹽或前藥，其中每個D、P2和P3的定義同前。在優(yōu)選的實施方案中，D、P2和P3獨立地為氫。在另一個本發(fā)明子實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的3-D或0-L核苷是式 (XXII)核苷 或其可藥用鹽或前藥，其中每個D、pi和R1的定義同前。在優(yōu)選的實施方案中，D和P2獨立地為氫。在一個本發(fā)明特別的子實施方案中，式(XXII)所示抗病毒或抗增殖有效的3-D 或日-L核苷，優(yōu)選0 -L核苷如下 或其可藥用鹽或前藥，其中D的定義同前，且優(yōu)選為H。在另一個本發(fā)明子實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L核苷是式 (XXIII)核苷 或其可藥用鹽或前藥，其中每個口、？1、？2、？3、! 1、! 4*!^的定義同前。在一個本發(fā)明特別的子實施方案中，式(XXIII)所示抗病毒或抗增殖有效的3 -D 或3 -L核苷如下 或其可藥用鹽或前藥，其中每個D、P2和P3的定義同前。在優(yōu)選的實施方案中，D、P2和P3獨立地為氫。在一個實施方案中，當(dāng)在合適的基于細胞的測定中測試時，本發(fā)明核苷的EC5(I(達 到50%病毒抑制的有效濃度)小于15 u M，更特別地，小于10或5 y M。在優(yōu)選的實施方案 中，核苷是對映體富集的。本發(fā)明還包括至少下述特征(a)如本文所述的式⑴-(XXIII)的3 _D核苷或3 _L核苷或其可藥用鹽或前藥 在醫(yī)療中的應(yīng)用，即作為抗病毒或抗腫瘤/抗癌劑的應(yīng)用，例如在治療或預(yù)防黃病毒科病 毒感染，包括丙型肝炎病毒感染中的應(yīng)用；(b)如本文所述的式⑴-(XXIII)的3 -D核苷或3 -L核苷或其可藥用鹽或前藥 在制備用于治療黃病毒科病毒感染，包括丙型肝炎病毒感染的藥物中的應(yīng)用；(c)藥物組合物，其中包含抗病毒有效量的如本文所述的式(I)-(XXIII)的3-D 核苷或3-L核苷或其可藥用鹽或前藥和依據(jù)本發(fā)明的可藥用載體或稀釋劑；(d)藥物組合物，其中包括如本文所述的式⑴-(XXIII)的3 -D核苷或3 -L核苷 或其可藥用鹽或前藥與一種或多種其它能有效抗病毒的活性劑；和(e)制備如本文所述的式(I)-(XXIII)的0 _D核苷或0 _L核苷及其可藥用鹽和 前藥的方法。本文所述的化合物的活性和毒性可依據(jù)任何已知方法評價。下文提供了使用實時 聚合酶鏈反應(yīng)(“RT-PCR”)來定量測定宿主中病毒負載量的一種有效方法。該方法包括使用可雜交到靶病毒DNA或RNA上的猝滅熒光探針分子。經(jīng)過核酸外切降解，可監(jiān)測可檢測 的熒光信號。使用該技術(shù)，通過監(jiān)測熒光信號的存在可實時探測RT-PCR擴增的DNA或RNA。本說明書描述了 (a)如本文所述的使用RT-PCR實時定量測定病毒負載量的方法；(b)如本文所述的使用RT-PCR實時定量測定宿主中黃病毒科病毒，包括宿主中 BVDV和HCV的病毒負載量的方法；(c)如本文所述的使用RT-PCR實時定量測定MDBK細胞系或宿主樣本中BVDV的病
毒負載量的方法；(d)如本文所述的設(shè)計成經(jīng)過核酸外切降解發(fā)出熒光并與BVDV NADLNS5B區(qū)域互 補的探針分子；和(e)探針分子，所述探針分子具有序列 5' -6-fam-AAATCCTCCTAACAAGCGGGTTCCAG G-tamara-3‘ (Sequence ID No 1)，和引物，所述引物具有正義序列5' -AGCCTTCAGTTTCT TGCTGATGT-3‘ (Sequence ID No 2)和反義序列5, -TGTTGCGAMGCACCMCAG-3‘ (Sequen ce ID No 3)；(f)如本文所述的使用RT-PCR實時定量測定宿主衍生樣本或細胞系中HCV的病毒 負載量的方法；(g)如本文所述的設(shè)計成經(jīng)過核酸外切降解發(fā)出熒光并與HCV 5'-未編碼區(qū)域 互補的探針分子；和(h)如本文所述的設(shè)計成經(jīng)過核酸外切降解發(fā)出熒光并與HCV編碼區(qū)域互補的探 針分子；和(i)如本文所述的設(shè)計成經(jīng)過核酸外切降解發(fā)出熒光并與HCV 3'-未編碼區(qū)域 互補的探針分子；和(j)探針分子，所述探針分子具有序列 5' -6-fam-CCTCCAGGACCCCCCCTCCC-tamar a-3' (Sequence ID No 4)，和引物，所述引物具有正義序列5‘ -AGCCATGGCGTTAGTA(T/C) GAGTGT-3‘ (Sequence ID No 5)和反義序列5' -TTCCGCAGACCACTATGG-3‘ (Sequence ID No 6)。附圖概述附

圖1表示的是，如實施例51所述，在細胞培養(yǎng)物中用增加濃度的牛病毒性腹瀉 病毒(“BVDV”)使得噬斑形成單位增多。附圖1表明，實施例51的方法提供了 BVDV的可 靠定量測定，其中檢測靈敏度為4倍病毒的log PFU/mL。附圖2表示的是，如實施例52所述，決定最佳收獲時間(感染后小時數(shù)對噬斑形 成單位(“PFU”)的log)，即感染后22小時的MDBK細胞中的BVDV復(fù)制周期，最佳收獲時 間大體上相當(dāng)于其中所產(chǎn)生的病毒量等于接種到細胞內(nèi)的病毒量的一個復(fù)制周期。附圖3是一個柱形圖表，其表明的是如實施例40所述的一些抗BVDV的測試化合 物抑制噬斑形成單位數(shù)目的能力。附圖4是一個柱形圖表，其表明的是可通過聯(lián)合施用天然核苷，即胞嘧啶核苷和 尿嘧啶核苷來防止“carba-糖”核苷在CEM細胞(人T-細胞淋巴瘤)和SUDHL-1細胞(人 退行發(fā)育性T-細胞淋巴瘤細胞系)中的細胞毒性。附圖5提供了本發(fā)明核苷的各個非限制性實例以及在本發(fā)明中用作比較實例的
42已知核苷利巴韋林的結(jié)構(gòu)。發(fā)明詳述本發(fā)明提供了用于治療感染屬于黃病毒科、正粘病毒科、或副粘病毒科病毒的宿 主的通式(I)-(XXIII)核苷或其可藥用鹽或前藥?；蛘?，本發(fā)明通式(I)-(XXIII)核苷或 其可藥用鹽或前藥可用于治療異常細胞增殖。在一個實施方案中，本發(fā)明提供了使用抗病毒劑或抗增殖劑的治療或預(yù)防方法， 例如治療或預(yù)防病毒感染，包括黃病毒科病毒感染，包括丙型肝炎病毒感染，流感病毒感 染，包括甲型流感病毒(例如Hmi和H3N2)與乙型流感病毒和RSV感染，以及異常細胞增 殖的方法，包括施用抗病毒或抗增殖有效量的本發(fā)明核苷或其可藥用鹽或前藥。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了使用抗病毒劑或抗增殖劑的治療或預(yù)防方 法，例如治療或預(yù)防黃病毒科病毒感染的方法，包括在用于治療的藥物的制備中施用抗病 毒量的本發(fā)明核苷或其可藥用鹽或前藥。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了使用抗病毒劑或抗增殖劑的治療或預(yù)防方 法，例如治療或預(yù)防流感病毒感染的方法，包括在治療藥物的制備中施用抗病毒有效量的 本發(fā)明核苷或其可藥用鹽或前藥。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了使用抗病毒劑或抗增殖劑的治療或預(yù)防方 法，例如治療或預(yù)防RSV感染的方法，包括在治療藥物的制備中施用抗病毒有效量的本發(fā) 明核苷或其可藥用鹽或前藥。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了使用抗病毒劑或抗增殖劑的治療或預(yù)防方 法，例如治療或預(yù)防其特征是異常細胞增殖的疾病的方法，包括施用抗增殖有效量的本發(fā) 明核苷。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了一種本文所述的化合物在制備用于治療病毒 感染或異常細胞增殖的藥物中的應(yīng)用。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了一種本文所述的化合物在治療表現(xiàn)出病毒感 染或異常細胞增殖的宿主中的應(yīng)用。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了藥物組合物，其中包括抗病毒或抗增殖有效 量的本發(fā)明核苷或其可藥用鹽或前藥和依據(jù)本發(fā)明的可藥用載體或稀釋劑。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了藥物組合物，其中包含本發(fā)明核苷或其可藥 用鹽或前藥與一種或多種其它能有效抗病毒或抗增殖的活性劑。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了制備本發(fā)明核苷及其可藥用鹽和前藥的方 法。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了治療患有與病毒有關(guān)的病癥的哺乳動物的方 法，包括給所述哺乳動物施用藥物有效量的本發(fā)明核苷或其可藥用鹽或前藥。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了治療患有與異常細胞增殖有關(guān)的病癥的哺乳 動物的方法，包括給所述哺乳動物施用藥物有效量的本發(fā)明核苷或其可藥用鹽或前藥。本發(fā)明特別包括在治療或預(yù)防下述疾病的方法中的所述化合物，或所述化合物在 治療或預(yù)防下述疾病中的應(yīng)用，或所述化合物在制備用于治療或預(yù)防下述疾病的藥物中的 應(yīng)用(a)黃病毒科病毒感染，包括所有Ifepacivirus屬(HCV)、瘟病毒屬(BVDV、CSFV、BDV)或黃病毒屬(登革熱病毒、日本腦炎病毒群(包括西尼羅河病毒)和黃熱病病毒)病 毒感染；(b)正粘病毒科病毒感染，包括所有甲型流感病毒屬和乙型流感病毒屬，特別是甲 型流感病毒和所有相關(guān)亞型，包括Hmi和H3N2以及乙型流感病毒感染；(c)副粘病毒科病毒感染，包括呼吸道合胞體病毒(RSV)感染；和(d)異常細胞增殖，包括惡性腫瘤。I.本發(fā)明化合物在一個實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(I)或(II)的3-D核苷 或其可藥用鹽或前藥，其中每個D是氫、烷基、?；⒁涣姿?、二磷酸、三磷酸、一磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯、 磷脂或氨基酸，優(yōu)選為氫；每個W1和W2獨立地為CH或N ；每個X1 和 X2 獨立地為氫、鹵素(F、CI、Br 或 I)、NH2、NHR4、NR4R4 ‘、NH0R4、 NR4NR4 ‘ R4 〃、OH、OR4、SH 或 SR4 ；每個Y1 是 0、S 或 Se ；每個Z 是 CH2 或 NH ；每個R1和R1 ‘獨立地為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級炔基、芳基、烷基芳基、鹵 素爾、(1、81~或1)、朋2、朋1 5、殿51 5'、NHOR5、NR5NHR5'、NR5NR5' R5〃、oh、OR5、SH、SR5、NO2、 no、ch2oh、ch2or5、co2h、co2r5、conh2、conhr5、conr5r5 '或 CN ;每個R2 和 R2'獨立地為氫或鹵素(F、CI、Br 或 I)、OH、SH、0CH3、SCH3、NH2、NHCH3、CH = CH2、CN、CH2NH2、CH20H、C02H ；每個R3 和 R3'獨立地為氫或鹵素(F、CI、Br 或 I)、OH、SH、0CH3、SCH3、NH2、NHCH3、 CH3、C2H5、CH = CH2、CN、CH2NH2、CH20H、C02H ；每個R4、R4'、R4"、R5、R5'和R5"獨立地為氫、低級烷基、低級鏈烯基、芳基或芳基 烷基例如未取代或取代的苯基或芐基；條件是對于每個通式⑴或(II)核苷，R2和R2'當(dāng)中至少有一個是氫，且R3和 R3'當(dāng)中至少有一個是氫。在另一個本發(fā)明實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(IIII)或(IV) 的3 "L核苷
的定義同前，
當(dāng)中至少有一個是氫，且R3或其可藥用鹽或前藥，其中每個口、^1、^2]1]2、？1、？、! 1、! 1'、R2、R2'、R3禾口 R3條件是對于每個通式(III)或(IV)核苷，R2和R2' 和R3'當(dāng)中至少有一個是氫。在一個本發(fā)明實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(V)-(VII)的 3 -D-carba-糖核苷 或其可藥用鹽或前藥，其中每個0、妒、12、父1、父2、丫1、2、1 1、1 1'、R2、R2'、R3和 R3'的定義同前，條件是對于每個通式(VIII)或(IX)核苷，R2和R2'當(dāng)中至少有一個是氫，且R3 和R3'當(dāng)中至少有一個是氫。在另一個本發(fā)明實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L-核苷分別是通 式(XI)或(XII)核苷
Y'^^N 、R
N^V^ 人
W1
X" N
"N
R2八 R_
？1
IR 叼 :R2界
47[XII-c]
、RlPR3'的定義同前，[XII-b]或其可藥用鹽或前藥，其中每個口、^1、^2]1]2、？1、？、! 1、! 1'、R2、]每個Z1和Z2獨立地為0、S、NR6或Se ；每個R6是氫、低級烷基或低級?；?。在另一個本發(fā)明實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L-核苷，優(yōu)選 B-D-核苷是通式(XIII)核苷
的定義同前；
或其可藥用鹽或前藥，其中 每個 D、! 1、! 1'、R2、R2'、鏟和鏟' 每個Y2是0、S、NH或NR7 ； 每個Y3是0、S、NH或NR8 ； 每個X3是OR9或SR9;且
每個R7、R8和R9是氫、CrC6低級烷基、芳基烷基或芳基； 條件是對于每個通式(XIII-d)核苷，R2和R2'當(dāng)中至少有-
卜是氫，且R3和R3
當(dāng)中至少有一個是氫。
48
在另一個實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的化合物是0-D或0-L-核苷，優(yōu)選 B-D-核苷，所述核苷是這樣獲得的將小分子例如次氯酸烷基酯、次溴酸烷基酯、次溴酸或 酰鹵加成到合適的嘧啶核苷上以形成式(XIV)核苷 或其可藥用鹽或前藥，其中每個0、父1、￥1、21、1 1、1 2、1 2'、鏟和鏟'的定義同上，每個L1是氫、C1或Br ；每個L2 是 OH、0CH3、0C2H5、0C3H7、0CF3、OAc 或 OBz ；每個Z3可以是0或CH2。在另一個實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(XV) 二聚核苷(每個核 苷呈0 -D或0 -L構(gòu)型)，其中這兩個核苷是通過二硫鍵連接的 或其可藥用鹽或前藥，其中每個口、！1、！2]1]1、？3、! 1、! 1'、R2、R2'、妒和妒'的定義同上。在一個實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(XVI)的0-D或3-L c-核苷 或其可藥用鹽或前藥，其中每個口、！1、！2]1]2]1、？3、! 1、! 1'、R2、R2'、R3和 R3'的定義同上；每個X4 和 X5 獨立地為氫、鹵素(F、CI、Br 或 I)、N3、NH2、NHR8、NR8R8'、OH、OR8、SH 或SR8;且每個R8和R8'獨立地為氫、低級烷基、低級鏈烯基、芳基或芳基烷基例如未取代或 取代的苯基或芐基；條件是對于每個通式(XVII-a)或(XVII_b)核苷，X4不是0H或OR8。在一個實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(XVIII)的a-D或 a -L-核苷 或其可藥用鹽或前藥，其中每個D和P2的定義同上。在優(yōu)選的實施方案中，D和P2獨立地為氫。在另一個本發(fā)明子實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L核苷是式 (XX)核苷 或其可藥用鹽或前藥，其中每個口、？1』2、？3、! 1、! 4、! 4'和R9 的定義同上。在另一個本發(fā)明子實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L核苷是式 (XXI)核苷 或其可藥用鹽或前藥，其中每個口、？1、？2、？3、! 1、! 4*! 4'的定義同上。在一個本發(fā)明特別的子實施方案中，式(XXI)所示抗病毒或抗增殖有效的0 -D或 3 -L核苷如下 或其可藥用鹽或前藥，其中每個D、P2和P3的定義同上。在優(yōu)選的實施方案中，D、P2和P3獨立地為氫。在另一個實施方案中，N-羥基胞嘧啶用作為連接到本申請中所述的任何糖或 carba-糖部分上的堿基，仿若每個單獨的具體實施方案都被完全描述過那樣。在另一個本發(fā)明子實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L核苷是式 (XXII)核苷 或其可藥用鹽或前藥，其中每個D、pi和R1的定義同上。在優(yōu)選的實施方案中，D和P2獨立地為氫。在一個本發(fā)明特別的子實施方案中，式(XXII)所示抗病毒或抗增殖有效的3-D 或日-L核苷，優(yōu)選0 -L核苷如下 或其可藥用鹽或前藥，其中D的定義同上，且優(yōu)選為H。在另一個本發(fā)明子實施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L核苷是式 (XXIII)核苷 或其可藥用鹽或前藥，其中每個口、？1、？2、？3、! 1、! 4*! 4'的定義同上。在一個本發(fā)明特別的子實施方案中，式(XXIII)所示抗病毒或抗增殖有效的3 -D 或3 -L核苷如下或其可藥用鹽或前藥，其中每個D、P2和P3的定義同上。在優(yōu)選的實施方案中，D、P2和P3獨立地為氫。在優(yōu)選的實施方案中，通式(I-a)和(Ill-a)的3 -D和3 _L核苷由表1提供的 非限制性實例代表。表 1 在優(yōu)選的實施方案中，通式(I-b)和(III-b)的3-D和f3-L核苷由表2提供的 非限制性實例代表。表2 [lll-b] 在優(yōu)選的實施方案中，通式(ii-a)和(iv-a)的3 -d和3 _l核苷由表3提供的 非限制性實例代表。表3 在優(yōu)選的實施方案中，通式(II-b)和(IV-b)的0 -D和0 -L核苷由表4提供的 非限制性實例代表。表4 在優(yōu)選的實施方案中，通式(v-a)和(viii-a)的3 _d和3 _l核苷由表5提供的 非限制性實例代表。表 5
65 在優(yōu)選的實施方案中，通式(vll-a)和(x-a)的0 -d和0 -l核苷由表6提供的 非限制性實例代表。表6 在優(yōu)選的實施方案中，通式(vii-b)和(x-b)的0 -d和0 -l核苷由表7提供的 非限制性實例代表。表 7 在優(yōu)選的實施方案中，通式(XI-a)或(XII-a)的0 -D或0 _L核苷由表8提供的 非限制性實例代表。表 8 在優(yōu)選的實施方案中，通式(XII-b)的0-L核苷由表9提供的非限制性實例代表。表 9 [XII-b]

在優(yōu)選的實施方案中，通式(Xlll-a)的3 -D核苷由表10提供的非限制性實例代表。表10 在優(yōu)選的實施方案中，通式(XIII-c)的-D核苷由表11提供的非限制性實例代表。表11 在優(yōu)選的實施方案中，通式(XIII-d)的3-D核苷由表12提供的非限制性實例代表。表12 在優(yōu)選的實施方案中，通式(XIV)的0-D核苷由表13提供的非限制性實例代表。表 13 在優(yōu)選的實施方案中，通式(XV-a)核苷由表14提供的非限制性實例代表。表 14
在優(yōu)選的實施方案中，通式(XV-b)核苷由表15提供的非限制性實例代表。表 15 在優(yōu)選的實施方案中，通式(XVI-a)核苷由表16提供的非限制性實例代表。表 16 在優(yōu)選的實施方案中，通式(XVI-c)核苷由表17提供的非限制性實例代表。表17
在優(yōu)選的實施方案中，通式(XVI-d)核苷由表18提供的非限制性實例代表, 表18 在優(yōu)選的實施方案中，通式(XVI-f)核苷由表19提供的非限制性實例代表。表 19 在優(yōu)選的實施方案中，通式(XVII-d)核苷由表20提供的非限制性實例代表。表 20 --- 在一個實施方案中，當(dāng)在合適的基于細胞的測定中測試時，本發(fā)明核苷的EC5tl(達 到50%病毒抑制的有效濃度)小于15 μ Μ,更特別地，小于10或5 μ Μ。在優(yōu)選的實施方案 中，核苷是對映體的富集。II.立體異構(gòu)現(xiàn)象和多晶現(xiàn)象具有手性中心的本發(fā)明化合物可以以旋光和外消旋形式存在以及被分離出來。某 些化合物可表現(xiàn)出多晶現(xiàn)象。本發(fā)明包括具有本文所述有用性質(zhì)的外消旋、旋光、多晶或立 體異構(gòu)體形式的本發(fā)明化合物或其混合物。旋光形式可通過例如下述方法制得通過重結(jié) 晶技術(shù)拆分外消旋形式，由旋光性原料合成，手性合成，使用手性固定相進行色譜分離，或 酶拆分。如下所示，核苷含有至少兩個關(guān)鍵的手性碳原子(*)。一般情況下，核苷手性碳上 的取代基[具體來說是嘌呤或嘧啶堿基(當(dāng)使用糖環(huán)中間體編號方式時，稱為Cl取代基) 和CH2OH (稱為C4中間體)]相對于糖環(huán)系可以呈順式(在相同一側(cè))或反式(在相反側(cè))。 順式和反式外消旋體都由一對旋光異構(gòu)體組成。因此，每個化合物具有4個獨立的立體異 構(gòu)體。這4個立體異構(gòu)體由下述構(gòu)型代表(當(dāng)在水平面中確定糖部分的方向時，-0-部分 以黑色表示)(1)兩個基團都“在上面”的順式，稱為0-D;(2)鏡像，即兩個基團都“在下 面”的順式，鏡像稱為β-L; (3) C4取代基“在上面”，且Cl取代基“在下面”的反式(稱為 α-D)；和(4)C4取代基“在下面”，且Cl取代基“在上面”的反式(稱為α-L)。這兩種順 式對映體一起稱為β -對映體的外消旋混合物，這兩種反式對映體一起稱為α "對映體的 外消旋混合物。 本發(fā)明化合物的4種可能的立體異構(gòu)體如下所示。 順式(旦)
HoI反式(a)III.定義除非另有說明，否則本文所用術(shù)語“烷基”是指飽和直鏈、支鏈或環(huán)狀伯、仲或叔 烴，包括但不限于(；-(16烴基，并具體包括甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基、丁基、異丁基、 叔丁基、戊基、環(huán)戊基、異戊基、新戊基、己基、異己基、環(huán)己基、環(huán)己基甲基、3-甲基戊基、2， 2- 二甲基丁基和2，3- 二甲基丁基。烷基可任選被一個或多個選自下列基團的部分取代烷 基、鹵素、商代烷基、羥基、羧基、?；?、酰氧基、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷基氨基、二烷基 氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、疊氮基、巰基、亞胺、磺酸、硫酸酯、磺?；?、硫 烷基、亞磺?；?、氨磺?；?、酯、羧酸、酰胺、膦?；?、氧膦基、磷?；?、膦、硫代酸酯、硫醚、酰 鹵、酸酐、肟、hydrozine、氨基甲酸酯、膦酸、磷酸酯、膦酸酯，或不抑制該化合物藥理活性的 任何可使用的其它官能團，這些取代基是未保護或按照需要保護的，這種保護是本領(lǐng)域技 術(shù)人員已知白勺，參見例如Greene,等人.,Protective Groups in OrRanic Synthesis, John ffileyand Sons, Second Edition，1991，其引入本文以供參考。除非另有說明，否則本文所用術(shù)語“低級烷基”是指(^-(；飽和直鏈、支鏈或如果適 當(dāng)?shù)脑挱h(huán)狀(例如環(huán)丙基)烷基，包括取代和未取代的形式。術(shù)語“亞烷基”或“鏈烯基”是指直鏈或支鏈構(gòu)型的飽和烴二基，包括但不限于具有 1-10個碳原子的那些。包括在該術(shù)語范圍內(nèi)的有亞甲基、1，2-乙烷-二基、1，1-乙烷-二 基、1，3-丙烷-二基、1，2-丙烷-二基、1，3-丁烷-二基、1，4_ 丁烷-二基等。本文所公開的 亞烷基或其它二價基團可任選被一個或多個選自下列的基團取代烷基、鹵素、鹵代烷基、 羥基、羧基、?；?、酰氧基、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷基氨基、疊氮基、二烷基氨基、芳基 氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、巰基、亞胺、磺?；?、硫烷基、亞磺?；?、氨磺酰基、 酯、羧酸、酰胺、膦?；?、氧膦基、磷?；?、膦、硫代酸酯、硫醚、酰商、酸酐、肟、hydrozine、氨 基甲酸酯、膦酸、膦酸酯，或不抑制該化合物藥理活性的任何可使用的其它官能團，這些取 代基是未保護或按照需要保護的，這種保護是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，參見例如Greene，等
人.，Protective Groups in Organic Synthesis,John Wiley and Sons,Second Edition，
751991，其引入本文以供參考。除非另有說明，否則本文所用術(shù)語“芳基”是指苯基、聯(lián)苯基或萘基，優(yōu)選苯基。該 術(shù)語包括取代和未取代的基團。芳基可被一個或多個選自下列的基團取代溴、氯、氟、碘、 羥基、疊氮基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、硫酸酯、膦酸、 磷酸酯或膦酸酯，這些取代基是未保護或按照需要保護的，這種保護是本領(lǐng)域技術(shù)人員已 知的，參見例如Greene,等人.，ProtectiveGroups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons， Second Edition，1991。除非另有說明，否則 本文所用術(shù)語“芳烷基”是指經(jīng)由如上所定義的烷基連接在分 子上的如上所定義的芳基。除非另有說明，否則本文所用術(shù)語“烷芳基”或“烷基芳基”是 指經(jīng)由如上所定義的芳基連接在分子上的如上所定義的烷基。在每個這些基團中，烷基可 任選如上所述被取代，且芳基可任選被一個或多個選自下列的基團取代烷基、鹵素、鹵代 焼基、輕基、幾基、 酰基、酰氧基、氨基、酰氨基、疊氮基、羧基衍生物、烷基氨基、二烷基氨基、 芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、巰基、亞胺、磺酰基、硫烷基、亞磺?；被酋?基、酯、羧酸、酰胺、膦?；?、氧膦基、磷?；?、膦、硫代酸酯、硫醚、酰鹵、酸酐、肟、hydrozine、 氨基甲酸酯、膦酸、膦酸酯，或不抑制該化合物藥理活性的任何可使用的其它官能團，這些 取代基是未保護或按照需要保護的，這種保護是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，參見例如Greene， 等 人· ， Protective Groups in OrganicSynthesis, John Wiley and Sons， Second Edition，1991，其引入本文以供參考。具體包括在術(shù)語芳基范圍內(nèi)的有苯基；萘基；苯基甲 基；苯基乙基；3，4，5_三羥基苯基；3，4，5_三甲氧基苯基；3，4，5_三乙氧基苯基；4-氯苯 基；4-甲基苯基；3，5- 二叔丁基-4-羥基苯基；4-氟苯基；4-氯-1-萘基；2-甲基-1-萘 基甲基；2-萘基甲基；4-氯苯基甲基；4-叔丁基苯基；4-叔丁基苯基甲基等。術(shù)語“烷基氨基”或“芳基氨基”分別是指具有一個或兩個烷基或芳基取代基的氨 基。本文所用術(shù)語“鹵素”包括氟、氯、溴和碘。在本說明書中使用的術(shù)語“對映體富集的”描述的是包含至少約95%、優(yōu)選至少 96 %、更優(yōu)選至少97 %、甚至更優(yōu)選至少98 %、甚至更優(yōu)選至少約99 %或更多的核苷的單 一對映體的核苷。除非另有說明，當(dāng)在本說明書中提及特定構(gòu)型(D或L)的核苷時，假定該 核苷是對映體富集的核苷。本文所用術(shù)語“宿主”是指病毒可在其中復(fù)制的單細胞或多細胞生物體，包括細胞 系和動物，優(yōu)選人?；蛘撸拗骺蓴y帶其復(fù)制或功能可被本發(fā)明化合物改變的一部分病毒基 因組。術(shù)語宿主具體指感染的細胞，用所有或部分病毒基因組轉(zhuǎn)染的細胞，和動物，特別是 靈長目動物(包括黑猩猩)和人。當(dāng)涉及異常細胞增殖時，術(shù)語“宿主”是指可在其中模擬 異常細胞增殖的單細胞或多細胞生物體。術(shù)語宿主具體指由于自然原因或非自然原因(例 如分別由于基因突變或基因工程)而異常增殖的細胞，和動物，特別是靈長目動物(包括黑 猩猩)和人。在大多數(shù)本發(fā)明動物應(yīng)用中，宿主是人患者。然而，對于某些適應(yīng)癥，可清楚 地預(yù)見到本發(fā)明的獸醫(yī)應(yīng)用(例如在牛中的牛病毒性腹瀉病毒、在豬中的豬霍亂病毒和在 綿羊中的border病病毒)。在本說明書中使用的術(shù)語“可藥用鹽或前藥”是用于描述任何可藥用形式(例如 酯、磷酸酯、酯的鹽或相關(guān)組)的化合物，當(dāng)施用給患者后它們能提供活性化合物?？伤幱名}包括衍生自可藥用無機或有機堿和酸的那些。合適的鹽包括衍生自堿金屬例如鉀和鈉， 堿土金屬例如鈣和鎂，以及藥物領(lǐng)域眾所周知的多種其它酸的那些?？伤幱们八幨侵冈谒?主中代謝例如水解或氧化以形成本發(fā)明化合物的化合物。前藥的典型實例包括在活性化合 物的官能團上具有生物不穩(wěn)定保護基的化合物。前藥包括可氧化、還原、胺化、脫氨基化、羥 基化、脫羥基化、水解、脫水、烷基化、脫烷基化、?；?、脫酰化、磷酸化、脫磷酸化以生成活性 化合物的化合物。IV.可藥用鹽和前藥當(dāng)化合物的堿性或酸性足以形成穩(wěn)定的無毒酸或堿加成鹽時，將化合物作為可藥 用鹽給藥可能是合適的。可藥用鹽包括衍生自可藥用無機或有機堿和酸的那些。合適的鹽 包括衍生自堿金屬例如鉀和鈉，堿土金屬例如鈣和鎂，以及藥物領(lǐng)域眾所周知的多種其它 酸的那些。特別是，可藥用鹽的實例是與形成生理可接受陰離子的酸形成的有機酸加成鹽， 例如甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、丙二酸鹽、酒石酸鹽、琥珀酸鹽、苯甲酸鹽、 抗壞血酸鹽、a-酮戊二酸鹽和a-甘油磷酸鹽。還可以形成合適的無機鹽，包括硫酸鹽、 硝酸鹽、碳酸氫鹽和碳酸鹽。可藥用鹽可用本領(lǐng)域眾所周知的標(biāo)準(zhǔn)方法獲得，例如通過將具有足夠堿性的化合 物例如胺與能給予生理可接受陰離子的合適的酸反應(yīng)來獲得。還可以制得羧酸的堿金屬 (例如鈉、鉀或鋰)或堿土金屬(例如鈣)鹽。本文所述的任何核苷都可作為核苷酸前藥施用以提高活性、生物利用度、穩(wěn)定性 或改變核苷的性質(zhì)。已知有多種核苷酸前藥配體。一般情況下，核苷的一磷酸酯、二磷酸酯 或三磷酸酯的烷基化、酰化或其它親脂性修飾將提高核苷酸的穩(wěn)定性。可代替磷酸酯基團 上的一個或多個氫的取代基的實例是烷基、芳基、留族化合物、碳水化合物，包括糖、1，2-二 ?；视秃痛肌. Jones 和 N. Bischofberger，Antiviral Research, 27 (1995) 1-17 中描述 了多種取代基。任意這些取代基可以與本發(fā)明所公開的核苷聯(lián)合使用以達到所需效果。本發(fā)明活性核苷也可以作為如在下述文獻中公開的5'-磷醚(phospho ether) 脂質(zhì)或5' _醚脂質(zhì)提供，這些文獻引入本文以供參考KuCera，L. S.，N. Iyer, E. Leake, A. Raben, Modest E. K.，D. L. ff.，和 C. Piantadosi. 1990. “抑制感染性 HIV-1 生成和引 起缺損病毒形成的新的膜相互作用醚脂質(zhì)類似物.” AIDS Res. Hum. Retroviruses. 6 491-501 ；Piantadosi, C. , J. Marasco C. J. , S. L. Morris-Natschke, K. L. Meyer, F. Gumus, J. R. Surles, K. S. Ishaq, L. S. Kucera, N. Iyer, C. A. Wall en, S. Piantadosi,禾口 E. J. Modest. 1991. “合成和評價新的醚脂質(zhì)核苷綴合物的抗-HIV活性 ”J. Med. Chem. 34 1408. 1414 ；Hosteller, K. Y. ， D. D. Richman, D. A. Carson, L. M. Stuhmiller, G. M. T. van Wijk，和H. van den Bosch. 1992. "3'-脫氧胸苷二磷酸酯二肉豆蔻基甘油-脫氧胸 苷的一種脂質(zhì)前藥大大提高了對1型人免疫缺陷病毒在CEM和HT4-6C細胞種復(fù)制的抑制 作用 "Antimicrob. Agents Chemother. 36 2025. 2029 ；Hosetler，K. Y.，L.M. Stuhmiller, H. B. Lenting, H. van den Bosch,和D. D. Richman, 1990. “疊氮胸苷和其它抗病毒核苷的磷 脂類似物的合成和抗逆轉(zhuǎn)錄病毒的活性.” J. Biol. Chem. 265 :61127。公開了可共價引入到核苷內(nèi)、優(yōu)選引入到核苷5' -0H位置上的合適的親脂性取 代基或親脂性制劑的u. S.專利的非限制性實例包括U. S.專利5，149，794(1992年9月22 日，Yatvin 等人.)；5，194，654 (1993 年 3 月 16 日，Hostetler 等人.)；5，223，263 (1993年 6 月 29 日，Hostetler 等人.)；5，256，641 (1993 年 10 月 26 日，Yatvin 等人.)； 5，411，947(1995年 5 月 2 日，Hostetler 等人.)；5，463，092 (1995 年 10 月 31 日，Hostetler 等人.)；5, 543，389 (1996 年 8 月 6 日，Yatvin 等人.)；5, 543，390 (1996 年 8 月 6 日，Yatvin 等人.)；5，543，391 (1996 年 8 月 6 日，Yatvin 等人.)；和 5，554，728 (1996 年 9 月 10 日； Basava等人.)，所有這些專利都引入本文以供參考。公開了可連接到本發(fā)明核苷上的親 脂性取代基或親脂性制劑的國外專利申請包括W089/02733、W0 90/00555、W0 91/16920、 W0 91/18914、W0 93/00910、TO 94/26273、TO 96/15132、EP 0350287、EP 93917054. 4 和 W091/19721。V.藥物組合物基于式(I)-(XXIII) 3-D或0-L化合物或其可藥用鹽或前藥的藥物組合物可以 以治療黃病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的治療有效量制得， 并任選聯(lián)合使用可藥用添加劑、載體或賦形劑。治療有效量可隨所治療的感染或病癥、其嚴(yán) 重程度、所采用的治療方案、所用活性劑的藥動學(xué)特征以及所治療的患者而變。在本發(fā)明的一個方面，優(yōu)選將本發(fā)明化合物與可藥用載體混合。一般情況下，優(yōu)選 以口服給藥形式施用藥物組合物，但是制劑也可以通過非胃腸道、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、透皮、頰、 皮下、栓劑或其它途徑給藥。靜脈內(nèi)和肌內(nèi)制劑優(yōu)選在無菌鹽水中給藥。本領(lǐng)域技術(shù)人員 可修飾在本說明書教導(dǎo)內(nèi)的制劑以提供適于特定給藥途徑，同時不導(dǎo)致本發(fā)明組合物不穩(wěn) 定或不破壞其治療活性的多種制劑。特別是，為了使其更溶于水或其它載體而對所需化合 物作的修飾可通過例如常規(guī)修飾(成鹽、酯化等)來容易地完成。在一些藥物劑型中，前藥形式的化合物，尤其包括?；?乙酰化或其它?；?和醚 衍生物、磷酸酯和各種鹽形式的本發(fā)明化合物是優(yōu)選的。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)知道如何方 便地將本發(fā)明化合物修飾成前藥形式以有助于將活性化合物遞送到宿主生物體或患者內(nèi) 的靶位點上。本領(lǐng)域技術(shù)人員還知道利用適用的前藥形式的有利藥動學(xué)參數(shù)以將所需化合 物遞送到宿主生物體或患者內(nèi)的靶位點上，從而實現(xiàn)化合物治療黃病毒科(包括HCV)、正 粘病毒科(包括甲型流感病毒和乙型流感病毒)、副粘病毒科(包括RSV)病毒感染或與異 常細胞增殖有關(guān)的病癥的最大預(yù)期作用。包括在本發(fā)明治療活性制劑中的化合物的量是治療感染或病癥的有效量，在優(yōu)選 的實施方案中，是治療黃病毒科(包括HCV)、正粘病毒科(包括甲型流感病毒和乙型流感病 毒)、副粘病毒科(包括RSV)病毒感染或與異常細胞增殖有關(guān)的病癥的有效量。一般情況 下，根據(jù)所用的化合物、所治療的病癥或感染以及給藥途徑，本發(fā)明化合物在藥物劑型中的 治療有效量通常為約0. lmg/kg-約100mg/kg或更多。對于本發(fā)明目的，本發(fā)明組合物的預(yù) 防有效量在上述治療有效量的相同濃度范圍內(nèi)，并且通常與治療有效量相同。本發(fā)明活性化合物的給藥可以從連續(xù)給藥(靜脈內(nèi)滴注)到每天口服給藥數(shù)次 (例如Q. I.D.、B. I.D.等)不等，并且可包括口服、局部、非胃腸道、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、皮下、透 皮(可包含滲透促進劑)、頰和栓劑給藥以及其它給藥途徑。也可以使用腸包衣口服片劑來 提高通過口服途徑施用的化合物的生物利用度和穩(wěn)定性。最有效的劑型將取決于所選特定 治療劑的藥動學(xué)特征以及患者疾病的嚴(yán)重程度。由于便于給藥和可預(yù)見的患者良好配合， 口服劑型是特別優(yōu)選的。為了制備本發(fā)明藥物組合物，優(yōu)選依據(jù)常規(guī)藥物混合技術(shù)將治療有效量的一種或多種本發(fā)明化合物與可藥用載體混合以制得劑型。根據(jù)給藥例如口服或非胃腸道給藥所需 的制劑形式，載體可呈多種形式。在制備口服劑型形式的藥物組合物時，可使用任何常規(guī)藥 物介質(zhì)。因此，對于液體口服制劑例如懸浮液、酏劑和溶液，可使用合適的載體和添加劑，包 括水、二醇、油、醇、矯味劑、防腐劑、著色劑等。對于固體口服制劑例如粉劑、片劑、膠囊以及 固體制劑例如栓劑，可使用合適的載體和添加劑，包括淀粉，糖載體例如葡萄糖、甘露醇、乳 糖和相關(guān)載體，稀釋劑、制粒劑、潤滑劑、粘合劑、崩解劑等。如果需要的話，可通過標(biāo)準(zhǔn)技術(shù) 給片劑或膠囊包上腸溶衣以持續(xù)釋放。使用這些劑型可顯著影響化合物在患者中的生物利 用度。對于非胃腸道給藥制劑，載體通常包括無菌水或氯化鈉水溶液，還可以包括其它 組分，包括輔助分散的組分。當(dāng)使用無菌水并且保持無菌狀態(tài)時，組合物和載體必須也是無 菌的。還可以制備可注射的懸浮液，其中可使用合適的液體載體、懸浮劑等。還可以通過常規(guī)方法制備脂質(zhì)體懸浮液(包括以病毒抗原為靶向的脂質(zhì)體)以獲 得可藥用載體。這可適于遞送游離核苷、?；塑栈蛄姿狨デ八幮问降谋景l(fā)明核苷化合物。在特別優(yōu)選的本發(fā)明實施方案中，使用本發(fā)明化合物和組合物來治療、預(yù)防或延 遲黃病毒科(包括HCV)、正粘病毒科(包括甲型流感病毒和乙型流感病毒)、副粘病毒科 (包括RSV)病毒感染或與異常細胞增殖有關(guān)的病癥的發(fā)作。優(yōu)選地，為了治療、預(yù)防或延遲 所述感染或病癥的發(fā)作，將組合物在口服劑型中以每天約250微克至最高達約1克或更高 的量施用，每天給藥至少一次，優(yōu)選每天給藥最高達4次。本發(fā)明化合物優(yōu)選口服給藥，但 是可以非胃腸道給藥、局部給藥或以栓劑形式給藥。由于在一些情況下對宿主細胞的毒性很低，所以本發(fā)明化合物可有利地預(yù)防性地 使用來預(yù)防黃病毒科(包括HCV)、正粘病毒科(包括甲型流感病毒和乙型流感病毒)、副粘 病毒科(包括RSV)病毒感染或與異常細胞增殖有關(guān)的病癥，或者預(yù)防出現(xiàn)與所述病毒感染 或病癥有關(guān)的臨床癥狀。因此，本發(fā)明還包括預(yù)防性地治療病毒感染，特別是黃病毒科(包 括HCV)、正粘病毒科(包括甲型流感病毒和乙型流感病毒)、副粘病毒科(包括RSV)病毒感 染或與異常細胞增殖有關(guān)的病癥的方法。在本發(fā)明的該方面中，使用本發(fā)明組合物來預(yù)防 或延遲黃病毒科(包括HCV)、正粘病毒科(包括甲型流感病毒和乙型流感病毒)、副粘病毒 科(包括RSV)病毒感染或與異常細胞增殖有關(guān)的病癥的發(fā)生。該預(yù)防方法包括給需要這 樣的治療的患者或有發(fā)展成所述病毒感染或病癥的危險性的患者施用減輕、預(yù)防或延遲所 述病毒感染或病癥發(fā)作有效量的本發(fā)明化合物。在依據(jù)本發(fā)明的預(yù)防性治療中，所用的抗 病毒或抗增殖化合物應(yīng)當(dāng)具有低的毒性，并優(yōu)選對患者沒有毒性。在本發(fā)明該方面中特別 優(yōu)選的是，所用的化合物應(yīng)當(dāng)最大有效地抗病毒或病癥，并且應(yīng)當(dāng)對患者表現(xiàn)出最小毒性。 對于黃病毒科(包括HCV)、正粘病毒科(包括甲型流感病毒和乙型流感病毒)、副粘病毒科 (包括RSV)病毒感染或與異常細胞增殖有關(guān)的病癥，可用于治療這些疾病狀態(tài)的本發(fā)明化 合物可以以與作為預(yù)防劑預(yù)防黃病毒科(包括HCV)、正粘病毒科(包括甲型流感病毒和乙 型流感病毒)、副粘病毒科(包括RSV)病毒感染的增殖或與異常細胞增殖有關(guān)的病癥，或延 長自身表現(xiàn)出臨床癥狀的黃病毒科(包括HCV)、正粘病毒科(包括甲型流感病毒和乙型流 感病毒)、副粘病毒科(包括RSV)病毒感染或與異常細胞增殖有關(guān)的病癥的發(fā)作所用治療 性治療相同的劑量范圍施用(即對于口服劑型，每天約250微克至最多1克或更多，每天給 藥1-4次)。
此外，本發(fā)明化合物可以與一種或多種抗病毒劑、抗HBV劑、抗HCV劑或抗皰疹劑 或干擾素、抗癌劑或抗菌劑，包括其它本發(fā)明化合物聯(lián)合或者交替施用。一些本發(fā)明化合物 可通過降低其它化合物的代謝、異化或失活而有效地提高一些本發(fā)明活性劑的生物活性， 因此對于該預(yù)期作用可聯(lián)合給藥。在下述部分中進一步舉例說明本發(fā)明。提供實驗詳述部分和包含在其中的實施例 是為了幫助理解本發(fā)明。這部分不是為了，并且也不應(yīng)當(dāng)理解為以任何方式限制如在其后 的權(quán)利要求書中所提出的本發(fā)明范圍。VI.治療黃病毒科病毒感染的療法已經(jīng)認識到，用抗病毒劑長期治療后，可出現(xiàn)抗藥性病毒變種。抗藥性最通常地是 由于編碼病毒復(fù)制周期所用酶一最通常地，對于HCV，是RNA-依賴性-RNA聚合酶一的基因 發(fā)生突變所致。已經(jīng)證實，通過與第二種、也許是第三種誘導(dǎo)與主要藥物所引起的突變不同 的突變的抗病毒化合物聯(lián)合或交替施用本發(fā)明化合物，可延長、增強或恢復(fù)抗病毒感染藥 物的效力?；蛘?，通過這樣的聯(lián)合或交替療法可改變藥物的藥動學(xué)、生物分布或其它參數(shù)。 一般情況下，與交替療法相比，聯(lián)合治療是更優(yōu)選的，因為其同時引起多種對病毒的抑制。已經(jīng)鑒定出具有抗丙型肝炎病毒活性，并因此可以與一種或多種通式 (I)-(XXIII)核苷聯(lián)合或交替使用的活性劑的實例包括(a)干擾素和利巴韋林(Battaglia，A. M.等人.Ann. Pharmacother. 2000,34,487 ； Berenguer, M. ^A.Antivir. Ther. 1998，3 (Suppl. 3)，125)；(b)基于底物的 NS3 蛋白酶抑制劑(Attwood 等人.PCT WO 98/22496,1998 ； Attwood ^ A ■ Antiviral Chemistry and Chemotherapy 1999,10,259 ；Attwood 等人.德 國專利公開DE 19914474 ；Tung等人 PCT W098/17679)，包括a -酮基酰胺類和胼基脲類， 以及末端是親電體例如硼酸或膦酸酯的抑制劑(Llinas Brimet等人.PCT W0 99/07734)；(c)非基于底物的抑制劑例如2，4，6_三羥基_3_硝基-苯甲酰胺衍生物(Sudo K.等人 ，Biochemical and Biophysical ResearchCommunications,1997，238，643 禾口 Sudo K.等人.Antiviral Chemistryand Chemotherapy 1998，9，186)，包括 RD3-4082 和 RD3-4078，前者在酰胺上被具有14個碳的鏈取代，后者具有對苯氧基苯基；(d)在用NS3/4A融合蛋白和NS5A/5B底物進行的反相HPLC測定中表現(xiàn)出相關(guān)抑 制作用的噻唑烷衍生物(Sudo K.等人，Antiviral Researchl996，32，9)，尤其是具有被長 烷基鏈取代的稠合肉桂?；糠值幕衔颮D-1-6250、RD4 6205和RD4 6193 ；(e)在 Kakiuchi N.等人.J. EBS Letters 421,217 禾P Takeshita N.等 人.Analytical Biochemistry 1997，247，242中確定的噻唑烷類化合物和苯甲?；桨奉?化合物；(f)在SDS-PAGE和放射自顯影測定中具有抗HCV蛋白酶活性的從鏈霉菌屬發(fā)酵 培養(yǎng)肉湯中分離出來的菲醌化合物Sch 68631 (Chu M.等人.Tetrahedron Letters 1996， 37，7229)，和在閃爍親近測定中表現(xiàn)出活性的從真菌？6111(^11111111 griscofuluum中分離出 來的 Sch351633(Chu M.等人.，BioorRanic and Medicinal Chemistry Letters9,1949)；(g)基于大分子elgin c的從水蛭中分離出來的選擇性NS3抑制劑(Qasim M. A.等 A Biochemistry 1997，36，1598)；(h) HCV 解旋酶抑制劑(Diana G. D.等人.，U. S.專利 5，633，358 和 DianaG. D.等人.PCT W0 97/36554)；(i)HCV聚合酶抑制劑例如核苷酸類似物、膠霉毒素(Ferrari R.等人. .Tournal of Virology 1999，73，1649)和天然產(chǎn)物淺藍菌素(LohmannV.等人 Virology 1998，249， 108)；(j)與下列序列互補的反義硫代磷酸寡脫氧核苷酸(S-0DN)至少一部分HCV的序 列(Anderson等人.U. S.專利6，174，868)，特別是在5'非編碼區(qū)域(NCR)中延伸的序列 (Alt M.等人.Heoatology 1995，22，707)，或包含NCR的3 ‘末端的核苷酸326-348和位 于 HCV RNA 的核編碼區(qū)域中的核苷酸 371-388 (Alt M.等人.Archives of Virologyl997, 142，589 和 Galderisi U.等人.，Tournal of Cellular Physiologyl999,81 :2151)；(k)IRES-依賴性翻譯抑制劑(Ikeda N等人.日本專利公開JP-08268890 ;Kai Y.等人.日本專利公開JP-10101591)；(1)核酸酶-抗性核酶(Maccjak D.J.等人.，Hepatology 1999，30，abstract 995)；(m)金剛燒胺例如金剛乙胺(Smith, Abstract from Annual Meeting ofthe American Gastoenterological Association and AASLD,1996)；(n)喹諾酮類例如氧氟沙星、環(huán)丙沙星和左氟沙星(AASLD Abstracts, Hepatology, Oct. 1994, Program Issue, 20(4), pt. 2, abstractno. 293)；(o)核苷類似物(Ismaili 等人.TO 01/60315 ；Storer W0 01/32153)，包括 2'-脫氧-L-核苷(Watanabe 等人.TO 01/34618)和 1_( 0 _L_ 呋喃核糖基)-1，2，4_ 三 唑-3-甲酰胺(levovirin ) (Tam W0 01/46212)；和(p)其它各種化合物，包括1-氨基-烷基環(huán)己烷(Gold等人.U.S.專利 6，034，134)、烷基脂類(Chojkier等人.U. S.專利5，922，757)、維生素E和其它抗氧 化劑(Chojkier等人.U.S.專利5，922，757)、角鯊烯、膽汁酸(Ozeki等人.U. S.專利 5，846，964)、N-(膦酰基乙?；?-L-天冬氨酸(Diana等人.U. S.專利5，830，905)、苯二 甲酰胺類(Diana等人.U.S.專利5，633，388)、多聚腺苷酸衍生物(Wang等人.U.S.專 利 5，496，546)、2'，3' -二脫氧肌苷(Yarchoan 等人.U. S.專利 5，026，687)、苯并咪唑 類(Colacino 等人 U. S.專利 5，891，874)、葡糖胺類(Mueller 等人 W0 01/08672)、取代 的-1,5-亞氨基-D-山梨醇(glucitol)化合物(Mueller 等人 W0 00/47198)。VII.治療|H粘病毒科病毒感染的療法已經(jīng)認識到，用抗病毒劑長期治療后，可出現(xiàn)流感病毒的抗藥性變種?？顾幮宰钔?常地是由于編碼病毒復(fù)制周期所用酶的基因發(fā)生突變，導(dǎo)致抗原轉(zhuǎn)變或漂移所致。已經(jīng)證 實，通過與第二種、也許是第三種誘導(dǎo)與主要藥物所引起的突變不同的突變的抗病毒化合 物聯(lián)合或交替施用本發(fā)明化合物，可延長、增強或恢復(fù)抗流感病毒感染藥物的效力?；蛘?， 通過這樣的聯(lián)合或交替療法可改變藥物的藥動學(xué)、生物分布或其它參數(shù)。一般情況下，與交 替治療相比，聯(lián)合治療是更優(yōu)選的，因為其同時引起多種對病毒的抑制。已經(jīng)鑒定出具有抗流感病毒活性，并因此可以與一種或多種通式(I)-(XXIII)核 苷聯(lián)合或交替使用的活性劑的實例包括(a)放線菌素D(Barry，R. D.等人.“脫氧核糖核酸參與流感病毒增殖”Nature， 1962，194，1139-1140)；
81
(b)金剛烷胺(Van Voris, L. P.等人.“用于化學(xué)預(yù)防和治療流感的抗病毒 劑” Semin Respir Infect, 1992, 7,61-70)；(c) 4-氨基-或4-胍基-2-脫氧-2，3_ 二去氫_D_N_乙酰神經(jīng)氨酸_4_氨基-或 4-胍基-Neu 5 Ac2en(von Itzstein, M.等人.“流感病毒復(fù)制的基于唾液酸酶的有效抑 制劑的合理設(shè)計” Nature, 1993，363，418-423)；(d)利巴韋林(Van Voris, L. P.等人.“用于化學(xué)預(yù)防和治療流感的抗病毒 劑” Semin Respir Infect, 1992, 7,61-70)；(e)干擾素(Came，P.E.等人.“干擾素引起的合成聚合物的抗病毒活件’ Troc Soc Exp Biol Med, 1969，131,443-446 ；Gerone, P. J.等人.“用合成雙鏈核糖核酸的氣霧劑抑 制小鼠的呼吸道病毒感染” Infect Immun, 1971,3,323-327 ；Takano, K.等人.“小鼠流感 中的被動干擾素保護” T Infect Pis, 1991，164，969-972)；(f)滅活的甲型和乙型流感病毒疫苗(“流感疫苗的臨床研究-1978”Rev Infect Pis, 1983, 5, 721-764 ；Galasso, G. T.等人.“流感疫苗的臨床研究-1976” T Infect Pis, 1977，136 (suppl)，S341-S746 Jennings, R.等人.“志愿者對滅活的流感病毒疫苗的反 應(yīng)，，T Hyr, 1981，86，1-16 ；Kilbourne, E. D. “滅活的流感疫苗” In :Plothin SA, Mortimer EA，eds. Vaccines Philadelphia :Saunders, 1988,420-434 ；Meyer,H. M. ,Jr.等人.“現(xiàn)有 流感疫苗綜沭”Am I ClinPathol, 1978,70,146-152 ；“每周死亡率和發(fā)病率報告.預(yù)防和控 制流感第 I 部分，疫苗 Recommendations of the Advisory Committeeon Immunication Practices (ACIP) ” MMWR, 1993,42 (RR-6), 1-14 :Palache, A.M.等人.“用不同劑量的疫苗 進行流感免疫接種后的抗體反應(yīng)在老年療養(yǎng)院和年輕志愿者中進行的雙盲、安慰劑對照、 多中心、劑量反應(yīng)實驗” Vaccine，1993，11，3-9 ；Potter, C. ff. “滅活的流感病毒疫苗” In Beare AS, ed. Basic and applied influezaresearch, Boca Raton, FL :CRC Press, 1982, 119-158)。VIII.治療副粘病毒科病毒感染的療法已經(jīng)認識到，用抗病毒劑長期治療后，可出現(xiàn)RSV的抗藥性變種。抗藥性最通常地 是由于編碼病毒復(fù)制周期所用酶的基因發(fā)生突變所致。已經(jīng)證實，通過與第二種、也許是第 三種誘導(dǎo)與主要藥物所引起的突變不同的突變的抗病毒化合物聯(lián)合或交替施用本發(fā)明化 合物，可延長、增強或恢復(fù)抗RSV感染藥物的效力?；蛘?，通過這樣的聯(lián)合或交替療法可改 變藥物的藥動學(xué)、生物分布或其它參數(shù)。一般情況下，與交替療法相比，聯(lián)合治療一般是更 優(yōu)選的，因為其同時引起多種對病毒的抑制。已經(jīng)鑒定出具有抗RSV活性，并因此可以與一種或多種通式(I)-(XXIII)核苷聯(lián) 合或交替使用的活性劑的實例包括(a)利巴韋林(Hruska，J. F.等人.“通過利巴韋林在體內(nèi)抑制呼吸道合胞體病 毒”Antimicrob Afients Chemother, 1982,21,125-130)；禾口(b)純化的人靜脈內(nèi)IgG-IVIG(Prince，G. A.等人.“在棉大鼠呼吸道合胞體病 毒感染的實驗免疫治療中局部施用的中和性抗體的有效性” J Virol，1987,61,1851-1954 ； Prince, G. A.等人.“免疫預(yù)防和免疫治療棉大鼠中的呼吸道合胞體病毒感染” Infect Immun,1982，42，81—87)。IX.治療異常細胞增殖的療法
已經(jīng)鑒定出具有抗異常細胞增殖活性，并因此可以與一種或多種通式 (I)-(XXIII)核苷聯(lián)合或交替使用的活性劑的實例包括A.烷化劑氮芥類氮芥(霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤)、環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺(急性和慢性 淋巴細胞白血病、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、成神經(jīng)細胞瘤、乳腺癌、卵巢 癌、肺癌、維爾姆斯瘤、子宮頸、睪丸、軟組織肉瘤)、馬法蘭(L-苯丙氨酸氮芥)(多發(fā)性骨髓 瘤、乳腺癌、卵巢癌)、瘤可寧(慢性淋巴細胞白血病、原發(fā)性巨球蛋白血癥、霍奇金病、非霍 奇金淋巴瘤)。乙烯亞胺類和甲基蜜胺類六甲蜜胺(卵巢癌)、噻替哌(膀胱癌、乳腺癌、卵巢 癌)O烷基磺酸酯類白消安(慢性粒細胞性白血病)。亞硝基脲卡氮芥(BCNU)(霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、原發(fā)性腦腫瘤、多發(fā)性骨 髓瘤、惡性黑素瘤)、羅氮芥(CCNU)(霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、原發(fā)性腦腫瘤、小細胞肺 癌)、甲環(huán)亞硝脲(甲基-CCNU)(原發(fā)性腦腫瘤、胃癌、結(jié)腸癌)、鏈脲霉素(STR)(惡性胰腺 胰島瘤、惡性類癌瘤)。三氮烯屬達卡巴嗪(DTIC;二甲基三氮烯基咪唑甲酰胺)(惡性黑素瘤、霍奇金 病、軟組織肉瘤)。B.抗代謝物葉酸類似物甲氨蝶呤(氨甲蝶呤)(急性淋巴細胞白血病、絨膜癌、蕈樣真菌病、 乳腺癌、頭頸癌、肺癌、骨原性肉瘤)。嘧啶類似物氟尿嘧啶(5-氟尿嘧啶；5-FU)、氟尿苷(氟脫氧尿苷；FUdR)(乳腺 癌、結(jié)腸癌、胃癌、胰腺癌、卵巢癌、頭頸癌、泌尿膀胱癌、惡化惡習(xí)前皮膚損害)(局部)、阿 糖胞苷(阿糖胞苷)(急性粒細胞和急性淋巴細胞白血病)。嘌呤類似物和相關(guān)抑制劑巰基嘌呤(6-巰基嘌呤；6-MP)(急性淋巴細胞白血病、 急性粒細胞白血病和慢性粒細胞白血病)、硫鳥嘌呤(6-硫鳥嘌呤；TG)(急性粒細胞白血 病、急性淋巴細胞白血病和慢性粒細胞白血病)、噴司他丁(2' -deoxycyoformycin)(多毛 細胞白血病、蕈樣真菌病、慢性淋巴細胞白血病)。長春花屬生物堿長春花堿(VLB)(霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、乳腺癌、睪丸癌)、 長春新堿(急性淋巴細胞白血病、成神經(jīng)細胞瘤、維爾姆斯瘤、橫紋肌肉瘤、霍奇金病、非霍 奇金淋巴瘤、小細胞肺癌)。表鬼臼毒素依托泊苷(睪丸癌、小細胞肺癌和其它肺癌、乳腺癌、霍奇金病、非霍 奇金淋巴瘤、急性粒細胞白血病、卡波西肉瘤)、替尼泊苷(睪丸癌、小細胞肺癌和其它肺 癌、乳腺癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、急性粒細胞白血病、卡波西肉瘤)。C.天然產(chǎn)物抗生素更生霉素(放線菌素D)(絨膜癌、維爾姆斯瘤、橫紋肌肉瘤、睪丸癌、卡波 西肉瘤)、柔紅霉素(道諾霉素；正定霉素)(急性粒細胞白血病和急性淋巴細胞白血病)、 阿霉素(軟組織肉瘤、骨原性肉瘤和其它肉瘤；霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、急性白血病、乳 腺癌、泌尿生殖器癌、甲狀腺癌、肺癌、胃癌、成神經(jīng)細胞瘤)、博萊霉素(睪丸癌、頭頸癌、皮 膚和食道癌、肺癌和泌尿生殖道癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤)、普卡霉素(光輝霉素)(睪丸癌、惡性高鈣血)、絲裂霉素(自力霉素C)(胃癌、子宮頸癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、胰腺癌、膀胱 癌、頭頸癌)。酶L_天冬酰胺酶(急性淋巴細胞白血病)。生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑a-干擾素(多毛細胞白血病、卡波西肉瘤、黑素瘤、類癌瘤、 腎細胞癌、卵巢癌、膀胱癌、非霍奇金淋巴瘤、蕈樣真菌病，多發(fā)性骨髓瘤、慢性粒細胞白血 病)。D.各種治療劑鉬配位絡(luò)合物順鉬(順式-DDP)、卡鉬(睪丸癌、卵巢癌、膀胱癌、頭頸癌、肺癌、 甲狀腺癌、子宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、成神經(jīng)細胞瘤、骨原性肉瘤)。蒽二酮類Mixtozantrone (急性粒細胞白血病、乳腺癌)。取代的脲類羥基脲(慢性粒細胞白血病、紅細胞增多癥、特發(fā)性血小板增多癥、 惡性黑素瘤)。甲基胼衍生物丙卡巴胼(N-甲基胼，MIH)(霍奇金病)。腎上腺皮質(zhì)抑制劑米托坦(o，p' -DDD)(腎上腺皮層癌)、氨魯米特(乳腺癌)。腎上腺類皮質(zhì)激素類強的松(急性和慢性淋巴細胞白血病、非霍奇金淋巴瘤、霍 奇金病、乳腺癌)。孕激素類己酸羥孕酮、乙酸甲羥孕酮、乙酸甲地孕酮(子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌)。E.抗血管牛成劑Angiostatin、Endostatin。F.激素和拮抗劑雌激素類己烯雌酚、乙炔雌二醇(乳腺癌、前列腺癌)?？勾萍に仡愃舴?乳腺癌)。雄激素類丙酸睪酮、氟甲睪酮(乳腺癌)?？剐奂に仡惙?前列腺癌)。促性腺素釋放激素類似物亮丙瑞林(前列腺癌)。X.合成方案式(I)-(XXIII)化合物可通過本領(lǐng)域已知的任何方法合成。特別是，這些化合物 可通過3條不同途徑制得(a)由預(yù)形成的核苷合成，(b)將修飾的糖或未修飾的核糖與嘌 呤或嘧啶縮合，和(c)這兩條途徑的聯(lián)合。因為在核苷類抗生素蛹蟲草菌素中發(fā)現(xiàn)了 3-脫 氧-D-赤呋喃戊糖結(jié)構(gòu)，所以在二十世紀(jì)六十年代報道了很多有關(guān)該抗生素的全合成(參 見Lee，W. W.等人.J. Am. Chem. Soc.，1961，83，1906 ;ffalton, E.等人.J. Am. Chem. Soc.， 1964,86,2952 ；Suhadolnik, R. J.等人.Carbohydr. Res.，1968，61，545 Jkehara, M.等 人.Chem. Pharm. Bull.，1967，15,94 ；Kaneko,M.等人.Chem. Pharm. Bull. 1972,20,63)。在 優(yōu)選的本發(fā)明實施方案中，由預(yù)形成的核苷類制備3'-脫氧核苷是以下述方法進行的A. Ia~c 和 Illa-c 型化合物(i)由預(yù)形成的核苷類合成按照Marumoto，R 等人，Chem. Pharm. Bull. 1974，22，128 的教導(dǎo)，該文獻描述了用 乙酰溴處理N4-乙?；找陨?'，5' -二-0-乙?；?3'-溴-3'-脫氧-3-D-呋 喃木糖基_胞嘧啶(2，R = Ac),可如反應(yīng)方案1所示將N4-保護的胞苷核苷類衍生化以形成嘧啶核苷類(I-a)。反應(yīng)方案1 可用酰鹵例如乙酰溴處理N4-保護的-D-胞苷核苷1以生成相應(yīng)的3'-鹵代-木 糖型-核苷2。將2去乙?；陨?，然后還原脫鹵，獲得了所需的3' _脫氧胞苷衍生 物4。用酸，優(yōu)選煮沸的乙酸水溶液處理2，生成了相應(yīng)的保護的尿嘧啶核苷5，可將5容易 地轉(zhuǎn)化成游離3'-溴-木糖型核苷6a，通過還原脫溴可由6a獲得3'-脫氧尿苷衍生物 6b。按照類似方法，由N4-保護的-L-胞苷開始可合成4和6的L-對映體(Ill-a)。在制備核苷類化合物I_a的另一個實施方案中，將核糖核苷進行2'， 5' -二-0-三苯甲基化，生成了 7(R2' =R5' =Tr)，將其轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的3' _0_甲磺酸酯 8 (反應(yīng)方案2)。用稀的氫氧化鉀或氫氧化鈉處理8，經(jīng)由脫水核苷9生成了相應(yīng)的木糖型 衍生物10，將其去-0-三苯甲基化后，獲得了 12。將10甲磺?；缓笕?0-三苯甲基化， 生成了 3' -0-甲磺酰基木糖型-核苷。用溴化鋰或碘化鈉處理8，經(jīng)由9形成了相應(yīng)的 3'-脫氧-3'-鹵代衍生物11，將其去-0-三苯甲基化，然后氫解，將11轉(zhuǎn)化成了所需 的3'-脫氧尿苷衍生物6b。按照類似方法，由L-核糖核苷開始，可合成4和6的L-核苷 (III-a)對應(yīng)物。反應(yīng)方案2
85 制備I-b型化合物一嘌呤核苷的一個實例是合成3'-脫氧嘌呤核苷類化合物 (反應(yīng)方案3)。用2-甲氧基異丁酰鹵(X = C1或Br)處理核糖核苷13，生成了 3'-鹵 代-呋喃木糖基和2'-鹵代-阿拉伯呋喃糖基衍生物(14和15)的混合物。氫解，然后色 譜分離，獲得了相應(yīng)的3'-脫氧核苷17和2'-脫氧核苷16。將17皂化，獲得了獲得了 所需的3'-脫氧核苷20。用堿處理14與15的反應(yīng)混合物，以定量產(chǎn)率生成了單環(huán)氧化 物18，用碘化銨或碘化鈉處理后，僅獲得了 3'-木糖型碘化物19。將19氫解，獲得了 20。 用還原劑例如阮內(nèi)鎳、氫化鋰鋁或硼氫化鈉將18還原，也生成20。按照類似方法，由嘌呤L-核糖核苷開始，可合成屬于III-b的20的L-核苷對應(yīng) 物。反應(yīng)方案3 為了合成式I-c化合物，原料是5-硝基嘧啶或吡啶核苷(反應(yīng)方案4)。在溶劑例 如醇或二甲基甲酰胺中于20°C -100°C、優(yōu)選25°C -80°C溫度范圍下，用疊氮化物離子處理 5_硝基尿苷(21，參見上文)。疊氮化物離子親核攻擊21的C-6，形成了酸式-硝基鹽22， 鹽22環(huán)合生成23。將23中和，生成了二環(huán)核苷24。
反應(yīng)方案4 (ii)通過將合適的糖與堿縮合來合成
合適的糖衍生物必須通過與所選的堿縮合來制得。雖然有幾種合成3-脫氧-D-赤 呋喃戊糖(3-脫氧-D-呋喃核糖)衍生物的方法(參見Lee，W. ff.等人.T. Am. Chem. Soc., 1961，83，1906 ；Walton, E.等人..T.Am. Chem. Soc.，1964，86，2952 ；Lin, T. S.等人 丄 Med. Chem. , 1991,34,693 ；Ozols, A.M.等人.Synthesis, 1980, 557),佰是本發(fā)明開發(fā)了如反應(yīng) 方案5所示的新方法。反應(yīng)方案5 將1，2-0-亞異丙基-5-0-甲氧基羰基-a _D_呋喃木糖(25)轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的3_硫 代羰基衍生物26，然后在自由基引發(fā)劑例如2，2 ‘-偶氮二異丁腈存在下使用三烷基氫 化錫進行自由基脫氧。用乙酸、乙酸酐和硫酸的混合物將脫氧產(chǎn)物27?；?，生成28，然 后通過 Vorbruggen ‘ s 方法(參見Niedballa，U.等人.T. Org. Chem. , 1976,41,2084 Vorbruggen, H 等人 Chem. Ber. ,1981,114,1234 ；Kazinierczuk, Z 等人 J. Am. Chem. Soc^, 1984,106,6379)將其與甲硅烷化的堿縮合，獲得了嘧啶核苷29(I_a型)或相關(guān)的嘌 呤核苷(I-b型)?；蛘呖捎闷渌；绫郊柞；ο趸郊柞；?、對氯苯甲?；?qū)?甲氧基苯甲?；约捌渌坠柰榛缡宥』谆坠柰榛蚴宥』交鶎?-0H保 護。類似地，可將L-木糖轉(zhuǎn)化成25的L-糖對應(yīng)物，之后可將其進一步衍生化以獲得30的 L-核苷?；蛘?，如反應(yīng)方案6所示，可在吡啶中用甲磺酰氯、甲苯磺酰氯或三氟乙磺酰氯將 1，2-0-亞異丙基-5-0-(叔丁基二苯基甲硅烷基)_ a-D-呋喃木糖(31)磺?；垣@得32。 將32進行甲醇分解后，可用堿例如甲醇鈉的甲醇溶液處理甲基木糖苷33，以獲得核糖-環(huán) 氧化物34。用氫化鋰鋁打開環(huán)氧化物34，立體選擇性地生成了 3-脫氧糖36。在丙酮或 2- 丁酮中用溴化鋰或碘化鈉處理34，生成了 3-鹵代-3-脫氧木糖苷35。將35還原脫鹵，獲 得了 36。用氟離子源例如三正丁基氟化銨的四氫呋喃溶液或三乙基氟化氫銨除去5'-甲 硅烷基保護基，生成了 37。在硫酸存在下用乙酸酐和乙酸將37?；闪巳?0-乙酰 基-3-脫氧-D-呋喃核糖38。還可以通過氟化物處理將33轉(zhuǎn)化成39，經(jīng)過乙?；?，獲得 了 40?？墒褂肰orbrueggen' s方法將這些乙酰化的糖38和40與全三甲基甲硅烷基化的 嘧啶或嘌呤堿縮合，以生成3'-修飾的核苷。叔丁基二苯基甲硅烷基保護基可用叔丁基二甲基甲硅烷基代替。反應(yīng)方案6 (iii)合成后修飾(1-6)(a)在嘧啶核苷的C-4上修飾(I-a和Ill-a)將28或38與尿嘧啶或5_取代的尿嘧啶縮合后，在吡啶中用五硫化磷或者在甲苯 中用Lawesson' s試劑處理保護的3'-脫氧尿苷衍生物(29，R5' = CH30C0,R2' = Ac或 R5' =R2' =Ac)以生成4-硫尿嘧啶核苷41，通過用氨處理將41轉(zhuǎn)化成3'-脫氧胞苷 (43, Rl = R2 = H)?；蛘?，在堿中用甲基碘或者硫酸二甲酯將41甲基化，生成了 4-S-甲基 衍生物42。用各種親核試劑置換42的4-S-甲基，獲得了相應(yīng)的N4-取代的3'-脫氧胞 苷43。還可以將29轉(zhuǎn)化成4-(三唑-2-基)衍生物44，可將44與氨或各種胺反應(yīng)以生成 43?；蛘撸酶鞣N醇或苯酚處理44，以獲得相應(yīng)的4-0-取代的-3'-脫氧尿苷。反應(yīng)方案7 或者，將尿嘧啶核苷例如糖-保護的尿苷45(R = H)轉(zhuǎn)化成4_(甲基咪唑 鐺)46 (反應(yīng)方案8)或4-0-(2，4，6-三異丙基苯磺?；?中間體47，然后用親核試劑例如 羥基胺處理，以生成相應(yīng)的C-4修飾的核苷，例如N4-羥基胞苷(48，R = H)。反應(yīng)方案8 按照類似方法，由L_核苷對應(yīng)物開始可制得相應(yīng)的Ill-a核苷。(b)在嘧啶核苷 的C-5上修飾(I-a和III-a)(i)鹵化(反應(yīng)方案9)可用氟化劑將3'-脫氧尿苷(6，R = H)氟化，氟化劑的某些非限制性實例包括 在乙酸中的氟、在一種或多種惰性溶劑例如四氫呋喃中的selectfluor或在醇中的氟磺酸 (fluoroxisulfate)銫(參見Stovber, S.等人.J. Chem. Soc. Chem. Commun. , 1983,563), 以生成5-氟-3'-脫氧尿苷(49)。使用合適的N-鹵代琥珀酰亞胺獲得5-氯、5-溴和 5_碘尿苷衍生物(50-52)。于氧化劑例如硝酸存在下在水中用溴或者在乙酸中用碘處理6， 分別獲得了 5-溴-或5-碘-尿嘧啶核苷。還可以將胞嘧啶衍生物43 (R = H)轉(zhuǎn)化成相應(yīng) 的5-鹵代衍生物(44-56)。5-氟-3 ‘-脫氧胞苷(53，R = H)是通過將28或38與5-氟 胞嘧啶縮合，然后皂化而制得的。反應(yīng)方案9 按照類似方法，由L-核苷對應(yīng)物開始，可制得相應(yīng)的Ill-a核苷。反應(yīng)方案10描 述了通過用碳酸氫鈉溶液處理將溴化的化合物51轉(zhuǎn)化成5-羥基-3'-脫氧尿苷(63)。 用烷基碘和堿將55烷基化，獲得了 62。51與堿金屬氰化物的延長反應(yīng)生成了 5-氰基-尿 嘧啶衍生物57，可將其水合以生成5-羧酰胺58和5-羧酸59。將59轉(zhuǎn)化成烷基酯60，然 后用硼氫化鈉還原，生成了 5-羥基甲基衍生物61。或者，可用二氫吡喃和催化量的酸例如 鹽酸、硫酸或?qū)妆交撬崽幚砘衔?0，以獲得2' ,5' -二-0-保護的核苷64。用硼氫 化鈉將64還原，獲得了 65。由于65的烯丙型性質(zhì)，用甲磺酰氯或甲苯磺酰氯處理生成了 5_氯甲基-尿嘧啶衍生物66。用醇化物處理66，然后脫保護，生成了相應(yīng)的5-烷氧基甲 基-3'-脫氧尿苷(69)。類似地，用各種胺與66反應(yīng)，獲得了 67，通過弱酸性水解將其轉(zhuǎn) 化成68。將66與硫脲反應(yīng)，生成了相應(yīng)的巰基甲基衍生物(70，R = H)，用硫醇鈉處理，生 成了烷硫基衍生物70 (R=烷基)，可用過氧化氫將其氧化成相應(yīng)的砜(71)。按照類似方法 由L-核苷對應(yīng)物開始，制得了相應(yīng)的Ill-a核苷。反應(yīng)方案10 (ii)硝化(反應(yīng)方案11)在環(huán)丁砜中用四氟硼酸硝鐺處理尿苷6 (參見Huang，G. _F.等人.J. 0rg. Chem.， 1977,42,3821 ；Huang, G. -F.等人.J. Carbohyd. NucleosidesNucleotides, 1978，5，317)，獲得了相應(yīng)的5_硝基衍生物72。將硝基-核苷72催 化氫化，生成了相應(yīng)的5-氨基衍生物73。用亞硝酸將73重氮化，生成了 5-重氮基-3'-脫 氧尿苷(74)，通過水解可將其轉(zhuǎn)化成1，2，3-三唑75。已報道過將5-氨基尿苷轉(zhuǎn)化成核 糖甲硅烷基三唑的類似轉(zhuǎn)化(參見Roberts，M.等人.J. Am Chem. Soc.，1952，74，668 ； Thurber,T. C.等人.J. Am. Chem. Soc.，1973，95，3081 ;.T. 0rg. Chem.，1976，41，1041)。將 72 與疊氮化鈉在二甲基甲酰胺中反應(yīng)，獲得了三唑并嘧啶(8-氮雜嘌呤)核苷76。按照類似方法，由L-核苷對應(yīng)物開始，可制得相應(yīng)的Ill-a核苷。反應(yīng)方案11
反應(yīng)方案12顯示了類似反應(yīng)順序，其中是由3'-脫氧胞苷4生成5-硝 基-3'-脫氧胞苷(77)，然后獲得5-氨基-3'-脫氧胞苷(78)。然而，用亞硝酸處理78 導(dǎo)致形成另一 8-氮雜嘌呤核苷79。該相同反應(yīng)順序可適用于相應(yīng)的L-核苷Ill-a。反應(yīng)方案12 (iii)羥基甲基化如反應(yīng)方案13所示，在堿例如氫氧化鉀或氫氧化鈉水溶液中用甲醛處理6 (R = H， R5' =R3' =R3" =H)，生成了 5-羥基甲基-3'-脫氧尿苷(80)，通過用氯化氫的乙醇溶 液處理將其轉(zhuǎn)化成5-乙氧基甲基-3'-脫氧尿苷(81，X = 0CH2CH3)?；衔?0(R5'= R3' =180 幻還可以這樣制得通過光化學(xué)溴化將胸腺嘧啶衍生物6(1 = 013，1 5' =R3' =TBDPS)轉(zhuǎn)化成 81 (X = Br)，然后水解(Matulic-Adamic，J.等人.Chem. Pharm. Bull., 1988，36，1554)。通過鹽酸的作用將化合物80轉(zhuǎn)化成5-氯甲基衍生物(81，X = C1)，或者 通過用二乙基氨基三氟化硫(DAST)處理將化合物80轉(zhuǎn)化成5-氟甲基衍生物(81，X = F)。 用二氧化錳將80(R5' =R2' =TBDPS，R3" =H)氧化，獲得5-甲?；苌?2，其是多種 反應(yīng)，包括Wittig、Wittig-Horner、Grignard或Reformatsky反應(yīng)的良好反應(yīng)物。例如， 用乙氧基亞甲基三苯基正膦[Et0C( = 0)CH = PPh3]處理82，生成了 5-(2-乙氧基羰基) 亞乙基-3'-脫氧尿苷衍生物(83)，可經(jīng)由5-(亞乙基-2-羧酸)衍生物84將其轉(zhuǎn)化成5-亞乙基-、5-(2-氯亞乙基)-或5-(2-溴亞乙基)-3'-脫氧尿苷衍生物(85)。通過用 DAST處理82可獲得5- 二氟甲基衍生物86。這些合成途徑如反應(yīng)方案13所示。該相同反應(yīng)順序可適用于相應(yīng)的L-核苷Ill-a。反應(yīng)方案13 (iv)金屬化 在水緩沖液中，可用乙酸汞處理6或4，然后用氯化鈉處理，分別以定量產(chǎn)率生成 了相應(yīng)的5-氯汞基衍生物87或91 (反應(yīng)方案14)。將87或91與碘在乙醇中反應(yīng)，分別生 成了 5-碘衍生物52或56。通過在碘化亞銅和三乙胺存在下與1-炔烴和二(三苯基膦) 氯化鈀(Ph3P)2PdCl2i應(yīng)可將化合物52轉(zhuǎn)化成5-乙炔基衍生物88。另一方面，通過用三氟 碘甲烷和銅粉處理，將52轉(zhuǎn)化成5-三氟甲基-3'-脫氧尿苷89。用氯化鋰鈀(Li2PdCl4) 和烯丙基氯處理87，獲得了 5-烯丙基-3'-脫氧尿苷(90)。在Li2PdCl2存在下將丙烯酸 甲酯與87或91反應(yīng)，以分別生成5-(E)-(2-甲氧基-羰基)乙烯基-3'-脫氧尿苷(83) 或-胞苷(92)。將83皂化生成84，然后用N-鹵代琥珀酰亞胺，生成了 5- (E)-鹵代乙烯基 尿嘧啶核苷85 (X = Cl.Br或I)。將84熱脫羧，生成了 5-乙烯基尿嘧啶衍生物85 (X = H)。 化合物85 (X = H)還可以通過在乙酸鈀-三苯基膦絡(luò)合物存在下用乙酸乙烯酯處理52來 制得。類似地，可將91轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的丙烯酸酯衍生物92，將其水解成93后，與N-鹵代琥珀 酰亞胺反應(yīng)以生成5-(E)-(2-鹵代乙烯基)-3'-脫氧胞苷(94)。應(yīng)當(dāng)注意，將5-乙烯基 衍生物催化氫化可生成相應(yīng)的5-乙基-嘧啶核苷。用稀硫酸將5-乙炔基-3'-脫氧尿苷 (88，R = H)水合，以高產(chǎn)率生成了 5-乙?；?3'-脫氧尿苷。按照類似方法，但是由L-核苷對應(yīng)物開始，制得了相應(yīng)的Ill-a核苷。反應(yīng)方案14 (c)在嘧啶核苷的C-6上的修飾(I-a和Ill-a)在二甲基甲酰胺中于室溫用氰化鈉或氰化鉀處理5-溴-3'-脫氧尿苷(51，反應(yīng) 方案15)，以高產(chǎn)率獲得了 6-氰基-3'-脫氧尿苷(95)。通過在高溫下進一步處理將95轉(zhuǎn) 化成5-氰基異構(gòu)體59。將95水解，獲得了 3'-脫氧乳清酸核苷96。將95進行甲醇分解， 生成了甲酯97，通過氨解將其轉(zhuǎn)化成98，其中R'是CfC6低級烷基或芐基或苯基。用硼氫 化鈉將97還原，獲得了 6-羥基甲基衍生物99，通過鹽酸的作用將其轉(zhuǎn)化成6-氯甲基尿嘧 啶核苷100。通過與各種胺反應(yīng)，將100轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的6-氨基甲基-3'-脫氧尿苷(101)。 采用類似反應(yīng)順序，經(jīng)由6-氰基中間體102由3'-脫氧胞苷(55)開始生成3'-脫氧胞 苷-6-基-羧酸(103)或其甲酯104。各種6-羧酰氨基胞嘧啶核苷105可通過用相應(yīng)的 胺處理104來獲得。使用氫硼化物將104還原，獲得了 6-羥基甲基衍生物104，可通過鹽酸 的作用將其轉(zhuǎn)化成6-氯甲基-3'-脫氧胞苷107。通過與各種胺反應(yīng)可將化合物107轉(zhuǎn) 化成相應(yīng)的6-氨基甲基-3'-脫氧胞苷(108)。該相同反應(yīng)順序可適用于相應(yīng)的L-核苷 III-a。反應(yīng)方案15 反應(yīng)方案16顯示了另外的衍生化。在尿嘧啶和胞嘧啶核苷的C-6位上鋰化(參 見Tanaka,H.等人.Tetrahedron Lett. , 1979,4755 :SerRueeva, Z. A.等人.Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids, 2000,19，275)。因此，在_45°C用正丁基鋰處理全三甲基甲硅 烷基化的3'-脫氧胞苷(109，R3' =R3" =H)，然后用甲基碘或二氧化碳處理，分別生成 了 6-甲基-3'-脫氧胞苷(110)或3'-脫氧胞苷-6-甲酸(103)。按照類似方法，但是 由L-核苷對應(yīng)物開始，制得了相應(yīng)的Ill-a核苷。反應(yīng)方案16 在四氫呋喃中于-78°C用二異丙基氨基鋰處理2 ‘，5 喃-2-基)-3'-脫氧尿苷(6，R2' =R5' =THP,R3' = R3" = H)，然后與烷基鹵反應(yīng)，形 成了 6-烷基-3'-脫氧尿苷(111)。用二氧化硒將111 (n = 0)氧化，生成了 3'-脫氧尿 苷-6-甲醛(112)，在堿存在下用硝基甲烷處理后生成了硝基烯烴113。將化合物112與各 種Wittig試劑反應(yīng)以生成相應(yīng)的烯烴114-117。用格氏試劑處理112，生成6-羥基烷基衍 生物121。將121氧化，獲得了相應(yīng)的6-酰基衍生物120 (R=烷基)。另一方面，將鋰化的 6(R5' = R2' = THP,R3' =R3" =H)與苯甲醛反應(yīng)，生成了 6-羥基芐基衍生物119，通過弱氧化將其轉(zhuǎn)化成6-苯甲?；?3'-脫氧尿苷(120，R = Ph)。如反應(yīng)方案17所示，還將 鋰化的6與二苯基二硫化物反應(yīng)，獲得了 6-苯硫基-3'-脫氧尿苷118。按照類似方法，但是由L-核苷對應(yīng)物開始，制得了相應(yīng)的Ill-a核苷。反應(yīng)方案17 (d)在嘌呤核苷的C-6上修飾(I-b和III-b)通過用氯化氫或溴化氫在乙酸中處理或者用溴化氫在二氯甲烷中處理將化合物 28或38轉(zhuǎn)化成鹵化物(halogenase) 122 (反應(yīng)方案18)，并通過鈉方法在乙腈中與6_氯嘌 呤縮合，獲得了 3'-脫氧核苷123。用氫氧化鈉或氫氧化鉀水溶液處理123，生成了 3'-脫 氧肌苷(124)。用甲醇鈉的甲醇溶液處理123，獲得了 6-0-甲基-3'-脫氧肌苷(125)。 進行弱皂化，然后將123催化氫解，生成了 3' _脫氧水松蕈素(126)。將硫脲與123反應(yīng)， 生成了 6-硫嘌呤核苷127，將其S-烷基化以生成128。化合物123、127和128易于與各種 胺、羥基胺、胼和氨基醇反應(yīng)以生成3'-脫氧腺苷類似物129-133。用疊氮化鈉處理123， 生成了 6-疊氮基嘌呤核苷134。該相同反應(yīng)順序可適用于相應(yīng)的L-核苷III-b。反應(yīng)方案18 這些化合物還可以通過用亞硝酸處理6-酰胼基嘌呤核苷130來合成。將129、130 或134還原，生成了 3'-脫氧腺苷(即蛹蟲草菌素)。預(yù)計在體內(nèi)通過腺苷脫氨基酶的作 用化合物125或蛹蟲草菌素可轉(zhuǎn)化成124。在體內(nèi)可將6-未取代的嘌呤核苷126氧化成 124。將122與2-取代的-6-氯嘌呤縮合，生成了 123的2_取代的類似物。通過親核取 代反應(yīng)可將6-氯官能團轉(zhuǎn)化成各種官能團。因此，將2-氨基-6-氯嘌呤轉(zhuǎn)化成135 (反應(yīng) 方案19)，可將135轉(zhuǎn)化成各種2-氨基嘌呤核苷(136-147)。應(yīng)當(dāng)注意，2,6- 二氨基-(141) 和2-氨基-嘌呤(138)核苷是3'-脫氧-鳥苷(136)的可能前體。按照類似方法，但是 由L-核苷對應(yīng)物開始，可制得相應(yīng)的III-b核苷。反應(yīng)方案19
99 按照類似方法可合成2-氧代-、2_甲氧基-、2_硫代-、2_烷基巰基_、2_甲基-、 2_甲基-氨基-或2- 二甲基氨基-嘌呤核苷(148-154)(反應(yīng)方案20)。而且，按照類似 方法，但是由相應(yīng)的L-核苷開始，可制得III-b類型的化合物。反應(yīng)方案20 (e)在嘌呤核苷的C-2上修飾(I_b和III_b)可通過用各種鏈烷酰氯或芳酰氯?；瘜?35-147的2_氨基修飾以獲得155 (反應(yīng) 方案21)。然后，通過用硼烷_胺絡(luò)合物還原將155進一步衍生化成相應(yīng)的2-烷基氨基或 2-芳基氨基衍生物 156 (Sergueeva, Z. A.等人 Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids, 2000，19，275)?；蛘撸ㄟ^Schiemarm反應(yīng)，在氟硼酸鹽存在下重氮化，可將化合物135的 2-氨基取代，然后通過熱分解，以生成2-氟-6-氯嘌呤核苷157。此外，可用各種如上所述 的親核試劑置換這些核苷的6-氯取代基。應(yīng)當(dāng)注意，存在的2-氟取代基保護了 6-氨基不 被腺苷脫氨基酶攻擊。反應(yīng)方案21 (f)在嘌呤核苷的C-8上修飾(I-b)應(yīng)當(dāng)注意，在嘌呤核苷的8-位上修飾特別重要，因為在該位置的取代將核苷的 ^ 選構(gòu)象改變?yōu)轫樖健Ｍㄟ^在乙酸鈉存在下用溴在乙酸中處理，可將蛹蟲草菌素(158，R3' =R3" = H)、 3'-脫氧肌苷(124，R3' =R3〃=H)和 3'-脫氧鳥苷(136，R3'=鏟〃=11)在(-8位 溴化，以生成159-161 (反應(yīng)方案22)。通過硫脲的作用，用硫置換159-161中的C-8溴取代 基，以獲得162-164，可在堿例如碳酸鈉或碳酸鉀存在下，在極性溶劑例如水、醇或二甲基甲 酰胺中用烷基鹵或芳烷基鹵將其烷基化或芳烷基化，以生成165-167?？蓪⒓谆鶐€基衍生 物165-167 (R =甲基)氧化成相應(yīng)的砜168-170。通過用各種胺處理這些砜，可獲得相應(yīng)的8-氨基衍生物171-173。通過用胺處理可直接由159-161獲得多種8-氨基衍生物。而 且，通過在乙酸酐中用乙酸鈉處理，然后水解，可將159轉(zhuǎn)化成8-氧代衍生物174。用氟硼 酸三乙基氧鐺將174 O-烷基化，生成了 8-乙氧基蛹蟲草菌素175。反應(yīng)方案22 8-烷基衍生物176 (反應(yīng)方案23)是這樣制得的在四氫呋喃中于-70°C以下用 二異丙基氨基鋰處理123(R5' =R2' = THP)，然后用烷基鹵處理。該方法被成功地用于 其它核糖核苷(Tanaka, H.等人· Chem. Pharm. Bull.，1983，31，787)，但是從來沒有應(yīng)用于 3'-脫氧核苷。當(dāng)使用二氧化碳來代替烷基鹵時，獲得了嘌呤核苷8-羧酸177。將其酯 化成178，然后氨解，獲得了酰胺181，將其脫水以生成8-氰基嘌呤核苷182。用硼烷-二 甲基硫醚將178還原，獲得了醇179。用二甲亞砜和草酸進行弱氧化，獲得醛180?；衔?179和180是用于各種修飾的多用途中間體。反應(yīng)方案23 B. Ila-c 和 IVa_c 型化合物(i)由由預(yù)形成的核苷合成可使用幾種方法以給預(yù)形成的核苷引入2' ,3' _不飽和。反應(yīng)方案24中顯示了 一個實例。在堿中、優(yōu)選在吡啶中，在0°C -80°C、優(yōu)選在室溫，優(yōu)選用叔丁基二甲基甲硅烷基 鹵或叔丁基二苯基甲硅烷基鹵將核苷7選擇性地0-甲硅烷化，然后在堿中、優(yōu)選在吡啶中， 在0°C -80°C、優(yōu)選在室溫，優(yōu)選用甲磺酰氯或甲苯磺酰氯磺?；?，以高產(chǎn)率生成了 8，可通 過用堿處理將8容易地轉(zhuǎn)化成來蘇糖酸環(huán)氧化物183。將183與鹵離子、優(yōu)選碘離子反應(yīng)， 例如用碘化鈉在丙酮或甲基乙基酮中處理，僅生成了反式-碘代醇184，X = 1)。將184甲 磺?；?，經(jīng)由185以高產(chǎn)率生成了烯烴186。經(jīng)過短的反應(yīng)時間后，可以以不佳的產(chǎn)率分離 到化合物185。用氟化物例如四丁基氟化銨將186去-0-甲硅烷化，以高產(chǎn)率獲得了所需烯 烴187，II-a型核苷。反應(yīng)方案24
103 由2' _脫氧核苷例如188 (反應(yīng)方案25)開始也可以制得II_a型烯屬糖核苷。 在吡啶中，在-10°C -80°C溫度范圍下、優(yōu)選在室溫，優(yōu)選用甲磺酰氯將188磺?；?，生成了 二-0-甲磺酸酯189，通過用堿水溶液例如氫氧化鈉水溶液處理，生成了 3' ,5'-脫水糖 核苷190。通過用無水強堿例如叔丁醇鉀的二甲亞砜溶液在-10°C -80°C溫度下、優(yōu)選在室 溫處理10分鐘至過夜、優(yōu)選1. 5-3小時，可容易地將核苷190以高產(chǎn)率轉(zhuǎn)化成所需的187。反應(yīng)方案25 反應(yīng)方案26顯示了制備II-a型2'-取代的烯屬糖核苷的一個實例。在吡啶中， 優(yōu)選用三苯甲基氯或叔丁基二甲基甲硅烷基氯或叔丁基二苯基甲硅烷基氯將1_(2'-脫 氧-2'-氟-D-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶(191)選擇性地脫保護以生成192。在吡 啶中，優(yōu)選用甲磺酰氯將192磺?；闪思谆撬狨?93，通過在無水惰性溶劑例如二氯 甲烷中用非親核性堿例如DBU或DBN處理，獲得了 2，3'-脫水核苷194。通過用叔丁醇鉀 的二甲亞砜溶液處理，可容易地將該化合物轉(zhuǎn)化成2'-氟-烯屬糖核苷195。將195脫保 護，生成了所需的2'-氟化II-a型核苷196。5' -0-甲硅烷基保護可獲得比三苯甲基保 護更好的總產(chǎn)率。反應(yīng)方案26
所有這些反應(yīng)都可適用于相應(yīng)的嘧啶L-核苷以制備IV-a型核苷。II-b型核苷可易于由197制得(反應(yīng)方案27)。用例如叔丁基二甲基甲硅烷基或 叔丁基二苯基甲硅烷基將197在5' _位上選擇性地保護，獲得了 198。在堿中例如在吡唳 中用甲苯磺酰鹵或甲磺酰鹵將其磺?；@得了保護的烯屬核苷199。用氟化物例如四丁基 氟化銨將199去-0-甲硅烷化，以高產(chǎn)率獲得了所需烯烴200，II-b型核苷?；蛘?，用乙酸鉻處理15 (參見反應(yīng)方案3)，用堿脫保護后，以良好產(chǎn)率生成了 200。反應(yīng)方案27 通過相同方法，但是使用嘌呤L-核苷，可獲得相應(yīng)的IV-b型烯屬糖L-核苷。(ii)通過堿和不飽和糖衍生物的縮合來合成在堿、優(yōu)選在吡啶中，優(yōu)選用叔丁基二甲基甲硅烷基鹵將市售4-羥基甲基-2-戊 烯酮(201，反應(yīng)方案28)甲硅烷化，以生成202，用硼氫化物將其還原，以獲得203。乙酰化 后，將產(chǎn)物204與甲硅烷化的堿例如5-取代的尿嘧啶縮合。獲得了復(fù)雜的混合物，其中正 位異構(gòu)核苷(205)是主要組分。通過色譜法分離出正位異構(gòu)體206和207，然后將每種正位 異構(gòu)體去甲硅烷基化，分別獲得核苷208(II-a型)和a-核苷209(XVIII-cS)。
反應(yīng)方案28 反應(yīng)方案29顯示了另一實例。通過醛210與Ph3P = CFC02Et的Wittig縮合可制 得2-氟-內(nèi)酯212。用甲硅烷基保護，并用DIBAH還原，然后將產(chǎn)物乙?；?，獲得了 213。在 惰性溶劑例如二氯甲烷或二氯乙烷中，在路易斯酸例如三氟甲磺酸三甲基甲硅烷基酯或四 氯化錫存在下，用甲硅烷基化的嘌呤例如6-氯嘌呤與213縮合，獲得了正位異構(gòu)體混合物 214。使用硅膠柱分離這些正位異構(gòu)體。將各種正位異構(gòu)體去甲硅烷基化后，可獲得相應(yīng)的
核苷 215(II-b 型)和 a-核苷216(XVIII-d型)。反應(yīng)方案29
106 C.合成 carba-糖核苷(V_X)迄今為止在自然界中發(fā)現(xiàn)的carba-核苷僅有腺嘌呤核苷，即aristeromycin和 n印lanocins，并且它們非常昂貴或者不能通過商購獲得。因此，由零開始來化學(xué)合成這些 類型的核苷。首先制備carba-糖衍生物，然后在糖上構(gòu)建雜環(huán)糖苷配基以制備carba-糖 核苷，或者對于嘌呤核苷，直接將該堿與carba-糖縮合。反應(yīng)方案30舉例說明了 5-氟-carba-胞苷(227，V-a型)的合成。carba-糖中 間體219可通過本領(lǐng)域已知的任何方法合成。Ali等人.(Tetrahedron Letters，1990，31， 1509)公開了將D-核糖酸內(nèi)酯(ribonolaCtone)217轉(zhuǎn)化成戊烯酮中間體218。然后可通過 任何已知的還原劑，優(yōu)選硼氫化鈉在甲醇中于0°C將酮218還原1小時，以獲得醇219。在 二氯甲烷中，在三乙胺存在下，于0°C優(yōu)選用甲磺酰氯將219磺?；?小時，以生成220，然 后在DMF中于140°C用疊氮化鈉將其處理過夜，以生成221。然后可通過任何已知的還原劑
例如Phgl^ (Staudinger法)或催化氫解、優(yōu)選用披鈀炭催化氫解將疊氮化物221容易地
還原。將所得胺222與0 -甲氧基丙烯?；惽杷狨ピ贒MF中進行Warrener-Shaw反應(yīng)， 然后用氫氧化銨處理，以經(jīng)由直鏈中間體223形成保護的carba-尿苷224。通過用任何氟 化劑將224氟化可獲得保護的5-氟-carba-尿苷(225)。氟化劑優(yōu)選是在乙酸中的氟。用 堿、優(yōu)選三乙胺中止反應(yīng)后，可按照類似于反應(yīng)方案7中描述的方法將尿嘧啶核苷225轉(zhuǎn) 化成保護的carba-5-氟胞苷(226)。用酸，優(yōu)選用三氟乙酸/水(2 lv/v)于50°C處理 3小時來除去226的保護基，以生成227。在三乙胺存在下，在二氯甲烷中用三氟甲磺酰氯將219磺?；?，生成了三氟甲磺 酸酯，與嘌呤堿例如腺嘌呤和氫化鈉在惰性溶劑例如乙腈或DMF中反應(yīng)后，直接獲得了相 應(yīng)的嘌呤核苷(V-b型)。通過使用相同方法，但是由L-核糖酸內(nèi)酯開始，可獲得相應(yīng)的L-核苷對應(yīng)物 (VIII型核苷)。
反應(yīng)方案30 或者，通過用四氧化鋨氧化將市售(lR)-(-)-氮雜二環(huán)[2.2. 1]庚-5-烯-3-酮 (228，反應(yīng)方案31)轉(zhuǎn)化成2，3-二羥基-內(nèi)酰胺229。將氯化氫的甲醇溶液將229進行甲 醇分解后，用2，2_ 二甲氧基丙烷在丙酮中或者用1，1_ 二甲氧基環(huán)己烷在環(huán)己醇中處理產(chǎn) 物230，生成了酮縮醇例如231，用硼氫化鈉將其還原成232。通過與0 -甲氧基丙烯?；?氰酸酯反應(yīng)，然后用氨處理，將氨基醇232轉(zhuǎn)化成2' ,3' -0-亞環(huán)己基-carba-尿苷。用 酸處理，優(yōu)選用三氟乙酸在甲醇中處理，生成了 carba-尿苷(233)。carba-5-氟胞苷(227) 可通過本領(lǐng)域眾所周知的方法由233容易地獲得。反應(yīng)方案31 按照類似方法，但是由另一旋光異構(gòu)體(lR)_(+)_氮雜二環(huán)[2. 2. 1] 庚-5-烯-3-酮開始，可獲得相應(yīng)的L-核苷類似物(VIII型)。VI型核苷是由V型核苷制得的。反應(yīng)方案32中顯示了另一個實例。通過用二 甲基甲酰胺酮縮二甲醇在DMF中處理，然后三苯甲基化，將Arister0myCin(234)或任何 carba-核糖核苷轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的N-[(二甲基氨基)亞甲基]_5' _0_三苯甲基衍生物235。將 235與硫代羰基二咪唑反應(yīng)，生成了 2'，3' -0-硫代碳酸酯236，在2，2'-氮雜二(2-甲 基丙腈)存在下用三正丁基氫化錫進行自由基還原后，分別獲得了烯烴237以及3'-脫 氧-和2'-脫氧-aristeromycine衍生物238和239?？稍诠枘z柱上將這些產(chǎn)物容易地 分離。用酸處理后，每一這些產(chǎn)物分別生成了相應(yīng)的游離核苷，240、241和242。該方法特 別適于在短時間內(nèi)制備用于篩選的少量幾種核苷。通過相同方法，但是用VIII型核苷代替V型核苷，可獲得相應(yīng)的L-核苷，IX型。反應(yīng)方案32
109 如反應(yīng)方案33所示，將V型立體選擇性地轉(zhuǎn)化成VI型也是可能的。將 5-氟-carba-尿苷(233)轉(zhuǎn)化成5‘ -0-三苯甲基-2‘ ,3' -二 -0-甲磺酰基衍生物243。 用堿的水溶液處理243，經(jīng)由2，2'-脫水核苷中間體244獲得了來蘇糖環(huán)氧化物245。用 碘化鈉在丙酮或丁酮中將環(huán)氧化物的環(huán)打開，生成了反式-碘代醇246，進行甲磺?；?，經(jīng) 由247獲得了烯烴248。將247去-0-三苯甲基化，獲得了 249。還可以使用叔丁基二甲基 甲硅烷基或叔丁基二苯基甲硅烷基保護的甲硅烷基保護來代替5' -0-三苯甲基保護。還 可以用通過試劑例如甲苯磺酰氯、三氟甲磺酰氯或三氟甲磺酸酐進行的其它磺?；瘉泶?甲磺?；Ｍㄟ^相同方法，但是使用VIII型核苷代替V型核苷，可獲得相應(yīng)的IX型L-核苷。反應(yīng)方案33 VI-b型核苷還可以由2-環(huán)戊烯-1-酮(250，反應(yīng)方案34)合成。將叔丁氧基甲 基銅酸鋰[(t-BuOCH2)2CuLi]與250進行邁克爾加成，生成了加合物251。依據(jù)Wilson等 人的方法(Synthesis，1995，1465)將251進行苯基硒化，該苯基硒化主要在相對于叔丁氧 基甲基呈反式的位置上發(fā)生，生成了 252。DIBAH還原以立體選擇方式將羰基還原成羥基， 生成了 253。在堿中優(yōu)選用三氟甲磺酰氯或三氟甲磺酸酐將其磺?；闪?254，在惰性 溶劑例如乙腈中，與鈉-嘌呤(由例如腺嘌呤和NaH制得的)縮合，以立體選擇方式獲得了 255。用過氧化氫在吡啶中將硒化物255氧化，結(jié)果順利地將255轉(zhuǎn)化成了烯烴256。用弱 酸處理256，生成了游離核苷240?；蛘?，將253乙?；?，然后在三氟甲基磺酸三甲基甲硅烷基酯存在下與甲硅烷化 的嘧啶例如三(三甲基甲硅烷基)_5_氟胞嘧啶縮合，以高產(chǎn)率生成了相應(yīng)的嘧啶核苷，通 過氧化并用酸除去產(chǎn)物的叔丁基可由其容易地制得VI-a型核苷。使用相同方法，但是用VIII型核苷代替V型核苷，可獲得相應(yīng)的IX型L-核苷。反應(yīng)方案34 此外，2' ,3' _不飽和核苷的外消旋carba類似物可通過Shi等人的方法 (.!■ Med. Chem. , 1999，42，859)制得，其中在Shi等人的方法中，是由環(huán)戊烯_4_羧酸乙酯經(jīng) 過多個步驟制得外消旋順式_3，4-環(huán)氧-環(huán)戊烷甲醇257 (反應(yīng)方案35)。用二苯基聯(lián)硒化 物打開環(huán)氧化物后，獲得了 258，將其乙?；缓笥眠^氧化物處理，生成了二乙酸酯259。 在Pd(PPh3)4存在下，在惰性溶劑例如四氫呋喃中，用鈉嘧啶(通過將尿嘧啶或胞嘧啶衍生 物與NaH在二甲亞砜中反應(yīng)而制得的)處理259，將產(chǎn)物脫乙酰化后，以10-70%的產(chǎn)率獲 得了 260。反應(yīng)方案35 反應(yīng)方案36 顯示了由 Wolfe 等人(T. Org. Chem. ,1990,55,4712)用 D_ 核糖酸 內(nèi)酯制得的261來合成VII型3，4-不飽和carba核苷。用亞磺酰氯中止叔丁氧基甲基 對261 (261，反應(yīng)方案36)的邁克爾加成，然后將產(chǎn)物與碳酸鈣一起加熱，生成了環(huán)戊烯酮 262。用DIBAH將262還原，然后磺?；?，獲得了 263。如上文所述用NaH將263 (優(yōu)選R = CF3)與嘌呤堿縮合，生成了嘌呤核苷VII-b例如n印lanocin A (264)。用NaN3處理263 (優(yōu) 選R = Me)，生成了 265，通過反應(yīng)方案30中已描述的方法可將265容易地轉(zhuǎn)化成包括266 在內(nèi)的各種嘧啶核苷(Vll-a)。由L-核糖酸內(nèi)酯開始，可容易地制得相應(yīng)的L-核苷對應(yīng)物(X-a和X_b)。反應(yīng)方案36 D.合成XI和XII型核苷有幾種可用于合成這些類型核苷的方法。用于本發(fā)明的一些核苷主要是以下述 方式制得的。將2，2_ 二甲氧基乙酸的1-薄荷基酯(267，反應(yīng)方案37)與巰基乙酸縮合以 獲得非對映體混合物268，268可易于在硅膠柱上分離。用NaBH4在乙醇中將268還原，然 后乙?；@得了 269，在四氯化錫存在下將其與甲硅烷化的堿縮合。主要獲得了所需的保 護的核苷，通過色譜法純化。進行去-0-乙?；@得了相應(yīng)的未保護的核苷270。由 ^{-80(3-1^-脯氨酸的2，2-二甲氧基乙酯也獲得了 270。在MgS04*CAS存在下，用3當(dāng)量 的巰基乙酸在二氯甲烷中處理該化合物，獲得了作為非對映體混合物的271，通過色譜法將 其分離。用Li(t-BuO)3AlH在四氫呋喃中將271的每種非對映體還原，然后乙?；?，獲得了 272，將其與甲硅烷化的堿縮合，然后對產(chǎn)物脫保護，生成了 270。反應(yīng)方案37
用于本發(fā)明的XIII型核苷是用本領(lǐng)域已知的方法制得的。在優(yōu)選的實施方案中， XIII-a型核苷是按照所報道的一步或兩步合成(Nucleic Acid Chem, 1978，1，272和343)， 通過磺酰化將5' -0H活化，然后用堿處理或用Ph3P和重氮二甲酸二乙酯直接處理未保護 的核苷。用于本發(fā)明的XIV型核苷的制備是通過有幾分類似于Duschinsky等人的合成相 應(yīng)的5-氟脫氧尿苷加合物的方法(J. Med. Chem.，1967，10，47)來進行合成的。反應(yīng)方案38 中顯示了使用5-氟尿苷(273)的幾個實例。在C-5位含有強吸電子取代基的任何嘧啶核 苷經(jīng)歷類似加合物形成。用溴在甲醇中處理273，生成了加合物274，可通過催化氫化將其 還原成275。在水中處理，生成了溴代醇277，在乙酸酐存在下在乙酸中通過溴的作用獲得 了 276。相應(yīng)的其它加合物可通過使用其它次鹵酸鹽例如次氯酸鹽來制得，生成了 278。每 一這些加合物都是非對映體混合物，并且以這樣的形式用于篩選。反應(yīng)方案38 E. XV-XVIII 型核苷用于本發(fā)明的核苷是通過依據(jù)本領(lǐng)域眾所周知的方法將4-硫尿苷和6-硫肌苷衍 生物氧化而制得的。XVI型化合物是C-核苷。XVI-a核苷是通過本領(lǐng)域已知方法由V-尿 苷合成的(Watanabe，“C-核苷化學(xué)，，，Townsend，L. B.，Ed. , In "Chemistry of Nucleosides andNucleotides”，Plenum, Publ. , New York, Vol.，3，421，1994)，或者通過將芳族化合物與 保護的核糖酸內(nèi)酯縮合，然后構(gòu)建產(chǎn)物來合成(例如Kabat等人.，J. Med. Chem.，1987，30， 924)。核苷XVI-b和XVI-c是依據(jù)Pankiewicz等人開發(fā)的改進方法來制備的(Carbohydr. Res.，1984，127,227 ^Nucleosides Nucleotides, 1991，10，1333)。嘌呤-型 XVI_d C-核苷 是依據(jù)Chu等人報道的方法合成的(J. Heterocycl. Chem.，1980，17，1435)。用于本發(fā)明的 XVII型核苷是通過4'-甲?；塑张c甲醛的交叉-醛醇反應(yīng)或者預(yù)形成的糖與堿的縮合 來合成的。某些XVIII類型的核苷的制備已經(jīng)在前面描述過。提供下述實施例是為了更好地理解本發(fā)明方法。這些實施例僅是舉例說明，并不 是限制本發(fā)明的范圍。在不背離本發(fā)明方法的一般范圍的情況下，可用同等的、類似的或合 適的溶劑、試劑或反應(yīng)條件來代替所述這些特定的溶劑、試劑或反應(yīng)條件。
實施例熔點是在開口毛細管中在Electrothermal數(shù)字式熔點儀上測定的，并且沒有校 正。UV吸收光譜是在Uvikon 931 (K0NTR0N)分光光度計上在乙醇中記錄的。t-NMR光譜是 在室溫用Varian Unity Plus 400光譜計測定的?；瘜W(xué)位移是以相對于作為參照的內(nèi)標(biāo)四 甲基硅烷的低場的ppm給出的。進行氘交換、去耦實驗或2D-C0SY以確定質(zhì)子賦值。信號多 重性是以s(單峰)、d(雙峰)、dd(雙雙峰)、t(三重峰)、q(四重峰)、br (寬的)、m(多重 峰)表示的。所有J-值是Hz給出的。FAB質(zhì)譜是以正_(FAB>0)或負_(FAB<0)離子 模式在JE0L DX 300質(zhì)譜儀上記錄的。基質(zhì)是3-硝基芐醇(NBA)或甘油與硫代甘油(GT) 的混合物(50 50，v/v)。比旋度是在Perkin-Elmer 241分光偏振計(路徑長度lcm)上測定的，并且以K^deg cm2 g—1為單位給出。元素分析是通過Atlantic Microlab Inc. (Norcross, GA)進行的。用元素或官能團的符號表示的分析在理論值的士0.4%范圍內(nèi)。 薄層色譜是在Whatman PK5F硅膠板上進行的，通過UV吸收，然后用10%的硫酸乙醇溶液炭 化并加熱來實現(xiàn)產(chǎn)物的顯形。柱色譜法是在Silica Gel (Fisher, S733-1)上于常壓下進行 的。實施例11-(2，5_ 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脫氧-D-呋喃木糖基)_N4-乙?；奏?(2，R = H)在回流狀態(tài)下用30分鐘向N4-乙酰基胞苷(5. 7g，0. 02mol)在乙腈(300mL)內(nèi)的 懸浮液中加入乙酰溴(15mL，0. 2mol)。將該混合物回流4小時，然后真空濃縮至干。將殘余 物溶解在二氯甲烷(150mL)中，并用水(150mL)洗滌。將有機層干燥(Na2S04)，蒸發(fā)，將殘余 物從乙醇中結(jié)晶，獲得了 1- (2，5- 二 -0-乙?；?3-溴-3-脫氧-0 -D-呋喃木糖基)-N4-乙 ?；奏?2,R = H,3. 4g,40%),mp 179_180°C。NMR(CDC13) 8 :10. 2 (bs，1H，NHAc)，8. 1 (d，1H，H_6，J5,6 = 7. 5Hz)，7. 5 (d，1H， H-5，J5,6 = 7. 5Hz) ,6. 0(d, 1H，H_1，，丄’,2’ < 1Hz) ,5. 5(d, 1H，H_2，，丄’,2’ < 1，J2’,3’ = 0Hz)， 4. 2-4. 7(m，4H，H_3，，4，，5，，5”)，2. 0-2. 4 (3s, 9H, 3Ac).按照類似方法，但是使用相應(yīng)的N-乙?；眨频昧讼铝泻塑占捌銵-對應(yīng)物1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基_5_氟胞 嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙?；鵢5_氯胞 嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基_5_溴胞 嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙?；鵢5_碘胞 嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基_5_甲基 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙?；鵢5_乙基 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脫氧-3 _D_呋喃木糖基)-N4-乙?；鵢5_正丙 基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴-3-脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基_5_異丙 基胞嘧啶， 1- (2，5- 二 -0-乙?；?3-溴-3-脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙?；鵢5_乙烯 基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙?；鵢5_ (2_氯 乙烯基)胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙?；鵢5_ (2_溴 乙烯基)胞嘧啶，
1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙?；鵢5_ (2_碘 乙烯基)胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙?；鵢5_ (2_甲 氧基羰基-乙烯基)-胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙?；鵢5_ (2_羥 基羰基-乙烯基)-胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙?；鵢5_苯基 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙?；鵢5_芐基 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲?；奏?，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴-3-脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲?；鵢5_氟 胞嘧啶， 1- (2，5- 二 -0-乙?；?3-溴-3-脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲?；鵢5_氯 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲?；鵢5_溴 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲?；鵢5_碘 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲?；鵢5_甲 基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲?；鵢5_乙 基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲?；鵢5_正 丙基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲?；鵢5_異 丙基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲?；鵢5_乙 烯基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲酰 基-5-(2-氯乙烯基)胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴-3-脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲酰 基-5-(2-溴乙烯基)胞嘧啶，1-(2，5_ 二 -0-乙?；?3-溴-3-脫氧_D_呋喃木糖基)_N4-苯甲酰 基-5-(2-碘乙烯基)胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲酰 基-5-(2-甲氧基羰基-乙烯基)胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲酰 基-5-(2-羥基羰基-乙烯基)胞嘧啶，
1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-苯甲酰基_5_苯 基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-苯甲?；鵢5_芐 基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脫氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香?；奏?，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香?；鵢5_氟 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香?；鵢5_氯 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香?；鵢5_溴 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴-3-脫氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香?；鵢5_碘 胞嘧啶， 1- (2，5- 二 -0-乙?；?3-溴-3-脫氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香?；鵢5_甲 基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香?；鵢5_乙 基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脫氧-β -D-呋喃木糖基)-N4茴香?；鵢5_正 丙基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脫氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香?；鵢5_異 丙基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香?；鵢5_乙 烯基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-β _D_呋喃木糖基)-N4-茴香酰 基-5-(2-氯乙烯基)胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-β _D_呋喃木糖基)-N4-茴香酰 基-5-(2-溴乙烯基)胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-β _D_呋喃木糖基)-N4-茴香酰 基-5-(2-碘乙烯基)胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-β _D_呋喃木糖基)-N4-茴香酰 基-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)_胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴-3-脫氧-β _D_呋喃木糖基)-N4-茴香酰 基-5- (2-羥基羰基-乙烯基)-胞嘧啶，1- (2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴-3-脫氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香?；鵢5_苯 基胞嘧啶，和1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香酰基_5_芐基胞嘧啶。實施例21-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脫氧-β -D-赤呋喃戊糖基)-N4-乙?；奏?br> 在Parr裝置內(nèi)，在碳酸鈣粉末(lg)和Pd-BaS04催化劑(0. 5g)存在下，將1_(2， 5- 二 -0-乙?；?3-溴-3-脫氧-0 -D-呋喃木糖基)-N4-乙?；奏?2. 15g，5mmol) 在50%的甲醇水溶液(100mL)中于45psi的初始壓力下氫化。通過過濾除去催化劑，將濾 液真空濃縮。將殘余物從乙醇中結(jié)晶，生成了 1-(2，5-二-0-乙?；?3-脫氧-0-0-赤呋 喃戊糖基)-N4-乙?；奏?3,R = H,1.06g,60% ),mp 174_177°C。
'HNMR^DC^) 6 10. 30 (bs, 1H, NHAc), 8. 05 (d, 1H, H_6，J5，6 = 7. 5Hz)，7. 43 (d，1H，H_5， J5，6 = 7. 5Hz)，5. 90 (d, 1H, H_l，，Jl，，2，= 1. 0Hz)，5. 46 (m, 1H, H_2，)，4. 30-4. 80 (3H, m, H-4，，5，，5”)，2. 10，2. 27(2s，9H，3Ac)，1. 60-2. 00 (m, 2H, H_3，，3”).按照類似方法，但是使用相應(yīng)的3 ‘-溴-木糖核苷，制得了下列核苷及其L-對應(yīng) 物1-(2，5_ 二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊糖基)-N4-苯甲?；奏ぃ?-(2，5- 二 -0-乙?；?3-脫氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)-N4-苯甲?；鵢5_甲基胞 嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-脫氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)-N4-苯甲酰基_5_乙基胞 嘧啶， 1- (2，5- 二 -0-乙酰基-3-脫氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)-N4-苯甲酰基_5_正丙基 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-脫氧-0 _D_赤呋喃戊糖基)-N4-苯甲?；鵢5_異丙基 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-脫氧-0 _D_赤呋喃戊糖基)-N4-苯甲?；鵢5_苯基胞 嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-脫氧-0 _D_赤呋喃戊糖基)-N4-苯甲?；鵢5_芐基胞 嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-脫氧-0 _D_赤呋喃戊糖基)-N4-茴香?；奏ぃ?-(2，5- 二 -0-乙?；?3-脫氧-0 _D_赤呋喃戊糖基)-N4-茴香?；鵢5_甲基胞 嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-脫氧-0 _D_赤呋喃戊糖基)-N4-茴香酰基_5_乙基胞 嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-脫氧-0 _D_赤呋喃戊糖基)善茴香?；鵢5_正丙基 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脫氧-0 _D_赤呋喃戊糖基)善茴香?；鵢5_異丙基 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脫氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)善茴香?；鵢5_苯基胞 嘧啶，和 1- (2，5- 二 -0-乙酰基-3-脫氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)善茴香?；鵢5_芐基胞 嘧啶。實施例31-(3-溴-3-脫氧-3 -D-呋喃木糖基)胞嘧啶(3，R = H)
在0°C將1- (2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙?；?胞嘧啶(4. 31g，0.01mol)用氨的飽和甲醇溶液(100mL)處理30分鐘，然后在35°C以下真 空濃縮。從甲醇中結(jié)晶殘余物，獲得了 1-(3_溴-3-脫氧-3-D-呋喃木糖基)胞嘧啶(3， R = H)。UV禾口 NMR(D20)與木糖型結(jié)構(gòu)一致。按照類似方法，但是使用相應(yīng)的N-?；眨频昧讼铝泻塑占捌銵-對應(yīng)物1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基-5-氟胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基-5-氯胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基-5-溴胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基-5-碘胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基-5-甲基胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基-5-乙基胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基-5-正丙基胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基-5-異丙基胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基-5-乙烯基胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基-5-(2-氯乙烯基)胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基-5-(2-溴乙烯基)胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基-5-(2-碘乙烯基)胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基-5-(2-氨基羰基乙烯基)胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基-5-(2-羥基羰基乙烯基)胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基-5-苯基胞嘧啶，和
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基-5-芐基胞嘧啶。
實施例43'-脫氧胞苷(4，R = H)將1- (2，5- 二 -0-乙?；?3-脫氧-3 _D_赤呋喃戊糖基)善乙?；奏?3， R = H,700mg,2mmol)溶解在氨的甲醇溶液(20mL，在0°C飽和的)中，將該溶液在室溫保持 過夜。通過真空蒸發(fā)除去溶劑，將殘余物溶解在乙醇(20mL)中，用2N硫酸將該溶液的pH調(diào) 節(jié)至3。收集沉淀，從水-乙醇中結(jié)晶，獲得了作為半硫酸鹽的3'-脫氧胞苷(4) (408mg， 74% ) 0 Mp 202-203V (分解)。NMR(D20) 8 8. 23 (d, 1H, H_6，J5,6 = 8. 0Hz) ,6. 27 (d, 1H, H_5，J5,6 = 8. 0Hz)， 5. 84 (d, 1H，H-1，，1’,2’ = 1. 0Hz), 4. 6 (m, 1H，H_2，)，3. 9 (m，3H，H_4，，5，，5”)，1. 95-2. 15 (m, 2H, H-2，，2”).按照類似方法，但是使用相應(yīng)的?；?'-脫氧核苷，制得了下列核苷及其L-對應(yīng) 物3'-脫氧-5-甲基胞苷，3'-脫氧-5-乙基胞苷，3'-脫氧-5-正丙基胞苷，3'-脫 氧-5-異丙基胞苷，3'-脫氧-5-苯基胞苷和3'-脫氧-5-芐基胞苷。實施例52' ,5' -二-0-乙?；?3'-脫氧尿苷將2' ,5' -二-0-乙?；?3-脫氧-N4-乙酰基胞苷(1.06g，3mol)溶解在70%乙 酸中，將該溶液輕微回流過夜。將該化合物真空濃縮后，從乙醇中結(jié)晶殘余物，獲得了 2'， 5' -二-0-乙酰基-3'-脫氧尿苷(660mg，96% )。屮NMR光譜表明其含有兩個乙?；?、兩個亞甲基和兩個烯屬質(zhì)子。按照類似方法，但是使用相應(yīng)的3'-脫氧胞苷(4)，制得了下列2'， 5' -二-0-乙?；?3'-脫氧尿苷及其L-對應(yīng)物2'，5' -二-0-乙酰基-3-脫氧-5-甲 基尿苷，2' ,5' -二-0-乙?；?3-脫氧-5-乙基尿苷，2' ,5' -二-0-乙?；?3-脫 氧-5-正丙基尿苷，2' ,5' -二-0-乙?；?3-脫氧-5-異丙基尿苷，2' ,5' -二-0-乙 ?；?3-脫氧-5-苯基尿苷和2'，5' -二-0-乙?；?3-脫氧-5-芐基尿苷。按照類似方法，但是使用相應(yīng)的3'-脫氧胞嘧啶核苷(2)，制得了下列尿嘧啶核 苷及其L-對應(yīng)物2'，5'-二 -0-乙?；?3-脫氧5-氟尿苷，
2'，5'-二 -0-乙酰基-3-脫氧-5--氯尿苷，
2'，5'-二 -0-乙?；?3-脫氧-5--溴尿苷，
2'，5'-二 -0-乙?；?3-脫氧-5--碘尿苷，
2'，5'-二 -0-乙?；?3-脫氧-5--甲基尿苷，
2'，5'-二 -0-乙?；?3-脫氧-5--乙基尿苷，
2'，5'-二 -0-乙?；?3-脫氧-5-_正丙基尿苷，
2'，5'-二 -0-乙?；?3-脫氧-5-_異丙基尿苷，
2'，5'-二 -0-乙?；?3-脫氧-5--乙烯基尿苷，
2'，5'-二 -0-乙?；?3-脫氧-5--(2-氯乙烯基)尿苷，
2'，5'-二 -0-乙酰基-3-脫氧-5--(2-溴乙烯基)尿苷，
2'，5'-二 -0-乙酰基-3-脫氧-5--(2-碘乙烯基)尿苷，
2'，5'-二 -0-乙?；?3-脫氧-5-_(2_甲氧基羰基乙烯基)尿苷，
2'，5'-二 -0-乙?；?3-脫氧-5-_(2_羥基羰基乙烯基)尿苷，
2'，5'-二 -0-乙?；?3-脫氧-5--苯基尿苷，和
2'，5'-二 -0-乙?；?3-脫氧-5--芐基尿苷。實施例61-(2，5- 二 -0-乙?；?3-溴_3_脫氧-3 _D_呋喃木糖基)尿嘧啶(5，R = H)將1-(2，5_ 二-0-乙酰基-3-溴-3-脫氧-3-D-呋喃木糖基)-N4-乙?；?嘧啶(2，R = H, R' = CH3) (4. 31g,0.01mol)溶解在70 %乙酸中，將該溶液輕微回流4 小時。將該混合物真空濃縮后，將殘余物從乙醇中結(jié)晶，獲得了 2' ,5' -二-0-乙酰 基-3'-溴-3'-脫氧尿苷(5，2.80g，91% )。NMR光譜表明其含有兩個乙酰基、兩個 亞甲基和兩個烯屬質(zhì)子。按照類似方法，但是使用相應(yīng)的2'，5' -二-0-乙?；?3'-溴-3'-脫 氧-N4-?；闸?，制得了下列1，5- 二 -0-乙酰基-3 ‘-溴-3 ‘-脫氧尿苷及其L-對 應(yīng)物1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-脫氧-D-呋喃木11基)-5-氟尿嘧啶，
1-(2，5-二二 -0-乙?；?3-脫氧-D-呋喃木11基)-5-氯尿嘧啶，
1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-脫氧-D-呋喃木11基)-5-溴尿嘧啶，
1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-脫氧-D-呋喃木11基)-5-碘尿嘧啶，
1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-脫氧-D-呋喃木11基)-5-甲基尿嘧啶，
1-(2，5-二-0-乙酰基-3-脫氧-D--呋喃木詩唐基)-5_乙基尿嘧啶，
1-(2，5-二-0-乙?；?3-脫氧-D--呋喃木詩唐基)_5_正丙基尿嘧啶，
1-(2，5-二-0-乙?；?3-脫氧-D--呋喃木詩唐基)-5-異丙基尿嘧啶，
1-(2，5-二-0-乙?；?3-脫氧-D--呋喃木詩唐基)-5_乙烯基尿嘧啶，
1-(2，5-二-0-乙?；?-脫氧-旦-D-呋喃木糖丨基)-5-(2-氯乙烯基)尿嘧啶，
1-(2，5-二-0-乙?；?3-脫氧-D--呋喃木1唐基)-5-(2-溴乙烯基)尿嘧啶，
1-(2，5-二-0-乙酰基-3-脫氧-D--呋喃木1唐基)-5-(2-碘乙烯基)尿嘧啶，
1-(2，5-二乙?；?3-脫氧--D--呋喃木1|基)-5- (2-甲氧基羰基乙烯基)尿嘧啶，
1-(2，5-二乙酰基-3-脫氧--D-呋喃木_■基)-5-(2-羥基羰基乙烯基)尿嘧啶，
1-(2，5-二-0-乙?；?3-脫氧-D--呋喃木詩唐基)-5_苯基尿嘧啶，和
1-(2，5-二-0-乙?；?3-脫氧-D--呋喃木詩唐基)-5_芐基尿嘧啶。
實施例7
3'-脫氧尿苷(6b，R = H)
將 2' ，5'一 _-O-乙酰基-3'-脫氧尿苷(1.06g，3mol)溶解在氨的甲醇溶液
(10mL，在0°C飽和的)中，并保持過夜。將該混合物真空濃縮后，將殘余物從乙醇中結(jié)晶，獲 得了 3'-脫氧尿苷(6b，660mg，96% )。按照類似方法，但是使用相應(yīng)的?；?'-脫氧-尿嘧啶核苷(6b)或其L-對應(yīng) 物，制得了下列核苷3_脫氧-5-甲基尿苷，3-脫氧-5-乙基尿苷，3-脫氧-5-正丙基尿苷， 3-脫氧-5-異丙基尿苷，3-脫氧-5-苯基尿苷和3-脫氧-5-芐基尿苷。實施例81-(3-溴-3-脫氧-0 -D-呋喃木糖基)尿嘧啶(6a，R = H)將1-(2' ,5' -二-0-乙酰基-3'-溴-3'-脫氧-3 _D_呋喃木糖基)尿嘧啶 (5，R = H)溶解在氨的甲醇溶液(10mL，在0°C飽和的)中。在0°C保持1小時后，將該混合 物真空濃縮，從乙醇中結(jié)晶殘余物，獲得了 3'-溴-3'-脫氧尿苷(6a，660mg，96%)。UV 和屮NMR與結(jié)構(gòu)一致。按照類似方法，但是使用相應(yīng)的?；? ‘-溴-木糖基尿嘧啶，制得了下列核苷 及其L-對應(yīng)物1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基)-5-氟尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基)-5-氯尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基)-5-溴尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基)-5-碘尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基)-5-甲基尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基)-5-乙基尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基)-5-正丙基尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基)-5-異丙基尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基)-5-乙烯基尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基)-5-(2-氯乙烯基)尿嘧唳，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基)-5--(2-溴乙烯基)尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基)-5--(2-碘乙烯基)尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基)-5-_(2_氨基羰基乙烯基)尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基)-5-_(2_羥基羰基乙烯基)尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基)-5--苯基尿嘧啶，和
1-(3-溴-3-脫氧-D-呋喃木11基)-5-_芐基尿嘧啶。
實施例9
2' ,5/ _~ __-0-三三苯基甲基尿苷(7，R=H)將尿苷(24. 4g，0. lmol)和三苯基氯甲烷(83. 5g，0. 3mol)在無水吡啶(250mL)中 的混合物于室溫攪拌過夜，然后回流4小時。冷卻至室溫后，在劇烈攪拌下將該混合物倒入 水中。通過傾析除去水，用水處理該樹膠狀殘余物，攪拌并傾析出水。將該操作重復(fù)數(shù)次， 然后用熱水(500mL)處理殘余物，攪拌并傾析出水。將該操作重復(fù)2次。將殘余物溶解在 二氯甲烷中，干燥(Na2S04)，并真空濃縮。將殘余物溶解在最小必需量的苯中，用乙醚將該溶 液稀釋至渾濁，將該混合物在15°C放置過夜。收集沉淀，從苯-乙醚中重結(jié)晶，獲得了 7(R =H) (22. 8g,31%),mp 224_225°C。將合并的濾液濃縮，將殘余物溶解在二氯甲烷中，通過 硅膠柱進行色譜純化，使用二氯甲烷-乙醇(99 lv/v)、(98 2v/v)和(97 3v/v)洗 脫。首先洗脫出了化合物7(10g，14%)，之后洗脫出了 3'，5' -二-0-三苯基甲基尿苷 (31. 0g，42. 5% )。按照類似方法，但是使用相應(yīng)的核苷，制得了下列2' ,5' -二-0-保護的和3'， 5' -二 -0-保護的核苷及其L-對應(yīng)物2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-氟尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-氯尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-溴尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-碘尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-甲基尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-乙基尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-正丙基尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-異丙基尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-乙烯基尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-乙炔基尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-氯乙烯基)尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-溴乙烯基)尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-碘乙烯基)尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)尿苷:
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-羥基羰基乙烯基)尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-苯基尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-芐基尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-氟尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-氯尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-溴尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-碘尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-甲基尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-乙基尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-正丙基尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-異丙基尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-乙烯基尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-乙炔基尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-氯乙烯基)尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-溴乙烯基)尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-碘乙烯基)尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-羥基羰基乙烯基)尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-苯基尿苷，和
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-芐基尿苷。實施例103' -0-甲磺?；?2' ,5' -二-0-三苯基甲基尿苷(8，R = H)向2'，5' -二-0-三苯基甲基尿苷(7，R = H，7.28g，l匪ol)在吡啶(100mL)內(nèi) 的冷卻溶液中滴加甲磺酰氯(lmL)，并將該反應(yīng)在4°C保持過夜。通過加入乙醇(5mL)來中 止該反應(yīng)。在室溫攪拌2小時后，將該混合物真空濃縮。將殘余物用乙醇(250mL)研制，收 集固體，從乙醇中重結(jié)晶，獲得了 8 (R = H) (7. 45g,92% ),mp 225_226°C。按照類似方法，但是使用相應(yīng)的核苷，制得了下列2',5' -二-0-三苯基甲基化和3'，5'-_ ■~-“-0-三苯基甲基化的核苷及其L-對應(yīng)物
3'-0-甲磺?；?2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-氟尿苷，
3'-0-甲磺?；?2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-氯尿苷，
3'-0-甲磺?；?2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-溴尿苷，
3'-0-甲磺?；?2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-碘尿苷，
3'-0-甲磺酰基-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-甲基尿苷，
3'-0-甲磺?；?2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-乙基尿苷，
3'-0-甲磺?；?2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-正丙基尿苷，
3'-0-甲磺?；?2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-異丙基尿苷，
3'-0-甲磺?；?2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-乙烯基尿苷，
3'-0-甲磺酰基-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-乙炔基尿苷，
3'-0-甲磺?；?2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-(2-氯乙烯基)尿苷，
3'-0-甲磺酰基-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-(2-溴乙烯基)尿苷，
3'-0-甲磺?；?2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-(2-碘乙烯基)尿苷，
3'-0-甲磺酰基-2'，5'--二 -0-三三苯基甲基-5--(2-甲氧基羰基乙烯基)尿
3'-0-甲磺酰基-2'，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-苯基尿苷，
3'-0-甲磺?；?2'，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-芐基尿苷，
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-氟尿苷，
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-氯尿苷，
2'-0-甲磺?；?，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-溴尿苷，
2'-0-甲磺?；?，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-碘尿苷，
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-甲基尿苷，
2'-0-甲磺?；?，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-乙基尿苷，
2'-0-甲磺?；?'-二 -0-—三苯基甲基-5-正丙基尿苷，
2'-0-甲磺?；?，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-異丙基尿苷，
2'-0-甲磺?；?'，5'-二 -0-三[苯基甲基-5-乙烯基尿苷，
2'-0-甲磺?；?，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-乙炔基尿苷，
2'-0-甲磺?；?，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-(2-氯乙烯基)尿苷，
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-(2-溴乙烯基)尿苷，
2'-0-甲磺?；?'-二 -0-—三苯基甲基-5-(2-碘乙烯基)尿苷，
2'-0-甲磺酰基，5‘-二 -0-三苯基甲基-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)尿甘，
2'-0-甲磺?；?，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-羥基羰基乙烯基)尿苷，
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-苯基尿苷，和
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-芐基尿苷。
實施例11
2,3/ _脫水-1-(2，5_ -~--0-三苯基甲基-0-D-呋喃木糖基)尿嘧啶(9，R = H，X'=0H)[1000]將3'--0-甲磺?；鵢-2'，5' _二_0-三苯基甲基尿苷(806mg，lmmol)、苯甲酸鈉(2g)在二甲基甲酰胺(40mL)中的混合物在130-140°c加熱過夜。將該混合物冷卻至室
溫，在攪拌下倒入1升水中。通過傾析收集沉淀，并用乙醇(lOOmL)研制，獲得了 3'-脫 水-1-(2，5-二-0-三苯基甲基-3-D-呋喃木糖基)尿嘧啶(9，R = H，X' = OH) (500mg, 75% ), mp 237°C。 按照類似方法，但是使用相應(yīng)的5-取代的3' -0-甲磺?；?2' ,5' -二-0-三 苯基甲基尿苷(8)，制得了下列2，3'-脫水-二 -0-三苯基甲基化的核苷及其L-對應(yīng)物2,3'-脫水_-(2,5-11-0-i三苯基甲基-D-呋喃木11基)-5-氟尿嘧啶，[1003]2,3'-脫水_-(2,5-11-0-i三苯基甲基-D-呋喃木11基)-5-氯尿苷，[1004]2,3'-脫水_-(2,5-1l-o-i三苯基甲基-D-呋喃木11基)-5-溴尿苷，[1005]2,3'-脫水_-(2,5-1l-o-i三苯基甲基-D-呋喃木11基)-5-碘尿苷，[1006]2,3'-脫水_-(2,5-1l-o-i三苯基甲基-D-呋喃木11基)-5-甲基尿苷，[1007]2,3'-脫水_-(2,5-1l-o-i三苯基甲基-D-呋喃木11基)-5-乙基尿苷，[1008]2,3'-脫水_-(2,5-1l-o-i三苯基甲基-D-呋喃木11基)-5-正丙基尿苷，[1009]2,3'-脫水_-(2,5-1l-o-i三苯基甲基-D-呋喃木11基)-5-異丙基尿苷，[1010]2,3'-脫水_-(2,5-1l-o-i三苯基甲基-D-呋喃木11基)-5-乙烯基尿苷，[1011]2,3'-_脫水_-1--(2,5-二-o-二三苯基甲基-D--呋喃木糖基)-5-乙炔基尿苷，[1012]2,3'-脫水_-1--(2,5-1二-o-三三苯基甲基-旦--D-呋喃木糖基)_-5-(2-氯乙烯基)尿苷，[1013]2,3'-脫水_-1--(2,5-1二-0-三三苯基甲基-旦--D-呋喃木糖基)_-5-(2-溴乙烯基)尿苷，[1014]2,3'-脫水_-1--(2,5-1二-0-三三苯基甲基-旦--D-呋喃木糖基)_-5-(2-碘乙烯基)尿苷，[1015]2,3'-_脫水_-1--(2,5-二 -0-J三苯基甲基-D-呋喃木糖基)1-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)_尿苷，[1016]2,3'-_脫水_-1--(2,5-二 -0-J三苯基甲基-D-呋喃木糖基)1-5-(2-羥基羰基乙烯基)_尿苷，[1017]2,3'-_脫水_-1--(2,5-二-0-:三苯基甲基-D--呋喃木糖基)-5-苯基尿苷，和[1018]2,3'-_脫水_-1--(2,5-二-0-:三苯基甲基-D-~呋喃木糖基)-5-芐基尿苷。[1019]按照類似方法，但是使用相應(yīng)的5-取代的2'-0-甲磺?；?3'，5 ‘ -二 -0-三苯基甲基尿苷，制得了下列2，2'-脫水-3' ，5'-._-“-0-_三苯基甲基化的核苷及其L-對應(yīng)物[1020]2,2'-脫水_-1-(3,5-Z二-o-三苯基甲基_旦-D-阿拉伯呋喃糖基)-5-氟尿嘧啶，[1021]2,2'-_脫水_-1--(3,5-二-0-:三苯基甲基-D--阿拉伯呋喃賴f基)_5_氯尿苷，[1022]2,2'-_脫水_-1--(3,5-二-0-:三苯基甲基-D--阿拉伯呋喃賴f基)-5-溴尿苷，[1023]2,2'-_脫水_-1--(3,5-二-0-:三苯基甲基-D--阿拉伯呋喃賴f基)-5-碘尿苷，[1024]2,2'-脫水_-1-(3,5-Z二-o-三苯基甲基_旦-D-阿拉伯呋喃糖基)-5-甲基尿苷，[1025]2,2'-脫水_-1-(3,5-Z二-o-三苯基甲基_旦-D-阿拉伯呋喃糖基)-5-乙基尿苷，[1026]2,2'-脫水--1--(3,5-二-0-三三苯基甲基--D-_阿拉伯呋喃糖■基)-5-正丙基尿甘， [1027]2,2'-脫水--1--(3,5-二-0-三三苯基甲基--D-_阿拉伯呋喃糖基)-5-異丙基尿甘， [1028]2,2'-脫水--1--(3,5-二-0-三三苯基甲基--D-_阿拉伯呋喃糖基)-5_乙烯基尿甘， [1029]2,2'-脫水--1--(3,5-二-0-三三苯基甲基--D-_阿拉伯呋喃糖基)-5_乙炔基尿甘， [1030]2,2'-_脫水_-1--(3,5-二 -0-J三苯基甲基-D-阿拉伯呋喃1|基)-5-(2_氯乙烯基)尿苷，[1031]2,2'-_脫水_-1--(3,5-二 -0-J三苯基甲基-D-阿拉伯呋喃1|基)-5-(2_溴乙烯基)尿苷，[1032]2,2'-_脫水_-1--(3,5-二 -0-J三苯基甲基-D-阿拉伯呋喃1|基)-5-(2_碘乙烯基)尿苷，[1033]2,2'-_脫水_-1--(3,5-二 -0-J三苯基甲基-D-阿拉伯呋喃1|基)-5-(2_甲氧基羰基乙烯基)_尿苷，[1034]2,2'-_脫水_-1--(3,5-二 -0-J三苯基甲基-D-阿拉伯呋喃1|基)-5-(2_羥基羰基乙烯基)_尿苷，2,2’ -脫水-1-(3，5-二-0-三苯基甲基-3-D-阿拉伯呋喃糖基)-5-苯基尿苷， 和2,2’ -脫水-1-(3，5-二-0-三苯基甲基-3-D-阿拉伯呋喃糖基)-5-芐基尿苷。實施例123'-脫氧-3'-碘-2' ,5' -二-0-三苯基甲基尿苷(11，R = H，X = I，X'= OH)將3' -0-甲磺?；?2' ,5' -二-0-三苯基甲基尿苷(8，1.61§，2讓01)、碘化鈉 (3g,20mmol)在1，2_ 二甲氧基乙烷(40mL)中的混合物加熱回流過夜。通過真空蒸發(fā)除去 溶劑，將殘余物溶解在二氯甲烷中。將該溶液依次用5%硫代硫酸鈉和水洗滌，用硫酸鈉干 燥，真空濃縮至干。用硅膠柱對殘余物進行色譜純化，使用二氯甲烷-乙醚(3 lv/v)洗 脫，獲得了 703mg(42% )3'-脫氧-碘-2' ,5' -二 _0_三苯基甲基尿苷(11，R = H，X = I，X' = 0H)。按照類似方法，但是使用相應(yīng)的5-取代的3' -0-甲磺?；?2' ,5' -二-0-三 苯基甲基尿苷(8)，制得了下列3' _碘衍生物及其L-對應(yīng)物3'-脫氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-氟尿苷，[1042]3'-脫氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-氯尿苷，[1043]3'-脫氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-溴尿苷，[1044]3'-脫氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-碘尿苷，[1045]3'-脫氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-甲基尿苷，[1046]3'-脫氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-乙基尿苷，[1047]3'-脫氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-正丙基尿苷，[1048]3'-脫氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-異丙基尿苷，[1049]3'-脫氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-乙烯基尿苷，[1050]3'-脫氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-乙炔基尿苷，[1051]3'-脫氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-(2-氯乙烯基)尿苷，[1052]3'-脫氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-(2-溴乙烯基)尿苷，[1053]3'-脫氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-(2-碘乙烯基)尿苷，[1054]3'-脫氧-3'-碘-2'，5'--二 -0-—三苯基甲基-5--(2-甲氧基羰基乙烯基)尿苷，[1055]3'-脫氧-3'-碘-2'，5'-二 -0- J三苯基甲基-5-_(2_羥基羰基乙烯基)尿甘， [1056]3'-脫氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-苯基尿苷，和[1057]3'-脫氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-芐基尿苷。按照類似方法，但是使用相應(yīng)的5-取代的2' -0-甲磺?；?3' ,5' -二 _0_三 苯基甲基尿苷，制得了下列2' _碘衍生物及其L-對應(yīng)物2'-脫氧-2'-碘-3'， 5' -二-0-三苯基甲基-5-氟尿苷，2'-脫氧-2'-碘-3' ,5' -二-0-三苯基甲基-5-氯尿苷，2'-脫氧-2'-碘-3'，5' -二-0-三苯基甲基-5-溴尿苷，[1061]2'-脫氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-碘尿苷，[1062]2'-脫氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-甲基尿苷，[1063]2'-脫氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-乙基尿苷，[1064]2'-脫氧-2'-碘-3'，5'-_■ _ 二苯基甲基-5-_正丙基尿苷，[1065]2'-脫氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-異丙基尿苷，[1066]2'-脫氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-乙烯基尿苷，[1067]2'-脫氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-乙炔基尿苷，[1068]2'-脫氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-(2-氯乙烯基)尿苷，[1069]2'-脫氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-(2-溴乙烯基)尿苷，[1070]2'-脫氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-(2-碘乙烯基)尿苷，[1071]2'-脫氧-2'-碘-3'，5'--二 -0-三苯基甲基-5--(2-甲氧基羰基乙烯基)尿苷，[1072]2'-脫氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-_(2_羥基羰基乙烯基)尿甘， [1073]2'-脫氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-苯基尿苷，和[1074]2'-脫氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-芐基尿苷。[1075]實施例13[1076]3'-碘-3/ _-脫氧尿苷將3'-脫氧-3'-碘-2' ,5' -二-0-三苯基甲基尿苷(840mg，lmmol) (11，R =H, X= I, X' = OH)溶解在二氯甲烷與三氟乙酸的10 1混合物(20mL)中，并將該混 合物保持在室溫。真空除去溶劑，用乙醚(15mLX2)研制殘余物。將不溶于醚的殘余物從 甲醇-乙醚中結(jié)晶，獲得了 3'-碘-3'-脫氧尿苷(312mg，88. 1%)。按照類似方法，但是使用相應(yīng)的5-取代的3'-脫氧-3'-碘-2'，5' -二_0_三 苯基甲基尿苷，制得了下列3'-碘尿苷衍生物及其L-對應(yīng)物3'-脫氧-3'-碘-5-氟 尿苷，3'-脫氧-3'-碘-5-氯尿苷，3'-脫氧-3'-碘-5-溴-尿苷，3'-脫 氧-3'-碘-5-碘尿苷，3'-脫氧-3'-碘-5-甲基-尿苷，3'-脫氧-3'-碘-5-乙 基尿苷，3'-脫氧-3'-碘-5-正丙基尿苷，3'-脫氧-3'-碘-5-異丙基尿苷， 3'-脫氧-3'-碘-5-乙烯基尿苷，3'-脫氧-3'-碘-5-乙炔基尿苷，3'-脫 氧-3'-碘-5-(2-氯-乙烯基)-尿苷，3'-脫氧-3'-碘-5-(2-溴乙烯基)尿苷，3'-脫 氧-3'-碘-5-(2-碘乙烯基)尿苷，3'-脫氧-3'-碘-5-(2-甲氧基羰基-乙烯基) 尿苷，3'-脫氧-3'-碘-5-(2-羥基-羰基-乙烯基)尿苷，3'-脫氧-3'-碘-5-苯 基尿苷和3'-脫氧-3'-碘-5-芐基-尿苷。按照類似方法，但是使用相應(yīng)的5-取代的2'-脫氧-2'-碘-3'，5' -二_0_三 苯基甲基尿苷，制得了下列2'-碘尿苷衍生物及其L-對應(yīng)物2'-脫氧-2'-碘-5-氟 尿苷，2'-脫氧-2'-碘-5-氯尿苷，2'-脫氧-2'-碘-5-溴-尿苷，2'-脫 氧-2'-碘-5-碘尿苷，2'-脫氧-2'-碘-5-甲基尿苷，2'-脫氧-2'-碘-5-乙 基尿苷，2'-脫氧-2'-碘-5-正丙基尿苷，2'-脫氧-2'-碘-5-異丙基-尿苷， 2'-脫氧-2'-碘-5-乙烯基尿苷，2'-脫氧-2'-碘-5-乙炔基尿苷，2'-脫 氧-2'-碘-5-(2-氯乙烯基)-尿苷，2'-脫氧-2'-碘-5-(2-溴乙烯基)尿苷，2'-脫氧-2'-碘-5-(2-碘乙烯基)尿苷，2'-脫氧-2'-碘-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)尿 苷，2'-脫氧-2'-碘-5-(2-羥基羰基-乙烯基)-尿苷，2'-脫氧-2'-碘-5-苯基 尿苷和2'-脫氧-2'-碘-5-芐基尿苷。實施例149-(2-0-乙?；?3-溴-3-脫氧-3-D-呋喃木糖基)腺嘌呤(14, R = H, X = Br, Y = NH2, Z = H)將化合物14 (R = 2，5，5-三甲基-1，3-二氧雜環(huán)戊烷-4-酮-2-基，X = Br,Y = NH2，Z = H,500mg, lmmol)溶解在氯化氫的甲醇溶液(通過將3滴乙酰氯加到10mL甲醇中 制得的)中。在室溫保持30分鐘后，加入3mL飽和碳酸氫鈉溶液，將該混合物真空濃縮至 干。用乙醇研制殘余物直至上清液在260nm不表現(xiàn)出顯著的UV吸收。將乙醇提取物濃縮， 從甲醇中結(jié)晶殘余物，獲得了所需的14(R = H，X = Br, Y = NH2, Z = H),325g(87% )。NMR(D6-DMS0) 8 :8. 16，8. 32 (2s，H_2and H_8)，6. 10 (d, 1H, H_l，，= 3. 9Hz),5. 91(dd, lH,H-2',Jrj2,= 3.9，J2’,3’= 4. 1Hz)，5. 85 (dd，1H，H_3，，J2’,3’ = 4. 1，J3’,4’ =5. 1Hz)，4. 38 (dt, 1H，H_4，，J3’,4’ = 5. 1，J4’,5’ = J4’,5’’= 5. 0Hz)，3. 79 (dd，2H，H_5，，5”)， 2. 09(s，3H，Ac).按照類似方法，但是使用相應(yīng)的嘌呤核苷，制得了下列2 ‘ -0-乙酰
基-3'-溴-3'_脫氧--D-木浪1核苷(14)及其L-對應(yīng)物[1085]9-(2-0-乙?；?3--溴-3-脫氧-D-呋喃木11基)鳥嘌呤，[1086]9-(2-0-乙?；?3--溴-3-脫氧-D-呋喃木11基)-6-氯嘌呤，[1087]9-(2-0-乙?；?3--溴-3-脫氧-D-呋喃木1|基)-2，6-二氯嘌呤，[1088]9-(2-0-乙酰基-3--溴-3-脫氧-D-呋喃木11基)_2_氨基-6-氯嘌呤，[1089]9-(2-0-乙?；?3--溴-3-脫氧-D-呋喃木1|基)-6_甲基硫嘌呤，和[1090]9-(2-0-乙酰基-3--溴-3-脫氧-D-呋喃木1|基)-6_甲氧基嘌呤。[1091]實施例159-[2-0-乙?；?3-溴-3-脫氧-5_0-(2，5，5-三甲基_1，3_ 二氧雜環(huán)戊 烷-4-酮-2-基呋喃木糖基]腺嘌呤(14，R= 2，5，5-三甲基-1，3-二氧雜環(huán)戊 烷-2-酮-2-基，X = Br，Y = NH2, Z = H)將腺苷(13，Y= NH2，Z = H，10g，0.037mol)與 a -乙酰氧基-異丁酰溴(24g， 0. 117mol)在乙腈(120mL)中的混合物于室溫攪拌45分鐘。真空除去溶劑，將殘余物溶解 在乙酸乙酯中，用碳酸氫鈉溶液和水洗滌，用硫酸鈉干燥，并真空濃縮。從甲醇中結(jié)晶出殘 余物，獲得了 6. 5g(35% ) 14(X = Br, Y = NH2, Z = H)，mp 169_170°C。NMR(D6-DMS0) 8 :8. 17，8. 26 (2s，各 1H，H_2 和 H-6)，6. 16 (d, 1H，H-1，，1’,2’= 3. 5Hz)，5. 94 (dd, 1H, H-2', Jr = 3. 5Hz，J2’，3’= 3. 0Hz)， 4. 92 (dd, 1H，H_3，，J2’,3’= 3. 0Hz，J3’,4’= 4. 8Hz)，4. 54 (m, 1H，H_4，)，3. 94 (m，2H，H_5，，5”)， 2. 10(s，3H，Ac)，1. 73，1. 58，1. 47 (3s，各 3H，在 5 ‘上的 CH3)、如通過屮NMR所確定的那樣，14結(jié)晶的母液含有2'-溴_2'-脫氧_D_阿拉伯 糖基異構(gòu)體15的混合物。按照類似方法，但是使用相應(yīng)的嘌呤核苷，制得了下列3'-溴-3'-脫氧衍生物 (14)及其L-對應(yīng)物
129[1097]9-[2-0-乙?；?3-溴-3-脫氧-5_0-(2，5，5-三甲基_1，3_ 二氧雜環(huán)戊 烷-4-酮-2-基)-0 -D-呋喃木糖基]-鳥嘌呤，9-[2-0-乙?；?3-溴-3-脫氧-5_0-(2，5，5-三甲基_1，3_ 二氧雜環(huán)戊 烷-4-酮-2-基)-0 -D-呋喃木糖基]-6-氯嘌呤，9-[2-0-乙?；?3-溴-3-脫氧-5_0-(2，5，5-三甲基_1，3_ 二氧雜環(huán)戊 烷-4-酮-2-基)-0 -D-呋喃木糖基]-2，6- 二氯嘌呤，9-[2-0-乙?；?3-溴-3-脫氧-5-0-(2，5，5-三甲基_1，3- 二氧雜環(huán)戊 烷-4-酮-2-基)-0 -D-呋喃木糖基]-2-氨基-6-氯嘌呤，9-[2-0-乙?；?3-溴-3-脫氧-5-0-(2，5，5-三甲基_1，3-二氧雜環(huán)戊 烷-4-酮-2-基)-0 -D-呋喃木糖基]-6-甲基硫嘌呤，9-[2-0-乙?；?3-溴-3-脫氧-5-0-(2，5，5-三甲基_1，3- 二氧雜環(huán)戊 烷-4-酮-2-基-D-呋喃木糖基]-6-甲氧基嘌呤，9-[3-0-乙?；?2-溴-2-脫氧-5-0-(2，5，5-三甲基_1，3- 二氧雜環(huán)戊 烷-4-酮-2-基)-0 -D-阿拉伯呋喃糖基]鳥嘌呤，9-[3-0-乙?；?2-溴-2-脫氧-5-0-(2，5，5-三甲基_1，3- 二氧雜環(huán)戊 烷-4-酮-2-基-D-阿拉伯呋喃糖基]-6-氯嘌呤，9-[3-0-乙?；?2-溴-2-脫氧-5-0-(2，5，5-三甲基_1，3- 二氧雜環(huán)戊 烷-4-酮-2-基-D-阿拉伯呋喃糖基]_2，6- 二氯嘌呤，9-[3-0-乙?；?2-溴-2-脫氧-5-0-(2，5，5-三甲基_1，3- 二氧雜環(huán)戊 烷-4-酮-2-基-D-阿拉伯呋喃糖基]-2-氨基-6-氯嘌呤，9-[3-0-乙?；?2-溴-2-脫氧-5-0-(2，5，5-三甲基_1，3- 二氧雜環(huán)戊 烷-4-酮-2-基)-0 -D-阿拉伯呋喃糖基]-6-甲基硫嘌呤，和⑴9-[3-0-乙?；?2-溴-2-脫氧-5-0- (2，5，5_三甲基-1，3_ 二氧雜環(huán)戊 烷-4-酮-2-基-D-阿拉伯呋喃糖基]-6-甲氧基嘌呤。實施例162' ,3'-脫水腺苷(18，Y = NH2，Z = H)在室溫將9-[2-0-乙酰基-3-溴-3-脫氧-5-0- (2，5，5-三甲基-1，3- 二氧雜環(huán) 戊烷-4-酮-2-基呋喃木糖基]腺嘌呤14(5. 0g,0.01mol)用1M甲醇鈉的甲醇溶 液(20mL)處理1小時。用冰醋酸將該混合物中和，并在冰箱中保持過夜。通過過濾收集沉 積的結(jié)晶18，2. lg(84% )。該樣本的1H NMR光譜與通過Mendez，E.等人.J. Virol. 1998， 72,4737的方法制得的樣本相同。按照類似方法，但是使用相應(yīng)的嘌呤核苷，制得了下列2' ,3'-脫水-D-核糖衍 生物(18)及其L-對應(yīng)物2'，3'-脫水鳥苷，9-(2，3-脫水-3-D-呋喃核糖基]-6-甲 基巰基嘌呤和9-(2，3-脫水-D-呋喃核糖基]-2-氨基-6-甲氧基嘌呤。實施例179-(3-脫氧-3-碘-3-D-呋喃木糖基)腺嘌呤(19，X = I，Y = NH2，Z = H)將18(Y = NH2，Z = H，lg，4mmol)、碘化鈉(1. 5g，lOmmol)、乙酸鈉(lOOmg)和乙酸 (5mL)在丁酮(30mL)中的混合物輕微回流3小時。將溶劑真空蒸發(fā)，用水研制殘余物，獲得 了 19(X = I，Y = NH2, Z = H)，1. 2g(80% )。[1116]1H NMR(D6-DMSO) δ 8. 24,8. 34 (2s, IH each, H-2and H_8)，5. 90 (d, 1H, H_l，，Jl，，2，= 4. 7Hz) ,4. 96 (dd, 1H, H_2，，Jl，，2，=4. 7，J2，， 3，= 4. 9Hz)，4. 60 (dd, 1H, H_3，，J2，，3，= 4. 9，J3，，4，= 4. 7Hz)，4. 80(d，2H，H_5，，5”)， 4. 40 (m, 1H, H-4，).按照類似方法，但是使用相應(yīng)的2' ,3'-脫水-D-核糖嘌呤核苷(14)，制得了下 列3'-脫氧-3'-碘-D-木糖核苷及其L-對應(yīng)物9-(3-脫氧-3-碘-β-D-呋喃木糖基)鳥嘌呤，9-(3-脫氧-3-碘-β-D-呋喃木糖基)-6_甲基巰基嘌呤，9-(3-脫氧-3-碘-β-D-呋喃木糖基)-6_甲氧基嘌呤，9-(3-脫氧-3-碘-β-D-呋喃木糖基)-2_氨基-6-甲基巰基嘌呤，和9-(3-脫氧-3-碘-β-D-呋喃木糖基)-2_氨基-6-甲氧基嘌呤。實施例183'-脫氧腺苷(20，Y = NH2, Z = H)在5% Pd/BaS04 催化劑(IOOmg)和三乙胺(ImL)存在下，將 19 (Y = NH2, Z = H, 380mg, lmmol)在甲醇(75mL)中的溶液以3atm的初始壓力在氫氣氛下振搖過夜。除去催化 劑之后，將溶劑真空蒸發(fā)，將殘余物從甲醇中結(jié)晶，獲得了 3'-脫氧腺苷20 (Y = NH2, Z = H),200mg(80% )。該樣本的1H NMR光譜與蛹蟲草菌素的相同。按照類似方法，但是使用相應(yīng)的3'-碘-D-木糖嘌呤核苷(19)，制得了下列 3'-脫氧-核苷及其L-對應(yīng)物9-(3_脫氧-0-0-赤呋喃戊糖基)鳥嘌呤，9-(3_脫 氧-0-0-赤呋喃戊糖基)-嘌呤，9-(3-脫氧-0-0-赤呋喃戊糖基)-6_甲氧基嘌呤， 9- (3-脫氧-β -D-赤呋喃戊糖基)-2-氨基-嘌呤和9- (3-脫氧-β -D-赤呋喃戊糖 基)-2_氨基-6-甲氧基嘌呤。實施例193-(β-D-呋喃核糖基)-8-氮雜黃嘌呤(24，X = 0Η，Y = N)向5-硝基尿苷(300mg)在DMF(60mL)內(nèi)的溶液中加入疊氮化鈉(IOOmg)，將該混 合物在室溫攪拌過夜。真空除去溶劑，將殘余物溶解在最小必需量的熱水中，用稀鹽酸將PH 調(diào)節(jié)至3-4。將沉淀從水中重結(jié)晶，164-166°C (分解)。元素分析=C9H11N5O6H2O的計算值 C, 35. 64 ；H, 4. 29 ；N, 23. 1。實測值-.C, 35. 96 ；H, 4. 01 ；N, 23. 43。實施例201，2-0-亞異丙基-5-0-甲氧基羰基-3-0-苯氧基硫代羰基-a-D-呋喃木糖(26， R = Ph)向1，2-0-亞異丙基-5-0-甲氧基羰基-a-D-呋喃木糖(25,25. Og, 0. Imol)和 4_ 二甲基氨基吡啶(25g，0.2mol)在無水吡啶(250mL)內(nèi)的溶液中滴加氯硫代甲酸苯酯 (50g，0. 3mol)在乙腈(IOOmL)中的溶液，并將該反應(yīng)混合物在50_60°C攪拌24小時。將 該溶液真空濃縮，將殘余物在二氯甲烷與水之間分配。將有機層依次用水、0. IN氫氧化鈉、 水、0. IN鹽酸和水洗滌，用硫酸鈉干燥，真空濃縮，以定量產(chǎn)率獲得了 26 (R = Ph)，為漿狀物 (38. 2g)。將該漿狀物 直接用于下一步驟。實施例213-脫氧-1，2-0-亞異丙基-5-0-甲氧基羰基-α -D-赤呋喃戊糖(27)[1135]用3小時將三正丁基氫化錫(58g，0. 2mol)在甲苯(300mL)中的溶液加到上 述化合物 26(R = Ph) (19. 2g，50mmol)和 2，2' _ 偶氮二異丁腈(2. 5g，15mmol)在甲苯 (400mL)內(nèi)的回流溶液中。將該混合物真空濃縮，將殘余物溶解在乙腈(300mL)中，用石油 醚(4X100mL)萃取該該溶液以除去三正丁基錫衍生物。將乙腈層濃縮。殘余物的薄層色 譜顯示了一個主要點，1H NMR光譜表明存在3個甲基，沒有任何芳族質(zhì)子，但是摻雜有少量 丁基錫衍生物。該產(chǎn)物不用進一步純化直接用于下一步驟。實施例221，2- 二 -0-乙酰基-3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖(28)在冷卻下以將溫度保持在15-25°C的速度向23(2. 32g，0.01mol)在乙酸(60mL)與 乙酸酐(6mL)的混合物內(nèi)的攪拌溶液中滴加濃硫酸(3mL)。在室溫靜置過夜后，向該溶液中 加入冰(250g)，然后用二氯甲烷(3X50mL)萃取該混合物。用飽和碳酸氫鈉溶液(3X30mL) 洗滌合并的萃取液，用硫酸鈉干燥，并真空濃縮，獲得了 28(2. 8g，100% )，為正位異構(gòu)體混 合物。該化合物的純度足以不用進一步純化而用于下一步驟。實施例231-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖基)-5-氟尿嘧啶 (29，X = OH, Z = F)將5-氟尿嘧啶(2.6g，0.02mol)、硫酸銨(約30mg)在六甲基乙硅氮烷(15mL)中的 混合物回流直至獲得澄清溶液。真空除去溶劑，將殘余物溶解在1，2_ 二氯乙烷(20mL)中， 加入在1，2_ 二氯乙烷(20mL)中的1，2_ 二 -0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤 呋喃戊糖(28，5. 5g，0. 02mol)。向該溶液中加入四氯化錫(5. 2g，0. 02mol)，并將該混合物 在室溫攪拌過夜，然后在40-50°C加熱3小時。加入飽和碳酸氫鈉溶液(40mL)，攪拌直至不 再有二氧化碳釋放出來。經(jīng)由硅藻土墊過濾該混合物。分離出有機層，用飽和碳酸氫鈉溶 液(20mLX2)和水(20mLX2)小心地洗滌，用硫酸鈉干燥，并真空濃縮至干。將殘余物從乙 醇中結(jié)晶，獲得了 29(4. 3g，62% )。按照類似方法，但是使用相應(yīng)的嘧啶堿，制得了下列2' ,5' _保護的3'-脫 氧-核苷及其L-對應(yīng)物1-(2-0-乙酰基-3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_氯尿嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_溴尿嘧啶，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_碘尿嘧啶，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖基)_5_氰基尿嘧 啶，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖基)_5_乙氧基羰 基-尿嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖基)_5_氨基羰 基-尿嘧啶，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖基)_5_乙?；?嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖基)-5-甲基尿嘧 啶，[1151]l-(2-0-乙酰基-3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖基)-5-乙基尿嘧 啶，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_正丙基尿 嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_異丙基尿 嘧啶，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_乙烯基尿 嘧啶，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_烯丙基尿 嘧啶，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_乙炔基尿 嘧啶，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_ (2_氯乙烯 基)_尿嘧啶，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_ (2_溴乙烯 基)_尿嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_ (2_碘乙烯 基)_尿嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5- (2-甲氧基 羰基-乙烯基)尿嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5- (2-羥基羰
基-乙烯基)尿嘧啶，[1162] 口空1--(2--0-乙?；?3--脫氧-5-0--甲氧基羰基-D--赤呋喃戊1唐基)_5_-苯基尿嘧呢， [1163] 口空1--(2--0-乙?；?3--脫氧-5-0--甲氧基羰基-D--赤呋喃戊1唐基)_5_-芐基尿嘧呢， [1164]1--(2--0-乙?；?-3-脫氧--5--0-甲氧基羰基_旦--D-赤呋喃戊賴氟胞嘧啶，[1165]1--(2--0-乙?；?-3-脫氧--5--0-甲氧基羰基_旦--D-赤呋喃戊賴■ )-5-氯胞嘧啶，[1166]1--(2--0-乙?；?-3-脫氧--5--0-甲氧基羰基_旦--D-赤呋喃戊賴■ )-5-溴胞嘧啶，[1167]1--(2--0-乙?；?-3-脫氧--5--0-甲氧基羰基_旦--D-赤呋喃戊賴碘胞嘧啶，[1168]1--(2--0-乙?；?3--脫氧-5-0--甲氧基羰基-D--赤呋喃戊1唐基)_5_-氰基胞嘧
啶，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖基)_5_乙氧基羰 基-胞嘧啶，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖基)-5-氨基羰 基-胞嘧啶，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖基)-5-乙酰基胞 嘧啶，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_甲基胞嘧1- (2-0-乙酰基-3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-乙基胞嘧 1- (2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-正丙基胞 1- (2-0-乙酰基-3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-異丙基胞 1- (2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-乙烯基胞 1- (2-0-乙酰基-3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-烯丙基胞 1- (2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-乙炔基胞
啶，
啶，
嘧啶，
嘧啶，
嘧啶，
嘧啶，
嘧啶，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_ (2_氯乙烯 基)_胞嘧啶，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5- (2_溴乙烯 基)_胞嘧啶，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5- (2-碘乙烯 基)_胞嘧啶，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-3-D-赤呋喃戊糖基)-5-(2_甲氧 基-羰基乙烯基)胞嘧啶，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_ (2_羥基羰 基乙烯基)胞嘧啶，
啶，和啶。
1- (2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-苯基胞嘧 1- (2-0-乙酰基-3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-芐基胞嘧 按照類似方法，但是使用相應(yīng)的嘧啶和嘌呤堿，制得了下列2' ,5' -二-0-乙酰
基3'--脫氧-核苷及其L-對應(yīng)物[1187]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-氯尿嘧啶，[1188]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-溴尿嘧啶，[1189]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-碘尿嘧啶，[1190]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-氰基尿嘧啶，[1191]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-乙氧基羰基尿嘧啶，[1192]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-氨基羰基尿嘧啶，[1193]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-乙?；蜞奏?，[1194]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-甲基尿嘧啶，[1195]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-乙基尿嘧啶，[1196]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-正丙基尿嘧啶，[1197]1-(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-異丙基尿嘧啶，[1198]1-(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-乙烯基尿嘧啶，[1199]1-(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-烯丙基尿嘧啶，[1200]1-(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-乙炔基尿嘧啶，[1201] 口空1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脫氧-D-赤呋喃戊唐基)-5--(2-氯乙烯基)尿嘧呢， [1202] 口空1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脫氧-D-赤呋喃戊唐基)-5--(2-溴乙烯基)尿嘧呢， [1203] 口空1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脫氧-D-赤呋喃戊唐基)-5--(2-碘乙烯基)尿嘧呢， [1204]1-(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基)-5--(2-甲氧基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1205]1-(2,5-1二-0-乙?；?-3-脫氧--D-赤呋喃戊_,基)-5-(2-羥基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1206]1-(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-苯基尿嘧啶，[1207]1-(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-芐基尿嘧啶，[1208]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-氟胞嘧啶，[1209]1-(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-氯胞嘧啶，[1210]1-(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-溴胞嘧啶，[1211]1-(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-碘胞嘧啶，[1212]1-(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-氰基胞嘧啶，[1213]1-(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-乙氧基羰基胞嘧啶，[1214]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-氨基羰基胞嘧啶，[1215]1-(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-乙?；奏?，[1216]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-甲基胞嘧啶，[1217]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-乙基胞嘧啶，[1218]1-(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-正丙基胞嘧啶，[1219]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-異丙基胞嘧啶，[1220]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-乙烯基胞嘧啶，[1221]1-(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-烯丙基胞嘧啶，[1222]1-(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-乙炔基胞嘧啶，[1223] 口空1-(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊唐基)-5--(2-氯乙烯基)胞嘧呢， [1224] 口空1-(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊唐基)-5--(2-溴乙烯基)胞嘧呢， [1225] 口空1-(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊唐基)-5--(2-碘乙烯基)胞嘧呢， [1226]1-(2,5-1二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基)-5--(2-甲氧基羰基乙烯基)胞嘧啶，[1227]1-(2，5-二-0-乙?；?3-脫氧--3-0-赤呋喃戊$害基)-5-(2-羥基羰基乙烯基)胞嘧啶，[1228]1-(2，5-二-0-乙酰基-3--脫氧-3-D-赤呋喃戊^瞎基)-5_苯基胞嘧啶，[1229]1-(2，5-二-0-乙酰基-3--脫氧-3-D-赤呋喃戊^瞎基)-5_芐基胞嘧啶，[1230]1-(2，5-二-0-乙?；?3--脫氧-3-D-赤呋喃戊^瞎基)-N6-苯甲?；汆堰?，[1231]1-(2，5-二-0-乙?；?3--脫氧-3-D-赤呋喃戊^瞎基)-6-氯嘌呤，[1232]1-(2，5-二-0-乙?；?3--脫氧-3-D-赤呋喃戊^瞎基)-2，6-二氯嘌呤，[1233]1-(2，5_ 二-0-乙?；?3-脫氧_-3-D-赤呋喃戊擴復(fù)基)-2-乙酰氨基-6-氯嘌呤，[1234]1-(2，5-二-0-乙?；?3--脫氧-3-D-赤呋喃戊1瘡基)-2_乙酰氨基-6-甲氧基嘌呤，[1235]1-(2，5-二-0-乙?；?3--脫氧-3-D-赤呋喃戊^瞎基)-6_甲氧基嘌呤，和[1236]1-(2，5-二-0-乙酰基-3--脫氧-3-D-赤呋喃戊^瞎基)-6_甲基巰基嘌呤。[1237]實施例24[1238]1-(2-0-乙?；?3-脫氧--5-0-甲氧基羰基D-赤呋喃戊糖基)-6-氯嘌呤(30，X =Cl, Y = H)[1239]將6-氯嘌呤(3. lg，0. 02mol)、硫酸銨(約30mg)在六甲基乙硅氮烷(25mL)中的
混合物回流直至獲得澄清溶液。真空除去溶劑，將殘余物溶解在1，2_ 二氯乙烷(30mL)中， 加入在1，2-二氯乙烷(20mL)中的1，2-二-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤 呋喃戊糖(28，5. 5g，0. 02mol)。向該溶液中加入四氯化錫(5. 2g，0. 02mol)，并將該混合物 在室溫攪拌過夜，然后在40-50°C加熱3小時。加入飽和碳酸氫鈉溶液(50mL)，攪拌直至不 再有二氧化碳釋放出來。經(jīng)由硅藻土墊過濾該混合物。分離出有機層，用飽和碳酸氫鈉溶 液(30mLX2)和水(30mLX2)小心地洗滌，用硫酸鈉干燥，并真空濃縮至干。將殘余物從乙 醇中結(jié)晶，獲得了 30(4. 3g，62% )。按照類似方法，但是使用相應(yīng)的嘌呤堿，制得了下列2' ,5' _保護的3'-脫 氧-核苷及其L-對應(yīng)物1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-3-D-赤呋喃戊糖基)-N6-苯甲?；?腺嘌呤，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基_D_赤呋喃戊糖基)_6_氯嘌呤，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基_D_赤呋喃戊糖基)_2，6_ 二氯嘌 呤，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 _D_赤呋喃戊糖基)_2_乙酰氨 基-6-氯嘌呤，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_2_乙酰氨基_6-甲氧基嘌呤，1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基_D_赤呋喃戊糖基)_6_甲氧基嘌 呤，和1-(2-0-乙?；?3-脫氧-5-0-甲氧基羰基_D_赤呋喃戊糖基)_6_甲基巰 基-嘌呤。實施例25[1250]1，2-0-亞異丙基-5-0-叔丁基二苯基甲硅烷基-a-D-呋喃木糖(31)將1，2-0-亞異丙基-a-D-呋喃木糖(38. 0g，0. 2mol)、叔丁基二苯基氯甲硅烷 (70g，0. 25mol)和咪唑(21. 5g，0. 4mol)在N，N-二甲基甲酰胺(50mL)中的混合物于室溫 攪拌1小時。真空除去溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯(1L)中，用水(300mLX2)和鹽水 (300mL)萃取，用硫酸鈉干燥，真空濃縮至干，獲得了粗產(chǎn)物31(86g，100% )，其不用進一步 純化直接用于下一步驟。實施例261,2-0-亞異丙基-3-0-甲磺酰基-5-0-叔丁基二苯基甲硅烷基-a _D_呋喃木糖 (32，R = Ms)將甲磺酰氯(17g，0. 15mol)滴加到粗產(chǎn)物31(43g，0. lmol)在吡啶(100mL) 內(nèi)的溶液中，將該混合物在室溫靜置過夜。向該混合物中加入碎冰(1L)，用二氯甲烷 (300mLX3)萃取該產(chǎn)物。將萃取液合并，用水(300mLX2)和鹽水(300mL)洗滌，用硫酸鈉 干燥，并真空濃縮至干。通過與甲苯反復(fù)共沸蒸餾除去微量吡啶。將殘余物溶解在二氯甲 烷(500mL)中，用0. IN鹽酸(250mLX2)和水洗滌，用硫酸鈉干燥，濃縮至干，獲得了粗產(chǎn)物 32(R = Ms),50. lg(99%)0該物質(zhì)的1H NMR光譜表明其純度足以直接用于下-步驟。實施例27甲基3-0-甲磺酰基-5-0-叔丁基二苯基甲硅烷基-D-呋喃木糖苷(33，R = Ms)將粗產(chǎn)物32(50g，0. lmol)在氯化氫的無水甲醇溶液(1L)中的溶液在室溫保 持過夜，然后真空蒸發(fā)至獲得了漿狀物，將其在水(100mL)與二氯甲烷(150mL)之間分配。 分離出有機層，用水(100mL)洗滌，用硫酸鈉干燥，并真空濃縮，獲得了粗產(chǎn)物33，為漿狀 物，重量為48g(100% )。該產(chǎn)物不用進一步純化而直接用于下一步驟。實施例28甲基2，3-脫水-5-0-叔丁基二苯基甲硅烷基-D-呋喃核糖苷(34)將粗產(chǎn)物33(48g，0. lmol)溶解在二氯甲烷(100mL)中，并用2M甲醇鈉的甲醇溶 液(60mL)處理，并回流2小時。通過過濾除去不溶性鹽，將濾液真空濃縮至干。將殘余物 溶解在二氯甲烷(150mL)中，用水(100mLX2)洗滌，用硫酸鈉干燥，濃縮至干，獲得了粗產(chǎn) 物30(38g，100% )，該產(chǎn)物可不用純化直接用于下一步驟。實施例29甲基3-脫氧-3-碘-5-0-叔丁基二苯基甲硅烷基-D-呋喃核糖苷(35，X = I)將34(38g，0. lmol)、碘化鈉(60g，0. 4mol)、乙酸鈉(0. 6g)和乙酸(70mL)在丙酮 (500mL)中的混合物加熱回流8小時。真空除去丙酮，將殘余物在二氯甲烷(500mL)與水 (250mL)之間分配。分離出有機層，用分別是250mL的水、0. 1M硫代硫酸鈉溶液和水洗滌， 并用硫酸鈉干燥。真空除去溶劑后，將殘余物從乙醇中結(jié)晶，獲得了 31g(60.5% )35(X = I)。實施例30甲基3-脫氧-5-0-叔丁基二苯基甲硅烷基-D-赤呋喃戊糖苷(37，由35制得)用5%披鈀炭(2g)將化合物35(X= I，25.6g，0.05mol)在乙酸乙酯(250mL)中氫 化。不再消耗氫氣后，將該混合物過濾，將濾液用水(150mLX2)洗滌，用硫酸鈉干燥，濃縮 至干，獲得了粗產(chǎn)物37 (19g，定量產(chǎn)率)，其純度足以直接用于下一步驟。[1267]實施例31甲基3-脫氧-5-0-叔丁基二苯基甲硅烷基-D-赤呋喃戊糖苷(36，由34制得)將氫化鋰鋁(8.4g，0.2mol)在無水乙醚(220mL)中的懸浮液于氮氣氛下攪拌，并 在冰浴中冷卻。以使得溫度保持25°C以下的速度向該懸浮液中滴加34(19g，0. 05mol)在無 水四氫呋喃(250mL)中的溶液。2小時后，再加入lg氫化鋰鋁，將該混合物在室溫攪拌過 夜。將該攪拌的混合物在冰浴中冷卻，滴加異丙醇(lOOmL)，然后加入丙酮(50mL)。將該混 合物真空濃縮，將殘余物在乙醚(250mL)與水(150mL)之間分配。經(jīng)由硅藻土墊過濾除去 不溶物，用乙醚洗滌。分離出乙醚層，依次用0.2N鹽酸(150mLX2)和水(150mLX2)洗滌， 用硫酸鈉干燥，然后濃縮至干，獲得了粗產(chǎn)物36(16. 5g,87% )。實施例32甲基3-脫氧-D-赤呋喃戊糖苷(38)向粗產(chǎn)物36(13g，0.03mol)在四氫呋喃(320mL)內(nèi)的溶液中滴加1M三乙基氟 化氫銨溶液(lOOmL)，將該混合物攪拌24小時。將該混合物真空濃縮，將殘余物溶解在水 (200mL)中。加入碳酸鈣粉末(20g)，將該混合物在室溫攪拌過夜，然后過濾。將濾液真空濃 縮至漿狀物，將其溶解在氯仿(200mL)中，過濾，真空蒸發(fā)，獲得了粗產(chǎn)物38(4. 5g,100%)o實施例331，2，5-三-0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊糖(38)向粗產(chǎn)物甲基3-脫氧-D-赤呋喃戊糖苷37(4. 5g，0.03mol)和乙酸(80mL)的 劇烈攪拌著的混合物中加入乙酸酐(40mL)，然后加入硫酸(4mL)，將該反應(yīng)混合物在室溫 攪拌過夜。將該混合物在二氯甲烷(150mL)與冰-水(400mL)之間分配。用二氯甲烷 (100mLX2)萃取水層。將合并的有機層用等體積的飽和碳酸氫鈉溶液洗滌2次，用水洗滌 一次，用硫酸鈉干燥，并真空濃縮至干。通過與甲苯共沸蒸餾數(shù)次來除去微量乙酸，獲得了 粗產(chǎn)物38(5. lg，66% )。NMR光譜表明產(chǎn)物的主要成分含有3個乙?；?，并且是正 位異構(gòu)體。實施例341-(3_脫氧-3-D-赤呋喃戊糖基)_5_氟尿嘧啶(3'-脫氧_5_氟尿苷，6b，X = OH, R = F)將39的乙?；苌?X = OH, Z = F，3. 3g，0. Olmol)與三乙胺(3mL)在甲醇 (lOOmL)中的混合物于室溫攪拌過夜。將該混合物真空濃縮至干，將殘余物從乙醇中結(jié)晶， 獲得了 3'-脫氧-5-氟尿苷(2. 0g，83% )，mp 169_171°C。NMR(D6-DMS0) 8 :11.7(bs，lH， N3-H,可交換的)，8. 44 (d，1H，H-6，J6,F = 7. 1Hz)，5. 7 (d，1H，2，-OH,可交換的)，5. 5 (窄 m， 1H, H-1' )，5. 3(t，1H，5，-OH,可交換的)，4. 1-4. 5(m，2H，H_2，和 H_4，)，3. 5-3. 9 (m，2H， H-5，，5”)，1. 6-2. 2(m，2H，H_3，，3”).按照類似方法，但是使用相應(yīng)的2' ,5' -二-0-乙?；奏ず袜堰屎塑眨频昧?下列3 ‘-脫氧-核苷及其L-對應(yīng)物1-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基).-5-氯尿嘧啶，[1282]1-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基).-5-溴尿嘧啶，[1283]1-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基).-5-碘尿嘧啶，[1284l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-氰基尿嘧啶，[1285l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-乙氧基羰基尿嘧啶，[1286l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-氨基羰基尿嘧啶，[1287l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-乙?；蜞奏ぃ琜1288l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-甲基尿嘧啶，[1289l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-乙基尿嘧啶，[1290l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-正丙基尿嘧啶，[1291l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-異丙基尿嘧啶，[1292l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-乙烯基尿嘧啶，[1293l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-烯丙基尿嘧啶，[1294l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-乙炔基尿嘧啶，[1295l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-(2-氯乙烯基)尿嘧啶，[1296l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-(2-溴乙烯基)尿嘧啶，[1297l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-(2-碘乙烯基)尿嘧啶，[1298l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1299l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-(2-羥基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1300l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-苯基尿嘧啶，[1301l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-芐基尿嘧啶，[1302l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基胞嘧啶，[1303l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-氟胞嘧啶，[1304l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-氯胞嘧啶，[1305l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-溴胞嘧啶，[1306l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-碘胞嘧啶，[1307l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-氰基胞嘧啶，[1308l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-乙氧基羰基胞嘧啶，[1309l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-氨基羰基胞嘧啶，[1310l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-乙酰基胞嘧啶，[1311l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-甲基胞嘧啶，[1312l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-乙基胞嘧啶，[1313l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-正丙基胞嘧啶，[1314l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-異丙基胞嘧啶，[1315l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-乙烯基胞嘧啶，[1316l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-烯丙基胞嘧啶，[1317l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-乙炔基胞嘧啶，[1318l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-(2-氯乙烯基)胞嘧啶，[1319l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-(2-溴乙烯基)胞嘧啶，[1320l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-(2-碘乙烯基)胞嘧啶，[1321l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)胞嘧啶，[1322l-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-(2-羥基羰基乙烯基)胞嘧啶，[1323]1-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-苯基胞嘧啶，[1324]1-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-芐基胞嘧啶，[1325]1-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基)-2-氯腺嘌呤，[1326]1-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基)-6-氯嘌呤，[1327]1-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基)-2，6_ 二氯嘌呤，[1328]1-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基)-2-乙酰氨基-6-氯嘌呤，[1329]1-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基)-2-乙酰氨基-6-甲氧基嘌呤，[1330]1-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基)-6-甲氧基嘌呤，和[1331]1-(3-脫氧-D-赤呋喃戊1套基)-6-甲基巰基嘌呤。實施例351-(2，5_ 二 -0-乙?；?3-0-甲磺?；鵢D_呋喃木糖基)_5_氟尿嘧啶將5-氟尿嘧啶(0. 02mol)、硫酸銨(約30mg)在六甲基乙硅氮烷(15mL)中的混合 物回流直至獲得澄清溶液。真空除去溶劑，將殘余物溶解在1，2_ 二氯乙烷(20mL)中，加入 在1，2-二氯乙烷(20mL)中的1，2，5-三-0_乙?；?3-0-甲磺?；鵢D_呋喃木糖(5. 5g， 0.02mol)。向該溶液中加入四氯化錫(5.2g，0.02mol)，并將該混合物在室溫攪拌過夜，然 后在40-50°C加熱3小時。加入飽和碳酸氫鈉溶液(40mL)，攪拌直至不再有二氧化碳釋放 出來。經(jīng)由硅藻土墊過濾該混合物。分離出有機層，用飽和碳酸氫鈉溶液(20mLX2)和水 (20mLX2)小心地洗滌，用硫酸鈉干燥，并真空濃縮至干。將殘余物從乙醇中結(jié)晶，獲得了標(biāo) 題產(chǎn)物(62% )。該樣本的屮NMR光譜與所指出的結(jié)構(gòu)一致。按照類似方法，但是使用相應(yīng)的嘧啶和嘌呤堿，制得了下列2,5' -二-0-乙?；?'-取代的木11核苷及其L-對應(yīng)物[1336]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3-0-甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5--氯尿嘧啶，[1337]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3-0-甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5--溴尿嘧啶，[1338]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-0-甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5--碘尿嘧啶，[1339]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3-0-甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-_氰基尿嘧啶，[1340] 口空1-(2，5-二二 -0-乙?；?3-0-甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5--乙氧基羰基尿嘧呢， [1341]1-(2，5_ 二二-0-乙?；?-3-0-甲磺?；鵢-D-呋喃木_,基)_5-氨基羰基尿嘧啶，[1342]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3-0-甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5--乙?；蜞奏?，[1343]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3-0-甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5--甲基尿嘧啶，[1344]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3-0-甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5--乙基尿嘧啶，[1345]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3-0-甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5--正丙基尿嘧啶，[1346]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3-0-甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5--異丙基尿嘧啶，[1347]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-0-甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5--乙烯基尿嘧啶，[1348]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3-0-甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5--烯丙基尿嘧啶，[1349]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3-0-甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5--乙炔基尿嘧啶，[1350]1-(2，5_ 二二-0-乙酰基--3-0-甲磺?；鵢-D-呋喃木糖■基)_5-(2-氯乙烯基)尿嘧啶，[1351]1-(2，5_ 二二-0-乙?；?-3-0-甲磺酰基_-D-呋喃木糖1基)_5-(2-溴乙烯基)尿嘧啶，1-(2，5-二1-0-乙?；?-3--0-甲磺?；?1-D-呋喃木II！基)--5-(2-碘乙烯基)尿嘧啶，[1353]1-(2，5_ 二二-0-乙?；?-3--0-甲磺?；?-D-呋喃木糖■基)-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1354]1-(2，5_ 二二-0-乙酰基--3--0-甲磺?；?-D-呋喃木糖■基)-5-(2-羥基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1355]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3--0--甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5-苯基尿嘧啶，[1356]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3--0--甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5-芐基尿嘧啶，[1357]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5-氟胞嘧啶，[1358]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3--0--甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5-氯胞嘧啶，[1359]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3--0--甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5-溴胞嘧啶，[1360]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3--0--甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5-碘胞嘧啶，[1361]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3--0--甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5-氰基胞嘧啶，[1362] 口空1-(2，5-二二 -0-乙?；?3--0--甲磺酰基-D--呋喃木詩唐基)-5-乙氧基羰基胞嘧呢， [1363]1-(2，5_ 二二-0-乙?；?-3--0-甲磺?；?-D-呋喃木糖■基)-5-氨基羰基胞嘧啶，[1364]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5-乙酰基胞嘧啶，[1365]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5-甲基胞嘧啶，[1366]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3--0--甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5-乙基胞嘧啶，[1367]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3--0--甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5-正丙基胞嘧啶，[1368]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3--0--甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5-異丙基胞嘧啶，[1369]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3--0--甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5-乙烯基胞嘧啶，[1370]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3--0--甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5-烯丙基胞嘧啶，[1371]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺?；?D--呋喃木1唐基)-5-乙炔基胞嘧啶，[1372]1-(2，5-二1-0-乙酰基--3--0-甲磺?；?-D-呋喃木II！基)--5-(2-氯乙烯基)胞嘧啶，[1373]1-(2，5-二1-0-乙?；?-3--0-甲磺?；?-D-呋喃木II！基)--5-(2-溴乙烯基)胞嘧啶，[1374]1-(2，5-二1-0-乙?；?-3--0-甲磺酰基--D-呋喃木II！基)--5-(2-碘乙烯基)胞嘧啶，[1375]1-(2，5_ 二二-0-乙酰基--3--0-甲磺?；?-D-呋喃木糖■基)-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)胞嘧啶，[1376]1-(2，5_ 二二-0-乙?；?-3--0-甲磺酰基--D-呋喃木糖■基)-5-(2-羥基羰基乙烯基)胞嘧啶，[1377]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-苯基胞嘧啶，[1378]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-芐基胞嘧啶，[1379]1-(2，5_ 二二-0-乙?；?-3-0-甲磺酰基-旦-D-咲喃木糖基)-N6-苯甲?；汆堰?，[1380]1-(2，5-二二 -0-乙?；?3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-6-氯嘌呤，[1381]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3--0--甲磺酰基-D-呋喃木糖基)-2，6-二氯嘌呤，[1382]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲磺?；?D-呋喃木糖基)-2-乙酰氨基-6-氯嘌呤，[1383]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3--0--甲磺酰基-D-呋喃木糖基)-2-乙酰氨基-6-甲氧基嘌呤，[1384]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3--0--甲磺?；?D-呋喃木糖基)-6-甲氧基嘌呤，[1385]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3--0--甲磺?；?D-呋喃木糖基)-6-甲基巰基嘌呤，[1386]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3--0--甲苯磺?；?-D-呋喃木^瞎基)-5-氯尿嘧啶，[1387]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3--0--甲苯磺?；?-D-呋喃木^瞎基)-5-溴尿嘧啶，[1388]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3--0--甲苯磺?；?-D-呋喃木^瞎基)-5-碘尿嘧啶，[1389]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3--0--甲苯磺?；?-D-呋喃木^瞎基)-5-氰基尿嘧啶，[1390]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3--0--甲苯磺酰基--D-呋喃木1瘡基)-5-乙氧基羰基尿嘧啶，[1391] 口空1--(2,5-1二 -0-乙?；?3--0--甲苯磺?；?-D-呋喃木1瘡基)-5-氨基羰基尿嘧呢， [1392]1--(2,5-1二-0-乙?；?-3-0-甲苯磺?；?D-呋喃木H！基)-5-乙酰基尿嘧啶，[1393]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲苯磺?；?-D-呋喃木^瞎基)-5-甲基尿嘧啶，[1394]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3--0--甲苯磺?；?-D-呋喃木^瞎基)-5-乙基尿嘧啶，[1395]1--(2,5-1二-0-乙酰基--3-0-甲苯磺?；?D-呋喃木H！基)-5_正丙基尿嘧啶，[1396]1--(2,5-1二-0-乙酰基--3-0-甲苯磺?；?D-呋喃木H！基)-5_異丙基尿嘧啶，[1397]1--(2,5-1二-0-乙?；?-3-0-甲苯磺酰基-D-呋喃木H！基)-5-乙烯基尿嘧啶，[1398]1--(2,5-1二-0-乙?；?-3-0-甲苯磺?；?D-呋喃木H！基)-5_烯丙基尿嘧啶，[1399]1--(2,5-1二-0-乙?；?-3-0-甲苯磺酰基-D-呋喃木H！基)-5-乙炔基尿嘧啶，[1400]1--(2,5-11-0-乙酰基_-3--0-甲苯磺?；?-D-呋喃木|唐基)--5-(2-氯乙烯基)尿嘧啶，[1401]1--(2,5-11-0-乙?；鵢-3--0-甲苯磺?；?-D-呋喃木|唐基)--5-(2-溴乙烯基)尿嘧啶，[1402]1--(2,5-11-0-乙酰基_-3--0-甲苯磺?；?-D-呋喃木|唐基)--5-(2-碘乙烯基)尿嘧啶，[1403]1--(2,5-1二-0-乙?；?-3-0-甲苯磺?；?D-呋喃木H！基)-5_ (2-甲氧基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1404]1--(2,5-1二-0-乙?；?-3-0-甲苯磺?；?D-呋喃木H！基)-5_ (2-羥基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1405]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3--0--甲苯磺酰基--D-呋喃木^瞎基)-5-苯基尿嘧啶，[1406]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲苯磺?；?-D-呋喃木^瞎基)-5-芐基尿嘧啶，[1407]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3--0--甲苯磺酰基--D-呋喃木^瞎基)-5-氟胞嘧啶，[1408]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3--0--甲苯磺酰基--D-呋喃木^瞎基)-5-氯胞嘧啶，[1409]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3--0--甲苯磺?；?-D-呋喃木^瞎基)-5-溴胞嘧啶，[1410]1--(2,5-1二 -0-乙?；?3--0--甲苯磺酰基--D-呋喃木^瞎基)-5-碘胞嘧啶，
142[1411]1-(2，5-二.-0--乙?；?3--0--甲苯磺酰基-D--呋喃木1瘡基)_5_氰基胞嘧啶，[1412]1-(2，5-二.-0--乙?；?3--0--甲苯磺?；?D--呋喃木M唐基)_5-乙氧基羰基胞嘧啶，[1413] 口空1-(2，5-二.-0--乙?；?3--0--甲苯磺?；?D--呋喃木M唐基)_5_氨基羰基胞嘧呢， [1414]1-(2，5_ 二-0-乙酰基--3--0-甲苯磺?；鵢-D-呋喃木_！基)-5_乙?；奏?，[1415]1-(2，5-二.-0--乙?；?3--0--甲苯磺?；?D--呋喃木1瘡基)_5-甲基胞嘧啶，[1416]1-(2，5-二.-0--乙?；?3--0--甲苯磺?；?D--呋喃木1瘡基)_5-乙基胞嘧啶，[1417]1-(2，5_ 二-0-乙酰基--3--0-甲苯磺?；鵢-D-呋喃木_！基)-5_正丙基胞嘧啶，[1418]1-(2，5_ 二-0-乙?；?-3--0-甲苯磺?；鵢-D-呋喃木_！基)-5_異丙基胞嘧啶，[1419]1-(2，5_ 二-0-乙?；?-3--0-甲苯磺酰基_-D-呋喃木_！基)-5_乙烯基胞嘧啶，[1420]1-(2，5_ 二-0-乙酰基--3--0-甲苯磺?；鵢-D-呋喃木_！基)-5_烯丙基胞嘧啶，[1421]1-(2，5_ 二-0-乙?；?-3--0-甲苯磺?；鵢-D-呋喃木_！基)-5_乙炔基胞嘧啶，[1422]1-(2，5-二-0-乙?；鵢-3--0-_甲苯磺?；?-D--呋喃木$害基)_5_-(2-氯乙烯基)胞嘧啶，[1423]1-(2，5-二-0-乙?；鵢-3--0-_甲苯磺?；?-D--呋喃木$害基)_5_-(2-溴乙烯基)胞嘧啶，[1424]1-(2，5-二-0-乙?；鵢-3--0-_甲苯磺?；?-D--呋喃木$害基)_5_-(2-碘乙烯基)胞嘧啶，[1425]1-(2，5_ 二-0-乙酰基--3--0-甲苯磺?；鵢-D-呋喃木_！基)-5_(2-甲氧基羰基乙烯基)胞嘧啶，[1426]1-(2，5_ 二-0-乙?；?-3--0-甲苯磺酰基_-D-呋喃木_！基)-5_(2-羥基羰基乙烯基)胞嘧啶，[1427]1-(2，5-二.-0--乙酰基-3--0--甲苯磺?；?D--呋喃木1瘡基)_5_苯基胞嘧啶，[1428]1-(2，5-二.-0--乙?；?3--0--甲苯磺酰基-D--呋喃木1瘡基)_5_芐基胞嘧啶，[1429] nA1-(2，5-二-0-乙?；?-3--0-甲苯磺酰基--D--呋喃木1_-N6_苯甲?；汆岩?， [1430]1-(2，5-二.-0--乙?；?3--0--甲苯磺酰基-D--呋喃木1瘡基)_6-氯嘌呤，[1431]1-(2，5-二.-0--乙?；?3--0--甲苯磺?；?D--呋喃木1瘡基)-2，6-二氯嘌呤，[1432]1-(2，5_ 二-0-乙?；?-3-0-甲苯磺?；鵢旦-D-呋喃木糖基)_2_乙酰氨基-6-氯嘌呤，[1433]1-(2，5-二.-0--乙?；?3--0--甲苯磺酰基-D--木糖型呋喃戊糖:基)-2_乙酰氨基-6-甲氧基嘌呤，[1434]1-(2，5-二.-0--乙酰基-3--0--甲苯磺?；?D--木糖型呋喃戊糖基)-6-甲氧基嘌呤，和[1435]1-(2，5_ 二-0-乙?；?-3--0-甲苯磺酰基_-D-呋喃木_！基)-6-甲基巰基嘌呤。[1436]實施例36[1437]1-(2,3,5-~'-—0-乙酰基--D-呋喃木_基)胸腺嘧啶[1438]將胸腺嘧啶(0. 02mol)、硫酸銨(約30mg)在六甲基乙硅氮烷(15mL)中的混合物回流直至獲得澄清溶液。真空除去溶劑，將殘余物溶解在1，2_ 二氯乙烷(20mL)中，加入在 1，2_ 二氯乙烷(20mL)中的1，2，3，5_三-0-乙酰基-D-呋喃木糖(5. 5g，0. 02mol)。向該溶 液中加入四氯化錫(5. 2g，0. 02mol)，并將該混合物在室溫攪拌過夜，然后在40_50°C加熱3 小時。加入飽和碳酸氫鈉溶液(40mL)，攪拌直至不再有二氧化碳釋放出來。經(jīng)由硅藻土墊 過濾該混合物。分離出有機層，用飽和碳酸氫鈉溶液(20mLX2)和水(20mLX2)小心地洗 滌，用硫酸鈉干燥，并真空濃縮至干。將殘余物從乙醇中結(jié)晶，獲得了產(chǎn)物(4. 3g,62% )。該 樣本的屮NMR光譜與所指出的結(jié)構(gòu)-致。 按照類似方法，但是使用相應(yīng)的嘧啶和嘌呤堿，制得了下列2' ,5' -二-0-乙酰 基3'-取代的木糖型核苷及其L-對應(yīng)物1-(2，3，5_ 三三-0-乙?；?D-呋喃木1_-5-氟尿嘧啶，[1441]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-氯尿嘧啶，[1442]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-溴尿嘧啶，[1443]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-碘尿嘧啶，[1444]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-氰基尿嘧啶，[1445]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-乙氧基羰基尿嘧啶，[1446]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-氨基羰基尿嘧啶，[1447]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-乙?；蜞奏ぃ琜1448]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-甲基尿嘧啶，[1449]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-乙基尿嘧啶，[1450]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-正丙基尿嘧啶，[1451]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-異丙基尿嘧啶，[1452]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-乙烯基尿嘧啶，[1453]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-烯丙基尿嘧啶，[1454]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-乙炔基尿嘧啶，[1455]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-(2-氯乙烯基)尿嘧啶，[1456]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-(2-溴乙烯基)尿嘧啶，[1457]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-(2-碘乙烯基)尿嘧啶，[1458] 口空1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1唐基:-5--(2-甲氧基羰基乙烯基)尿嘧呢， [1459]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木f！基)-5-(2-羥基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1460]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-苯基尿嘧啶，[1461]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-芐基尿嘧啶，[1462]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-氟胞嘧啶，[1463]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-氯胞嘧啶，[1464]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-溴胞嘧啶，[1465]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-碘胞嘧啶，[1466]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-氰基胞嘧啶，[1467]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙?；?D-呋喃木1_-5-乙氧基羰基胞嘧啶，[1468]1-(2，3，5_ 三1 -0-乙?；?D-呋喃木1睡)-5-氨基羰基胞嘧啶，[1469] 1-2,3,5-E二一 -0-乙?；?D-呋喃木賴,基)_-5-“乙酰基胞嘧啶，[1470] 1-2,3,5-E二一 -0-乙?；?D-呋喃木賴,基)_-5-“甲基胞嘧啶，[1471] 1-2,3,5-E二一 -0-乙?；?D-呋喃木賴,基)_-5-“乙基胞嘧啶，[1472] 1-2,3,5-E二一 -0-乙?；?D-呋喃木賴,基)_-5--正丙基胞嘧啶，[1473] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-5--異丙基胞嘧啶，[1474] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-5-“乙烯基胞嘧啶，[1475] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-5--烯丙基胞嘧啶，[1476] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-5-“乙炔基胞嘧啶，[1477] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-5--(2-氯乙烯基)胞嘧啶，[1478] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-5--(2-溴乙烯基)胞嘧啶，[1479] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-5--(2-碘乙烯基)胞嘧啶，[1480] 1- 口空2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1睡)-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)胞嘧呢， [1481] 1-2,3,5-E二一 -0-乙?；?D-呋喃木賴,基)_-5-_苯基胞嘧啶，[1482] 1-2,3,5-E二一 -0-乙?；?D-呋喃木賴,基)_-N6-苯甲?；汆堰剩琜1483] 1-2,3,5-E二一 -0-乙?；?D-呋喃木賴,基)_-6--氯嘌呤，[1484] 1-2,3,5-E二一 -0-乙?；?D-呋喃木賴,基)_-26_ 二氯嘌呤，[1485] 1-2,3,5-E二一 -0-乙?；?D-呋喃木賴f基)_-2--乙酰氨基-6-氯嘌呤，[1486] 1- nA2,3,5-E二一 -0-乙?；?D-木糖型呋喃戊糖基)-2-乙酰氨基-6-甲氧基嘌吟， [1487] 1-2,3,5-E二一 -0-乙?；?D-木糖型呋喃戊糖基)-6_甲氧基嘌呤，和[1488] 1-2,3,5-E二一 -0-乙?；?D-呋喃木賴,基)_-6--甲基巰基嘌呤。實施例371-(3-脫氧-3-0-甲磺酰基-0 -D-呋喃木糖基)-5-氟尿嘧啶將1-(2，5_ 二-0-乙酰基-3-0-甲磺?；?3-D-呋喃木糖基)_5_氟尿嘧啶 (4. 24g,0.01mol)在氨的甲醇溶液(100mL)中的混合物在0°C攪拌30分鐘，真空濃縮至干， 將殘余物從乙醇中結(jié)晶，獲得了 1-(3_脫氧-3-0-甲磺酰基-3-D-呋喃木糖基)-5_氟尿 嘧啶(2.82g，83%)。1HNMR(D6-DMS0)表明分子中沒有任何乙?；?，但是有-個甲磺?；?。按照類似方法，但是使用相應(yīng)的2' ,5' -二-0-乙?；奏ず袜堰屎塑眨频昧?下列3丨-0-甲磺?；?核苷及其L-對應(yīng)物1-(3--0-甲磺酰基-D-呋喃木11基)-5-氯尿嘧啶，[1494]1-(3--0-甲磺?；?D-呋喃木11基)-5-溴尿嘧啶，[1495]1-(3--0-甲磺?；?D-呋喃木11基)-5-碘尿嘧啶，[1496]1-(3--0-甲磺?；?D-呋喃木11基)-5-氰基尿嘧啶，[1497]1-(3--0-甲磺?；?D-呋喃木11基)-5-乙氧基羰基尿嘧啶，[1498]1-(3--0-甲磺?；?D-呋喃木11基)-5-氨基羰基尿嘧啶，[1499]1-(3--0-甲磺?；?D-呋喃木11基)-5-乙酰基尿嘧啶，[1500]1-(3--0-甲磺?；?D-呋喃木11基)-5-甲基尿嘧啶，[1501]1-(3--0-甲磺?；?D-呋喃木11基)-5-乙基尿嘧啶，[15023--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-正丙基尿嘧啶，[15033--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-異丙基尿嘧啶，[15043--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-乙烯基尿嘧啶，[15053--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-烯丙基尿嘧啶，[15063--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-乙炔基尿嘧啶，[15073--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-(2-氯乙烯基)尿嘧啶，[15083--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-(2-溴乙烯基)尿嘧啶，[15093--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-(2-碘乙烯基)尿嘧啶，[15103--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)尿嘧啶，[15113--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-(2-羥基羰基乙烯基)尿嘧啶，[15123--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-苯基尿嘧啶，[15133--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-芐基尿嘧啶，[15143--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基胞嘧啶，[15153--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-氟胞嘧啶，[15163--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-氯胞嘧啶，[15173--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-溴胞嘧啶，[15183--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-碘胞嘧啶，[15193--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-氰基胞嘧啶，[15203--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-乙氧基羰基胞嘧啶，[15213--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-氨基羰基胞嘧啶，[15223--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-乙?；奏?，[15233--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-甲基胞嘧啶，[15243--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-乙基胞嘧啶，[15253--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-正丙基胞嘧啶，[15263--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-異丙基胞嘧啶，[15273--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-乙烯基胞嘧啶，[15283--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-烯丙基胞嘧啶，[15293--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-乙炔基胞嘧啶，[15303--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-(2-氯乙烯基)胞嘧啶，[15313--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-(2-溴乙烯基)胞嘧啶，[15323--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-(2-碘乙烯基)胞嘧啶，[15333--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)胞嘧啶，[15343--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-(2-羥基羰基乙烯基)胞嘧啶，[15353--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-苯基胞嘧啶，[15363--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-5-芐基胞嘧啶，[15373--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-2-氯腺嘌呤，[15383--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-6-氯嘌呤，[15393--o-甲磺?；?D-呋喃木禾唐基-2，6_ 二氯嘌呤，[15403--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-2-乙酰氨基-6-氯嘌呤，[1541]l-(3-0-甲磺酰基-D-呋喃木糖基)_2_乙酰氨基-6-甲氧基嘌呤，1-(3-0-甲磺酰基-D-呋喃木糖基)-6-甲氧基嘌呤，和1-(3-0-甲磺?；?D-呋喃木糖基)-6-甲基巰基嘌呤。實施例381-(0_0-呋喃木糖基)-5-氟尿嘧啶將1-(2，3，5-三-0_乙?；?3-D-呋喃木糖基)-5-氟尿嘧啶(3. 88g,0. Olmol) 與三乙胺(3mL)在甲醇(100mL)中的混合物于室溫攪拌過夜。將混合物真空濃縮至干，從 乙醇中結(jié)晶殘余物，獲得了 1-W-D-呋喃木糖基)_5_氟尿嘧啶(2.0g，76%)。該樣本的 UV和咕NMR(Me2S0-d6)光譜與產(chǎn)物結(jié)構(gòu)一致。按照類似方法，但是使用相應(yīng)的2' ,5' -二-0-乙?；奏ず袜堰蕢A，制得了下
列木_1型_核苷及其L-對應(yīng)物[1548]-D-呋喃木11基-5-氯尿嘧啶，[1549]-D-呋喃木11基-5-溴尿嘧啶，[1550]-D-呋喃木11基-5-碘尿嘧啶，[1551]-D-呋喃木11基-5-氰基尿嘧啶，[1552]-D-呋喃木11基-5-乙氧基羰基尿嘧啶，[1553]-D-呋喃木11基-5-氨基羰基尿嘧啶，[1554]-D-呋喃木11基-5-乙?；蜞奏?，[1555]-D-呋喃木11基-5-甲基尿嘧啶，[1556]-D-呋喃木11基-5-乙基尿嘧啶，[1557]-D-呋喃木11基-5-正丙基尿嘧啶，[1558]-D-呋喃木11基-5-異丙基尿嘧啶，[1559]-D-呋喃木11基-5-乙烯基尿嘧啶，[1560]-D-呋喃木11基-5-烯丙基尿嘧啶，[1561]-D-呋喃木11基-5-乙炔基尿嘧啶，[1562]-D-呋喃木11基-5-(2-氯乙烯基)尿嘧啶，[1563]-D-呋喃木11基-5-(2-溴乙烯基)尿嘧啶，[1564]-D-呋喃木11基-5-(2-碘乙烯基)尿嘧啶，[1565]-D-呋喃木11基-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1566]-D-呋喃木11基-5-(2-羥基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1567]-D-呋喃木11基-5-苯基尿嘧啶，[1568]-D-呋喃木11基-5-芐基尿嘧啶，[1569]-D-呋喃木11基胞嘧啶，[1570]-D-呋喃木11基-5-氟胞嘧啶，[1571]-D-呋喃木11基-5-氯胞嘧啶，[1572]-D-呋喃木11基-5-溴胞嘧啶，[1573]-D-呋喃木11基-5-碘胞嘧啶，[1574]-D-呋喃木11基-5-氰基胞嘧啶，[1575]-D-呋喃木11基-5-乙氧基羰基胞嘧啶，[1576]-D-呋喃木|唐基)-5-氨基羰基胞嘧啶，[1577]D-呋喃木糖卜基)_5-乙?；奏ぃ琜1578]-D-呋喃木|唐基)-5-甲基胞嘧啶，[1579]-D-呋喃木|唐基)-5-乙基胞嘧啶，[1580]-D-呋喃木|唐基)-5-正丙基胞嘧啶，[1581]-D-呋喃木|唐基)-5-異丙基胞嘧啶，[1582]-D-呋喃木|唐基)-5-乙烯基胞嘧啶，[1583]-D-呋喃木|唐基)-5-烯丙基胞嘧啶，[1584]-D-呋喃木|唐基)-5-乙炔基胞嘧啶，[1585]-D-呋喃木|唐基)-5-(2-氯乙烯基)胞嘧啶，[1586]-D-呋喃木|唐基)-5-(2-溴乙烯基)胞嘧啶，[1587]-D-呋喃木|唐基)-5-(2-碘乙烯基)胞嘧啶，[1588]-D-呋喃木|唐基)-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)胞嘧啶，[1589]-D-呋喃木|唐基)-5-(2-羥基羰基乙烯基)胞嘧啶，[1590]-D-呋喃木|唐基)-5-苯基胞嘧啶，[1591]-D-呋喃木|唐基)-5-芐基胞嘧啶，[1592]-D-呋喃木|唐基)-2-氯腺嘌呤，[1593]-D-呋喃木|唐基)-6-氯嘌呤，[1594]-D-呋喃木|唐基)-2，6-二氯嘌呤，[1595]-D-呋喃木|唐基)-2-乙酰氨基-6-氯嘌呤，[1596]-D-呋喃木|唐基)-2-乙酰氨基-6-甲氧基嘌呤，[1597]-D-呋喃木|唐基)-6-甲氧基嘌呤，和[1598]-D-呋喃木|唐基)-6-甲基巰基嘌呤。[1599]實施例39[1600]2' ,3’ -0-亞異丙基--5' -0-三苯基甲基-N4-羥基胞苷[1601]在 0 °C，向 2 ‘，3‘-0--亞異丙基-5-0-三苯基甲基尿苷(lg)在50mL腈和三乙胺(0.76g)內(nèi)的攪拌著的溶液中加入2，4，6_三異丙基苯磺酰氯(1.
DMAP(232mg)，將該反應(yīng)混合物在室溫攪拌1天。然后加入羥基胺鹽酸鹽(263mg)，并將該 混合物在室溫再攪拌1天。通過加入水來中止該反應(yīng)，用氯仿(200mL)萃取產(chǎn)物。將有機 層用鹽水洗滌，用MgS04干燥，并真空濃縮。通過硅膠柱色譜純化殘余物(5% MeOH在CHC13 中的混合物)，獲得了 2'，3' -0-亞異丙基-5' -0-三苯甲基-N4-羥基-胞苷(723mg， 70%)，為白色固體。Mp :99-101oCo匪R(CDC13) S 1. 34(s，3H)，1. 56(s，3H)， 3. 40-3. 73 (m, 2H)，4. 26 (br s, 1H)，4. 79-4. 81 (m, 2H)，5. 34 (d, J = 8. 12Hz, 1H)，5. 88 (br s, 1H)，6. 88m (d, J = 8. 12Hz，lH)，7. 22-7. 41 (m, 15H).按照類似方法，但是使用相應(yīng)的5-取代的尿嘧啶核苷，合成了下列N4-羥基-2'， 3' -0-亞異丙基-5' -0-三苯基甲基胞苷衍生物2' ,3' -0-亞異丙基-5' -0-三苯基甲基-5-氟-N4-羥基胞苷，2' ,3' -0-亞異丙基-5' -0-三苯基甲基-5-氯-N4-羥基胞苷，[1606]2'，3'-0-亞異丙基-5'-0-i三苯基甲基-5--溴-N4-羥基胞苷，[1607]2'，3'-0-亞異丙基-5'-0-i三苯基甲基-5--碘-N4-羥基胞苷，[1608]2'，3'-0-亞異丙基-5'-o-i三苯基甲基-5--甲基-N4-羥基胞苷，[1609]2'，3'-0-亞異丙基-5'-o-i三苯基甲基-5--乙基-N4-羥基胞苷，[1610]2'，3'-0-亞異丙基-5'-o-i三苯基甲基-5--正丙基-N4-羥基胞苷，[1611]2'，3'-0-亞異丙基-5'-o-i三苯基甲基-5-_異丙基-N4-羥基胞苷，[1612]2'，3'-0-亞異丙基-5'-o-i三苯基甲基-5--乙烯基-N4-羥基胞苷，[1613]2'，3'-0-亞異丙基-5'-o-i三苯基甲基-5-_乙炔基-N4-羥基胞苷，[1614]2'，3'-0-亞異丙基-5'-o-i三苯基甲基-5--(2-氯乙烯基)-N4-羥基胞苷，[1615]2'，3'-0-亞異丙基-5'-o-i三苯基甲基-5--(2-溴乙烯基)-N4-羥基胞苷，[1616]2'，3'-0-亞異丙基-5'-o-i三苯基甲基-5--(2-碘乙烯基)-N4-羥基胞苷，[1617]2'，3'-0-亞異丙基_-5'-o-三三苯基甲基--5-(2-甲氧基羰基乙烯基)-N4-羥基胞苷，[1618]2'，3'-0-亞異丙基_-5'-o-三三苯基甲基--5-(2-羥基羰基乙烯基)-N4-羥基胞甘， [1619]2'，3'-0-亞異丙基-5'-o-i三苯基甲基-5--苯基-N4-羥基胞苷，和[1620]2'，3'-0-亞異丙基-5'-o-i三苯基甲基-5--芐基-N4-羥基胞苷。 按照類似方法，但是使用相應(yīng)的5-取代的2'，5' -二-0-乙?；?3'-脫氧尿
苷，合成了下列N4-羥基-2' ，5'-二 -0--乙?；?3'-脫氧胞苷衍生物[1622]1-(2，5-—二 -0-乙?；?3--脫氧-D-赤呋喃戊)|唐基)-N4-羥基胞嘧啶，[1623]1-(2，5-—二 -0-乙?；?3--脫氧-D-赤呋喃戊)|唐基)-5-氟-N4-羥基胞嘧啶，[1624]1-(2，5-—二 -0-乙?；?3--脫氧-D-赤呋喃戊)|唐基)-5-氯-N4-羥基胞嘧啶，[1625]1-(2，5-—二 -0-乙酰基-3--脫氧-D-赤呋喃戊)|唐基)-5-溴-N4-羥基胞嘧啶，[1626]1-(2，5-—二 -0-乙?；?3--脫氧-D-赤呋喃戊)|唐基)-5-碘-N4-羥基胞嘧啶，[1627]1-(2，5-—二-0-乙?；?-3-脫氧_D-赤呋喃戊_〖基)_5_氰基-N4-羥基胞嘧啶，[1628]1-(2，5-—二-0-乙?；?3--脫氧_-D-赤呋喃戊|1基)-5_乙氧基羰基-N4-羥基
胞嘧啶，
嘧啶，
啶，
啶，
啶，
啶，
-(2,5-
-(2,5-
-(2,5-. -(2,5-. -(2,5-
-(2,5-
-(2,5-
.-0-乙?；?3-脫氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-氨基羰基-N4-羥基胞
.-0-乙酰基-3-脫氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-乙?；?N4-羥基胞嘧
-0-乙?；?3-脫氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-甲基-N4-羥基胞嘧啶， -0-乙?；?3-脫氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-乙基-N4-羥基胞嘧啶， .-0-乙?；?3-脫氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-正丙基-N4-羥基胞嘧
.-0-乙酰基-3-脫氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-異丙基-N4-羥基胞嘧
.-0-乙?；?3-脫氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-乙烯基-N4-羥基胞嘧
149[1636]1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脫氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_烯丙基-N4-羥基胞嘧 啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-脫氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_乙炔基-N4-羥基胞嘧 啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-脫氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_ (2-氯乙烯基)-N4-羥 基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-脫氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_ (2-溴乙烯基)-N4-羥 基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-脫氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_ (2-碘乙烯基)-N4-羥 基胞嘧啶，1-(2，5_ 二-0-乙酰基-3-脫氧-3-D-赤呋喃戊糖基)-5-(2-甲氧基羰基乙烯 基)-N4-羥基胞嘧啶，1- (2，5- 二 -0-乙?；?3-脫氧_ 0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_ (2_羥基羰基乙烯 基)-N4-羥基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-脫氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_苯基-N4-羥基胞嘧啶， 和1-(2，5- 二 -0-乙?；?3-脫氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_芐基-N4-羥基胞嘧啶，按照類似方法，但是使用相應(yīng)的5-取代的3'，5' -二-0-乙酰基-2'-脫氧尿
苷，合成了下列N4--羥基-3' ,5'-0-乙?；?N4-羥基-2'-脫氧胞苷衍生物[1646]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脫氧-N4--羥基胞苷，[1647]3'，5'-二 -0-乙?；?2'-脫氧-5-氟-N4-羥基胞苷，[1648]3'，5'-二 -0-乙?；?2'-脫氧-5-氯-N4-羥基胞苷，[1649]3'，5'-二 -0-乙?；?2'-脫氧-5-溴-N4-羥基胞苷，[1650]3'，5'-二 -0-乙?；?2'-脫氧-5-碘-N4-羥基胞嘧啶，[1651]3'，5'-二 -0-乙?；?2'-脫氧-5-氰基-N4-羥基胞苷，[1652]3'，5'-二 -0-乙?；?2'-脫氧-5-乙氧基羰基-N4-羥基胞苷，[1653]3'，5'-二 -0-乙?；?2'-脫氧-5-氨基羰基-N4-羥基胞苷，[1654]3'，5'-二 -0-乙?；?2'-脫氧-5-乙?；?N4-羥基胞苷，[1655]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脫氧-5-甲基-N4-羥基胞苷，[1656]3'，5'-二 -0-乙?；?2'-脫氧-5-乙基-N4-羥基胞嘧啶，[1657]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脫氧-5-正丙基-N4-羥基胞苷，[1658]3'，5'-二 -0-乙?；?2'-脫氧-5-異丙基-N4-羥基胞苷，[1659]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脫氧-5-乙烯基-N4-羥基胞苷，[1660]3'，5'-二 -0-乙?；?2'-脫氧-5-烯丙基-N4-羥基胞苷，[1661]3'，5'-二 -0-乙?；?2'-脫氧-5-乙炔基-N4-羥基胞苷，[1662]3'，5'-二 -0-乙?；?2'-脫氧-5-(2-氯乙烯基)-N4-羥基胞苷，[1663]3'，5'-二 -0-乙?；?2'-脫氧-5-(2-溴乙烯基)-N4-羥基胞苷，[1664]3'，5'-二 -0-乙?；?2'-脫氧-5-(2-碘乙烯基)-N4-羥基胞苷，[1665]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脫氧-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)_N4-羥基胞苷，[1666]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脫氧-5-(2-羥基羰基乙烯基)-N4-羥基胞嘧啶，[1667]3'，5'-二 -0-乙?；?2'-脫氧-5-苯基-N4-羥基胞苷，和[1668]3'，5'-二 -0-乙?；?2'-脫氧-5-芐基-N4-羥基胞苷。實施例40N4-羥基胞苷將2' ,3' -0-亞異丙基-5' -0-三苯甲基-N4-羥基胞苷(500mg，0. 92mmol)溶 解在50mL三氟乙酸與水(2 1，v/v)的混合物中，將該溶液在50°C攪拌3小時。冷卻至 室溫后，通過蒸發(fā)除去溶劑，與乙醇(3X20mL)共蒸發(fā)。通過硅膠色譜柱純化殘余物(20% MeOH在CHC13中的混合物)，獲得了 N4-羥基胞苷(215mg)，為白色固體，將其從熱的乙醇中 重結(jié)晶；mp. 173-176°C。NMR (DMS0-d6) 8 3. 66-3. 71 (m, 2H) , 3. 93 (br s, 1H) ,4. 08-4. 15(m,2H), 5. 17-5. 23(m，2H，D20 可交換的)，5. 43 (d，J = 6. 00Hz，lH，D20 可交換的)，5. 73 (d，J = 8. 16Hz, 1H)，5. 90 (d, J = 8. 12Hz, 1H)，7. 28 (d, J = 8. 40Hz, 1H)，9. 65 (s, 1H, D20可交換的)，
0. 15(s，lH，D20 可交換的)
1673]元素分析:C9H13N306 的計算值:C,41. 70 ；H,5. 05 ；N, 16. 21.實測值:C，41. 85 ；H, 14；N,16. 34。
亞異丙基-5-0-三苯基甲按照類似方法，但是使用相應(yīng)的5-取代的2' ,3'-基-N4-羥基胞苷核苷，合成了下列N4-羥基-5-取代的胞苷[1675]5-氟-N4-羥基胞苷，[1676]5-氯-N4-羥基胞苷，[1677]5-溴-N4-羥基胞苷，[1678]5-碘-N4-羥基胞苷，[1679]5-甲基-N4-羥基胞苷，[1680]5-乙基-N4-羥基胞苷，[1681]5-正丙基-N4-羥基胞苷，[1682]5-異丙基-N4-羥基胞苷，[1683]5-乙烯基-N4-羥基胞苷，[1684]5-乙炔基-N4-羥基胞苷，[1685]5-(2-氯乙烯基)-N4-羥基胞苷，[1686]5-(2-溴乙烯基)-N4-羥基胞苷，[1687]5-(2-碘乙烯基)-N4-羥基胞苷，[1688]5-(2-甲氧基羰基乙烯基)_N4-羥基胞苷，[1689]5-(2-羥基羰基乙烯基)-N4-羥基胞苷，[1690]5-苯基-N4-羥基胞苷，和[1691]5-芐基-N4-羥基胞苷。[1692]按照類似方法，但是使用氨的甲醇溶液代替三氟乙
-(2,5- 二 -0-乙?；?3-脫氧-D-赤呋喃戊糖基)-N4-羥基胞嘧啶核苷，合成了下列 N4-羥基-5-取代的3'-脫氧胞苷 [1693] 5-氟-3'-脫氧-N4-羥基胞苷，[1694]5-氯-3'-脫氧-N4-羥基胞苷，5-溴-3'-脫氧-N4-羥基胞苷，5-碘-3'-脫氧-N4-羥基胞苷，5-甲基-3'-脫氧-N4-羥基胞苷，5-乙基-3'-脫氧-N4-羥基胞苷，5-正丙基-3'-脫氧-N4-羥基胞苷，5-異丙基-3'-脫氧-N4-羥基胞苷，5-乙烯基-3'-脫氧-N4-羥基胞苷，5-乙炔基-3'-脫氧-N4-羥基胞苷，5- (2-氯乙烯基)-3 ‘-脫氧-N4-羥基胞苷，5- (2-溴乙烯基)-3 ‘-脫氧-N4-羥基胞苷，5- (2-碘乙烯基)-3 ‘-脫氧-N4-羥基胞苷，5-(2-甲氧基羰基乙烯基)_3'-脫氧-N4-羥基胞苷，5- (2-羥基羰基乙烯基)_3 ‘-脫氧-N4-羥基胞苷，5-苯基-3'-脫氧-N4-羥基胞苷，和5-芐基-3'-脫氧-N4-羥基胞苷。按照類似方法，但是使用氨的甲醇溶液代替三氟乙酸，并使用相應(yīng)的5-取代的 3' ,5'-二-0-乙酰基-2'-脫氧-N4-羥基胞嘧啶核苷，合成了下列N4-羥基-5-取代
的2'“脫氧胞苷[1711]5-氟-2'-脫氧-N4-羥基胞苷，[1712]5-氯-2'-脫氧-N4-羥基胞苷，[1713]5-溴-2'-脫氧-N4-羥基胞苷，[1714]5-碘-2'-脫氧-N4-羥基胞苷，[1715]5-甲基-2_脫氧--N4-羥基胞苷，[1716]5-乙基-2_脫氧--N4-羥基胞苷，
1717]5-正丙基-2'-脫氧-N4-羥基胞苷，
1718]5-異丙基-2'-脫氧-N4-羥基胞苷，
1719]5-乙烯基-2'-脫氧-N4-羥基胞苷，
1720]5-乙炔基-2'-脫氧-N4-羥基胞苷，
1721]5_(2_氯乙烯基)_2'-脫氧-N4-羥基胞苷，
1722]5_(2_溴乙烯基)_2'-脫氧-N4-羥基胞苷，
1723]5_(2_碘乙烯基)_2'-脫氧-N4-羥基胞苷，
1724]5-(2-甲氧基羰基乙烯基)_2'-脫氧-N4-羥基胞苷，
1725]5-(2-羥基羰基乙烯基)_2 ‘-脫氧-N4-羥基胞苷，
1726]5-苯基-2'-脫氧-N4-羥基胞苷，和
1727]5-芐基-2 ‘-脫氧-N4-羥基胞苷。
1728]實施例41
1729]2,3'-脫水-1-(2-脫氧-2-氟-5-0-三苯甲基-3-D-呋喃來蘇糖基)胸腺嘧 啶(194，R = Tr)[1730]將1-(2_脫氧-2-氟-3-0-甲磺?；?5-0-三苯基甲基-0 -D-阿拉伯呋喃糖基) 胸腺嘧啶(193，R = Tr，6. 0g)和DBU(3. OmL)在二氯甲烷(50mL)中的溶液加熱回流16小 時。將該混合物真空濃縮后，在硅膠柱上對殘余物進行色譜純化，用氯仿洗脫，從甲醇中重 結(jié)晶后，獲得了 4.4g 2，3'-脫水-1-(2'-脫氧-2'-氟-5-0-三苯甲基-3-D-呋喃來 蘇糖基)胸腺嘧啶(194，R = Tr)，mp 252_255°C。NMR(DMS0-d6) ； 8 1. 80(s,3H, Me), 4. 61 (1H, m)，5. 40 (dm, 1H)，5. 89 (1H, ddd)，5. 96 (1H, dd, H_1，)，7. 30 (15H, Tr)，7. 66 (s, 1H, H-6).實施例42l-(2，3_ 二脫氧-2 ‘-氟-5' _0_ 三苯甲基-0 _D_ 甘油(glycero)-戊 (pento)-2-烯呋喃糖基(enofuranosyl))-胸腺嘧啶(195，R = Tr)將194(646mg)和t_Bu0K (270mg)在DMSO(lOmL)中的懸浮液于室溫攪拌2小時，然 后過濾。將濾液真空濃縮，在硅膠柱上對殘余物進行色譜純化(CHCl3/Me0H，49 1 v/v), 獲得了 600mg 195，mp. 176_180°C (從 EtOH 中結(jié)晶)。匪R(DMS0-d6) 8 1. 27(s,3H, Me), 3. 21(m,2H, H-5，5”)，4. 98(m，1H，H_4，)，6. 17 (t, 1H, H_l，，Jl，，2，= Jl，，F(xiàn) = 1. 5Hz)，6. 81 (m，1H， H-3，) ,7. 32 (m, 16H, H-6, Tr)，11. 52 (s, 1H, NH 可交換的)，實施例43l-(2，3- 二脫氧-2-氟-D-甘油_2_烯呋喃糖基)胸腺嘧啶(196)將195(600mg)在80%乙酸水溶液(10mL)中的溶液加熱回流20分鐘，然后真空濃 縮至干。在硅膠柱上對殘余物進行色譜純化(CHCl3/Me0H，9 1 v/v)，獲得了 100mg 196， mp 154-159°C (從 Et0H_H20 中結(jié)晶)。匪R(DMS0-d6) S 1.76(s，3H，Me)，3. 61(m，2H，H-5，，5”)， 4. 79 (m, 1H, H-4，)，5. 15 (t，1H，5，_0H，可交換的)，5. 99 (m, 1H, H_l，) ,6. 76 (m, 1H, H_3，)， 7. 88 (s, 1H, H-6)，11. 43 (s，1H, NH,可交換的) 實施例44(15，25，3札41 )-4-(叔丁氧基甲基)-2，3-(亞異丙二氧基)環(huán)戊+醇(219)在0°C，向 4_(叔丁氧基甲基)環(huán)戊烷-2，3_ 二醇(218, 5g)和 CeCl3 *7H20(7. 69g) 在甲醇(80mL)內(nèi)的溶液中加入NaBH4(1.01g)，并將該混合物在0°C攪拌1小時。通過加 入冷水來中止該反應(yīng)，用乙酸乙酯(2X300mL)萃取。將合并的有機萃取液用鹽水洗滌 (2X200mL)，用硫酸鈉干燥，然后真空濃縮。在硅膠柱上對殘余物進行色譜純化(30%乙酸 乙酯在正己烷中的混合物)，獲得了 219(4. 8g,95% )，為漿狀物。'H-NMR(CDC13) 6 1. 13(s，9H，t_Bu)，1. 34(s，3H，Me)，1. 48(s，3H，Me)， 1. 83(m，2H，5a，b_H)，2. 19 (m，1H，4_H)，2. 44(d, 0H，可交換的)，3. 20 (dd, J = 4. 5,8. 8Hz, 1H, 6a-H)，3. 31 (dd, J = 4. 5，8. 8Hz，1H, 6b_H)，4. 23 (m, 1H, 1_H)，4. 44 (m, 2H, 2_H，3_H).元素分析:C13H2404的計算值C，63. 91 ；H，9. 90。實測值C，64. 09 ；H，9. 87。實施例45(IS, 2S，3R，4R) ~4~ (叔丁氧基甲基)_2，3_ (亞異丙二氧基)甲磺酰氧基環(huán)戊烷 (220)[1747]在0°C，向219(6. 50g)和三乙胺(7. 3g)在二氯甲烷(170mL)內(nèi)的溶液中滴加甲磺 酰氯(4. 73g)。45分鐘后，加入水(270mL)。用二氯甲烷(3X200mL)萃取水層。合并有機 相，用鹽水(2X200mL)洗滌，用硫酸鈉干燥，并真空濃縮，獲得了粗產(chǎn)物220，其純度足以直 接用于下一步驟。實施例46(1R，2S，3R，4R)-1-疊氮基_4-(叔丁氧基甲基)-2，3_(亞異丙二氧基)環(huán)戊烷 (221)將上面獲得的220與疊氮化鈉(17. 3g)在DMF(300mL)中的混合物在140°C攪拌下 加熱過夜。將該混合物過濾，將濾液真空濃縮。將殘余物在乙酸乙酯(150mL)與水(50mL) 之間分配。用硫酸鈉干燥有機層，真空濃縮，在硅膠柱上對殘余物進行色譜純化(1-4%梯度 的乙酸乙酯在正己烷中的混合物)，獲得了 221 (5. 9g)，為油狀物。NMR(CDC13) 6 1. 18(s，9H，t_Bu)，1. 30(s，3H，Me)，1. 46 (s, 3H, Me)，1. 71 (m, 1H，5a_H)，2. 29 (m，2H，4_H，5b_H)，3. 29 (dd, J = 6. 7,8. 8Hz, lH，6a_H)，
3.37 (dd, J = 7. 0,8. 8Hz, lH，6b_H)，3. 96 (m, 1H, 1_H)，4. 40 (dd, J = 2. 3,6. 1Hz, 1H，3_H)，
4.48 (dd, J = 2. 0,6. 1Hz, 1H，2_H) 元素分析:C13H23N303 0. 13Et0Ac 的計算值C，57. 95 ；H，8. 65，N，14. 99.實測值 C，58. 25 ；H，8. 71 ；N, 14. 76。實施例47(1札25，3札41 )-4-(叔丁氧基甲基)-2，3-(亞異丙二氧基)-1-環(huán)戊基胺(222)將221 (4. Og)與10% Pd/C(l. Og)在無水乙醇(140mL)中的懸浮液于20psi的H2 下振搖5小時。將該混合物過濾，將濾液真空濃縮，獲得了粗產(chǎn)物222(3. 6g，定量產(chǎn)率)，其 不用進一步純化直接用于下一步驟。匪 R(CDC13) 8 1. 18(s,9H, t_Bu)，1. 28 (s，3H，Me)， 1. 36 (m, lH，5a-H)，1. 45(s，3H，Me)，1. 89 (br s，2H，NH2)，2. 24-2. 36 (m，2H，4_H，5b_H)， 3. 34-3. 43(m，3H，1-H，6a，b_H)，4. 21 (dd，J = 2. 6，6. 2Hz，1H，3_H)，4. 48 (dd，J = 2.8， 6. 2Hz,1H,2-H).元素分析:C13H26N03 0. 16H20 的計算值:C，63. 41 ；H, 10. 37，N, 5. 69.實測值C， 63. 09 ；H, 10. 16 ；N，5. 59。實施例48N-{[lR，2S，3R，4R)-4_(叔丁氧基甲基)-2，3_(亞異丙二氧基)環(huán)戊基]氨基羰 基]-3-甲氧基-2-丙烯酰胺(223)將氰酸銀(7. 60g，用五氧化二磷在黑暗中于100°C真空干燥3小時)、3 -甲氧基 丙烯酰氯(2. 64g)在無水苯(30mL)中的混合物加熱回流30分鐘，然后冷卻至室溫。沉淀沉 降后，在-15至_20°C、氮氣氛下，用15分鐘將含有0 -甲氧基丙烯?；惽杷狨サ?2. 5mL 上清液加到222(3. Og)在無水DMF(50mL)內(nèi)的溶液中。在氮氣氛下，將該混合物在_15°C攪 拌2小時，然后在室溫攪拌10小時以上。真空濃縮并與甲苯(2X20mL)共蒸發(fā)，產(chǎn)物223 固化(4. Og)。屮腿_13) 8 1. 17(s，9H，t-Bu)，1. 28(s，3H，Me)，1. 47(s，3H，Me)，1. 58 (m, 1H，5，a_H)，2. 28 (m, 1H,4-H), 2. 36-2. 43 (m, 1H，5，b_H)，3. 33-3. 42(m，2H，6，a, b_H)，3. 73(s，3H，OMe)，4. 20 (m, 1H, 3，-H)，4. 45(m，2H，1，_H，2，_H)，5. 35 (d, J = 12. 3Hz, 1H，5_H)，7. 67 (d, J = 12. 3Hz, 1H, 6-H)，8. 72 (br s, 1H, NH)，9. 35 (br s, 1H, NH).元素分析:C18H30N206的計算值C，58. 36 ；H，8. 16，N, 7. 56.實測值C，58. 28 ；H, 8. 16 ；N，7. 60。實施例49(1 ‘ R,2' S,3' R,4' R)-1_[4_ (叔丁氧基甲基)_2，3_ 亞異丙 二氧基)環(huán) 戊-1-基]尿嘧啶(5‘-叔丁基-2' ,3' -0-亞異丙基-carba-尿苷，224)將223(4. 2g)在乙醇(25mL)和氫氧化銨(30%，llmL)中的溶液在不銹鋼彈中于 100°C加熱12小時。除去溶劑后，在硅膠柱上對殘余物進行色譜純化(乙酸乙酯-正己燒， 1 1 v/v)，獲得了 224 (3.21 g)，為白色泡沫狀物。匪R(CDC13) 8 1. 19(s，9H，t_Bu)， 1.30(s，3H，Me)，1. 54(s，3H，Me)，1. 97 (m，1H，5，a_H)，2. 32-2. 41 (m，2H，4，_H，5，b_H)， 3. 43-3. 50 (m, 2H，6，a，b_H)，4. 48 (dd，J = 4. 1，6. 5Hz，1H，3，_H)，4. 65-4. 75 (m, 2H, 1，_H， 2，-H), 5. 72 (d, J = 8. 0Hz, 1H，5_H)，7. 35 (d, J = 8. 0Hz, 1H，6_H)，8. 63 (br s, 1H, NH).元素分析:C17H26N205的計算值:C,60. 34 ；H，7. 74，N，8. 28.實測值:C，60. 06 ；H, 7. 70 ；N，8. 14。實施例50(1 ‘ R,2' S,3' R,4' R)-1_[4_ (叔丁氧基甲基)_2，3_ 亞異丙 二氧基)環(huán) 戊-1-基]-5-氟尿嘧啶(5‘ -0-叔丁基-2' ,3' -0-亞異丙基-carba-5-氟尿苷，225)在室溫向224(2. 50g)在乙酸(600mL)內(nèi)的溶液中小心地鼓入含有5%氟的氟-氮 混合物30分鐘。將該混合物攪拌直至在TLC板上不能檢測到任何UV吸收。真空除去溶 劑，將殘余物與乙酸(20mL)共蒸發(fā)至干燥。在50°C用三乙胺將殘余物處理1.5小時，然 后真空濃縮至干。通過硅膠柱色譜純化殘余物(乙酸乙酯-正己烷，1 1 v/v)，獲得了 225(1.31g)，為白色泡沫狀物。匪R(CDC13) 8 1.22(s，9H，t_Bu)，1. 31 (s，3H，Me)，1. 55 (s，3H，Me)，1. 85 (m，1H， 5，a-H), 2. 38-2. 51(m，2H，4，_H，5，b_H)，3. 44—3. 52(m，2H，6，a, b_H)，4. 47 (dd，J = 3. 4，
6.2Hz，1H，3，-H)，4. 58(t，J = 6. 0Hz，1H，1，_H)，4. 87 (dd，J = 8. 9，14. 5Hz，1H，2，_H)，
7.61 (d, J = 6. 1Hz, 1H,6-H) ,8. 77 (br s，lH，NH).元素分析:C17H25FN205 0. 25H20 的計算值:C，56. 58 ；H,7. 12，N, 7. 76.實測值C， 56. 20 ；H，7. 02 ；N, 7. 50。實施例51(1 ‘ R,2' S,3' R,4' R)-1_[4_ (叔丁氧基甲基)_2，3_ 亞異丙 二氧基)環(huán) 戊-1-基]-5-氟胞嘧啶(226). (5 ‘ -0-叔丁基-2'，3' -0-亞異丙基-carba-5-氟胞 苷)將225(350mg)、三乙胺(190mg)、2，4，6_三異丙基苯磺酰氯(590mg)和 DMAP(230mg)在乙腈(50mL)中的混合物在室溫攪拌1天。加入氫氧化銨溶液(30%，15mL)， 將該混合物再攪拌5小時。通過加入氯仿(250mL)和水(10mL)來中止該反應(yīng)。用鹽水洗 滌有機層，用硫酸鈉干燥，并真空濃縮。通過硅膠柱色譜純化殘余物(5%Me0H在01(13中的混合物，v/v)，獲得了 226 (205mg)，mp 128_130°C。UV(MeOH)入 max 286. 5nm. 1HNMR(CDC13) 8 1. 19(s,9H, t_Bu)，1. 29 (s，3H，Me)， 1. 53(s，3H，Me)，2. 02 (dt, J = 10. 2，12. 8Hz, 1H，5，a_H)，2. 32 (m, 1H，4，_H)，2. 42 (dt, J = 8. 0，12. 7Hz, 1H，5，b_H)，3. 42 (dd, J = 6. 1,8. 7Hz, 1H，6，a_H)，3. 52 (dd, J = 4. 1,8. 8Hz, 1H，6，b-H)，4. 49(dd，J = 5. 1，6. 3Hz，1H，3，_H)，4. 60 (m，1H，1，_H)，4. 79 (dd，J = 5.0，
6.4Hz，1H，2，-H)，7. 49(d，J = 6.1Hz，1H，6-H). HR-FAB MS Obsd ；m/z 356.1981.Calcdfor C17H26FN304 :m/z 356. 1986(M+1)+.實施例52(1' R，2' S，3' R，4' R) _1_[2，3_ 二羥基 _4_(羥基甲基)環(huán)戊 基]_5_ 氟 胞嘧啶(carba-5-氟胞苷，227)將226 (180mg)在三氟乙酸與水的混合物2 1 (v/v) (40mL)中的溶液在50°C攪拌 3小時。真空除去溶劑，將殘余物與乙醇(2X30mL)共蒸發(fā)，在硅膠柱上純化(MeOH_CHCl3， 1 5 v/v)，獲得了 227 (47. 5mg)，為泡沫狀物。UV (H20)入 max 284nm (e5，876，pH7)， 293. 5nm( e 7，440，pH2)，2845nm( e 5，883，pHll). 匪R(DMS0_d6) 8 1. 19 (m, 1H，5，a_H)， 1. 92 (m, 1H，4，a-H), 2. 00 (ddd, J = 8. 3,8. 7，12. 5Hz, 1H，5，b_H)，3. 42(m，2H，6，ab_H)，
3.70(dd, J = 2. 9,5. 3Hz, lH，3，b_H)，3. 98(dd, J = 5. 2,9. 0Hz, 1H，2，_H)，4. 10(d, J = 4. 5， 1H, 0H，可交換的)，4. 51(br s，1H，0H，可交換的)，4. 60 (dd，J = 9. 0，18. 2Hz，1H，1，_H)，
4.73 (d，J = 6. 1Hz，1H，0H，可交換的)，7. 33 (bs，1H，可交換的)，7. 55 (bs，1H，可交換的)，
7.98 (d, J = 7. 3Hz，1H，6-H). HR-FAB MSObsd ；m/z 260. 1054. Calcd for C17H26FN304 :m/z 260. 1047(M+1)+.按照類似方法，但是使用相應(yīng)的5-取代的衍生物，制得了下列5-取代的 carba- ^"^f 5- it -carba-5-溴-carba-尿苷，5-碘-carba-尿苷，5-氰基-carba-尿苷，cara-尿苷 _5_ 甲酸，5-乙氧基羰基-carba-尿苷，carba-尿苷 _5_ 甲酰胺，5-羥基甲基-carba-尿苷，5-硝基-carba-尿苷， [1791 ] 5-氨基-carba-尿苷，5-氯-carba-胞苷，5-溴-carba-胞苷，5-碘-carba-胞苷，5-氰基-carba-胞苷，cara-胞苷 _5_ 甲酸，5-乙氧基羰基-carba-胞苷，[1798]carba-胞苷 _5_ 甲酰胺，5-羥基甲基-carba-胞苷，5-硝基-carba-胞苷，和5-氨基-carba-胞苷。XI.牛物學(xué)方法本發(fā)明還提供了使用實時逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(“Q-RT-PCR”)來定量測定宿主中 病毒負載量的一種有效方法。該方法包括使用可雜交到靶病毒DNA或RNA上的猝滅熒光探 針分子。經(jīng)過核酸外切降解，可監(jiān)測可檢測的熒光信號。因此，使用該技術(shù)，通過監(jiān)測熒光 信號的存在可實時探測RT-PCR擴增的DNA或RNA。在一個具體的本發(fā)明實施方案中，提供了 RT-PCR在定量測定黃病毒科病毒的病 毒負載量中的應(yīng)用。在一個更具體的本發(fā)明實施方案中，提供了 RT-PCR在定量測定MDBK細胞系或宿 主樣本中BVDV的病毒負載量中的應(yīng)用。在另一個本發(fā)明實施方案中，提供了設(shè)計成經(jīng)過核酸外切降解發(fā)出熒光并與BVDV NADL NS5B區(qū)域互補的探針分子。在一個更具體的本發(fā)明實施方案中，提供了探針分子，所述探針分子具有序列5 ‘ 6-fam-AMTCCTCCTAACAAGCGGGTTCCAGG-tamara-3' (Sequence ID No 1)，和引物，所述引物 具有正義序列5' -AGCCTTCAGTTTCTTGCTGATGT-3‘ (Sequence ID No 2)和反義序列5' -TGTTGCGAAAGCACCAACAG-3‘ (Sequence ID No 3)。在一個具體的本發(fā)明實施方案中，提供了 RT-PCR在實時定量測定宿主衍生樣本 或細胞系中的HCV的病毒負載量中的應(yīng)用。在一個具體的本發(fā)明實施方案中，提供了 RT-PCR的應(yīng)用，設(shè)計成經(jīng)過核酸外切降 解發(fā)出熒光并與HCV基因組互補的探針分子。在一個更具體的本發(fā)明實施方案中，提供了 RT-PCR的應(yīng)用，設(shè)計成經(jīng)過核酸外切 降解發(fā)出熒光并與HCV 5'-未翻譯區(qū)域互補的探針分子。在一個更具體的本發(fā)明實施方案中，提供了探針分子，所述探針分子具有序列5 ‘ 6-fam-CCTCCAGGACCCCCCCTCCC-tamara-3‘ (SequenceID No 4)，和引物，所述引物具有正義 序列5' -AGCCATGGCGTTAGTA(T/C)GAGTGT-3‘ (Sequence ID No 5)和反義序列5‘ -TTC CGCAGACCACTATGG-3‘ (Sequence ID No 6)。A. RNA分離和定量RT-PCR分析本發(fā)明提供了稱為實時聚合酶鏈反應(yīng)(“RT-PCR”)的定量測定宿主中病毒負載 量的有效方法。該方法包括使用可雜交到病毒DNA或RNA上的猝滅熒光探針分子。因此， 經(jīng)過核酸外切降解，可監(jiān)測可檢測的熒光信號。因此，通過監(jiān)測熒光信號的存在可實時探測 RT-PCR 擴增的 DNA 或 RNA。作為該方法的一個實例，對于MDBK細胞中的BVDV，在第一個步驟中，通過市售柱 (Viral RNA extraction kit，QiaGen，CA)從140 ii L細胞培養(yǎng)物上清液中分離出病毒RNA。 然后將病毒RNA從柱上洗脫下來以獲得60 y L的總體積，然后通過使用適于BVDV NADL株 的引物的定量RT-PCR方法擴增。將猝滅熒光探針分子雜交到BVDV DNA上，之后經(jīng)過核酸 外切降解，生成可檢測到的熒光信號。因此，通過監(jiān)測熒光信號的存在來實時探測RT-PCR擴增的 DNA。借助于來 Primer Express 軟件(PE-Applied Biosystems)來設(shè)計 Ta#an 探 針分子(5' -6-fam-AAATCCTCCTAACAAGCGGGTTCCAGG-tamara 3' [Sequence ID No 1]和 引物(正義5' -AGCCTTCAGTTTCTTGCTGATGT-3‘ [Sequence ID No 2]；和反義5' -TGT TGCGAAAGCACCAACAG-3' [Sequence ID No 3])以與 BVDVNADL NS5B 區(qū)域互補。在 50 ii L RT-PCR混合物中分析總共10 ii L RNA。用于定量測定PCR的試劑和條件購自PE Applied Biosystems。使用濃度為6000噬斑形成單位(PFU) -0. 6PFU/份RT-PCR混合物的未稀釋接 種病毒來產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)曲線。通常獲得超過4-log的線性范圍?？刹捎帽容^方法來測定其它黃病毒科病毒(主要是HCV、YFV、登革熱病毒、西尼羅 河病毒等)在臨床樣本或組織培養(yǎng)樣本中的量。例如，HCV RNA純化與使用下述引物(5' -TTCCGCAGACCACTATGG-3‘ [Sequence ID No. 4]和5' -AGCCATGGCGTTAGTATGAGTGT-3‘ [Se quencelD No. 5])和探針(5' -6-fam-CCTCCAGGACCCCCCCTCCC-tamara-3' [Sequence ID No. 6])的實時RT-PCR的組合可獲得7-log線性范圍的病毒負載量檢測。B.細胞/病毒材料其特征被最好地確定的一個瘟病毒屬成員是BVDV。BVDV與HCV具有至少3個下 列所述的共有特征⑴它們都經(jīng)歷IRES-介導(dǎo)的翻譯；⑵NS4A輔因子是其NS3絲氨酸蛋 白酶所必需的；(3)它們經(jīng)歷在非結(jié)構(gòu)區(qū)域，尤其是在NS5A和NS5B接合位點的類似多蛋白加工。使用BVDV復(fù)制系統(tǒng)來發(fā)現(xiàn)抗黃病毒科化合物。本發(fā)明所述化合物具有抗瘟病毒 屬、H印aciviruse和/或黃病毒屬的活性。將Mai din-Darby牛腎(MDBK)細胞在補充10%熱滅活馬血清的改進的eagle培養(yǎng) 基(DMEM/F12 ；GibcoBRL)中于37°C在濕潤的5% C02培養(yǎng)箱中生長和保持。牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)株NADL在感染這些細胞后引起致細胞病變作用(CPE)。C.抗病毒測定使用胰蛋白酶-EDTA，通過標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)分離出在DMEM/F12_10%馬血清(HS)中生長 的MDBK細胞。將細胞以5X104個細胞/孔的濃度與測試化合物(20微摩爾(y M)濃度)接 種到96-孔平板中以給出100微升(yL)的總體積。1小時后，除去培養(yǎng)基，將細胞在50 yL 的總體積中以0. 02或0. 002的感染復(fù)數(shù)(M0I)感染45分鐘。然后除去病毒，并用100 u L 測定培養(yǎng)基洗滌2次。最后，將感染的細胞以含有濃度為10、40或lOOyM的測試化合物的 100 yL總體積接種。22小時后，通過經(jīng)由低速離心除去細胞碎屑來收集細胞上清液，然后 以定量方式測定病毒的存在。D.測試抗黃病毒科化合物的細胞毒件該實施例所進行的細胞毒性測試是標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。簡言之，在遞增濃度的測試化合物 (0、1、3、10、33和100 iiM)存在下，將細胞以不同濃度(取決于細胞類型、測定持續(xù)時間)， 典型地是以5 X 103個細胞/孔的濃度接種到96-孔平板中。培養(yǎng)3天后，通過加入MTS-染 料(Promega)，然后培養(yǎng)3小時來測定細胞存活力和線粒體活動。然后在490nm讀取含有染 料的平板。制造商(Promega)很好地描述并提供了這樣的操作方法。實施例53BVDV RT-PCR定量標(biāo)準(zhǔn)曲線如通過常規(guī)噬斑分析(Mendez，E.等人.J. Virol. 1998，72，4737)所測定的那樣，
158標(biāo)準(zhǔn)BVDV病毒貯備液含有2 X 106PFU/mL。從140 ii L該接種材料中提取病毒RNA，使用60 ii L 洗脫緩沖液洗脫。然后將該純化的RNA材料從10—1逐步稀釋到10_5。使用實時RT-PCR擴 增技術(shù)，測試10 y L每一稀釋液。該連續(xù)稀釋的結(jié)果在附圖1中繪圖表示，該圖將PFU與標(biāo) 準(zhǔn)物的濃度聯(lián)系起來。從該實驗可以清楚地看出，該技術(shù)給出了超過4-log的病毒可靠定 量測定(在擴增混合物中從6000至0. 6PFU/輸入)。在該實驗中，檢測的下限是0. 6PFU 或-0.221og PFU。因此，低于該檢測限的測試樣本的實時RT-PCR定量測定值視為不可靠。實施例54MDBK細胞中的BVDV復(fù)制周期為了測定MDBK細胞中的BVDV產(chǎn)生以及測定在一定時間內(nèi)的最近收獲時間，將細 胞以5X104個細胞/孔的濃度接種，并以M0I = 0.02或M0I = 0.002接種。感染后，除去 接種物，并用培養(yǎng)基將細胞洗滌2次。在不同時間點收獲細胞上清液；測定病毒的量，并與 初始接種物和細胞洗滌液比較。如附圖2所示，至少需要2個洗滌步驟來除去接種的病毒。 感染22小時后所產(chǎn)生的病毒的量大約等于接種細胞所用的病毒的量。根據(jù)這些結(jié)果，MDBK 細胞中一個BVDV復(fù)制周期為22小時。注意，在這些實驗中設(shè)定的檢測水平是基于通過標(biāo) 準(zhǔn)曲線確定的檢測下限。實施例55使用RT-PCR評價抗病毒化合物將MDBK細胞以5 X104個細胞/孔的濃度接種，用BVDV以0.02的感染復(fù)數(shù)(M0I) 感染，并在測試化合物存在下生長22小時。將未用測試化合物處理的細胞作為陰性對照， 利巴韋林用作陽性對照。提取病毒RNA，并通過實時RT-PCR進行分析。附圖3所示的典型 實驗證實了陰性對照和大部分處理的細胞產(chǎn)生了相差不大的病毒(1. 5-21ogPFU/輸入)， 這有效地表明了測試化合物是沒有活性的。然而，用陽性對照利巴韋林(RIB)或用5-羥基 尿苷(0-D-CL)處理的細胞表現(xiàn)出幾乎完全不存在病毒RNA。在22小時的繁殖期間，RIB 和3-D-CL將病毒產(chǎn)量減少了大約21og PFU或99%。從該種實驗中不能推斷出這些化合 物的精確效力，因為該實驗中的檢測限設(shè)定為-0. 221og PFU，并且在所述實驗條件下僅進 行了一個病毒復(fù)制周期。在一組類似實驗中，加大測試化合物的濃度范圍(0、1、3、10、33、10011|1)，來測定 抗BVDV化合物的效力或者將病毒產(chǎn)量抑制50%或90%時化合物的有效濃度(分別是EC5Q 或EC9(1值)。EC9(1值是指在22小時期間內(nèi)獲得病毒產(chǎn)量的1-log減少所必需的濃度。表 21列出了表現(xiàn)出有效抗病毒活性的化合物。該表給出了在感染22小時后以給定濃度觀察 到的最大病毒負載量減少。表21 感染22小時后的BVDV病毒負載量
159[1836] 實施例56測定抗病毒活性的另一細胞培養(yǎng)系統(tǒng)可通過改變細胞系統(tǒng)和病毒病原體來使上述測定適于黃病毒科的其它成員。測 定這些抗病毒化合物的效力的方法包括如在下列文獻中描述的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)的改進形式 Holbrook, MR 等人.Virus Res. 2000,69 (1) ,31 ；Markland, ff 等人.Antimicrob. Afients. Chemother. 2000,44 (4)，859 ；Diamond, MS 等人，J. Virol. 2000，74 (17)，7814 Jordan,I.等人，T. Infect. Pis. 2000,182，1214 :Sreenivasan, V.等人.T. Virol. Methods 1993， 45(1)，1 ；或 Baginski，SG 等人.Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. .2000，97 (14)，7981，或?qū)崟r RT-PCR技術(shù)。具體來說，可使用在HuH7細胞中的HCV復(fù)制子系統(tǒng)(Lohmarm，V等人Science, 1999，285 (5424)，110)或其改進形式(Rice 等人.2000，abstract Xth International Symposium for ViralHepatitis and Liver Disease, Atlanta, GA) 0實施例57測試候選化合物的細胞毒性該實施例所進行的細胞毒性測試是標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。簡言之，在遞增濃度的測試化合物 (0、1、3、10、33和100 iiM)存在下，將細胞以不同濃度(取決于細胞類型、測定持續(xù)時間)， 典型地是以5X 103個細胞/孔的濃度接種到96-孔平板中。培養(yǎng)3天(Vero細胞)、4天 (CEM細胞)或5天(PBM細胞)后，通過加入MTT-染料(Promega)，然后培養(yǎng)8小時來測定 細胞存活力和線粒體活性。之后通過加入停止溶液后再進行8小時培養(yǎng)，來固定含有涂料 的諸板。最后在570nm讀取吸收度。制造商(Promega)很好地描述并提供了這樣的操作方 法。表22中列出了在該方法中測試的化合物的相關(guān)目錄。雖然測試化合物一般沒有 細胞毒性，但是化合物0 "D-GA表現(xiàn)出對CEM細胞的選擇性細胞毒害作用。表22 :V-a和Villa的細胞毒性*
1848]*IC5QiiM(在 lOOiiM 的％抑制)
1849]實施例58
1850]測試候選化合物對呼吸系統(tǒng)病毒的抗病毒作用
1851]在這些實驗期間，測試了通式(I)化合物抗感染上呼吸道的一組病毒的抗病毒活 、生。用于這些目的的方法已很好地描述過。下列方案是得自Virology Branch, Division of Microbiology and InfectiousDiseases, NIAID, NIH 的標(biāo)準(zhǔn)操作方法。
1852]A.用于初次篩選的病毒和細胞系
1853](i)甲型和乙型流感病毒
1854]病毒株A/Beijing/262/95 (H1N1) (SourceCDC) ；A/Sydney/05/97 (H3N2) (source CDC) ；B/Beijing/184/93(source :CDC)。
1855]細胞系MaldinDarby Canine Kidney (MDCK)
1856](ii)呼吸道合胞體病毒(RSV)
1857]病毒株 A2 (source :ATCC)。
1858]細胞系:African Green Monkey kidney (MA-104)細胞
1859](iii)3型副流感病毒
1860]病毒株14702 (source :isolate 5/95Boivin, Montreal Canada)
1861]細胞系:African Green Monkey kidney (MA-104)細胞
1862]B.測定抗病毒活件的方法
1863](i)抑制病毒致細胞病變作用(CPE)
163[1864]該測試是在96-孔微量滴定板中進行的。在該CPE抑制測試中，將每一測試化合 物的41og1(l稀釋液加到3個含有單層細胞的杯子中，在5分鐘內(nèi)，加入病毒并將平板密封， 在37°C培養(yǎng)，當(dāng)未處理的感染對照達到3-4+CPE時(約72-120小時)，用顯微鏡讀取CPE。 在各個測試中，以與測試藥物平行的方式評價已知的陽性對照藥物。對于流感病毒、麻疹病 毒、RSV和副流感病毒，該藥物是利巴韋林。(ii)增加中件紅(NR)染料攝取進行該測試是為了確認在初始測試中觀察到的CPE抑制，并且在CPE已經(jīng)變?yōu)榧t 色后使用同一 96-孔微平板。將中性紅加到培養(yǎng)基中；沒有被病毒破壞的細胞攝取更大量 的染料，在使電腦化微平板讀數(shù)器上讀取。使用McManus描述的方法(Appl. Environment. Microbiol. 31 :35-38，1976)。從該染料攝取中確定 EC5(1。(iii)證實測試CPE_視覺和病毒產(chǎn)量測定使用CPE抑制和減少病毒產(chǎn)量作用的試驗再測試通過CPE抑制和NR染料攝取證 實有活性的化合物。通過系列稀釋到單層易感細胞上來測定從初始測試中收集的洗脫物的 病毒效價。CPE在這些細胞中的發(fā)展是存在感染性病毒的指示。由這些數(shù)據(jù)確定EC9(i，EC9(i 是將病毒產(chǎn)量抑制1-log的藥物濃度。表23總結(jié)了部分抗病毒測試的結(jié)果。0 -D-BS具有有效的抗黃病毒科活性，并且 具有抗甲型和乙型流感病毒的有效體外抗病毒能力，以及抗RSV的某些活性。沒有抗3型 副流感病毒的活性，這表明該化合物具有抗一些種類但不是全部RNA病毒的特異性抗病毒 作用。此外，化合物0 -D-CL是有效的體外抗RSV化合物，選擇性指數(shù)為150。表23 對呼吸系統(tǒng)病毒的抗病毒作用初始測試，通過CPE抑制(視覺觀察)用呼吸系統(tǒng)病毒進行抗病毒篩選 初始測試，通過中性紅用呼吸系統(tǒng)病毒進行抗病毒篩選 初始測試，通過中性紅用呼吸系統(tǒng)病毒進行抗病毒篩選 證實測試，通過視覺觀察用呼吸系統(tǒng)病毒進行抗病毒篩選(EC5Q)
p-d-bs
甲型流感病喜ec5g(|im) 1.3 (hin1) sp*> 246甲難流威病喜ECsgGiM) 0.5 證實測試，通過產(chǎn)量用呼吸系統(tǒng)病毒進行抗病毒篩選(EC9Q) *RSV 呼吸道合胞體病毒A**SI 選擇性指數(shù)(IC5。/EC90)實施例59測定候選化合物抗黃病毒科的抗病毒測試A.在Huh7細胞中的HCV復(fù)制子系統(tǒng)可在含有10%胎牛血清、IX非必需氨基酸Pen-Str印-Glu(分別是100單位/升， 100微克/升，和2. 92mg/升)和500-1000微克/毫升G418的DMEM培養(yǎng)基(高葡萄糖，不 含丙酮酸鹽)中培養(yǎng)含有HCV復(fù)制子的HuH7細胞。可如下所述在不含G418的相同培養(yǎng)基中 進行抗病毒篩選測定為了將細胞保持在對數(shù)生長期，以低密度例如1000個細胞/孔將細 胞接種到96孔中。接種細胞后立即加入測試化合物，在培養(yǎng)箱中于37°C培養(yǎng)3-7天。然后 除去培養(yǎng)基，制備細胞以提取總的核酸(包括復(fù)制子RNA和宿主RNA)。然后在Q-RT-PCR方 案中擴增復(fù)制子RNA，并因此定量測定。在復(fù)制子RNA定量測定中觀察到的差異是表示測試 化合物抗病毒效力的一個方法。典型實驗證實了，在陰性對照和沒有活性的化合物組中產(chǎn) 生了相差不大的復(fù)制子的量。這可以推斷出來，因為在兩組中測定的HCV RT-PCR的閾-周 期彼此接近。在這樣的實驗中，表示化合物抗病毒有效性的一個方法是從測試化合物的閾 RT-PCR周期減去陰性對照的平均閾RT-PCR周期。該值稱為S Ct ( A Ct或DCt)。在復(fù)制子 產(chǎn)生中，3.3的ACt等于1-log減少(等于ECJ。導(dǎo)致HCV復(fù)制子RNA水平減少程度大 于2 △ Ct (復(fù)制子RNA減少75% )的化合物是抗病毒治療的候選化合物。這樣的候選化合 物屬于通式(I)-(XXIII)結(jié)構(gòu)。表24給出了如果目標(biāo)化合物以所述方式培養(yǎng)96小時可獲 得的平均ACt值(N=測試的時間)。至于陽性對照，使用重組干擾素a-2a(R0fer0n-A， Hoffmann-Roche, New Jersey, USA)作為陽性對照。然而，該HCV ACt值不包括編碼病毒RNA-依賴性RNA聚合酶的復(fù)制子的任何特異 性參數(shù)。在典型的組中，化合物既可以降低宿主RNA聚合酶活性，也可以降低復(fù)制子-編碼 的聚合酶活性。因此，rRNA (或任何其它宿主RNA聚合酶I產(chǎn)物)或0 -肌動蛋白mRNA (或任何其它宿主RNA聚合酶II)的定量測定以及與未使用藥物的對照的RNA水平比較是確定 測試化合物對宿主RNA聚合酶的作用的有關(guān)測定。表24還給出了測試化合物對于rRNA的 ACt 值。通過獲得HCV ACt數(shù)據(jù)和rRNA A Ct，可引入特異性參數(shù)。該參數(shù)是通過從彼此 中減去兩個ACt值而獲得的。這樣獲得了 S-SCT值(A ACt或DDCt) ；0以上的值表示 對復(fù)制子編碼的聚合酶的抑制作用更強，0以下的△ ACt值表示對宿主rRNA水平的影響大 于對復(fù)制子水平的影響。表24中給出了以△ ACt值表示的測試化合物的抗病毒活性。一 般情況下，超過2的△ ACt值被認為與未使用藥物處理的對照有顯著差異，并因此表現(xiàn)出 顯著的抗病毒活性。然而，A ACt值小于2，但是表現(xiàn)出有限分子細胞毒性數(shù)據(jù)(rRNA ACT 為0-2)的化合物也有可能是活性化合物。在另一個典型的組中，化合物可能降低宿主RNA聚合酶活性，但是不降低宿主DNA 聚合酶活性。因此，rDNA或肌動蛋白DNA(或任何其它宿主DNA片斷)的定量測定以 及與未使用藥物的對照的DNA水平比較是確定測試化合物對細胞DNA聚合酶的作用的有關(guān) 測定。表25給出了測試化合物對于rDNA的A Ct值。通過獲得HCV ACt數(shù)據(jù)和rDNA A Ct，可引入特異性參數(shù)。該參數(shù)是通過從彼此 中減去兩個ACt值而獲得的。這樣獲得了 △ ACt值；0以上的值表示對復(fù)制子編碼的聚 合酶的抑制作用更強，0以下的△ ACt值表示對宿主rDNA水平的影響大于對復(fù)制子水平 的影響。表25中給出了以△ ACt值表示的測試化合物的抗病毒活性。一般情況下，超過 2的A ACt值被認為與未使用藥物處理的對照有顯著差異，并因此是進一步評估的有意義 的化合物。然而，A ACt值小于2，但是表現(xiàn)出有限分子細胞毒性(rDNA A CT為0_2)的化 合物也可能是想要的化合物。導(dǎo)致HCV復(fù)制子RNA水平特異性降低，但是使得細胞RNA和/或DNA水平發(fā)生有 限降低的化合物是抗病毒治療的候選化合物。評價了屬于通式⑴-(XXIII)的候選化合物 降低黃病毒科病毒RNA(包括BVDV和HCV)的特異性能力，并檢測了有效的化合物(表21、 24 和 25)。
168
平均HCVRNA 平均rRNA
平均 實施例600-D-GA的毒性特性該實施例所進行的細胞毒性測試是標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。簡言之，在遞增濃度的測試化合物 (0、1、3、10、33和100 iiM)存在下，將細胞以不同濃度(取決于細胞類型、測定持續(xù)時間)， 典型地是以5X103個細胞/孔的濃度接種到96-孔平板中。根據(jù)細胞類型，與測試化合物 培養(yǎng)的時間可以改變，但是一般為3-5天。通過加入MTT-染料(Promega)，然后培養(yǎng)8小時 來測定細胞存活力和線粒體活性。之后通過加入停止溶液，然后再培養(yǎng)8小時將含有染料 的平板固定。最后在570nm讀取吸收度。制造商(Promega)很好地描述并提供了這樣的操作方法。雖然測試化合物一般沒有細胞毒性，但是令人驚奇的是，充足的0 -D-GA表現(xiàn)出 對于CEM細胞的選擇性細胞毒害作用(表21)。為了探究該化合物的完全潛力，將一組人 惡性T和B細胞和不同的腫瘤細胞系與不同濃度的0 -D-GA培養(yǎng)，讀取吸收度后，計算IC5(1 值。使用Ara-G、5FU和放線菌酮作為對照(表26)。0 -D-GA在人惡性T和B細胞中有有效毒性，但是在人PBM細胞和非_T或B腫瘤 細胞中沒有毒性。與Ara-C和5-FU相比，0 -D-GA的抗癌活性對于T和B細胞有高度選擇 性。表26 0 -D-GA抗不同腫瘤細胞系的毒性特性(IC5Q，uM)* *MTT測定(3-5天的培養(yǎng)時間)PBM 人外周血液單核細胞Vero 非洲綠猴腎細胞系CEM:人T-細胞淋巴瘤細胞系SUDHL-1 人退行發(fā)育大T-細胞淋巴瘤細胞系SupTI 人T-細胞成淋巴細胞的細胞系H9 人T-細胞成淋巴細胞的細胞系JY:人B-細胞成淋巴細胞的細胞系(用EBV轉(zhuǎn)化的)BL41 人B-細胞成淋巴細胞的細胞系LNCap 人前列腺腺癌細胞系SK-MES-1 人肺鱗狀癌細胞系SK-MEL-28 人黑素瘤細胞系HEPG2 人肝臟癌細胞系MCF-7 人乳腺癌細胞系通過加入天然核苷來測定對于CEM細胞(人T-細胞淋巴瘤)和SUDHL-1細胞(人 退行發(fā)育大T-細胞淋巴瘤細胞系)中的0-D-GA相關(guān)細胞毒性的防止作用。通過向培養(yǎng) 基中加入50 y M天然核苷和遞增濃度的0 -D-GA來開始該實驗。將CEM細胞以2500個細 胞/孔的濃度接種，并培養(yǎng)3天(=快生長性細胞系，倍增時間為約1.3天)。將SUDHL-1 細胞以10000個細胞/孔的濃度接種，并培養(yǎng)4天(=慢生長性細胞系，倍增時間為約3 天)。附圖4中繪圖表示了該實驗的結(jié)果。該附圖表明，胞苷和尿苷顯著防止了 0-D-GA在 SUDHL-1細胞和CEM細胞(類似的圖，未顯示)中的毒性。2'-脫氧胞苷具有中等預(yù)防活 性作用。從這些數(shù)據(jù)可以推斷出，0-D-GA同等有效地抗慢生長性SUDHL-1細胞和快生長 性CEM細胞，并且胞苷和尿苷在這兩種細胞系中都防止了與該化合物有關(guān)的毒性。0-D-GA 的作用可與宿主RNA分子的合成和功能有關(guān)，但是與DNA分子的合成和功能無關(guān)。已經(jīng)用各種具體和優(yōu)選的實施方案和技術(shù)來描述了本發(fā)明。然而應(yīng)當(dāng)理解，通過 本發(fā)明的上面詳細描述，多種改變和變型對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，并且可 在仍然在本發(fā)明的實質(zhì)和范圍內(nèi)的情況下作出。
權(quán)利要求
式I-b、I-c、II-a、II-b或II-c的化合物或其β-L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表現(xiàn)出黃病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途其中每個D是氫、烷基、?；?、一磷酸、二磷酸、三磷酸、一磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯、磷脂或氨基酸；每個W1和W2獨立地為CH或N；每個X1和X2獨立地為氫、鹵素(F、Cl、Br或I)、NH2、NHR4、NR4R4′、NHOR4、NR4NR4′R4″、OH、OR4、SH或SR4；每個Y1是O、S或Se；每個Z是CH2或NH；每個R1和R1′獨立地為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級炔基、芳基、烷基芳基、鹵素(F、Cl、Br或I)、NH2、NHR5、NR5R5′、NHOR5、NR5NHR5′、NR5NR5′R5″、OH、OR5、SH、SR5、NO2、NO、CH2OH、CH2OR5、CO2H、CO2R5、CONH2、CONHR5、CONR5R5′或CN；每個R2和R2′獨立地為氫或鹵素(F、Cl、Br或I)、OH、SH、OCH3、SCH3、NH2、NHCH3、CH＝CH2、CN、CH2NH2、CH2OH、CO2H；每個R3和R3′獨立地為氫或鹵素(F、Cl、Br或I)、OH、SH、OCH3、SCH3、NH2、NHCH3、CH3、C2H5、CH＝CH2、CN、CH2NH2、CH2OH、CO2H；每個R4、R4′、R4″、R5、R5′和R5″獨立地為氫、低級烷基、低級鏈烯基、芳基或芳基烷基例如未取代或取代的苯基或芐基；條件是對于式I-b和I-c的核苷，R2和R2′當(dāng)中至少有一個是氫，且R3和R3′當(dāng)中至少有一個是氫。FSA00000131012000011.tif
2.
3.權(quán)利要求1的用途，其中式(I-b)的3-D核苷選自一種下列化合物或其0-L對映 體或其可藥用鹽
4.權(quán)利要求1的用途，其中式(II-b)的 體或其可藥用鹽_D核苷選自一-種下列化合物或其0-L對映
5.通式(V)、(VI)或(VII)化合物或其0-L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療或 預(yù)防表現(xiàn)出黃病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方 面的用途 每個口、^1、^2、^、^、？1、？、! 1、!^、R2、R2'、鏟和鏟'的定義同前，條件是對于通式 (V)或(VII)的核苷，R2和R2'當(dāng)中至少有一個是氫，且R3和R3'當(dāng)中至少有一個是氫。
6.權(quán)利要求5的用途，其中式(V-a)的3-D核苷選自一種下列化合物或其0-L對映 體或其可藥用鹽
7.
8.
9.通式(XI)化合物或其H -L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表現(xiàn)出黃病 譯斗、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途 其中 每個口 每個Z1和Z2獨立地為0、S、NR6或Se ；r3和r3'的定義同前，每個R3是氫、低級烷基或低級?；?。
10.權(quán)利要求9的用途，其中式(XI-a)的3-D核苷選自一種下列化合物或其0-L對 映體或其可藥用鹽
11.權(quán)利要求9的用途，其中式(XI-b)的3-D核苷選自一種下列化合物或其0-L對 映體或其可藥用鹽
12.通式(XIII)化合物或其0-L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表現(xiàn)出 黃病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途 [xin-c]、R2、R2'、rtR3'的定義同前；[XIII-a]其中每個dU 每個Y2是0、S、NH或NR7 ； 每個Y3是0、S、NH或NR8 ； 每個X3是OR9或SR9 ；且每個R7、R8和R9是氫、CrC3低級烷基、芳基烷基或芳基；條件是對于通式(XIII-d)核苷，R2和R2'當(dāng)中至少有一個是氫，且R3和R3'當(dāng)中至 少有一個是氫。
13.權(quán)利要求12的用途，其中式(XIII-a)的3-D核苷選自一種下列化合物或其3-L 對映體或其可藥用鹽
14.權(quán)利要求12的用途，其中式(XIII-c)的3-D核苷選自 對映體或其可藥用鹽o 一種下列化合物或其3 -L
15.權(quán)利要求12的用途，其中式(XIII-d)的3-D核苷選自下述化合物或其0-L對映 體或其可藥用鹽
16.通式(XIV)化合物或其0-L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表現(xiàn)出黃 病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途 其中^Da\Y\Z\R\R\R2'、鏟和鏟'的定義同前， 每個L1是氫、C1或Br ；每個 L2 是 OH、OCH3、OC2H5、OC3H7、OCF3、OAc 或 OBz ；每個Z3可以是0或CH2。
17.權(quán)利要求16的用途，其中式(XIV)的3-D核苷選自一種下列化合物或其0-L對 映體或其可藥用鹽
18.通式(XV)化合物或其P-L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表現(xiàn)出黃 病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途 [XV-a][XV-b]其中每個D.w'.W2^X1^1^3^1^1'、R2、R2'、R3和R3'的定義同前。
19.權(quán)利要求18的用途，其中式(XV-a)的3-D核苷是定義如下的化合物或其L對 映體或其可藥用鹽
20.權(quán)利要求18的用途，其中式(XV-b)的3-D核苷是定義如下的化合物或其L對 映體或其可藥用鹽
21.通式(XVI)化合物或其0-L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表現(xiàn)出黃 病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途 其中每個口^、^、^、？、! 1、! 2、! 2'、R3 和 R3'的定義同前； 每個W3獨立地為N、CH或CR1 ； 每個W4和W5獨立地為N、CH、CX1或CR1 ‘；且 每個t和Z5獨立地為NH或C (二 Y1)；條件是如果Z4和Z5是通過共價鍵結(jié)合的，則當(dāng)Z5是C( = Y1)時，Z4不是C( = Y0 ； 并且環(huán)氮原子不超過3個。
22.權(quán)利要求21的用途，其中式(XVI-a)的3-D核苷選自一種下列化合物或其3 _L 對映體或其可藥用鹽
23.權(quán)利要求21的用途，其中式(XVI-c)的3-D核苷是定義如下的化合物或其3-L對映體或其可藥用鹽
24.權(quán)利要求21的用途，其中式(XVI-d)的3-D核苷是定義如下的化合物或其3-L 對映體或其可藥用鹽
25.權(quán)利要求21的用途，其中式(XVI-f)的3-D核苷是定義如下的化合物或其3-L 對映體或其可藥用鹽
26.通式(XVII)化合物或其0-L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表現(xiàn)出 黃病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途 其中^D.ffM^X1^2^1^3^1^1'、R2、R2'、R3 和 R3'的定義同前；每個 X4 和 X5 獨立地為氫、鹵素(F、CI、Br 或 I)、N3、NH2、NHRs、NR8R8'、OH、OR8、SH 或SR8;且每個R8和R8'獨立地為氫、低級烷基、低級鏈烯基、芳基或芳基烷基例如未取代或取代 的苯基或芐基；條件是對于通式(XVII-a)或(XVII-b)核苷，X4不是0H或OR8。
27.權(quán)利要求26的用途，其中式(XVII-d)的3-D核苷是定義如下的化合物或其3-L 對映體或其可藥用鹽
28.通式(XVIII)化合物或其0-L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表現(xiàn)出 黃病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途 每個口、！1、！2]1、^、？1、! 1、! 1'、R2、R2'和 R3 的定義同前。
29.通式(XXIII)化合物或其0-L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表現(xiàn)出 黃病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途 [XXIII]其中每個口、？1、^、？3、! 1、! 4*!^的定義同前。
30.下述通式所示的化合物或其0-L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表 現(xiàn)出黃病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用 途 其中每個D、P2和P3的定義同前。
31.下述通式所示的化合物或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表現(xiàn)出黃病毒科、正 粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途
32.下述通式所示的化合物或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表現(xiàn)出黃病毒科、正 粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途
33.權(quán)利要求1-28中任一項所述的化合物用于治療或預(yù)防宿主中丙型肝炎病毒感染 的用途。
34.通式(XXIII)的3-D核苷化合物或其0-L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療 或預(yù)防宿主中丙型肝炎病毒感染的藥物方面的用途 其中每個口、？1、^、？3、! 1、! 4*!^的定義同前； 所述化合物任選在可藥用載體中。
35.通式(XXIII)的3-D核苷化合物或其0-L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療 或預(yù)防宿主中丙型肝炎病毒感染的藥物方面的用途其中 每個D、P2和P3的定義同前; 所述化合物任選在可藥用載體中。
36.下式化合物或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防宿主中丙型肝炎病毒感染的藥物 方面的用途 所述化合物任選在可藥用載體中。
37.下式化合物或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防宿主中丙型肝炎病毒感染的藥物 方面的用途所述化合物任選在可藥用載體中。
38.式I_a的化合物或其0-L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表現(xiàn)出正粘 病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途 其中D是氫、烷基、?；?、一磷酸、二磷酸、三磷酸、一磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯、磷脂或氨 基酸；X1 獨立地為氫、鹵素(F、CI、Br 或 I)、NH2、NHR4、NR4R4‘、NHOR4、NR4NR4' R4〃、OH、OR4、 SH 或 SR4 ；Y1 是 0、S 或 Se ;每個R1和R1'獨立地為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級炔基、芳基、烷基芳基、鹵素(F、 (1、81~或1)、朋2、朋1 5、殿51 5'、NHOR5、NR5NHR5'、NR5NR5' R5"、OH、OR5、SH、SR5、N02、NO、 CH20H、CH20R5、C02H、C02R5、C0NH2、CONHR5、C0NR5R5 '或 CN ;每個 R2 和 R2'獨立地為氫或鹵素(F、Cl、Br 或 I)、0H、SH、0CH3、SCH3、NH2、NHCH3、CH = CH2、CN、CH2NH2、CH2OH、C02H ；每個 R3 和 R3'獨立地為氫或鹵素(F、CI、Br 或 I)、OH、SH、0CH3、SCH3、NH2、NHCH3、CH3、 C2H5、CH = CH2、CN、CH2NH2、CH2OH、C02H ；每個R4、R4'、R4"、R5、R5'和R5〃獨立地為氫、低級烷基、低級鏈烯基、芳基或芳基烷基 例如未取代或取代的苯基或芐基；條件是對于式I_a的核苷，R2和R2'當(dāng)中至少有一個是氫，且R3和R3'當(dāng)中至少有一 個是氫。
39.權(quán)利要求38的用途，其中式(I-a)的3-D核苷選自一種下列化合物或其0-L對 映體或其可藥用鹽
40.式(XIX)化合物或其0 -L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表現(xiàn)出正粘 病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途 [XIX]其中每個D、Ri、R4和R4'的定義同前； 每個R9是氫、鹵素爾、(1、81~或1)或0P3;每個P1是氫、低級烷基、低級鏈烯基、芳基、芳基烷基(例如未取代或取代的苯基或芐 基)、OH、OR4、NH2、NHR4 或 NR4R4 ‘；禾口每個P2和P3獨立地為氫、烷基、?；?、_Ms、Ts、一磷酸、二磷酸、三磷酸、一磷酸酯、二磷 酸酯、三磷酸酯、磷脂或氨基酸。
41.下述通式所示的化合物或其0-L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表 現(xiàn)出正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途， 其中每個D和P2的定義同前。
42.通式(XX)化合物或其0-L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表現(xiàn)出正 粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途 其中每個口卞、？2、？3、! 1、! 4、! 4'和R9的定義同前。
43.通式(XXI)化合物或其0-L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表現(xiàn)出正 粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途 其中每個口、？1、^、？3、! 1、! 4*!^的定義同前。
44.下述通式所示的化合物或其0-L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表 現(xiàn)出正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途 其中每個D、P2和P3的定義同前。
45.通式(XXII)化合物或其0-L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表現(xiàn)出 正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途 其中每個D、pi和R1的定義同前。
46.下述通式所示的化合物或其0-L對映體或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表 現(xiàn)出正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途 [XXII]19 其中D的定義同前。
47.下述通式所示的化合物或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表現(xiàn)出正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途
48.下述通式所示的化合物或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表現(xiàn)出正粘病毒科或 副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途
49.下述通式所示的化合物或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防表現(xiàn)出正粘病毒科或 副粘病毒科病毒感染或異常細胞增殖的宿主的藥物方面的用途
全文摘要
本發(fā)明公開了用于治療病毒感染和異常細胞增殖的修飾核苷類化合物。本發(fā)明公開了用于治療宿主，包括動物，尤其是人中黃病毒科(包括BVDV和HCV)、正粘病毒科(包括甲型和乙型流感病毒)或副粘病毒科(包括RSV)感染或涉及異常細胞增殖的病癥的組合物和方法，所述組合物和方法使用的是通式(I)-(XXIII)核苷或其可藥用鹽或前藥。本發(fā)明還提供了使用實時聚合酶鏈反應(yīng)(“TR-PCR”)來定量測定宿主中病毒負載量，特別是BVDV、HCV或西尼羅河病毒的病毒負載量的有效方法。此外，本發(fā)明還公開了可發(fā)出與樣本中存在的病毒量成比例的熒光的探針分子。
文檔編號C07D473/18GK101862345SQ20101019290
公開日2010年10月20日 申請日期2001年10月18日 優(yōu)先權(quán)日2000年10月18日
發(fā)明者L·斯圖伊維爾, 渡邊恭一 申請人:法瑪塞特公司