專(zhuān)利名稱(chēng)：：一種從玉米淀粉廢水中分離提純蛋白的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種從玉米淀粉廢水中分離提純蛋白的方法。
背景技術(shù)：
：隨著國(guó)內(nèi)玉米淀粉生產(chǎn)規(guī)模的不斷擴(kuò)大，玉米淀粉廢水在不斷地增加。玉米淀粉廢水主要由兩部分組成，玉米浸泡液和生產(chǎn)工藝水。玉米淀粉廢水的CODcr含量高，如果直接排放，不僅會(huì)污染水環(huán)境，給企業(yè)增加了處理廢水的成本，同時(shí)還會(huì)浪費(fèi)了其中的蛋白。傳統(tǒng)的工藝是將浸泡液從含蛋白67%(wt/wt)經(jīng)三效或四效蒸發(fā)濃縮至4048%后分離蛋白。但是三效蒸發(fā)濃縮或四效蒸發(fā)濃縮成本較高，能耗也高。以年產(chǎn)6萬(wàn)噸玉米淀粉企業(yè)為例利用三效蒸發(fā)回收蛋白時(shí)設(shè)備投資120萬(wàn)元，耗蒸氣量為300kg/噸，折合140元/噸，電耗30元/噸；利用四效蒸發(fā)回收蛋白時(shí)設(shè)備投資160萬(wàn)元，耗蒸氣量為250kg/噸，折合120元/噸，電耗25元/噸。此外，由于浸泡液中含有大量蛋白，極易使蒸發(fā)管結(jié)垢，需要定期用堿液蒸煮，這樣又增加了處理成本。因此，開(kāi)發(fā)一種新技術(shù)來(lái)分離提純淀粉廢水中的蛋白代替蒸發(fā)濃縮成為目前淀粉廢水處理行業(yè)的一項(xiàng)新課題，但是成功的應(yīng)用到實(shí)際污水處理中卻很少。雙水相萃取(Aqueoustwo-phaseextraction,ATPE)技術(shù)始于20世紀(jì)60年代，從1956年瑞典倫德大學(xué)的Albertsson發(fā)現(xiàn)雙水相體系，到1979年德國(guó)GBF的Kula等人將雙水相萃取分離技術(shù)應(yīng)用于生物產(chǎn)品分離，雖然只有30多年的歷史，但由于其條件溫和，容易放大，可連續(xù)操作，目前，成功地應(yīng)用于蛋白質(zhì)、核酸和病毒等生物產(chǎn)品的分離和純化，雙水相體系也已被成功地應(yīng)用到生物轉(zhuǎn)化及生物分析中。國(guó)內(nèi)自20世紀(jì)80年代起也開(kāi)展了雙水相萃取技術(shù)研究，但是關(guān)于從淀粉廢水中分離提純蛋白的還未見(jiàn)報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺點(diǎn)，本發(fā)明的目的在于提供一種從玉米淀粉廢水中分離提純蛋白的方法，使資源合理利用，變廢為寶。本發(fā)明的技術(shù)方案是本發(fā)明綜合分析了聚合物濃度，分子量，鹽，pH等因素對(duì)分離效果的影響。采用以下工藝流程。工藝流程主要由三部分構(gòu)成目的產(chǎn)物的萃?。痪酆衔锏难h(huán)；無(wú)機(jī)鹽的循環(huán)。具體步驟(1)目的產(chǎn)物的提取將已加入0.05mol/L磷酸緩沖液PH值調(diào)至8-10、含蛋白6%-8%(wt/wt)的玉米淀粉均漿液廢水，分子量為2000-8000的濃度為20%-30%(wt/wt)的聚合物PEG，濃度為13%-21%(wt/wt)的NH4SO4在均漿液混合池中混合，所述玉米淀粉廢水與PEG、NH4S04的體積比為122;然后再進(jìn)入分離器分離，目標(biāo)蛋白被分離到下相(PEG相)，其它雜質(zhì)諸如核酸，多糖等分配到上相(富鹽相)；第二步萃取是將目標(biāo)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)入富鹽相，方法是在下相中加入濃度為0M-1.OM的NaCl水溶液，按11體積比與下相形成新的雙水相體系，然后進(jìn)入分離器分離，目標(biāo)蛋白被分離到上相，其它雜質(zhì)分配到下相(PEG相)，從而將蛋白與PEG分離，以利于使用超濾或透析將PEG回收利用，含有蛋白的上相經(jīng)進(jìn)一步濃縮、干燥得到產(chǎn)品；(2)聚合物PEG的循環(huán)在大規(guī)模的蛋白分離過(guò)程中，成相材料的回收和循環(huán)利用，不僅減少?gòu)U水處理的費(fèi)用，還可以節(jié)約化學(xué)試劑，降低成本。PEG的回收可采用是加入NaCl使目標(biāo)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)入富鹽相，然后使用超濾或透析將PEG回收利用。(3)NH4SO4的循環(huán)在大量分離蛋白的過(guò)程中，也需要消耗一定的硫酸銨，若將這部分硫酸鹽回收，將會(huì)為企業(yè)或者工廠節(jié)約大量生產(chǎn)成本。通常先將含無(wú)機(jī)鹽相(富鹽相)冷卻，結(jié)晶，然后用離心機(jī)分離收集。與傳統(tǒng)的液-液分離方法相比，雙水相萃取技術(shù)分離純化具有以下優(yōu)勢(shì)(1)含水量高(70%90%)，在接近生理環(huán)境的體系中進(jìn)行萃取，不會(huì)引起生物活性物質(zhì)失活或變性；(2)可以直接從含有菌體的發(fā)酵液和培養(yǎng)液中提取所需的蛋白質(zhì)，還能不經(jīng)過(guò)破碎直接提取細(xì)胞內(nèi)酶，省略了破碎或過(guò)濾等步驟；(3)分相時(shí)間短，自然分相時(shí)間一般為5min15min；(4)界面張力小(10_710_4mN/m)，有助于兩相之間的質(zhì)量傳遞，界面與試管壁形成的接觸角幾乎是直角；(5)不存在有機(jī)溶劑殘留問(wèn)題，高聚物一般是不揮發(fā)物質(zhì)，對(duì)人體無(wú)害；(6)大量雜質(zhì)可與固體物質(zhì)一同除去；(7)易于工藝放大和連續(xù)操作，與后續(xù)提純工序可直接相連接，無(wú)需進(jìn)行特殊處理；(8)操作條件溫和，整個(gè)操作過(guò)程在常溫常壓下進(jìn)行；(9)親和雙水相萃取技術(shù)可以提高分配系數(shù)和萃取的選擇性。本發(fā)明的有益效果是該工藝設(shè)備簡(jiǎn)單，可操作性很強(qiáng)，所加聚合物和鹽類(lèi)均可回收利用、反復(fù)使用。而且回收率極高，不會(huì)對(duì)環(huán)境造成二次污染。該工藝不僅能夠分離玉米淀粉廢水中的蛋白，還可以分離提純其它淀粉廢水中的蛋白。圖1為本發(fā)明的工藝流程圖；圖2為pH=8時(shí)，PEG分子量和濃度對(duì)分離系數(shù)的影響柱形圖(圖中自左向右PEG質(zhì)量百分濃度依次為20%、23%、25%、27%和30%)；圖3為PH=9時(shí)，PEG分子量和濃度對(duì)分離系數(shù)的影響柱形圖(圖中自左向右PEG質(zhì)量百分濃度依次為20%、23%、25%、27%和30%)；圖4為pH=10時(shí)，PEG分子量和濃度對(duì)分離系數(shù)的影響柱形圖(圖中自左向右PEG質(zhì)量百分濃度依次為20%、23%、25%、27%和30%)；圖5為NaCl濃度對(duì)PEG3000+NH4S04體系分離系數(shù)的影響圖；圖6為NaCl濃度對(duì)PEG6000+NH4S04體系分離系數(shù)的影響圖；圖7為NaCl濃度對(duì)PEG8000+NH4S04體系分離系數(shù)的影響圖。具體實(shí)施例方式實(shí)施例11實(shí)驗(yàn)方法本實(shí)驗(yàn)主要是以PEG(聚乙二醇)_(NH4)2SO4為雙水相體系來(lái)分離提純玉米淀粉廢水中的蛋白，分析了在不同影響因子下(聚合物及其分子量，PH值，溫度，離子濃度等)雙水相體系對(duì)蛋白的分離效果。1.1實(shí)驗(yàn)材料包括分子量分別為3000，6000和8000的聚乙二醇，硫酸銨((NH4)2S04)，牛血清蛋白。所需試劑都是分析純，聚乙二醇和硫酸銨都不需要進(jìn)一步的提純。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程所需水都是超純水。1·2樣品的制備本實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所用的水樣均來(lái)自河南永昌飛天淀粉有限公司的玉米浸泡液，所述玉米浸泡液含蛋白的質(zhì)量百分含量為7-8%。1.3雙水相生物反應(yīng)系統(tǒng)的制備第一步配置分子量為3000,6000和8000，濃度為20%、23%、25%、27%、30%(wt/wt)的聚乙二醇溶液；第二步配置濃度為13%、15%、17%、19%、21%(wt/wt)的硫酸銨溶液；第三步將200ml的不同濃度不同分子量的PEG(聚乙二醇)溶液分別置于燒杯內(nèi)；第四步在每個(gè)燒杯內(nèi)放入一個(gè)電熱恒溫器內(nèi)，將溫度控制在恒溫30士0.050C；第五步然后按體積比為11的比例，在濃度為20%、23%、25%、27%、30%的盛放聚乙二醇溶液的燒杯分別加入濃度為13%、15%、17%、19%、21%的硫酸銨溶液，在電熱恒溫器中攪拌1小時(shí)，形成聚合體_鹽溶液(聚乙二醇-硫酸銨)，然后靜置沉淀24小時(shí)；第六步經(jīng)過(guò)靜置沉淀后，大部分聚乙二醇在底部聚集，大多數(shù)的硫酸銨在頂部富集，雙水相反應(yīng)系統(tǒng)制備完畢，即為后續(xù)的雙水相儲(chǔ)備液。1.4蛋白在雙水相系統(tǒng)的萃取所有的實(shí)驗(yàn)都是在不同的pH(8，9，10)和恒溫條件下進(jìn)行的。pH在這個(gè)范圍內(nèi)既不是強(qiáng)酸性，也不是強(qiáng)堿性，這樣節(jié)省了因溶液的酸堿性而需要的后續(xù)處理。第一步取200ml不同分子量(分子量分別為3000，6000，8000)、不同濃度的聚乙二醇和硫酸銨的儲(chǔ)備液放入帶刻度的離心管中(儲(chǔ)備液的制備見(jiàn)1.3雙水相生物反應(yīng)系統(tǒng)的制備)；第二步在50ml含蛋白水樣中(玉米浸泡液)加入0.05mol/L的磷酸緩沖液來(lái)保持PH濃度，然后將其加入到第一步的儲(chǔ)備液中，混合均勻；第三步將置有溶液的離心管放入離心機(jī)，在轉(zhuǎn)速為3000rmp下離心20min。取出離心管在室溫下靜置24h以確保分離完全；第四步通過(guò)離心管的刻度來(lái)確定不同相的體積；第五步用注射器取50ml不同相的含蛋白混合液，確定蛋白質(zhì)在不同相的濃度(由于聚合體混合液的粘度很高，所以在測(cè)定蛋白含量前要對(duì)試樣進(jìn)行稀釋)。1.5蛋白質(zhì)的分析樣品中的總可溶性蛋白用改良的Bradford(考馬斯亮藍(lán)法)法測(cè)定。各相組分之間的相互干擾可以用同稀釋相同倍數(shù)來(lái)消除。2.結(jié)果與討論2.1聚合物分子量及濃度對(duì)分離效果的影響本研究為了得出利用APTS(雙水相)體系從玉米淀粉廢水中分離提純蛋白的最佳條件，分析了在不同的影響因子下，諸如，PEG濃度，分子量，NH4SO4濃度，NaCl濃度，pH值等蛋白的分離系數(shù)和回收效率。結(jié)果見(jiàn)下表(表1表3)。從表中可以看出，PEG分子量是影響分離效果的一個(gè)最主要因素之一。當(dāng)PH=10時(shí)，在PEG(3000)+NH4SO4分離體系中，隨著PEG濃度的增加，蛋白回收率分別由49.增加到85.3%，達(dá)到最佳回收效率。同樣在pH=10時(shí)，通過(guò)比較在不同的PEG分子量，相同的NaCl濃度(IM)下，蛋白的回收率隨著分子量的增加而降低，由85.3%降到74.3%。不同NaCl濃度不同pH下PEG分子量對(duì)分離系數(shù)的影響詳見(jiàn)圖2圖4。從圖中可以看出，蛋白在ATPS體系中的分離系數(shù)也隨PEG分子量的變化而變。從圖4可以看出，當(dāng)pH=10時(shí)，PEG的分子量為3000，6000，8000時(shí)，相對(duì)應(yīng)的分離系數(shù)分別為2.2，1.9，1.85。由此可以得出，分離系數(shù)隨著聚合物分子量的增加而減小。這是因?yàn)榉肿娱g存在一種體積排斥效應(yīng)。在體積效應(yīng)的作用下聚合物分子量越小，分離系數(shù)越大，蛋白回收率也越高；反之，分離系數(shù)越小，回收率也越低。此外，由于PEG+NH4S04體系中投加的鹽分具有鹽析效應(yīng)，使得蛋白向著含鹽量低的方向聚集?？傊?，在體積排斥和鹽析效應(yīng)共同作用下，溶液中大量蛋白在含低分子聚合物相中富集。表面張力也是影響分離效果的一個(gè)重要因素。通常，分子量越小，表明張力越小，越有利于被萃取物的分離。此外，由于雙水相體系中鹽的存在，使得溶液中離子強(qiáng)度增加，蛋白在靜電排斥的作用下向不含鹽的相中聚集，從而使得分離系數(shù)隨著鹽分濃度的增加而增加。隨著聚合物PEG濃度的增加，體系中聚合單元數(shù)量增多，蛋白與水分子之間的疏水作用增強(qiáng)，這樣有利于蛋白向含PEG的相凝聚。1.2NaCl對(duì)分離效果的影響在本研究中，分析了不同NaCl濃度(0M，0.1M，1.0M)對(duì)PEG+(NH4)2S04+水體系中對(duì)蛋白分離效果的影響。NaCl是雙水相體系中最常用的介質(zhì)，它的主要作用是促進(jìn)蛋白向不含聚合物PEG的相轉(zhuǎn)移。不同NaCl濃度對(duì)分離效果的影響詳見(jiàn)圖(圖5圖7)。從圖中可以看出，分離系數(shù)隨著NaCl濃度的增加而增加。當(dāng)pH=8時(shí)，分離系數(shù)隨著NaCl濃度的增加由0.6增加到1.05(PEG3000，濃度20%)，其它情況也是類(lèi)似結(jié)果。從表13中可以看到，在不同pH值，不同分子量和濃度下，蛋白回收率皆隨著NaCl濃度的增加而增加。對(duì)于PEG3000(濃度20%)+(NH4)2SO4體系來(lái)說(shuō)，當(dāng)pH=10時(shí)，蛋白的回收率由32.2%增加到45.6%。當(dāng)NaCl的濃度為1.OM時(shí)，蛋白回收率達(dá)到最大。由于所加鹽的離子有不同的憎水性，也就說(shuō)，它們處于親水相或者憎水相體系當(dāng)中。二者都能影響蛋白的分離效果。疏水性較強(qiáng)的陽(yáng)離子和陰離子都能使趨勢(shì)蛋白向著親水相聚集。綜上所述，分離系數(shù)和蛋白回收率都隨著NaCl濃度的增加而增加，這一結(jié)果以及原因與其它類(lèi)似研究一致。1·3ρΗ對(duì)分離效果的影響本研究分析了在不同ρΗ(8，9，10)下PEG+(NH4)2S04雙水相體系的分離系數(shù)和蛋白回收率。PH是影響體系分離效果的一種非常重要的因素。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，分離系數(shù)和回收效率隨著PH值的增加而增加。在PEG3000(濃度20%)+(NH4)2SO4分離體系中，當(dāng)pH為8，9，10時(shí)，相應(yīng)的分離系數(shù)分別0.55，0.57,0.6；回收率分別為32.2%，33.4%，35.6%。當(dāng)pH發(fā)生改變時(shí)，通過(guò)改變?nèi)苜|(zhì)的電荷或溶液中帶電粒子的比例來(lái)影響分離效果的。蛋白質(zhì)是由氨基酸組成的，除了有末端-NH3+和末端-C00—外，參與其組成的氨基酸殘基側(cè)鏈上還有酸、堿性基團(tuán)，因此蛋白質(zhì)是兩性物質(zhì)，具有等電點(diǎn)pi。當(dāng)PH值較小時(shí)(pH<Pl)，蛋白質(zhì)帶正電，當(dāng)PH較大時(shí)(pH>pi)，蛋白質(zhì)帶負(fù)電。當(dāng)pH=Pl時(shí)，蛋白分子以雙極離子形式存在，總電荷為零，蛋白分子點(diǎn)沒(méi)有電荷間的排斥作用，容易凝結(jié)成大顆粒，因而最不穩(wěn)定，溶解度最小，最容易分離。表IpH=8時(shí)，PEG+NH4S04體系及NaCl濃度分離效果的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>表2ρΗ=9時(shí)，PEG+NH4S04體系及NaCl濃度分離效果的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>表3.pH=10時(shí)，PPEG+NH4S04體系及NaCl濃度分離效果的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>以某玉米淀粉廢水為原料，PEG(聚乙二醇)_(NH4)2SCM為雙水相體系來(lái)分離提純玉米淀粉廢水中的蛋白，分析了在不同影響因子下(聚合物及其分子量，PH值，溫度，離子濃度等)雙水相體系對(duì)蛋白的分離效果。結(jié)果如下(I)PEG濃度是影響分離效果的主要因素之一，分離系數(shù)與回收效率隨著PEG濃度的增加而增加。當(dāng)pH=10時(shí)，在PEG(3000)+NH4SO4分離體系中，隨著PEG濃度的增加，蛋白回收率分別由49.增加到85.3%，達(dá)到最佳回收效率。(2)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，PEG分子量越大，分離系數(shù)與回收效率越小。當(dāng)pH=10,NaCl濃度為IM時(shí)，PEG3000，6000，8000相對(duì)應(yīng)的分離系數(shù)分別為0.95,0.81,0.62；蛋白回收效率分別為49.1%,42.2%,39.3%。這是因?yàn)榉肿娱g存在一種體積排斥效應(yīng)。在體積效應(yīng)的作用下聚合物分子量越小，分離系數(shù)越大，蛋白回收率也越高；反之，分離系數(shù)越小，回收率也越低。因此，當(dāng)PEG的分子量為3000時(shí)，分離系數(shù)與回收效率最大。(3)本研究分析了在不同pH(8，9，10)下PEG+(NH4)2SO4雙水相體系的分離系數(shù)和蛋白回收率。pH是影響體系分離效果的一種非常重要的因素。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，分離系數(shù)和回收效率隨著PH值的增加而增加。在PEG3000(20%H(NH4)2SO4分離體系中，當(dāng)pH為8，9，10時(shí)，相應(yīng)的分離系數(shù)分別0.55，0.57，0.6；回收率分別為32.2%，33.4%，35.6%。因?yàn)橛衩椎鞍椎牡入婞c(diǎn)Pl=10，當(dāng)pH=pI時(shí)，蛋白分子以雙極離子形式存在，總電荷為零，蛋白分子點(diǎn)沒(méi)有電荷間的排斥作用，容易凝結(jié)成大顆粒，因而最不穩(wěn)定，溶解度最小，最容易分離。因此，當(dāng)其它條件一定，PH=10時(shí)，蛋白的分離效果最好。(4)NaCl是雙水相體系中最常用的介質(zhì)，它的主要作用是促進(jìn)蛋白與聚合物PEG相分離。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，分離系數(shù)隨著NaCl濃度的增加而增加。當(dāng)pH=8時(shí)，分離系數(shù)隨著NaCl濃度的增加由0.6增加到1.05(PEG3000，濃度20%)。這時(shí)由于所加鹽的陰陽(yáng)離子有不同的親水性或者疏水性，親水性或疏水性的強(qiáng)弱直接影響蛋白在兩相之間的轉(zhuǎn)移。在靜電排斥和疏水作用下，有利于蛋白向不含PEG的相轉(zhuǎn)移。當(dāng)NaCl的濃度為1.0M時(shí)，蛋白回收率達(dá)到最大值。實(shí)施例2(1)目的產(chǎn)物的提取將已加入0.05mol/L磷酸緩沖液PH值調(diào)至10、含蛋白7%(wt/wt)的玉米淀粉均漿液廢水，分子量為3000的濃度為30%(wt/wt)的聚合物PEG和濃度為21%(wt/wt)的NH4SO4在均漿液混合池中混合，所述玉米淀粉廢水與PEG、NH4S04的體積比122;形成均漿液，再進(jìn)入分離器分離，目標(biāo)蛋白被分離到下相(PEG相)，其它雜質(zhì)諸如核酸，多糖等分配到上相(富鹽相)；第二步萃取是將目標(biāo)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)入富鹽相，方法是在下相中加入濃度為1.OM的NaCl水溶液，按11體積比與下相形成新的雙水相體系，然后進(jìn)入分離器分離，目標(biāo)蛋白被分離到上相，其它雜質(zhì)分配到下相(PEG相)，從而將蛋白質(zhì)與PEG分離，以利于使用超濾或透析將PEG回收利用，含有蛋白質(zhì)的上相經(jīng)進(jìn)一步濃縮、干燥得到產(chǎn)品，蛋白回收率大于85.0%。(2)聚合物PEG的循環(huán)將與蛋白分離后的PEG相使用超濾技術(shù)回收利用。(3)NH4SO4的循環(huán)將含無(wú)機(jī)鹽(富鹽相)相冷卻，結(jié)晶，然后用離心機(jī)分離收集。權(quán)利要求一種從玉米淀粉廢水中分離提純蛋白的方法，其特征是，將已加入0.05mol/L磷酸緩沖液PH值調(diào)至8-10、含蛋白重量百分?jǐn)?shù)為6％-8％的玉米淀粉均漿液廢水，分子量為2000-8000的質(zhì)量百分濃度為20％-30％的聚合物PEG和質(zhì)量百分濃度為13％-21％的NH4SO4在均漿液混合池中混合，所述玉米淀粉廢水與PEG、NH4SO4的體積比為1∶2∶2；然后再進(jìn)入分離器分離，目標(biāo)蛋白被分離到下相，其它雜質(zhì)分配到富鹽相；然后在下相中加入濃度為0M-1.0M的NaCl水溶液，按1∶1體積比與下相形成新的雙水相體系，然后進(jìn)入分離器分離，目標(biāo)蛋白被分離到上相，其它雜質(zhì)分配到PEG相，從而將蛋白與PEG分離，含有蛋白的上相經(jīng)進(jìn)一步濃縮、干燥得到產(chǎn)品蛋白。2.如權(quán)利要求1所述的一種從玉米淀粉廢水中分離提純蛋白的方法，其特征是，所述PEG的分子量為3000，質(zhì)量百分濃度為30%；所述NH4SO4的質(zhì)量百分濃度為21%；所述加入緩沖液磷酸調(diào)節(jié)玉米淀粉均漿液廢水PH值至10；所述NaCl水溶液的濃度為1M。3.如權(quán)利要求1或2所述的一種從玉米淀粉廢水中分離提純蛋白的方法，其特征是，所述與蛋白分離的PEG相使用超濾或透析將PEG回收利用。4.如權(quán)利要求1或2所述的一種從玉米淀粉廢水中分離提純蛋白的方法，其特征是，將含無(wú)機(jī)鹽的富鹽相冷卻，結(jié)晶，然后用離心機(jī)分離回收NH4S04。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種從玉米淀粉廢水中分離提純蛋白的方法。其步驟是將已加入磷酸調(diào)節(jié)pH值至8-10的玉米淀粉廢水、聚合物PEG和NH4SO4在均漿液混合池中混合；然后，形成均漿液，再進(jìn)入分離器分離，目標(biāo)蛋白被分離到下相；然后在下相中加入NaCl水溶液，與下相形成新的雙水相體系，然后進(jìn)入分離器分離，目標(biāo)蛋白被分離到上相，其它雜質(zhì)分配到下相，含有蛋白的上相經(jīng)進(jìn)一步濃縮、干燥得到產(chǎn)品蛋白。該方法設(shè)備簡(jiǎn)單，可操作性很強(qiáng)，所加聚合物和鹽類(lèi)均可回收利用、反復(fù)使用。而且回收率極高，不會(huì)對(duì)環(huán)境造成二次污染。該方法不僅能夠分離玉米淀粉廢水中的蛋白，還可以分離提純其它淀粉廢水中的蛋白。文檔編號(hào)C07K1/14GK101824070SQ20101014607公開(kāi)日2010年9月8日申請(qǐng)日期2010年4月14日優(yōu)先權(quán)日2010年4月14日發(fā)明者于桂英,張喜玲,梅媛申請(qǐng)人:山東匯盛天澤環(huán)境工程有限公司