專利名稱：制備斑蝥酸鈉的工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
木發(fā)明涉及一種腫瘤治療藥物的制備工藝，特別涉及一種斑蝥酸鈉的制備工藝。
背景技術(shù)：
我國的中醫(yī)很早就開始使用斑蝥蟲治療腫瘤早在十三世紀(jì)《仁齋直指方》中就記載了 斑蝥有治療乳癌及腹部癌的作用。古人常用"斑蝥煮雞蛋，棄斑蝥食蛋"的偏方治療肝癌及 其它消化系統(tǒng)癌癥，至今仍在民間沿用。該藥性味辛，熱；有大毒，可攻毒蝕瘡，歸肝、胃、 腎經(jīng)。有破血消{徵}，功毒蝕瘡，引赤發(fā)泡的功能，用于{徵}瘕腫塊，積年頑癬，瘰疬，贅 疣，癰疽不潰，惡瘡死肌的治療。但毒副作用很大。近年發(fā)現(xiàn)其抗癌有效成分是體內(nèi)天然存 在的斑蝥素。我國對斑蝥素的臨床研究表明，斑蝥素及其衍生物等對治療原發(fā)性肝癌療效顯 著，明顯優(yōu)于手術(shù)治療或放療。此外，它還能治療慢性肝炎和神經(jīng)性皮炎白細胞減少等。另 有報道證明，斑蝥素及其衍生物對乳腺癌、食道癌、肺癌、腸癌、肝硬化等疾病也有一定療
效；同時可用于治療疥癬、消瘰?。贿€可以通利水道，是一種很強的利尿劑。外用為皮膚刺激
藥，有引赤發(fā)泡、生毛之功效，并能治惡瘡潰痛、癰疽拔膿、積年癬瘡、疣痣黑子等。經(jīng)科 學(xué)提取得到的斑蝥素雖然服用方便，但是毒副作用仍然很大，斑蝥素的有效劑量與毒性劑量 很接近。而斑蝥酸鈉是斑蝥素的衍生物，在保持了斑蝥素的藥理活性外，降低了其毒副作用。 其分子量小，易入細胞內(nèi)，產(chǎn)生細胞毒作用，具有較強的抗腫瘤作用，是一種較為理想的抗癌 藥物，具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、升高白細胞等藥理活性，在臨床上主要用于用于晚期原發(fā)性 肝癌及晚期肺癌的治療。斑蝥酸鈉作為抗腫瘤的先鋒藥物，使應(yīng)用現(xiàn)代生物技術(shù)從斑蝥蟲中 提取其有效成分，結(jié)合藥物合成技術(shù)，經(jīng)過斑蝥蟲體的處理，斑蝥素的提取、純化精制，斑 蝥酸鈉的合成、斑蝥酸鈉的純化精制而成，其抗腫瘤機理主要是通過抑制癌細胞的蛋白質(zhì)合
成，影響其RNA及DNA，抑制癌細胞的生長分裂，從而達到治療的目的。
公告號為CN1166669C的中國專利公開了一種斑蝥酸鈉的制備工藝，包括斑蝥素提取、結(jié) 晶，制備斑蝥酸鈉的幾個步驟，具體方法為將斑蝥蟲體粉末加入鹽酸浸潤24小時，再加入丙 酮冷浸，過濾，分取有機相，回收丙酮至油膏狀，加入石油醚與無水乙醇混合溶液洗滌，得 黃白色斑蝥素粗品；取斑蝥素粗品按l: 30重量的比例加入丙酮，回流30分鐘，趁熱抽濾，
得無色澄明濾液，回收丙酮，冷卻后抽濾，得白色結(jié)晶，得斑蝥素精品；再取斑蝥素精品按 1: 20重量的比例加入丙酮溶液，回流溶解，再取與斑蝥素摩爾比為l: 2的氫氧化鈉20%的
溶液，反應(yīng)1小時，然后蒸餾，加入活性炭回流，濃縮，干燥，得白色斑蝥酸鈉結(jié)晶粉末。 然而，該方法使用了大量的丙酮，成本高，且丙酮為毒性溶劑，對操作者易產(chǎn)生危害。
3公開號為CN1586500A中國專利申請公開了一種斑蝥酸鈉注射劑及其制備方法，其中也公 開了斑蝥酸鈉的制備步驟，其中包括斑蝥蟲粉碎、斑蝥素提取、斑蝥素脫脂、斑蝥酸鈉合成 等步驟。該申請在提取、脫脂等步驟中，也采用了大量的丙酮，因此存在著與CN1166669C同 樣的缺點。
現(xiàn)有技術(shù)仍然需要一種操作簡便、污染少、對操作人員危害小的制備斑蝥酸鈉的制備方法。
發(fā)明內(nèi)容
申請人經(jīng)大量研究發(fā)現(xiàn)，在斑蝥素提取步驟中，采用乙酸乙酯來替代丙酮作為溶劑進行 提取，可以使操作時間縮短，而且達到更好的提取效果。
同時，在斑蝥素純化步驟中，僅用石油醚進行脫脂洗滌，也能達到較好的純化效果。
在斑蝥酸鈉的合成步驟中，申請人還另人驚訝地發(fā)現(xiàn)，先用異丙醇將斑蝥素溶解，然后 再采用5%-20%,優(yōu)選15%的氫氧化鈉溶液，可以使斑蝥酸鈉的合成時間縮短，產(chǎn)率增加。其 中，斑蝥素與異丙醇的重量比可以是1:5 200，優(yōu)選1:10 100，最優(yōu)選1:30 70。
因此，本發(fā)明的目的是提供一種新的符合國家藥典要求的斑蝥酸鈉的制備方法，該方法 包括采用斑蝥蟲體，經(jīng)蟲體前處理、提取、純化精制得到斑蝥素精品，再經(jīng)半合成而得到斑 蝥酸鈉精品的工藝。該方法中沒有采用丙酮等毒性溶劑，工藝簡單、安全、方便、快捷、經(jīng) 濟，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，純度高，且能達到良好的收率。
本發(fā)明是采用以下技術(shù)方案實現(xiàn)的，具體包括斑蝥蟲體的處理，斑蝥素的提取、純化精 制，斑蝥酸鈉的合成、斑蝥酸鈉的純化精制步驟
(1) 斑蝥蟲體的處理。 將符合國家藥典標(biāo)準(zhǔn)的干燥斑蝥蟲體進行挑揀，除去土塊等雜物，粉碎。
(2) 斑蝥素的提取。
將斑蝥蟲體粉加入預(yù)先用鹽酸飽和的乙酸乙酯，浸泡10 20小時。將浸出液放出至儲 藏罐中，再加入預(yù)先用鹽酸飽和的乙酸乙酯浸泡提取一次。放出浸出液合并至回收器中蒸汽 加熱至5(TC濃縮。其中斑蝥蟲體粉與鹽酸飽和的乙酸乙酯的重量比為1: 7 9。
(3) 斑蝥素的純化精制。
將濃縮液轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)瓶中，水浴加熱至50'C加入約1倍量石油醚(bp: 60°C 90°C)， 共熱5分鐘，倒入以綢布為濾材的布氏漏斗中，減壓抽濾至干，用約2.5倍量石油醚淋洗至 得到白色斑蝥素結(jié)晶，常溫減壓干燥，即得到斑蝥素精品(純度97%以上)。
(4) 斑蝥酸鈉的合成。
將斑蝥素加入異丙醇稍加熱使其溶解，將氫氧化鈉和水按比例配成5%-20%溶液，以斑蝥素與氫氧化鈉摩爾比1: 2加入到以上斑蝥素異丙醇溶液中，在水浴中加熱至7(TC 75'C反 應(yīng)1至2小時。減壓蒸出溶劑，得到斑蝥酸鈉粗品。其中斑蝥素與異丙醇的重量比為1: 30 70。(5)斑蝥酸鈉的純化精制。將斑蝥酸鈉粗品加入純化水，再加入0. 4%左右的活性炭，在60'C水浴中保溫1至1. 5 小時，減壓蒸出水份，干燥，即得斑蝥酸鈉成品。采用本發(fā)明方法制備的斑蝥酸鈉，純度高，性質(zhì)穩(wěn)定，可用于大針劑、大輸液、片劑、 顆粒劑、膠囊劑、口服液、軟膏劑等劑型以及多種緩控釋制劑的生產(chǎn)。
具體實施例方式
實施例1:(1) 斑蝥蟲體的處理。將符合國家藥典標(biāo)準(zhǔn)的干燥斑蝥蟲體進行挑揀，除去土塊等雜物，粉碎，使斑蝥蟲體粉末的細度在20目 40目。(2) 斑蝥素的提取。將斑蝥蟲體粉100公斤，加入預(yù)先用鹽酸飽和的乙酸乙酯700公斤至2000升的不銹鋼 提取罐中，浸泡16小時，前IO個小時每隔半小時攪拌一次。將浸出液放出至儲藏罐中。重 復(fù)以上操作，再加入預(yù)先用鹽酸飽和的乙酸乙酯700公斤浸泡提取一次。放出浸出液合并至 回收器中蒸汽加熱至5(TC濃縮，停止加熱，回收的溶劑作為下一次提取用。浸出液放干后， 取出蟲渣，集中收集統(tǒng)一處理。(3) 斑蝥素的純化精制。將濃縮液轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)瓶中，水浴加熱至50'C加入1倍量石油醚(bp: 6(TC 9(TC)，共 熱5分鐘，倒入以綢布為濾材的布氏漏斗中，減壓抽濾至干，用2. 5倍量石油醚淋洗至得到 白色斑蝥素結(jié)晶，常溫減壓干燥，即得到斑蝥素精品(純度99.3%)。(4) 斑蝥酸鈉的合成。在1000毫升至5000ml的圓底燒瓶中加入斑蝥素，加入約50倍量的異丙醇稍加熱使其 溶解，按比例將氫氧化鈉和水配成溶液后，倒入燒瓶中，在水浴中加熱至7CTC 75'C反應(yīng)1至2小吋。減壓蒸出溶劑，得到斑蝥酸鈉粗品。其中，斑蝥素精品異丙醇氫氧化鈉 蒸餾水二1.96: 50: 0. 8: 4 (重量比)。(5) 斑蝥酸鈉的純化精制。將斑蝥酸鈉粗品投入到3000毫升至5000毫升的燒瓶中，加入10倍量的純化水，再加入0.4%左右的活性炭，在6(TC水浴中保溫1至L5小時，減壓蒸出水份，干燥，即得斑蝥酸鈉成品。實施例2:(1) 斑蝥蟲體的處理。將符合國家藥典標(biāo)準(zhǔn)的干燥斑蝥蟲體進行挑揀，除去土塊等雜物，粉碎，使斑蝥蟲體粉 末的細度在20目 30目。(2) 斑蝥素的提取。將斑蝥蟲體粉100公斤，加入預(yù)先用鹽酸飽和的乙酸乙酯800公斤至2000升的不銹鋼 提取罐中，浸泡16小時，前IO個小時每隔半小時攪拌一次。將浸出液放出至儲藏罐中。重 復(fù)以上操作，再加入預(yù)先用鹽酸飽和的乙酸乙酯700公斤浸泡提取一次。放出浸出液合并至 回收器中蒸汽加熱至5(TC濃縮，停止加熱，回收的溶劑作為下一次提取用。浸出液放干后， 取出蟲渣，集中收集統(tǒng)一處理。(3) 斑蝥素的純化精制。將濃縮液轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)瓶中，水浴加熱至5(TC加入2倍量石油醚，共熱5分鐘，倒入以 綢布為濾材的布氏漏斗中，減壓抽濾至干，用1.5倍量石油醚淋洗至得到白色斑蝥素結(jié)晶， 常溫減壓干燥，即得到斑蝥素精品(純度98.6%)。(4) 斑蝥酸鈉的合成。在1000毫升至5000ml的圓底燒瓶中加入斑蝥素，加入約20倍量的異丙醇稍加熱使其 溶解，按比例將氫氧化鈉和水配成溶液后，倒入燒瓶中，在水浴中加熱至7(TC 75'C反應(yīng)1至2小時。減壓蒸出溶劑，得到斑蝥酸鈉粗品。其中，斑蝥素精品異丙醇氫氧化鈉蒸餾水=1.96: 77: 0. 80: 5.50 (重量比)(5) 斑蝥酸鈉的純化精制。將斑蝥酸鈉粗品投入到3000毫升至5000毫升的燒瓶中，加入8倍量的純化水，再加入 0.4%左右的活性炭，在60。C水浴中保溫1至1.5小時，減壓蒸出水份，千燥，即得斑蝥酸 鈉成品。 實施例3:(1) 斑蝥蟲體的處理。將符合國家藥典標(biāo)準(zhǔn)的干燥斑蝥蟲體進行挑揀，除去土塊等雜物，粉碎，使斑蝥蟲體粉 末的細度在30目 40目。(2) 斑蝥素的提取。 配方比例為將斑蝥蟲體粉100公斤，加入預(yù)先用鹽酸飽和的乙酸乙酯900公斤至2000升的不銹鋼提 取罐中，浸泡16小時，前IO個小時每隔半小時攪拌一次。將浸出液放出至儲藏罐中。重復(fù) 以上操作，再加入預(yù)先用鹽酸飽和的乙酸乙酯700公斤浸泡提取一次。放出浸出液合并至回 收器中蒸汽加熱至50'C濃縮，停止加熱，回收的溶劑作為下一次提取用。浸出液放干后，取 出蟲渣，集中收集統(tǒng)一處理。(3) 斑蝥素的純化精制。將濃縮液轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)瓶中，水浴加熱至5(TC加入1倍量石油醚，共熱5分鐘，倒入以 綢布為濾材的布氏漏斗中，減壓抽濾至干，用2.5倍量石油醚淋洗至得到白色斑蝥素結(jié)晶， 常溫減壓干燥，即得到斑蝥素精品(純度98.8°/。)。(4) 斑蝥酸鈉的合成。在1000毫升至5000ml的圓底燒瓶中加入斑蝥素，加入約65倍量的異丙醇稍加熱使其 溶解，按比例將氫氧化鈉和水配成溶液后，倒入燒瓶中，在水浴中加熱至70'C 75i:反應(yīng)1至2小時。減壓蒸出溶劑，得到斑蝥酸鈉粗品。其中，斑蝥素精品異丙醇氫氧化鈉蒸餾水=1.96: 107.55: 0.8: 16 (重量比)(5) 斑蝥酸鈉的純化精制。將斑蝥酸鈉粗品投入到3000毫升至5000毫升的燒瓶中，加入12倍量的純化水，再加 入0.4%左右的活性炭，在6(TC水浴中保溫1至1.5小時，減壓蒸出水份，干燥，即得斑蝥 酸鈉成品。實施例4 產(chǎn)品質(zhì)量研究斑蝥酸鈉國家藥品標(biāo)準(zhǔn)[標(biāo)準(zhǔn)號WS-10001-(HD-0044)-2002]規(guī)定斑蝥酸鈉含量按照干 燥品計算，不得少于85%，而按照上述實施例制得的斑蝥酸鈉進行含量測定和純度檢査，結(jié) 果均在98%以上。說明按照本發(fā)明制得的斑蝥酸鈉質(zhì)量要明顯優(yōu)于市售產(chǎn)品，含量測定和純 度檢查具體方法如下 1含量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇一水(51 : 49) 為流動相；流速為1. Oml/min;檢測波長為227nm;靈敏度為0. 005AUFS。理論塔板數(shù)按斑蝥 素峰計算，應(yīng)不低于2000。對照品溶液的制備取斑蝥素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含斑蝥素0. 15mg 的溶液，作為對照品溶液。供試品溶液的制備精密稱取本品10mg，至100ml燒瓶中，加50ml水溶解，再加 lmol/LH2S04溶液10ml，搖勻，置65'C水浴中回流30分鐘，稍冷后移于分液漏斗中，用氯仿725ml、 15ral、 10ml萃取三次，每次10分鐘，合并萃取液，置70。C水浴中揮干溶劑，殘渣用 甲醇轉(zhuǎn)容至50ml量瓶中，定容，搖勻，即為供試品溶液。測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20W，注入液相色譜儀，記錄色譜圖， 以外標(biāo)法計算斑蝥素含量，再乘以1.316，即得斑蝥酸鈉含量。結(jié)果斑蝥酸鈉實際含量在98%以上。 2純度檢査色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇一O. 5%三乙胺(28 : 72)為流動相；流速為1. Oml/min;檢測波長為210nm;靈敏度為0. 005AUFS。理論塔板數(shù)按 斑蝥酸鈉峰計算，應(yīng)不低于2000。供試品溶液制備精密稱取本品10mg，至10ml量瓶中，加水溶解并定容，搖勻，即為 供試品溶液。測定精密吸取供試品溶液20W，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以面積歸一化法檢査 斑蝥酸鈉的純度。結(jié)果斑蝥酸鈉純度大于98%。 3測定結(jié)果^ 含量(％) 純度《)實施例1 9^7§實施例2 99.8 99.2實施例3 99. 1 98.權(quán)利要求
1、一種斑蝥酸鈉的制備方法，其特征在于包括將斑蝥蟲體加入預(yù)先用鹽酸飽和的乙酸乙酯浸泡提取斑蝥素的步驟。
2. 根據(jù)權(quán)利要求l的制備方法，其中斑蝥蟲體粉與鹽酸飽和的乙酸乙酯的重量 比為1: 7 9。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種制備斑蝥酸鈉的工藝，它是由斑蝥蟲體的處理，斑蝥素的提取、純化精制，斑蝥酸鈉的合成、斑蝥酸鈉的純化精制等步驟。本發(fā)明具有工藝簡單實用、安全性好、制備的成品純度高，性質(zhì)穩(wěn)定，生產(chǎn)成本低等優(yōu)點?？捎糜诖筢槃⒋筝斠?、片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液及軟膏劑等多種劑型的生產(chǎn)。
文檔編號C07D493/08GK101633661SQ20091016937
公開日2010年1月27日 申請日期2007年2月13日 優(yōu)先權(quán)日2007年2月13日
發(fā)明者郝守祝 申請人:北京世紀(jì)博康醫(yī)藥科技有限公司