專利名稱:制備受保護(hù)脒的方法
專利說明制備受保護(hù)脒的方法 本發(fā)明涉及一種用于由腈制備某些受保護(hù)的脒如烷氧基脒的新方法。該方法可采用例如具有給電子基或吸電子基的芐腈,并可應(yīng)用于例如中間體如用于凝血酶抑制體生產(chǎn)的中間體的制備。與這類化合物的其它可選制備方法相比,該方法表現(xiàn)出改進(jìn)和優(yōu)點。
脒殘基對于胰島素類蛋白酶(如凝血酶)的新型競爭抑制劑的治療活性是重要的。為改進(jìn)脒直接凝血酶抑制體如美拉加群(melagatran)的口服生物利用率,可將脒基保護(hù)為例如羥基脒(如在ximelagatran中)或烷氧基脒基。施用后,該羥基-或烷氧基-脒可在體內(nèi)還原為脒基。
除美拉加群外,化合物的例子為或代謝轉(zhuǎn)化為是胰島素樣蛋白酶(如凝血酶)的競爭抑制體的化合物,其記載于PCT/SE01/02657號國際專利申請(WO02/44145)中。該申請披露了例如式IA的化合物,
其中, R1表示由1個或多個氟取代基取代的C1-2烷基; R2表示C1-2烷基;和 n表示0、1或2;以及以下兩種化合物 (a)Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OMe)
該化合物在下文中稱作化合物A; (b)Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(2,6-二F)(OMe)
該化合物在下文中稱作化合物B。
烷氧基脒如甲氧基脒通常采用多步合成來制備,其中首先將腈轉(zhuǎn)化為脒或羥基脒,然后轉(zhuǎn)化為甲氧基脒,例如使用鹽酸甲氧基胺。然而該化學(xué)性質(zhì)對于大多數(shù)基質(zhì)并不特別令人滿意(例如,在收率和反應(yīng)時間上)。從而需要一種更簡便更有效率的制備受保護(hù)的脒如烷氧基脒的方法。本發(fā)明的方法通過由腈在單一步驟中實現(xiàn)該轉(zhuǎn)化從而提供了這些優(yōu)點。該方法對于制備酸敏感或具有酸敏感基團(tuán)的受保護(hù)脒如烷氧基脒特別有用。
脒的制備記載于例如WO 98/09950中,其中在硫代羧酸存在下使腈與氨水、烷基胺或聯(lián)氨反應(yīng)。
由腈制備羥基脒可采用羥基胺來實現(xiàn)。這種羥基脒-烷氧基脒的轉(zhuǎn)化進(jìn)一步需要烷基化化學(xué)反應(yīng),該烷基化化學(xué)反應(yīng)并不特別適于大規(guī)模生產(chǎn)目的。
由脒合成烷氧基脒如甲氧基脒可采用例如甲氧基胺來實施,但這類化學(xué)反應(yīng)首先要求形成脒殘基。由腈直接制備受保護(hù)的(例如烷氧基的)脒仍然是未知的。
此外,任選地取代的芐腈通常需要用強(qiáng)酸如鹽酸或路易斯酸如三甲基鋁活化以在腈中反應(yīng)。
本發(fā)明的方法已經(jīng)克服了這些問題,并提供了由腈以良好收率直接制備受保護(hù)的脒的可能,且其不需要強(qiáng)酸如鹽酸或路易斯酸如三甲基鋁。如將要看到的,唯一可能存在的酸為硫代羧酸,但不要求該酸的酸性能夠?qū)嵤┧龇磻?yīng)(已經(jīng)表明所述反應(yīng)在約與巰基乙酸乙酯相同的程度上發(fā)生-見實施例1)。
本發(fā)明的方法特別適用于制備如在WO 02/44145中描述的那些化合物,即式IB的化合物,
其中R3a表示式I(i)或I(ii)的結(jié)構(gòu)片段
I(i)I(ii) 其中,R5為-OR6,和R6表示C1-10烷基、C1-3的烷芳基或C1-3的烷氧基芳基(后兩個基團(tuán)烷基部分任選地插入一個或多個氧原子;和后兩個基團(tuán)的芳基部分任選地由一個或多個選自鹵素、苯基、甲基或甲氧基的取代基取代,其中后三個基團(tuán)也任選地由一個或多個鹵素取代基取代);和 Ra表示-OH或CH2OH; R1表示一個或多個任選的鹵素取代基; R2表示一個或兩個C1-3的烷氧基取代基,該取代基烷基部分本身由一個或多個氟取代基取代; Y表示-CH2-或-(CH2)2-; R4表示H或一個或多個氟取代基;和 X1、X2、X3和X4中的一個或兩個表示-N-和其它的表示-CH-。
因此,本發(fā)明提供一種用于制備式(I)的受保護(hù)脒基的方法
其中,R6表示C1-10烷基(其任選地用一個或多個各自獨立地選自鹵素、C1-4的烷氧基、硝基、C1-4烷基胺和二(C1-4烷基)胺的取代基取代)、芳基、C1-3的烷芳基或C1-3的烷氧基芳基(后兩個基團(tuán)烷基部分任選地插入一個或多個氧原子;和后兩個基團(tuán)的芳基部分任選地用一個或多個選自鹵素、苯基、甲基或甲氧基的取代基取代,其中后三個基團(tuán)也任選地用一個或多個鹵素取代基取代) 其包括 在式(III)的硫-酮基活化劑存在下,使含腈化合物與式(II)的羥基胺反應(yīng) R6ONH2 (II) 其中R6與上述在(I)中定義的相同; HS-Ry-C(O)-Z(III) 其中Z為-(1-4C)烷基、-OH、-O-(1-4C)烷基、-SH、-S(1-4C)烷基、-NH2、-NH(1-4C)烷基或-N[(1-4C)烷基]2; Ry為(1-2C)烷基,其任選地用至多三個各自獨立地選自(1-4C)烷基、鹵素、氨基和乙酰氨基的取代基取代;或 將Z和Ry連接以形成式(IV)的5-或6元環(huán)
其中 X為-CH2-、-O-、-NH-或-N(1-4C)烷基;p為1或2;m為1或2和 Rz各自獨立地選自H、(1-4C)烷基、鹵素和氨基。
受保護(hù)的脒是指式(I)的脒殘基
其中R6表示C1-10烷基(其任選地用一個或多個各自獨立地選自鹵素、C1-4的烷氧基、硝基、C1-4烷基胺和二(C1-4烷基)胺的取代基取代)、芳基、C1-3烷芳基或C1-3烷氧基芳基(后兩個基團(tuán)的烷基部分任選地插入一個或多個氧原子;和后兩個基團(tuán)的芳基部分任選地用一個或多個選自鹵素、苯基、甲基或甲氧基的取代基取代,其中后三個基團(tuán)也任選地用一個或多個鹵素取代基取代)。
從而,該羥基胺為式(II) R6ONH2(II) 其中R6與上述在(I)中定義的相同。
可由R6表示的烷氧基芳基包括由氧原子連接的烷基和芳基。烷芳基(例如芐基)和烷氧基芳基通過這些基團(tuán)的烷基部分與該分子的其它部分連接,其烷基部分(如果存在足夠數(shù)量的碳原子(如三個))可以為支鏈。R6可表示或可被取代的芳基和烷芳基與烷氧基芳基的芳基部分包括碳環(huán)和雜環(huán)的芳香基,所述芳基例如苯基、萘基、吡啶基、唑基、異唑基、噻二唑基、吲哚基和苯并呋喃基等。
可由R6表示的烷基可以為支鏈,或當(dāng)存在足夠數(shù)量的碳原子(即最少三個)時可以為支鏈和/或環(huán)。此外,當(dāng)存在足夠數(shù)量的碳原子(即最少4個)時,該烷基也可以為部分環(huán)/或無環(huán)的。該烷基還可以為飽和的,或當(dāng)存在足夠數(shù)量的碳原子(即最少兩個)時,可以為不飽和的。
可用于取代R6的鹵素基團(tuán)包括氟、氯、溴和碘,特別是F或Cl。
R6的具體例子為C1-4烷基,特別是甲基和乙基,和苯基。
含腈化合物包括任何含腈基的分子,該腈基形成最終的引入受保護(hù)脒基的分子的全部或部分。適宜的含腈化合物包括芳族腈(如任選地取代的氰基苯化合物)、雜芳香腈、雜環(huán)腈、烷基腈(如任選地取代的(1-4C)烷基鏈,如任選地取代的芐基腈)和環(huán)-烷基腈(如任選地取代的(3-5C)環(huán)-烷基環(huán))。
雜芳香腈包括含1-3個各自獨立地選自N、O和S的雜原子的芳香環(huán)體系。雜環(huán)腈包括含1-3個各自獨立地選自N、O和S的雜原子的非芳香環(huán)。
在含腈化合物中的任何環(huán)均可任選地由其它形成最終制備的分子的一部分的基團(tuán)取代,或例如在可行的碳原子上由至多三個(優(yōu)選一個)各自獨立地選自鹵素、(1-4C)烷基和(1-4C)烷氧基的取代基取代。
硫-酮基活化劑為式(III) HS-Ry-C(O)-Z (III) 其中Z為-(1-4C)烷基、-OH、-O-(1-4C)烷基、-SH、-S(1-4C)烷基、-NH2、-NH(1-4C)烷基或-N[(1-4C)烷基]2; Ry為(1-2C)烷基,其任選地用至多三個各自獨立地選自(1-4C)烷基、鹵素、氨基和乙酰氨基的取代基取代;或 Z和Ry連接以形成式(IV)的5-或6元環(huán)
其中 X為-CH2-、-O-、-NH-或-N(1-4C)烷基;p為1或2;m為1或2和 Rz各自獨立地選自H、(1-4C)烷基、鹵素和氨基。
該式(III)或(IV)的硫-酮基活化劑被認(rèn)為活化所述腈基,在這方面該酮基與硫基官能度之間的氫鍵結(jié)合可能是重要的。通常該硫-酮基活化劑定量使用(如與所述腈化合物約等摩爾),盡管如果所述反應(yīng)能夠令人滿意地進(jìn)行,可以采用較低(如1∶0.5)和較高(如1∶1.5)的腈化合物硫-酮基活化劑摩爾比。
式(III)的硫-酮基活化劑可包括(α)-硫代羧酸、與之相當(dāng)?shù)孽?例如甲酯或乙酯)和氨基酸如半胱氨酸(兩性離子的)或N-乙酰半胱氨酸。優(yōu)選的硫-酮基活化劑為式(III),其中Z為-OH或-O-(1-4C)烷基,特別優(yōu)選巰基乙酸。
式(III)或(IV)的某些硫-酮基活化劑也可以適宜鹽的形式使用。
在本申請中公開的某些反應(yīng)物和產(chǎn)物可表現(xiàn)出互變異構(gòu)現(xiàn)象。所有互變異構(gòu)形式或其混合均包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
本發(fā)明的方法可在任何適宜的溶劑中實施,例如醇(如甲醇或乙醇或正丁醇)、乙酸酯(如乙酸乙酯)、水或這些溶劑的混合物。其它可行的溶劑為芳香族溶劑,氯化溶劑和氧化溶劑如醚。
本發(fā)明的方法可在任何適宜的溫度下實施,例如在該反應(yīng)混合物的回流溫度下。
可加入金屬螯合劑(例如EDTA)以螯合金屬離子雜質(zhì)(如鐵離子),所述金屬離子雜質(zhì)可在本發(fā)明方法中導(dǎo)致雜質(zhì)/副產(chǎn)物的形成。
可使用堿如NaOH、三乙胺或N-甲基嗎啉以例如在本發(fā)明方法中去保護(hù)羥基胺的鹽形式。
應(yīng)該指出的是,在某些含腈化合物和/或在某些硫-酮基活化劑中,可能存在在本發(fā)明的方法中需要保護(hù)的基團(tuán)(如氨基)。這類基團(tuán)在所述受保護(hù)的脒官能度形成后,如果適當(dāng)可去保護(hù)。從而,例如胺基可任選地使用如Boc、甲磺酸酯(mesylate)、甲苯磺酸酯(tosylate)或芐基的標(biāo)準(zhǔn)保護(hù)基保護(hù)。這些基團(tuán)可使用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)除去。
本發(fā)明方法的具體闡述通過以下芐腈(也可使用其它基質(zhì)和反應(yīng)物)的圖解1顯示
R=任選地取代的(1-10C)烷基、苯基或芐基; R’=H或(1-10C)烷基; n=0、1、2或3; R1=H、鹵素、任選地取代的(1-4C)烷基、芳基、或形成其中(將)含有受保護(hù)的脒基的化合物的全部或部分的任何基團(tuán)(基團(tuán)的組合)。
R和R’可以相同或不同;如果n為2或3,則每個R1可以相同或不同。
圖解1 在圖解1中R1的例子包括下式II的那些
其中R2為例如H、Boc或式III的基團(tuán)
當(dāng)n為1時,優(yōu)選的反應(yīng)為生產(chǎn)以下適用于制備化合物A的產(chǎn)物的那些(其中R為甲基(命名為Me的化合物)或乙基) (a)Pab(OMe)
(b)Boc-Pab(OMe)
(c)Aze-Pab(OMe)
(d)Boc-Aze-Pab(OMe)
當(dāng)n為3時,優(yōu)選的反應(yīng)為生產(chǎn)以下適用于制備化合物B的產(chǎn)物的那些(其中R為甲基(命名為Me的化合物)或乙基) (a)(2,6-二F)Pab(OMe)
(b)Boc-(2,6-二F)Pab(OMe)
(c)Aze-(2,6-二F)Pab(OMe)
(d)Boc-Aze-(2,6-二F)Pab(OMe)
為制備化合物A和B,可分別使Aze-Pab(OMe)和Aze-(2,6-二F)Pab(OMe)與3-氯-5-二氟甲氧基扁桃酸(其可例如根據(jù)以下圖解A來制備,其中熟練的化學(xué)家將能夠?qū)嵤┫鄳?yīng)的轉(zhuǎn)化。該期望的手性扁桃酸可通過例如拆分手性/外消旋混合物來得到)偶合(使用標(biāo)準(zhǔn)條件)。
圖解A
實施例 本發(fā)明現(xiàn)在將通過以下非限制性實施例來說明,其中 Aze=(S)-氮雜環(huán)丁烷-2-羧酸酯(除非另外說明) Boc=叔丁氧基羰基 CBA=對氰基芐胺 Pab=對脒基芐氨 EDC=鹽酸1-(3-二甲基氨基苯基)-3-乙基碳二亞胺 TBTU=[四氟硼酸N,N,N’,N’-四甲基-O-(苯并三唑-1-基)脲] TCTU=四氟硼酸N-[(1H-6-氯苯并三唑基-1-基)(二甲基氨基)亞甲基]-N-甲基甲銨(methylmethanaminium)N-氧化物 HBTU=六氟磷酸N-[(1H-苯并三唑基-1-基)(二甲基氨基)亞甲基]-N-甲基甲銨N-氧化物 HCTU=六氟磷酸N-[(1H-6-氯苯并三唑-1-基)(二甲基氨基)亞甲基]-N-甲基甲銨N-氧化物 PyBOP=六氟磷酸苯并三唑-1-基-N-氧基-三(吡咯烷基)膦 實施例1 將鹽酸甲氧基胺(0.88g,10.4mmol)在乙醇(20ml)中與三乙胺(1.45ml,10.4mmol;或相對于鹽酸甲氧基胺,三乙胺可略過量使用)混合。加入3,5-二氟芐腈(0.5ml,4.9mmol)和巰基乙酸(0.34ml,4.9mmol),并將該混合物加熱至回流且如此保持約6-12小時。冷卻該反應(yīng),并在減壓下濃縮。
根據(jù)上述N’-甲氧基芐脒合成類推制備其它N’-甲氧基芳基脒,并記載于表1中。
用于實施例1中所有反應(yīng)的常規(guī)方法 將殘余物溶解在乙酸乙酯中,并用5%w/wNa2CO3水溶液洗滌。使該有機(jī)相通過MgSO4干燥,蒸發(fā)并應(yīng)用于二氧化硅柱。使用二氯甲烷和甲醇、乙醇或乙酸乙酯混合物萃取出該產(chǎn)物。該粗N’-甲氧基芳基脒作為油或固態(tài)殘余物(溶劑蒸發(fā)后)獲得。
收率根據(jù)在粗反應(yīng)混合物中期望產(chǎn)物的GC面積%以轉(zhuǎn)化率表示,除了Boc-Aze-(2,6-二F)CBA和Boc-Aze-CBA外,其中使用HPLC。對于由實施例1中記載的常規(guī)純化方法得到的分離材料,其結(jié)構(gòu)可通過GC-或LC-MS和/或NMR證實。
表1 N’-甲氧基芳基脒 采用本發(fā)明的方法,在乙醇中實施Boc-CBA向Boc-Pab(OMe)的轉(zhuǎn)化(實施例2),和在甲醇或乙醇溶劑中實施Boc-Aze-CBA向Boc-Aze-Pab(OMe)的轉(zhuǎn)化(實施例3)。對于兩種載體,使用巰基乙酸催化劑可得到良好的轉(zhuǎn)化率。
實施例2 用CBA.HCl如下制備Pab(OMe)
方案2合成Pab(OMe) 步驟1CBA.HCl鹽的叔丁氧基羰基化(以制備Boc-CBA) 將4-氰基芐胺鹽酸鹽(CBA HCl)(200g,1.19mol)在5L罩溫為25℃的反應(yīng)器中溶解于1.25L蒸餾的去離子水(6.25體積)中。在25℃下,該溶液在15分鐘內(nèi)澄清。向該澄清溶液中加入52g(1.1eq.)NaOH在400mL水中的溶液。該溶液以10-15mL/min的速率加入。注意到微小升溫(約3℃)。在添加期間出現(xiàn)大量沉淀(自由胺)。添加后,混合物的pH>12。
向該白色懸浮液中以約10mL/min的平均速率滴加Boc2O(285g,1.30mol,1.1eq.)的甲醇(200mL)溶液。在添加時,注意到二氧化碳產(chǎn)生和微小升溫(30分鐘內(nèi)5℃)。隨著繼續(xù)添加,由于該不溶性胺轉(zhuǎn)化為不溶性的Boc-保護(hù)的胺,該漿液/懸浮液的稠度改變。
反應(yīng)后從反應(yīng)器中取出浮于上層的樣品,并用原料的校準(zhǔn)曲線對比該原料的峰面積(HPLC柱Symmetry Shield RP8,3.5μm,50mm;205和230nm-更多細(xì)節(jié)見實施例3)。
Boc2O添加結(jié)束后6小時得到98%的轉(zhuǎn)化率。保持該反應(yīng)整夜以獲得99%的轉(zhuǎn)化率。過濾該漿液,并用2×500mL水洗滌固體。該材料于40℃真空下干燥以得到Boc-CBA(265g,97%的收率,98.7%的純度(采用與實施例3類似的HPLC,沒有檢測到Boc2O)。
步驟2Boc-CBA的甲氧基酰胺化(以制備Boc-Pab(OMe)) 用N2沖洗5L反應(yīng)器并加入EtOH(1.75L,7體積)。所述N2可在實施隨后添加的同時流過該反應(yīng)器。向所述EtOH中加入Boc-CBA(250g,1.08mol),并升溫至55℃。在幾乎完全溶解后,加入三乙胺(525mL,3.5eq.),然后以約20mL/min的速率滴加30%w/w的鹽酸NH2OMe的水溶液(599g,2eq.)(所述使用的NH2OMe鹽溶液中具有5%wt的過量HCl,因此需要3eq.的堿來中和反應(yīng)物中的所有HCl)。注意到有少量放熱,并在添加期間,該溶液變得澄清。
加入α-巰基乙酸(77mL,1eq.)以生產(chǎn)總體積約3L的輕度不透明混合物。小心將所述罩加熱至90℃,并當(dāng)?shù)玫交亓?內(nèi)部溫度=78℃)時,關(guān)閉N2,攪拌該反應(yīng)整夜。
在回流下攪拌21小時后,該反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率為96%(HPLC柱Symmetry Shield RP8,3.5μm,50mm;230nm-更多細(xì)節(jié)見實施例3)。然后冷卻該反應(yīng)混合物至40℃,并在一分鐘內(nèi)加入丙酮(160mL,2eq.)。保持該混合物靜置1小時,以猝滅任何殘留的NH2OMe。然后將該混合物倒入圓底燒瓶中,并在40℃真空下通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法除去溶劑。將剩余的殘余物溶解在3L nBuOAc∶H2O為2∶1的混合物,并在25℃置于反應(yīng)器中(總體積=4.5L),攪拌10分鐘以充分混合該層。
該相靜置分離后,除去水層(2L,pH6)。用1L水洗滌該有機(jī)層,并除去水層(pH=4)。然后用K2CO3(297g,2eq.)在1L水中的溶液洗滌(這有助于除去該巰基乙酸)。除去該堿性水層,并用1L水實施最終洗滌。除去該水層后,從反應(yīng)器中移出該有機(jī)層,并存儲整夜(總體積約2.3L)。
用在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中除去的約一半nBuOAc(925mL)共沸干燥該有機(jī)層。得到的混合物置于反應(yīng)器中(罩溫=30℃),并加入425mL的nBuOAc(nBuOAc的總體積=2L-0.925+0.425=1.5L=6體積)。然后添加440mL(1.75體積)的EtOH。將該混合物加熱至30℃以得到Boc-Pab(OMe)溶液。
可使用正丁醇作為溶劑代替乙醇重復(fù)上述反應(yīng)。
上述步驟1反應(yīng)得到的Boc-CBA也可不經(jīng)分離或純化而用于步驟2的甲氧基酰胺化反應(yīng)。
步驟3叔丁氧基羰基的去保護(hù)以提供Pab(OMe)的二鹽酸鹽 攪拌上述Boc-Pab(OMe)的nBuOAc/EtOH溶液,并在20分鐘內(nèi)滴加濃鹽酸(12M)(360mL,4eq.,基于步驟2的100%收率)。在添加時氣體產(chǎn)生并輕微升溫。將該懸浮液加熱至35℃,4小時后液態(tài)淤漿形成并得到97%的轉(zhuǎn)化率(HPLC柱Symmetry Shield RP8,3.5μm,50mm;230nm-更多細(xì)節(jié)見實施例3)。1小時內(nèi)將該混合物冷卻至0℃,然后進(jìn)一步在0℃冷卻1小時。過濾該材料,并用nBuOAc和EtOH的混合物(分別為690mL(2.3體積.)和210mL(0.7體積))洗滌該晶體,然后用900mL的EtOH(3體積)洗滌以洗去nBuOAc。產(chǎn)物在40℃真空下干燥以提供237gBoc-Aze-CBA的二鹽酸鹽(0.94mol,經(jīng)兩步87%的收率,根據(jù)類似于實施例3的HPLC98.9%的純度)。
以氣體HCl代替HCl水溶液重復(fù)上述去保護(hù)。
然后將根據(jù)實施例2的Pab(OMe)與Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-H偶合以制備化合物A。
實施例3 還可將根據(jù)實施例2制備的Pab(OMe)與Boc-Aze偶合以制備Boc-Aze-Pab(OMe)??蛇x地,Boc-Aze-Pab(OMe)和Aze-Pab(OMe)可如下制備 Boc-Aze-Pab(OMe) 將Boc-Aze-CBA(2.02g,6.34mmol)于環(huán)境溫度下溶解在EtOH(14mL)中。向該燒瓶中加入三乙胺(3.1mL,3.5eq.)、30%MeONH2xHCl(aq)(3.5g,2eq.)和巰基乙酸(0.45mL,1eq.)。加熱該溶液至回流,并靜置整夜。在回流下22小時后,該反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率為97%(HPLC)。然后冷卻該混合物至40℃,并加入丙酮(0.95mL,2eq.)。使該混合物靜置30分鐘以猝滅剩余的MeONH2。通過在真空下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)降低溶劑的量。將剩余的殘余物溶解在n-BuOAc(16mL)ochEtOH(6mL)中。進(jìn)一步蒸發(fā)后加入水(15mL),并使相分離。用2M K2CO3溶液(2×20mL)洗滌有機(jī)層兩次,并用水(2×20mL)洗滌兩次。通過Na2SO4干燥該產(chǎn)物溶液,并蒸發(fā)至干燥。將殘余物溶解在n-BuOAc(11.2mL)和EtOH(3.5mL)中,并在以下步驟中使用。
Aze-Pab(OMe)×2HCl 向由前一步驟得到的上述Boc-Aze-Pab(OMe)的n-BuOAc/EtOH溶液中滴加濃鹽酸(12M)(2.1mL,4eq.)。將該反應(yīng)混合物加熱至35℃。約3h后從得到的漿液中采樣并分析,通過HPLC獲得<99%的轉(zhuǎn)化率。將該混合物逐步冷卻至0℃,此后使之在0°靜置至少1h。然后過濾該材料并用n-BuOAc(5.3mL)和EtOH(1.6mL)的混合物洗滌該晶體,并隨后用EtOAc(6.9mL)洗滌。在40℃真空下干燥該產(chǎn)物以提供1.50gAze-Pab(OMe)的二鹽酸鹽(4.47mmol,經(jīng)兩步70.6%的收率,通過HPLC 99.0%的純度)。
該兩步反應(yīng)同樣也已在第一步驟中在MeOH中實施,得到24h后約90%的轉(zhuǎn)化率和48h后約95%的轉(zhuǎn)化率。兩步后的分離收率為67%。
用于轉(zhuǎn)化率的HPLC 該反應(yīng)使用Symmetry Shield RP8、50×4.6mm、3.5μm柱監(jiān)測。流動相A(50mM NH4H2PO4-pH 3緩沖溶液)和流動相B(CH3CN/50mMNH4H2PO4-pH 3緩沖溶液70/30)。梯度100%A10分鐘、0-100%B10分鐘、l00%B1分鐘、0%A4分鐘。在230nm下流速1.5mL/min。
用于Pab(OMe)×2HCl純度的HPLC 使用ThermoHypersil Aquasil 100×4.6mm、3μm分析所述分離產(chǎn)物。流動相A(25mM NH4H2PO4-pH 3緩沖溶液)和流動相B(CH3CN/25mM NH4H2PO4-pH 3緩沖溶液80/20)。梯度0-30%Bl5分鐘、30-100%B10分鐘、100%B5分鐘、0%B10分鐘。在235nm下流速1.0mL/min。
用于Aze-Pab(OMe)×2HCl純度的HPLC 使用ThermoHypersil Aquasil 100×4.6mm、3μm分析所述分離產(chǎn)物。流動相A(25mM NH4H2PO4-pH3緩沖溶液)和流動相B(CH3CN/25mM NH4H2PO4-PH3緩沖溶液70/30)。梯度0-30%B30分鐘、30-100%B10分鐘、100%B5分鐘、0%B10分鐘。在235nm下流速1.0mL/min。
然后可將Aze-Pab(OMe)與3-氯-5-二氟甲氧基扁桃酸偶合以制備化合物A。也可使Aze-Pab(OMe)與其它扁桃酸偶合以提供如在WO02/44145(其相關(guān)內(nèi)容由此結(jié)合作為參考)中記載的化合物。各種不同的偶合條件和偶合試劑(例如,通過作為脫水劑來促進(jìn)偶合的試劑)是本領(lǐng)域公知的,并可采用以影響該反應(yīng)(優(yōu)選以高收率及手性扁桃酸有限的外消旋)。適宜的偶合試劑為EDC、TBTU、TCTU、HBTU、HCTU和PBOP,并且這些試劑可與羥基苯并三唑(HOBt)組合使用。HOBt優(yōu)選以在水溶液中至多50wt%濃度的叔胺鹽如N-甲基嗎啉.HOBt(NMM.HOBt)形式使用。HOBt叔胺鹽水溶液(或HOBt和叔胺如NMM的水溶液混合物)的使用對于大規(guī)模處理這類試劑具有優(yōu)勢。
可選地,本發(fā)明的方法可用于Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-CBA以提供化合物A。
實施例4-A 將本發(fā)明的方法應(yīng)用于3,5-二氟氰基苯以如下制備3,5-二氟-N-甲基-芐胺肟
向惰性氣氛下攪拌的3,5-二氟氰基苯(1eq)的甲醇(7體積)溶液中加入EDTA(0.02%w/w,以鹽酸甲氧基胺的量計算)、三乙胺(4.5eq.)、巰基乙酸(1eq)和鹽酸甲氧基胺(30%水溶液,2eq)。該添加在控制溫度低于25℃下實施,將該反應(yīng)混合物加熱至回流后(65℃),保持整夜。然后將該反應(yīng)混合物冷卻至≈35℃,并加入丙酮(1.3eq)以猝滅過量的甲氧基胺。60分鐘后,在真空下濃縮該混合物至原始體積的一半(約3.5體積),并加入乙酸異丙酯至原始體積。重復(fù)該濃縮過程一次,并再次加入乙酸異丙酯至原始體積。從得到的兩相溶液中分離水相,然后用乙酸異丙酯再萃取兩次。
隨后用Na2CO3(aq.sat.)(2.5體積)和NaCl(aq.sat.)洗滌該組合的有機(jī)相。真空中除去溶劑后,將該油性物質(zhì)應(yīng)用于二氧化硅,并用乙酸乙酯洗提。真空除溶劑后,提供淡黃色固體材料,收率≈97%,根據(jù)GC和LC的純度為98面積%。
實施例4-BHCl鹽分離 以高收率和極高純度如下分離該3,5-二氟-N-甲基芐胺肟的HCl鹽。該HCl鹽促進(jìn)了3,5-二氟-N-甲基芐胺肟產(chǎn)物的分離和純化。
向惰性氣氛下攪拌的3,5-二氟氰基苯(20.0g,144mmol)甲醇(140ml,7體積)溶液中加入EDTA(16.8mg,0.02%w/w,以鹽酸甲氧基胺的量計算)、三乙胺(90.2mL,647mmol)、巰基乙酸(11.0mL,158mmol)和鹽酸甲氧基胺(80.0g,288mmol,30%水溶液)。實施該添加并控制溫度低于25℃,將該反應(yīng)混合物加熱至回流后(65℃),保持整夜。然后將該反應(yīng)混合物冷卻至低于40℃,并加入丙酮(1.3eq)以猝滅過量的甲氧基胺。在40℃1小時后,在真空下濃縮該混合物至原始體積的一半,并加入乙酸異丙酯以恢復(fù)至原始體積。重復(fù)該濃縮過程一次,并再次加入乙酸異丙酯至原始體積。除去有機(jī)層之后,用乙酸異丙酯(2×40mL)再萃取該混合物兩次。
隨后用Na2CO3(aq.sat.)(2×40mL)和NaCl(aq.sat.40mL)洗滌該組合的有機(jī)相,然后通過MgSO4干燥。過濾后冷卻該溶液至10℃。當(dāng)緩慢添加4MHCl/1,4二烷(39.5mL,158mmol)時,固體沉淀出來。添加結(jié)束后,攪拌該懸浮液20分鐘,然后過濾。用乙酸異丙酯(40mL)洗滌該殘余物,并隨后真空干燥以提供3,5-二氟-N-甲基芐胺肟.HCl,收率91%(27.5g,131mmol,根據(jù)LC為99.4面積%)。
該反應(yīng)通過HPLC使用Genesis AQ 100×4.6mm、4μm柱監(jiān)測。流動相A(CH3CN/25mM NaPO4-pH3.0緩沖溶液5/95),和流動相B(CH3CN/25mM NaPO4-pH3.0緩沖溶液60/40)。梯度0-100%B8分鐘、100%B1分鐘、100-0%B0.1分鐘、100%A2.9分鐘。在230/220nm下流速2.0mL/min。
向3,5-二氟-N-甲基芐胺肟.HCl(20.0g,89.8mmol)室溫下攪拌的THF(140mL)懸浮液中緩慢加入Et3N(18.8mL,135mmol)。攪拌該乳白色懸浮液5h,然后濾出該Et3NHCl。分次用THF(∑100mL)洗滌該濾餅后,該溶液可原樣帶入下一步驟,或在真空下除去溶劑以得到96%收率的淺黃色固體3,5-二氟-N-甲基芐胺肟(16.1g,86.4mmol,根據(jù)GC98.2面積%)。
由實施例4類推,(2,6-二F)Pab(OMe)可由(2,6-二F)CBA制備(可能需要適宜的胺官能度的保護(hù)和隨后的去保護(hù),例如使用Boc-保護(hù)基團(tuán))。然后可使(2,6-二F)Pab(OMe)與Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-H偶合以得到化合物B。
實施例5 將本發(fā)明的方法如下應(yīng)用于Boc-Aze-(2,6-二F)CBA。
Boo-Aze-(2,6-二F)CBABoc-Aze-(2,6-二F)Pab(OMe) 在室溫下于氮氣氣氛中向Boc-Aze-(2,6-二F)CBA(1eq)的甲醇(7體積)溶液中加入EDTA(0.02%w/w,以鹽酸甲氧基胺的量計算)、三乙胺(4.5eq)和巰基乙酸(1eq)。向該混合物中加入鹽酸甲氧基胺(30%水溶液,2eq)。添加結(jié)束后,溫度升高+4℃-25℃。將該反應(yīng)混合物加熱至63℃(油浴70℃)并保持整夜。實施HPLC分析并表現(xiàn)出>99%的轉(zhuǎn)化率。將該反應(yīng)混合物冷卻至<50℃,并加入丙酮以猝滅過量的甲氧基胺(1.2eq)。反應(yīng)(在40-50℃)30分鐘后,在真空下將該混合物濃縮至原始體積的一半(約3.5體積),并加入乙酸異丙酯至原始體積。重復(fù)該濃縮過程一次,并再次加入乙酸異丙酯至原始體積。用水(2×2體積)洗滌該有機(jī)層,并分離出水相(pH≈5)。進(jìn)一步用K2CO3(水溶液,2M,2×1體積)和最終用鹽水(20%w/w,1體積)洗滌有機(jī)層。在HPLC分析后不經(jīng)過進(jìn)一步純化直接將該有機(jī)層用于下一步驟,debocylation過程。平均收率為約90%(用HPLC計算)并具有93-96%的HPLC純度。
該反應(yīng)通過HPLC使用Genesis AQ 100×4.6mm、4μm柱監(jiān)測。流動相A(CH3CN/25mM NaPO4-pH3.0緩沖溶液5/95),和流動相B(CH3CN/25mM NaPO4-pH3.0緩沖溶液60/40)。梯度0-100% B8分鐘、100%B1分鐘、100-0%B0.1分鐘、100%A2.9分鐘。在230/220nm下流速2.0ml/min。
然后可將Aze-(2,6-二F)Pab(OMe)與扁桃酸3-氯-5-二氟甲氧基扁桃酸偶合以制備化合物B。
可選地,可將本發(fā)明的方法用于Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-(2,6-二F)CBA以制備化合物B。
還可將Aze-(2,6-二F)Pab(OMe)與其它扁桃酸偶合,以制備如在WO 02/44145(其相關(guān)內(nèi)容由此結(jié)合作為參考)中記載的那些化合物。
實施例6 在進(jìn)一步的基質(zhì)上評價本發(fā)明的方法。
實施例6-A 由實施例4-B中使用的方法類推,將4-氯芐腈轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的甲氧基脒。
該產(chǎn)物通過1H/13C NMR和LCMS(ES+,m/z199)來表征。
實施例6-B和6-C 根據(jù)實施4-A中使用的方法類推,反應(yīng)以下兩種基質(zhì)。
實施例6-B
該產(chǎn)物通過1H/13C NMR和LCMS(ES+,m/z204)來表征。
實施例6-C
該產(chǎn)物通過1H/13C NMR和LCMS(ES+,m/z179)來表征。
權(quán)利要求
1.一種用于制備式(I)的受保護(hù)脒基團(tuán)的方法
其中,R6表示C1-10烷基(其任選地用一個或多個各自獨立地選自鹵素、C1-4的烷氧基、硝基、C1-4烷基胺和二(C1-4烷基)胺的取代基取代)、芳基、C1-3烷芳基或C1-3烷氧基芳基,后兩個基團(tuán)的烷基部分任選地插入一個或多個氧原子;和后三個基團(tuán)的芳基部分任選地用一個或多個選自鹵素、苯基、甲基或甲氧基的取代基取代,(該后三個基團(tuán)也任選地用一個或多個鹵素取代基取代)
其包括
在式(III)的硫-酮基活化劑存在下,使含腈化合物與式(II)的羥基胺反應(yīng)
R6ONH2 (II)
其中R6與上述在(I)中定義的相同;
HS-Ry-C(O)-Z (III)
其中Z為-(1-4C)烷基、-OH、-O-(1-4C)烷基、-SH、-S(1-4C)烷基、-NH2、-NH(1-4C)烷基或-N[(1-4C)烷基]2;
Ry為(1-2C)烷基,其任選地用至多三個各自獨立地選自(1-4C)烷基、鹵素、氨基和乙酰氨基的取代基取代;或
Z和Ry連接以形成式(IV)的5-或6元環(huán)
其中
X為-CH2-、-O-、-NH-或-N(1-4C)烷基;p為1或2;m為1或2和
Rz各自獨立地選自H、(1-4C)烷基、鹵素和氨基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法,其中R6表示C1-10烷基(優(yōu)選C1-4烷基)、芳基(優(yōu)選苯基)或芐基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法,其中R6表示甲基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任意一項的方法,其中所述硫-酮基活化劑定量使用,即與所述腈化合物約等摩爾。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任意一項的方法,其中所述硫-酮基活化劑為巰基乙酸。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任意一項的方法,其中所述含腈化合物為其中腈基連接于芳環(huán)或雜芳環(huán)上的化合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任意一項的方法,其中所述含腈化合物為其中腈基連接于烷基鏈或環(huán)-烷基環(huán)上的化合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任意一項的方法,其中所述含腈化合物為任選地受保護(hù)的對氰基芐胺、4-((S)-氮雜環(huán)丁烷-2-羧基氨基甲基)-氰基苯、對氰基(2,6-二F)芐胺或4-((S)-氮雜環(huán)丁烷-2-羧基氨基甲基)-(3,5-二F)氰基苯。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的方法,其中所述含腈化合物通過叔丁氧基羰基基團(tuán)保護(hù)。
10.式(III)的硫-酮基活化劑在根據(jù)權(quán)利要求1-9中任意一項方法中的用途
HS-Ry-C(O)-Z (III)
其中Z為-(1-4C)烷基、-OH、-O-(1-4C)烷基、-SH、-S(1-4C)烷基、-NH2、-NH(1-4C)烷基或-N[(1-4C)烷基]2;
Ry為(1-2C)烷基,其任選地用至多三個各自獨立地選自(1-4C)烷基、鹵素、氨基和乙酰氨基的取代基取代;或
Z和Ry連接以形成式(IV)的5-或6元環(huán)
其中
X為-CH2-、-O-、-NH-或-N(1-4C)烷基;p為1或2;m為1或2和
Rz各自獨立地選自H、(1-4C)烷基、鹵素和氨基。
全文摘要
一種制備式(I)的受保護(hù)脒基團(tuán)的方法其中R6表示例如C1-10烷基(任選地被取代)、芳基、C1-3烷芳基或C1-3的烷氧基芳基;其包括使含腈化合物與式(II)R6ONH2的羥基胺反應(yīng),其中R6與(I)中定義相同;其是在式(III)HS-Ry-C(O)-Z硫-酮基活化劑的存在下,其中Z為-(1-4C)烷基、-OH、-O-(1-4C)烷基、-SH、-S(1-4C)烷基、-NH2、-NH(1-4C)烷基或-N[(1-4C)烷基]2;Ry為(1-2C)烷基(任選地被取代);或Z和Ry連接以形成式(IV)的5-或6元環(huán)其中X為-CH2-、-O-、-NH-或-N(1-4C)烷基;p為1或2;m為1或2;和Rz各自獨立地選自H、(1-4C)烷基、鹵素和氨基。
文檔編號C07C259/18GK101128419SQ200680005750
公開日2008年2月20日 申請日期2006年2月22日 優(yōu)先權(quán)日2005年2月23日
發(fā)明者F·阿爾-薩法, S·伯林, T·穆西爾, S·西瓦達(dá)桑 申請人:阿斯利康(瑞典)有限公司