本發(fā)明涉及一種無(wú)毒可降解型蒸騰抑制劑的制備方法，屬于蒸騰抑制劑制備技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
蒸騰抑制劑是一種減少水分蒸發(fā)，保護(hù)植物，提高成活的一種藥劑，其作用機(jī)理是通過均勻噴施于植物葉片和枝干后，在葉片表面形成一層保護(hù)膜，封閉氣孔，減緩新陳代謝，特有的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)又能保證呼吸作用的正常進(jìn)行，減少水分蒸發(fā)，從而提高樹木的成活率。一般是在大樹移植前后以及運(yùn)輸過程中、高溫或干旱、園林綠化工程中大規(guī)格苗木古樹名木珍稀樹種等、常綠喬灌木移植等的情況下使用。
現(xiàn)有的蒸騰抑制劑主要有：①代謝型抗蒸騰劑：常用的有PMA（醋酸苯汞）、ABA、NaHSO3、CaC12、2,4-D、阿特拉津、甲草胺、三唑酮、黃腐酸，其中除黃腐酸外大都具有嚴(yán)重的環(huán)境毒性和生理毒性，危害環(huán)境和人類健康，同時(shí)ABA等生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑不僅具有環(huán)境毒性而且價(jià)格昂貴，因此很難推廣使用；②成膜型抗蒸騰劑，大都是國(guó)外昂貴的專利產(chǎn)品，很難自然降解，具有持久污染；③反射型抗蒸騰劑，常用的有：高嶺土和高嶺石，此類制劑的使用量大、效果差并且具有直接降低光合速率的副作用等，目前也較少實(shí)際應(yīng)用；生物感應(yīng)型抗蒸騰劑，它是一種基于釀酒酵母菌的生物型植物抗蒸騰劑，由于釀酒酵母菌可能產(chǎn)生酒精等對(duì)植物有副作用的物質(zhì)，還需要進(jìn)一步的完善才能被實(shí)際應(yīng)用推廣。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題：針對(duì)傳統(tǒng)的蒸騰抑制劑含有毒性，危害環(huán)境和人體健康，且很難自然降解，具有持久污染的問題，提供了一種通過豆粕富集耐熱型凝結(jié)芽孢桿菌，在中溫下對(duì)牛奶與大豆進(jìn)行發(fā)酵，通過牛奶與大豆中蒸煮出的脂肪蛋白復(fù)合物，負(fù)載至細(xì)菌產(chǎn)生的纖維素薄膜表面，將其碾磨并噴灑至樹葉表面，待其干燥后形成一層復(fù)合薄膜，有效關(guān)閉樹葉和植物表面氣孔，抑制植物表面水汽的蒸騰作用的方法。本發(fā)明首先以豆粕、氯化鈉等物質(zhì)為原料，制得滅菌富集培養(yǎng)基，將凝結(jié)芽孢桿菌轉(zhuǎn)接于滅菌富集培養(yǎng)基上，進(jìn)行培養(yǎng)，經(jīng)過濾，得到富集菌種液，接著將其接種于自制的滅菌培養(yǎng)基上，進(jìn)行加熱，收集培養(yǎng)基表層薄膜，進(jìn)行干燥，研磨過篩，得到發(fā)酵膜粉末，最后將其與去離子水、磷酸二氫鉀等物質(zhì)進(jìn)行均質(zhì)處理，即可得到無(wú)毒可降解型蒸騰抑制劑。本發(fā)明制備的無(wú)毒可降解型蒸騰抑制劑中不含有有毒物質(zhì)，不會(huì)對(duì)環(huán)境和人的身體健康產(chǎn)生危害，且具有可降解性，具有廣泛的應(yīng)用前景。
為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：
（1）分別稱量10～15g豆粕、650～700mL去離子水、5～10g氯化鈉、10～15g磷酸氫二鉀、1～2g錳酸鉀置于培養(yǎng)皿中，攪拌混合并置于120～125℃下高溫滅菌處理10～15min，靜置冷卻至室溫后，制備得滅菌富集培養(yǎng)基；
（2）選用接種環(huán)挑選2～3環(huán)凝結(jié)芽孢桿菌轉(zhuǎn)接于上述滅菌富集培養(yǎng)基上，控制培養(yǎng)溫度為45～50℃，在120～200r/min下?lián)u床振蕩培養(yǎng)5～8天，待培養(yǎng)完成后，用三層紗布過濾并收集濾液，制備得富集菌種液；
（3）按重量份數(shù)計(jì)，分別稱量45～50份新鮮牛奶、10～15份大豆、5～10份氯化鈉、10～15份磷酸氫二鉀、1～2份錳酸鉀和45～50去離子水置于燒杯中，攪拌混合并置于100～110℃下水浴加熱25～30min，靜置冷卻至室溫，制備得滅菌培養(yǎng)基，再按接種量5%，將上述制備的富集菌種液添加至滅菌培養(yǎng)基中，在45～50℃下水浴加熱5～7天；
（4）待水浴加熱完成后，停止加熱并靜置冷卻至室溫，收集培養(yǎng)基表層薄膜，用去離子水沖洗3～5次后，真空冷凍干燥收集得干燥發(fā)酵薄膜，將干燥發(fā)酵薄膜置于研缽中研磨并過200目篩，收集得發(fā)酵膜粉末，隨后按重量份數(shù)計(jì)，分別稱量45～50份去離子水、10～15份磷酸二氫鉀、5～8份蜂蠟和15～20份發(fā)酵膜粉末置于均質(zhì)機(jī)中，在45～55℃下均質(zhì)處理15～20min，收集均質(zhì)液即可制備得一種無(wú)毒可降解型蒸騰抑制劑。
本發(fā)明的應(yīng)用方法：本發(fā)明制備的無(wú)毒可降解型蒸騰抑制劑可廣泛適用于植物移植前后及待移栽過程；植物種植后的養(yǎng)護(hù)管理及在高溫或干旱環(huán)境中生長(zhǎng)的植物，按質(zhì)量比1:80～1:100，將本發(fā)明制備的無(wú)毒可降解型蒸騰抑制劑與溫度為35～40℃的水進(jìn)行攪拌混合均勻，均勻的噴灑于所需使用蒸騰抑制劑的植物葉面，植物移栽采用起苗前噴灑1次，載植后間隔30天噴灑2次；植物種植后的養(yǎng)護(hù)管理每隔六個(gè)月噴灑1次；在高溫或干旱環(huán)境中生長(zhǎng)的植物在干旱期、灌漿期葉面噴灑2次。經(jīng)檢測(cè)，對(duì)于移栽和干旱、高溫中生長(zhǎng)的植物成活率提高了15～20%，對(duì)于養(yǎng)護(hù)的植物葉子枯黃推遲15～20天，有效降低植物的蒸騰速率。
本發(fā)明與其他方法相比，有益技術(shù)效果是：
（1）本發(fā)明制備的無(wú)毒可降解型蒸騰抑制劑能有效降低植物的蒸騰速率，對(duì)于移栽和干旱、高溫中生長(zhǎng)的植物成活率提高了15～20%，對(duì)于養(yǎng)護(hù)的植物葉子枯黃推遲15～20天；
（2）本發(fā)明制備的無(wú)毒可降解型蒸騰抑制劑中不含有有毒物質(zhì)，不會(huì)對(duì)環(huán)境和人體身體健康造成危害；
（3）本發(fā)明制備的無(wú)毒可降解型蒸騰抑制劑易降解，不會(huì)造成持久污染，具有廣闊的應(yīng)用前景。
具體實(shí)施方式
首先分別稱量10～15g豆粕、650～700mL去離子水、5～10g氯化鈉、10～15g磷酸氫二鉀、1～2g錳酸鉀置于培養(yǎng)皿中，攪拌混合并置于120～125℃下高溫滅菌處理10～15min，靜置冷卻至室溫后，制備得滅菌富集培養(yǎng)基；選用接種環(huán)挑選2～3環(huán)凝結(jié)芽孢桿菌轉(zhuǎn)接于上述滅菌富集培養(yǎng)基上，控制培養(yǎng)溫度為45～50℃，在120～200r/min下?lián)u床振蕩培養(yǎng)5～8天，待培養(yǎng)完成后，用三層紗布過濾并收集濾液，制備得富集菌種液；再按重量份數(shù)計(jì)，分別稱量45～50份新鮮牛奶、10～15份大豆、5～10份氯化鈉、10～15份磷酸氫二鉀、1～2份錳酸鉀和45～50去離子水置于燒杯中，攪拌混合并置于100～110℃下水浴加熱25～30min，靜置冷卻至室溫，制備得滅菌培養(yǎng)基，再按接種量5%，將上述制備的富集菌種液添加至滅菌培養(yǎng)基中，在45～50℃下水浴加熱5～7天；待水浴加熱完成后，停止加熱并靜置冷卻至室溫，收集培養(yǎng)基表層薄膜，用去離子水沖洗3～5次后，真空冷凍干燥收集得干燥發(fā)酵薄膜，將干燥發(fā)酵薄膜置于研缽中研磨并過200目篩，收集得發(fā)酵膜粉末，隨后按重量份數(shù)計(jì)，分別稱量45～50份去離子水、10～15份磷酸二氫鉀、5～8份蜂蠟和15～20份發(fā)酵膜粉末置于均質(zhì)機(jī)中，在45～55℃下均質(zhì)處理15～20min，收集均質(zhì)液即可制備得一種無(wú)毒可降解型蒸騰抑制劑。
實(shí)例1
首先分別稱量15g豆粕、700mL去離子水、10g氯化鈉、15g磷酸氫二鉀、2g錳酸鉀置于培養(yǎng)皿中，攪拌混合并置于125℃下高溫滅菌處理15min，靜置冷卻至室溫后，制備得滅菌富集培養(yǎng)基；選用接種環(huán)挑選3環(huán)凝結(jié)芽孢桿菌轉(zhuǎn)接于上述滅菌富集培養(yǎng)基上，控制培養(yǎng)溫度為50℃，在200r/min下?lián)u床振蕩培養(yǎng)8天，待培養(yǎng)完成后，用三層紗布過濾并收集濾液，制備得富集菌種液；再按重量份數(shù)計(jì)，分別稱量50份新鮮牛奶、15份大豆、10份氯化鈉、15份磷酸氫二鉀、2份錳酸鉀和50去離子水置于燒杯中，攪拌混合并置于110℃下水浴加熱30min，靜置冷卻至室溫，制備得滅菌培養(yǎng)基，再按接種量5%，將上述制備的富集菌種液添加至滅菌培養(yǎng)基中，在50℃下水浴加熱7天；待水浴加熱完成后，停止加熱并靜置冷卻至室溫，收集培養(yǎng)基表層薄膜，用去離子水沖洗5次后，真空冷凍干燥收集得干燥發(fā)酵薄膜，將干燥發(fā)酵薄膜置于研缽中研磨并過200目篩，收集得發(fā)酵膜粉末，隨后按重量份數(shù)計(jì)，分別稱量50份去離子水、15份磷酸二氫鉀、8份蜂蠟和20份發(fā)酵膜粉末置于均質(zhì)機(jī)中，在55℃下均質(zhì)處理20min，收集均質(zhì)液即可制備得一種無(wú)毒可降解型蒸騰抑制劑。
本發(fā)明制備的無(wú)毒可降解型蒸騰抑制劑可廣泛適用于植物移植前后及待移栽過程，按質(zhì)量比1:100，將本發(fā)明制備的無(wú)毒可降解型蒸騰抑制劑與溫度為40℃的水進(jìn)行攪拌混合均勻，均勻的噴灑于所需移栽的植物，植物移栽采用起苗前噴灑1次，栽植后間隔30天噴灑2次，經(jīng)檢測(cè)，對(duì)于移栽的植物成活率提高了15%，有效降低植物的蒸騰速率。
實(shí)例2
首先分別稱量10g豆粕、650mL去離子水、5g氯化鈉、10g磷酸氫二鉀、1g錳酸鉀置于培養(yǎng)皿中，攪拌混合并置于120℃下高溫滅菌處理10min，靜置冷卻至室溫后，制備得滅菌富集培養(yǎng)基；選用接種環(huán)挑選2環(huán)凝結(jié)芽孢桿菌轉(zhuǎn)接于上述滅菌富集培養(yǎng)基上，控制培養(yǎng)溫度為45℃，在120r/min下?lián)u床振蕩培養(yǎng)5天，待培養(yǎng)完成后，用三層紗布過濾并收集濾液，制備得富集菌種液；再按重量份數(shù)計(jì)，分別稱量45份新鮮牛奶、10份大豆、5份氯化鈉、10份磷酸氫二鉀、1份錳酸鉀和45去離子水置于燒杯中，攪拌混合并置于100℃下水浴加熱25min，靜置冷卻至室溫，制備得滅菌培養(yǎng)基，再按接種量5%，將上述制備的富集菌種液添加至滅菌培養(yǎng)基中，在45℃下水浴加熱5天；待水浴加熱完成后，停止加熱并靜置冷卻至室溫，收集培養(yǎng)基表層薄膜，用去離子水沖洗3次后，真空冷凍干燥收集得干燥發(fā)酵薄膜，將干燥發(fā)酵薄膜置于研缽中研磨并過200目篩，收集得發(fā)酵膜粉末，隨后按重量份數(shù)計(jì)，分別稱量45份去離子水、10份磷酸二氫鉀、5份蜂蠟和15份發(fā)酵膜粉末置于均質(zhì)機(jī)中，在45℃下均質(zhì)處理15min，收集均質(zhì)液即可制備得一種無(wú)毒可降解型蒸騰抑制劑。
本發(fā)明制備的無(wú)毒可降解型蒸騰抑制劑可適用于植物種植后的養(yǎng)護(hù)管理，按質(zhì)量比1:80，將本發(fā)明制備的無(wú)毒可降解型蒸騰抑制劑與溫度為35℃的水進(jìn)行攪拌混合均勻，均勻的噴灑于所需養(yǎng)護(hù)的植物葉面，植物種植后的養(yǎng)護(hù)管理每隔六個(gè)月噴灑1次，經(jīng)檢測(cè)，養(yǎng)護(hù)的植物葉子枯黃推遲15天，有效降低植物的蒸騰速率。
實(shí)例3
首先分別稱量12g豆粕、670mL去離子水、7g氯化鈉、12g磷酸氫二鉀、2g錳酸鉀置于培養(yǎng)皿中，攪拌混合并置于122℃下高溫滅菌處理12min，靜置冷卻至室溫后，制備得滅菌富集培養(yǎng)基；選用接種環(huán)挑選2環(huán)凝結(jié)芽孢桿菌轉(zhuǎn)接于上述滅菌富集培養(yǎng)基上，控制培養(yǎng)溫度為47℃，在130r/min下?lián)u床振蕩培養(yǎng)7天，待培養(yǎng)完成后，用三層紗布過濾并收集濾液，制備得富集菌種液；再按重量份數(shù)計(jì)，分別稱量47份新鮮牛奶、12份大豆、7份氯化鈉、12份磷酸氫二鉀、2份錳酸鉀和47去離子水置于燒杯中，攪拌混合并置于105℃下水浴加熱27min，靜置冷卻至室溫，制備得滅菌培養(yǎng)基，再按接種量5%，將上述制備的富集菌種液添加至滅菌培養(yǎng)基中，在47℃下水浴加熱6天；待水浴加熱完成后，停止加熱并靜置冷卻至室溫，收集培養(yǎng)基表層薄膜，用去離子水沖洗4次后，真空冷凍干燥收集得干燥發(fā)酵薄膜，將干燥發(fā)酵薄膜置于研缽中研磨并過200目篩，收集得發(fā)酵膜粉末，隨后按重量份數(shù)計(jì)，分別稱量47份去離子水、12份磷酸二氫鉀、7份蜂蠟和17份發(fā)酵膜粉末置于均質(zhì)機(jī)中，在50℃下均質(zhì)處理17min，收集均質(zhì)液即可制備得一種無(wú)毒可降解型蒸騰抑制劑。
本發(fā)明制備的無(wú)毒可降解型蒸騰抑制劑可適用于在高溫或干旱環(huán)境中生長(zhǎng)的植物，按質(zhì)量比1:90，將本發(fā)明制備的無(wú)毒可降解型蒸騰抑制劑與溫度為37℃的水進(jìn)行攪拌混合均勻，均勻的噴灑于干旱環(huán)境中生長(zhǎng)的植物葉面，在干旱期、灌漿期葉面噴灑2次。經(jīng)檢測(cè)，對(duì)于干旱、高溫中生長(zhǎng)的植物成活率提高了20%，有效降低植物的蒸騰速率。