楓楊樹皮和果提取物及其新用途
【專利摘要】本發(fā)明涉及植物樹皮和果的提取物及其制備方法和用途【技術(shù)領(lǐng)域】，具體公開了一種楓楊樹皮和果提取物及其新用途，尤其是在抑制油茶炭疽病菌和鏈格孢屬菌的新用途。本發(fā)明的技術(shù)方案證明了楓楊樹皮和果提取物對油茶中主要病原菌油茶炭疽病菌和鏈格孢具有良好的抑制效果，而且對人畜、生物不會造成危害，屬于天然提取物，不污染環(huán)境，對油茶中主要病原體的綜合防治具有重要意義。
【專利說明】楓楊樹皮和果提取物及其新用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及植物樹皮和果的提取物及其制備方法和用途【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及一種 楓楊樹皮和果提取物及其新用途，尤其是在抑制油茶炭疽病菌和鏈格孢屬菌的新用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 楓楊（Pterocarya stenoptera C.)屬于胡桃科 Juglandaceae 楓楊屬 Pterocarya Kunth，《中國植物志》記載現(xiàn)代楓楊屬包括8個種，其中五個種為中國特有種。其廣泛分布 于我國的亞熱帶和暖溫帶地區(qū)，長江中下游地區(qū)為其中心栽培區(qū)，是我國長江中下游地區(qū) 適應(yīng)性很強的樹種。屬于生長快、護堤護岸和造林綠化的樹種之一。楓楊因其莖、葉、花和 果等都具有獨特的氣味，在早期被當(dāng)做農(nóng)藥用于防治病蟲害。目前利用楓楊提取物對害蟲 的作用的研宄越來越多，其提取物對夜蛾科中的斜紋夜蛾和棉鈴蟲成蟲具有引誘作用，并 對一些倉儲害蟲，如玉米象具有熏死效果，同時具有對病害的抑制作用；楓楊還是一味中藥 材，在對釘螺防治和抗癌作用的研宄比較完善。
[0003] 油茶炭疽病菌（Collectotrichum gloeosporioides)，鏈格抱（Alternaria alternata)隸屬真菌的一個屬，主要對油茶進行侵害。該病害在全國各油茶產(chǎn)區(qū)普遍發(fā) 生，油茶的地上部位均可以受害，主要引起落果、落蕾、枝梢枯死等癥狀，病害落果率通常在 20%左右，嚴(yán)重時高達40%以上。油茶（Camellia oleifera)屬山茶科（Theaceae)山茶屬 (Camellia)，為多年生常綠小喬木，我國特有食用油料樹種之一。油茶廣泛分布于我國南方 各省，與油棕、油橄欖和椰子并稱為世界四大木本食用油料植物。
[0004] 農(nóng)藥在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中對病蟲害的防治中起著重要的作用。但是自從農(nóng)藥應(yīng)用到農(nóng)業(yè) 生產(chǎn)中，也帶來了很多問題。如：污染環(huán)境、食品安全、抗藥性的產(chǎn)生等。隨著人們對健康 意識的提高，解決農(nóng)藥殘留量，努力開發(fā)新型的低殘留的農(nóng)藥已經(jīng)成為當(dāng)務(wù)之急，植物源農(nóng) 藥主要是利用植物中的活性成分包括植物本身和按活性結(jié)構(gòu)合成的化合物及衍生物，使其 免受或減輕病蟲等有害生物為害的植物源制劑。本研宄擬采用將楓楊提取物按照0. 1和 0. Olg/ml的配比添加到PDA培養(yǎng)基，通過計算其抑菌率，確定提取物對病菌的作用效果。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005] 針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，本發(fā)明的目的在于提供了一種利用楓楊提取物對油 茶中油茶炭疽病菌和鏈格孢屬病菌進行殺菌、抑菌的新用途。
[0006] 為了檢測楓楊提取物對油茶病原菌的殺菌、抑菌的效果，本發(fā)明采取以下實驗進 行驗證：利用不同溶劑（甲醇、乙酸乙酯和石油醚）的不同濃度的楓楊不同部位提取物對 油茶兩種主要病原菌進行抑制實驗。本實驗分別將楓楊提取物和培養(yǎng)基混合，配制0. 1和 0. Olg/mL的培養(yǎng)基，接上實驗用的菌種，在恒溫下培養(yǎng)5天，計算抑菌效果。計算方法為抑 菌率=(對照菌落直徑-菌餅直徑）-(處理菌落直徑-菌餅直徑）/對照菌落直徑-菌餅 直徑。
【具體實施方式】
[0007] 下面 申請人:將結(jié)合各具體實施例對本發(fā)明的新用途做進一步的詳細說明。
[0008] 以下各實施例中，原材料湖北楓楊（Pterocarya hupehensis Skan)為2014年5-8 月采集于湖北工程學(xué)院校內(nèi)：取新鮮的楓楊皮、果、葉和去皮莖，分別放置于_60°C狀態(tài)下， 冷凍干燥，粉碎后，冷藏備用；
[0009] 油茶炭疽病菌 C. gloeosprioides (GenBank 登錄號 JX010152)、鏈格孢 A. alternata(GenBank登錄號KJ716876)均采于湖北省孝感市油茶苗木基地，采集病株后， 經(jīng)過分離、純化與鑒定得到。植物源農(nóng)藥主要是利用植物中的活性成分包括植物本身和 按活性結(jié)構(gòu)合成的化合物及衍生物，使其免受或減輕病蟲等有害生物為害的植物源制劑， 其優(yōu)點在于：專一性強，不傷害天敵，保護環(huán)境等。本研宄采用將楓楊提取物按照〇. 1和 0. Olg/ml (浸膏重量含量）的配比添加到PDA培養(yǎng)基，通過計算其抑菌率，確定提取物對病 菌的作用效果。
[0010] 實施例1 :不同部位甲醇提取物對油茶兩種主要病菌的抑制作用
[0011] 取上述經(jīng)過粉碎后，保存的楓楊葉、樹皮、去皮莖和果粉末各50g分別加入8倍重 量的甲醇（99. 5 %，天津博迪），在38°C下利用超聲波抽提10分鐘，后放置在常溫下（25°C ) 浸提72小時后過濾，于40°C狀態(tài)下，利用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將提取得到的浸提液濃縮至漿狀 或膏狀之后，用甲醇溶解漿狀物或膏狀物，離心后取清液，再將清液減壓濃縮至甲醇的質(zhì)量 百分比含量低于20%，得浸膏。
[0012] 稱取一定量浸膏，溶解在甲醇中得到2倍浸膏體積量的浸膏甲醇溶液。取50ml (或 5ml)的浸膏甲醇溶液加入到快要冷卻的（約50°C) 100ml PDA培養(yǎng)基中，搖勻后倒入培養(yǎng) 皿中使其培養(yǎng)基中含有提取物的濃度到達〇. 1 (或〇. 01) g/ml (指浸膏重量含量），待培養(yǎng)基 冷卻后，分別取直徑為0· 6cm的C. gloeosprioides和A. alternata菌餅接入不同的培養(yǎng)皿 中間，利用空白溶劑（即甲醇）作為對照，每皿三個重復(fù)，放置于生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)條 件28 ± 2 °C，五天后，用十字交叉法測量菌絲直徑，計算其抑菌率。
[0013] 計算方法為：抑菌率=(對照菌落直徑-菌餅直徑）_(處理菌落直徑-菌餅直 徑）/對照菌落直徑-菌餅直徑。
[0014] 結(jié)果顯示：采用甲醇對楓楊不同部位進行提取，利用其提取物對兩種不同病原菌 的反復(fù)試驗，確定了楓楊樹皮和果的殺菌、抑菌效果（見表1)。楓楊不同部位甲醇提取物實 驗發(fā)現(xiàn)，樹皮和果的提取物對兩種菌的抑菌效果顯著高于其他部位提取物。
[0015] 表1楓楊不同部位甲醇提取物對油茶病原菌的抑制效果
[0016]
【權(quán)利要求】
1. 楓楊提取物在制備抑制油茶病原菌中的應(yīng)用。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述油茶病原菌為炭疽病菌或鏈格孢。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于：所述提取物為甲醇、乙酸乙酯或石油醚提 取物。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于：所述楓楊提取物的提取部位為樹皮、果、 葉或去皮莖。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于：所述楓楊提取物的提取部位為樹皮或果。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于：所述楓楊提取物的提取部位為樹皮。
7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于：所述楓楊提取物的提取部位為果。
【文檔編號】A01P3/00GK104488977SQ201510024150
【公開日】2015年4月8日 申請日期:2015年1月19日 優(yōu)先權(quán)日:2015年1月19日
【發(fā)明者】張志林, 史紅安, 王立華, 李國元, 傅本重 申請人:湖北工程學(xué)院