本發(fā)明涉及生物藥物制劑領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及一種穩(wěn)定的包含維得利珠單抗的藥物制劑。
背景技術(shù)：
1、維得利珠單抗(vedolizumab)作為一種人源化單克隆抗體，與α4β7整合素特異性結(jié)合，阻斷α4β7整合素與madcam-1相互作用，抑制記憶t淋巴細(xì)胞穿過內(nèi)皮遷移至胃腸道的炎癥組織，從而精準(zhǔn)抑制腸道炎癥，常用于治療潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病。
2、目前已上市的藥物產(chǎn)品為一種凍干的維得利珠制劑，制劑重構(gòu)后為60mg/ml抗體、50mm組氨酸、10％(w/v)蔗糖、125mm精氨酸鹽酸鹽和0.06％(w/v)聚山梨醇酯80，ph為6.3。在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步提高制劑中抗體的穩(wěn)定性，需要確保在將該分子施用給患者時(shí)符合劑量和產(chǎn)品安全性的要求，最大程度減少蛋白質(zhì)降解尤其是蛋白質(zhì)聚集，以盡量避免嚴(yán)重的免疫原反應(yīng)。
3、因此在本領(lǐng)域中，優(yōu)化維得利珠制劑配方，提高抗體穩(wěn)定性，提升儲存能力，仍然存在需要。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的在于提供一種優(yōu)化的包含抗α4β7抗體的制劑，該制劑在長期儲存過程中表現(xiàn)出了提高的物理及化學(xué)穩(wěn)定性。
2、本發(fā)明的第一方面提供了一種穩(wěn)定的藥物制劑，其包含抗α4β7抗體和第一穩(wěn)定劑，其中所述的第一穩(wěn)定劑為海藻糖。
3、在一些實(shí)施方案中，所述海藻糖的濃度為約99-118g/l。
4、在一些實(shí)施方案中，所述海藻糖的濃度為約99-112g/l。
5、在一些實(shí)施方案中，所述海藻糖的濃度為約112g/l。
6、在一些實(shí)施方案中，所述抗α4β7抗體包含重鏈可變區(qū)(vh)和，所述抗α4β7抗體包含輕鏈可變區(qū)(vl)；其中，所述重鏈可變區(qū)中包含氨基酸序列為seq?id?no:1的hcdr1、氨基酸序列為seq?id?no:2的hcdr2和/或氨基酸序列為seq?id?no:3的hcdr3；所述輕鏈可變區(qū)中包含氨基酸序列為seq?id?no:4的lcdr1、氨基酸序列為seq?id?no:5的lcdr2和/或氨基酸序列為seq?id?no:6的lcdr3。
7、seq?id?no:1：
8、ser?tyr?trp?met?his
9、seq?id?no:2：
10、glu?ile?asp?pro?ser?glu?ser?asn?thr?asn?tyr?asn?gln?lys?phe?lys
11、seq?id?no:3：
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13、seq?id?no:4：
14、arg?ser?ser?gln?ser?leu?ala?lys?ser?tyr?gly?asn?thr?tyr?leu?ser
15、seq?id?no:5
16、gly?ile?ser?asn?arg?phe?ser
17、seq?id?no:6
18、leu?gln?gly?thr?his?gln?pro?tyr?thr
19、在一些實(shí)施方案中，所述抗α4β7抗體包含氨基酸序列為seq?id?no:7的重鏈可變區(qū)(vh)和氨基酸序列為seq?id?no:8的輕鏈可變區(qū)(vl)。
20、seq?id?no:7：
21、gln?val?gln?leu?val?gln?ser?gly?ala?glu?val?lys?lys?pro?gly?ala?serval?lys?val?ser?cys?lys?gly?ser?gly?tyr?thr?phe?thr?ser?tyr?trp?met?his?trpval?arg?gln?ala?pro?gly?gln?arg?leu?glu?trp?ile?gly?glu?ile?asp?pro?ser?gluser?asn?thr?asn?tyr?asn?gln?lys?phe?lys?gly?arg?val?thr?leu?thr?val?asp?ileser?ala?ser?thr?ala?tyr?met?glu?leu?ser?ser?leu?arg?ser?glu?asp?thr?ala?valtyr?tyr?cys?ala?arg?gly?gly?tyr?asp?gly?trp?asp?tyr?ala?ile?asp?tyr?trp?glygln?gly?thr?leu?val?thr?val?ser?ser
22、seq?id?no:8：
23、asp?val?val?met?thr?gln?ser?pro?leu?ser?leu?pro?val?thr?pro?gly?glupro?ala?ser?ile?ser?cys?arg?ser?ser?gln?ser?leu?ala?lys?ser?tyr?gly?asn?thrtyr?leu?ser?trp?tyr?leu?gln?lys?pro?gly?gln?ser?pro?gln?leu?leu?ile?tyr?glyile?ser?asn?arg?phe?ser?gly?val?pro?asp?arg?phe?ser?gly?ser?gly?ser?gly?thrasp?phe?thr?leu?lys?ile?ser?arg?val?glu?ala?glu?asp?val?gly?val?tyr?tyr?cysleu?gln?gly?thr?his?gln?pro?tyr?thr?phe?gly?gln?gly?thr?lys?val?glu?ile?lys
24、在一些實(shí)施方案中，所述抗α4β7抗體包含氨基酸序列為seq?id?no:9的重鏈和氨基酸序列為seq?id?no:10的輕鏈。
25、seq?id?no:9
26、gln?val?gln?leu?val?gln?ser?gly?ala?glu?val?lys?lys?pro?gly?ala?serval?lys?val?ser?cys?lys?gly?ser?gly?tyr?thr?phe?thr?ser?tyr?trp?met?his?trpval?arg?gln?ala?pro?gly?gln?arg?leu?glu?trp?ile?gly?glu?ile?asp?pro?ser?gluser?asn?thr?asn?tyr?asn?gln?lys?phe?lys?gly?arg?val?thr?leu?thr?val?asp?ileser?ala?ser?thr?ala?tyr?met?glu?leu?ser?ser?leu?arg?ser?glu?asp?thr?ala?valtyr?tyr?cys?ala?arg?gly?gly?tyr?asp?gly?trp?asp?tyr?ala?ile?asp?tyr?trp?glygln?gly?thr?leu?val?thr?val?ser?ser?ala?ser?thr?lys?gly?pro?ser?val?phe?proleu?ala?pro?ser?ser?lys?ser?thr?ser?gly?gly?thr?ala?ala?leu?gly?cys?leu?vallys?asp?tyr?phe?pro?glu?pro?val?thr?val?ser?trp?asn?ser?gly?ala?leu?thr?sergly?val?his?thr?phe?pro?ala?val?leu?gln?ser?ser?gly?leu?tyr?ser?leu?ser?serval?val?thr?val?pro?ser?ser?ser?leu?gly?thr?gln?thr?tyr?ile?cys?asn?val?asnhis?lys?pro?ser?asn?thr?lys?val?asp?lys?lys?val?glu?pro?lys?ser?cys?asp?lysthr?his?thr?cys?pro?pro?cys?pro?ala?pro?glu?leu?ala?gly?ala?pro?ser?val?pheleu?phe?pro?pro?lys?pro?lys?asp?thr?leu?met?ile?ser?arg?thr?pro?glu?val?thrcys?val?val?val?asp?val?ser?his?glu?asp?pro?glu?val?lys?phe?asn?trp?tyr?valasp?gly?val?glu?val?his?asn?ala?lys?thr?lys?pro?arg?glu?glu?gln?tyr?asn?serthr?tyr?arg?val?val?ser?val?leu?thr?val?leu?his?gln?asp?trp?leu?asn?gly?lysglu?tyr?lys?cys?lys?val?serasn?lys?ala?leu?pro?ala?pro?ile?glu?lys?thr?ileser?lys?ala?lys?gly?gln?pro?arg?glu?pro?gln?val?tyr?thr?leu?pro?pro?ser?argasp?glu?leu?thr?lys?asn?gln?val?ser?leu?thr?cys?leu?val?lys?gly?phe?tyr?proser?asp?ile?ala?val?glu?trp?glu?ser?asn?gly?gln?pro?glu?asn?asn?tyr?lys?thrthr?pro?pro?val?leu?asp?ser?asp?gly?ser?phe?phe?leu?tyr?ser?lys?leu?thr?valasp?lys?ser?arg?trp?gln?gln?gly?asn?val?phe?ser?cys?ser?val?met?his?glu?alaleu?his?asn?his?tyr?thr?gln?lys?ser?leu?ser?leu?ser?pro?gly?lys
27、seq?id?no:10
28、asp?val?val?met?thr?gln?ser?pro?leu?ser?leu?pro?val?thr?pro?gly?glupro?ala?ser?ile?ser?cys?arg?ser?ser?gln?ser?leu?ala?lys?ser?tyr?gly?asn?thrtyr?leu?ser?trp?tyr?leu?gln?lys?pro?gly?gln?ser?pro?gln?leu?leu?ile?tyr?glyile?ser?asn?arg?phe?ser?gly?val?pro?asp?arg?phe?ser?gly?ser?gly?ser?gly?thrasp?phe?thr?leu?lys?ile?ser?arg?val?glu?ala?glu?asp?val?gly?val?tyr?tyr?cysleu?gln?gly?thr?his?gln?pro?tyr?thr?phe?gly?gln?gly?thr?lys?val?glu?ile?lysarg?thr?val?ala?ala?pro?ser?val?phe?ile?phe?pro?pro?ser?asp?glu?gln?leu?lysser?gly?thr?ala?ser?val?val?cys?leu?leu?asn?asn?phe?tyr?pro?arg?glu?ala?lysval?gln?trp?lys?val?asp?asn?ala?leu?gln?ser?gly?asn?ser?gln?glu?ser?val?thrglu?glnasp?ser?lys?asp?ser?thr?tyr?ser?leu?ser?ser?thr?leu?thr?leu?ser?lysala?asp?tyr?glu?lys?his?lys?val?tyr?ala?cys?glu?val?thr?his?gln?gly?leu?serser?pro?val?thr?lys?ser?phe?asn?arg?gly?glu?cys
29、在一些實(shí)施方案中，所述抗α4β7抗體是維得利珠單抗。
30、在一些實(shí)施方案中，所述抗α4β7抗體的濃度是約50-70g/l。
31、在一些實(shí)施方案中，所述抗α4β7抗體的濃度是約60g/l。
32、在一些實(shí)施方案中，所述藥物制劑還包含第二穩(wěn)定劑，其中所述第二穩(wěn)定劑選自鹽酸精氨酸、甘氨酸和氯化鈉。
33、在一些實(shí)施方案中，所述第二穩(wěn)定劑為鹽酸精氨酸。
34、在一些實(shí)施方案中，所述第二穩(wěn)定劑的濃度為約22g/l-30g/l。
35、在一些實(shí)施方案中，所述第二穩(wěn)定劑的濃度為約26.34g/l-30g/l。
36、在一些實(shí)施方案中，所述第二穩(wěn)定劑的濃度為約26.34g/l。
37、在一些實(shí)施方案中，所述藥物制劑還包含表面活性劑，其中所述表面活性劑選自吐溫80、吐溫20和泊洛沙姆188。
38、在一些實(shí)施方案中，所述表面活性劑是吐溫80。
39、在一些實(shí)施方案中，所述表面活性劑的濃度是約0.4-0.8g/l。
40、在一些實(shí)施方案中，所述表面活性劑的濃度是約0.6g/l。
41、在一些實(shí)施方案中，所述藥物制劑還包含緩沖液，其中所述緩沖液選自組氨酸-組氨酸鹽酸和檸檬酸-檸檬酸鈉。
42、在一些實(shí)施方案中，所述緩沖液是組氨酸-組氨酸鹽酸。
43、在一些實(shí)施方案中，所述緩沖液的濃度是約40mm-約65mm。
44、在一些實(shí)施方案中，所述緩沖液的濃度是約50mm。
45、在一些實(shí)施方案中，所述藥物制劑包含抗α4β7抗體、海藻糖、鹽酸精氨酸、吐溫80和組氨酸-組氨酸鹽酸緩沖液。
46、在一些實(shí)施方案中，所述藥物制劑包含約50g/l-70g/l抗α4β7抗體、約99g/l-112g/l海藻糖、約22g/l-30g/l鹽酸精氨酸、約0.4-0.8g/l吐溫80和約40-65mm組氨酸-組氨酸鹽酸緩沖液。
47、在一些實(shí)施方案中，所述藥物制劑包含約60g/l的抗α4β7抗體、約112g/l海藻糖、約26.34g/l鹽酸精氨酸、約0.6g/l吐溫80和約50mm組氨酸-組氨酸鹽酸緩沖液。
48、在一些實(shí)施方案中，所述藥物制劑的ph值為約6.0-約6.6。
49、在一些實(shí)施方案中，所述ph值為6.3。
50、在一些實(shí)施方案中，所述藥物制劑為液體制劑或凍干制劑。
51、在一些實(shí)施方案中，所述藥物制劑是凍干制劑。
52、本發(fā)明針對抗α4β7抗體提供了一種優(yōu)化的抗體藥物制劑。本發(fā)明提供的藥物制劑在含有較高濃度的抗α4β7抗體時(shí)，具有較高的穩(wěn)定性，并且以液體制劑存儲和以凍干制劑存儲時(shí)都能夠保持相當(dāng)?shù)姆€(wěn)定性，并且具有低的粘度和接近等滲的滲透壓，滿足給藥需求，提高藥物療效。
53、定義以及詳細(xì)說明
54、以下結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步闡明本發(fā)明的內(nèi)容，但并不限制本發(fā)明。
55、本文術(shù)語“抗體”是指包括整個(gè)抗體及其任意抗原結(jié)合部分或單鏈。自然產(chǎn)生的“抗體”是包含通過二硫鍵互相連接的至少兩個(gè)重鏈(h)和兩個(gè)輕鏈(l)的糖蛋白。各重鏈包含重鏈可變區(qū)(本文縮寫為vh)和重鏈恒定區(qū)。重鏈恒定區(qū)包含三個(gè)域，ch1、ch2和ch3。各輕鏈包含輕鏈可變區(qū)(本文縮寫為vl)和輕鏈恒定區(qū)。輕鏈恒定區(qū)包含一個(gè)域cl。vh和vl區(qū)可進(jìn)一步細(xì)分成多個(gè)高變區(qū)域，稱為高變區(qū)或互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)，其間有更保守性地稱為骨架區(qū)(fr)的區(qū)域。vh和vl包含三個(gè)cdr和四個(gè)fr，從氨基端至羧基端如下排列：fr1、cdr1、fr2、cdr2、fr3、cdr3、fr4，即vh包含hcdr1、hcdr2、hcdr3、hfr1、hfr2、hfr3和hfr4，vl包含lcdr1、lcdr2、lcdr3、lfr1、lfr2、lfr3和lfr4。重鏈和輕鏈的可變區(qū)包含與抗原相互作用的結(jié)合域。
56、細(xì)胞表面分子“α4β7整合素”或“α4β7”是α4鏈(cd49d，itga4)與β7鏈(itgb7)的雜二聚體。人α4及β7基因(分別為genbank(national?center?for?biotechnology?information，bethesda，md)refseq寄存編號nm_000885和nm_000889)由b和t淋巴細(xì)胞、特別是記憶cd4+淋巴細(xì)胞表達(dá)。作為許多整合素的典型，α4β7可以靜止或活化狀態(tài)存在。α4β7的配體包括血管細(xì)胞粘著分子(vcam)、纖維結(jié)合蛋白(fibronectin)和粘膜地址素(madcam(例如madcam—1))。
57、術(shù)語“抗α4β7抗體”意指與人α4β7特異性結(jié)合的人抗體或其抗原結(jié)合片段。
58、本文使用“液體制劑”，也稱液體藥物組合物，表示并非自凍干物復(fù)溶的水性組合物，其包含至少一種抗α4β7抗體或其抗原結(jié)合片段(例如維得利珠單抗)和至少一種賦形劑(例如穩(wěn)定劑等)。該液體藥物組合物可包含其他賦形劑(緩沖液、表面活性劑)和其他活性成分。這種制劑也稱為“即用型”液體制劑。
59、術(shù)語“穩(wěn)定的制劑”是指其中的抗體在儲存時(shí)保持其物理穩(wěn)定性和/或化學(xué)穩(wěn)定性和/或生物學(xué)活性的制劑?？墒褂酶鞣N分析方法來評估給定組合物的穩(wěn)定性，例如可使用cex-hplc來評估本公開液體組合物中的抗體純度(主峰的含量)，可使用sec-hplc評估本公開液體組合物中的聚集水平。
60、本文描述為“包括”或“包含”一個(gè)或多個(gè)命名的要素或步驟的組合物或方法是開放式的，意味著所述命名的元件或步驟是必要的，但可在所述組合物或方法的范圍內(nèi)添加其他元件或步驟。在本文公開的任何組合物或方法中，任何命名的基本元件或步驟的已知或公開的等同物可取代所述元素或步驟。