本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種含有夫西地酸的外用乳膏組合物及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
葡萄球菌對多種抗菌藥物的廣泛耐藥使臨床治療面臨困境，全球各地耐甲氧西林葡萄球菌分離率差別較大，但均呈現(xiàn)快速上升趨勢。我國細(xì)菌耐藥監(jiān)測結(jié)果表明，臨床分離耐甲氧西林葡萄球菌比例大多占葡萄球菌的50％以上。迄今為止，我國臨床治療甲氧西林耐藥葡萄球菌感染的抗菌藥物僅有萬古霉素與替考拉寧兩種，長期頻繁的應(yīng)用勢必造成細(xì)菌耐藥發(fā)生；為此應(yīng)該積極開發(fā)新的抗菌藥物和重新評估既有的抗菌藥物，使臨床治療有更多選擇，避免單純應(yīng)用糖肽類藥物所導(dǎo)致的耐藥選擇壓力，減低耐糖肽類藥物葡萄球菌發(fā)生機(jī)會。
夫西地酸(fusidicacid)又譯梭霉孢酸，可由fusidiumcoccineum或cephalosporiumlamellaecolla等產(chǎn)生，為類甾類抗生素，主要通過干擾蛋白質(zhì)合成延長因子g(ef-g)抑制細(xì)菌核糖體的易位，阻礙細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成而產(chǎn)生殺菌作用，這種獨(dú)特的作用機(jī)理避免了與其他抗生素的交叉耐藥性。夫西地酸為窄譜抗生素，對g+菌活性強(qiáng)，也可抗多種厭氧菌和幾種其他菌，尤對金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、梭狀芽孢菌屬、棒狀桿菌非常敏感；另外對分支桿菌、嗜肺軍團(tuán)菌、奴卡氏菌中度敏感；同時具有良好的安全性，且其毒性低，罕見過敏反應(yīng)。用于治療葡萄球菌所致各種感染，如敗血癥、肺炎、心內(nèi)膜炎、皮膚和軟組織感染、骨與關(guān)節(jié)感染等。
1962年丹麥利奧制藥公司首次從梭鏈孢酸脂球菌的發(fā)酵液中提取出夫西地酸，夫西地酸鈉(sodiumfusidate，商品名立思丁)是夫西地酸(fusidicacid)的鈉鹽，屬梭鏈孢酸類抗生素。為目前唯一具有類甾體結(jié)構(gòu)的抗生素，化學(xué)名：反-16α-羧基-3β,11β-二羥基-4β,8β,14α-三甲基-18-去甲基-5β,10α-膽甾-(17z)-17(20)，24-二烯-21-酸半水合物。分子式：c31h48o6，結(jié)構(gòu)式如下：
如上述結(jié)構(gòu)看出夫西地酸分子結(jié)構(gòu)中存在，不共軛的烯烴側(cè)鏈，因此容易受氧化的影響。并且含有一個乙酯鍵，按此預(yù)期此結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性較差，經(jīng)檢索，確認(rèn)此結(jié)構(gòu)易氧化，生成相應(yīng)的氧化雜質(zhì)，同時乙酯鍵易水解，生成相應(yīng)羧酸和乙酸，以及羧酸相關(guān)異構(gòu)體，內(nèi)酯雜質(zhì)等。
歐洲藥典8.0中，夫西地酸項(xiàng)下，記述了其氧化和水解降解雜質(zhì)，如下表所示：
經(jīng)檢索發(fā)現(xiàn)，目前的制劑研究，尤其是外用制劑研究中，均沒有同時關(guān)注此兩方面雜質(zhì)降解，從而得到穩(wěn)定的夫西地酸外用制劑的研究。
此外由于夫西地酸水溶性較差，較難制得水溶性制劑，例如噴劑，溶液劑等。
因此急待開發(fā)一種性質(zhì)穩(wěn)定的夫西地酸制劑，尤其是外用制劑，在制劑研究中同時關(guān)注制劑中的原料藥的氧化和水解降解，從而大大增強(qiáng)制劑的穩(wěn)定性。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
為降低制劑中原料藥氧化和水解的產(chǎn)生發(fā)明人經(jīng)過研究，得到一種含有夫西地酸的外用乳膏組合物，由主藥夫西地酸，油相溶劑，乳化劑，助乳化劑，抗氧劑，增稠劑，水相溶劑，水解穩(wěn)定劑組成，該組合物通過如下步驟進(jìn)一步制備成乳膏劑：
步驟一：取夫西地酸原料藥超微粉碎，平均粒徑小于20μm，備用；
步驟二：取油相溶劑，在氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下，水浴加熱至60℃，依次取處方量抗氧劑，夫西地酸，增稠劑，助乳化劑攪拌，溶解，為油相；
步驟三：取水相溶劑，水浴加熱至60℃，攪拌溶解水解穩(wěn)定劑，乳化劑，以naoh水溶液調(diào)節(jié)ph值至4.0-5.5，為水相；
步驟四：在真空狀態(tài)下，將水相加入到油相中，降溫，持續(xù)攪拌，直至體系溫度降低至室溫，得到含有夫西地酸的乳膏；
步驟五：取步驟四所得夫西地酸乳膏，灌裝于塑料軟膏管中，得成品。
其特征在于，所述水解穩(wěn)定劑為醋酸，醋酸用量為2.0％-5.0％。單位劑量夫西地酸含量為0.5％-2.0％。
所述油相溶劑為丙二醇。
所述水相溶劑為純化水，所述乳化劑為聚山梨酯80，助乳化劑為單硬脂酸甘油酯，抗氧劑為丁基羥基茴香醚，增稠劑為十六醇。
所述含有夫西地酸的外用乳膏組合物，單位制劑處方組成如下：
所述含有夫西地酸的外用乳膏組合物，通過如下步驟進(jìn)一步制備成外用乳膏劑：
步驟一：取夫西地酸原料藥超微粉碎，使平均粒徑小于20μm，備用；
步驟二：取油相溶劑丙二醇在氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下，水浴加熱至60℃，依次取處方量抗氧劑丁基羥基茴香醚，夫西地酸，增稠劑十六醇，助乳化劑單硬脂酸甘油酯，攪拌，溶解，為油相；
步驟三：取純化水，水浴加熱至60℃，加入醋酸，乳化劑聚山梨酯80，攪拌溶解，以naoh水溶液調(diào)節(jié)ph值至4.0-5.5，在溶液中形成醋酸-醋酸鈉緩沖對，為水相；
步驟四：在真空狀態(tài)下，將水相加入到油相中，降溫，持續(xù)攪拌，直至體系溫度降低至室溫，得到含有夫西地酸的乳膏；
步驟五：取步驟四所得夫西地酸乳膏，灌裝于聚乙烯軟膏管中，得成品。
通過如下實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步說明本發(fā)明專利申請
針對夫西地酸制劑容易氧化降解及水解的缺陷，發(fā)明人擬通過在制劑體系中加入抗氧劑，水解穩(wěn)定劑的方式，避免氧化和水解反應(yīng)的發(fā)生，并通過選擇原料藥粒度和溶解，成功解決了夫西地酸溶解問題，使其以分子狀態(tài)存在于乳膏中，提高了療效。
本發(fā)明的技術(shù)方案中，雖然夫西地酸水溶性較差，但是其醇溶性較好，易溶于乙醇，但是以乙醇溶劑容易引起乳膏體系破乳，故選擇同為醇溶劑，但是不會對乳膏產(chǎn)生破壞作用的丙二醇為有機(jī)相溶劑。并通過超微粉碎的方式，減小原料藥粒徑，從而增加其在丙二醇中的溶解度，圓滿解決了原料藥溶解的問題。
在本發(fā)明技術(shù)方案中，由于夫西地酸原料藥分子結(jié)構(gòu)中的酯鍵水解產(chǎn)生相應(yīng)羧酸和乙酸，故擬選擇添加乙酸為穩(wěn)定劑，推動水解反應(yīng)向左移動，并通過選擇合適的水相，從而顯著降低原料藥的水解。水解反應(yīng)方程式如下：
試驗(yàn)證明所得乳膏劑各項(xiàng)檢測均符合標(biāo)準(zhǔn)，同時氧化和水解降解雜質(zhì)的生成被顯著抑制，大大增加及了產(chǎn)品的穩(wěn)定性，達(dá)到了本發(fā)明最初的目的。
實(shí)驗(yàn)一：原料藥溶解試驗(yàn)
本試驗(yàn)主要考察不同粒徑夫西地酸在甘油和丙二醇中的溶解度，在氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下，不同溫度條件下，分別考察不同粒徑夫西地酸原料藥在甘油和丙二醇中的溶解性。
試驗(yàn)結(jié)果如下：
從上述試驗(yàn)數(shù)據(jù)可以看出，室溫條件下，當(dāng)原料藥粒徑降低至20μm及以下時，其在丙二醇中的溶解性良好，在室溫時溶解度可以達(dá)到95mg/g，即0.95％。
實(shí)驗(yàn)二：醋酸對夫西地酸的穩(wěn)定作用
本試驗(yàn)主要考察在不同ph值條件下，4小時后，1.0％-5.0％醋酸溶液對夫西地酸的穩(wěn)定作用，經(jīng)檢測所用夫西地酸原料藥中水解反應(yīng)雜質(zhì)，即雜質(zhì)i，j，k，o雜質(zhì)總含量為0.020％，試驗(yàn)條件下水解雜質(zhì)含量如下所示：
如上所示，在ph4.0-6.0條件下，醋酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.0％-5.0％時，60℃，40℃以及室溫條件下，水解反應(yīng)被明顯抑制，可以作為乳膏制備的穩(wěn)定劑。
實(shí)驗(yàn)三：不同抗氧劑濃度下，藥物的氧化程度。
本試驗(yàn)主要考察在不同抗氧劑，及抗氧劑濃度下，4小時內(nèi)，抗氧劑對夫西地酸的穩(wěn)定作用，經(jīng)檢測所用夫西地酸原料藥中氧化降解雜質(zhì)，即雜質(zhì)a，b，c，d，e，f雜質(zhì)總含量為0.011％，試驗(yàn)條件及對應(yīng)條件下氧化雜質(zhì)含量如下所示：
如上數(shù)據(jù)可以看出，0.1％-0.5％的丁基羥基茴香醚bha即對夫西地酸氧化具有明顯的抑制作用。
實(shí)驗(yàn)四：處方篩選試驗(yàn)
根據(jù)經(jīng)驗(yàn)設(shè)計(jì)如下處方組成：
制備工藝：
步驟一：取夫西地酸原料藥超微粉碎，使平均粒徑小于20μm，備用；
步驟二：取油相溶劑丙二醇在氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下，水浴加熱至60℃，依次取處方量抗氧劑丁基羥基茴香醚，夫西地酸，增稠劑十六醇，助乳化劑單硬脂酸甘油酯，攪拌，溶解，為油相；
步驟三：取純化水，水浴加熱至60℃，加入醋酸，乳化劑聚山梨酯80，攪拌溶解，以naoh水溶液調(diào)節(jié)ph值至4.0-5.5，在溶液中形成醋酸-醋酸鈉緩沖對，為水相；
步驟四：在真空狀態(tài)下，將水相加入到油相中，降溫，持續(xù)攪拌，直至體系溫度降低至室溫，得到含有夫西地酸的乳膏；
步驟五：取步驟四所得夫西地酸乳膏，灌裝于聚乙烯軟膏管中，得成品。
試驗(yàn)結(jié)果分析：上述處方1-3乳膏成型較好，色澤均勻，質(zhì)地細(xì)膩，具適當(dāng)粘稠性，易涂布于皮膚上，無砂礫感。
實(shí)驗(yàn)五：產(chǎn)品性質(zhì)檢測試驗(yàn)
經(jīng)過上述篩選，確定了1.0％的夫西地酸乳膏劑的三個處方及制備工藝。
制備工藝：
步驟一：取夫西地酸原料藥超微粉碎，使平均粒徑小于20μm，備用；
步驟二：取油相溶劑丙二醇在氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下，水浴加熱至60℃，依次取處方量抗氧劑丁基羥基茴香醚，夫西地酸，增稠劑十六醇，助乳化劑單硬脂酸甘油酯，攪拌，溶解，為油相；
步驟三：取純化水，水浴加熱至60℃，加入醋酸，乳化劑聚山梨酯80，攪拌溶解，以naoh水溶液調(diào)節(jié)ph值至4.0-5.5，在溶液中形成醋酸-醋酸鈉緩沖對，為水相；
步驟四：在真空狀態(tài)下，將水相加入到油相中，降溫，持續(xù)攪拌，直至體系溫度降低至室溫，得到含有夫西地酸的乳膏；
步驟五：取步驟四所得夫西地酸乳膏，灌裝于聚乙烯軟膏管中，得成品。
刺激性試驗(yàn)：
新西蘭兔12只，分為正常皮膚組和破損皮膚組，每組6只，雌雄各半。采用同體左右側(cè)自身對比法。試驗(yàn)前24h對給藥區(qū)進(jìn)行脫毛處理，左右各一塊，去毛范圍3cm*3cm。破損皮膚組在用藥部位劃“井”字，以滲出血為度。左側(cè)脫毛處分別涂抹處方1,2,3乳膏0.5g，右側(cè)涂等量空白對照乳膏。貼敷時間4h，每天一次，連續(xù)28天。貼敷結(jié)束后，除去供試品并用溫水或無刺激性溶劑清潔給藥部位。每次涂藥前仔細(xì)觀察涂藥處皮膚有無紅斑或水腫，停藥后繼續(xù)觀察3天。
試驗(yàn)結(jié)果，在給藥期和觀察期內(nèi)。在全光譜燈光下肉眼觀察兔給藥部位與對照部位皮膚均未見紅斑形成。也未見糜爛、潰瘍等病變。鏡下檢查。正常皮膚組和破損皮膚組空白對照部位表皮完整。表面無角化不全。顆粒層、棘層厚度正常。細(xì)胞未見變性、壞死。真皮血管無明顯的擴(kuò)張堯充血。間質(zhì)無水腫。毛囊、皮脂腺等皮膚附件結(jié)構(gòu)清楚。正常皮膚組和破損皮膚組給位表皮各層組織結(jié)構(gòu)完整。真皮無血管擴(kuò)張、充血及炎性細(xì)胞浸潤。
穩(wěn)定性即耐熱耐寒試驗(yàn)：將取上述處方1-3乳膏各適量，分別置于55℃恒溫6小時及-15℃放置24小時，觀察是否分層，結(jié)果如下：
實(shí)驗(yàn)六：6個月加速穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)
取上述3個處方乳膏劑(實(shí)施例1中3個處方)及市售品立思丁2％(含包裝)四組樣品分別編號a-d分別置40℃±2℃，75％±5％rh條件下存儲12個月，分別于0月，1月，3月，6月，12月，取樣測定相關(guān)性質(zhì)，得到相應(yīng)數(shù)據(jù)，如下表所示：
表5實(shí)施例1中3個處方與市售制劑樣品穩(wěn)定性比較
由上表數(shù)據(jù)可以看出，依本發(fā)明所述實(shí)施例1-3所述處方和工藝所制備的夫西地酸乳膏，在40℃±2℃，75％±5％rh加速條件下，12個月存儲后，其含量，有關(guān)物質(zhì)均有所變化，但是含量均超過98.6％，水解雜質(zhì)總量小于0.09％，氧化雜質(zhì)總量小于0.09％，總雜質(zhì)均低于0.3％；與之相對應(yīng)，市售夫西地酸乳膏經(jīng)過加速12個月存儲后，其含量下降至約95％，水解雜質(zhì)總量超過1.5％，氧化雜質(zhì)總量超過1.7％，總雜質(zhì)則超過5.0％。
基于如上分析，依本發(fā)明所述實(shí)施例1-3所述處方和工藝所制備的夫西地酸乳膏在加速條件下，存儲12個月后的數(shù)據(jù)顯示，其穩(wěn)定性明顯好于市售乳膏，即通過本發(fā)明的處方和工藝使夫西地酸乳膏的穩(wěn)定性得到了明顯增強(qiáng)，氧化及水解雜質(zhì)的生成得到顯著抑制，從而使得本發(fā)明具有突出的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著進(jìn)步，并具有實(shí)用性。
具體實(shí)施方式
通過以下實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步說明本發(fā)明的有益效果。但并不局限于下述實(shí)施例，本領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明基礎(chǔ)上所作的，不脫離本發(fā)明實(shí)質(zhì)內(nèi)容的等同替代或變換,亦均在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
實(shí)施例1夫西地酸乳膏劑制備(單位：g)
處方：
制備工藝：
步驟一：取夫西地酸原料藥超微粉碎，使平均粒徑小于20μm，備用；
步驟二：取油相溶劑丙二醇在氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下，水浴加熱至60℃，依次取處方量抗氧劑丁基羥基茴香醚，夫西地酸，增稠劑十六醇，助乳化劑單硬脂酸甘油酯，攪拌，溶解，為油相；
步驟三：取純化水，水浴加熱至60℃，加入醋酸，乳化劑聚山梨酯80，攪拌溶解，以naoh水溶液調(diào)節(jié)ph值至4.0-5.5，在溶液中形成醋酸-醋酸鈉緩沖對，為水相；
步驟四：在真空狀態(tài)下，將水相加入到油相中，降溫，持續(xù)攪拌，直至體系溫度降低至室溫，得到含有夫西地酸的乳膏；
步驟五：取步驟四所得夫西地酸乳膏，灌裝于聚乙烯軟膏管中，得成品。